62
ФЕДЕРАЛЬНОЕ АГЕНТСТВО ПО ОБРАЗОВАНИЮ Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования «ПЕНЗЕНСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ УНИВЕРСИТЕТ» (ПГУ) МЕДИЦИНСКИЙ ИНСТИТУТ РАБОЧАЯ ТЕТРАДЬ ПО ИММУНОЛОГИИ Часть 1 Инфекция и иммунитет Н.Н. Митрофанова В.Л. Мельников

J : ; H Q :Я L ? L J : >Ь I H B F F M G H E H = B B Qасть 1 … · 2019. 2. 11. · Виды иммунитета: Схемы механизмов активации комплемента

  • Upload
    others

  • View
    4

  • Download
    0

Embed Size (px)

Citation preview

Page 1: J : ; H Q :Я L ? L J : >Ь I H B F F M G H E H = B B Qасть 1 … · 2019. 2. 11. · Виды иммунитета: Схемы механизмов активации комплемента

ФЕДЕРАЛЬНОЕ АГЕНТСТВО ПО ОБРАЗОВАНИЮ

Государственное образовательное учреждение

высшего профессионального образования

«ПЕНЗЕНСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ УНИВЕРСИТЕТ» (ПГУ)

МЕДИЦИНСКИЙ ИНСТИТУТ

РАБОЧАЯ ТЕТРАДЬ ПО ИММУНОЛОГИИ

Часть 1 Инфекция и иммунитет

Н.Н. Митрофанова

В.Л. Мельников

Page 2: J : ; H Q :Я L ? L J : >Ь I H B F F M G H E H = B B Qасть 1 … · 2019. 2. 11. · Виды иммунитета: Схемы механизмов активации комплемента

Методическое пособие «Рабочая тетрадь по иммунологии» составлено в соответствии с программой для студентов 2 курса по иммунологии.

Подготовлено на кафедре микробиологии, эпидемиологии и инфекционных болезней медицинского института ПГУ.

В пособии представлена методика проведения практических работ по иммунологии для студентов медицинских вузов.

Пособие рекомендовано для работы студентов на практических занятиях.

Page 3: J : ; H Q :Я L ? L J : >Ь I H B F F M G H E H = B B Qасть 1 … · 2019. 2. 11. · Виды иммунитета: Схемы механизмов активации комплемента

Тема 1: ИММУНОЛОГИЧЕСКАЯ ЛАБОРАТОРИЯ. ОСНОВНЫЕ МОДЕЛИ В ИММУНОЛОГИИ. ОСОБЕННОСТИ РАБОТЫ С

ИММУНОКОМПЕТЕНТНЫМИ КЛЕТКАМИ.

Цель: Познакомиться с предметом и задачами иммунологии, с историей развития

и основными теориями иммунитета. Выучить и научиться выполнять правила

противоэпидемического режима и техники безопасности в иммунологической

лаборатории. Изучить объекты исследования в иммунологии. Основные вопросы, разбираемые на занятии: 1. Предмет и задачи иммунологии

2. История развития иммунологии.

3. Инструктивные и конструктивные теории иммунитета.

4. Клонально-селекционная теория Бернета

5. Оснащение и режим работы иммунологической лаборатории

6. Основные подходы к стандартизации лабораторного иммунологического

обследования

7. Объекты исследования в иммунологии

8. Инбредные животные.

9. Биологические материалы для исследований.

10. Особенности работы с иммунокомпетентными клетками.

11. Иммунологические методы, применяемые в эксперементальных и

клинических исследованиях.

Иммунология -_____________________________________________________

_________________________________________________________________

_________________________________________________________________

_________________________________________________________________

Этапы развития иммунологии 1___________________________________________________________________

____________________________________________________________________

____________________________________________________________________

2___________________________________________________________________

____________________________________________________________________

____________________________________________________________________

3___________________________________________________________________

____________________________________________________________________

____________________________________________________________________

Page 4: J : ; H Q :Я L ? L J : >Ь I H B F F M G H E H = B B Qасть 1 … · 2019. 2. 11. · Виды иммунитета: Схемы механизмов активации комплемента

Теории иммунитета

Название Автор Основные положения

ИММУНОЛОГИЧЕСКАЯ ЛАБОРАТОРИЯ

Лаборатория - _____________________________________________________

__________________________________________________________________

ПБА - _____________________________________________________________

____________________________________________________________________

________________________________________________________________

Page 5: J : ; H Q :Я L ? L J : >Ь I H B F F M G H E H = B B Qасть 1 … · 2019. 2. 11. · Виды иммунитета: Схемы механизмов активации комплемента

Требования, предъявляемые к иммунологическим лабораториям: 1_________________________________________________________________

2_________________________________________________________________

3_________________________________________________________________

4_________________________________________________________________

5_________________________________________________________________

Основные принципы организации иммунологической лаборатории: 1_________________________________________________________________

2_________________________________________________________________

3_________________________________________________________________

4_________________________________________________________________

5_________________________________________________________________ 6_________________________________________________________________ Участие аллергических реакций разных типов в патогенезе иммунопатологических состояний,встречающихся в различных клинических дисциплинах.

Тип аллергических реакций

Диагноз Клиническая дисциплина

Современная иммунологическая лаборатория имеет возможность провести: 1_________________________________________________________________

2_________________________________________________________________

3_________________________________________________________________

4_________________________________________________________________

Page 6: J : ; H Q :Я L ? L J : >Ь I H B F F M G H E H = B B Qасть 1 … · 2019. 2. 11. · Виды иммунитета: Схемы механизмов активации комплемента

5_________________________________________________________________ 6_________________________________________________________________ 7_________________________________________________________________

8_________________________________________________________________ 9_________________________________________________________________

Оборудование иммунологической лаборатории

Название Назначение

Подходы к стандартизации лабораторного иммунологического обследования 1_________________________________________________________________

2_________________________________________________________________

3_________________________________________________________________

Стандартизация показаний к лабораторному иммунологическому обследованию включает: 1_________________________________________________________________

2_________________________________________________________________

3_________________________________________________________________

4_________________________________________________________________

5_________________________________________________________________ 6_________________________________________________________________ Стандартизация определения лабораторных иммунологических показателей включает: 1_________________________________________________________________

2_________________________________________________________________

3_________________________________________________________________

4_________________________________________________________________

Page 7: J : ; H Q :Я L ? L J : >Ь I H B F F M G H E H = B B Qасть 1 … · 2019. 2. 11. · Виды иммунитета: Схемы механизмов активации комплемента

5_________________________________________________________________ 6_________________________________________________________________ 7_________________________________________________________________

8_________________________________________________________________

9_________________________________________________________________

10_________________________________________________________________

11________________________________________________________________ 12________________________________________________________________ 13_________________________________________________________________ 14_________________________________________________________________ Стандартизация интерпретации результатов включает 1_________________________________________________________________

2_________________________________________________________________

3_________________________________________________________________

4_________________________________________________________________

5_________________________________________________________________ 6_________________________________________________________________ 7_________________________________________________________________

8_________________________________________________________________

9_________________________________________________________________

10_________________________________________________________________

11________________________________________________________________ 12________________________________________________________________ Схема взаимодействия «больной-клиницист-иммунолог»

Page 8: J : ; H Q :Я L ? L J : >Ь I H B F F M G H E H = B B Qасть 1 … · 2019. 2. 11. · Виды иммунитета: Схемы механизмов активации комплемента

Объекты исследования в иммунологии 1_________________________________________________________________

2_________________________________________________________________

3_________________________________________________________________

Инбредные животные-____________________________________________

_________________________________________________________________

_________________________________________________________________

_________________________________________________________________

Конгенные животные-____________________________________________

_________________________________________________________________

_________________________________________________________________

_________________________________________________________________

Биологические материалы для исследований 1_________________________________________________________________

2_________________________________________________________________

3_________________________________________________________________

4_________________________________________________________________

5_________________________________________________________________ 6_________________________________________________________________ 7_________________________________________________________________

8_________________________________________________________________

9_________________________________________________________________

10_________________________________________________________________

11________________________________________________________________ 12________________________________________________________________ 13_________________________________________________________________

Page 9: J : ; H Q :Я L ? L J : >Ь I H B F F M G H E H = B B Qасть 1 … · 2019. 2. 11. · Виды иммунитета: Схемы механизмов активации комплемента

Занятие № 2 Дата______________

Тема: ИНФЕКЦИЯ И ИНФЕКЦИОННЫЙ ПРОЦЕСС.

Цель: изучить условия развития инфекционного процесса, принципы

классификации инфекционных заболеваний, факторы вирулентности и

патогенности бактерий и методы их выявления.

Основные вопросы, разбираемые на занятии:

1. Понятие об инфекции. Три взаимодействующих фактора в инфекции.

