UJI EFEK EKSTRAK ETANOL 70% KULIT BUAH ASAM JAWA (Tamarindus indica L) TERHADAP PENURUNAN KADAR GLUKOSA DARAH TIKUS JANTAN GALUR WISTAR (Rattus norvegicus) YANG

DIINDUKSI ALOKSAN

SKRIPSI

Untuk memenuhi sebagian persyaratan

Mencapai derajat Sarjana Kedokteran

Diajukan Oleh :

Ririh Rahadian Syaputri

J50010 0050

FAKULTAS KEDOKTERAN

UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH SURAKARTA2014

MOTTO

“Sesungguhnya Allah tidak akan mengubah nasib suatu kaum

kecuali kaum itu sendiri yang mengubah apa apa yang pada

diri mereka”

QS ( Ar-Ra’d[13]: 11)

Bekerjalah dengan giat dan keras seakan-akan engkau akan

hidup seribu tahun lagi, tetapi beribadahlah dengan khusyu’

seakan-akan besok engkau akan mati.

Berusaha sekeras mungkin untuk mencapai yang kau inginkan,

jangan lupakan doa dan selalu diiringi belajar ikhlas dalam

segala hal.

“Wanita yang kuat adalah ketika 7 milyar orang di dunia tidak

pernah tahu dia menangis. Terus berusaha, tidak menyerah.

Terus berdiri, setiap kali jatuh terduduk.”

(Tere Liye)

“Masa depan adalah milik mereka yang percaya pada indahnya

mimpi-mimpi mereka.”

(Eleanor Roosevelt)

PRAKATA

Alhamdulillah, segala puji syukur atas kehadirat Allah SWT atas segala

rahmat dan kekuatan, sholawat serta salam tetap tercurahkan kepada Nabi

Muhammad SAW dan para sahabatnya.

Penyusunan skripsi dengan judul “Uji Efek Ekstrak Etanol 70% Kulit

Buah Asam Jawa (Tamarindus indica L) Terhadap Penurunan Kadar Glukosa

Darah Tikus Jantan Galur Wistar (Rattus norvegicus) yang diinduksi aloksan” ini

dalam rangka memenuhi persyaratan untuk memperoleh gelar Sarjana Kedokteran

di Fakultas Kedokteran Universitas Muhammadiyah Surakarta. Semoga skripsi ini

bermanfaat dan menambah wawasan tentang kegunaan tanaman.

Penyelesaian skripsi ini tidak lepas dari dukungan dan doa dari berbagai

pihak. Untuk itu penulis mengucapkan banyak terimakasih kepada :

1. Allah SWT yang telah memberi kekuatan, petunjuk dan segala Rahmatnya

2. Nabi Muhammad SAW sebagai tuntunan terbaik, dan para sahabatnya.

3. Kedua orang tua tersayang Sudarno, SH dan Sri Harnanik, terimakasih

sebesar-besarnya tanpa kalian saya tidak aka bisa seperti ini.

4. Prof. Dr. Bambang Soebagyo, dr., SpA(K)., selaku Dekan Fakultas

Kedokteran Universitas Muhammadiyah Surakarta.

5. M. Shoim Dasuki, dr., M.Kes., selaku kepala biro skripsi beserta seluruh staf

skripsi yang telah memberikan arahan dan bantuan.

6. Dr. EM Sutrisna, dr., M.Kes., selaku Pembimbing I yang telah berkenan

meluangkan waktu dalam membimbing, memotivasi, dan memberikan arahan

kepada penulis.

7. Devi Usdiana, dr. selaku Pembimbing II atas segala bimbingan, arahan, saran,

dan waktu yang telah diberikan kepada penulis.

8. Retno Sintowati, dr., M.Sc., selaku Penguji Utama yang telah berkenan

menguji dan memberikan saran demi kesempurnaan penulisan skripsi ini.

9. Kedua adikku Dwi Hengky Arga Putra dan A. Hardika Tri Utama yang

member canda tawa, senang dirumah tercinta.

10. Saudara-saudaraku, nenekku yang memberi warna dihidup ini.

11. Rizal Dwi Febriyana terimakasih atas dukungan, semangat, tempat keluh

kesah dan lain – lain.

12. Bapak Mujiyana dan ibu Muryanti atas nasehat dan dukungannya

13. Sahabat seperjuangan Emy Trisnawati, buat semangat, dan waktu bersama-

sama.

14. Sahabat di Farmasi kakak Aan A’krom, Linda Mahapatih, ungky, ari,

trimakasih atas kebersamaan di Farmasi.

15. Valensia ika K terimakasih dukungannya.

16. Sahabat karib seangkatan Nuansa Bunga Atmantika, Ermay Hayu P, Ika

Nurwulandary, Astri K, Maria S, trimakasih atas canda tawa, kebersamaannya

slama ini.

17. Reni F, nafis, teman-teman asdos farmakologi, trimakasih atas

kebersamaannya.

18. Mas wahab trimakasih sudah dipinjami skripsinya sebagai acuan pembuatan

skripsiku.

19. Teman seperjuangan penelitian farmakologi Ermay Hayu P, Rizky Maidisya

T, A. Roni R, Chaviz Ilham H, semangat seperjuangan.

20. Bu yuni yang memberi saran dalam pembuatan skripsi ini.

21. Anak-anak kos panembahan, mbak Wieke, mbak ayu, Nia, putri, nilla, Kristin,

nana, ayu, niken, risty dan yuni, sebagai keluarga baru di kosan.

22. Semua teman angkatan 2010 FK UMS sebagai saudara sejawat , penulis tidak

bisa menyebutkan satu per satu.

23. Semua pihak yang telah membantu dalam penyusunan skripsi ini.

Penulis menyadari masih banyak kekurangan dalam penelitian dan

penyusunan skripsi ini. Kritik dan saran sangat diharapkan demi perbaikan. Akhir

kata, semoga skripsi ini dapat bermanfaat bagi seluruh pembaca.

Surakarta, ……………………………..

Ririh Rahadian Syaputri

NIM.J500100050

DAFTAR ISI

Halaman Judul ........................................................................................... i

Lembar Pengesahan ................................................................................... ii

Pernyataan ................................................................................................... iii

Motto ............................................................................................................. iv

Prakata ......................................................................................................... v

Daftar Isi ...................................................................................................... vii

Daftar Tabel ................................................................................................. x

Daftar Gambar ............................................................................................ xi

Daftar Lampiran ......................................................................................... xii

Abstrak ........................................................................................................ xiii

Abstract ....................................................................................................... xiv

Bab I Pendahuluan

A. Latar Belakang .................................................................................. 1

B. Rumusan Masalah ............................................................................. 3

C. Tujuan Penelitian .............................................................................. 3

D. Manfaat Penelitian ............................................................................ 4

Bab II Tinjauan Pustaka

a. Landasan Teori

1. Asam Jawa ...........................................................................................5

2. Teknik Ekstraksi....................................................................................8

3. Glukosa Darah dan Diabetes Melitus..................................................10

a. Glukosa Darah ..............................................................................10

b. Diabetes Melitus ...........................................................................11

4. Metode Pemeriksaan Glukosa Darah ..................................................16

5. Model Hewan Dalam Pengujian Efek Anti Diabetes .........................17

6. Aloksan ...............................................................................................18

7. Glibenklamid .......................................................................................19

8. Tikus Putih...........................................................................................20

9. Kromatografi Lapis Tipis (KLT) ........................................................21

B. Kerangka Teori..........................................................................................22

C. Hipotesis ...................................................................................................23

Bab III Metodologi Penelitian

A. Jenis Penelitian ..........................................................................................24

B. Tempat Penelitian .....................................................................................24

C. Subyek dan Obyek Penelitian ...................................................................24

D. Estimasi Besar Sampel ..............................................................................24

E. Kriteria Restriksi........................................................................................25

F. Identifikasi Variabel ..................................................................................25

G. Definisi Operasional .................................................................................26

H. Instrumentasi Penelitian ............................................................................26

I. Skema Penelitian .......................................................................................28

J. Cara Kerja .................................................................................................29

K. Analisis Data..............................................................................................31

L. Jadwal Penelitian ......................................................................................32

Bab IV Hasil dan Pembahasan

A. Hasil Penelitian .........................................................................................33

1. Determinasi Tanaman .........................................................................33

2. Rendemen ...........................................................................................33

3. Hasil Uji Orientasi Efek Ekstrak Terhadap Penurunan Glukosa Darah

Tikus ...................................................................................................34

4. Hasil Uji Efek Antidiabetes ................................................................35

5. Hasil Analisis Statistik ........................................................................36

6. Potensi Penurunan Kadar Glukosa Darah Ekstrak Kulit Buah Asam

Jawa Dibanding Glibenklamid ............................................................40

7. Hasil KLT ...........................................................................................41

B. Pembahasan ...............................................................................................43

Bab V Kesimpulan dan Saran

A. Kesimpulan ...............................................................................................49

B. Saran .........................................................................................................49

Daftar Pustaka ....................................................................................................50

DAFTAR TABEL

Tabel 1 : Hasil Uji fitokimia ekstrak asam jawa

Tabel 2 : Kadar glukosa darah sewaktu dan puasa sebagai patokan penyaring dan

diagnosis DM (mg/dL)

Tabel 3 : Hasil Uji Orientasi Dosis Efek Ekstrak Tamarindus indica L Terhadap

Penurunan Glukosa Darah Tikus

Tabel 4 : Data Rerata Kadar Glukosa Darah Prestest - Posttest

Tabel 5 : Presentase Rerata Penurunan Kadar Glukosa Darah

Tabel 6 : Hasil Uji LSD H+4

Table 7 : Hasil Uji LSD H+7

DAFTAR GAMBAR

Gambar 2. 1 : Tanaman asam jawa ( Tamarindus indica L).

Gambar. 4.2. : Hasil Uji KLT Ekstrak Etanol 70% Kulit Buah Asam Jawa.

DAFTAR LAMPIRAN

Lampiran 1 : Hasil Pengukuran Kadar Glukosa Darah Tikus

Lampiran 2 : Data Hasil Penurunan Glukosa Darah Pretest-Posttest

Lampiran 3 :

a. Rerata Kadar Glukosa Darah Pretestb. Rerata Kadar Glukosa Darah Posttest H4c. Rerata Kadar Glukosa Darah Posttest H7d. Rerata % Penurunan Kadar Glukosa Darah H4e. Rerata % Penurunan Kadar Glukosa Darah H7f. Presentase Rerata Penurunan Kadar Glukosa Darah

Lampiran 4 : Uji Normalitas

Lampiran 5 : Uji Homogenitas Varian dan One Way Anova

Lampiran 6 : Uji LSD (Least Significant Difference)

Lampiran 7 : NilaiKonversi Dosis Manusia Dan Hewan

Lampiran 8 : Volume Maksimal Larutan Obat Yang Dapat Diberikan Pada Hewan

Uji

Lampiran 9 : Surat Keterangan Determinasi

Lampiran 10 : Surat Keterangan Selesai Penelitian KLT

Lampiran 11 : Surat Keterangan Selesai Penelitian Glukosa Darah

ABSTRAK

Ririh Rahadian Syaputri, J500100050, 2014. Uji Efek Ekstrak Etanol 70% Kulit Buah Asam Jawa (Tamarindus indica L) Terhadap Penurunan Kadar Glukosa Tikus Jantan Galur Wistar (Rattus norvegicus) yang diinduksi Aloksan.

Latar Belakang : Asam Jawa ( Tamarindus indica L) merupakan tanaman tradisional yang mempunyai khasiat sebagai antidiabetes. Senyawa kimia yang dapat menurunkan glukosa darah dalam kulit buah asam jawa yaitu flavonoid dan proanthocyanidin (tanin yang terkondensasi). Mekanisme dari senyawa tersebut yaitu menghambat penyerapan glukosa di intestinal dan menghambat adipogenesis serta menstimulasi pelepasan insulin di sel β pankreas sehingga dapat menurunkan kadar glukosa darah.

Tujuan Penelitian : Mengetahui efek ekstrak etanol 70% kulit buah asam jawa (Tamarindus indica L) terhadap kadar glukosa darah tikus yang diinduksi aloksan dan mengetahui kandungan ekstrak dari uji KLT

Metode Penelitian : Eksperimental laboratorik, rancangan penelitian pretest – posttest with control group design. Hewan uji dibagi dalam 5 kelompok perlakuan masing-masing kelompok 5 ekor tikus. Kelompok I : kontrol positif (glibenklamid 0,126mg/200gBB), kelompok II : kontrol negative (CmcNa), kelompok III, IV, V : ekstrak etanol 70% kulit buah asam jawa dengan dosis berturut-turut 20mg/200gBB, 40mg/200gBB, dan 50mg/200gBB. Kandungan senyawa ekstrak diuji dengan profil Kromatografi Lapis Tipis mengunakan plat silica gel.

Hasil Penelitian : Berdasarkan hasil uji ANOVA data penurunan glukosa darah pada hari ke 4 dan ke 7 pemberian ekstrak nilai probabilitas signifikan (p) : 0,000 dengan demikian p<0,05 maka efek pada 5 kelompok perlakuan terdapat perbedaan penurunan kadar glukosa darah secara bermakna. Kemudian untuk mengetahui perbandingan setiap kelompok dilanjutkan uji LSD, pada hari ke4 dan ke 7 diperoleh hasil antara kelompok kontrol negative (II) dengan semua kelompok (I,III,IV,V) nilai signifikansi adalah 0,000.(p<0,05). Hasil uji KLT diperoleh kandungan ekstrak etanol 70% kulit buah asam jawa yaitu flavonoid, terpenoid, alkaloid, dan fenolik (Tanin).

Kesimpulan : Pemberian ekstrak etanol 70% kulit buah asam jawa (Tamarindus indica L) dapat menurunkan kadar glukosa darah pada tikus yang diinduksi aloksan. Hasil uji KLT terdapat senyawa yang sama dengan teori yaitu flavonoid, alkaloid dan fenolik (tanin).

Kata Kunci : Ekstrak kulit buah asam jawa (Tamarindus indica L), glukosa darah, KLT (Kromatografi lapis Tipis)

ABSTRACT

Ririh Rahadian Syaputri, J500100050, 2014. Effects Test Ethanol 70% Extract of Tamarindus indica L rind on Blood Glucose Level in Alloxant-Induced Rattus norvegicus Wistar strain White Rat.

Background : Tamarindus indica L is one of traditional plant that has antidiabetic effect. Chemical substance in Tamarindus indica L rind which can reduce blood glucose level is flavonoid and proanthocyanidin (condensed tannins). The mechanism of that compound is inhibit glucose absorption in intestinal, inhibit adipogenesis and stimulate insulin release by β pancrease cell so that can reduce blood glucose level.

Objective of Research : To know the effect of ethanol 70% extract of Tamarindus indica L rind on blood glucose level in alloxan induced rat and to know chemical substance of extract by TLC test.

Method of Research : Experimental laboratory, design of research was pretest – posstest with control group. Examination animal divided into 5 experimental groups and each group consist of 5 rats. Group I : positive control (glibenclamide 0,126 mg/200g Body weight), Group II : negative control (CmcNa), Group III, IV, V : ethanol 70% extract of Tamarindus indica L rind with the dosage of 20 mg/ 200g Body Weight, 40 mg/200g Body Weight, and 50 mg/200 g Body Weight. Chemical substance in Tamarindus indica L rind tested with Thin Layer Chromatography profile using silica gel plate.

