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Valoración de semen de

rumiantes a través delmicroscopio óptico

Autora: Paula Díaz Álvarez. Centro: I.E.S re!orio Prieto. "ínea: Ima!en #

$iomedicina.

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Índice: P%!inas

Portada&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&..'

(ndice&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&.)

'. Introducción&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&.&.*

). +ateriales&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&..,

*. Procedimiento&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&-

,. ipótesis&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&./

0. 1esultados&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&..'2

3. Conclusión&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&..'4

-. 1e5erencias&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&.'/

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1. Introducción

+i tra$a6o tiene como o$6etivo valorar la calidad inmediata del semen con!elado en

5unción de distintos métodos de descon!elación para una r%pida evaluación a través delmicroscopio óptico 7ue se apro8ime lo m%8imo a la calidad real de la muestra9 teniendoen cuenta 7ue una descon!elación no adecuada puede deteriorar o 5alsear la calidadinicial del e#aculado # considerando 7ue en este tra$a6o vamos a ver la motilidadindividual 7ue aparece en todas las especies # nos servir% para valorar la calidad delsemen9 pero tenemos 7ue tener en cuenta 7ue e8iste otra motilidad llamada masal9 7uesolamente la tienen los animales salva6es # de los domésticos9 solo los rumiantes # estaltima !uarda una relación m%s directa con la 5ertilidad # para la inseminación arti5icial97ue constitu#e uno de los m%s anti!uos e importantes adelantos en reproducción tanto anivel ;umana como animal9 en el primer caso como respuesta a 5acilitar la concepciónen casos 7ue de otra 5orma no sería posi$le # en el se!undo9 como método $%sicamentede me6ora !enética entre otros muc;os o$6etivos.

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2. Materiales:

El o$6eto de estudio son las pajuelas de semen inmersas en un tan7ue de nitrógeno

líquido a

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Para la descon!elación de las pa6uelas vamos a utilizar tres bañosmaría9 dos paradescon!elar >uno a *-=C # otro a 32=C? # uno para atemperar >a *)=?:

Estos $a@os9 ;an de tener una temperatura determinada 7ue la controlaremos !racias atermómetros con sonda sumer!i$le:

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+ezclaremos diluente I!"# $% con el semen para determinar el movimiento de losespermatozoides:

ecesitaremos tubos de ensao9 donde pondremos el semen # el dilu#ente9 para llevar aca$o los primeros procesos:

Btilizaremos una pipeta para manipular el dilu#ente # el semen:

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os valdremos de un microscopio óptico ion Eclipse 02i con una c%mara acoplada9de manera 7ue se pueda visualizar en una pantalla el o$6eto de estudio:

inalmente9 necesitaremos material au8iliar desec;a$le como porta cubre objetos puntas de pipeta:

&. 'rocedimiento

Vamos a tra$a6ar con semen de ca$ra de la raza 5lorida. Este9 est% envasado en pa6uelasde 29)0 cc # almacenada a

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El se!undo paso es co!er una pa6uela de semen del tan7ue de nitró!eno lí7uido a

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Por ltimo9 ;a# 7ue !uardar las !ra$aciones de los espermatozoides9 # repetir el procesocontrolando las temperaturas # los tiempos necesarios.

Se valoran la motilidad en sí o K de 5ormas móviles # la calidad de ese movimiento. "acalidad del movimiento se valora en escala de 2 a 09 se admiten valores intermedios>*90H ,90?9 siendo:

• 2: Espermatozoides inmóviles.• ': +ovimiento oscilatorio o de vaivén sin desplazamiento9 ca$eceo.• ): +ovimiento circular.• *: +ovimiento circular9 eventualmente pro!resivo.• ,: +ovimiento pro!resivo.• 0: +ovimiento pro!resivo enér!ico.

(. )ipótesis

a# unas temperaturas # tiempos de descon!elación r%pida en las 7ue la motilidadad7uiere un m%8imo #9 manteniendo una temperatura constante9 compro$aremos siacortando el tiempo de descon!elación9 la motilidad es m%s $a6a por7ue losespermatozoides no ;an tenido tiempo su5icienteF para recuperar su ener!ía oalar!%ndolos9 la motilidad $a6a tam$ién por7ue el tiempo e8cesivo ;a podidoa!otarles la citada ener!ía. Como #a ;e dic;o antes9 vamos a tomar dos

temperaturas di5erentes # en cada una de ellas un tiempo de re5erencia9 am$os

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contrastados # 6u!aremos con el tiempo ;acia arri$a # ;acia a$a6o para ver si secon5irma nuestra ;ipótesis.