2. Пути проникновения микроба в организм. Входные ворота инфекции.

3. Стадии развития инфекционного заболевания.

4. Принципы классификации инфекционных заболеваний

5. Экзогенная и эндогеннная инфекции, условия возникновения.

6. Отличительные черты и исходы инфекционных заболеваний.

7. Патогенность и вирулентность. Методы определения вирулентности.

Способы снижения и повышения вирулентности.

8. Факторы вирулентности.

9. Ядовитость: токсигенность и токсичность, классификация токсинов.

10. Особенности биологического метода диагностики инфекционных

заболеваний.

Инфекция - это - ____________________________________________________

____________________________________________________________________

____________________________________________________________________ Эндогеная инфекция (аутоинфекция) - ________________________________

____________________________________________________________________

____________________________________________________________________ Экзогеная инфекция - _______________________________________________

_______________________________________________________________________

_______________________________________________________________________ Стадии развития инфекционного процесса 1.___________________________________________________________________

2._____________________________________________________________________

3._____________________________________________________________________

4._____________________________________________________________________

Page 10: J : ; H Q :Я L ? L J : >Ь I H B F F M G H E H = B B Qасть 1 … · 2019. 2. 11. · Виды иммунитета: Схемы механизмов активации комплемента

Три звена эпидемической цепи

Патогенность - ______________________________________________________

____________________________________________________________________

____________________________________________________________________ Вирулентность - ____________________________________________________

____________________________________________________________________

____________________________________________________________________ Патогенные микроорганизмы - _______________________________________

_______________________________________________________________________

_______________________________________________________________________

Условно-патогенные микроорганизмы - _______________________________

_______________________________________________________________________

_______________________________________________________________________

Сапрофитные микроорганизмы - _______________________________

_______________________________________________________________________

_______________________________________________________________________

Пути повышения вирулентности микроорганизмов: 1_____________________________________________________________

2_____________________________________________________________

Пути снижения вирулентности микроорганизмов: 1_____________________________________________________________

2_____________________________________________________________

Факторы инвазивности. Инвазивность - _____________________________________________________

____________________________________________________________________

____________________________________________________________________ Факторы проникновенния: 1. Активная подвижность. Рост возбудителя брюшного тифа S.typhi на полужидком агаре.

Page 11: J : ; H Q :Я L ? L J : >Ь I H B F F M G H E H = B B Qасть 1 … · 2019. 2. 11. · Виды иммунитета: Схемы механизмов активации комплемента

2. Адгезивность. Оценка адгезивности кишечных палочек по их способности к адсорбции на

поверхности эритроцитов.

Принцип метода: к суспензии эрироцитов добавляют испытуемую культуру

микроорганизмов. После инкубации готовят мазки, окрашивают и под

микроскопом определяют среднее количество бактерий, адсорбировавшихся на

одном эритроците. Эритроциты в данном случае используются в качестве модели

клеток восприимчивого макроорганизма.

Факторы защиты и агрессии. 1. Капсула

Мазок по Бурри-Гинсу

S.pneumoniae, штамм 1

Мазок по Бурри-Гинсу

S.pneumoniae, штамм 2

Вывод: (укажите какой из этих штаммов является авирулентеным и почему)

___________________________________________________________________

___________________________________________________________________

___________________________________________________________________

Page 12: J : ; H Q :Я L ? L J : >Ь I H B F F M G H E H = B B Qасть 1 … · 2019. 2. 11. · Виды иммунитета: Схемы механизмов активации комплемента

2. Другие факторы защиты (перечислите другие известные Вам факторы защиты) ___________________________________________________________________

___________________________________________________________________

___________________________________________________________________

Ферменты инвазивности

Фермент Субстрат Значение для микроорганизма

Определение ферментов инвазивности у стафилококков. 1. Плазмокоагулаза.

Принцип метода: в пробирку, содержащую цитратную плазму крови

кролика,вносится испытуемая культура. После инкубации в термостате

учитывается результат. При положительном результате плазма свертывается

(коагулирует).

штамм № 1 штамм № 2 '

2. Фибрннолизин.

Принцип метода: в пробирку с фибрином (отмытый от эритроцитов сгусток

крови) вносят испытуемую культуру. После инкубации в термостате учитывается

результат. При положительном результате сгусток растворяется.

штамм № 1 штамм № 2

Page 13: J : ; H Q :Я L ? L J : >Ь I H B F F M G H E H = B B Qасть 1 … · 2019. 2. 11. · Виды иммунитета: Схемы механизмов активации комплемента

3. Гиалуронцдаза,

Принцип метода: в пробирку с гиалуроновой кислотой (ГУК) вносят испытуемую

культуру. После инкубации в термостате добавляют реактив, вызывающий

свертывание ГУК и учитывают результат. При положительном результате,

вследстие расщепления ГУК сгустка не образуется.

штамм № 1 штамм № 2

4. Лецитовителлаза.

Принцип метода: _________________________________________________________

___________________________________________________________________________

___________________________________________________________________________

штамм № 1

штамм №2

Вывод: (перечислите ферменты вирулентности каждого из изученных штаммов и

укажите на практическое значение методов их определения)

___________________________________________________________________

___________________________________________________________________

___________________________________________________________________

Ядовитость. Токсичность - ______________________________________________________

____________________________________________________________________

____________________________________________________________________

Page 14: J : ; H Q :Я L ? L J : >Ь I H B F F M G H E H = B B Qасть 1 … · 2019. 2. 11. · Виды иммунитета: Схемы механизмов активации комплемента

Токсигенность - _____________________________________________________

____________________________________________________________________

____________________________________________________________________ Эндотоксины Эндотоксин - _______________________________________________________

____________________________________________________________________

____________________________________________________________________ Эндотоксический шок - ______________________________________________

____________________________________________________________________

____________________________________________________________________ Практическое применение эндотоксинов. ____________________________________________________________________

____________________________________________________________________

____________________________________________________________________ Экзотоксины. Экзотоксин - ________________________________________________________

____________________________________________________________________

____________________________________________________________________ Приведите примеры токсигенных микроорганизмов - ___________________

____________________________________________________________________

____________________________________________________________________ Анатоксин - _________________________________________________________

____________________________________________________________________

____________________________________________________________________ Схема получения экзотоксина и анатоксина.

Page 15: J : ; H Q :Я L ? L J : >Ь I H B F F M G H E H = B B Qасть 1 … · 2019. 2. 11. · Виды иммунитета: Схемы механизмов активации комплемента

Практическое применение экзотоксинов:

1___________________________________________________________

2___________________________________________________________

Экспериментальная инфекция Области применения:

1___________________________________________________________

2___________________________________________________________

3___________________________________________________________

4___________________________________________________________

Биологичесикй метод диагностики Биологический метод диагностики - _____________________________________

____________________________________________________________________

____________________________________________________________________

Этапы биологического метода диагностики

1. Заражение животного

2. Наблюдение за развитием заболевания

3. Вскрытие погибшего животного

4. Выявление возбудителя в тканях и органах погибщего животного с

помощью бактерископического метода и выделение - с помощью

бактериологического метода.

K.pneumoniae в органах

погибшего животного

Высев из крови и органов

погибшего животного

Page 16: J : ; H Q :Я L ? L J : >Ь I H B F F M G H E H = B B Qасть 1 … · 2019. 2. 11. · Виды иммунитета: Схемы механизмов активации комплемента

Достоинства биологического метода диагностики: _______________________________________________________________________

_______________________________________________________________________

_______________________________________________________________________

_______________________________________________________________________

_______________________________________________________________________ Недостатки биологического метода диагностики: _______________________________________________________________________

_______________________________________________________________________

_______________________________________________________________________

_______________________________________________________________________

_______________________________________________________________________

Page 17: J : ; H Q :Я L ? L J : >Ь I H B F F M G H E H = B B Qасть 1 … · 2019. 2. 11. · Виды иммунитета: Схемы механизмов активации комплемента

Занятие № 3 Дата______________

Тема: ИММУНИТЕТ: ВИДЫ ИММУНИТЕТА, НЕСПЕЦИФИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ ЗАЩИТЫ.

Цель: изучить строение иммунной системы организма человека,

строение и функции иммунокомпетентных клеток, изучить виды иммунитета и

неспецифические факторы защиты организма.

Основные вопросы, разбираемые на занятии: 1. Виды невосприимчивости макроорганизма к возбудителям инфекционных

заболеваний (врожденная и приобретенная невосприимчивость, видовая

невосприимчивость, естественная резистентность, иммунитет: естественный и

искусственный, активный и пассивный).

2. Видовая невосприимчивость к возбудителям инфекционных болезней и ее

механизмы.

