General Biochemistry 101

Pre-lab results

واألحماض واندهىن، نسكريات،ل مخبرية تغطية ويشمم .انحيىية نهكيمياء عاو تعريفي مقرر . عمهها كيقية و انمنظمة انمحانيم تحضير كيفية و اإلنزيمات و ،األمينية

2014

KING SAUD UNIVERSITY 1/1/2014

Eman Alshehri

(BUFFER SOLUTIONالمحاليل المنظمة )

: الإس خنذاج

ضافة مكياث كيةل من الأحامض بأو الواػد الوية بأو غند ختفيفيا، ويه املنظمةاحملايي ثلاوم اخغري يف ارمق اييدروجيين غند اإ

.غبارت غن حمول محلض ضؼيف وبأحد بأمالحو بأو كاػدت ضؼيفة وبأحد بأمالهحا

ياء يقطش يحهىل انظى

7.43 5.40 PH before adding

7.32 3.93 PH After adding HCL

7.48 8.03 PH After adding

NaOH

Eman Alshehri

الاخذباراث اؼامة و اوصفية لأحامض الأمينية

اخحثاس انزوتاية-1

انحيجة حط أييي انجهيسي األثىب

يذوة ماءاذن ثذوة الأحامض الأمينية يف املاء لرثباط جزيئاهتا املس خلعبة

جبزيئاث املاء العبية و نذكل وجود مجموػة الامني الاػدية و

اىربوهس يي امحلضية جسيي ذوابن الاحامض الامينية يف الاحامض و

الواػد

ل يذوة لكورفورم

يذوة ىيدروهس يداصوديوم

يذوة محض اييدرولكوريم

اخحثاس انهيذسي-2

انالحظة األثىتة

حىون ون بنفسجي حمول انهنيدرين+ اجليسني

حىون ون بأصفر حمول انهنيدرين+ اربوني

Eman Alshehri

إخحثاس ييهى- 3

انالحظة األثىتة

حىون راسب بين محمر من بأمالح ازئبق لإحذواء اخريوسني ػيل مجموػة اييدروهيس فينيي اكشف ميون+ اخريوسني

حىون راسب بين محمر من بأمالح ازئبق اكشف ميون+ افينول

إخحثاس انزاثىتشوجييك -4

انالحظة اإلثىتة

ضافة ىيدروهس يد اصوديوم ارتبخوفان يؼعي ابدسخني مرهباث انيرتو اصفراء ايت ثؼعي اون اربثلايل ابإ

ػدمي اون افينيي الاهني

ضافة ىيدروهس يد اصوديوم اخريوسني يؼعي ابدسخني مرهباث انيرتو اصفراء ايت ثؼعي اون اربثلايل ابإ

إخحثاس سكاجىجشي -4

انالحظة و االسححاج األثىتة

يخىون مرتاهب بأمحر اون يدل ػيل مجموػة اجلواهيدين املوجودت يف محض الأرجنني مع افا انفثول يف وجود الأرجنني

اييبوبروميت وؼامي مؤهسد ذلكل يس خخدم ىذا الاخذبار متزي الارجنني غن ابكية امحلاض الأميين

Eman Alshehri

اختبار الننيهيدرين

الزانثوبروتييك إختبار

Eman Alshehri

االخحثاسات انىصفية نهثشوجيات

solubility of proteinsروتا انثشوجيات-1

قاتهية انزوتا في اناء ىع انثشوجي انثشوجي

انثاسد

NaOH 1%قاتهية انزوتا في

ذاة ذاة بس يط ابيومني

Biuret testإخحثاس انثيىسيث-2

انالحظة و االسححاج األثىتة

ابيومني

يؼعي مرتاهبا بنفسجي اون لهو ثفاػي ابريوثني مع حمول نربيخاث

انحاس يف وسط كاػدي

اثش االيالح عهي روتاية انثشوجي -3

انالحظة و االسححاج االثىتة

يذوة لن ارتانزي اليةل من املح اذابت اربوثني و اس خلراره هديجة خجاذة مكياث كيةل من مح لكوريد اصوديوم+ ابيومني

بني ايوانث املح و اجملموػاث افؼاةل يف اربوثني

يرتسب اربوثني لن ارتانزي اؼاية من ايوانث املح ثناكس جزئياث اربوثني حمول مش بع من مح نربيخاث الاموهيوم+ ابيومني

