GUIA DE PRACTICAS DE BIOLOGIA USS 2010 - II.pdf

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    UNIVERSIDAD SEOR DE SIPANFACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD

    ESCUELA ACADMICO PROFESIONAL DE ENFERMERA

    MANUAL DE PRCTICAS DEBIOLOGA GENERAL

    AUTORES:Dr. Juan Luis RODRGUEZ VEGA

    Lic. Wilmer Leoncio CALDERN MUNDACA

    DIRECTORA DE ESCUELA: Mg.Sc. Marina CAJN VILLANUEVA

    DECANO: Dr. Carlos URIARTE NEZ

    USS - 2010

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    INSTRUCCIONES PARA EL USO DE LA GUA DE PRCTICAS

    POR LOS ESTUDIANTES USS C.C.S.S.

    Las prcticas de laboratorio de Biologa estn concebidas como un adecuado complemento a las clases

    tericas y se recomienda al estudiante de la USS que emplee este material fundamentalmente leer

    previamente la parte de INTRODUCCIN y los OBJETIVOS indicados en cada una de ellas.

    Igualmente debe proveer el material biolgico que se indica para cada prctica y otro que el docente

    considere conveniente. Se debe ceir estrictamente a lo programado en PROCEDIMIENTOS

    realizando cada una de las experiencias o aquellas que el docente seale previamente. El estudiante

    en el numeral RESULTADOS registrar en las hojas en blanco los resultados de cada una de las

    experiencias realizadas y expresados en esquemas, grficos, tablas, cuadros. etc.

    Luego elaborar laDISCUSIN de los resultados obtenidos en la prctica con las aseveraciones que

    sobre el particular obtenga de la revisin de la bibliografa especializada. En funcin de los objetivos

    fijados y de los resultados obtenidos el estudiante elaborar lasCONCLUSIONES preferentemente

    en forma de generalizaciones aplicando el mtodo inductivo. En el numeral REFERENCIAS

    BIBLIOGRFICAS se indicarn las fuentes de informacin que sobre el particular se han

    consultado. El nmero y tipo de trabajos citados en la lista de referencias bibliogrficas, en ocasiones,

    es una indicacin de la calidad del trabajo; se acostumbra colocarlos en orden alfabtico de apellidos y

    en forma de lista con las principales notas tipogrficas siguiendo las pautas que se indicaron en laasignatura referente a Metodologa del Trabajo Universitario o su equivalente; de preferencia bajo

    las normas de la APA 2010. .

    Autores de la Gua de

    Prcticas de Biologa USS

    - FCCSS

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    INSTRUCCIONES PARA LA REALIZACIN DE

    PRCTICAS EN EL LABORATORIO DE BIOLOGA - USS

    RECOMENDACIONES GENERALES:

    1. En lo posible el estudiante deber utilizar un guardapolvo adecuado, identificado con el logo de la

    USS, institucional.

    2. Durante las sesiones prcticas estar prohibido provocar ruidos molestos, movimientos

    innecesarios, comer, fumar y conversar.

    3. Los materiales y equipos de laboratorio debern ser manipulados con el cuidado requerido.

    Cualquier dao es de responsabilidad exclusiva de quienes lo utilicen, y ser informado a la instancia

    respectiva.

    4 Al concluir la sesin, el estudiante deber dejar limpios los materiales, equipos y la superficie de las

    mesas de trabajo.

    5. Los residuos slidos deben arrojarse en los receptores de basura expresamente dispuestos.

    RECOMENDACIONES PARA LA REALIZACIN DE EXPERIMENTOS:

    1. Antes de ingresar al laboratorio, lea siempre las instrucciones directrices del experimento que va arealizar.

    2. Espere las instrucciones del docente antes de empezar a manipular los materiales y equipos de

    laboratorio.

    3. Ejecute solamente las experiencias sealadas o aprobadas por el docente. Estn prohibidas las

    experiencias no autorizadas.

    4. Ordene y rotule los materiales antes de empezar cada experimento.

    5. Siga las instrucciones cuidadosamente y en forma precisa. En caso de duda consulte con el docente

    y haga todas las preguntas que desee por simple que parezcan.

    6. Registre todos los resultados de sus experiencias en un cuaderno especial para ello. No se fie de su

    memoria, anote siempre el nombre, da, hora, lugar y titulo de cada experimento.

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    REGLAS DE BIOSEGURIDAD QUE DEBEN CONSIDERARSE EN EL

    LABORATORIO DE BIOLOGA - USS

    1 Cuando caliente una Sustancia lquida en un tubo de ensayo, no dirija el extremo abierto hacia

    usted o hacia algn compaero. La sustancia que calienta. Puede ser lanzada violentamente

    provocando un accidente.

    2. Utilice siempre pinzas para coger los tubos de ensayo cuando realice calentamiento en ellos.

    Recuerde que el vidrio caliente tiene el mismo aspecto que el vidrio fro, lo cual puede confundir y

    provocar lamentables quemaduras.

    3. Cuando trabaje con material de vidrio proceda con cuidado para evitar quebraduras y cortes.

    4. No tocar, oler o gustar directamente cualquier producto qumico. Evite ponerlos en contacto con el

    cuerpo o ropa. Considere todas las sustancias qumicas peligrosas a menos que est comprobado lo

    contrario.

    5. Si se vierte sobre usted un cido u otros lquidos corrosivos, venenosos o txicos (cloruro de

    mercurio, cido actico, cianuros. fluoruros, hidrxido de potasio. etc.) lvese inmediatamente la parte

    afectada con abundante agua.

    6. Evite derramar substancias sobre la mesa o aparatos de laboratorio, pero si ello ocurre. Siempre

    limpie cuidadosamente el material derramado con una tela mojada.

    7. Compruebe cuidadosamente los rtulos de los frascos de reactivos antes de usar las substancias quecontiene. Lea los rtulos dos veces para asegurarse de que tiene el frasco indicado. No use el

    contenido de un frasco de reactivos que no tenga etiqueta.

    8. No devuelva nunca a los frascos de origen los sobrantes de compuestos utilizados. Evite introducir

    objetos extraos en ellos.

    9. Cuando trabaje con substancias inflamables (ter, cloroformo, alcohol etlico, bencina, etc.) evite

    prender fsforos o mecheros. Si necesita calentarlos utilice el bao mara o una cocina elctrica.

    10. Cuando prenda el mechero a gas, evite abrir totalmente la llave y procure retirar la cara, la

    presin del gas produce una llama bastante larga que podra causarle quemaduras.

    11. Al empezar y terminar un experimento, el estudiante debe lavarse las manos, usando agua y jabn

    o detergente y luego secarse con una toalla limpia.

    12. Informe al docente de cualquier accidente que tenga, por pequeo que sea.

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    PRCTICA No01

    RECONOCIMIENTO DE MATERIALES DE LABORATORIO

    1.0. INTRODUCCIN.

    El laboratorio de BIOLOGA de la USS, recientemente construido (ciclo acadmico 2010

    I) es un lugar de trabajo donde se realiza enseanza e investigacin (a nivel didctico y

    cientfico) del Proceso Docente Educativo en la Prctica de las diversas especialidades de las

    Ciencias de la Salud, en el se encuentran una serie de materiales de vidrio, metal, madera y

    equipos de laboratorio: esencialmente microscopio, centrifuga, estufa, etc., de los cuales se

    hace necesario conocerlos, saber manejarlos y darles mantenimiento, por su elevado costo y

    por la utilidad que representan para la realizacin de prcticas y el desarrollo de nuestros

    trabajos de investigacin en la especialidad. Es aqu donde debemos destacar un antiguo

    apotegma puesto en prctica dentro de nuestra especialidad: la prctica sin la teora es una

    utopa y la prctica sin la teora es una rutina, esta prctica de laboratorio; inaugural para

    nuestras actividades el presente ciclo lectivo 2010 II es pilar fundamental para todas las

    dems, a nivel de la educacin superior universitaria en la USS que opte nuestro egresado.

    2.0. OBJETIVOS

    1. Reconocer, describir y comprender la estructura de los materiales, instrumentos yequipos de laboratorio de uso mas frecuente en los trabajos prcticos en la

    especialidad.

    2. Identificar segn el nombre, clasificacin y sealar la funcionalidad de cada

    material y equipo del laboratorio de Biologa de la USS.

    3. Manipular de forma correcta los materiales y equipos bsicos en un laboratorio de la

    especialidad.

    4. Instalar correctamente los equipos para las operaciones fundamentales que la

    prctica nos demande.

    5. Adoptar las medidas de BIOSEGURIDAD ms convenientes para su persona y

    equipos de laboratorio en la especialidad.

    6. Seleccionar los materiales y equipos necesarios para una determinada experiencia.

    7. Valorar la importancia del material de laboratorio para la enseanza, aprendizaje y

    actividad diaria en la especialidad.

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    3.0. MATERIALES, PROCEDIMIENTO Y FUNDAMENTO.

    Como lo indica CARRASCO V. Luis (1994) en su conocida obra Qumica Experimental,

    las experiencias que se desarrollan en una prctica con oportunidades nicas para que el

    estudiante se familiarice con el instrumental, as como con los principios, reglas y axiomas

    que rigen el desarrollo de las Ciencias de la Salud; as como sus aplicaciones en la Enfermera.

    Para poder llevar a cabo experiencias o experimentos de laboratorio es necesario contar con

    material adecuado con funciones especficas, esto quiere decir que su estructura ayudara en

    su clasificacin o taxonoma:

    Para clasificar la gran variedad de materiales y equipos se deben elegir los criterios

    siguientes:

    a. Por la clase de material empleado en la fabricacin de los mismos.

    1. Material de madera. Su empleo no es muy difundido, debido a su fcil destruccin

    cuando estn frente a ciertos agentes corrosivos.

    2. Material de vidrio. El vidrio es el insumo mas importante en la fabricacin de

    materiales de laboratorio, por su resistencia a los agentes qumicos, adems su

    transparencia permite observar todos los fenmenos que curren en un ensayo, se

    subdividen en termorresistentes y termolbiles de acuerdo a su resistencia al calor;

    los vidrios PREX son los mas recomendados debido a su termorresistencia.

    3. Materiales e arcilla o porcelana. Contemplan un amplio margen de termorresistencia.4. Materiales de acero. Son materiales de alta resistencia fsica, empleados bsicamente

    en nuestros estuches de ciruga menor.

    5. Materiales de plstico. Son muy poco empleados en relacin con otros materiales,

    debido a que son atacados fcilmente por sustancias corrosivas.

    b. Por su uso especifico.

    1. Materiales para medicin.

    2. Instrumentos para medicin.

    3. Materiales para separacin.

    4. Equipos para separacin.

    5. Materiales para mezclas: combinacin y reaccin.

    6. Materiales para calentamiento.

    7. Materiales para soporte o sostn.

    8. Materiales para conservacin.

    9. Materiales para reduccin de tamao, disgregacin y molienda.

    10. Materiales para usos diversos.

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    4.0. RESULTADOS.

    Para efectos de nuestra extensin categorial solo nos referiremos a los materiales de

    laboratorio, por ser los presentes en ms cantidad para nuestro nivel y modalidad, reservando

    contenidos mas avanzados para niveles superiores de estudios.

    MATERIALES DE LABORATORIO DE BIOLOGA - USS

    a. MATERIALES PARA MEDICIN.