Results of Research : Based on ANOVA test, blood glucose level reduction on day 4 and 7 treated extract, significant probability value (p) : 0,000 on which then p < 0,05 thus the effect from 5 experimental groups has differences on blood glucose level reduction is significantly. Then, to know the comparison of each group continued with LSD test on day 4 and 7 results between negative control group (II) with all of groups (I,III,IV,V) significant probability value is 0,000 (p <0,05). The results of TLC test is chemical substance in ethanol 70% extract Tamarindus indica L rind are flavonoid, terpenoid, alkaloid, and fenolik (tanin).

Conclusion : Treatment with ethanol 70% extract Tamarindus indica L rind can reduce blood glucose levels in alloxan induced rat. The result of TLC test there are same chemical substance with theory are flavonoid, alkaloid and fenolik (tanin).

Keywords : extract Tamarindus indica L rind, blood glucose, TLC (Thin Layer Chromatography)

BAB I

PENDAHULUAN

A. Latar Belakang Masalah

Diabetes Melitus merupakan suatu penyakit kelainan metabolisme

karbohidrat yang disebabkan oleh adanya peningkatan kadar glukosa darah yang

ditandai dengan penderita sering mengalami poliuri (banyak buang air kecil),

polifagi (banyak makan), dan polidipsi (banyak minum) (Khasanah, 2012). World

Health Organisation (WHO) menjelaskan bahwa Diabetes Melitus merupakan

penyakit peringkat ke 4 penyebab kematian karena non commnicable disease

(penyakit yang tidak menular). Selain itu, WHO memperkirakan pada tahun 2025

jumlah penderita Diabetes Melitus akan meningkat menjadi 300 juta orang

(Suyono, 2009). Lebih dari 80% kematian diabetes terjadi di negara

berpenghasilan rendah dan menengah (WHO, 2013). Di Indonesia, Diabetes

Melitus merupakan urutan ke-10 dari jumlah penderita Diabetes Melitus

terbanyak di dunia dengan jumlah 7,3 juta orang dan diperkirakan pada tahun

2030 jumlah penderita Diabetes Melitus akan meningkat menjadi 11,8 juta orang

(IDF, 2011). Berdasarkan profil departemen kesehatan Jawa Tengah tahun 2008

penderita diabetes mencapai 261,462 pasien.

Pengobatan modern untuk DM dengan obat-obatan pharmaceutik seperti

sulfonylurea dan biguanides telah memiliki hasil yang memuaskan, tetapi

memiliki efek samping yang tidak diinginkan. Terapi insulin efektif untuk

mengontrol peningkatan kadar glukosa darah namun tidak efektif melalui

pemberian oral, penyimpanan obat harus pada suhu tertentu dan konstan, apabila

dosis berlebih akan mengakibatkan hipoglikemia. Karena beberapa alasan

tersebut, dalam beberapa tahun terakhir obat tradisional menjadi popular untuk

dijadikan pengobatan karena lebih aman (Maiti et al., 2005).

Bangsa Indonesia sudah lama mengenal dan memanfaatkan tanaman

berkhasiat obat sebagai penanggulangan masalah kesehatan. Pengetahuan tentang

tanaman berkhasiat obat pada masyarakat berdasar pada pengalaman dan

ketrampilan yang diwariskan secara turun temurun (Sari, 2006). Disebutkan

dalam Undang-undang No 23 Tahun 1992 tentang Kesehatan bahwa obat

tradisional merupakan bahan atau ramuan yang berasal dari bahan tumbuhan,

bahan hewan, bahan mineral, sediaan sarian (galenik) atau campuran bahan

tersebut yang telah digunakan untuk pengobatan berdasarkan pengalaman

(DEPKES, 2007). Menurut WHO, dibeberapa Negara Asia dan Afrika 80%

populasi menggunakan obat tradisional untuk perawatan kesehatan primer.

Beberapa Negara bahkan telah mempunyai kebijakan nasional untuk mengatur

obat tradisional. Pengaturan produk obat-obatan tradisional tersebut diatur

menurut katagori terapi obat tradisional. WHO juga mendukung, mengakui obat

tradisional sebagai perawatan kesehatan primer, bahkan meningkatkan akses

perawatan serta pelestarian pengetahuan dan sumber daya dari tanaman yang

digunakan sebagai pengobatan tradisional (WHO, 2008).

Salah satu tanaman tradisional yang mempunyai banyak manfaat yaitu

asam jawa (Tamarindus indica L). Beberapa khasiat tanaman asam jawa telah

dilaporkan antara lain getah daun digunakan untuk diuretik, daun memiliki khasiat

kholagogik, laksatif, yang bersama buahnya berguna untuk kongesti hati,

hemorrhoid dan konstipasi (Rahmadiah et al., 2009). Dalam kehidupan sehari –

hari asam jawa dapat juga digunakan untuk meningkatkan nafsu makan, sebagai

obat kumur untuk sakit tenggorokan dan untuk mengobati luka, bahkan dapat

untuk membantu dalam pemulihan sensasi rasa dalam kasus kelumpuhan (Ahmed

et al, 2005). Berdasarkan penelitian Bhadorya et al (2011) mengenai potensial

asam jawa, kandungan semua ekstrak asam jawa termasuk kulit buah

menunjukkan antioksidan yang baik, namun kandungan yang paling tinggi

terdapat pada daging buah asam jawa. Asam jawa juga mengandung protein

dengan asam amino essensial, tinggi karbohidrat yang menyediakan energi, kaya

akan mineral, kalium, kalsium magnesium, sedikit mengandung zat besi dan

vitamin A.

Antioksidan yang terkandung dalam kulit buah asam jawa berupa

polifenol yang didominasi oleh proanthocyanidin atau yang disebut dengan

tannin. Efek tannin yaitu menghambat penyerapan glukosa di intestinal dan

menghambat adipogenesis sehingga berpotensi pada pengobatan diabetes. Selain

itu dapat memperbaiki stress oksidatif patologik pada situasi diabetik, tannin juga

bertindak sebagai anti radikal bebas dan mengaktifkan enzim antioksidan yang

meregenerasi sel β pankreas (Sudjaroen et al, 2005 ; Kumari dan Jain, 2012).

Terdapat beberapa penelitian mengenai hubungan asam jawa dengan

Diabetes Mellitus. Pada penelitian Moudi et al (2010) tentang efek ekstrak air biji

Tamarindus indica L dapat menurunkan glukosa darah tikus dengan metode

stereological yang memberikan hasil signifikan pada dosis 200mg/kgBB setiap

harinya pada tikus yang diinduksi streptozotosin. Niranjana et al (2011) juga

menyebutkan bahwa terdapat efek penurunan glukosa darah dari ekstrak air biji

asam jawa pada hewan uji yang diinduksi menjadi bentuk Diabetes Melitus tipe

ringan dan tipe berat dengan dosis tipe ringan 80 mg dan tipe berat 120 mg/100g

berat badan hewan uji.

Dari kandungan tersebut dan masih banyak penelitian yang sering

menggunakan biji tetapi sedikit penelitian tentang efek kulit asam jawa sebagai

antidiabetes, maka penulis ingin mengetahui apakah ada efek ekstrak kulit buah

Tamarindus indica L terhadap penurunan kadar glukosa darah tikus putih yang

diinduksi aloksan.

B. Perumusan Masalah

Berdasarkan latar belakang dapat dirumuskan permasalahan : apakah

pemberian ekstrak kulit buah Tamarindus indica L dapat menurunkan kadar

glukosa darah pada tikus yang diinduksi aloksan?

C. Tujuan Penelitian

Untuk mengetahui efek ekstrak kulit buah Tamarindus indica L terhadap

penurunan kadar glukosa darah tikus yang diinduksi aloksan.

D. Manfaat Penelitian

1. Manfaat Teoritis

Memberikan tambahan pengetahuan dan penjelasan terhadap bukti empiris

pengaruh pemberian ekstrak kulit buah Tamarindus indica L terhadap

penurunan kadar glukosa darah tikus yang diinduksi aloksan.

2. Manfaat Aplikatif

Apabila terbukti bahwa terdapat efek ekstrak kulit buah Tamarindus indica L

terhadap penurunan kadar glukosa darah tikus yang diinduksi aloksan maka

diharapkan penelitian ini dapat digunakan sebagai dasar untuk uji preklinik

lebih lanjut.

BAB II

LANDASAN TEORI

A. Tinjauan Pustaka

1. Asam Jawa

Klasifikasi tanaman

Divisi : Spermatophyta

Sub divisi : Angiospermae

Kelas : Dicotyledoneae

Bangsa : Resales

Suku : Leguminosae

Marga : Tamaridus

Jenis : Tamarindus indica L

Asam jawa dengan nama ilmiah Tamarindus indica L adalah nama

sejenis pohon dengan buah lonjong dan masam. Di Negara Indonesia sendiri

terdapat beberapa nama lain asam jawa seperti Bak mee (Aceh), celagi (Bali),

tangkal asem (Sunda), asang jawi (gorontalo). Nama-nama lainnya dibeberapa

Negara adalah : tamarinde (Afrika), aradeib, ardeib (Arab); tamarinda,

tamarino (Brazil); luo-wang, lo-wang-tsu (Cina); tamarinde, tamarindenbaum

(Jerman); teteli, tetuli, tentul (India); tamrisi (Ghana), tamarin, tamarinier

(Prancis) ( Lim, 2012; Warintek, 2013).

Deskripsi tanaman asam jawa berperawakan pohon tinggi besar,

dengan tinggi ± 25 m. Batang tegak, berkayu, bulat, permukaan banyak

lentisel, percabangan simpodial, coklat muda. Daun majemuk, lonjong,

berhadapan, panjang sekitar 1- 2,5 cm, lebar 0,5 – 1 cm, mempunyai tepi rata,

ujung tumpul, pangkal membulat, berwarna hijau, halus, pertulangan

menyirip, halus, dan bertangkai dengan panjang ± 0,2 cm. Bunga majemuk,

berbentuk tandan, berada di ketiak daun, tangkai panjang ± 0,6 cm, warna

kuning, kelopak bentuk tabung, hijau kecoklatan, benang sari warna putih

berjumlah banyak, dan putik putih, mahkota kecil, berwarna kuning. Buah

polong, panjang ± 10 cm, lebar ± 2 cm, hijau kecoklatan. Akar tunggang,

berwarna coklat kotor ( Warintek, 2013).

Gambar 2.1 Tanaman asam jawa ( Tamarindus indica L).

Kandungan nutrisi asam jawa antara lain pada asam jawa matang

mengandung 40 – 50 % buah yang dapat dimakan dan per 100 g

mengandung : 17,8-35,8 g. air, 2-3 g. protein, 0,6 g. lemak,: 41,1-61,1 g.

karbohidrat, 2,9 g serat;: 2,6-3,9 g abu, 34-94 mg. kalsium, 34 mg -78. fosfor,

0,2-0,9 mg. besi, 0,33 mg 'tiamin (vitamin B1), 0,1 mg. riboflavin (vitamin

B2), 1 mg. niacin (vitamin B3), 44 mg. vitamin C. Biji atau benih segar

mengandung 13% air, 20% protein, lemak 5,5%, 59% karbohidrat, abu 2,4%

dan sisanya adalah amyloid, phytohemaglutinins dan flavonoid. Daging buah,

daun, dan batang mengandung saponin, flavonoid dan tannin (Soemardji,

2007).

Isolasi dan penentuan struktur senyawa fenolik antioksidan dari

benih dan kulit buah asam jawa menyimpulkan bahwa terdapat kandungan

polifenol sebagai antioksidan. Polifenol dalam kulit buah didominasi oleh

proanthocyanidin (73,4 %) dalam berbagai bentuk (+)-catechin (2.0 %),

procyanidin B2 (8,2%), (-)-epicatechin (9.4%), procyanidin trimer (11,3%),

procyanidin tetramer (22,2%), procyanidin pentamer (11,6%), procyanidin

heksamer (12,8%), bersama dengan taxifolin (7,4%), apigenin (2.0%),

eriodictyol (6,9%), luteolin (5.0%) dan naringenin (1.4%) dari total fenol.

Ekstraksi kulit buah dan biji menggunakan aseton, methanol, asam asetat

hanya mendapatkan kandungan polifenol berupa oligomer procyanidin, tetapi

hasilnya jauh lebih tinggi. Dari hasil tersebut menunjukkan bahwa asam jawa

dapat menjadi produk pencegah kanker di daerah tropis (Sudjaroen et al.,

2005).

Dari hasil uji fitokimia ekstrak asam jawa didapatkan beberapa

senyawa yang dihasilkan dari ekstra air dan etanol 70%, yaitu :

Tabel 1 Hasil Uji fitokimia ekstrak asam jawa

NO SENYAWAEKSTRAK

AIR ETANOL 70%

1 Alkaloid ++ +++

2 Flavonoid ++ +

3 Saponin + +++

4 Steroid + +

5 Triterpenoid - -

6 Tanin ++ +++

Keterangan:

+ = terdeteksi mengandung senyawa metabolit tersebut.

- = tidak terdeteksi mengandung senyawa metabolit tersebut.

(Doughari, 2006)

Dalam kehidupan sehari-hari tanaman asam jawa banyak

dimanfaatkan masyarakat untuk tujuan tertentu. Daging buahnya digunakan

untuk dimakan seperti dalam bumbu masakan, permen, selai dan jus. Biji

digunakan untuk bahan produk farmasi, stabilkan eskrim, mayones, dan keju.

Daun dan bunga sebagai bumbu masakan yang banyak digunakan di masakan

Thailand dan salad. Batang pohon berguna sebagai bahan bakar maupun

bahan bangunan (Williams, 2006).

Proanthocyanidin yang merupakan kandungan terbanyak dari kulit

buah asam jawa mempunyai nama lain yaitu tannin khususnya tannin yang

terkondensasi yang termasuk oligomer dan polimer dari monomer flavonoid

yang lebih khususnya adalah polyflavan (molekul kental flavonoid dengan

cincin C jenuh (Beecher , 2004). Mekanisme tannin sebagai antidiabetik

terdapat beberapa mekanisme yaitu menghambat penyerapan glukosa

diintestinal dan menghambat adipogenesis. Mekanisme tersebut yaitu

menurunkan absorbsi nutrisi (seperti katein teh) dengan menghambat

penyerapan glukosa di intestinal. Pada penghambatan adipogenesis dengan

menginduksi regenerasi sel β pankreas dan berefek langsung pada sel adipose

yang menguatkan aktivitas insulin. Selain itu tannin bertindak sebagai

pemangsa radikal bebas dan mengaktifkan enzim antioksidan. Pada

peningkatan uptake glukosa dalam darah melalui aktivasi mediator jalur

signal insulin, seperti PI3K (phosphoinositide 3-Kinase), p38 MAPK

(Mitogen Aktivated Protein Kinase) dan translokasi GLUT-4 sehingga

menurunkan glukosa dalam darah (Kumari dan Jain, 2012).

Selain itu flavonoid itu sendiri merangsang sekresi insulin dan

meregenerasi kerusakan sel beta pankreas untuk antihiperglikemik.

Antioksidan secara umum juga berpengaruh pada glukosa darah, mekanisme

antioksidan dalam antihiperglikemia yaitu mengurangi stress oksidatif pada

terjadinya diabetes, selain itu antioksidan bekerja dengan cara mengurangi

glukosa dalam darah dan meningkatkan kadar insulin plasma (Widowati,

2008).