ػيل الارثباط جبزئياث املاءفيلي اس خلرار اربوثني و يسيي حرسيبو

جشسية انثشوجيات تايالح انعاد انثقيهة-4

انالحظة االثىتة

يرتسب اربوثني بوجود امالح املؼادن اثليةل هرتاث افضة+ ابيومني

Eman Alshehri

انحشسية تاالحاض انقىية -5

انحقذيش انكي نهثشوجيات تاسحخذاو طشيقة الوسي-6

ال

انالحظة و االسححاج االثىتة

يرتسب اربوثني يف الك الاهبوبخني محض انرتيم املرنز + ابيومني

زاليث لكوريد محض اخليم+ ابيومني

750االيحصاص انضىئي عذ انطىل انىجي االثىتة

nm

0 ماء امللعر

mg/ml 0.19 20اربوثني اليايس

mg/ml 0.32 40اربوثني اليايس

mg/ml 0.46 60 اربوثني اليايس

mg/ml 0.512 80اربوثني اليايس

mg/ml 0.60 100اربوثني اليايس

0.170 اربوثني اجمليول

0.175 اربوثني اجمليول

Eman Alshehri

اختبار بيوريت

0

0.1

0.2

0.3

0.4

0.5

0.6

0.7

0 20 40 60 80 100 120

Ab

soe

rban

ce a

t 7

50

nm

protein Concetration

Eman Alshehri

1الاخذباراث اؼامة و اوصفية ىربوىيدراث

اخحثاس انزوتاية -1

انحيجة اناء األثىب

يذوة اجلوهوزاسىرايث الاحادية و اثنائية كابةل ذلوابن يف املاء خبالف

اسىرايث اؼديدت ل ثذوة يف املاء بسبب نرب جحميا اجلزيئ و

هنا حىون حمايي غروية غند ذوابهنا فاإ

يذوة اسىروز

حشيح اذلوابن انشا

اخحثاس يىنش -2

انالحظة األثىتة

حىون حلة بنفسجية اون بني سعحي الاهفصال يف الك الاهبوبخني و ابخايل هيدف الاخذبار حمول اجلوهوز

حمول اريبوز متزي او خؼرف ػيل وجود اىربوىيدراث

(اخحثاس اخحزاني في وسظ قاعذي)إخحثاس تذكث -3

انالحظة األثىتة

ايل (اجلوهوز)حىون راسب بأمحر برثلايل هديجة ان مرهب بندهت خيزتل يف وجود سىر خمزتل حمول اجلوهوز

)اهس يد انحاسوز الأمحر حير يظير ػيل شلك راسب بأمحر برثلايل خبالف اسىر غري خمزتل

حمول اسىروز (اسىروز

Eman Alshehri

:(اخحثاس اخحزاني في وسظ حضي )إخحثاس تاسافىيذ -4

انالحظة اإلثىتة

يف اوسط امحليض ثخفاػي اسىرايث الاحادية اخملزتةل بأرسع من اسىرايث اخملزتةل اثنائية حمول اجلوهوز

حير يىون راسب بون بأمحر ظويب ذلكل يس خخدم اكشف ابرافويد متزي بني اسىرايث

حمول االنخوز اخملزتةل الاحادية و اثنائية

إخحثاس تايم -5

انالحظة و االسححاج األثىتة

حمول اجلوهوزهو يىون افورفورال و اذلي بدوره غند جسخني اسىر امخلايس مع محض اييدرولكوريم فاإ

يخفاػي مع الاورسينول يىون ون اخرض مزرق ذلكل يس خخدم اكشف ابرافويد متزي بني

حمول اريبوز اسىرايث الاحادية امخلاس ية و اسداس ية

اخحثاس انسهفاىف -6

انالحظة و االسححاج األثىتة

احمول اجلوهوز

اىيخوانث ثفلد املاء بسبب ثفاػيا مع محض ايريولكوريم و حىون افوفورال

بسيوةل هبريت ملارهو ابلدلىيداث و يخفاػي افورفورال مع اريزورسينول يىون

ون امحر كرمزي ذلكل يس خخدم اكشف اسفاهوف متزي بني اسىرايث

الاحادية الادلىيدية و اىيخوهية

Eman Alshehri

اختبار بندكت

اختبار بايل

Eman Alshehri

: اخحي املايئ سىروز -2

اسىروز سىر زنايئ و ىو غبارت غن ارثباط ما بني اجلوهوز و افرنخوز و ل ثوجد دليو مجموػة اىربوهيي حرت ذلكل ىو سىر غري خمزتل ل

ل بؼد بأن يخحي اسىروز ايل مىوانثو (فرنخوز+جوهوز)يؼعي هديجة اجيابية مع اكشف بندهت اإ