    Son aquellos destinados a realizar mediciones con diversas magnitudes en el Sistema

    Internacional, tenemos:

    1. Probetas graduadas. Recipientes cilndricos de vidrio grueso con pico y base para

    poder parar, algunas son de plstico, se emplean para medir volmenes de lquidos

    cuando no se necesita mucha exactitud.

    2. Buretas. Tubos largos, cilndricos y graduados cuyo extremos inferior termina en una

    llave de vidrio o en su defecto lleva un tubo corto de goma, terminado en un pico de

    vidrio, que se cierra con una pinza, sus capacidades oscilan entre 10, 25, 50 y 100

    ml., adems antes de ser usadas, las buretas deben enjuagarse en el lquido a medirse.

    3. Pipetas. Son construidas de vidrio, destinadas a medir lquidos, tenemos:

    - Pipetas simples o de PASTEUR, sin medidas graduativas, consta de un

    abultamiento cilndrico, en el extremo superior de la misma.- Pipetas volumtricas o aforadas, son aquellas que tienen una marca y

    transfieren un volumen de lquido definido y en ciertas condiciones especficas.

    Hay de 5, 10, 20, 25 y 50 ml., la medida de ha de enrasar con el nivel del ojo.

    - Pipetas con mbolo o enrase, provistas con mbolos para realizar la succin,

    empleadas para medir sustancias corrosivas.

    - Pipetas graduadas, son aquellas que tienen el vstago graduado.

    4. Picnmetros. Son pequeos matraces aforados con tapn de vidrio esmerilado queterminan en un capilar, se emplean para determinar el peso especfico de diversas

    sustancias.

    5. Cuenta gotas. Son tubos de vidrio cortos y sesgados en uno de los extremos se adapta

    una perilla con bombilla de goma, y en el otro extremo se encuentra estrangulado.

    6. Vasos de precipitacin o BEAKER. Son vasos de vidrio que poseen una escala

    graduada, que permite medir lquidos con aproximacin.

    7. Tubo pneumomtrico. Tubo de vidrio graduado, utilizado generalmente para medir

    volmenes de gases, algunos de ellos tienen el extremo abierto y el otro cerrado.

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    b. INSTRUMENTOS PARA MEDICIN.

    Tenemos:

    1. Balanzas. Son instrumentos diseados para determinar los pesos de diversas

    sustancias, el tipo e balanza mas empleada en el laboratorio es la balanza

    analtica, la que cuantifica la cantidad de masa de las sustancias manipuladas

    (analita), con una sensibilidad de 0,1 g., con una carga mxima de 200 g.

    2. Densmetros. Llamados tambin aermetros, son tubos de vidrio cerrados, de forma

    especial, con un lastre en a parte inferior para mantenerlos verticales, y una escala

    de papel pegada en su parte inferior, evala densidades de fluidos lquidos.

    3. Barmetro. Es un tubo de vidrio graduado en milmetros o centmetros, que emplea

    un lquido como el mercurio para medir presiones atmosfricas o locales.

    4. Manmetro. Aparato para medir la diferencia de presin entre dos puntos de un

    sistema, utilizando un lquido pneumomtrico como el mercurio que fluye en un tubo

    en U.

    5. Voltmetro. Es un aparato a utilizar para medir la diferencia de potencial o fuerza

    electromotriz entre dos puntos de un sistema.

    6. Ampermetro. Es un aparato que mide la intensidad de corriente elctrica que fluye a

    travs de un conductor.7. Potencimetro. Aparato que mide el pH o el pOH de una sustancia o solucin.

    8. Cronmetros. Instrumentos que miden el tiempo de duracin de algunas experiencias

    o experimentos.

    9. Termmetros. Instrumentos destinados a medir la temperatura en diversos procesos

    qumicos, fsicos o biolgicos.

    c. MATERIALES PARA SEPARACIONES.

    Tenemos:

    1. Embudos. Ac contamos con:

    - Embudos simples, llamados tambin embudos de filtracin, se disponen en

    distintos ngulos, dimetros y longitudes del vstago.

    - Embudo de BUCHNER, construido generalmente de porcelana, los hay de

    diferente tamao y son de vstago corto, poseen agujeros en la parte cntrica en

    la cual se coloca un papel filtro.

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    - Embudos de separacin, llamados peras de decantacin o peras de bromo, sirven

    esencialmente para agregar un solvente inmiscible y realizar extracciones de

    algn compuesto, llevan una llave inferior.

    2. Matraz de KITTASATO. O matraz de filtracin al vaco, de forma cnica al igual

    que los matraces de ERLENMEYER, con la diferencia de que la parte lateral posee

    un orificio de salida, se emplea para filtraciones al vacio.

    3. Matraz de CLAISSE, llamado matraz de destilacin, de igual funcin que el

    anterior, con un cuerpo esfrico.

    4. Papel de filtro. Papel de celulosa pura, sin carga y sometido a procesos especiales,

    sirve para filtrar sustancias en condiciones normales y al vaco.

    5. Tamices metlicos. Son mallas metlicas cuya superficie perforada permite efectuar

    la separacin de partculas o granos por tamaos; los tamices se clasifican de acorde

    al tamao de malla, siendo un estndar universalmente aceptado la malla 200.

    d. EQUIPOS PARA SEPARACIN.

    Tenemos:

    1. Columnas de absorcin. Generalmente son columnas cilndricas de vidrio, con

    entradas y salidas apropiadas de vidrio. Tienen una sustancia absorbente para

    determinado reactivo, el mismo que es inerte (relleno).

    2. Tubos desecadores. Tambin conocidos como tubos de calcio, estn construidos devidrio, generalmente se utilizan para absorber el vapor de agua de la humedad

    ambiental, pueden ser rectos o en U.

    3. Centrfugas. Equipos que trabajan a velocidades relativas altas para poder separar

    compuestos en funcin de su densidad.

    4. Equipos de destilacin. Hablaremos en este caso e la parte esencial de este equipo

    denominado refrigerante o condensador de LIEBIG, que consta de un tubo central

    lineal, que puede ser serpenteante o de denominacin somital (comnmente llamad

    este ltimo de bolas); revestid con una camiseta concntrica de mayor tamao,

    construida de vidrio transparente por donde se dirige el lquido condensante.

    e. MATERIALES PARA MEZCLA, COMBINACIN Y REACCIN.

    Tenemos:

    1. Tubos de ensayo. Denominados tambin de prueba", es el instrumento mas

    empleado, y presenta las siguientes variedades:

    - Tubos de ignicin, tubos pequeos que se emplean para calentar sustancias a

    altas temperaturas.

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    - Tubos de ensayo o de prueba, propiamente dichos, comunes y de diversos

    tamaos, sirven para ensayar y verificar reacciones.

    - Tubos con salida lateral, o de brazo lateral, empleados para producir, absorber

    gases o efectuar filtraciones al vaco.

    - Tubos de DHURMANN, semejantes a los de ensayo, diferencindose ya que al

    extremo cuentan con la campana de DHURMANN.

    - Tubos graduados o pneumomtricos cuya funcin ya fue resaltada.

    2. Matraz de ERLENMEYER. Conocidos como vasos o frascos cnicos, su uso mas

    comn es en titulaciones y en anlisis qumicos cuantitativos y cualitativos.

    3. Balones. Recipientes construidos de vidrio, de cuerpo cilndrico, son de diversos

    tipos:

    - Baln de fondo plano, comnmente conocido como matraz de PASTEUR, los

    hay diferidos en cuello corto, largo o de Florencia y serpenteante o cuello de

    cisne llamados redomas de PASTEUR.

    - Baln de DUMAZ, de cuello largo cuya parte terminal empieza a estrecharse,

    de funcin semejante a las redomas PASTEUR.

    - Baln de KJENDHAL, de cuello largo lineal, estrechndose en la parte

    terminal.

    - Baln de fondo redondo, de cuello largo, son clsicos para calentar sustancias.

    - Balones de destilacin, algunos con cuello lateral y otros como lo de CLAISSE

    con dos cuellos laterales extra ara ciertas destilaciones.

    4. Crisoles. Recipientes de forma cnica invertida, con tapa, de diferentes materiales

    tales como porcelana o platino, se emplea para calentamientos a altas temperaturas.

    5. Capsulas. Son casquetes esfricos, de porcelana o de vidrio, pueden ir a fuego directo

    y sirven para concentrar y evaporar a sequedad.

    6. Fiola o matraz aforado. Recipiente de vidrio de cuello muy largo y angosto, que

    tiene una marca que seala un volumen exacto a determinada temperatura.

    7. Luna de reloj. Discos de vidrio de diferente dimensin diametral, llanos o cncavos

    usados para tapar los vasos de precipitacin o contener sustancias.

    8. Cristalizadores. Son recipientes de vidrio de poca altura y de base ancha, con pico o

    sin el, algunos con tapa, sirven para obtener cristales por evaporacin de sustancias

    concentradas.

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    9. Retortas. Son recipientes de vidrio en forma de pipa cerrada, con o sin abertura en la

    parte superior, si leva abertura forzosamente lleva tapa, sirven para obtener

    productos voltiles corrosivos.

    10. Cuchara de deflagmacin. Recipientes en forma de cucharas de mango largo, se

    emplean para quemar slidos en el seno de los gases.

    f. MATERIALES PARA CALENTAMIENTO.

    Tenemos:

    1. Mecheros diversos. Aparatos destinados a quemar combustible y producir calor, los

    hay de varias formas conocidas, desde el simple mechero de alcohol, hasta el mechero

    de propano segn modelos: BUNSEN, TIRRIF, MAKER, FISHER, AMAL.

    2. Hornos elctricos. Se utilizan para las operaciones que demandan temperaturas de

    fundicin.

    3. Mufla elctrica. Es una cmara cerrada construida de material refractario, produce

    calefaccin.

    4. Planchas elctricas. Se utilizan para el calentamiento y evaporacin de soluciones.

    5. Estufas elctricas. Se utiliza para secar precipitados o sustancias solidas a

    temperaturas relativamente bajas.

    g. MATERIALES PARA SOPORTE O SOSTN.

    Son artefactos o instrumentos cuyo fin es de servir de soporte o de apoyo para la mejorseguridad de instalaciones o equipos, tenemos:

    1. Soporte universal. Consistente en una varilla metlica de longitud variable

    enroscada en una base de hierro, que puede ser triangular, y en algunos casos la base

    es de porcelana, es utilizado para realizar diversas instalaciones.

    2. Pinzas. Tenemos:

    - Pinza para crisol: de material metlico, tiene la forma de una tijera, sirve para

    sujetar al crisol para una operacin de calentamiento.

    - Pinza para vasos de precipitacin: con forma de tijera, similar en uncin a la

    anterior pinza.

    - Pinza para tubos de prueba: la ms utilizada es la pinza de STODDAR, de

    similar funcin a las anteriores.

    - Pinzas para pesas: son instrumentos de madera con tenacillas de estructura

    metlica, sirve para coger las pesas pequeas empleadas en operaciones de

    medicin.

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    - Pinza de MOHR: denominada tambin pinza de presin, de estructura metlica

    sirve para controlar el flujo de un fluido, a travs de un tubo de goma o tripa

    ltex.

    - Pinza de HOFFMAN: llamada tambin pinza de tornillo, de naturaleza

    metlica, se utiliza de manera similar a la anterior, con la diferencia de su

    mayor precisin en el control del flujo.