2. Teknik Ekstraksi

Ekstrak merupakan sediaan kering, kental, atau cair yang dibuat dengan

menyari simplisia nabati maupun hewani dengan beberapa cara tanpa

pengaruh matahari. Simplisia itu sendiri berarti bahan alam yang telah

dikeringkan yang digunakan untuk pengolahan dan belum mengalami

pengolahan (MENKES, 2009). Tujuan pembuatan ekstrak itu sediri adalah

untuk menstandarisasi tumbuhan untuk menjamin keseragaman mutu,

keamanan dan khasiat produk akhir. Simplisia juga dapat digunakan

tersendiri walupun sebelum diekstrak, tetapi ekstrak mempunyai kelebihan

dibandingkan silmplisia asalnya yaitu penggunaan lebih simpel, bobot

pemakaiannya lebih sedikit dibandingkan berat tumbuhan asalnya (BPOM,

2005).

Teknik ekstraksi membutuhkan cairan penyari dengan berbagai

pertimbangan. Pertimbangan tersebut meliputi : murah dan mudah diperoleh,

stabil secara fisika maupun kimia, bereaksi netral, tidak mudah menguap dan

tidak mudah terbakar, selektif menarik zat yang dikehendaki, dan tidak

mempengaruhi zat yang berkhasiat. Dalam Farmakope Indonesia ditetapkan

beberapa cairan penyari yaitu air, etanol, dan etanol-air. Air dipertimbangkan

sebagai cairan penyari karena mudah diperoleh, stabil, tidak mudah menguap,

tidak muah terbakar, tidak beracun dan alamiah. Air dapat melarutkan

kandungan senyawa garam alkaloid, minyak penguap, glikosida, tannin dan

gula, gom, pati, protein, pectin, dan zat warna. Akan tetapi terdapat kerugian

yaitu tidak selektif, sari dapat ditumbuhi kapang dan kuman serta cepat rusak.

Selanjutnya etanol mempunyai kelebihan lebih selektif, kapang dan kuman

sulit tumbuh dalam etanol diatas 20%, tidak beracun, netral, absorbsinya

baik, etanol dapat bercampur dengan air dalam segala perbandingan,

sedangkan kerugian etanol lebih mahal. Etanol dapat melarutkan alkaloid

basa, minyak penguap, glikosida, kurkumin, kumarin, antrakinon, flavonoid,

steroid, dammar dan klorofil (DEPKES, 1986).

Berikut ini beberapa metode ekstraksi menurut BPOM (2010) dan

DEPKES (1986):

1. Infusa (Infus)

Infusa merupakan sediaan cair yang dibuat dengan cara

mengekstraksi simplisia nabati dengan air pada suhu 90˚ C selama 15

menit. Teknik ini merupakan cara yang paling sederhana untuk membuat

sediaan herbal dari bahan lunak seperti daun dan bunga. Sediaan infusa

dapat dikonsumsi panas maupun dingin.

2. Maserasi

Maserasi merupakan cara ekstraksi yang sederhana. Maserasi

dilakukan dengan merendam serbuk simplisia dalam cairan penyari

kemudian zat aktif akan larut karena perbedaan konsentrasi. Setelah

beberapa hari diambil ekstrak kemudian dipanaskan sambil diaduk

sehingga diperoleh ekstrak kental.

3. Perkolasi

Prinsip perkolasi yaitu serbuk simplisia ditempatkan dalam bejana

atau percolator dibawahnya ada sekat berpori, kemudian cairan penyari

dialirkan dari atas ke bawah melalui serbuk tersebut kemudian ditutup dan

ditunggu selama 24 jam. Hal tersebut dilakukan berulang sampai

mendapatkan 0,8 bagian perkolat cair, kemudian dipisahkan dan sisanya

diuapkan sampai mendapat 0,2 bagian perkolat yang selanjutnya dicampur

kedalam perkolat pertama.

3. Glukosa Darah dan Diabetes Mellitus

a. Glukosa Darah

Glukosa merupakan hal terpenting yang berperan dalam penyedia

energi di dalam tubuh. Glukosa tersebut diperoleh dari karbohidrat yang

dikonsumsi baik monosakarida, disakarida maupun polisakarida. Glukosa

tersebut di dalam hati akan dikonversikan menjadi glukosa. Dalam tubuh

manusia glukosa diserap oleh usus halus kemudian didistribusikan ke semua

sel dalam tubuh melalui aliran darah. Penyimpanan glukosa di dalam tubuh

tidak hanya tersimpan dalam bentuk glikogen di dalam otot dan hati namun

tersimpan dalam plasma darah dalam bentuk glukosa darah ( blood glucose)

(Irawan, 2007). Jumlah glukosa yang diambil dan dilepaskan hati kemudian

digunakan oleh jaringan perifer bergantung pada keseimbangan fisiologi

beberapa hormon yaitu hormon yang menurunkan kadar glukosa darah

(insulin) dan hormon yan meningkatkan glukosa darah (glukagon). Kedua

hormon tersebut disekresi dalam sel-sel pankreas yaitu sel beta pulau

langerhans mensekresi insulin dan sel alfa pulau langerhans mensekresi

glukagon (Schteingart, 2006).

Keadaan pasca penyerapan kadar glukosa darah mamalia termasuk

manusia dan tikus yaitu antara 4,5 – 5,5 mmol/L. Setelah mengkonsumsi

karbohidrat, kadar meningkat menjadi 6,7 – 7, 2 mmol/L, dan pada saat

kelaparan kadar turun menjadi 3,3 – 3,9 mmol/L. Kadar glukosa darah

manusia dalam keadaan normal apabila tidak makan dalam tiga sampai empat

jam terakhir sekitar 90 mg/dL, sedangkan setelah makan walaupun banyak

makanan karbohidrat kadar jarang melebihi 140 mg/dL. Keadaan penurunan

mendadak glukosa darah akan menyebabkan kejang karena otak bergantung

pada pasokan glukosa. Jika terjadi peningkatan glukosa darah atau

hiperglikemi hormon insulin akan berperan dalam penyeimbangan agar tidak

mengganggu keseimbngan tubuh sendiri. Penurunan glukosa darah tersebut

dengan cara meningkatkan pemindahan glukosa ke dalam jaringan adipose

dan otot dengan merekrut pengangkut glukosa dari bagian sel ke membrane

plasma (Bender dan Mayes, 2009., Guyton dan Hal, 2008., IDF, 2007).

Kadar glukosa serum puasa normal yaitu 70 sampai 110 mg/dl,

dalam keadaan meningkat atau hiperglikemi jika lebih dari 110 mg/dl

sedangkan keadaan menurun atau hipoglikemi kurang dari 70mg/dl. Glukosa

difiltrasi oleh glomerulus ginjal dan hampir keseluruhannya direabsorbsi oleh

tubulus ginjal selama kadar glukosa dalam plasma tidak melebihi 160 – 180

mg /dl. Apabila konsentrasi melebihi kadar tersebut glukosa dapat keluar

bersama urin dan keadaan tersebut disebut glikosuria (Schteingart, 2006).

b. Diabetes mellitus

1) Definisi Diabetes Melitus:

Menurut American Diabetes Asosiation (ADA), Diabetes

mellitus (DM) merupakan kelompok penyakit metabolik dengan cirri

khas hiperglikemia yang disebabkan karena adanya kelainan kerja

insulin, sekresi insulin atau keduanya (ADA, 2013). Hiperglikemia

kronik pada diabetes dapat berhubungan dengan kerusakan jangka

panjang, kegagalan beberapa organ tubuh, terutama pada ginjal, saraf,

mata, jantung dan pembuluh darah. Secara umum diabetes mellitus

juga dapat dikatakan sebagai kumpulan problema kimiawi dan

anatomik akibat dari sejumlah factor dimana terdapat gangguan fungsi

insulin dan defisiensi insulin absolute atau relatif (Purnamasari, 2009).

2) Gejala Diabetes Melitus :

Gejala yang biasanya diderita pasien Diabetes Melitus secara

umum meliputi sering mulai mendadak merasakan haus, berat badan

turun, poliuria dan kelelahan. Selain itu didapatkan gejala umum

dehidrasi, pusing, jantung berdenyut cepat, pandangan mata kabur,

infeksi. Apabila dalam pemeriksaan penyaring rutin didapati juga

glikosuria ( Barnes, 2012 ., Saputra, 2009).

3) Diagnosis Diabetes Melitus:

Diagnosis Diabetes Melitus (DM) didasarkan pada

pemeriksaan konsentrasi glukosa darah. Ada beberapa gejala dari

Diabetes Melitus seperti gejala klasik berupa poliuria, polidipsia,

polifagia dan penurunan berat badan yang tidak jelas penyebabnya

sedangkan gejala lainnya seperti lemah badan, kesemutan, gatal, mata

kabur, disfungsi ereksi pada pria dan pruritus vulvae pada wanita.

Diagnosis tersebut dapat ditegakkan melalui beberapa langkah

(Purnamasari , 2009) :

a) Gejala klasik DM + glukosa plasma sewaktu ≥ 200 mg/dL (11,1

mmol/L)

Glukosa plasma sewaktu merupakan hasil pemeriksaan sesaat pada

suatu hari tanpa memperhatikan waktu makan terakhir.

b) Atau

Gejala klasik DM + glukosa plasma puasa ≥ 126 mg/dL (7,0

mmol/L)

Puasa diartikan pasien tidak mendapat kalori tambahan sedikitnya

8 jam.

c) Glukosa plasma 2 jam pada TTGO (Test Toleransi Glukosa Oral)

≥ 200 mg/dL (11,1 mmol/L)

TTGO dilakukan dengan standart WHO, menggunakan beban

glukosa yang setara dengan 75 gram glukosa anhidrus yang

dilarutkan ke dalam air.

Apabila terdapat risiko DM namun tidak menunjukkan adanya

gejala DM dilakukan pemeriksaan penyaring. Pemeriksaan penyaring

dapat dilakukan melalui pemeriksaan kadar gluosa darah sewaktu

maupun kadar glukosa darah puasa. Pemeriksaan ini bertujuan untuk

menemukan pasien DM, TGT (Toleransi Glukosa Terganggu),

maupun GDPT (Glukosa Darah Puasa Terganggu) sehingga dapat

ditangani lebih dini dan secara tepat. TGT dan GDPT merupakan

tahapan sementara menuju DM dan merupakan faktor risiko untuk

terjadinya DM. Pemeriksaan penyaring dianjurkan dilakukan apabila

saat pemeriksaan untuk penyakit lain atau general check-up.

Tabel 2. Kadar glukosa darah sewaktu dan puasa sebagai patokan

penyaring dan diagnosis DM (mg/dL)

    Bukan BelumDM

    DM pasti DM

Konsentrasi

glukosa

Plasma vena <100 100 - 199 ≥ 200

darah sewaktu

(mg/dL)

Darah

kapiler <90 90 - 199 ≥ 200

Konsentrasi

glukosa

Plasma vena <100 100 - 125 ≥ 126

darah puasa

(mg/dL) Darah

kapiler <90 90 - 99 ≥ 100

(PERKENI, 2011)

4) Klasifikasi Diabetes Melitus :

Beberapa jenis diabetes pada seseorang sering tergantung

pada saat individu mengalami keadaan tertentu yang dialami saat

didiagnosis. Misalnya diabetes mellitus gestasional dimana pasien

akan mengalami hiperglikemia berkelanjutan setelah melahirkan dan

bisa ditentukan menjadi Diabetes tipe 2 dan masih banyak contoh

lainnya. Hal tersebut untuk dokter dan pasien merupakan hal yang

kurang penting dari pada memahami patofisiologi hiperglikemianya

sendiri agar terapi lebih efektif.

a) Diabetes Melitus Tipe I

Pada tipe ini terdapat defisiensi absolut insulin dengan

penyebab paling umum yaitu destruksi sel beta pankreas yang

disebabkan oleh autoimun. Pada keadaan ini pemberian insulin

sangat penting, karena jika pasien tidak menerima insulin maka

pasien akan mengalami dehidrasi akibat hiperglikemia berat dan

ketoasidosis. Hiperglikemia berat dan ketoasidosis bila tidak

diobati akan menyebabkan koma dan kematian dengan cepat. DM

tipe 1 juga memiliki kecenderungan genetik yang kuat dan terdapat

beberapa gen yang rentan. Pasien DM dengan tipe ini sangat rentan

mengalami komplikasi mikroavaskuler seperti neuropati,

retinopati, dan nefropati. Selain itu dapat juga mengalami penyakit

arteri koroner dan aterosklerosis meskipun kurang umum

(Kidambi dan Patel, 2008).

b) Diabetes Melitus Tipe II

Diabetes mellitus tipe 2 merupakan gangguan metabolisme

yang melibatkan kelebihan berat badan dan resistensi insulin.

Pasien DM tipe ini pada awalnya pankreas memproduksi insulin

akan tetapi tubuh kesulitan untuk menggunakan hormon

pengendali glukosa darah tersebut. Peran gangguan sekresi insulin

oleh sel beta pankreas dan resistensi insulin perifer masih belum

diketahui pasti. Akhirnya pankreas tidak dapat menghasilkan

cukup insulin untuk memenuhi kebutuhan tubuh tersebut. Diabetes

tipe ini merupakan bentuk paling umum dinegara maju. Diabetes

tipe 2 dahulu disebut diabetes onset dewasa dan non- insulin –

dependent diabetes melitus (NIDDM). Istilah tersebut tidak akurat

karena perkembangan penyakit menjadikan anak - anak dapat

mengalami Diabetes tipe 2 dan beberapa pasien butuh terapi

insulin ( Kumar et al., 2007 ; Riaz , 2009).

c) Diabetes Melitus Tipe Lainnya

Beberapa tipe diabetes mellitus pada tipe ini (ADA, 2012) yaitu:

1. Defek genetik fungsi sel beta : pada kromosom 12, kromosom

7, kromosom 20, kromosom 13, kromosom 17, kromosom 2,

DNA mitokondrial dan yang lain.

2. Defek genetik kerja insulin : resistensi insulin tipe A,

leprechaunism, sindrom Rabson-Mendenhal., diabetes

lipoatropihic, dan yang lain.

3. Penyakit eksokrin pankreas : pancreatitis, trauma /

pancreatectomy, neoplasia, fibrosis kistik, hemoshromatosis,

pancreatopathy fibrocalculus, dan yang lain.

4. Endokrinopati : acromegali, chushing’s syndrome,

glucagonoma, pheochromacytoma, hipertiroid,

somatostatinoma, aldosteronoma, dan lainnya.

5. Karena obat dan zat kimia : vacor, pentamidin, asam nicotin,

glucocorticoids, hormon tiroid, diazoxide, agonis b-adrenergik,

thiazid, dilantin, g-interferon dan lainnya.

6. Infeksi : rubella congenital, cytomegalovirus, dan lainnya

7. Sebab imunologi yang jarang : stiff-man syndrome, antibody

reseptor anti insulin dan yang lainnya.