3. Физиологические (барьерная функция покровов, антимикробное действие

секретов, выведение микробов физиологическими путями, антагонистическое

действие нормальной микрофлоры, барьерная и адсорбционная функция

тканей, действие тканевых ингибиторов, фагоцитоз, антимикробное действие

лизоцима, комплемента, интерфероны и др.) механизмы неспецифической

резистентности

4. Механизм фагоцитоза. Макро- и микрофаги, их функциональные отличия.

Завершенный и незавершенный фагоцитоз.

5. Комплемент. Пути активации.

6. Патофизиологические (стресс, воспалительная реакция) механизмы

неспецифической резистентности

8. Иммунная система организма. Центральные и периферические органы

иммунной системы.

9. Филогенез и онтогенез иммунной системы.

10. Иммунокомпетентные клетки. Клеточные и гуморальные механизмы

иммунитета (Т и В системы).

. Иммунитет - ________________________________________________________

____________________________________________________________________

____________________________________________________________________

Page 18: J : ; H Q :Я L ? L J : >Ь I H B F F M G H E H = B B Qасть 1 … · 2019. 2. 11. · Виды иммунитета: Схемы механизмов активации комплемента

Виды иммунитета:

Схемы механизмов активации комплемента. 1.Классический путь активации комплемента 2. Альтернативный путь активации комплемента

Page 19: J : ; H Q :Я L ? L J : >Ь I H B F F M G H E H = B B Qасть 1 … · 2019. 2. 11. · Виды иммунитета: Схемы механизмов активации комплемента

3.Лектиновый путь активации комплемента

Схема действия интерферонов.

Фагоцитоз - _________________________________________________________

____________________________________________________________________

____________________________________________________________________

Стадии завершенного фагоцитоза

___________________________________________________________________

___________________________________________________________________

___________________________________________________________________

___________________________________________________________________

Стадии незавершенного фагоцитоза

___________________________________________________________________

___________________________________________________________________

___________________________________________________________________

__________________________________________________________________

Page 20: J : ; H Q :Я L ? L J : >Ь I H B F F M G H E H = B B Qасть 1 … · 2019. 2. 11. · Виды иммунитета: Схемы механизмов активации комплемента

Незавершенный фагоцитоз гонококков в организме человека

Мазок _________________________

Окраска _______________________

Увеличение х

ОРГАНЫ ИММУННОЙ СИСТЕМЫ

ЦЕНТРАЛЬНЫЕ ОРГАНЫ ИММУННОЙ СИСТЕМЫ

Костный мозг - ______________________________________________________

____________________________________________________________________

____________________________________________________________________

Структурной основой (стромой) костного мозга является ______________

____________________________________________________________________

____________________________________________________________________

Основные структуры красного костного мозга.

_____________________________

_____________________________

_____________________________

_____________________________

Тимус (вилочковая железа, зобная железа) ___________________________

____________________________________________________________________

____________________________________________________________________

Page 21: J : ; H Q :Я L ? L J : >Ь I H B F F M G H E H = B B Qасть 1 … · 2019. 2. 11. · Виды иммунитета: Схемы механизмов активации комплемента

Строение тимуса

1 – кора

2 – тельце вилочковой

железы

3 – мозговое вещество

4 – лимфатический проток

5 - вена

6 - артерия

Клеточный состав тимуса.

Тип клеток Разновидность

клеток

Локализация клеток

Лимфоциты

Эпителиальные

Акцессорные

Соединительнотканные

ПЕРИФЕРИЧЕСКИЕ ОРГАНЫ ИММУННОЙ СИСТЕМЫ

Селезенка - ___________________________________________________

____________________________________________________________________

____________________________________________________________________

Page 22: J : ; H Q :Я L ? L J : >Ь I H B F F M G H E H = B B Qасть 1 … · 2019. 2. 11. · Виды иммунитета: Схемы механизмов активации комплемента

Основные структуры селезенки.

_____________________________

_____________________________

_____________________________

_____________________________

_____________________________

_____________________________

_____________________________

_____________________________

Лимфатические узлы________________________________________________

____________________________________________________________________

____________________________________________________________________

____________________________________________________________________

Основные структуры лимфатического узла.

_____________________________

_____________________________

_____________________________

_____________________________

_____________________________

_____________________________

_____________________________

_____________________________

Расположение основных лимфатических узлов.

Название узла Местоположение Области, от которых лимфа

оттекает в эти узлы

Лимфоциты

Эпителиальные

Акцессорные

Соединительно-

тканные

Page 23: J : ; H Q :Я L ? L J : >Ь I H B F F M G H E H = B B Qасть 1 … · 2019. 2. 11. · Виды иммунитета: Схемы механизмов активации комплемента

СИСТЕМА ЛИМФОЭПИТЕЛИАЛЬНЫХ ОБРАЗОВАНИЙ

Лимфоидные образования глотки ___________________________________

____________________________________________________________________

____________________________________________________________________

________________________________________________________________

Лимфоидные образования пищевода. _________________________________

____________________________________________________________________

____________________________________________________________________

________________________________________________________________

Лимфоидные образования желудка. ___________________________________

____________________________________________________________________

____________________________________________________________________

____________________________________________________________________

Лимфоидные образования кишечника. ________________________________

____________________________________________________________________

____________________________________________________________________

________________________________________________________________

Лимфоидные образования органов дыхания. ___________________________

____________________________________________________________________

____________________________________________________________________

________________________________________________________________

Лимфоидные образования мочевыводящих путей. ______________________

____________________________________________________________________

____________________________________________________________________

____________________________________________________________________

Строение миндалины.

_____________________________

_____________________________

_____________________________

_____________________________

_____________________________

_____________________________

_____________________________

_____________________________

Page 24: J : ; H Q :Я L ? L J : >Ь I H B F F M G H E H = B B Qасть 1 … · 2019. 2. 11. · Виды иммунитета: Схемы механизмов активации комплемента

Особенности строения и функций иммунокомпетентных клеток

Клетка Функция Рисунок

Фагоциты

Микрофаги: Фагоцитоз

нейтрофилы

базофилы

эозинофилы

Фагоцитоз

Макрофаги:

моноциты

гистиоциты

Фагоцитоз, участие в

иммунном ответе, синтез

медиаторов и

биологически активных

веществ

Лимфоциты

0-(ни-В/ни-Т-) лимфоциты:

NK-клетки

(нормальные

киллеры)

Неспецифическая

цитотоксичность.

К-клетки

Антителозависимая

клеточная

цитотоксичность.

Т-лимфоциты:

1 Т-хелперы Участие в иммунном

ответе (стимуляция)

Т-супрессоры Участие в иммунном

ответе (ингибиция)

Т-киллеры Антигензависимая

клеточная

цитотоксичность

Т- эффекторы Участие в ГЗТ и

отторжении

трансплантата

В-лимфоциты Участие в иммунном

ответе (предшественники

антителопродуцирующих

клеток - плазмоцитов

Page 25: J : ; H Q :Я L ? L J : >Ь I H B F F M G H E H = B B Qасть 1 … · 2019. 2. 11. · Виды иммунитета: Схемы механизмов активации комплемента

Вывод: (отметить морфологические особенности отдельных субпопуляций

лимфоцитов, основные отличительные черты)

___________________________________________________________________

___________________________________________________________________

___________________________________________________________________

___________________________________________________________________

___________________________________________________________________

___________________________________________________________________

Схема образования клеток крови и иммунной системы.

Основные периоды онтогенеза иммунной системы

период характеристика сроки

Page 26: J : ; H Q :Я L ? L J : >Ь I H B F F M G H E H = B B Qасть 1 … · 2019. 2. 11. · Виды иммунитета: Схемы механизмов активации комплемента

Эволюция иммунной системы

Этап эволюции или фактор отбора

Элементы иммунной системы

Page 27: J : ; H Q :Я L ? L J : >Ь I H B F F M G H E H = B B Qасть 1 … · 2019. 2. 11. · Виды иммунитета: Схемы механизмов активации комплемента

Занятие № 4 Дата______________

Тема: ИММУНИТЕТ: АНТИГЕНЫ И АНТИТЕЛООБРАЗОВАНИЕ, ИММУННЫЕ РЕАКЦИИ.

Цель: Познакомиться со строением и свойствами антигенов и антител,

познакомиться с основными формами иммунного реагирования.

Познакомиться с особенностями протекания реакций Аг+Ат. Научиться

осуществлять постановку ориентировочной и развернутой реакции

агглютинации Основные вопросы, разбираемые на занятии: 1. Антигены. Химическая природа, антигенность, иммуногенность,

специфичность, детерминантные группы. Гаптены. Микробные антигены,

2. Антитела. Классификация, строение. Биологическая роль.

