Hazai természetesvízi és tógazdasági halakból származó

Aeromonas veronii törzsek összehasonlító

vizsgálata

2014. június 5.

Sellyei Boglárka, Varga Zsuzsanna, Papp Melitta, Paulus Petra,Molnár Kálmán, Székely Csaba

MTA Agrártudományi Kutatóközpont, Állatorvos-tudományi IntézetNÉBIH Élelmiszer Mikrobiológiai Laboratórium

Budapest

Halak bakteriális megbetegedése

2014. június 5.

A leggyakoribb kórképek- fekélyes bőrgyulladás- Columnaris -betegség (uszony-, farok rothadás)- gümőkór

Forrás: www.malawifish.com

Bőrgyulladás típusai

2014. június 5.

Érintett fajok: elsődlegesen pontyfélékponty, bodorka, ezüstkárász, compó

vörösszárnyú-, dévérkeszeg

Tünetek:-

pikkelyhiány

-

kipirult, gyulladásos hám-

pikkelytasak gyulladás

-

izomba terjedő, kipirult szegélyű

hámhiány

Bőrgyulladásból izolálható

baktériumok

2014. június 5.

fertőző

ágens:Aeromonas (hydrophila, veronii)Pseudomonas (fluorescens)Flexibacter columnare

Aeromonas nemzetség

előfordulás: édes-, brakk-, csap-, szennyvíz, iszap

morfológia: G (-), fakultatív anaerob egyenes pálcaegyesével, párokban v. rövid láncokban

mozgás: változó, ált. egy poláris flagellum

növekedési tartomány: 4 -

42ºC (opt. 22-

37ºC)pszichrofil és mezofil fajok

patogenitás: gerinctelenekbéka, tengeri v. édesvízi halakháziállatok, ember

Aeromonas nemzetség

2014. június 5.

A salmonicida complex

A caviae complex

A hydrophila complex

A veronii complex

Vizsgálati anyag

2014. június 5.

TolnaSomogy

Heves

Békés

Jász- Nagykun- Szolnok

Pest

A vizsgálati időszak: 2013.10 –

2014.04

Balaton, Tisza-tó

-

ponty, dévérkeszeg, bodorka, csuka tógazdaságok

-

ponty, lénai tok, szivárványos pisztráng

Mintavétel:bőrfelszíni elváltozások, fekélyek, kopoltyú, máj, lép, vese, bél

Módszerek

2014. június 5.

-

izolálás: szelektív és TSA agaron

-

morfológiai vizsgálatoktelepmorfológia, natív-, festett kenet, oxidáz reakció

-

molekuláris vizsgálatokgenus-specifikus PCR (Kong et al., 1999)

cnp gén szekvenálás (fajazonosítás) (Miñana-Galbis et al., 2009)

virulencia gének vizsgálata (Nam és Joh, 2007)

-

patogenitási teszt

(Le Coadic et al., 2011)

2014. június 5.

24 Aeromonas törzs (83% A veronii, 10% A hydrophila, A sobria, A salmonicida)egyéb potenciális kórokozók: Acinetobacter sp., Cryseobacterium sp., Streptococcus sp.,

Staphylococcus sp.,Pseudomonas sp., Flavobacterium sp.,Shewanella sp., Yersinia sp., Citrobacter

Az

A veronii törzsek gyakorisága:-

nemzetközi irodalom

Zhou et al., 2013Distribution and virulence gene comparison of Aeromonas strains

isolated from diseased fish and water environment

-

hazai megfigyelésGlatz et al., 2013Halakból és humán mintákból izolált Aeromonas sp. törzsek azonosítása klasszikus és modern módszerekkel

Az

A veronii törzsek patogenitása:

Cai et al., 2012Characterization of pathogenic Aeromonas veronii bv. veronii associated with ulcerative syndrome from Chinese longsnout catfish (Leiocassis longirostris Günther)

Kozinska et al., 2002Phenotypic characteristics and pathogenicity of Aeromonas genomospecies isolated from common carp (Cyprinus carpio L.)

Izolált törzsek

Virulencia faktorok

2014. június 5.

M

–

100bp molekula marker L

–

lipázS

–

szerin proteázG

–

glicerofoszfolipid-koleszterol transzferázA

–

aerolizin (hemolizin)N

–

nukleázLf

–

laterális fimbria

M L S G A N Lf Törzs Eredet Lip Ser GCAT Aero Nuc LafBA hydrophila harcsa + + - + + - A salmonicida pisztráng + + + + - - A sobria csuka - + - + - - A caviae hu + - - - - - A media hu + - - - - - A7 ponty + + - + - - A8 ponty - + - + - - A9 ponty - + - + - - A10 ponty - + - + - - A11 ponty - + - + - - A12 ponty - + - + - - A13 ponty - + - + - - A14 ponty - + - + - - A15 ponty - + - + - - A16 ponty - + - + - - A18 ponty - + - + - - A19 ponty + + - + - - A20 ponty - - - + - - A21 ponty - - - + - - A22 dévérkeszeg - + - + - - A23 dévérkeszeg - - - + - - A24 bodorka - + - + - - A26 bodorka - + - + - - A28 pisztráng + + + - + -

Patogenitási teszt

2014. június 5.

0123456789

10

0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12

órák

elhu

llott

egye

dek

szám

aA28A7A26A19A20

A28 A7 A26 A19 A200 h 0 0 0 0 01 h 7 5 2 0 22 h 7 5 3 0 23 h 7 5 3 1 24 h 7 5 4 2 25 h 7 5 5 4 26 h 7 5 5 6 27 h 7 5 6 6 38 h 7 5 7 7 39 h 7 5 8 8 510 h 9 5 9 9 711 h 9 6 9 9 812 h 9 6 9 9 8

A28 –

Lip, Ser, GCAT, NucA7 –

Lip, Ser, Aero

A26 –

Ser, AeroA19 –

Lip, Ser, Aero

A20 -

Aero

Összefoglalás

2014. június 5.

- a hazai fekélyes bőrgyulladást mutató

halakból izolált Aeromonas törzsek

többsége A. veronii(ezen faj térhódítását kiterjedt hőmérsékleti tűréstartománya és széles gazdaspektruma teszi jelentőssé)

24C

42C

-A veronii törzsekben kimutatható

virulencia faktorok megoszlása eltérő

ennek megfelelően, az egyes törzsek patogenitása különböző

Köszönöm a figyelmet!

2014. június 5.

2014. június 5.

2014. június 5.

• Rahman M., Colque-Navarro P., Kühn I., Huys G., Swings J., Möllby R. Identification and characterization of pathogenic Aeromonas veronii bv. sobria associated with epizootic ulcerative syndrome in fish in Bangladesh. Appl. Environ. Microbiol. 2002;68:650–655. doi: 10.1128/AEM.68.2.650- 655.2002. [PMC free article] [PubMed] [Cross Ref]

• 7. Cai S.-H., Wu Z.-H., Jian J.-C., Lu Y.-S., Tang J.F. Characterization of pathogenic Aeromonas veronii bv. veronii associated with ulcerative syndrome from Chinese longsnout catfish (Leiocassis longirostris Günther) Braz. J. Microbiol. 2012;43:382–388. doi: 10.1590/S1517-83822012000100046. [PMC free article] [PubMed] [Cross Ref]