8. Sindrom genetik lain yang berkaitan dengan Diabetes Melitus :

syndrome down, syndrome klinefelter, syndrome turner,

syndrome wolfram, ataxia friedreich, chorea Huntington,

porhyria, dan yang lainnya.

d) Diabetes Melitus Gestasional

Diabetes mellitus gestasional seperti namanya diabetes ini

timbul pada kehamilan. Hal tersebut akan beralih ke metabolisme

dan ke gejala normal setelah melahirkan, meskipun dapat juga

berisiko menjadi diabetes tipe 2 antara 7 – 13 kali lebih tinggi pada

diabetes gestasional dibandingkan normoglikemik. Oleh karena hal

tersebut diabetes tipe ini harus dibedakan dari diabetes yang sudah

ada pada wanita yang hamil. Efek dari diabetes ini meliputi

eklampsia, kesulitan melahirkan, retardasi pertumbuhan intrauterus,

makrosomia, hipoglikemia neonatl dan gangguan pernafasan

(Ministry of Public Health and Sanitation, 2010).

4. Metode Pemeriksaan Glukosa Darah

Pengukuran glukosa darah dalam laboratorium ada beberapa cara yaitu

menggunakan metode kondensasi, reduksi dan enzimatik. Cara yang sering

digunakan adalah metode enzimatik dengan perkembangan metode

menggunakan glukometer yang mudah dibawa.

1. Metode Kondensasi

Metode kondensasi merupakan metode yang termasuk metode

spektofotometri atau kolometri. Metode ini berprinsip pada kondensasi

glukosa dengan senyawa amin aromtik primer menjadi campuran yang

seimbang. Bahan penstabil yang biasa digunakan yaitu o-toluidin yang

akan menghasilkan warna sehingga dapat dibaca oleh spektrofotometer

(Dubowski, 2008).

2. Metode reduksi

Metode ini merupakan metode yang paling lama yang

memanfaatkan reduktor glukosa. Metode ini menghasilkan kadar glukosa

yang terlalu tinggi sehingga metode ini sudah lama ditinggalkan (Sacks et

al., 2011).

3. Metode Enzimatik

Metode enzimatik menggunakan beberapa enzim untuk melakukan

pengukuran glukosa darah yaitu glukosa dehidrogenase, glukosa oksidase

dan heksokinase. Metode yang sering digunakan adalah metode

dehidrogenase (Sacks et al., 2011). Terdapat alat dengn metode enzimatik

yang mudah dibawa yaitu glukometer. Glukometer adalah alat yang sering

digunakan pada masyarakat maupun klinis. Ada beberapa faktor yang

dapat mempengaruhi hasil glukosa meter seperti teknik operator, paparan

lingkungan, faktor pasien seperti obat-obatan, terapi oksigen, anemia,

hipotensi dan yang lainnya. Metode glukosa meter sering digunakan

karena cepat, mudah, hanya menggunakan sedikit sampel darah dan cukup

akurat (Hones et al., 2008., Tonyushkina et al., 2009).

5. Model Hewan Dalam Pengujian Efek Anti Diabetes

Etuk (2010) menyebutkan terdapat perkembangan model hewan diabetes

mellitus atau penguji agen antidiabetes. Model tersebut mencangkup metode

kimia, bedah (pancreatectomy) dan manipulasi genetik. Ada beberapa obat

atau bahan kimia sebagai aksi diabetogenik yaitu aloksan monohydrate,

streptozotocin dengan atau tanpa nicotinamide, nitrilotriacetate besi, ditizona

dan antiinsulin serum.

1. Model Hewan Uji Normoglikemik

Hewan uji yang normal dapat berpotensi untuk melakukan uji

normoglikemik. Metode ini masih valid digunakan untuk menguji efek

obat tanpa perusakan pankreas. Agen hiperglikemik dapat dideteksi pada

waktu yang sama.

2. Model Hewan Uji Diberikan Asupan Glukosa Secara Oral (TTGO)

Metode ini juga disebut metode induksi fisiologis karena

peningkatan glukosa darah tanpa merusak pankreas. TTGO merupakan

prosedur yang sering digunakan untuk diagnosis pada pasien diabetes.

Pada model ini hewan uji dipuasakan selama semalam kemudian diberikan

glukosa berlebihan (1-2,5 g/kgBB) dan kadar glukosa dimonitor selama

waktu tertentu. Kelemahan metode ini menghasilkan kondisi

hiperglikemia lebih fluktuasi dibandingkan induksi aloksan monohidrat.

3. Model Hewan Uji Yang Diinduksi Secara Kimiawi

Beberapa agen yang digunakan seperti aloksan monohydrate,

streptozotocin dengan atau tanpa nicotinamide, nitrilotriacetate besi,

ditizona dan antiinsulin serum. Mayoritas agen yang digunakan dalam

bidang farmakologi yaitu model induksi Streptozotocin (STZ, 69% ) dan

Aloksan 31%. Kedua obat tersebut mempunyai efek diabetogenik ketika

diberikan secara parenteral (intravena, intraperitoneal atau subkutan).

Dosis yang diberikan untuk menginduksi diabetes tergantung pada spesies

hewan, jalur metabolisme dan status gizi.

6. Aloksan

Aloksan (2,4,5,6-tetraoxypyrimidine; 2,4,5,6-pyrimidinetetrone)

merupakan derivat pirimidin oksigen yang ditampilkan sebagai hidrat aloksan

di larutan. Aloksan muncul dari dua kata yaitu allantoin dan asam Oxaluric,

dengan allantonin adalah produk asam urat diekskresi dalam allantois

sedangkan asam oxalurik yaitu turunan asam oksalat dan urea yang ditemukan

pada air seni. Aloksan digunakan untuk penginduksi hewan uji untuk

menciptakan keadaan diabetes pada hewan uji. Injeksi aloksan sebagai aksi

diabetogenik dilakukan pada pemberian parenteral yaitu intravena,

intraperitoneal atau subkutan. Dosis aloksan untuk beberapa penelitian

tergantung spesies hewan, metabolisme dan status gizi. Aloksan terbukti tidak

beracun untuk sel beta manusia bahkan dalam dosis sangat tinggi, karena

mungkin disebabkan oleh perbedaan penyerapan glukosa pada manusia dan

hewan uji (Rohilla dan Ali , 2012).

Mekanisme aloksan sebagai aksi diabetogenik masih belum pasti tetapi

ada penelitian yang menyebutkan aksi diabetogenik aloksan pada hewan uji

yaitu zat aloksan sangat cepat mencapai pankreas. Aksi tersebut diawali

dengan pengambilan cepat pada sel beta langerhans. Kemudian terjadi reduksi

aloksan dalam sel beta sehingga menyebabkan pembentukan oksigen reaktif..

Pembentukan oksigen reaktive merangsang pengeluaran asam dialurat

kemudian mengalami reoksidasi kembali dan menyebabkan pengeluaran

radikal superoksida. Selanjutnya radikal superoksida membebaskan ion ferri

dari feritin yang akan mereduksi ferro dan radikal superoksida juga

mengalami dismutase menjadi hydrogen peroksida yang kedua hal tersebut

akan membentuk radikal hidroksi yang sangat reaktif melalui reaksi fenton.

Dari reaksi tersebut menyebabkan kerusakan DNA sel pulau langerhans yang

memproduksi insulin sehingga produksi insulin terganggu. Selain itu

mekanisme aloksan dalam aksi diabetogenik aloksan menyebabkan gangguan

homeostatis kalsium intraselluler. Aloksan menyebabkan depolarisasi sel beta

langerhans yang membuka kanal kalsium sehingga menyebabkan gangguan

sensitivitas insulin perifer dalam waktu singkat. Dari kedua mekanisme

tersebut dapat menyebabkan rusaknya sel penghasil insulin dan meningkatkan

kadar glukosa dalam plasma (Nugroho, 2006).

Pada penelitian Munawaroh dan Sujono (2009) menyebutkan percobaan

dosis untuk hewan uji 100 dan 120 mg/kgBB belum mampu menyebabkan

terjadinya diabetes pada tikus, sedangkan dosis 150 mg/kgBB sudah mampu

menyebabkan keadaan diabetes untuk hewan uji. Sehingnga dosis aloksan

yang digunakan untuk penginduksi diabetes adalah 150 mg/kgBB yang

diberikan secara intraperitoneal pada tikus.

7. Glibenklamid

Glibenklamid merupakan obat generasi dua golongan sulfonylurea yang

berpotensi sebagai antihiperglikemik. Golongan obat ini sering disebut

sebagai insulin secretagogues dengan mekanisme kerjanya merangsang

sekresi insulin dari sel beta langerhans. Farmakokinetik golongan ini

absorbsinya melalui saluran pencerna yang cukup efektif. Potensi

glibenklamid yang merupakan golongan dua dari sulfonylurea lebih kuat 200

kali daripada tolbutamid yang merupakan golongan satu sulfonylurea. Waktu

paruh obat sekitar empat jam yang metabolismenya terjadi di hepar. Efek

hipoglikemik dari obat ini berlangsung 12 – 24 jam sehingga sering cukup

diberikan satu kali sehari. Pada pemberian dosis tunggal hanya 25%

metabolitnya diekskresi melalui urin dan sisanya melalui empedu (Syarif et

al., 2007).

Efek samping dari glibenklamid yaitu peningkatan nafsu makan dan berat

badan, sehingga pasien dengan pengobatan glibenklamid yang tidak menjaga

pemasukan makanan dan olahraga teratur akan mengalami obesitas. Keadaan

hipoglikemia yang berat sangat berbahaya jika diberikan pada orang tua.

Selain itu terdapat gangguan pencernaan dan ruam kulit reaksi alergi banyak

dilaporkan. Kerusakan sumsum tulang juga dapat terjadi akan tetapi jarang

dilaporkan dan termasuk efek samping berat (Throp, 2008).

Indikasi pemberian obat harus tepat untuk suksesnya terapi dan berdampak

buruk hanya sedikit. Penentuan keberhasilan bukanlah melalui umur pasien

waktu terapi dimulai melainkan usia pasien saat mulai timbul penyakit

diabetes mellitus. Kegagalan terapi obat ini disebabkan oleh perubaahan

farmakokinetik obat misalnya penghancuran yang sangat cepat (Syarif et al.,

2007).

Glibenklamid dalam pasaran tersedia dalam bentuk tablet. Dosis yang

diberikan pada awal biasanya 2,5 mg/hari atau kurang, dan rata-rata dosis

pemeliharaan 5 – 10 mg/hari yang diberikan sebagai dosis tunggal pada pagi

hari. Dosis pemeliharaan tidak dianjurkan memberikan dosis sampai 20

mg/hari (Katzung, 2002).

8. Tikus Putih

a. Taksonomi

Kingdom : Animalia

Phylum : Chordata

Subphylum : Vertebrata

Class : Mammalia

Order : Rodentia

Suborder : Myomorpha

Family : Muridae

Subfamily : Murinae

Genus : Rattus

Spesies : Rattus norvegicus (Armitage, 2008).

b. Sifat – sifat Tikus Putih

Hewan percobaan yang umumnya digunakan salah satunya yaitu

tikus putih. Suhu perawatan tikus pada laboratorium dianjurkan antara

suhu 20 – 26 C atau 68 – 79 F. Beberapa penggunaan hewan uji tikus di

laboratorium seperti praktikum imunologi, fisiologi, farmakologi, dan

untuk respon toxicology (National Academy of Sciences, 2011).

Penggunaan tikus putih karena tikus putih mempunyai anatomi dan

fisiologi serta proses biokimia dan biofisik yang hampir sama dengan

manusia (Amitage, 2008).

Tikus putih (Rattus norvegicus) mempunyai panjang ekor yang

lebih pendek dari pada kepala dan badannya. Telinga tikus pendek, dan

ketika telinga ditelungkupkan tidak dapat mencapai mata (Yigit et al,

1998). Berat tikus tersebut 150 – 600 gram, dengan panjang kepala dan

badan 18-25 cm,ekor 16 – 21 cm, telinga 20-23 mm. Tikus putih

mempunyai bulu dibagian punggung berwarna abu-abu kecoklatan dan

pada bagian perut keabu-abuan. Tikus dewasa berumur 75 hari dan pada

tikus betina masa hamil 22 – 24 hari. Kebiasaan Rattus norvegicus adalah

menggali lubang, berenang, menyelam dan menggigit benda keras seperti

kayu bangunan, alumunium dan lain – lain (DEPKES, 2013).

9. Kromatografi Lapis Tipis (KLT)

Kromatografi merupakan teknik pemisahan komponen senyawa kimia

diantara dua fase yaitu fase gerak (cair atau gas) dan fase diam (padat atau

cair). Teknik ini digunakan untuk mengidentifikasi senyawa-senyawa kimia

karena penggunaan memerlukan biaya yang murah, metode sederhana, serta

dalam serempak dapat menganalisis beberapa komponen. Dalam

melaksanakan teknik ini diawali dengan pembuatan lapisan tipis adsorben

pada permukaan plat kaca yang tebalnya bervariasi tergantung pada analisis

yang akan dilakukan. Pemisahan komponen senyawa dengan KLT

dipengaruhi beberapa faktor, yaitu suhu ruang, kejenuhan uap pereaksi,

ketebalan fase diam, dan cara penetesan contoh ekstrak. Komponen senyawa

yang dipisahkan dengan KLT merupakan senyawa-senyawa besar seperti

flavonoid, tannin, saponin, dan lainnya. (Handayani dan Sukmasari, 2005).

B. Kerangka Teori

Keterangan : : Menstimulasi

: Menghambat atau memperbaiki

: Menghasilkan

Ekstrak etanol 70% kulit asam jawa

(Tamarindus indica L)

Kandungan flavonoid fenolik

(Proanthocyanidin atau Tanin terkondensasi)

Tikus Putih Jantan Galur Wistar

↓ Glukosa darah

Sel β pankreas rusak

↓ Radikal superoksida

Radikal superoksida

Diinduksi Aloksan

Pemangsa Radikal superoksida

Transport Glukosa darah terganggu

↓ Level Insulin

Regenerasi sel β pankreas dan

↑ aktivitas insulin

Induksi Regenerasi Sel β Pankreas

↑ uptake Glukosa darah

Aktivasi mediator jalur signal insulin

Glukosa darah ↑

Hambat penyerapan glukosa di intestinal

↓ Glukosa darah

C. Hipotesis

Berdasarkan tinjauan pustaka tersebut maka dapat dihipotesiskan bahwa :

H0 : Tidak terdapat efek ekstrak kulit buah asam jawa (Tamarindus indica L.)

terhadap kadar glukosa darah pada tikus putih jantan yang diinduksi

Aloksan.

H1 : Terdapat efek ekstrak kulit buah asam jawa (Tamarindus indica L.)

terhadap kadar glukosa darah pada tikus putih jantan yang diinduksi

Aloksan.

BAB III

METODE PENELITIAN

A. Jenis Penelitian

Penelitian ini menggunakan design penelitian eksperimental

laboratorik dengan rancangan penelitian pretest-posttest with control group

design.

B. Tempat dan Waktu Penelitian

Penelitian ini dilakukan di Laboratorium Farmakologi Fakultas

Kedokteran Universitas Muhammadiyah Surakarta selama satu bulan

(Oktober – November).

C. Subyek dan Obyek Penelitian

Subyek penelitian yaitu kulit buah asam jawa (Tamarindus indica

L). Keseluruhan buah diperoleh dari daerah Gempolrejo, Tunjungan, Blora,

Jawa Tengah. Keseluruhan buah diambil sebanyak 7 kg kemudian dipisahkan

antara daging buah, biji dan kulit buah. Setelah itu kulit buah dicuci dan

dibilas dengan aquadest untuk menghilangkan kotoran.