3. Схема иммунного ответа. Т-зависимые и Т-независимые антигены.

Первичный и вторичный иммунный ответ.

4. Динамика накопления антител, фазы антителообразования. Иммунизация и

гипериммунизация, ревакцинация.

9. Механизм реакций АГ+АТ. Стадии и компоненты

10. Реакция агглютинации.

11. Получение диагностических препаратов (агглютинирующая сыворотка,

диагностикум)

Антигены_____________________________________________________________

__________________________________________________________________

Антитела______________________________________________________________

__________________________________________________________________

Цитокины_____________________________________________________________

__________________________________________________________________

Полные антитела______________________________________________________

______________________________________________________________________

______________________________________________________________________

Неполные антитела (гаптены)___________________________________________

______________________________________________________________________

________________________________________________________________

Антигенсвязывающий центр (паратоп)___________________________________

______________________________________________________________________

________________________________________________________________

Page 28: J : ; H Q :Я L ? L J : >Ь I H B F F M G H E H = B B Qасть 1 … · 2019. 2. 11. · Виды иммунитета: Схемы механизмов активации комплемента

Иммунгенность________________________________________________________

___________________________________________________________________

Специфичность________________________________________________________

___________________________________________________________________

Антигенная детерминанта______________________________________________

___________________________________________________________________

Строение иммуноглобулина G

1- Н-цепь,

2-L- цепь,

3- дисульфидные связи (-S-S-),

4-вариабельная область - V-

домены,

5-константная область - С-

домены

6- антигенсвязывающий центр

7- Fab фрагмнт

8- Fc фрагмент

Основные классы иммуноглобулинов человека

Свойства IgG IgМ IgА IgD IgЕ

Уровень в сыворотке

крови

Период распада 50%

Молекулярная масса,кД

Количество мономеров

Валентность

Способность проникать

через плаценту

Page 29: J : ; H Q :Я L ? L J : >Ь I H B F F M G H E H = B B Qасть 1 … · 2019. 2. 11. · Виды иммунитета: Схемы механизмов активации комплемента

СХЕМА ИММУННОГО ОТВЕТА ОСНОВНАЯ СХЕМА ИММУННОГО ОТВЕТА

1

2

3

4

5

6

ИММУНОЛОГИЧЕСКИЙ ОТВЕТ ПО КЛЕТОЧНОМУ ТИПУ

1

2

3

4

5

6

Page 30: J : ; H Q :Я L ? L J : >Ь I H B F F M G H E H = B B Qасть 1 … · 2019. 2. 11. · Виды иммунитета: Схемы механизмов активации комплемента

ИММУНОЛОГИЧЕСКИЙ ОТВЕТ ПО ГУМОРАЛЬНОМУ ТИПУ С

ПОМОЩЬЮ Т- ХЕЛПЕРОВ

1

2

3

4

5

6

7

8

ИММУНОЛОГИЧЕСКИЙ ОТВЕТ ПО ГУМОРАЛЬНОМУ ТИПУ БЕЗ

ПОМОЩИ Т- КЛЕТОК

1

2

3

4

5

6

Page 31: J : ; H Q :Я L ? L J : >Ь I H B F F M G H E H = B B Qасть 1 … · 2019. 2. 11. · Виды иммунитета: Схемы механизмов активации комплемента

Динамика накопления антител, фазы антителообразования при

первичном иммунном ответе

Фазы

1__________________________

2__________________________

3__________________________

4__________________________

Динамика накопления антител, фазы антителообразования при

вторичном иммунном ответе

Фазы

1__________________________

2__________________________

3__________________________

4__________________________

Реакции агглютинации (РА ). Реакции АГ+А Т протекают в 2 фазы:

1-я специфическая взаимодействуют антиген и антитело с

образованием комплекса АГ+АТ

2-я неспецифическая проявление этой реакции, видимый эффект

Определяемые свойства

реакции

Фазы реакции

1-ая - взаимодействие

АГ+АТ

2-ая - развитие видимых

проявлений Специфичность + Вид реакции + Чувствительность +

Скорость +

Page 32: J : ; H Q :Я L ? L J : >Ь I H B F F M G H E H = B B Qасть 1 … · 2019. 2. 11. · Виды иммунитета: Схемы механизмов активации комплемента

Реакция агглютинации Реакция агглютинации - _____________________________________________

_______________________________________________________________________

_______________________________________________________________________

(+) феномен агглютинации - образование

агрегатов (крупнохлопчатых при наличии у

бактерий жгутиков или мелкозернистых при их

осутствии),

(-) феномен агглютинации - равномерная муть.

Агглютинирующая диагностическая сыворотка (что содержит, как получена, как применяется) __________________________________________

_______________________________________________________________________

_______________________________________________________________________

Неадсорбированная агглютинирующая сыворотка _____________________

_______________________________________________________________________

_______________________________________________________________________

Адсорбированная агглютинирующая сыворотка _______________________

_______________________________________________________________________

_______________________________________________________________________

Получение адсорбированной агглютинирующей сыворотки методом

истощения (адсорбции) по Кастеллани.

Принцип метода:______________________________________________________

______________________________________________________________________

______________________________________________________________________

1. Получение иммунных сывороток

Page 33: J : ; H Q :Я L ? L J : >Ь I H B F F M G H E H = B B Qасть 1 … · 2019. 2. 11. · Виды иммунитета: Схемы механизмов активации комплемента

2. Истощение (адсорбция) по Кастеллани.

Поливалентная сыворотка (смесь) : ___________________________________

______________________________________________________________________

______________________________________________________________________ Титрование агглютинирующей сыворотки: Принцип реакции: К серийным разведениям сыворотки добавляют густую

взвесь бактерий, применявшихся для гипериммунизации животного при

получении сыворотки.

Титром агглютинирующей сыворотки называется максимальное разведение сыворотки, в

котором

наблюдается агглютинация.

Ингредиенты:

Исследуемый материал ______________________________ содержит ________

Диагностический препарат _________________________ содержит ________

Агглю-

тинат

Разведения сыворотки Контроли

1/100 1/200 1/400 1/800 1/1600 1/3200 1/6400 антигена сыворотки

(+/ –)

Ответ: Титр агглютинирующей сыворотки = ____________

Серотипирование - __________________________________________________

_______________________________________________________________________

_______________________________________________________________________

Определение антигенного состава Х-культуры с помощью

неадсорбированных и адсорбированных агглютинирующих сывороток.

Реакция Грубера на стекле. Принцип реакции: к капле сыворотки добавляют петлю чистой культуры

микроорганизмов, выделенной в ходе бактериологического исследования (Х-

культура). При соответствии антигенного состава Х-культуры и известной

Page 34: J : ; H Q :Я L ? L J : >Ь I H B F F M G H E H = B B Qасть 1 … · 2019. 2. 11. · Виды иммунитета: Схемы механизмов активации комплемента

агглютинирующей сыворотки в течение 2-х мин образуются хлопья и жидкость

просветляется.

Реакция Грубера с неадсорбированными сыворотками.

Ингредиенты:

Исследуемый материал ______________________________ содержит ________

Диагностический препарат _________________________ содержит ________

Сыворотки:

1. ______________ 3. _____________ 2. ______________ 4. _____________

Ответ: _____________________________________________________________

_______________________________________________________________________

Вывод: При проведении р. Грубера с неадсорбированными сыворотками

положительный результат рассматривается как ориентировочный и требует

постановки развернутой пробирочной реакции.

Реакция Грубера с адсорбированными сыворотками.

Ингредиенты:

Исследуемый материал ______________________________ содержит ________

Диагностический препарат _________________________ содержит ________

Сыворотки:

1. ______________ 3. _____________ 2. ______________ 4. _____________

Ответ: _____________________________________________________________

_______________________________________________________________________

Вывод:

Выделенная культура идентифицирована как _______________________________

Page 35: J : ; H Q :Я L ? L J : >Ь I H B F F M G H E H = B B Qасть 1 … · 2019. 2. 11. · Виды иммунитета: Схемы механизмов активации комплемента

Реакция развернутой агглютинации с целью серотипирования E. сoli

Ингредиенты:

Исследуемый материал ______________________________ содержит ________

Диагностический препарат _________________________ содержит ________

Диагностическая

сыворотка

Разведения взвеси Контроли

1/50 1/100 1/200 1/400 1/800 1/1600 антигена сыворотки

к О-антигену

к К-антигену

Вывод:

Выделенная культура идентифицирована как _______________________________

Page 36: J : ; H Q :Я L ? L J : >Ь I H B F F M G H E H = B B Qасть 1 … · 2019. 2. 11. · Виды иммунитета: Схемы механизмов активации комплемента

Занятие № 5 Дата______________

Тема: ИММУНИТЕТ: ИММУНОЛОГИЧЕСКАЯ ПАМЯТЬ И ТОЛЕРАНТНОСТЬ.ИММУННЫЕ РЕАКЦИИ.