    - Pinzas para buretas: son mordazas de jebe que se sujetan al soporte universal

    3. Trpodes. Construidos de metal, constituidos de un anillo circular apoyado en tres

    patas equidistantes, se utiliza como soporte ara el calentamiento.

    4. Gradillas para tubo de prueba. De metal o de madera, es una especie de estantera

    porttil y sencilla, su funcin es tcita.

    5. Nuez. Denominada tambin tenaza, es de metal, sirve para realizar diferentes

    conexiones de instrumentos, pueden ser fijas o giratorias (simples y universales

    respectivamente).

    6. Rejillas. Son mallas metlicas hechas de fierro estaado, pueden ser metlicas y con

    asbesto, es un material que permite la difusin del calor.

    7. Triangulo de porcelana. Llamado tambin triangulo de arcilla, constituido por dos

    partes, metal y porcelana, sostiene los crisoles en el trpode durante el calentamiento

    o calcinacin.8. Anillos de extensin. Llamados tambin soporte de anillo o aros de soporte, sostiene

    matraces redondos, embudos, etc.

    h. MATERIALES PARA CONSERVACIN.

    Tenemos:

    1. Frascos. Son recipientes de vidrio o plstico, algunos transparentes y otros obscuros

    acaramelados, con tapn, deben de estar rotulados puesto que contienen reactivos.

    2. Campana de vidrio. Sirven para aislar sustancias del medio ambiente (en qumicainorgnica), y cumplen otras aplicaciones, es verstil.

    3. Picetas. Recipientes de vidrio o de plstico, se llenan de agua destilada, sirviendo

    para lavar precipitados, si poseen un sistema de insuflacin de aire se denominan

    frascos de HERN.

    4. Frascos goteros. Denominados tambin cuenta gotas, son de vidrio o de plstico, su

    funcin es tcita.

    i. MATERIALES PARA REDUCCIN DE TAMAO, DISGREGACIN Y

    MOLIENDA.

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    Tenemos:

    1. Morteros. Recipientes semiesfricos de base plana, constituidos generalmente de un

    material duro y resistente al desgaste, consta de dos partes: el brazo, piln, mano o

    pistillo y el tazn, puede ser de acero, porcelana, vidrio, gata; su funcin es tcita.

    j. MATERIALES PARA USO DIVERSO.

    Tenemos:

    1. Varillas de vidrio. Denominadas agitadores o baguetas sirven para agitar y

    trasvasar lquidos.

    2. Tubos. Pueden ser de vidrio o de goma, denominados codos si sirven para articular

    otros dos tubos, cuando son completamente de goma se les denomina mangueras o

    tripa ltex, son de completa versatilidad.

    3. Esptulas. Son instrumentos de metal, alargados de forma plana y bordes afilados

    provistos de un mango de madera, sirven para coger, trasladar o transportar

    muestras solidas, para medicin con una balanza analtica.

    4. Pinzas. De diversa constitucin.

    5. Tubos de desprendimiento. Construidos de vidrio con ciertos dobleces, permiten el

    transporte de gases a recipientes.

    6. Tubos de THIELE. Tubos en forma de una V fabricados de vidrio especial, usados

    para determinar el punto de fusin de una sustancia.7. Llaves de vidrio. Dispositivos de vidrio que sirven para controlar el flujo de algn

    fluido.

    8. Tubos de seguridad. O embudos de seguridad, sirven para agregar sustancias una

    solucin dentro de un equipo.

    9. Frascos de WOOLF. Empleados para reacciones de liberacin de sustancias

    gaseosas.

    10. Frascos de PASCAL. Usados para probar los principios de PASCAL y os clculos

    hemodinmicos de MAREY en biofsica.

    11. Placas de PETRI. Son cajas circulares de dimetro y altura variables, estn

    compuestas por dos tapas, una ms grande que la otra, se emplean como recipientes

    de medios de cultivo slido o lquido y para otros fines biolgicos.

    12. Lmina porta objetos. Son lminas de vidrio rectangular de 75 por 25 mm., de

    superficie y 1 mm., de espesor; se emplean en preparaciones microscpicas.

    13. Laminilla cubre objetos. Son lminas de vidrio muy delgadas de forma cuadrada o

    rectangular, se utilizan para cubrir las preparaciones microscpicas, de 16 a 40 mm.,

    de largo por 22 mm., de ancho y de 0,17 a 0,22 mm., de espesor.

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    14. Material de diseccin o estuche de ciruga menor. Esta compuesto por tijeras de

    puntas rectas y agudas MAYO, tijeras de puntas redondeadas, pinzas de punta

    recta y curva, con o sin dientes de ratn, canaleta, estiletes, bisturs, comps de

    dos puntas, etc. Sirve para facilitar la diseccin de vegetales, animales o piezas y

    restos humanos para su examen macroscpico.

    5.0.LIMPIEZA DEL MATERIAL DE LABORATORIO.

    La realizacin de experimentos en el laboratorio de Biologa - USS, exigen del material de

    cristalera una esmerada limpieza, ya este el material nuevo o utilizado, evitando as que los

    resultados de nuestras experiencias se vean afectados por impurezas contenidos en ellos. La

    limpieza se debe efectuar de la siguiente manera:

    1. PARA CRISTALES DE VIDRIO NUEVO.

    a. Lavar en agua con jabn o detergente.

    b. Enjuagar en agua corriente.

    c. Volver a enjuagar con agua o alcohol acidulado.

    d. Dejar escurrir y enjuagar con agua destilada.

    e. Dejar escurrir y secar con una tela limpia.

    Para el paso c se recomienda tambin dejar sumergido el material en una mezcla

    sulfocrmica durante 24 horas.2. PARA RECIPIENTES QUE GUARDARON REACTIVOS Y COLORANTES.

    a. Sumergirlos en agua con jabn o detergente, durante 1 hora.

    b. Lavar en agua con jabn o detergente, utilizando una escobilla para quitar las

    partculas adheridas a las paredes.

    c. Lavar con agua corriente.

    d. Sumergirlos por 24 horas en una mezcla sulfocrmica.

    e. Dejar escurrir y lavarlos con agua destilada.

    f. Dejar escurrir y secar con una tela limpia.

    3. PARA PORTA Y CUBRE OBJETOS.

    a. Sumergir los porta y cubreobjetos en la mezcla sulfocrmica durante 24 horas.

    b. Lavar en agua con detergente y dejarlos en agua corriente por 24 horas.

    c. Colocarlos en agua destilada por 24 horas.

    d. Colocarlos n un recipiente cerrado, con alcohol al 70% del cual sacaran hasta ser

    utilizados.

    Si los porta y cubreobjetos despus e utilizados presentan restos de colorantes y a la vez

    se encuentran unidos por blsamo de Canad, se sumergen en la mezcla de LEMNING

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    durante tres das. Despus se lavan con agua corriente y se pasan a una solucin de

    NaOH al 2% durante 24 horas para lavarlos despus con agua corriente y clocarlos en

    alcohol al 70% del cual se sacaran hasta que se utilicen.

    4. PARA PIPETAS Y GOTEROS.

    Se sigue el mismo procedimiento que para el material de vidrio nuevo. Sin embargo

    cuando se encuentran obstruidas por restos de lquidos contaminados, ejemplo: aguas

    estancadas, se recomienda quitar a la pipeta el tapn de algodn con un alambre fino y

    limpiar su interior con pinceles especiales y hacindole pasar agua corriente a chorro

    fuerte, luego se lavan con agua destilada y se dejan secar escurriendo. El secado se puede

    acelerar con estufa de desecacin. Cuando los goteros, pipetas u otros materiales se han

    utilizado con sustancias grasas, es conveniente despus de lavarlos enjuagarlos con ter

    sulfrico con alcohol al 70%.

    5. PREPARACIN DE SOLUCIONES PARA LIMPIEZA Y DESINFECCIN

    DEL MATERIAL DE LABORATORIO.

    ALCOHOL ACIDULADO.

    Alcohol 96% 3 partes

    Ac. Clorhdrico concentrado 1 parte.

    AGUA ACIDULADA.

    Agua destilada 3 partesAc. Clorhdrico o Ac actico concentrado 1 parte.

    SOLUCIN SULFOCRMICA.

    Dicromato de potasio 2 g.

    Ac. Sulfrico concentrado 20 ml.

    Agua destilada 250 ml.

    SOLUCIN DESINFECTANTE DE FENOL.

    Acido fnico 5 g.

    Agua destilada 95 ml.

    SOLUCIN DE LEMNING

    Agua destilada 250 ml.

    Bicarbonato de potasio 25 g.

    Ac. Sulfrico concentrado 25 ml.

    El bicarbonato de potasio se disuelve en agua destilada caliente. Se deja enfriar la

    solucin y se agrega gota a gota el acido sulfrico, agitando con una bagueta.

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    SOLUCIN ALCOHOL XILOL.

    Agua destilada 1 parte.

    Alcohol al 96% 1 parte.

    Xilol 1 parte.

    Se utiliza para el lavado de porta y cubreobjetos que tienen colorantes, grasa y blsamo

    de Canad. Los porta y cubre se sumergen en esta solucin durante 24 horas, despus se

    lavan con agua destilada y finalmente se mantendrn en un frasco con alcohol de 70%

    hasta que se utilicen.

    6.0.PRESENTACIN DE RESULTADOS.

    El alumno presentar sus resultados en un folder o espiralado acondicionado para la

    consecucin progresiva de sus prcticas.

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    PRCTICA No02

    LA METODOLOGA CIENTFICA

    1.0. INTRODUCCIN.

    Como se explico fundamentadamente en nuestra teora, la Ciencia es una categora

    dicotmica en cuanto es un Proceso conocido como Investigacin Cientfica y es tambin a la

    vez un Producto conocido como Conocimiento Cientfico, por tanto su concepcin actual

    supera a la clsica definicin de conjunto de conocimientos ordenados y sistematizados que

    estudian un determinado sector de la realidad objetiva, la cual solo tocaba una arista de la

    CIENCIA categorial. Nuestra preocupacin es ahora definir como este proceso genera un

    producto, y esto se debe a los mtodos de la ciencia, es decir un conjunto de pasos que adopta

    el proceso para obtener su producto en manos y actitud de los cientficos (se puede afirmar

    que un paradigma o forma de pensar del investigador influye en su modo de actuar), pero he

    aqu una diferencia sustancial las ciencias se clasifican, esto se denomina sistemtica

    epistemolgica; es as que n el marco general encontramos ciencias sociales y ciencias de la

    naturaleza, de las cuales nos ocuparemos el presente ao lectivo. Es cierto entonces que cada

    ciencia tiene un mtodo particular de generar un producto que es el conocimiento cientfico de

    esa especialidad o disciplina. Las ciencias naturales estn influenciadas de gran modo por

    una metodologa cuantitativa y un paradigma que llamamos positivista, ac trabajaremosbajo esa concepcin, por ser el nivel que nos corresponde reservndose el esquema Dialctico

    para la educacin superior.

    2.0. OBJETIVOS.

    1. Manejar criterios elementales para conducir una actividad experiencial de corte

    cientfico.

    2. Desarrollar habilidades para la observacin cualitativa, formulacin e hiptesis y la

    experimentacin.

    3. Valorar la importancia de la ruta investigativa en el desarrollo del proceso y productos

    cientficos.