اخذبار بندهت

هالحغ حىون راسب بأمحر برثلايل ايل اخرض لن اجلوهوز يىشف غن وجود اجلوهوز بؼد حتي اسىروز

.سىر خمزتل

اخذبار سفاهوف

يىشف غن وجود افرنخوز بؼد حتي اسىروز هالحغ حىون ون بأمحر داهن لأن افرنخوز سىر سدايس

.هيخوين

:اخحي املايئ نشا -3

يس خخدم ىذا الاخذبار غن ظبيؼة اسىر املىون جلزئ انشا و ذكل ابخحي املايئ يف وسط محيض حير يخىون اجلوهوز

اذلي يؼخرب سىر خمزتل خبالف انشا ل خيزتل حمول بندهت

اخذبار بندهت

يىشف غن وجود اجلوهوز بؼد حتي انشا هالحغ حىون راسب بأمحر برثلايل ايل اخرض لن اجلوهوز سىر

.خمزتل

اخذبار ايود

ايضا يىشف غن وجود اجلوهوز بؼد حتي انشا هالحغ اهو مل يخغري ون احملول ىذا يدل ان انشا حتي ايل

.اجلوهوز

الإخذباراث اؼمية سىرايث اؼديدت و اثنائية

وشف ايود -1

املالحظة الاهبوبة

مل يخغري ون احملول جوهوز

مل يخغري ون احملول املاخوز

يخىون ون بأزرق انشا

Eman Alshehri

اختبار بندكت و سلفانوف:التحلل المائي للسكروز

اختبار بندكت و اختبار اليود: التحلل المائي للنشا

Eman Alshehri

اخذبار اذلوابهية -1

اخذبار اخصنب -2

ىيدروهس يد اصوديوم اىحويل + وضؼنا زيت ازيخون

دكائق و بؼدىا يخىون اصابون 3اغيل احملول ملدت

. من املاء و يخىون دلينا رغوت يس خخدم حمول اصابون يف اخجارة اخاية ml 30هضيف

اخذبار فصي اصابون من احملول ابمتيح -3

اخذبار حتضري الاحامض ادلىنية من اصابون -4

:االخحثاسات انعاية نهذهى

المشاهدة االنبوبة

مل يذة حىون ظبلذني منفصخني زيت ازيخون+ ماء

ذاة لن الكورفورم غري كعيب زيت زيخون+ لكورفورم

المشاهدة االنبوبة

غند ادش بع ينفصي اصابون ػيل صورت غري ذائبة و يعفو فوق لكوريد اصوديوم اصب+ حمول اصابون

اسعح

المشاهدة االنبوبة

يخحي اصابون ايل الاحامض ادلىنية ػيل صورت حرت غري ذائبة حامم زجي+ HCL+ حمول اصابون

يف املاء

Eman Alshehri

اخذبار حىوين امالح الاحامض ادلىنية اغري ذائبة -5

اخذبار خالث انحاس -6

المشاهدة االنبوبة

حىون راسب هديجة ايوانث ااكس يوم و املغنس يوم ثؼمي ػيل لكوريد ااكس يوم+ حمول اصابون

حرسيب اصابون وجتؼةل غري ذائب يف املاء فيصؼب حىون رغوت لكوريد املغنس يوم+ حمول اصابون

المشاهدة االنبوبة

ل يخفاػي خالث انحاس مع ازيوث خالث انحاس+ ايرث ابرتويل+ زيت زيخون

ييم حىون ظبلذني و ميىن اس خخالص املح انحايس خالث انحاس+ ايرث ابرتويل+ محض الاو

حىون راسب مزرق مموج و ابخايل لميىن اس خخالص املح خالث انحاس+ ايرث ابرتويل+ محض الاسديارك

انحايس

Eman Alshehri

اختبار الذوبانية للدهون

اختبار التصبن

Eman Alshehri

الصابون من الدهنية االحماض تحضير اختبار

اختبار خالت النحاس

Eman Alshehri

نزميــــــــــــــــــاث الإ

a) Enzymatic Activity

Incubation Time

(min) Colour intensity(-, +,++ or +++)

Tube A Tube B Tube C

0 + - -

5 ++ - -

10 +++ - -

15 +++ - -

20 +++ - -

25 +++ - -

b) Chemical Nature of Polyphenol Oxidase

Tube Treatment Colour intensity

A Control ++

B Trypsin -

C TCA -

D phenylthiourea -

c) Substrate Specificity

Substrate Colour intensity

Catechol +++

Phenol -

Hydroquinone +

d) Temperature and Enzymatic Activity

Temperature Colour intensity

0 ⁰C -

37 ⁰C +++

70 ⁰C -