Цель: Познакомиться с механизмами иммунологической памяти и

толерантности. Изучить особенности и методы постановки различных иммунных

реакций, научиться ставить реакцию Видаля, РНГА. Уметь интерпретировать

результаты реакций.

Основные вопросы, разбираемые на занятии: 1. Иммунологическая память.

2. Иммунологическая ареактивность

3. Иммунологическая толерантность.

4. Реакции агглютинации (РА ). Нагрузочные реакции. РНГА

5. Критерии серодиагностики: дигностический титр, нарастание титра антител.

6. Применение реакций АГ+АТ в диагностике: изучение антигенного состава

микроорганизмов (серотипирование), экспрессдиагностика, индикация

антигенов в объектах внешней среды, серодиагностика.

Иммунологическая память___________________________________________

____________________________________________________________________

____________________________________________________________________

Иммунологическая толерантность_____________________________________

____________________________________________________________________

____________________________________________________________________

Врожденная толерантность___________________________________________

____________________________________________________________________

____________________________________________________________________

Приобретенная толерантность________________________________________

____________________________________________________________________

____________________________________________________________________

Толерогены_________________________________________________________

____________________________________________________________________

____________________________________________________________________

Причины развития иммунологической толерантности

Page 37: J : ; H Q :Я L ? L J : >Ь I H B F F M G H E H = B B Qасть 1 … · 2019. 2. 11. · Виды иммунитета: Схемы механизмов активации комплемента

____________________________________________________________________

____________________________________________________________________

____________________________________________________________________

____________________________________________________________________

____________________________________________________________________

____________________________________________________________________

____________________________________________________________________

____________________________________________________________________

____________________________________________________________________

Серодиагностика Серодиагностика - __________________________________________________

_______________________________________________________________________

_______________________________________________________________________

Применение реакции агглютинации в серодиагностике. Принцип реакции: Сыворотку больного разводят в нескольких рядах. К

каждому разведению прибавляют равное количество соответствующего

диагностикума.

Диагностикум - ____________________________________________________

_______________________________________________________________________

_______________________________________________________________________

РА с целью серодиагностики брюшного тифа (реакция Видаля).

Ингредиенты:

Исследуемый материал ______________________________ содержит ________

Диагностический препарат _________________________ содержит ________

Диагностикум

из

Разведения сыворотки Контроль

1/50 1/100 1/200 1/400 1/800 1/1600 сыворотки диагностикума

S. typhi

S. paratyphi

Диагностический титр = ____________

Ответ: ____________________________________________________________

____________________________________________________________________

Вывод: Заболевание вызвано __________________________________________________

Диагностические критерии серодиагностики:

Page 38: J : ; H Q :Я L ? L J : >Ь I H B F F M G H E H = B B Qасть 1 … · 2019. 2. 11. · Виды иммунитета: Схемы механизмов активации комплемента

Диагностический титр - __________________________________

________________________________________________________

________________________________________________________ Нарастание титра антител - _____________________________

________________________________________________________

________________________________________________________ Парные сыворотки - ____________________________________

________________________________________________________

Нагрузочные реакции Реакция непрямой (нагрузочной) гемагглютинации (РНГА) ____________

____________________________________________________________________

____________________________________________________________________ Схема РНГА (обозначьте ингредиенты).

Эритроцитарный диагностикум

Антительный эритроцитарный диагностикум (иммунодиагностикум)

Page 39: J : ; H Q :Я L ? L J : >Ь I H B F F M G H E H = B B Qасть 1 … · 2019. 2. 11. · Виды иммунитета: Схемы механизмов активации комплемента

"+" феномен РНГА - "зонтик"

"-" феномен РНГА - "пуговица"

Эритроцитарный диагностикум _______________________________________

____________________________________________________________________

____________________________________________________________________

Эритроцитарный антительный диагностикум (иммунодиагностикум антительный) _______________________________________________________

____________________________________________________________________

____________________________________________________________________

Экспресс-диагностика Экспресс-диагностика - это быстрое обнаружение микроорганизмов или их антигенов е материале от больного. Экспресс диагностика гепатита В в РНГА. Принцип метода: К последовательным двухкратным разведениям

исследуемого материала добавляют диагностический препарат.

Ингредиенты:

Исследуемый материал _______________________________ содержит ________

Диагностический препарат __________________________ содержит ________

Разведения сыворотки Контроль

диагностикума

Положительный

контроль 1/4 1/8 1/16 1/32 1/64

РНГА (+/ –)

Диагностический титр = 1/8

Ответ: _____________________________________________________________

____________________________________________________________________

Вывод: ____________________________________________________________

__________________________________________________________________

__________________________________________________________________

Page 40: J : ; H Q :Я L ? L J : >Ь I H B F F M G H E H = B B Qасть 1 … · 2019. 2. 11. · Виды иммунитета: Схемы механизмов активации комплемента

Применение РНГА в серодиагностике.

Принцип реакции: Сыворотку больного разводят в нескольких рядах. К

каждому разведению прибавляют равное количество соответствующего

эритроцитарного диагностикума.

РНГА с целью серодиагностики сыпного тифа

Ингредиенты:

Исследуемый материал _______________________________ содержит ________

Диагностический препарат __________________________ содержит ________

Сыворотка

на

Разведения сыворотки Контроль

1/20 1/40 1/80 1/160 1/320 1/640 1/1280 эрит. диагн. сыворотки

8 день

14 день

Ответ: _____________________________________________________________

____________________________________________________________________

Вывод: ____________________________________________________________

__________________________________________________________________

_________________________________________________________________

Page 41: J : ; H Q :Я L ? L J : >Ь I H B F F M G H E H = B B Qасть 1 … · 2019. 2. 11. · Виды иммунитета: Схемы механизмов активации комплемента

Занятие № 6 Дата______________

Тема: ИММУНИТЕТ: ВЗАИМОДЕЙСТВИЕ ФАКТОРОВ ИММУНИТЕТА И НЕСПЕЦИФИЧЕСКОЙ РЕЗИСТЕНТНОСТИ

ПРИ ИНФЕКЦИЯХ РАЗЛИЧНОЙ ЭТИОЛОГИИ. ПРОТИВООПУХОЛЕВЫЙ ИММУНИТЕТ.

КОМПЛЕМЕНЗАВИСИМЫЕ СЕРОЛОГИЧЕСКИЕ РЕАКЦИИ

Цель:. Познакомиться с особенностями взаимодействие факторов

иммунитета и неспецифической резистентности при инфекциях различной

этиологии. Изучить механизмы противоопухолевого иммунитета. Научиться

учитывать р. иммунного гемолиза и РСК, интерпретировать их результаты

Основные вопросы, разбираемые на занятии: 1. Особенности взаимодействие факторов иммунитета и неспецифической

резистентности при инфекциях различной этиологии

2. Противоопухолевый иммунитет, его значение.

3. Реакции с участием комплемента (реакции иммунного бактериолизиса,

иммунного гемолиза, РСК).

4. Получение препаратов: комплемент, гемолитическая сыворотка.

5. Определение периода болезни с помощью серодиагностики (раздельное

определение IgM, IgG).

Антибактериальный

иммунитет_________________________________________________________

____________________________________________________________________

Противовирусный

иммунитет_________________________________________________________

____________________________________________________________________

Противогрибковый

иммунитет_________________________________________________________

____________________________________________________________________

Противоглистный

иммунитет_________________________________________________________

____________________________________________________________________

Реакции с участием комплемента

Реакция иммунного бактериолизиса - реакция Аг+Ат, в которой происходит лизис бактерий в присутствии комплемента

Page 42: J : ; H Q :Я L ? L J : >Ь I H B F F M G H E H = B B Qасть 1 … · 2019. 2. 11. · Виды иммунитета: Схемы механизмов активации комплемента

(+) феномен - лизис (жидкость прозрачная)

(-) феномен - осадок или равномерная муть при

встряхивании.

Реакция иммунного гемолиза ________________________________________

____________________________________________________________________

____________________________________________________________________

Принцип реакции: К эритроцитам барана добавляются гемолитическая

сыворотка и комплемент.

(+) феномен - гемолиз ("лаковая" кровь)

(-) феномен - отсутствие гемолиза.

Титр комплемента – это _____________________________________________

____________________________________________________________________

Реакция связывания комплемента (РСК).