    3.0. MATERIALES Y PROCEDIMIENTOS EXPERIENCIALES.

    A. OBSERVACIONES CUALITATIVAS.

    Las observaciones que se realizan en el laboratorio pueden ser de dos clases: cualitativas

    y cuantitativas, segn que la atencin vaya dirigida a las cualidades o caractersticas

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    que definen a un objeto o proceso, o si se toman en cuenta cantidades, realizando

    mediciones precisas y cuidadosas utilizando instrumentos especiales.

    Las observaciones cualitativas se realizan bsicamente a travs de los sentidos

    (percepciones sensoriales), la utilidad de estas observaciones consiste en que siendo las

    primeras que se hacen, estimulan el pensamiento y preparan los caminos para la

    investigacin. En esta parte de la prctica el alumno utilizara indicadores para hacer

    observaciones cualitativas y luego, tratara de interpretar los fenmenos que ocurren para

    elaborar una hiptesis en base a ellos.

    MATERIALES.

    - 7 tubos de ensayo de 12 x 100 mm., con tapn de jebe.

    - 1 gradilla con agujeros chicos.

    - 7 soportes adaptables a interior de cada tubo de ensayo.

    - Solucin de azul de bromotimol.

    - Solucin de agua mas levadura sin hervir y hervida.

    - 10 semillas secas y 10 remojadas.

    - 7 etiquetas engomadas.

    - 3 goteros.

    - Un insecto vivo y uno muerto de la misma especie, de preferencia las cucarachas

    pequeas que viven en las cocinas o dos moscas grandes (el insecto debe haber

    muerto cuando menos 48 horas antes de hacer la prctica)

    PROCEDIMIENTO.

    - Enumere los tubos de ensayo del 1 al 7.

    - En cada uno ponga 5 gotas de azul de bromotimol.

    - Con cuidado introduzca un soporte en cada uno de ellos.

    - Complete la preparacin de cada tubo como se le indica en el cuadro 01.

    - Tape todos los tubos cuando haya terminado de prepararlos.

    - Anote la hora de inicio del experimento, tome nota del tiempo requerid para que

    se produzca algn cambio.

    - Complete las dos columnas que faltan llenar en el cuadro 01.

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    CUADRO N

    0

    01: Registro de datos cualitativos.

    Tubo N

    0

    Material que se debe colocar en los tubos que

    contienen azul de bromotimol

    Cambio de color de

    la solucin

    Tiempo en

    minutos

    1 Nada.

    2 Papel toalla humedecido en la solucin de

    azcar mas levadura sin hervir.

    3 Papel toalla humedecido en la solucin de

    azcar mas levadura hervida.

    4 10 semillas secas.

    5 10 semillas remojadas.

    6 1 insecto vivo.

    7 1 insecto muerto.

    Sacuda el papel toalla antes de introducirlo al tubo, para eliminar el exceso de

    solucin.

    DISCUSIN.

    1. Qu es el azul de bromotimol? Cules son sus propiedades?

    2. Con que objeto se taponan los tubos una vez preparados?

    3. Cul s l objeto del tubo N001?

    4. Describa los cambios efectuados n la solucin de azul de bromotimol contenido en cada uno de los tubos.

    5. Relacione la intensidad del color con el tiempo y contenido el tubo.

    B. FORMULACIN DE UNA HIPTESIS.

    Alberto EINSTEIN dijo: la formulacin de un problema es a menudo mas esencial que

    su solucin, ya que esta puede ser simplemente materia de una agudeza matemtica o

    experimental. Plantear preguntas y posibilidades nuevas, enfocar viejos problemas desde

    un ngulo nuevo, requiere imaginacin creadora y marca u avance real en la ciencia.Nada ms cierto ahora en este nuevo siglo que afrontamos en nuestro ISTPRG, es cierto

    y lo decimos con la experiencia suficiente de ser cientficos, que la parte que requiere mas

    creatividad en el trabajo de un cientfico es cuando intenta solucionar un problema. Este

    intento de solucin llamada hiptesis debe explicar los hechos conocidos y predecir otros.

    EXPLICACIN y PREDICCIN son las dos principales funciones de la HIPTESIS.

    PROCEDIMIENTO.

    Considere los resultados de todas sus observaciones y elabore una hiptesis en base a

    ellas. Escrbala usando la formula:

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    Si..entonces

    .

    En su debido lugar. Este seguro que la hiptesis cumpla sus dos funciones.

    C. EXPERIMENTACIN.

    Una vez planteada una hiptesis, el siguiente paso consiste en elaborar un diseo

    experimental para comprobarla o refutarla. Pero esta parte de la metodologa cientfica

    requiere de experiencia previa.

    En el siguiente caso se han diseado tres experimentos simples con los cuales se tratara

    de probar una hiptesis, posiblemente similar a la que se ha elaborado en base a las

    observaciones cualitativas de la parte A.

    El ser viviente con que realizaremos estos experimentos es el hombre; por tanto usted

    mismo ser el sujeto de experimentacin, adems como todas las pruebas sern realizadas

    por 12 grupos diferentes, los resultados que se obtengan tendrn validez cientfica.

    MATERIALES.

    - 8 tubos de ensayo de 15 x 160 mm.

    - 1 gradilla.

    - 2 pipetas de 5 ml.

    -Sorbetes.

    - Solucin de azul de bromotimol (AB), diluida en HCl.

    - Hidrxido de calcio.

    - Agua carbonatada. (H2O.CO2).

    - Agua destilada.

    - 8 etiquetas engomadas.

    - 3 goteros de medicina.

    - 1 pedazo pequeo de mrmol o calcita (por grupo).

    PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL.

    EXPERIMENTO N

    0

    01.

    1. Numere tres tubos del 1 al 3. Vierta 10 gotas de solucin de azul de bromotimol

    (AB) en cada uno de ellos.

    2. Aada 5 gotas de solucin de HCl diluidos en el tubo N01, observe el resultado

    e interprete lo que ocurre.

    3. Aada 5 gotas de agua carbonatada al tubo N0 2, observe el resultado einterprete.

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    4. Sople con un sorbete dentro del tubo N0 3 durante 20 segundos, observe el

    resultado e interprete.

    DISCUSIN N

    0

    01.

    a. En base a este experimento Puede Ud. afirmar que el hombre exhala CO2

    durante la expiracin?

    b. Qu es lo que puede afirmar con toda seguridad?

    c. Qu funcin desempean los tubos N01 y 2 respecto del 3 en este experimento?

    EXPERIMENTO N

    0

    02.

    1. Numere otros tres tubos con los nmeros 4 a 6 y ponga dentro de cada uno de

    ellos 4 ml de agua de cal (hidrxido de calcio).

    2. Aada 10 gotas de HCl diluido en el tubo N04, observe el resultado e interprete.

    3. Aada 10 gotas de agua carbonatada al tubo N0 5, observe los resultados e

    interprete.

    4. Sople con un sorbete dentro del contenido del tubo N0 6 durante 20 segundos,

    observe el resultado e interprete.

    DISCUSIN N

    0

    02

    a. Con qu objeto se realiza el experimento del tubo N04? considera que podra

    eliminarse este paso? Explique su respuesta.

    b. Explique el rol del tubo N0

    5.c. Cul puede ser una conclusin razonable del segundo experimento?

    d. Los tubos 4 y 5 en relacin con el N06 Tienen la misma o diferente funcin los

    N01 y 2, respecto de 3, en el experimento N001?

    e. Los resultados de los experimentos realizados Confirman o refutan su

    hiptesis?

    f. Cmo modificara Ud. este experimento para que la conclusin sea definitiva?

    EXPERIMENTO N

    0

    03.

    1. Enumere los ltimos tubos de ensayo con los nmeros 7 y 8.

    2. En el tubo N07 vierta 5 ml. de agua de cal y sople con un sorbete durante 3

    minutos. Observe lo que ocurre, compare con el contenido del tubo N06.

    3. Esta nueva observacin comparacin modifica la interpretacin que realiz

    Ud. en ese momento?

    4. Vierta unas 5 gotas de la solucin de HCl dentro del precipitado que se formo en

    el tubo N07. Describa e interprete lo que curre.

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    5. Coloque un trozo muy pequeo de calcita o mrmol dentro del tubo N08. Aada

    unos 5 ml de agua destilada. Vierta unas 5 gotas de solucin de HCl dentro de

    este tubo. Observe lo que ocurre. Compare con el resultado del paso anterior.

    DISCUSIN N

    0

    03.

    a. Cmo afectan los resultados de los experimentos nmeros 02 y 03, a su

    respuesta a la pregunta 1 en el experimento N001?

    b. Qu gas es el que se desprende de los tubos 7 y 8? en que basa Ud. su

    afirmacin?

    c. Qu origen tuvo la sustancia que desprendi este gas en el tubo 7? Cul es el

    origen y composicin de la sustancia que se utilizo en el tubo N08?

    d. Escriba las ecuaciones qumicas de las reacciones que ocurren en este

    experimento.

    e. Cul de estos tubos, en este experimento es el testigo y cual el tubo

    problema? explique su eleccin.

    f. Con los resultados de esta Prctica de Laboratorio podramos afirmar

    concluyentemente que uno de los productos finales de la respiracin humana es

    el CO2?

    g. Cul seria la conclusin general sobre la respiracin, extendindola a otrosorganismos vivientes?

    4.0. PRESENTACIN DE RESULTADOS.

    El alumno presentara sus resultados en un folder o espiralado acondicionado para la

    consecucin progresiva de sus prcticas, este ao lectivo. Para esta prctica es necesario

    la presentacin de dibujos sobre los materiales observados y un mnimo de fundamento

    referente a la funcionalidad de cada material.

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    CUADRO REGISTRO DE RESULTADOS DE LAS ACCIONES QUE SE INDICAN

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    PRCTICA No03

    FORMACIN DE IMGENES EN EL MICROSCOPIO PTICO Y

    ESTEREOMICROSCOPIO

    1.0 INTRODUCCIN

    El microscopio compuesto es un instrumento valioso en el laboratorio de Biologa: con el que se

    obtienen imgenes dimensionales del objeto observado al ser atravesado por la luz mirando a travs

    de los oculares: de un lado el microscopio provee aumento y permite ver detalles de objetos tan

    pequeos que no son visibles a simple vista (menores de 0.1 mm)

    El microscopio consta de las partes siguientes:

    A. Sistema Mecnico

    -Pie o base

    -Brazo o columna

    -Tubo ptico

    -Revlver

    -Platina

    -Tomillos macro y micromtrico

    B. Sistema ptico; formado por un conjunto de lentes convergentes que incluye a oculares y

    objetivos.C. Sistema de Iluminacin, comprende:

    -Espejo o lmpara de iluminacin

    -Condensador

    -Diafragma

    -Portafiltro

    El conocimiento del microscopio es de suma importancia para los estudiantes de las Ciencias de la

    Salud en la USS si se tiene en cuenta que el desarrollo y evolucin en los ltimos aos ha permitido

    dilucidar los aspectos inherentes a la naturaleza de los seres vivos y la individualizacin de las

    estructuras facilitando su estudio y comprensin.

    2.0. OBJETIVOS

    Al concluir la presente prctica el estudiante estar capacitado para:

    1. Explicar la formacin de imgenes en el microscopio ptico

    2. Identificar sin error las partes del microscopio ptico.

    3. Calcular la magnificacin (aumentos) de la imagen del objeto obtenida empleando el

    microscopio ptico.