Obyek penelitian yaitu tikus ( Rattus norvegicus) putih jantan,

galur wistar, berumur 60-70 hari dan berat badan 150-250 gram. Tikus dipilih

secara random atau acak. Tikus diperoleh dari Laboratorium Farmakologi

Universitas Muhammadiyah Surakarta dengan bahan makanan yang

diberikan adalah pellet.

D. Estimasi Besar Sampel

Besar sampel setiap kelompok ditentukan berdasarkan rumus

perhitungan Federer. Rumus yang digunakan adalah sebagai berikut :

(n-1) (t-1) > 15

Keterangan : dengan (t) merupakan jumlah ulangan untuk setiap perlakuan

dan (n) adalah jumlah perlakuan.

Dari rumus tersebut, dalam percobaan ini jumlah sampel yang dibutuhkan

perkelompok adalah sebagai berikut :

(n-1) (t-1) > 15

(n-1) (5-1) > 15 ; t = 5

(n-1) (4) > 15

4n – 4 > 15

4n > 19

n > 4,75 ;

Jumlah sampel yang digunakan dalam percobaan ini minimal 5 ekor tikus

perkelompok sehingga jumlah keseluruhan sampel yang akan digunakan

sebanyak 25 ekor tikus putih jantan.

E. Kriteria Restriksi

1. Kriteria Inklusi

a. Tikus putih jantan galur Wistar.

b. Umur kurang lebih 60 – 70 hari.

c. Berat badan antara 150 – 250 gram.

d. Sehat dan mempunyai aktifitas normal.

2. Kriteria Ekslusi

a. Tikus menderita sakit saat penelitian berlangsung.

b. Tikus mati saat penelitian berlangsung.

F. Identifikasi Variable

1. Variabel Bebas : Ekstrak etanol 70% kulit buah asam jawa (skala

rasio)

2. Variabel Terikat : Penurunan kadar glukosa tikus (skala rasio)

3. Variabel Luar :

a. Dapat dikendalikan : jenis makanan dan minuman, jenis

kelamin, suhu udara, berat badan, dan umur.

b. Tidak dapat dikendalikan : kondisi awal pankreas tikus yang

berhubungan dengan tingginya glukosa darah, kondisi psikologis

tikus, dan variasi genetik.

G. Definisi Operasional

1. Ekstrak etanol 70% kulit buah asam jawa

Ekstrak etanol 70% kulit buah asam jawa adalah ekstrak dari kulit

buah asam jawa menggunakan metode maserasi dengan cairan

pengekstraksi etanol 70%. Perlakuan untuk ekstrak kulit buah asam jawa

dibuat dalam tiga kelompok perlakuan, yaitu pada kelompok 3 (dosis 100

mg/kgBB/hari ), kelompok 4 (dosis 200mg/kgBB/hari), kelompok 5

(dosis 250 mg/kgBB/hari).

Alat : Water bath

Skala pengukuran : Ratio

2. Kadar glukosa darah

Kadar glukosa darah adalah kadar glukosa pada darah tikus yang

diukur dalam mg/dL. Kadar glukosa darah tikus pada penelitian diukur

sebelum diberikan perlakuan, setelah diinduksi Aloksan, dan setelah

diberikan perlakuan.

Kadar glukosa darah puasa tinggi : > 126 mg/dL (PERKENI, 2011)

Alat ukur : Spektrofotometer

Skala pengukuran : Ratio

H. Instrumentasi Penelitian

1. Alat

- Pemeliharaan dan pengambilan darah pada tikus :

a. Kandang tikus 5 buah

b. Timbangan

c. Kapas

d. Silet

e. Obat merah

f. Tabung mikrokapiler

g. Ependove

h. Gabus untuk alas

i. Sonde lambung dan spuit injeksi

j. Gelas ukur dan pengaduk

- Pengukuran glukosa darah :

a. Ependove

b. Alat sentrifuge

c. Tabung reaksi

d. Rak tabung

e. Micropipette

f. Waterbath

g. Fotometer

- Kromatografi Lapis Tipis (KLT) :

a. Lampu UV portable

b. Vertex

c. Pipa microkapiler

d. Ependove

e. Micropipette

2. Bahan

a. Hewan uji : tikus putih jantan galur Wistar

b. Aloxan

c. Ekstra kulit buah asam jawa

d. Aquadest sebagai control negative

e. Glibenklamid sebagai control positif

f. Makanan hewan percobaan : pellet dan aquadest

g. Reagen warna glukoa untuk pengukuran kadar glukosa

h. KLT : plat KLT, ekstrak, etil asetat, vanillin, sitrobarat, dragendrof.

I. Skema Penelitian

25 ekor tikus ditimbang berat badan diadaptasikan dan dipuasakan dengan

tetap memberi minum

Hari pertama : diukur kadar glukosa darah hewan uji

Hewan uji diinduksi aloksan secara intraperitoneal

Pengukuran kadar glukosa darah kedua (hari ke empat)

Tikus dikelompokkan secara acak menjadi 5 kelompok dengan setiap

kelompok terdiri dari 5 ekor tikus kemudian diberi perlakuan selama 7 hari

Pengukuran kadar glukosa darah ke tiga (hari ke tujuh) dan ke empat (hari ke

sepuluh)

Analisis data

Kelompok 1

kontrol positif glibenklamid dosis 0,126 mg/200 gBB

Kelompok 2

Control negatif CmcNa

Kelompok 3 ekstrak etanol kulit buah asam jawa Dosis I

Kelompok 4 ekstrak etanol kulit buah asam jawa Dosis II

Kelompok 5 ekstrak etanol kulit buah asam jawa Dosis III

J. Cara Kerja

1. Pembuatan Ekstrak 70% kulit buah asam jawa :

a. Bagian kulit buah asam jawa dipisahkan dari daging buah kemudian

ditimbang didapatkan 150 gram, lalu dijemur sampai kering.

b. Kulit buah asam jawa kering ditimbang didapatkan berat 66 gram,

kemudian dihancurkan dengan blender sehingga menjadi serbuk.

c. Serbuk diekstrak dengan metode maserasi dengan cara direndam

dengan pelarut etanol 70% selama 5 hari.

d. Rendaman tersebut disaring dengan kain saring kemudian ekstraknya

dienapkan 1-2 hari kemudian diambil ekstraknya.

e. Ekstrak diuapkan di water bath suhu 60˚ - 70˚ C sambil diaduk

kemudian diangin-anginkan sehingga diperoleh ekstrak yang kental.

2. Cara pengambilan darah dan pengukuran glukosa darah :

a. Pada tikus darah diambil dengan cara ekor dilukai menggunakan

pisau disayat miring.

b. Ditusukkan pipa mikrokapiler yang telah dilapisi heparin sampai

darah masuk dalam pipa

c. Darah dikeluarkan dari pipa mikrokapiler ditampung kedalam sample

cup (ependove). Darah dialirkan melalui dinding sample cup

menghindari hemolisis.

d. Darah (kurang lebih 1 ml) dicentrifuge dengan kecepatan 4000rpm

selama 10menit.

e. Diambil serum 10 micron (0,01ml) dimasukkan tabung reaksi

kemudian ditambahkan reagen warna glukosa 1000micron/1 ml

f. Dikocok pelan kemudian diinkubasi selama 10 menit dengan suhu 37˚

C

g. Dibaca pada spektrofotometer

3. Pembagian kelompok dan perlakuan pada hewan percobaan :

a. Tikus dibagi secara acak dalam 5 kelompok, masing- masing

kelompok terdiri dari 5 ekor tikus : kelompok I sebagai kontrol positif

(+), kelompok II kontrol negatif (-), kelompok III perlakuan dosis I,

kelompok 4 perlakuan dosis II, kelompok 5 perlakuan dosis III.

b. Pertama semua tikus atau subjek penelitian diadaptasikan selama

beberapa hari dalam lingkungan laboratorium. Tikus diambil darah

dan diukur kadar glukosa darah awal (GD awal).

c. Semua hewan uji diinduksi dengan aloksan 150mg/200gBB secara

intraperitoneal.

d. Setelah 4 hari dihitung dari hari pertama injeksi aloksan dilakukan

pengukuran kadar glukosa darah kedua (pretest).

e. Kontrol positif (+) diberikan glibenklamid peroral dengan dosis 0,126

mg/200gBB, kontrol negatif (-) diberi cmcNa. Kelompok 1 diberi

ekstrak kulit buah asam jawa dosis I (100mg/kgBB), kelompok 2

diberi ekstrak kulit buah asam jawa dosis II (200mg/kgBB), dan

kelompok 3 diberi ekstrak kulit buah asam jawa dosis III

(250mg/kgBB) dengan sonde lambung peroral selama 7 hari berturut-

turut.

f. Tikus diukur glukosa darah pada hari ke 4 setelah injeksi aloksan dan

hari ke 7 yang sebelumnya tikus dipuasakan sebelum diambil

darahnya.

4. Preparasi induksi aloksan :

a. Aloksan serbuk sebanyak 30 mg dilarutkankan dengan aquabidest

diambil dari setengah volume maksimal yaitu 2,5.

b. Maka aquabidest diukur 2,5 kalinya berat serbuk, maka didapatkan 75

ml.

c. Hewan uji yang telah ditimbang dihitung volume pemberiannya

secara intraperitoneal.

d. Aloksan diinjeksikan pada hewan uji secara intraperitoneal.

5. Teknik Kromatografi Lapis Tipis (KLT) :

a. Sebanyak 100 mg Ekstrak etanol 70% kulit buah asam jawa

dilarutkan dalam 1 mL methanol Pa

b. Larutan tersebut ditotolkan sebanyak 0,5 µL pada lempeng KLT (Plat

silica GF254)

c. Plat tersebut dielusi pada bejana yang telah jenuh dengan fase gerak

Toluen : Etil asetat (3:9) v/v dengan jarak pengembangan 4 cm

d. Bercak diamati pada UV254nm dan UV366nm

e. Deteksi komponen spesifik golongan terpen menggunakan vanillin-

H2SO4, golongan polifenol menggunakan FeCl3, golongan alkaloid

menggunakan dragendrof dan golongan flavonoid menggunakan

sitroborat.

f. Deteksi komponen spesifik golongan flavonoid dan terpen setelah

dilakukan penyemprotan dimasukkan dalam oven selama 10 menit

pada suhu 100˚ C.

g. Analisis data KLT dengan menghitung Rf (Retention Faktor ) dari

masing-masing bercak menggunakan rumus :

Retention Faktor (hRf) =

jarak titik bercak pa da awal titik penotolanjarak elusi

x 100

K. Analisis Data

Data yang diperoleh diolah menggunakan uji statistik. Sebelum

data dimasukkan kedalam uji statistik SPSS dilakukan perhitungan sebagai

berikut :

Rata-rata penurunan kadar glukosa darah dihitung dengan rumus :

Apababila data pretest homogen :

% Penurunan = Posttest K ¿¿ x 100%

Apabila data pretest tidak homogen :

- Untuk data deskriptif urutan perhitungan :

a. % Penurunan Kontrol negative : Pretest−Posttest

Pretest x 100% = X

b. Pretest (Ekstrak) – (X% dari Pretest) = Y

c. % Penurunan : Y−Posttes (Ekstrak)

Y x 100%

- Untuk data yang dianalisis statistic :

% Penurunan : PosttestPretest

x 100%

Uji statistik yang digunakan :

1. Uji statistik Shapiro Wilk, untuk menguji distribusi data yang didapat

dengan jumlah sampel sedikit (kurang dari 50).

2. Uji statistik Test of Homogeneity of Variance, untuk menguji

homogenitas dari varian tiap data kelompok.

3. Uji statistik One Way Anova, untuk menguji rata-rata perbandingan data

tiap kelompok.

4. Uji statistik LSD (Least Significant Difference), untuk menguji

signifikansi dari perbedaan rata-rata data antar kelompok perlakuan.

Jika p < 0,05 maka H0 ditolak dan H1 diterima.

L. Jadwal Penelitian

Kegiatan

Tahun 2013Tahun 2014

Bulan Bulan

3 4 5 6 7 8 9 1011 12 1

Penyusuna Proposal Penelitian                      Ujian Proposal                      Revisi Proposal                      Penelitian                      Analisis Data                      Penyusunan Skripsi                      Ujian Skripsi                      Revisi Skripsi                      

BAB IV

HASIL DAN PEMBAHASAN

A. Hasil Penelitian

1. Determinasi Tanaman

Determinasi tanaman dilakukan untuk mengklasifikasikan atau identifikasi

tanaman. Identifikasi tersebut merupakan upaya membandingkan tumbuhan

lain yang sudah dikenal maupun untuk mengetahui ciri-ciri tanaman yang

baru ditemukan. Dalam upaya membandingkan suatu tanaman dengan

tanaman lain untuk menghindari terjadi kesalahan dalam pengambilan

tanaman. Determinasi tanaman dilakukan di Laboratorium Biologi Fakultas

Keguruan dan Ilmu Pendidikan (FKIP) Universitas Muhammadiyah

Surakarta.

Kunci determinasi asam jawa (Tamarindus indica L) adalah sebagai

berikut :

1b, 2b, 3b, 4b, 6b, 7b, 9b, 10b, 11b, 12b, 13b, 14a, 15b, 197b, 208b, 219b,

220b, 224b, 225b, 227b, 230a, 231b, 233b …..→ Familia : Caesalpiniacea

1b, 5b, 7b, 8a ……………………………...→ Genus : Tamarindus

→ Species : Tamarindus indica L.

(Van Steenis, 2005 ; Tjitrosoepomo, 2007).

2. Rendemen

Rendemen ekstrak bertujuan untuk mengetahui perbandingan antara

ekstrak dengan simplisia (kulit buah asam jawa). Rendemen dihitung dengan

membandingkan jumlah ekstrak yang diperoleh dengan simplisia awal.

Perhitungan pada penelitian :

Berat kering simplisia (kulit buah asam jawa) = 66 gr

Berat hasil ekstrak = 6,5 gr

Rendemen = 6,566

= 0,09

Jadi, 1 gram kulit buah asam jawa kering = 0,09 gram ekstrak kental.

3. Hasil uji orientasi efek ekstrak terhadap penurunan glukosa darah tikus

Tabel 3. Hasil Uji Orientasi Dosis Efek Ekstrak Tamarindus indica L

Terhadap Penurunan Glukosa Darah Tikus

Dosis EkstrakGlukosa

Darah Awal

Glukosa Darah

Post Aloksan

Glukosa Darah

Post EkstrakPenurunan

(%)Yang Diberikan (Pretest) (Posttest)

100 mg/kgBB 45,7 156,0 83,0 46,8

200 mg/kgBB 57,9 308,2 80,2 73,9

200 mg/kgBB 29,3 223,8 83,3 62,8

250 mg/kgBB 35,5 224,7 70,6 68,6

250 mg/kgBB 38,9 362,2 60,6 83,3

Pada Tabel 3 merupakan hasil uji orientasi yang menunjukkan kadar

glukosa darah hewan uji pretest, posttes dan % penurunan kadar glukosa

darah. Awalnya peneliti melakukan orientasi dosis aloksan dengan variasi

dosis 140 mg/kgBB, 150 mg/kgBB dan 160 mg/kgBB. Dari variasi dosis

tersebut saat pengukuran glukosa darah didapatkan untuk dosis 140 mg/kgBB

masih belum menaikkan kadar glukosa hewan uji. Untuk dosis 150 mg/kgBB

sudah bisa menaikkan kadar glukosa darah tikus, sedangkan dosis 160

mg/kgBB menghasilkan kadar glukosa darah yang tinggi sehingga banyak

hewan uji yang mati. Dari berbagai variasi dosis aloksan tersebut yang

digunakan untuk melakukan penelitian adalah dosis 150 mg/kgBB.