Схема РСК

I фаза II фаза

Ингредиенты:

Аг __________________________________________________________________

Ат __________________________________________________________________

Комплемент _________________________________________________________

Page 43: J : ; H Q :Я L ? L J : >Ь I H B F F M G H E H = B B Qасть 1 … · 2019. 2. 11. · Виды иммунитета: Схемы механизмов активации комплемента

Гемолитическая система:

эритроциты барана

гемолитическая сыворотка _____________________________________________

Для получения достоверного результата необходимо, чтобы все известные

ингредиенты были взяты в определенных количествах (рабочие дозы). Для

этого колмплемент и гемолитическую сыворотку предварительно титруют и

вычисляют их рабочие дозы.

Титрование комплемента.

Тип реакции _________________________________________________________

Ингредиенты:

Исследуемый материал _______________________________ содержит _______

Диагностические препараты 1._________________________содержит _______

2._________________________содержит _______

Разведения сыворотки Контроль

гем. системы 1/10 1/15 1/20 1/25 1/30 1/35

Результат (Г/ЗГ)

Обозначения: Г- гемолиз, ЗГ - задержка гемолиза

Ответ: Титр комплемента = _____________

Рабочая доза комплемента (на 20-25% выше титра, обычно берут предыдущее

разведение) = ________________________________________________________

Титрование гемолитической сыворотки.

Тип реакции _________________________________________________________

Ингредиенты:

Исследуемый материал _______________________________ содержит _______

Диагностические препараты 1._________________________содержит _______

2._________________________содержит _______

Разведения сыворотки Контроль

1/200 1/400 1/800 1/1600 1/3200 1/6400 сыв. компл. эритр.

Результат

(Г/ЗГ)

Обозначения: Г- гемолиз, ЗГ - задержка гемолиза

Page 44: J : ; H Q :Я L ? L J : >Ь I H B F F M G H E H = B B Qасть 1 … · 2019. 2. 11. · Виды иммунитета: Схемы механизмов активации комплемента

Ответ:

Титр гемолитической сыворотки = _________

Рабочая доза гемолитической сыворотки (в 3-4 раза выше титра) = __________

Применение РСК в экспресс-диагностике

Ингредиенты:

Исследуемый материал _______________________________ содержит _______

Диагностические препараты 1._________________________содержит _______

2._________________________содержит _______

3._________________________содержит _______

4._________________________содержит _______

РСК с целью выявления риккетсиозного антигена в крови больного Q-

лихорадкой (ставится на 1-3 день болезни) Разведения сыворотки Контроль

1/2 1/4 1/8 1/16 1/32 1/64 гем. сист компл. эритр.

Результат

(Г/ЗГ)

Обозначения: Г- гемолиз, ЗГ - задержка гемолиза

Диагностический титр = 1/8

Ответ: _____________________________________________________________

____________________________________________________________________

Вывод: ____________________________________________________________

__________________________________________________________________

__________________________________________________________________

Применение РСК в экспресс-диагностике

Ингредиенты:

Исследуемый материал _______________________________ содержит _______

Диагностические препараты 1._________________________содержит _______

2._________________________содержит _______

3._________________________содержит _______

4._________________________содержит _______

РСК с целью серодиагностики сыпного тифа

Сыворотка на Разведения сыворотки Контроль

1/20 1/40 1/80 1/160 1/320 антигена сыворотки

8 день

14 день

Обозначения: Г- гемолиз, ЗГ - задержка гемолиза

Page 45: J : ; H Q :Я L ? L J : >Ь I H B F F M G H E H = B B Qасть 1 … · 2019. 2. 11. · Виды иммунитета: Схемы механизмов активации комплемента

Ответ: _____________________________________________________________

____________________________________________________________________

Вывод: ____________________________________________________________

__________________________________________________________________

__________________________________________________________________

Применение РСК для определения периода болезни. Принцип метода: IgM, образующиеся преимущественно в начальный (острый)

период заболевания (или при первичной встрече с антигеном), при обработке

меркаптоэтанолом разрушаются в отличие от IgG, образование которых

характерно для более позднего периода болезни (или повторной встречи с

антигеном). Более низкий титр реакции с обработанной сывороткой,

свидетельствует о наличии IgM - начале заболевания.

Ингредиенты: Исследуемый материал 1. ____________________________содержит ________

2. ____________________________содержит _______

Диагностические препараты 1._________________________содержит _______

2._________________________содержит _______

3._________________________содержит _______

4._________________________содержит _______

РСК с целью раздельного определения IgM и IgG в сыворотке больного

сыпным тифом Сыворотка Разведения сыворотки Контроли

1/50 1/100 1/200 1/400 антигена сыворотки

нативная

обработанная

меркаптоэтанолом

Обозначения: Г- гемолиз, ЗГ - задержка гемолиза

Ответ: _____________________________________________________________

____________________________________________________________________

Вывод: ____________________________________________________________

__________________________________________________________________

____________________________________________________________________

Page 46: J : ; H Q :Я L ? L J : >Ь I H B F F M G H E H = B B Qасть 1 … · 2019. 2. 11. · Виды иммунитета: Схемы механизмов активации комплемента

Занятие № 7 Дата______________

Тема: Иммунитет: ГНТ И ГЗТ. АНТИТОКСИЧЕСКИЙ ИММУНИТЕТ.

Цель:.Познакомиться с особенностями ГНТ и ГЗТ, с механизмами

антитоксического иммунитета. Научиться осуществлять постановку реакций

преципитации и нейтрализации, интерпретировать их результаты

Основные вопросы, разбираемые на занятии: 1. Особенности реакций гиперчувствительности, их классификация и значение.

2. Реакции гиперчувствительности I типа, механизм их развития.

3. Реакции гиперчувствительности II типа, механизм их развития

4. Реакции гиперчувствительности III типа, механизм их развития

5. Реакции гиперчувствительности IV типа, механизм их развития

6. Антитоксический иммунитет и методы его изучения

7. Реакции преципитации.

8. Реакции нейтрализации токсина антитоксической сывороткой in vivo и in

vitro.

Антитоксический иммунитет

Антитоксический иммунитет - _______________________________________

__________________________________________________________________

____________________________________________________________________

Антитоксический иммунитет обусловлен ______________________________

__________________________________________________________________

____________________________________________________________________ Реакции нейтрализации токсина антитоксической сывороткой.

Антитоксическая сыворотка - ______________________________________

__________________________________________________________________

____________________________________________________________________

Реакции in vivo.

1. Реакция нейтрализации на животных.

Принцип метода: _________________________________________________

__________________________________________________________________

____________________________________________________________________

Ингредиенты:

Исследуемый материал ______________________________ содержит ________

Диагностический препарат _________________________ содержит ________

Page 47: J : ; H Q :Я L ? L J : >Ь I H B F F M G H E H = B B Qасть 1 … · 2019. 2. 11. · Виды иммунитета: Схемы механизмов активации комплемента

Задача 1.

При постановке реакции нейтрализации токсина антитоксином на белых мышах

мышь, не получившая антитоксической сыворотки, погибла, а получившая -

осталась жива. Ваше заключение?

Ответ: _________________________________________________________

__________________________________________________________________

____________________________________________________________________

Задача 2.

При постановке реакции нейтрализации токсина антитоксином на белых мышах

опытная и контрольная мыши погибли. Ваше заключение?

Ответ: _________________________________________________________

__________________________________________________________________

____________________________________________________________________

Задача 3.

При постановке реакции нейтрализации токсина антитоксином на белых мышах

опытная и контрольная мыши выжили. Ваше заключение?

Ответ: _________________________________________________________

__________________________________________________________________

____________________________________________________________________

2. Кожные иммунологические пробы:

Принцип метода: _________________________________________________

__________________________________________________________________

____________________________________________________________________

Сфера применения: _________________________________________________

__________________________________________________________________

____________________________________________________________________

Диагностические препараты:

Токсин Шика - _______________________________________________________

Токсин Дика - _______________________________________________________

Page 48: J : ; H Q :Я L ? L J : >Ь I H B F F M G H E H = B B Qасть 1 … · 2019. 2. 11. · Виды иммунитета: Схемы механизмов активации комплемента

Положительный результат кожной

иммунологической пробы –

______________________________________

Отрицательный результат кожной

иммунологической пробы –

______________________________________

Реакция преципитации Реакция преципитации - _____________________________________________

_______________________________________________________________________

_______________________________________________________________________

(+) феномен преципитации - помутнение

(-) феномен преципитации - отсутствие

помутнения.

Преципитирующие сыворотки получают ______________________________

_______________________________________________________________________

_______________________________________________________________________

Титром преципитирующей сыворотки называется _________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________.

Типы реакций преципитации.

Применение РП в экспресс-диагностике эпидемического цереброспинального

менингита (Реакция встречной иммунодиффузии в агаре по Оухтерлони).

