INVESTIGACIÓN Y RECUENTO DE Staphilococcus aureus

Autores: Lidia Olmos Vera

María Espinosa Vicente

José Antonio Esteban Cánovas

Procedimiento

• 1. Para la realización de esta práctica necesitamos los siguientes materiales:

- 2 Placas petri con medio Baird-Parker- 2 Hisopos- 2 Tubos de ensayo con 2ml de agua de peptona- Gradilla- Asa en L- Mechero Bünsen

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Placa 1

Placa 2

• 2. Sacamos el hisopo de su funda, cerca del mechero para así mantener la esterilidad.

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• 3. Flameamos el tubo de ensayo

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• 4. Introducimos el hisopo en el tubo de ensayo que contiene 2ml de agua de peptona, para humedecerlo antes de la toma de muestra.

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• 5. Realizamos la toma de muestra introduciendo el hisopo en las fosas nasales del operador.

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• 6. Introducimos el hispo con la muestra, de nuevo, en el tubo de ensayo.

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• 7. Flameamos el tubo, y cerramos.

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• 8. Emulsionamos y homogenizamos en el agitador de tubos, para así liberar las posibles microorganismos adheridos al hisopo.

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• 9. Introducimos una punta de micropipeta estéril.

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• 10. Abrimos el tubo de ensayo, y flameamos.

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• 11. Tomamos 0,1ml de la disolución que contiene microorganismos distribuidos en el agua de peptona.

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• 12. Adicionamos 0,1ml tomados anteriormente en el centro del medio de cultivo.

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• 13. Tras la inoculación, desechamos la punta de micropipeta en una solución de lejía ( o salfumán) en agua. Para así poder exterminar los posibles microorganismos.

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• 14. Flameamos el asa en L.

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• 15. Realizamos la siembra en sábana de 0,1ml del inóculo, con asa en L.

Para ello realizamos una serie movimientos para distribuir de forma homogénea el inóculo.

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• 16. Cerramos las placas 1 y 2, e introducimos las mismas en estufa a 37ºC, durante 30 horas.

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• 17.Tras 30 horas de incubación a 37ºC, hemos observado en la primera placa, la aparición de 60 colonias con halo y 5 sin halo.

• Para la segunda placa no podemos cuantificar el número de colonias.

Procedimiento

• Hemos de decir que si a las 48 horas de incubación alguna de las 6 colonias de la primera placa observamos que aparece con halo, se le debe realizar la prueba de la coagulasa (plasma de conejo) para confirmar si son positivas.