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    4. Manipular adecuadamente el microscopio ptico.

    5. Hacer preparaciones en fresco y seco definiendo el uso de los diferentes objetivos segn el

    caso.

    3.0 MATERIALES Y EQUIPOS

    3.1 MATERIAL BIOLGICO

    - Agua estancada

    - Lminas montadas de tejidos animales

    - Sangre humana

    3.2 MATERIAL DE LABORATORIO

    - Microscopio compuesto

    - Estereomicroscopio

    - Lminas portaobjetos

    - Laminillas

    - Fotografas de peridicos

    - Calendario de bolsillo milimetrado

    - Lapicero- Lanceta hemolet

    3.3. REACTIVOS

    - Aceite de cedro

    - Colorante WRIGHT

    4.0. PROCEDIMIENTOS

    4.1. EXPERIENCIA 01: FORMACIN DE IMGENES EN EL MICROSCOPIO

    1. Obtener un cuadrado de papel de 1 cm de lado

    2. Dibujar sobre el una flecha de 02 mm de longitud

    3. Colocarlo sobre una lmina portaobjetos; adicionar una gota de agua y cubrirlo con una laminilla.

    4. Llevar la muestra al microscopio; observar a menor aumento, y realizar desplazamiento con los

    otros objetivos, a mediano y mayor aumento.

    5. En cada una de las observaciones apreciar la orientacin de la flecha de la muestra, respecto a la

    imagen observada en el ocular.

    6. Esquematizar calcular los aumentos.

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    4.2 EXPERIENCIA 02: PODER DE RESOLUCIN DEL MICROSCOPIO

    1. De una fotografa de peridico o revista obtener un cuadrado de 01 cm de lado.

    2. Colocarlo sobre una lmina portaobjetos: adicionar una gota de agua y cubrirla con laminilla.

    3. Llevarla al microscopio compuesto y observar a menor, mediano y mayor aumento; en cada caso

    contar el nmero de puntos que se observa en el campo microscpico.

    4. Calcular el aumento, explicar y esquematizar

    4.3. EXPERIENCIA 03: MEDIDA DEL DIMETRO DEL CAMPO MICROSCPICO

    1. Sobre la platina del microscopio colocar la parte milimetrada de un calendario de bolsillo.

    2. Con el objetivo de menor aumento observar y contar el nmero de espacios, tratando que una lnea

    coincida con el borde del campo microscpico.

    3. Transformar el nmero de mm en micras y expresar el dimetro del campo microscpico en estas

    ltimas unidades.

    4. Calcular el dimetro del campo microscpico para los objetivos de 10 y 40 X usando la frmula

    siguiente:

    OX = (0 a menor aumento)(Potencia del objetivo a menor aumento)

    Potencia del Objetivo del dimetro X

    4.4. EXPERIENCIA 04: MEDIDA APROXIMADA DEL GROSOR DE UN CABELLO

    1. Colocar el calendario sobre la platina.

    2. En el espacio comprendido entre dos mm contiguos colocar cabellos alineados paralelamente hasta

    copar todo el espacio.

    3. Esquematizar y calcular el dimetro de un cabello.

    4.5. EXPERIENCIA 05: PREPARADOS MICROSCPICOS EN FRESCO

    1. En una lmina portaobjetos colocar una gota de agua estancada.

    2. Cubrirlo con laminilla

    3. Llevar el microscopio y observar a menor, mediano y mayor aumento con los objetivos en seco. NO

    USAR EL OBJETIVO DE INMERSIN.

    4. Esquematizar lo observado en un campo microscpico de 6 cm. de dimetro tratando que exista

    proporcin entre lo observado y lo esquematizado y que no haya variaciones de forma y color en

    ambos casos.

    4.6. EXPERIENCIA 06: PREPARACIONES MICROSCPICAS EN SECO

    1. Realizar una extensin o frotis de sangre

    2. Colorear con colorante WRIGHT

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    3. Agregar aproximadamente doble cantidad de agua destilada por cada gota de colorante

    WRIGHT

    4. Dejar en reposo de 3 a 5 minutos

    5. Lavar con agua potable o destilada y luego secar

    6, Llevar al microscopio y observar con objetivo de inmersin

    7. Esquematizar

    4.7. EXPERIENCIA 07: FORMACIN DE IMGENES EN EL ESTEREOMICROSCOPIO

    1. Obtener un rectngulo de papel de 2 x 1 cms.

    2. Dibujar sobre l una flecha de 1 cm. de longitud.

    3. Colocarlo sobre una lmina portaobjetos y llevar este preparado hasta la platina del estereoscopio.

    4. Observar la orientacin de la flecha de la muestra en relacin a la imagen observada en el ocular.

    5. Esquematizar, explicar y calcular los aumentos.

    5.0 RESULTADOS

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    PRCTICA No04

    PROPIEDADES FSICAS DE LA MATERIA VIVA

    1.0. INTRODUCCIN

    Los intercambios de materia y energa son regulados por fenmenos fsicos universalmente aceptados:

    los cuales afectan la constitucin orgnica de los seres vivos y las diversas funciones metablicas.

    Estos procesos se desarrollan en el interior de las clulas y constituyen el fundamento de las

    actividades vital es.

    La materia viva se presenta en tres estados:

    - ESTADO SOLIDO: Se encuentran substancias que constituyen elementos esquelticos y de

    proteccin (huesos, depsitos de grasa, pelos, plumas, troncos de rboles, etc.).

    - ESTADO LIQUIDO: Est constituido por dispersin de solutos (ejm: sales minerales,

    molculas orgnicas pequeas, glucosa, protenas, etc.) en un solo solvente: el agua.

    - ESTADO GASEOSO lo constituyen algunos gases que intervienen en el metabolismo

    (Oxgeno y C02) y otros que como el nitrgeno en estado inerte forma parte de las cianofceas.

    Es importante el estudio de los diferentes fenmenos fsicos que se desarrollan a nivel celular, pues

    permite comprobar el comportamiento de las BIOMOLCULAS y sentar las bases para la

    comprensin posterior del desarrollo de las actividades metablicas integrales.

    2.0. OBJETIVOS

    Al trmino de la presente prctica el estudiante estar capacitado para:

    1. Diferenciar los fenmenos fsicos en los distintos estados de la materia viva

    2. Diferenciar sistemas dispersos; propiedades de superficie y movimientos moleculares

    3. Explicar los cambios del estado fsico

    4. Relacionar algunas actividades vitales con los fenmenos fsicos estudiados

    5. Esquematizar con correccin el desarrollo de las experiencias

    3.0. MATERIALES Y EQUIPOS

    3.1. MATERIAL BIOLGICO

    - 100 ml de aceite comestible

    - 01 caja de gelatina

    - 100 ml de leche

    - 10 ml bilis de pollo

    - 01 buche de ave

    - 02 huevos

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    - Hojas de elodea

    - 60 semillas de frejol

    3.2. MATERIAL INORGNICO

    - Tiza

    - 20 gr. de azufre en polvo

    - 01 caja mediana de vaselina

    - 01 bolsa de detergente

    - 01 paquete de algodn

    3.3. MATERIAL DE LABORATORIO

    - Tubos de ensayo

    - Embudos

    - Vasos de precipitacin 100 ml; 250 ml.

    - Baguetas

    - Pipetas de 1,5 y 10 ml.

    - Papel de filtro

    - Lminas portaobjetos y cubreobjetos

    - Pipetas Pasteur

    - Lancetas hemolet

    - Goteros medicinales3.4. REACTIVOS:

    - Cloruro de sodio

    - Almidn al 1%

    - Nitrato de plata

    - Acido ntrico

    - KMnO4

    - Agua destilada

    - Alcohol

    Colorantes:

    - Lugol

    3.5. EQUIPOS DE LABORATORIO

    - Mechero Bunsen o de alcohol

    - Microscopio compuesto

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    4.0. PROCEDIMIENTOS

    4.1. EXPERIENCIA 01: SISTEMAS DISPERSOS

    1. Numere los tubos de ensayo y papeles de filtro de 01 al 04 y opere segn el cuadro siguiente:

    TUBOS N

    REACTIVO 1 2 3 4

    - NaCl 1g

    - Tiza en polvo 1g

    - Aceite 1g

    - Gelatina 1g

    -Agua destilada 3 ml 3 ml 3 ml 3 ml

    2. Agite cada uno de los tubos y observe a trasluz las diferencias existentes

    3. Dejar en reposo por 2 a 5 minutos

    4. Agitar el contenido y filtrarlo usando embudos y vasos de precipitacin

    5. Observar, explicar y esquematizar

    4.2. PROPIEDADES DE SUPERFICIE

    4.2.1. EXPERIENCIA 02: TENSIN SUPERFICIAL

    1. En un vaso de precipitacin llenar agua destilada hasta las partes

    2. Espolvorear azufre en polvo sobre la superficie del agua observando la posicin que ocupa.

    3. Con el extremo engrasado de una bagueta, presione lentamente la superficie del agua y observe por

    la parte lateral del vaso

    4. Con una pipeta agregue solucin de detergente por las paredes del vaso

    5. Observar, explicar y esquematizar

    4.2.2. EXPERIENCIA 03: ADSORCIN

    1. En un vaso de precipitacin adicionar 25 cc. de almidn al 1%

    2. Agregar 4 gotas de lugol y agitar. observando el cambio de coloracin

    3. Dejar en reposo por unos minuto

    4. Filtrar el preparado y observar el color de la solucin filtrado

    5. Adicione a la solucin filtrada unas gotas de almidn al 1 %

    6. Explique y esquematice

    4.2.3. EXPERIENCIA 04: IMBIBICIN

    1. Pesar 20 semillas secas de frjol, anotar el peso

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    2. Colocar las semillas en un recipiente con agua y dejarlo por espacio de 04 horas o ms

    3. Extraer las semillas y secarlas con una toalla

    4. Pesar las semillas inmediatamente

    5. Compare con el peso inicial. Explique el fenmeno

    4.3. MOVIMIENTOS MOLECULARES

    4.3.1 EXPERIENCIA 05: MOVIMIENTO BROWNIANO

    1. Colocar 2 ml. de leche en un tubo de ensayo

    2. Agregar 3 gotas de bilis y agitar

    3. Obtener una gota del sobrenadante y colocarla sobre una lmina portaobjetos, cubrir luego con

    laminilla

    4. Calentar ligeramente el Portaobjetos

    5. Llevar al microscopio y observar a menor, mediano y mayor aumento

    6. Explicar, esquematizar

    4.3.2 EXPERIENCIA 06: DILISIS

    1. Colocar 25 ml. de NaCl 10% en el buche del ave previamente secado

    2. Agregar 25 ml. de solucin de albmina al 60%

    3. Introducir el buche en un vaso de precipitacin de 250 ml. conteniendo 150 ml. de agua destilada

    4. Dejar en reposo durante 10 minutos

    5. Trasvasar 5 cc. de la solucin contenida en el vaso de precipitacin a un tubo de ensayo y agregue 1 2 gotas de cido ntrico y llevarlo al calor

    6. En otro tubo d ensayo trasvasar 5 cc. de la solucin contenida en el vaso agregar 1 2 gotas de

    AgNO3

    7. Observar, explicar y esquematizar

    4.3.3. EXPERIENCIA 07: DIFUSIN

    1. En un tubo de ensayo agregar 5 ml. de agua helada

    2. En un segundo tubo agregar 5 ml. de agua a temperatura ambiente

    3. En un tercer tubo de ensayo agregar 5 ml. de agua caliente

    4. Adicionar 5 gotas de KMNO4en solucin a cada uno de los tubos antes mencionados

    5. Observar y ordenar los tubos de acuerdo a la velocidad de difusin

    6. Observar, explicar el fenmeno y esquematizar

    4.3.4 EXPERIENCIA 08: EXOSMOSIS Y ENDOSMOSIS

    1. En un tubo de ensayo agregar 2 ml. de solucin de NaCI 4%

    2. En un segundo tubo de ensayo agregar 2 ml. de NaCI al 0,9%

    3. En un tercer tubo de ensayo agregar 2 ml. de agua destilada

    4. Con un trozo de algodn embebido en alcohol, limpiar la yema del dedo ndice

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    5. Con una lanceta Hemolet o aguja esterilizada hacer puncin en la yema del dedo cordial.