Принцип реакции: В слое агар-агара вырезают лунки, в которые вносят

соответствующие ингредиенты реакции. При встречной диффузии между лунками

в зоне эквивалентности образуется линия преципитата.

Ингредиенты:

Исследуемый материал ______________________________ содержит ________

Page 49: J : ; H Q :Я L ? L J : >Ь I H B F F M G H E H = B B Qасть 1 … · 2019. 2. 11. · Виды иммунитета: Схемы механизмов активации комплемента

Диагностический препарат _________________________ содержит ________

Контрольная сыворотка не содержит антител к искомому антигену.

Ответ: _____________________________________________________________

_______________________________________________________________________

Вывод: ____________________________________________________________

__________________________________________________________________

__________________________________________________________________

Применение РП для индикации сибиреязвенного антигена (реакция

кольцепреципитации по Асколи).

Принцип реакции: В пробирку на преципитирующую сыворотку наслаивают

экстракт из исследуемого материала. Реакция считается положительной при

появлении зоны помутнения (кольцо преципитации).

Ингредиенты:

Исследуемый материал ______________________________ содержит ________

Диагностический препарат _________________________ содержит ________

Ответ: _____________________________________________________________

Вывод: ____________________________________________________________

___________________________________________________________________

Реакции нейтрализации токсина антитоксической сывороткой in vitro./

Page 50: J : ; H Q :Я L ? L J : >Ь I H B F F M G H E H = B B Qасть 1 … · 2019. 2. 11. · Виды иммунитета: Схемы механизмов активации комплемента

1. Выявление токсигенности возбудителя дифтерии в реакции преципита-

ции в геле по Оухтерлони.

Ингредиенты:

Исследуемый материал ______________________________ содержит ________

Диагностический препарат _________________________ содержит ________

На рисунке обозначьте:

1. фильтровальная бумага, смоченная

антитоксической сывороткой;

2. испытуемые культуры:

а) нетоксигенные б) токсигенные

3. линии преципитации.

2. Реакция флоккуляции

Принцип метода: _________________________________________________

__________________________________________________________________

____________________________________________________________________

Сфера применения: _________________________________________________

__________________________________________________________________

____________________________________________________________________

Ингредиенты:

Исследуемый материал ______________________________ содержит ________

Диагностический препарат _________________________ содержит ________

Количество антитоксической сыворотки в мл

0,01 0,02 0,03 0,04 0,05 0,06 0,07

Помутнение (+/ –)

Примечание: Доза токсина, внесенного в каждую пробирку - ___________ АЕ.

Расчет активности сыворотки:

Page 51: J : ; H Q :Я L ? L J : >Ь I H B F F M G H E H = B B Qасть 1 … · 2019. 2. 11. · Виды иммунитета: Схемы механизмов активации комплемента

Вывод: ____________________________________________________________

__________________________________________________________________

____________________________________________________________________

Гиперчувствительность. Механизм основных типов аллергических реакций.

Тип Ведущее звено патогенеза Основные клинические формы

I тип

II тип

III тип

IV тип

Методы выявления сенсибилизации

Кожные аллергические пробы.

Цель постановки Тип гиперчувстви-

тельности ГЗТ/ГНТ)

Диагностический

препарат

Page 52: J : ; H Q :Я L ? L J : >Ь I H B F F M G H E H = B B Qасть 1 … · 2019. 2. 11. · Виды иммунитета: Схемы механизмов активации комплемента

Принцип метода: Внутрикожно или накожно в организм человека вводися

небольшое количество аллергена. При наличии сенсибилизации через некоторое

время на месте введения препарата возникает местная реакция.

Положительный результат кожной

аллергической пробы –

______________________________________

Отрицательный результат кожной

аллергической пробы –

______________________________________

Page 53: J : ; H Q :Я L ? L J : >Ь I H B F F M G H E H = B B Qасть 1 … · 2019. 2. 11. · Виды иммунитета: Схемы механизмов активации комплемента

Занятие № 8 Дата______________

Тема: ИММУНИТЕТ: ИММУННЫЕ РЕАКЦИИ С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ МЕЧЕНЫХ АНТИТЕЛ ИЛИ

АНТИГЕНОВ. ИММУНОБИОЛОГИЧЕСКИЕ ПРЕПАРАТЫ.

Цель: Изучить основные иммунобиологические препараты, их особенности,

получение и применение в медицине. Получить представление о принципах

приготовления диагностических препаратов, меченых флюорохромами,

радиоактивными элементами, ферментами; чувствительности отдельных

иммунных реакций и областях их применения..

Основные вопросы, разбираемые на занятии: 1. Вакциопрофилактика и вакцинотерапия.

2. Состав и классификация вакцин.

3. Живые вакцины, получение и применение.

4. Инактивированные вакцины, получение и применение.

5. Синтетические и полусинтетические вакцины, получение и применение.

6. Ассоциированные вакцины.

7. Календарь профилактических прививок.

8. Серопрофилактика и серотерапия.

9. Сывороточные иммунные препараты.

10. Получение и применение моноклональных антител.

11. Иммуномодуляторы.

12. Реакции с мечеными диагностическими компонентами (ИЛМ, РИФ, ИФА,

РИА, иммуноблоттинг).

Тема для самостоятельной проработки - опсоно-фагоцитарная реакция.

Иммуно-люминесцентный метод (ИЛМ, РИФ) Принцип метода: Антитела, соединенные с ФИТЦ (флюоресцсина

изотиоционат), фиксируются на соответствующих антигенах. После промывки, в

люминесцентном микроскопе виден искомый микроорганизм или пораженная

клетка макроорганизма, светящиеся на темном фоне.

Ингредиенты:

1. Аг - клетка микроорганизма или пораженная клетка макроорганизма.

2. Люминесцирющая сыворотка против искомого антигена.

3. Нелюминесцирующая кроличья сыворотка против искомого Аг.

4. Люминесцирующая сыворотка против иммуноглобулинов кролика.

5. Комплемент.

6. Люминесцирующая сыворотка против комплемента.

Page 54: J : ; H Q :Я L ? L J : >Ь I H B F F M G H E H = B B Qасть 1 … · 2019. 2. 11. · Виды иммунитета: Схемы механизмов активации комплемента

Схема реакций (отметьте соответствующие компоненты цифрами)

Прямой

метод

Непрямой

двухэтапный

метод

Непрямой

трехэтапный

метод

Перечислите ингредиенты для ИЛМ (РИФ) с целью:

а) Индикации возбудителя дизентерии в молоке

В прямой РИФ В непрямой

двухэтапной РИФ

Исследуемый материал

Диагностические

препараты

б) Серодиагностики сифилиса в непрямой двухэтапной РИФ

В непрямой двухэтапной РИФ

Исследуемый материал

Диагностические

препараты

Page 55: J : ; H Q :Я L ? L J : >Ь I H B F F M G H E H = B B Qасть 1 … · 2019. 2. 11. · Виды иммунитета: Схемы механизмов активации комплемента

Иммуно-ферментный анализ ИФА.

Принцип метода: Антитела к искомому антигену фиксируются на носителе.

Вносят исследуемый материал, добавляют антитела, меченые ферментом, и

хромогенный субстрат. Между всеми операциями интенсивно промывают. При

соответствии антигенов и антител, содержимое пробирки окрашивается, причем

интенсивность окрашивания пропорциональна количеству искомого

компонента.

Схема ИФА Обнаружение антител

Обнаружение антигена

ИФА с целью обнаружения вируса гепатита В в сыворотке больного

Ингредиенты:

Исследуемый материал _______________________________ содержит _______

Диагностические препараты 1._________________________содержит _______

2._________________________содержит _______

Исследуемые сыворотки Контроли

A B C D E положительный отрицательный

Результат

Ответ: _____________________________________________________________

____________________________________________________________________

Вывод: ____________________________________________________________

__________________________________________________________________

____________________________________________________________________

Page 56: J : ; H Q :Я L ? L J : >Ь I H B F F M G H E H = B B Qасть 1 … · 2019. 2. 11. · Виды иммунитета: Схемы механизмов активации комплемента

ИФА с целью серодиагностики сифилиса

Ингредиенты:

Исследуемый материал _______________________________ содержит _______

Диагностические препараты 1._________________________содержит _______

2._________________________содержит _______

Исследуемые сыворотки Контроли

A B C D E положительный отрицательный

Результат

Ответ: _____________________________________________________________

____________________________________________________________________

Вывод: ____________________________________________________________

__________________________________________________________________

____________________________________________________________________

Иммуноблоттинг (выявление антител в сыворотках больных к

определенным антигенам возбудителя).