Orientasi dosis ekstrak kulit buah asam jawa juga dilakukan dengan

berbagai dosis dengan variasi dosis 50 mg/kgBB, 100 mg/kgBB, 200

mg/kgBB dan 250 mg/kgBB. Dari uji orientasi dosis 50 mg/kgBB hanya

beberapa hewan uji yang mengalami penurunan kadar glukosa dan sangat

sedikit penurunan. Dosis 100 mg/kgBB sudah mempunyai efek menurunkan

glukosa darah hewan uji, sedangkan dosis paling berefek adalah dosis 250

mg/kgBB. Selanjutnya untuk penelitian digunakan variasi dosis 100

mg/kgBB, 200 mg/kgBB dan 250 mg/kgBB.

4. Hasil Uji Efek Antidiabetes

Hasil pengukuran kadar glukosa darah (lampiran 1) menunjukkan data

kadar glukosa darah dalam 5 kelompok, yaitu kelompok kontrol positif

(Glibenklamid), kelompok kontrol negatif (CmcNa), kelompok perlakuan

Dosis I 100mg/kgBB, kelompok perlakuan Dosis II 200mg/kgBB dan

kelompok perlakuan Dosis III 250mg/kgBB. Pengukuran kadar glukosa

darah dilakukan sebelum diinduksi aloksan (kadar glukosa awal), post

induksi aloksan (pretest), post induksi ekstrak etanol 70 % kulit buah asam

jawa (Tamarindus indica L) hari ke 4 setelah injeksi aloksan (posttest H+4)

dan post induksi ekstrak hari ke 7 setelah injeksi aloksan (posttest H+7).

Untuk mengetahui terjadinya penurunan kadar glukosa darah setelah

diinduksi ektrak dihitung dengan rumus % Penurunan apabila data post

aloksan (pretest) penyebarannya homogen menggunakan rata-rata kadar

posttest kontrol negatif dikurangi posttest ekstrak dibagi rata-rata posttest

kontrol negatif dikalikan 100%. Perhitungan penurunan dilakukan pada hari

ke 4 maupun hari ke 7 setelah induksi ekstrak. Hasil perhitungannya sebagai

berikut :

Tabel 4. Data Rerata Kadar Glukosa Darah Prestest - Posttest

KelompokPost Aloksan /

PretestPost

Ekstrak/PosttestPost

Ekstrak/Posttest(mg/dL) H+4 (mg/dL) H+7 (mg/dL)

Kontrol Positif244,1 ± 34,606 71,9 ± 17,090 46,9 ± 10,274

(glibenklamid)Kontrol Negatif

193,3 ± 21,288 179,0 ± 32,680 176,9 ± 34,749(Cmc Na)

Dosis I204,3 ± 37,895 74,4 ± 10,355 51,9 ± 12,105

(100 mg/kgBB)Dosis II

216,0 ± 38,457 85,4 ± 8,447 71,7 ± 32,005(200 mg/kgBB)

Dosis III228,4 ± 34,951 77,1 ± 12,312 67,5 ± 25,748

(250 mg/kgBB)

Tabel 4 menunjukkan data rerata kadar glukosa darah hewan uji post

induksi aloksan (pretest) dengan glukosa darah post induksi ekstrak (posttest)

hari ke empat maupun ke tujuh yang terdiri dari rata-rata dan standart deviasi.

Tabel 5. Presentase Rerata Penurunan Kadar Glukosa Darah

KelompokRata-Rata ± Standart Deviasi

H+4 (%) H+7 (%)

Kontrol + 59,9 ± 9,536 73,5 ± 5,782

Dosis I 59,1 ± 12,105 70,5 ± 6,673

Dosis II 52,3 ± 4,743 59,5 ± 18,067

Dosis III 56,9 ± 6,907 61,9 ± 14,549

Tabel 5 merupakan data rerata presentase penurunan kadar glukosa darah

dimana induksi ekstrak etanol 70% kulit buah asam jawa (Tamarindus indica

L) yang memiliki efek penurunan glukosa darah post aloksan paling besar

adalah dosis 1 (100mg/kgBB).

5. Hasil Analisis Statistik

a. Hasil Uji Distribusi Data

Uji distribusi data menggunakan Uji Saphiro-Wilk, uji tersebut

digunakan untuk mengetahui distribusi data kelompok kecil yang kurang

dari 50 sampel. Hasil analisis Saphiro-Wilk hari keempat ektrak

didapatkan nilai p = 0,412 yang berarti nilai p > 0,05, maka disimpulkan

bahwa data terdistribusi normal. Hasil analisis hari ketujuh ekstrak

didapatkan nilai p = 0,061 yang berarti sama seperti hari keempat bahwa

distribusinya normal. Data dapat dilihat pada Lampiran 4.

b. Hasil Uji Test of Homogenecity of Variance

Uji homogenitas varian dilakukan dengan menggunakan Test of

Homogenecity of Variance. Hasil analisis hari keempat post ekstrak

didapatkan p = 0,308 dimana p > 0,05 maka data dinyatakan data

homogen, sedangkan analisis hari ketujuh post ekstrak didapatkan p =

0,202 maka p > 0,05 sehingga data dinyatakan homogen. Data dapat

dilihat pada Lampiran 5.

Dari hasil uji Saphiro-Wilk semua data distribusinya normal, uji

Test of Homogecity of Variance dari semua data homogen maka dapat

dilanjutkan dengan uji One Way Anova karena syarat uji tersebut datanya

harus terdistribusi normal dan homogen.

c. Hasil Uji ANOVA

Hasil uji ANOVA pada penelitian hari keempat yaitu 0,000 dan

hari ketujuh 0,000. Nilai probabilitas merupakan parameter untuk

pengambilan keputusan. Apabila nilai probabilitas > 0,05 maka H1

diterima sebaliknya jika nilai probabilitas < 0,05 maka Ho ditolak. Dari

hasil uji ANOVA kedua kelompok yaitu hari keempat maupun hari

ketujuh menunjukkan hasil nilai probabilitas < 0,05 maka Ho ditolak.

Data dapat dilihat pada lampiran 5.

d. Hasil Uji LSD (Least Significant Difference)

Setelah dilakukan uji ANOVA selanjutnya dilakukan Uji LSD

untuk menguji signifikansi atau bermaknanya perbedaan rata-rata antar

kelompok. Kriteria penilaian uji ini adalah pasangan perlakuan dikatakan

terdapat perbedaan bermakna kadar glukosa darah hewan uji apabila nilai

p < 0,05. Untuk melihat hasil lengkap pada lampiran 6.

Tabel 6. Hasil Uji LSD H+4

Kelompok P Keterangan

I – II 0,000 Berbeda Signifikan

I – III 0,768 Tidak Berbeda Signifikan

I – IV 0,162 Tidak Berbeda Signifikan

I – V 0,551 Tidak Berbeda Signifikan

II – III 0,000 Berbeda Signifikan

II – IV 0,000 Berbeda Signifikan

II – V 0,000 Berbeda Signifikan

III – IV 0,250 Tidak Berbeda Signifikan

III – V 0,760 Tidak Berbeda Signifikan

IV – V 0,377 Tidak Berbeda Signifikan

Terdapat perbedaan rata-rata antar kelompok yaitu :

- I-II, p : 0,000 maka terdapat perbedaan kadar glukosa darah yang

signifikan antara kelompok kontrol positif (I) dengan kelompok

kontrol negatif (II).

- I-III, p : 0,768 maka terdapat perbedaan kadar glukosa darah yang

tidak signifikan antara kelompok kontrol positif dengan kelompok

Dosis I (III).

- I-IV, p : 0,162 maka terdapat perbedaan kadar glukosa darah yang

tidak signifikan antara kelompok kontrol positif dengan kelompok

Dosis II (IV).

- I-V, p : 0,551 maka terdapat perbedaan kadar glukosa darah tidak

signifikan antara kelompok kontrol positif dengan kelompok Dosis III

(V).

- II-III, p : 0,000 maka terdapat perbedaan kadar glukosa darah yang

signifikan antara kelompok kontrol negatif dengan kelompok Dosis I.

- II-IV, p : 0,000 maka terdapat perbedaan kadar glukosa darah yang

signifikan antara kelompok kontrol negatif dengan kelompok Dosis

II.

- II-V, p : 0,000 maka terdapat perbedaan kadar glukosa darah yang

signifikan antara kelompok kontrol negatif dengan kelompok Dosis

III.

- III-IV, p : 0,250 maka terdapat perbedaan kadar glukosa darah yang

tidak signifikan antara kelompok Dosis I dengan kelompok Dosis II.

- III-V, p : 0,760 maka terdapat perbedaan kadar glukosa darah yang

tidak signifikan antara kelompok Dosis I dengan kelompok Dosis III.

- IV-V, p : 0,377 maka terdapat perbedaan kadar glukosa darah yang

tidak signifikan antara kelompok Dosis II dengan Dosis III.

Tabel 7. Hasil Uji LSD H+7

Kelompok P KeteranganI – II 0,000 Berbeda SignifikanI – III 0,716 Tidak Berbeda SignifikanI – IV 0,119 Tidak Berbeda SignifikanI – V 0,158 Tidak Berbeda Signifikan

II – III 0,000 Berbeda SignifikanII – IV 0,000 Berbeda SignifikanII – V 0,000 Berbeda Signifikan

III – IV 0,209 Tidak Berbeda SignifikanIII – V 0,280 Tidak Berbeda SignifikanIV – V 0,784 Tidak Berbeda Signifikan

Terdapat perbedaan rata-rata antar kelompok yaitu :

- I-II, p : 0,000 maka terdapat perbedaan kadar glukosa darah yang

signifikan antara kelompok kontrol positif (I) dengan kelompok

kontrol negatif (II).

- I-III, p : 0,716 maka terdapat perbedaan kadar glukosa darah yang

tidak signifikan antara kelompok kontrol positif dengan kelompok

Dosis I (III).

- I-IV, p : 0,119 maka terdapat perbedaan kadar glukosa darah yang

tidak signifikan antara kelompok kontrol positif dengan kelompok

Dosis II (IV).

- I-V, p : 0,158 maka terdapat perbedaan kadar glukosa darah tidak

signifikan antara kelompok kontrol positif dengan kelompok Dosis III

(V).

- II-III, p : 0,000 maka terdapat perbedaan kadar glukosa darah yang

signifikan antara kelompok kontrol negatif dengan kelompok Dosis I.

- II-IV, p : 0,000 maka terdapat perbedaan kadar glukosa darah yang

signifikan antara kelompok kontrol negatif dengan kelompok Dosis

II.

- II-V, p : 0,000 maka terdapat perbedaan kadar glukosa darah yang

signifikan antara kelompok kontrol negatif dengan kelompok Dosis

III.

- III-IV, p : 0,209 maka terdapat perbedaan kadar glukosa darah yang

tidak signifikan antara kelompok Dosis I dengan kelompok Dosis II.

- III-V, p : 0,280 maka terdapat perbedaan kadar glukosa darah yang

tidak signifikan antara kelompok Dosis I dengan kelompok Dosis III.

- IV-V, p : 0,784 maka terdapat perbedaan kadar glukosa darah yang

tidak signifikan antara kelompok Dosis II dengan Dosis III.

Keterangan :

I = kelompok kontrol positif

II = kelompok kontrol negatif

III = kelompok Dosis I (100mg/kgBB)

IV = kelompok Dosis II (200mg/kgBB)

V = kelompok Dosis III (250mg/kgBB)

6. Potensi Penurunan Kadar Glukosa Darah Ekstrak Kulit Buah Asam Jawa

Dibanding Glibenklamid

Potensi penurunan kadar glukosa darah ekstrak kulit buah asam jawa

dibandingkan dengan glibenklamid dihitung menggunakan rumus :

Rata – Rata Presentase Penurunan

Dosis

Hasil perbandingan potensi penurunan didapatkan potensi dosis I (100

mg/kggBB) pada H4 yaitu 0,614 % dan H7 yaitu 0,605 % dari potensi

glibenklamid, dosis II (200mg/kgBB) pada H4 yaitu 0,275 % dan H7 yaitu

0,255 % dari potensi glibenklamid, dosis III (250mg/kgBB) pada H4 yaitu

0,239 % dan H7 yaitu 0,212 % dari potensi glibenklamid.

7. Hasil KLT

Profil KLT dapat digunakan untuk identifikasi golongan senyawa

metabolit sekunder. Identifikasi bertujuan untuk menunjukkan adanya

kandungan senyawa minyak atsiri, fenolik, alkaloid dan flavonoid dalam

ekstrak kulit buah asam jawa. Hasil percobaan KLT sebagai berikut :

Gambar. 4.2. Hasil Uji KLT Ekstrak Etanol 70% Kulit Buah Asam Jawa.

Keterangan : Profil KLT ekstrak etanol 70% kulit buah asam jawa dengan

plat Silika gel GF254 dan fase gerak dengan Toluen : Etil asetat ( 3 : 9)

v/v

A. Penampakan di bawah UV254

B. Penampakan di bawah UV366

C. Derivatisasi dengan vailin H2SO4

D. Derivatisasi dengan sitroborat

E. Derivatisasi dengan FeCl3

F. Derivatisasi dengan dragendrof

Gambar 4.2 yang merupakan hasil uji KLT ekstrak etanol 70% kulit buah

asam jawa mengindentifikasi beberapa senyawa besar. Identifikasi tannin

atau polifenol (gambar E) pada ekstrak memberikan hasil positif ditandai

dengan adanya satu bercak berwarna coklat-hitam pada pengamatan secara

visual setelah disemprot dengan FeCl3. Untuk identifikasi alkaloid (gambar F)

memberikan hasil positif setelah disemprot dragendrof yang menunjukkan

warna coklat pada titik penotolan. Identifikasi flavonoid (gambar C)

menggunakan reagen sitroborat sebagai penyemprot yang memberikan hasil

positif pada ekstrak. Terdapat tiga bercak berwarna kuning di bawah UV 366

menunjukkan adanya kandungan falvonoid. Identifikasi kandungan trepenoid

digunakan pereaksi semprot vanillin H2SO4 (gambar C) yang ditandai dengan

tiga bercak berwarna hitam-ungu (Wagner dan Bland, 1996).

Tabel. 8. Hasil Pemisahan Ekstrak Etanol 70% Kulit Buah Asam Jawa

Deteksi NO hRf Keterangan warna Interpretasi

senyawa

UV 254

1 0 Pemadaman kuat  2 75 Pemadaman lemah3 95 Pemadaman lemah

UV366

1 0 Fluoresensi kuning lemah Flavonoid 2

37,5Fluoresensi biru

kekuningan Flavonoid3 62,5 Fluoresensi kuning Flavonoid4

90Fluoresensi biru

kekuningan Flavonoid

Vanilin H2SO4

1 0 Coklat kehitaman Terpenoid2 75 Ungu kehijauan Terpenoid 3 95 Kehitaman Terpenoid

Sitroborat

1 0 Fluoresensi kuning lemah Flavonoid 2

37,5Fluoresensi biru

kekuningan Flavonoid3 62,5 Fluoresensi kuning Flavonoid4

90Fluoresensi biru

kekuningan Flavonoid

FeCl3

10 Kehitaman

Fenolik (Tanin)

Dragendrof 1 0 Coklat Alkaloid

Tabel 8 menunjukkan tabel beberapa senyawa besar yang dapat terlihat

yang dihasilkan dari uji KLT ekstrak kulit buah asam jawa.