    6. Agregar 2 gotas de sangre a cada tubo y agitar

    7. Con una pipeta Pasteur por separado obtener una gota de cada tubo y observarla al microscopio

    compuesto apreciando en cada caso el aspecto de los glbulos rojo

    8. Explicar y esquematizar

    4.4. EXPERIENCIA 09: PLASMLISIS EN CLULAS VEGETALES

    1. Colocar una hoja de elodea sobre una lmina portaobjetos.

    2. Adicionar una gota de agua y colocar laminilla.

    3. Llevar al microscopio y observar las caractersticas morfolgicas de las clulas

    4. Retirar el portaobjetos de la platina: levantar la laminilla y agregar una gota de solucin de NaCI

    10%

    5. Cubrir con laminilla y llevar al microscopio

    6. Observar la morfologa de las clulas. Explicar y esquematizar.

    5.0. RESULTADOS

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    PRCTICA No05

    DETERMINACIN DEL PH

    1.0. INTRODUCCIN

    El valor pH expresa con exactitud y sencillez el grado de acidez o alcalinidad de una substancia,

    considerando la concentracin jnica del hidrgeno y la disociacin del agua en Hidrogeniones H+e

    Hidroxilionies OH-, el hidrgeno contenido en los cidos es el responsable de la acidez, por lo tanto un

    cido es una substancia que libera hidrogeniones en solucin y un lcali (Base) es una substancia que

    contiene el radical OH- como base. Sorensen propuso la notacin pH que expresa por un nmero

    positivo numricamente igual al logaritmo negativo de la concentracin de iones H medidos en Moles

    por Litro, pH log10(1-1+): por ejemplo 0.01 Moles Lt.(0.01m) = 1 x 10 n pH = 2

    En el caso de agua pura (H) (01-r) 1x107 la solucin es neutra, pues el nmero de iones H+ son

    equivalentes al nmero de iones OH-si aadimos cido al agua pura aumentamos H+, por lo tanto la

    solucin ser ms cida alcanzando su mximo en el punto O de la escala, si se disminuye la

    concentracin H+y se incrementa la concentracin OH-la solucin alcalina alcanzar su mximo en

    1x104(H+). El estudio del pH en Biologa es importante por la influencia de los iones H+en todos los

    procesos vitales de los organismos, por ejemplo el pH de la sangre de los mamferos nunca llegar a ser

    cido encontrndose en los lmites de 7.3 - 7.5 apareciendo anormalidades al rebasar estos lmites. Las

    enzimas desarrollan su mxima actividad en un rango de pH ptimo y muchos procesos industrialesdependen de un adecuado manejo de este factor, por ejemplo el curtido de pieles, la preparacin de

    alimentos, la elaboracin de vinos, cervezas, la fertilizacin del suelo, etc. La tecnologa moderna ha

    desarrollado mtodos electrnicos en la determinacin de pH, pasando por los colorimtricos y

    electroqumicos. En esta prctica se ha seleccionado el uso de papel indicador y el manejo del pH

    metro.

    2.0. OBJETIVOS.

    Al finalizar la prctica el alumno estar capacitado para:

    1. Explicar con sus propias palabras el significado del pH

    2. Usar correctamente el papel indicador en la determinacin del pH de otras substancias

    3. Diferenciar el pH de distintas substancias orgnicas, ordenndolas en cidos y bsicos

    fundamentalmente

    4. Usar correctamente el pH metro

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    3.0 MATERIALES Y EQUIPOS

    3.1. MATERIAL BIOLGICO

    -100 ml de leche de vaca

    -02 huevos

    -02 limones

    -Orina

    -Saliva

    -Leche materna

    -100 ml de jugo de naranja

    -Ltex de tallo

    -Plasma sanguneo

    -Agua de mar

    3.2. MATERIAL DE LABORATORIO

    -Tubos de ensayo

    -Goteros

    -Pipetas por 5 ml

    -Cristalizadores

    -Vasos de precipitacin

    -Mortero y pilas-Embudos

    -Gradillas

    Reactivos:

    -Agua acidulada

    -Agua alcalina

    4.0. PROCEDIMIENTOS

    4.1. EXPERIENCIA 01: DETERMINACIN DEL pH DE DIVERSAS SUSTANCIAS

    UTILIZANDO PAPEL INDICADOR DE pH

    1. Preparar una solucin de la muestra

    2. Cortar un pequeo trozo de papel indicador

    3. Con una pinza introducir el papel indicador en la muestra durante un minuto

    4. Retirar el trozo de papel, observar la variacin de color

    5. Comparar el color resultante con el color correspondiente de la escala de pH que tiene el patrn.

    6. Explicar, comparar y esquematizar.

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    4.2. EXPERIENCIA 02: DETERMINACIN DEL pH USANDO EL PH METRO

    1. Antes de prender el aparato cerciorarse que el botn Z est hacia adentro.

    2. Prender la palanca de la fuente principal (No.1)

    3. Si despus de 5 minutos la aguja no permanece en el cero de la zona roja, en la perilla 3 (cero)

    ajustar a 0.

    4. Percatarse que los botones de RANGE y TEMPERATURE estn en forma adecuada.

    5. Colocar la muestra en los electrodos sumergidos, presionar el botn A (No. 4).

    6. Si la aguja est fuera de la zona roja llevarlo con el botn COMPENSATION (4a) a la zona roja.

    7. Una vez en la zona roja presionar el botn M (No. 5) y leer la fraccin del pH cuyo nmero entero

    lo da el botn 4a. (botn de COMPENSATION).

    8. Finalmente presionar Z (No. 2).

    Nota: En ningn momento mover las perillas Buffer Coarse y Buffer Fine (son botones para la

    calibracin).

    5.0 RESULTADOS

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    PRCTICA No06

    DIFERENCIACIN DE CLULAS PROCARIOTAS Y EUCARIOTAS

    1.0. INTRODUCCIN

    La teora celular sostiene que la clula es la unidad vital, morfolgica, fisiolgica y gentica de todo

    ser vivo, todos los organismos vivos estn formados por clulas y las sustancias orgnicas producidas

    en ellas. Para la concepcin didctica se consideran dos tipos de clulas: Las procariotas, sin ncleo

    diferenciado entre las que se encuentran las Bacterias, Cianofceas y Micoplasmatales y las

    Eucariotas con ncleo bien diferenciado y tamao relativamente mayor y que constituyen organismos

    de vida libre o estructuras de seres vivos diversos. Las clulas Procariotas, por su tamao, presentan

    en algunas ocasiones ciertas dificultades para su estudio habindose logrado en el caso de bacterias

    mejores conocimientos con el uso del microscopio electrnico: sin embargo con el microscopio ptico se

    puede llegar a obtener una idea de su morfologa.

    Las clulas Eucariotas en cambio pueden ser estudiadas con ms facilidad debido a su tamao y es

    posible identificar con relativa frecuencia uno de los componentes ms importantes: el ncleo celular,

    el cual es un elemento constante en clulas Eucariotas animales y vegetales (excepto en hemates

    circulantes; especialmente de humanos), es generalmente de forma esfrica, en algunos casos tiene la

    misma forma de la clula y ocupa mayormente una posicin central. Es importante discriminar las

    caractersticas de las clulas Procariotas y Eucariotas tales como forma, tamao y presencia oausencia de ncleo, pues constituyen caractersticas taxonmicas fundamentales y reflejan la

    adaptacin funcional como organismos vivos independientes o como estructuras de otros organismos.

    2.0. OBJETIVOS

    Al finalizar la presente prctica los estudiantes estarn capacitados para:

    1. Identificar las partes fundamentales de las clulas Eucariotas diferenciando claramente el

    ncleo.

    2. Diferenciar clulas Eucariotas de Procariotas en relacin a la presencia del ncleo celular,

    3. Establecer diferencias significativas entre clulas Procariotas y Eucariotas en relacin a

    forma, tamao y estructura.

    4. Esquematizar con correccin las observaciones realizadas

    3.0. MATERIALES Y EQUIPOS

    3.1. MATERIAL BIOLGICOS

    -Sarro dentario

    -Yogurt

    -Orina expuesta 4 das al medio ambiente

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    -Cultivos de Macrocistis sp, Anabaena sp y Nostoc sp

    -Muestras de mucosa labial

    -Bulbos de cebolla

    -Lminas montadas de tejido nervioso

    3.2. MATERIAL DE LABORATORIO

    -Estiletes

    -Goteros

    -Lminas portaobjetos y laminillas

    -Mechero de alcohol

    -Varilla de coloracin

    3.3. REACTIVOS Y COLORANTES

    -Violeta de genciana

    -Lugol

    -Alcohol - acetona

    -Safranina

    -Azul de metileno

    -Fucsina bsica

    -Aceite de cedro

    -Alcohol comercial-Xilol

    3.4. EQUIPOS DE LABORATORIO

    -Microscopio compuesto

    4.0. PROCEDIMIENTOS

    4.1. EXPERIENCIA 01: OBSERVACIN DE CLULAS PROCARlOTAS EN SARRO

    DENTARIO

    1. Con mondadientes extraer una pequea muestra de substancia examen y realizar una extensin o

    frotis sobre una lmina portaobjetos.

    2. Fijarlas al calor moderado.

    3. Agregar violeta de genciana hasta cubrir el preparado y dejarlo en reposo durante 1 a 2 minutos.

    4. Eliminar el exceso de colorante sin lavar la lmina

    5. Agregar lugol hasta cubrir el preparado y dejarlo en reposo durante 1 a 2 minutos.

    6. Decolorar con Alcohol - Acetona (80/20) hasta que el preparado est incoloro

    7. Lavar el preparado en agua destilada.

    8. Aadir safranina y dejarlo en reposo durante 1 a 2 minutos.

    9. Lavar el preparado con agua destilada.

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    10. Secar el preparado al medio ambiente o al calor moderado.

    11. Llevar la lmina portaobjetos al microscopio y observar con objetivos de inmersin e identificar

    los diferentes tipos de bacterias.