*. "esultados

"os resultados o$tenidos 5ueron los si!uientes:

Descon!elación a *-=CSC'2220 >sementales de la 'Lca$ra?

M+2/'2' >sementales de la )Lca$ra?

+ovilidad Calidad delmovimiento


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0 se!undos 3, *90 3- )90'0 se!undos 0' *90 ,, )*2 se!undos ,' )90 ,/ *,0 se!undos )/ ) *4 )9032 se!undos '/ )90 ,, *90

Descon!elación a 32=CSC'2220 >sementales de la 'Lca$ra?

M+2/'2' >sementales de la )Lca$ra?



' se!undo '3 )90 ,2 )

0 se!undos 02 *90 0- )90'2 se!undos *4 )90 *' *'0 se!undos ) ) *0 *

+ovilidad en descon!elación a *-= C:

0

20

40

60

80

100

120

140

JM09101

SC1005

Calidad del movimiento en descon!elación a *-= C:

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0

1

2

3

4

5

6

7

JM09101

SC10005

+ovilidad en descon!elación a 32= C:

1 segundo 5 segundos 10 segundos 15 segundos

0

10

20

30

40

50

60

SC10005

JM09101

Calidad del movimiento en descon!elación a 32=C:

1 segundo 5 segundos 10 segundos 15 segundos

0

1

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6

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JM09101

SC10005

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Estas son las 5oto!ra5ías tomadas con el microscopio # el pro!rama SCA )22):

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• SC'2220 ,0 se!undos:

• SC'2220 32 se!undos:

• M+2/'2' 0 se!undos:

• M+2/'2' '0 se!undos:

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• M+2/'2' *2 se!undos:

• M+2/'2' ,0 se!undos:

• M+2/'2' 32 se!undos:

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• SC'2220 '0 se!undos:

• M+2/'2' ' se!undo:

• M+2/'2' 0 se!undos:

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• M+2/'2' '2 se!undos:

• M+2/'2' '0 se!undos:

%. +onclusión

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Al ;acer este e8perimento9 ;emos compro$ado 7ue *-= # 0 se!undos es una $uenatemperatura # tiempo de descon!elación9 #a 7ue el movimiento de los espermatozoides9en los dos sementales9 es adecuado.

Gam$ién ;a# variaciones individuales:

• En el semental SC'22209 el movimiento de los espermatozoides descienceindirectamente proporcionalmente con el tiempo de descon!elación9 menos en ladescon!elación ' se!undo a 32=C9 7ue se!uramente 5uera demasiado pocotiempo para 7ue los espermatozoides pudieran reaccionar."a media de la calidad del movimiento9 tanto con la descon!elación a *-=C9como a 32=C9 es )9-)9 una $uena calidad9 teniendo en cuenta 7ue un calidadóptima ronda el ,.

• En el semental M+2/'2'9 el movimiento de los espermatozoides no cam$ia proporcionalmente con el tiempo de descon!elación."a media de la calidad del movimiento9 tanto con la descon!elación a *-=C9como a 32=C9 es )9339 tam$ién una $uena calidad9 aun7ue no tanto como la delsemental SC'2220.

En las 5oto!ra5ías tomadas con el microscopio # el pro!rama mencionadoanteriormente9 ;emos compro$ado9 7ue a pesar de 7ue los espermatozoides ten!an unamovilidad alta9 la calidad del movimiento no es tan $uena en todos los casos.Por e6emplo: En el semental M+2/'2' con la descon!elación a 32=C ' se!undo9 tieneuna movilidad de ,29 7ue no est% mal9 pero su calidad es de )9 #a 7ue la ma#oría de losespermatozoides9 se mueven en zi!

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• Centro re!ional de selección # reproducción CE1SN1A Valdepe@as:;ttp:OOpa!ina.6ccm.esOa!riculOcers#raO

• Asociación Espa@ola de 1eproducción Animal: ;ttp:OO.aera.or!.esOenO • Em$r#otools: ;ttp:OO.em$r#otools.comOQRreproduccin

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