B. Pembahasan

Pada percobaan ini bertujuan untuk mengetahui ada tidaknya efek ekstrak

etanol 70% kulit buah asam jawa ( Tamarindus indica L) terhadap penurunan

kadar glukosa darah tikus jantan galur wistar (Rattus norvegicus) yang diinduksi

aloksan. Penelitian ini menggunakan lima kelompok yang setiap kelompok

tersebut terdapat lima ekor tikus dan diberikan tiga ekor tikus cadangan untuk

setiap kelompok perlakuan. Tikus cadangan berguna untuk mengganti tikus-tikus

yang mungkin mati disaat penelitian sedang berlangsung. Dari lima kelompok

tersebut terbagi menjadi kelompok I sebagai kontrol positif (glibenklamid dosis

0,126 mg/200gBB), kelompok II sebagai kontrol negatif (CMCNa), kelompok III

sebagai kelompok perlakuan dosis I 100mg/kgBB, kelompok IV sebagai

kelompok perlakuan dosis II 200mg/kgBB, dan kelompok V sebagai kelompok

perlakuan dosis III 250mg/kgBB. Kadar glukosa darah diukur sebanyak empat

kali saat penelitian berlangsung. Kadar awal diukur pada hari pertama penelitian

dimaksudkan untuk menyingkirkan apabila terdapat hewan uji yang sebelum

perlakuan sudah mempunyai kadar glukosa darah tinggi. Apabila tidak

disingkirkan akan mempengaruhi hasil yang nanti penyebarannya tidak homogen

setelah perlakuan. Pengukuran kadar glukosa darah awal (GD1) dijadikan sebagai

kadar glukosa darah tanpa perlakuan.

Keadaan diabetes atau diabetogenic pada hewan uji dilakukan dengan

induksi aloksan monohidrad dengan dosis 150mg/kgBB. Dosis tersebut

didapatkan dari hasil uji orientasi sebelum penelitian yang dilakukan dengan

berbagai variasi dosis. Berbagai variasi dosis tersebut dilakukan untuk mencari

dosis yang efektif dan tidak berlebihan untuk menaikkan glukosa darah pada

hewan uji.Variasi dosis yang digunakan awalnya dari dosis 150mg/kgBB sebagai

patokan dosis berdasarkan penelitian Munawaroh dan Sujono (2009), kemudian

diambil rentang 10 dibawah dan diatasnya sehingga variasi yang digunakan yaitu

140 mg/kgBB, 150 mg/kgBB, dan 160 mg/kgBB. Menurut Patel et al (2012) sejak

ditemukannya aloksan ditahun 1943 bahwa aloksan dapat menginduksi kerusakan

sel β pankreas maka sampai sekarang masih digunakan untuk percobaan diabetes.

Aloksan dapat meningkatkan keadaan glukosa darah dengan mekanisme yaitu

aloksan cepat menuju sel β pankreas kemudian terjadi pembentukan oksigen

reaktif yang akan menyebabkan stress oksidatif karena radikal superoksida

sehingga terjadi kerusakan sel β pankreas (Rohilla dan Ali, 2012). Kadar glukosa

darah kedua diukur pada hari keempat setelah induksi aloksan (pretest). Diukur

setelah empat hari induksi karena reaksi aloksan akan bekerja lebih efektif.

Menurut Lenzen (2008) degranulasi dan hilangnya sel β pankreas sudah dapat

terlihat pada 12 – 48 jam setelah induksi. Namun untuk dapat melihat hasil

peningkatan glukosa darah yang signifikan maka ditunggu empat hari setelahnya.

Setelah hari keempat induksi aloksan maka diberikan ekstrak etanol 70%

kulit buah asam jawa (Tamarindus indica L) peroral dengan tiga variasi dosis

selama tujuh hari berturut-turut. Pengukuran kadar glukosa darah selanjutnya

setelah induksi ekstrak (posttest) dilakukan pada hari keempat saat pemberian

ekstrak (posttest H+4) dan hari ketujuh (posttest H+7). Kadar glukosa darah

posttest diukur dua kali, hari keempat sudah mulai diukur karena untuk

mengetahui apakah sudah terjadi penurunan. Sedangkan hari ketujuh untuk

melihat apakah ekstrak mempunyai efek dan apakah sudah terjadi penurunan yang

signifikan.

Selanjutnya untuk mengetahui nilai probabilitas efek ekstrak etanol 70%

kulit buah asam jawa dilakukan uji statistic dengan program SPSS versi 17.

Sebelum melakukan uji One Way Anova dan LSD dilakukan uji distribusi

data dan uji homogenitas varian. Menurut Sopiyudin (2011) uji distribusi dengan

jumlah data <50 maka menggunakan uji Shapiro-Wilk. Uji distribusi data dari

lima kelompok perlakuan didapatkan nilai signifikansi (p) pada hari keempat

perlakuan ekstrak 0,412 dan hari ketujuh perlakuan ekstrak 0,061 yang keduanya

> 0,05, maka data terdistribusi secara normal. Uji homogenitas varian pada hari

keempat perlakuan ekstrak nilai signifikansi (p) 0,308, sedangkan hari ketujuh

perlakuan ekstrak 0,202. Uji homogenitas pada hari keempat dan ketujuh

didapatkan nilai signifikansi > 0,05 maka data hari dari kedua kelompok

homogen. Data dapat dilanjutkan untuk uji One Way Anova karena distribusi

normal dan homogenitas merupakan syarat uji tersebut. Pada uji One Way Anova

nilai p pada hari keempat dan ketujuh perlakuan ekstrak didapatkan hasil sama

yaitu 0,000, maka nilai p < 0,05 sehingga terdapat perbedaan efek secara

bermakna terhadap penurunan kadar glukosa darah hewan uji. Dari hasil uji One

Way Anova dapat ditentukan bahwa hipotesis 1 peneliti dapat diterima. Selisih

kadar glukosa darah hewan uji setiap kelompok perlakuan dapat diketahui dengan

uji LSD. Dari uji LSD menunjukkan perbedaan selisih penurunan kadar glukosa

darah secara signifikan antara kelompok kontrol positi, kelompok kontrok

negative, kelompok Dosis I, kelompok Dosis II, dan kelompok dosis III pada hari

keempat maupun hari ketujuh (Lampiran 6).

Terjadi perbedaan selisih yang signifikan pada kadar glukosa darah antara

kelompok kontrol positif dengan kelompok kontrol negatif pada hari keempat

maupun ketujuh perlakuan ekstrak dengan nilai p sebesar 0,000. Kontrol negatif

diberikan CMCNa yang bersifat netral sehingga tidak memberi efek penurunan

kadar glukosa darah. Pada data terlihat sedikit terjadi penurunan kadar glukosa

darah pada kontrol negatif karena didukung regenerasi sel β pankreas yang

sebenarnya induksi aloksan tidak seluruhnya merusak sel β pankreas sehingga

masih terdapat insulin yang masih bisa dieksresi (Dor, 2005). Meskipun terjadi

sedikit penurunan namun kadar glukosa darah pada hewan uji masih dikatakan

diabetes. Kontrol positif terjadi penurunan yang signifikan karena glibenklamid

merupakan obat antidiabetik oral golongan sulfonilurea yang mekanisme kerjanya

menstimulasi sel β pankreas untuk melepaskan sekresi insulin (Novrial et al,

2012). Selain merangsang sekresi insulin, dalam memberikan efek penurunan

kadar glukosa darah dapat melalui jalan lain dengan memperbaiki kerusakan

akibat mekanisme aloksan yang sesuai penelitian Nugroho (2006) dimana

mengganggu homeostatis intraseluler menyebabkan depolarisasi sel β pankreas

dan membuka kanal kalsium sehingga terjadi gangguan sensitivitas insulin.

Glibenklamid mengikat membran sel β menyebabkan penutupan adenosin

trifosfat (ATP) yang sensitif terhadap saluran kalium dan terjadi depolarisasi sel

membrane. Selanjutnya membuka saluran tegangan sehingga ion kalsium masuk

dan menyebabkan sekresi insulin (Bastaki, 2005).

Dari hasil uji LSD juga terlihat adanya perbedaan selisih kadar glukosa

darah yang signifikan antara kelompok kontrol negatif dengan kelompok

perlakuan dosis I, dosis II dan dosis III. Nilai signifikansinya 0,000 dari semua

kelompok dan dari kedua kelompok hari yaitu H+4 maupun H+7 pemberian

ekstrak, maka nilai tersebut <0,05. Dari hasil tersebut dapat disimpulkan bahwa

pemberian ekstrak etanol 70% kulit buah asam jawa (Tamarindus indica L) pada

tikus yang diinduksi aloksan mampu menurunkan kadar glukosa darah pada tikus

pasca aloksan pada dosis I, dosis II maupun dosis III.

Perbedaan selisih kadar glukosa darah antara kontrol positif dengan

kelompok perlakuan dosis dapat terlihat pada uji LSD. Pada H+4 pemberian

ekstrak perbedaan selisih kadar glukosa kontrol positif dengan dosis I 0,768, dosis

II 0,162, dan dosis III 0,551. Dosis I ,II dan III menunjukkan nilai signifikansi >

0,05 sehingga perbedaan selisih penurunan kadar glukosa darah tidak signifikan

antara kelompok kontrol positif dengan ketiga kelompok dosis tersebut. Nilai

yang tidak signifikan pada H+4 tersebut menunjukkan bahwa kontrol positif dan

perlakuan dosis I, II dan III mempunyai efek yang sebanding. Pada H+7

pemberian ekstrak perbedaan selisih kadar glukosa kontrol positif dengan dosis I

0,956, dosis II 0,193, dan dosis III 0,585. Dari data tersebut nilai signifikansi dari

semua kelompok yaitu > 0,05 maka pada H+7 pemberian ekstrak menunjukkan

bahwa perbedaan selisih penurunan kadar glukosa darah antara kelompok

perlakuan kontrol positif dengan kelompok perlakuan dosis tidak signifikan. Hal

tersebut menunjukkan antara kelompok kontrol positif dan kelompok dosis I,II

maupun III mempunyai efek menurunkan glukosa darah yang sebanding.

Meskipun dari data tersebut menunjukkan kontrol positif dengan dosis III pada

H+4 dan kontrol positif dengan dosis I,dosis II,dosis III pada H+7 mempunyai

efek sebanding namun dari presentase rata-rata penurunan kadar glukosa darah

menunjukkan bahwa kontrol positif mempunyai efek yang lebih tinggi

dibandingkan dengan semua dosis perlakuan. Artinya, meskipun esktrak etanol

70% kulit buah asam jawa (Tamarindus indica L) mampu menurunkan kadar

glukosa darah pada hewan uji tetapi efek penurunannya lebih kecil dibandingkan

efek penurunan pada pemberian glibenklamid yang merupakan obat antidiabetika

oral.

Perbandingan potensi penurunan glukosa darah pada kelompok ekstrak

terhadap kelompok kontrol positif (glibenklamid) dilihat dari dua kelompok hari

posttest yaitu hari keempat (H4) dan hari ketujuh (H7). Pada H4 perbandingan

potensi secara berurutan dari efek penurunan kadar glukosa darah dosis I, dosis II,

dosis III yaitu 0,614 %, 0,275%, dan 0,239 % terhadap efek penurunan kadar

glukosa darah oleh glibenklamid. Pada H7 perbandingan potensi penurunan

glukosa darah dari efek dosis I 0,605%, dosis II 0,255%, dan dosis III 0,212%

terhadap efek penurunan glukosa darah oleh glibenklamid. Perbandingan efek

setiap dosis pemberian ekstrak pada H4 antara dosis I : II = 223,33%, dosis I : III

= 256,59%, dosis II:III = 114,89 %, dan pada H7 antara dosis I:II = 237,31%,

dosis I:III = 235,86%, dosis II:III = 120,15 %.

Menurut Doughari (2006) Tamarindus indica L dari hasil uji fitokimia

dengan menggunakan ekstrak etanol didapatkan zat kimia utama yaitu alkaloid,

flavonoid, saponin, dan tannin. Dalam kulit buah asam jawa terdapat senyawa

fenolik antioksidan yang didominasi oleh proanthocyanidins (Sudjaroen et al,

2005). Proanthocyanidins merupakan tannin yang terkondensasi (Frutos et al,

2004). Mekanisme tanin terhadap penurunan kadar glukosa darah ada beberapa

mekanisme yaitu tanin menurunkan absorbsi nutrisi dengan menghambat

penyerapan glukosa di intestinal, selain itu menginduksi regenerasi sel β pankreas

yang berefek pada sel adipose sehingga menguatkan aktifitas insulin. Tanin

merupakan pemangsa radikal bebas dan meningkatkan uptake glukosa dalam

darah melalui aktifitas mediator insulin sehingga menurunkan glukosa dalam

darah (Kumari dan Jain, 2012). Yokozawa et al (2012) juga menjelaskan

mengenai mekanisme proanthocyanidins dalam menurunkan glukosa darah yaitu

menekan stress oksidatif yang terkait dengan proses inflamasi karena induksi

diabetogenik. Penekanan stress oksidatif tersebut melalui penghambatan

peroksidasi lipid, dan generasi ROS (Reaktiv Oksigen Spesies). Dalam

menurunkan glukosa darah flavonoid merangsang sekresi insulin dan

meregenerasi kerusakan sel beta pankreas (Widowati, 2008).

Dilakukan uji kromatografi lapis tipis untuk mengetahui senyawa besar

yang terkandung dalam ekstrak asam jawa tersebut serta membuktikan dari

penelitian sebelumnya mengenai kandungan senyawa. Senyawa yang terdapat

dalam ekstrak etanol 70 % kulit buah asam jawa adalah flavonoid, terpenoid,

alkaloid, dan fenolik (Tanin). Pada saat melakukan uji tersebut dalam plat KLT

terlihat banyak pemisahan warna yang dapat menunjukkan senyawa, akan tetapi

sulit untuk terdeteksi. Pada hasil uji fitokimia Doughari (2006) menunjukkan

kandungan asam jawa yaitu alkaloid, flavonoid, saponin, dan tannin, tetapi dalam

uji KLT hanya dapat membuktikan senyawa flavonoid, alkaloid dan fenolik

(Tanin). Senyawa yang dicurigai untuk menurunkan kadar glukosa darah pada

hewan uji yaitu tanin dan flavonoid terbukti terdapat pada ekstrak kulit buah asam

jawa oleh uji KLT.

Penelitian ini masih terdapat banyak kekurangan, diantaranya adalah

kurangnya variasi dosis untuk menghasilkan dosis yang tepat untuk menurunkan

kadar glukosa darah, selain itu mekanisme penurunan kadar glukosa darah karena

pemberian ekstrak etanol kulit buah asam jawa (Tamarindus indica L) tidak dapat

diketahui pasti.