    12. Esquematizar y explicar lo observado.

    4.2. EXPERIENCIA 02: OBSERVACIONES DE CLULAS PROCARIOTAS:

    LACTOBACILOS

    1. Colocar una a tres gotas de yogurt sobre una lmina portaobjetos

    2. Extender la muestra con un mondadientes, y secar al ambiente o al calor moderado

    3. Agregar 2 a 5 gotas de azul de metileno

    4. Lavar ligeramente con agua

    5. Secar nuevamente

    6. Llevar al microscopio y observar con objetivo de inmersin

    7. Esquematizar y explicar lo observado

    4.3. EXPERIENCIA 03: OBSERVACIN DE BACTERIAS EN MOVIMIENTO

    1. En un frasco mediano de vidrio depositar 30 ml de orina

    2. Dejarlo expuesto al medio ambiente por 4 das

    3. Con un gotero tomar una o dos gotas de la muestra, colocarlas sobre una lmina portaobjetos y

    cubrirla con laminilla.

    4. Llevarla al microscopio y observar con pequeo; mediano y mayor aumento5. Observar la bacteria y el flagelo que presenta movimiento zigzagueante, fijar la idea del tamao y

    forma de cada estructura

    6. Esquematizar y explicar lo observado

    4.4. EXPERIENCIA 04: OBSERVACIN DE CIANOFCEAS.

    1. De cultivos de Macrocistis sp., Anabaena sp. y Nostoc sp . por separado tomar unas muestras y

    colocarlos sobre lminas portaobjetos y cubrirlas con laminillas

    2. Llevar al microscopio y observar con objetivos de pequeos; mediano y gran aumento cada una de

    las muestras tratando de individualizar la clula.

    3. Apreciar adems forma, tamao y componentes de cada estructura.

    4. Esquematizar y explicar lo observado.

    4.5. EXPERIENCIA 05: OBSERVACIN DE CLULAS EUCARIOTAS VEGETALES

    1. Con ayuda de un estilete, desprenda usted la epidermis de la cara interna de la catfila de la

    cebolla y obtenga de ella 1 cm2.

    2. Colocar la muestra sobre una lmina portaobjetos y aadir una gota de alcohol.

    3. Adicionar una gota de azul de metileno.

    4. Lavar con agua destilada evitando el desprendimiento de la muestra.

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    5. Colocar una laminilla sobre el preparado.

    6. Llevar al microscopio y observar al mediano y mayor aumento.

    7. Identificar la forma, tamao y partes de cada clula distinguiendo la forma y posicin del ncleo.

    8. Explicar y esquematizar lo observado.

    4.6. EXPERIENCIA 06: OBSERVACIN DE CLULAS EUCARIOTAS ANIMALES

    1. Con un mondadientes extraer una muestra de mucosa labial y realizar una extensin sobre una

    lmina portaobjetos.

    2. Fijar al calor moderado o al medio ambiente.

    3. Colorear de uno a tres minutos con azul de metileno, Violeta de genciana o Safranina.

    4. Sacar al medio ambiente o al calor moderado.

    5. Llevar al microscopio y observar a mediano y mayor aumento tratando de identificar la forma,

    tamao y posicin del ncleo celular.

    6. Explicar y esquematizar lo observado.

    4.7. EXPERIENCIA 07: OBSERVACIN DE CLULAS EUCARIOTAS ANIMALES EN

    TEJIDO NERVIOSO

    1. Colocar una lmina de tejido nervioso sobre la platina del microscopio.

    2. A menor aumento identificar una neurona

    3. A mayor aumento observar la forma; tamao y las partes que presenta identificando el ncleo

    celular. Explicar y esquematizar lo observado.5.0 RESULTADOS

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    PRCTICA No07

    CROMATOGRAFA

    1.0. INTRODUCCIN

    Plinio el viejo, en su monumental "Historias Naturales", menciona una tcnica que podramos llamar

    "Cromatografa en papiro", alude a un test cromatogrfico para el hierro, pero hasta comienzo del

    siglo XIX, esta tcnica no se emple realmente como verdaderos fenmenos que suceden. EI qumico

    alemn Runge en 1855, mejora la tcnica y llega a publicar cromatogramas sobre papel, impregnado

    con sustancias adsorbentes como anilina. Li Elegang, en 1943, realiza el primer cromatograma

    bidimensional y en 1944 Martin y Synge, reciben el premio Nobel de reconocimiento a su trabajo de

    pioneros en la cromatografa sobre papel.

    La cromatografa de papel, que es la tcnica de separacin e identificacin de sustancias qumicas,

    mediante un disolvente que se mueve sobre hojas o tiras de papel filtro, es importante pues permite

    aseverar que no hay parte de la Qumica o de la Biologa, en la que la cromatografa de papel, no haya

    prestado contribucin sustancial, en orden de los avances del conocimiento y su mejor comprensin.

    En la cromatografa sobre papel se puede distinguir:

    a.Cromatografa ascendente

    b.Cromatografa descendente

    c.Cromatografa monodimensional

    d.Cromatografa bidimensional

    2.0. OBJETIVOS

    Al finalizar la presente prctica el estudiante estar capacitado para:

    1. Explicar el principio bsico de la cromatografa en papel

    2. Describir las fases de cada componente del cromatograma

    3. Comparar las tcnicas utilizadas

    4. Determinar el Rf en el cromatograma

    3.0. MATERIALES

    3.1. BIOLGICOS

    - Hojas de geranio, hojas de chabelita

    - Flores de color variado (rojo. prpura. azul)

    - Filtrados diversos (soya, arvejas, lentejas, tomate, esparrago)

    3.2. DE LABORATORIO

    - Tizas blancas

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    - Tubos

    - Gradillas

    - Mechero

    - Fsforos

    -Tijerillas

    - Pinzas

    - Matraces

    - Cristalizadores

    -Pipetas Pasteur

    - Mortero-piln

    -Vasos de 1000-1500 cc

    -Pipetas graduadas

    - Regla

    - Cajas PETRI grandes y chicas

    - Hojas de papel filtro

    - Hojas de papel bond

    - Lpiz

    -Tubos capilares

    - Engrapador- Baguetas

    3.3 REACTIVOS

    - 500 cc de alcohol

    - Mezcla sol vente (80; 10; 10)

    - Solucin de triptfano

    - Solucin de acido asprtico

    - Solucin de fenilalanina

    - Solucin reveladora (solucin de ninhidrina al 1 %)

    - Agua destilada

    3.4. EQUIPOS

    - Estufa

    4.0. PROCEDIMIENTOS

    4.1. EXPERIENClA 01: SEPARACIN DE PIGMENTOS CLOROFLICOS POR

    CROMATOGRAFA EN COLUMNA

    1. Lavar y secar hojas y flores

    2. Fragmentar y hervir en bao mara y en alcohol

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    3. Hervir hasta la decoloracin total del material

    4. Extraer los fragmentos del material decolorados y continuar el hervido hasta obtener un

    concentrado verde oscuro

    5. Retirar y enfriar el extracto alcohlico

    6. Pulverizar en mortero tizas blancas

    7. Humedecer con mezclas solventes

    8. Llenar un tubo

    9. Verter el extracto alcohlico

    10. Observar

    11. Aadir el extracto solvente gota a gota

    12. Observar, comparar, explicar y dibujar.

    4.2. EXPERIENClA 02: RECONOCIMIENTO DE AMINOCIDOS POR

    CROMATOGRAFA EN PAPEL

    1. Verter en la cmara cromatogrfica (vaso de 1000- 1500 cc.), mezcla solvente hasta 1 cm. de la

    base y tapar.

    2. Confeccionar el papel bond, un modelo del cromatograma, segn las medidas de la cmara

    cromatogrfica, estableciendo que al colocarlo no contacte con la superficie interna y quede a 1 cm del

    borde

    3. Transferir estas medidas aI papel filtro, y a 1.5 cm. del borde base trazar a lpiz marcas muytenues, que correspondan'alas soluciones problemas

    4. Utilizando un tubo capilar impregnar 1 2 gotas, con intervalo de secado, con cada una de las

    muestras problemas en los puntos

    5. Dejar secar

    6. Observar y comparar

    7. Colocando el modelo de cromatograma entre dos hojas de papel bond, enrollar por repetidas veces

    alrededor de una pipeta hasta obtener un cilindro

    8. Fijar los bordes laterales mediante dos grapas en ambos extremos, evitando el mnimo contacto

    9. Introducir el cilindro dentro de la cmara cromatogrfica, de tal manera que el borde base quede

    sumergido en la mezcla solvente, no debiendo haber otro contacto

    10. Tapar la cmara

    11. Dejar en reposo por 20 segundos

    12. Observar y comparar

    13. Sealar a lpiz y muy tenuemente, la altura a la que ha llegado la mezcla solvente en cada caso

    14. Colocar el cilindro desenrollado a la estufa a 100C

    15. Dejar por 2 minutos

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    16. Observar y comparar

    17. Introducir por el lado en donde estn las muestras, en un PETRI con la sustancia reveladora

    hasta una humectacin apropiada

    18. Observar y comparar

    19. Llevar a la estufa a 100C por 2 minutos

    20. Observar, comparar y esquematizar

    21. Calcular la Rf para cada una de las muestras, siguiendo la frmula ya conocida

    22. Comparar, explicar y dibujar

    4.3. RECONOCIMIENTO DE AA. EN MUESTRAS NATURALES

    1. Preparar los filtrados de los productos vegetales

    2. El resto de los pasos son idnticos al procedimiento anterior

    5.0. RESULTADOS

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    PRCTICA No08

    INTERPRETACIN DE MICROFOTOGRAFAS

    1.0 INTRODUCCIN

    EI microscopio ptico y sus diversas tcnicas permiten observar la clula en su conjunto y

    dependiendode la coloracin usada es posiblereconocer algunasestructurasdebido asuafinidad por

    los colorantes;por ejemplo, el ncleo se tiecuando se usan colorantesbsicos yel citoplasmase tie

    con colorantes cidos. Dependiendo de elloigualmentese puede observar ncleo ynuclolo en diversas

    formasy nmeros segn el tipo de clula y las mitocondrias aparecen comogrnulos finos o

    bastoncillosdispersos en el citoplasmasinestructuradefinida;esposible apreciartambinel Aparato

    de Golgi; algunos lisosomasy en algunas clulas se puede observar el retculo endoplasmtico

    mediante coloraciones de protenas; los centriolos y elhuso mittico es posible visualizarlos en

    preparados paramitosis.

    El microscopioelectrniconoposibilita una visin panormica delaclula, sino que permiteindagar

    su interiory a diferencia del microscopio pticoy sus tcnicas de col oracin en el microscopio

    electrnico l a imagen se apreciaen una pantalla y luego enunamicrofotografapartes de la clula

    con todosusestructuras externaseinternas. Con el perfeccionamiento del microscopio electrnicoyla

    obtencin de las microfotografas esposible con las tcnicas de ampl iacin alcanzar aumentos

    significativos quepermiten elestudiomacromolecular de una determinada estructura. Ahora bien, enel microscopioelectrnico de transmisin se pueden mostrar secciones transversales, longitudinales o

    sagitales d e la clula o partes de ella o de un organelo; los cortes transversalesde estructuras tipo

    vesiculares presentan forma redondeada o esfrica; l as estructuras tubulares aparecen en forma de

    crculos en ocasiones anastomosadas o cangran cantidad ramificacionesy las estructuras tipo

    cisterna aparecen apiladas;lasmembranas unitarias aparecen como estructurastrilaminares.

    EI MEC o microscopio de barrido d a una imagen tridimensional de la parte de la clula que

    constituye la muestra y requiere de elevado criterio para su interpretacin. Es importante la

    realizacin de esta prctica porque posibilita al estudiante una adecuada interpretacin de las

    microfotografas.