Принцип метода: 1. Разделенный с помощью электрофореза комплекс

антигенов наносят на полоску из нитроцеллюлозы. При этом разные антигены

фиксируются в различных участках полоски. 2. Дальнейшие исследования

проводят по схеме обычного ИФА

Иммуноблоттинг для диагностики ВИЧ-инфекции

Антигены ВИЧ

Ответ:

______________________________________________

______________________________________________

Вывод:

______________________________________________

______________________________________________

Page 57: J : ; H Q :Я L ? L J : >Ь I H B F F M G H E H = B B Qасть 1 … · 2019. 2. 11. · Виды иммунитета: Схемы механизмов активации комплемента

Радио-иммунный метод (РИМ)(Радиоиммунологический анализ, РИА) Принцип метода отличается от ИФА тем, что диагностические сыворотки метят

радиоактивной меткой, а результат учитывают при помощи счетчика

радиоактивности.

Общий вывод (сделайте вывод об экспресс-диагностике и серодиагностике, их возможностях, достоинствах, недостатках):

__________________________________________________________________

____________________________________________________________________

__________________________________________________________________

____________________________________________________________________

Задачи, решаемые с помощью серодиагностики:

1______________________________________________________________

2______________________________________________________________

3______________________________________________________________ ВАКЦИНЫ

Живые Убитые Синтетические Анатоксины

Содержат

Получены

путем

Применяются

для

Примеры

Page 58: J : ; H Q :Я L ? L J : >Ь I H B F F M G H E H = B B Qасть 1 … · 2019. 2. 11. · Виды иммунитета: Схемы механизмов активации комплемента

Аутовакцина - _______________________________________________________

____________________________________________________________________ Комбинированная вакцина - _________________________________________

____________________________________________________________________ Ассоциированная вакцина - __________________________________________

____________________________________________________________________

Сорбированная вакцина - ___________________________________________

____________________________________________________________________ СЫВОРОТОЧНЫЕ ИММУНОБИОЛОГИЧЕСКИЕ ПРЕПАРАТЫ Сыворотка - ________________________________________________________

____________________________________________________________________

Гамма-глобулин - ___________________________________________________

____________________________________________________________________

Моноклональные антитела - _________________________________________

____________________________________________________________________

Схема получения моноклональных антител:

Page 59: J : ; H Q :Я L ? L J : >Ь I H B F F M G H E H = B B Qасть 1 … · 2019. 2. 11. · Виды иммунитета: Схемы механизмов активации комплемента

Применение моноклональных антител:

__________________________________________________________________

____________________________________________________________________

__________________________________________________________________

____________________________________________________________________

Для экстренной специфической профилактики используют - ___________

__________________________________________________________________

____________________________________________________________________

Для заблаговременной специфической профилактики используют - ____

__________________________________________________________________

____________________________________________________________________

Для вакцинотерапии используют - __________________________________

__________________________________________________________________

____________________________________________________________________ ИММУНОМОДУЛЯТОРЫ Иммуномодуляторы - _______________________________________________

____________________________________________________________________ Примеры иммуномодулирующих препаратов:

__________________________________________________________________

____________________________________________________________________

__________________________________________________________________

____________________________________________________________________

__________________________________________________________________

____________________________________________________________________

Page 60: J : ; H Q :Я L ? L J : >Ь I H B F F M G H E H = B B Qасть 1 … · 2019. 2. 11. · Виды иммунитета: Схемы механизмов активации комплемента

Занятие № 9 Дата______________

ВОПРОСЫ К КОЛЛОКВИУМУ №1

1. Предмет и задачи иммунологии. История развития иммунологии.

2. Инструктивные и конструктивные теории иммунитета.

3. Оснащение и режим работы иммунологической лаборатории

4. Основные подходы к стандартизации лабораторного иммунологического

обследования

5. Объекты исследования в иммунологии (инбредные животные,

биологические материалы для исследований, особенности работы с

иммунокомпетентными клетками).

6. Иммунологические методы, применяемые в эксперементальных и

клинических исследованиях.

7. Понятие об инфекции. Условия возникновения инфекционного процесса.

Инфекционная болезнь. Стадии развития. Типы инфекционных заболеваний

и их отличительные черты.

8. Роль внешней среды в процессах инфекции и иммунитета. Роль

состояния макроорганизма в возникновении инфекции и развитии

иммунитета.

9. Патогенность и вирулентность бактерий, единицы измерения. Патогенные,

условно-патогенные и непатогенные микроорганизмы.

10. Морфологические и биохимические аспекты вирулентности. Токсины

бактерий, их природа и свойства. Анатоксины. Получение, титрование,

применение.

11. Принципы специфической профилактики и лечения инфекционных

заболеваний. Вакцины, определение, классификация, применение.

Вакцинопрофилактика и вакцинотерапия.

12. Неспецифические факторы зашиты организма. Фагоцитоз. Показатели

фагоцитоза.

13. Комплемент, его структура, функции, пути активации, роль в иммунитете.

14. Интерфероны, их характеристика. Способы получения и применение.

15. Антигены. Определение. Понятие о полноценных и неполноценных

антигенах. Требования, предъявляемые к антигенам. Понятие об антигенных

свойствах микроорганизмов. Антигенная структура бактерий.

16. Серотипирование. Получение, титрование и применение агглютинирующих

сывороток. Получение и применение монорецепторных сывороток.

17. Филогенез и онтогенез иммунной системы. Особенности

иммунологической реактивности детского возраста.

18. Понятие об иммунитете. Общебиологическое значение иммунитета. Виды

иммунитета.

19. Иммуноглобулины, структура и функция. Механизм взаимодействия

антитела и антигена.

20. Специфичность антител. Их классификация по методу специфичности.

Полные и неполные антитела.

Page 61: J : ; H Q :Я L ? L J : >Ь I H B F F M G H E H = B B Qасть 1 … · 2019. 2. 11. · Виды иммунитета: Схемы механизмов активации комплемента

21. Моноклональные антитела. Получение, применение

22. Структура и функция иммунной системы.

23. Кооперация иммунокомпетентных клеток в иммунном ответе. Иммунный

ответ, его типы. Иммунокомпетентные клетки (Т - и В - лимфоциты,

макрофаги), их кооперация в иммунном ответе.

24. Антителогенез. Первичный и вторичный иммунный ответ. Клонально-

селекционная теория Бернета.

25. Серодиагностика инфекционных заболеваний. Принципы и критерии.

26. Реакция агглютинации. Компоненты, механизм, способы постановки.

Применение.

27. Реакция преципитации. Механизм, компоненты. Способы постановки.

Применение.

28. Нагрузочные серологические реакции. Реакция непрямой гемагглютинации.

Компоненты. Применение.

29. РСК. Реакции иммунного лизиса (гемолиз, бактериолиз).

30. РИФ. Реакция иммунофлюоресценции. Механизм, компоненты,

применение.

31. ИФА. Иммуноферментный анализ, иммуноблоттинг, механизм,

компоненты, применение.

32. Реакция нейтрализации токсина антитоксином. Механизм. Способы

постановки, применение.

33. Антитоксический иммунитет, активный и пассивный. Антимикробные и

антитоксические сыворотки. Получение, титрование, применение.

34. Понятие об аллергии. Типы аллергических реакций, Аллергены.

35. Гиперчувствительность немедленного типа. Механизм реакции. Атопия.

Анафилаксия.

36. Гиперчувствительность замедленного типа. Механизм реакции. Кожные

аллергические пробы.

37. Трансплантационный иммунитет. Антигены гистосовместимости и их

значение. Методы подавления трансплантационного иммунитета.

38. Серопрофилактика, серотерапия. Осложнения, их предупреждения.

Анафилактический шок. Сывороточная болезнь.

39. Т-зависимая гиперчувствительность замедленного типа. Значение в

патогенезе и диагностике инфекционных заболеваний. Аллергические

пробы, их сущность, применение.

40. Особенности противоопухолевого иммунитета.

41. Особенности противовирусного иммунитета.

42. Вирусная гемагглютинация и её торможение. Практическое применение.

Методические подходы к серодиагностике вирусных инфекций.

43. Особенности биологического метода диагностики инфекционных

заболеваний

44. Серологические методы лабораторной диагностики инфекционных

болезней, достоинства и недостатки

45. Вакциопрофилактика и вакцинотерапия. Состав и классификация

вакцин.

Page 62: J : ; H Q :Я L ? L J : >Ь I H B F F M G H E H = B B Qасть 1 … · 2019. 2. 11. · Виды иммунитета: Схемы механизмов активации комплемента

46. Живые вакцины, получение и применение.

47. Инактивированные вакцины, получение и применение.

48. Синтетические и полусинтетические вакцины, получение и применение.

49. Ассоциированные вакцины.

50. Календарь профилактических прививок.

51. Сывороточные иммунные препараты.

52. Иммуномодуляторы.