    2.0. OBJETIVOS

    Al finalizar la prctica el estudiante estar capacitado para:

    1. Diferenciar las microfotografas obtenidas con el microscopio electrnico de las obtenidas

    con el microscopio ptico.

    2. Estimar el tipo de corte que se ha aplicado a la clula u organela en base a la imagen que

    se presenta.

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    3. Diferenciar las diversas organelas celulares

    4. Estimar el tamao real de una organela o estructura celular cuya microfotografa se

    estudia.

    3.0. MATERIALES:

    - Microfotografas con nmero de aumentos registrados (preferentemente fotocopias de textos

    originales)

    - Lupas

    - Reglas de 30 cm graduadas al milmetro

    - Calculadora de bolsillo

    4.0. PROCEDIMIENTOS:

    1. Obtenga la fotocopia de una parte de la clul a registrada en una microfotografa obtenida con

    microscopio electrnico y queindique el nmero deaumentos.

    2. Reconozca la estructura celular y sus diversas partes

    3. Estimar la forma original de la estructura celularu organela de la microfotografa en estudio.

    4. Estime el tamao real de la estructura celular en estudio de acuerdo a la formula siguiente:

    YmmXum

    microfMagnum =.

    1

    En donde:

    Magn.Microf.= Magnificacin de la microfotografa expresada en mm

    Ymm= Medida de la estructura expresada mm

    5. Realice un mnimo de 3 mediciones por cada organela o estructura celular en estudio

    6. Esquematizar y explicar

    5.0. RESULTADOS

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    PRCTICA No09

    COLORACIONES CITOLGICAS

    1.0 INTRODUCCIN

    Desde el punto de vista fsico, la coloracin implica la penetracin del colorante por fenmenos

    osmticosy su fijacin se debe a fenmenos de adsorcin de partculas o iones. Qumicamente, la

    coloracin es la unin de las molculas del colorante con los elementos constituyentes de los tejidos;

    algunas regiones celulares tienen pH alcalino y se tien con los colorantes cidos; otros tienen pH

    acido y se tien con colorantes bsicos;sin embargo, es necesario sealar que tanto el ncleo como el

    citoplasma tienen caractersticas anfotricas de manera que se pueden teir, el ncleo con algunos

    colorantes cidosyel citoplasma con algunos colorantes bsicos.

    Es generalmente aceptado que los mecanismos de coloracin son afectados por:

    1. La pureza del colorante.

    2. La concentracin del colorante

    3. EI pH de la solucin del colorante

    4. La temperatura del medio ambiente

    5. Sustancias adicionales (mordientes)

    6. Tiempo de coloracin

    De ah que es importante ejercitar al estudiante en e1 manejo y aplicacin de estos factores que

    inciden bsicamente en la complementacin del aprendizaje para el estudio de estructuras celulares

    significativas.

    2.0. OBJETIVOS

    Al terminar la presente prctica el estudiante estar capacitado para:

    1. Diferenciar la accin de colorantes cidos de colorantes bsicos sobre la clula

    2. Diferenciar colorantes vitales y supravitales3. Diferenciar coloraciones en funcin al nmero de colorantes usados

    4. Explicar en sus propias palabras el fundamento de las distintas coloraciones

    5. Esquematizar el flujo de la coloracin de GRAM

    6. Realizar coloraciones con otras muestras biolgicas

    3.0. MATERIALES Y EQUIPOS

    3.1. MATERIAL BIOLGICO

    - Mucosa labial

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    - Sangre

    - Agua estancada

    3.2. MATERIAL DE LABORATORIO

    - Lminas portaobjetos y cubreobjetos

    - Pipetas Pasteur y goteros

    - Mondadientes

    - Lanceta Hemolet

    3.3. EQUIPOS

    - Microscopio compuesto

    - Mechero de alcohol

    3.4. REACTIVOS

    - Agua destilada

    - Aceites de cedro

    - Alcohol al 95%

    - Alcohol acetona 80/20

    - Agua pH 7

    3.5. COLORANTES

    -Safranina

    -Eosina-Violeta de genciana

    -Hematena

    - Cristal violeta

    - Colorante Wright

    - Lugol

    - Fucsina

    - Verde Janus B 1: 10,000

    - Colorante Giemsa

    - Azul de metileno

    - Indicadores: rojo neutro 1/1000 pH. 7.2

    4.0. PROCEDIMIENTOS

    4.1. EXPERIENCIA 01: COLORACIN SIMPLE

    1. Con un mondadientes extraer mucosa labial y realizar una extensin sobre lmina portaobjeto

    2. Fijarla al calor moderado o al medio ambiente.

    3. Colorear de 1 5 minutos con safranina (o Eosina) o azul de metileno/violeta de genciana

    4. Secar al medio ambiente o a calor moderado

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    5. Observar al microscopio a mayor y menor aumento

    6. Esquematizar

    4.2. EXPERIMENTO 02: COLORACIN DOBLE

    1. Obtener una muestra de mucosa labial y realizar una extensin sobre lmina portaobjeto

    2. Fijar el calor moderado del mechero o al medio ambiente

    3. Colorear con hematena de 3 a 5 minutos

    4. Colocar el preparado en agua destilada

    5. Colocar con Eosina de 5 a 10 minutos

    6. Lavar con agua corriente

    7. Secar y observar al microscopio con objetivo de inmersin

    8. Esquematizar lo observado

    4.3. EXPERIENCIA 03: COLORACIN NEUTRA

    1. Realizar una extensin o frotis de sangre

    2. Colorear con colorante Wright

    3. Agregar aproximadamente doble cantidad de agua destilada por cada gota de colorante Wright

    4. Dejar en reposo de 3 a 5 minutos

    5. Lavar con agua corriente o destilada

    6. Secar al medio ambiente o calor moderado

    7. Observar con objetivo de inmersin8. Esquematizar

    4.4. EXPERIENClA 04: COLORACIN DIFERENCIAL: COLORACIN DEGRAM

    1. Recolectar la substancia examen (sarro dentario, pus, esputo, etc.) en un frasco de vidrio o en un

    PETRI, esterilizados.

    2. Con una asa de Kolle previamente esterilizada al calor, tomar una pequea porcin de la

    substancia examen y realizar una extensin o frotis enuna lmina portaobjetos

    3. Fijar la muestra al calor moderado

    4. Agregar violeta de genciana, hasta cubrir el preparado y dejarlo en reposo por espacio de 1 a 2

    minutos.

    5. Eliminar el exceso del colorante, sin lavar la lmina.

    6. Agregar lugol hasta cubrir el preparado y dejarlo en reposo por espacio de 1 a 2 minutos.

    7. Decolorar con alcohol acetona (80% de alcohol y 20% de acetona), hasta que el preparado este

    incoloro.

    8. Lavar el preparado en agua destilada

    9. Aadir fucsina bsica o safraninaydejarlo en reposo por espacio de 1 a 2 minutos.

    10. Lavar el preparado con agua

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    11. Secar el preparado al medio ambiente o al calor moderado

    12. Luego observar al microscopio con objetivo de inmersin e identificar los diferentes tipos de

    bacterias (cocos, bacilos, etc.), teidos de color violeta los Gram positivos y de color rosado los Gram

    negativos.

    4.5. EXPERIENCIA 05: COLORANTES VITALES: OBSERVACIN DE VACUOLAS EN

    Paramecium sp.

    1. Obtener una muestra de agua estancada que contenga Paramecium sp.

    2. Adicionar una gota de rojo neutro 1/1000 pH 7.2

    3. Llevar al microscopio y apreciar las vacuolas de color rojo intenso

    4. Esquematizar y explicar

    4.6. EXPERIENCIA 06: COLORACIONES SUPRAVITALES OBSERVACIN DE

    MITOCONDRIAS

    1. Obtener una muestra de mucosa labial y realizar un frotis

    2. Secar al aire del medio ambienteNO CALOR, NO LLAMA.

    3. Colorear con verde Janus B por 5 minutos

    4. Eliminar el colorante y llevar luego al microscopio

    5. Observar a menor y mayor aumento las mitocondrias que aparecen de color verde brillante en el

    citoplasma

    6. Explicar y esquematizar

    5.0. RESULTADOS

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    PRCTICA No10

    RECONOCIMIENTO DE ELEMENTOS BIOGENSICOS

    1.0 INTRODUCCIN

    La materia que constituye el universo esta formada por elementos qumicos; de los cuales

    aproximadamente 70 de ellos (exceptuando los gases nobles) existen en la materia viva organizada. A

    estos se les denomina ELEMENTOS BIOGENSICOS (de bios = vidaygenos = nacimiento) o

    BIOELEMENTOS, los que en forma simple y mas o menos indispensable forman parte del

    protoplasma.

    LosEBGvaranen cuanta a importancia y distribucin, el C, H, N, O, P se encuentran en todos los

    seres vivos, otras se hallan en algunos seres vivos, ya sea en cantidades notables o en trazas,

    presentando las caractersticas comunes siguientes:

    1. Abundan en la naturaleza

    2. Son de peso atmico bajo

    3. Tienen calor especfico elevado

    4. Forman compuestos fcilmente solubles

    5. Forman molculas de gran volumen

    Es sumamente importante el estudio de los EBG por las funciones que cumplen en los organismos

    vivos como elementos plsticos (CHONPS) o en el metabolismo normal de las actividades vitales, porejemplo el Na+y el CI-enla regulacin de la presin osmtica y equilibrio acido base, el ion K+en la

    actividad cardiaca y en la transmisin nerviosa, el Mg+como catalizador de reacciones enzimticas.

    2.0 OBJETIVOS

    Al finalizar la presente prctica el alumno estar en condiciones de:

    1. Reconocer cualitativamente los EBG de la materia viva

    2. Reconocer las sales que forman los EBG de la materia viva

    3. Identificar reactivos especficos para la determinacin cualitativa de los EBG

    4. Esquematizar elproceso de reconocimiento cualitativo de un mnimo de tres EBG

    5. Determinar EBG en otras sustancias orgnicas

    3.0. MATERIALES Y EQUIPOS

    3.1. MATERIAL BIOLGICO

    -02 papas

    -50 gr. de carne molida

    -02 huevos

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    -100 ml de leche

    -Orina

    -100 gr de cal

    -Sangre

    3.2. MATERIAL DE LABORATORIO

    -Tubos de ensayo

    -Mortero

    -Baguetas

    -Vasos de precipitacin

    -Papel de filtro

    3.3. EQUIPOS

    - Mechero de Bunsen

    3.4. REACTIVOS

    -Hidrxido de sodio (granulado)

    -cido clorhdrico concentrado

    -Acetato de plomo al 10%

    -NaOH al 40%

    -Reactivo de Sulkowitch

    -Agua destilada-Oxalato de amonio al 2%

    -Nitrato de plata al 2%

    -Colorantes

    4.0 PROCEDIMIENTOS

    4.1. EXPERIENCIA 01: RECONOCIMIENTO DE CHON

    1. En un T.E. colocar 5 gr de papa

    2. En otro tubo de ensayo colocar 5 gr de tiza

    3. Calentar ambos tubos

    4. Comparar, esquematizar y explicar

    4.2. EXPERIENCIA 02: RECONOCIMIENTO DE NITRGENO

    1. En un mortero triturar cal y NaOH granulado

    2. En un tubo ensayo colocar clara de huevo como la sustancia examen

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    3. Vaciar el contenido de