BAB V

KESIMPULAN DAN SARAN

A. Kesimpulan

Kesimpulan dari hasil penelitian adalah sebagai berikut :

1. Pemberian ekstrak etanol 70% kulit buah asam jawa (Tamarindus indica L)

dosis 100 mg/kbBB, 200 mg/kgBB dan 250 mg/kgBB dapat menurunkan

kadar glukosa darah tikus putih jantan galur Wistar (Rattus norvegicus) yang

diinduksi dengan aloksan dengan presentase penurunan secara berturut-turut

pada hari keempat posttest 58,4 %, 52,3% dan 56,9%, sedangkan hari ketujuh

posttest 70,6 %, 59,5 %, dan 61,9%.

2. Potensi penurunan kadar glukosa darah pada pemberian ekstrak etanol 70%

kulit buah asam jawa (Tamarindus indica L) lebih kecil dibandingkan

pemberian glibenklamid sebagai kontrol positif dengan nilai sebagai berikut,

pada hari keempat posttest dosis I 0,614%, dosis II 0,275 % dan dosis III

0,239%, sedangkan hari keempat posttest dosis I 0,605%, dosis II 0,255%, dan

dosis III 0,212%.

B. Saran

1. Perlu dilakukan penelitian lebih lanjut dengan waktu penelitian yang lebih

lama, sehingga dapat diketahui waktu terapi yang dapat menurunkan kadar

glukosa darah secara maksimal.

2. Perlu dilakukan penelitian lebih lanjut dengan variasi dosis yang lebih banyak

dan dengan sampel yang lebih banyak, sehingga dapat diketahui dosis yang

paling efektif untuk menurunkan kadar glukosa darah.

3. Perlu identifikasi zat yang lebih spesifik dari tanaman asam jawa (Tamarindus

indica L), sehingga dapat diketahui senyawa spesifik yang dapat menurunkan

kadar glukosa.

DAFTAR PUSTAKA

ADA.2012. Diagnosis and Classification of Diabetes Mellitus. Diabetes Journals. Vol 35 (1) : s67

ADA. 2013. Diabetes Basics. Available at : http://www.diabetes.org/diabetes-basics (Juni, 2013)

Ahmed,J., Ramaswamy, HS., dan Sashidhark, C. 2005. Rheological Characteristics of Tamarind (Tamarindus indica L) Juice Concentrates. Swiss Society of Food Science and Technology Elsevier. Vol 40(2007) : 225-6

Armitage, D., 2008. Rattus Novergicus. Universitas of Machigan. Available at:http://animaldiversity.ummz.umich.edu/site/accounts/information/Ratttus_norvegicus.html. (Mei 2013)

Barnes, D.E,. 2012. Program Olahraga : Diabetes Melitus. Yogyakarta : PT Citra Aji Parama. Hal : 5

Bastaki, S. 2005. Review Diabetes Mellitus and Its Treatment. International Journal Diabetes and Metabolisme. Vol (13) : 111-131

Beecher, G.R,. 2004. Proanthocyanidins : Biological Activities Associated with Human Health. Pharmaceutical Biology. Vol 42(supplement) : 2

Bender, D.A., dan Mayes, P.A,. 2009. Glukoneogenesis dan Kontrol Glukosa Darah. Dalam : Biokimia Harper. Jakarta : EGC. Hal : 179-181

Bhadorya, S.S., Ganeshpunkar, A., Narwaria, J., Rai, G., dan Jan, A.P,. 2011. Tamarindus indica : Extent of Explored Potential. Pharmacognosy Review : PubMed. Vol 5(9)

BPOM. 2005. Standardisasi Ekstrak Tumbuhan Obat Indonesia, Salah Satu Tahapan Penting Dalam Pengembangan Obat Asli Indonesia. Info POM. Vol 6(4) : 5

BPOM. 2010.Acuan Sediaan Herbal Volume 5 Edisi 1. Jakarta : Badan Pengawas Obat Republik Indonesia. Hal : 3-7

DEPKES.1986. Sediaan Galenik. Bakti Husada Departemen Kesehatan Republik Indonesia. Hal : 5-7

DEPKES. 2007. Kebijakan Obat Tradisional. Departemen Kesehatan Republik Indonesia : Keputusan Menteri Kesehatan 381/Menkes/SK/III/2007

DEPKES JATENG. 2008. Daftar Tabel Profil Kesehatan Provinsi Jawa Tengah Tahun 2008. Available at : www.depdiknes jateng.go.id (Maret, 2013)

DEPKES. 2013. Pedoman Pengendalian Tikus. Available at : http:/www.Depkes.go.id/downloads/pengendaliantikus.pdf. (maret, 2013)

Doughari, J.H,. 2006. Antimicrobial Activity of Tamarindus indica Linn. Tropical Journal of Pharmaceutical Research. Vol 5(2) : 597-603

Dubowski, K.M,. 2008. An O-Toluidine Method for Body Fluid Glucose Determination. Clinical Chemistry. Vol 54(11) : 1919

Dor. 2005. Adult Pancreatic β are Performed by Cell Duplication Rather than Stem Cell Differentiation. Nature, 429.

Etuk, E.U,. 2010. Animal Models for Studying Diabetes Melitus. Agriculture and Biology Journal of North American. Vol 1(2) : 130-1

Frutos, P; Hervas, G; Giraldez. F.J; and Mantecon. A.R. 2004. Review Tannins and Ruminant Nutrition. Spanish Journal of Agricultural Research. Vol 2(2) : 191-202

Guyton, A.C., dan Hall, J.E,. 2008. Metabolisme Karbohidrat dan Pembentukan Adenosin Trifosfat. Dalam : Buku Ajar Fisiologi Kedokteran Edisi II. Jakarta : EGC. Hal : 881

Handayani, E dan Sukmasari, M. 2005. Teknik Pemisahan Komponen Ekstrak purwoceng secara Kromatografi Lapis Tipis. Buletin Teknik Pertanian. Vol (10) no.2

Hones, J., Muller, P., and Surridge, N. 2008. The Technology Behind Glucose Meters : Test Strips. Diabetes Technology and Therapeutics. Vol 10(1) : 10-26

IDF. 2007. Guideline For Management of Post Meal Glucose from International Diabetes Federation. Available at : www.idf.org (Juni, 2013)

IDF. 2011. IDF Diabetes Atlat Fifth Edition from International Diabetes Federation. Available at : http://www.idf.org/diabetesatlas/5e/diabetes (Juli, 2013)

Irawan , M.A,. 2007. Glukosa dan Metabolisme Energi. Polton Sports Science and Performance Laboratorium. Vol 01(2007) : 6

Katzung, B.G,. 2002. Farmakologi Dasar dan Klinik. Jakarta : Salemba Medika. Hal : 699

Khasanah, N. 2012. Waspada Beragam Penyakit Degeneratif Akibat Pola Makan. Yogyakarta : Laksana.Hal : 33

Kidambi, S dan Patel, S.B,. 2008. Diabetes Melitus Considerations for Dentristry. The Journal of The American Dental Association. Vol 139 (5) : 9s

Kumar, V., Crawford, J.M., dan Clare-salzler, M.J,. 2007. Pankreas. Dalam : Buku Ajar Patologi Edisi VII. Jakarta : EGC. Hal : 722

Kumari, M dan Jain, S. 2012. Tannins : An Antinutrient with Positive Effect to Manage Diabetes. Research Journal of Recent Science. Vol 1(12) : 70-1

Lenzen, S. 2008. The Mechanisms of alloxan-and streptozotocin-induced Diabetes. Journal of Springer : Institute of Clinical Biochemistry Hannover Medical School. Diabetologia. Vol (2008) 51 : 216 -226.

Lim, T.K,. 2012. Edible Medical and Non-Medical Plant. London New York : Springer Dordrecht Heidelberg. Hal : 879-880

Maiti ,R., Das,V.K., dan Ghosh, D. 2005. Attenuation of Hyperlipidemia in Streptozotocin Induce Diabetic Rats by Aqueous Extract of Seed of Tamarindus indica. Biology Pharmaceutical Bulletin. Vol 28(7) : 1173

MENKES. 2009. Farmakope Herbal Indonesia Edisi Pertama. Available at : http://www.hukor.depkes.go.id/upprodkepmenkes/KMK%20/.pdf (Juni, 2013)

Ministry of Public Healt and Sanitasion. 2010. National Clinical Guidelines for Management of Diabetes Melitus first edition. Nairobi : Ministry of Public Healt and Sanitasion. Hal :1-2

Moudi, B., Sagheb, H.M., Heidari, Z., dan Shahraki, M. 2010. A Stereological Study Of Effects Of Aqueous Extract Of Tamarindus Indica Seeds On Pancreatic Islets In Streptozotocin-Induced Diabetic Rats. Pakkenberg Journal Pharmacology Science. Vol.23 (4) : 427

Munawaroh, R., dan Sujono, T.A,. 2009. Antaraksi Quercentin dengan Tolbutamid : Kajian Terhadap Perubahan Kadar Glukosa Darah pada Tikus Jantan yang Diinduksi Aloksan. Journal Penelitian Sains dan Teknologi. Vol 10(2)

National Academic of Science. 2011. Guide For the Care and Use of Laboratory Animals “Eighth Edition”. Washington DC : The National Academic Press (44,113)

Niranjana, S.R., Prakash, H.S., Murthy, S.M., Lakshmidevi, N., Kavishankar, G.B. 2011. Diabetes and medicinal plants-A review. International Journal Pharmaceutical Biomed Science. Vol 2(3)

Novrial, D; Sulistyo, H; dan Setiawati. 2012. Comparison of Antidiabetic Effect of Honey, Glibenclamide Metformin And Their Combination In the Streptozotocin Induced Diabetic Rat. Prosiding Seminar Nasional Kesehatan. Kesehatan Masyarakat FKIK Unsoed. Vol (3-4).

Nugroho, A.E,. 2006. Hewan Percobaan Diabetes Melitus : Pathology Mekanisme Aksi Diabetogenik. Biodiversitas. Vol 7(4) : 381

Patel, D.K., Kumar.R., Laloo, D., dan Hemalatha, S. 2012. Diabetes Mellitus : An Overview on its Pharmacological aspect and reported medicinal plants having antidiabetic activity. Asian Pasific Journal of Tropical Biomedicine Elsevier. Vol 2 (5) : 411-420.

PERKENI. 2011. Konsesus Pengelolaan dan Pencegahan Diabetes Melitus Tipe 2 di Indonesia. Available at : www.perkeni.org/ (juni, 2013)

Purnamasari, D. 2009. Diagnosis dan Klasifikasi Diabetes Melitus. Dalam : Buku Ajar Ilmu Penyakit Dalam. Jilid III. Edisi V. Jakarta : Pusat Penerbit Departemen Ilmu Penyakit Dalam. Hal : 1880

Rahmadiah, H.E., dan Mun’im,A. 2009. Karakterisasi Ekstrak Etanolik Daun Asam Jawa ( Tamarindus indica L). Majalah Ilmu Kefarmasian. Vol 4 (1) : 39

Riaz, S. 2009. Diabetes Mellitus. Academic Journal : Scientific Research and Essay. Vol 4(5) : 369

Rohilla, A., and Ali, S. 2012. Alloxan Induced Diabetes : Mecanism and Effects. International Journal of Research in Pharmaceutical and Biomedical Science. Vol 3(2) : 819-820

Sacks, D.B., Arnold, M., Bakris, G., Bruns, D.E., Horvath, A.R., Irkman, M.E., Lernmark, A., Metzger, B.E., and Nathan, D.M. 2011. Guidelines and Recommendation for Laboratory Analisis in the Diagnostik and Management of Diabetes Melitus. Clinical Chemistry. Vol 57 : 11-14

Saputra, L. 2009. Kapita Selekta Kedokteran Klinik. Tangerang : Bina Rupa Aksara Publisher. Hal : 74-5

Sari, L.O.R.K,. 2006. Pemanfaatan Obat Tradisional dengan Pertimbangan Manfaat dan Keamanannya. Majalah Ilmu Kefarmasian. Vol III(1) : 2

Schteingart, D.E,.2006. Pankreas : Metabolisme Glukosa dan Diabetes. Dalam : Patofisiologi Konsep Klinis dan Proses-proses Penyakit. Jakarta : EGC. Hal : 1259

Soemardji, A.A,. 2007. Tamarindus indica L or “asam jawa” The Sour but Sweet and Useful. Japan : Institute of Natural Medicine University of Toyama. Hal :7

Sopiyudin, M. 2011. Statistik untuk Kedokteran dan Kesehatan. Salemba Medika : Jakarta. Hal 55.

Sudjaroen, Y., R.Hauoner., G.Wurtele., W.E.Hull., G.Erben., B.Spiegelhalder., S.Chang., S.Bartsch., dan R.W.Owen. 2005. Isolation and Structure Elucidation of Phenolic Antioksidants from Tamarind (Tamarindus indica L) Seed and Pericarp. Food and Chemical Toxicology Elsevier. Vol 43(11) : 1673-1682

Suyono, slamet. 2009. Diabetes Melitus di Indonesia. Dalam : Buku Ajar Ilmu Penyakit Dalam. Jilid III. Edisi V. Jakarta: Pusat Penerbit Departemen Ilmu Penyakit Dalam, pp : 1870

Syarif, A., Estuningtyas, A., Setiawat, A. 2007. Farmakologi dan Terapi. Jakarta : Balai Penerbit FKUI. Hal : 490-491

Thorp, M.C,. 2008. Pharmacology for The Health Care Professions. Inggris (UK) : University of Salford Wiley-Blackwell. Hal : 109

Tonyuskina, K., dan Nichols, J.H,. 2009. Glucose Meter : A Review of Technical Challenges to Obtaining Accurates Results. Journals of Diabetes Science and Technology. Vol 3(4) : 971

Wagner, H dan S. Bland. 1996. Plant Drug Analysis : A Thin Layer Chromatography Atlas 2nd Edition. Springer : Berlin Heidelberg

Warintek. 2013. Tamarindus indica L. Available at : http://www.warintek.ristek.go.id/pangan_kesehatan/tanaman_obat/depkes/1-144.pdf. (Maret,2013)

WHO. 2008. Traditional Medicine. Available at : www.who.int/mediacentre/fact-sheets/fs134/en/index.html (April, 2013)

WHO. 2013. Diabetes. Available at : www.who.int/mediacentre/factsheets/fs332/en/index.html (April, 2013)

Widowaty, W. 2008. Potensi Antioksidan Sebagai Antidiabetes. Jurnal Kesehatan Masyarakat. Vol 7(2) : 6-7

Williams, J.T,. 2006. Tamarind Tamarindus indica L. England : Southampton Centre for Underutilised Crops

Yigit, N., Colak, E., Sozen, M., dan Ozkurt, S. 1998. The Taxonomi and Karyology of Rattus norvegicus (Berkenhout, 1769) and Rattus ratus (Linnaeus, 1758) (Rodentia : Muridae) In Turkey. Tr J of Zoologi. Vol 22(1998) : 204

Yokuzawa, T., Cho E.J., Park C.H., dan Kim, H.J. 2012. Review Article Protective Effect of Proanthocyanidin Against Diabetic Oxidative Stress. Evidence- Based Complementary and Alternative Medicine. Vol (2012) : 1-11

Lampiran 1

Hasil Pengukuran Kadar Glukosa Darah Tikus

Kelompok AwalPost Aloksan /

PretestPost

Ekstrak/PosttestPost

Ekstrak/Posttest

(mg/dL) (mg/dL) H+4 (mg/dL) H+7 (mg/dL)

Kelompok Kontrol

41.6 213 68 44.443 219 49.7 41

Positif (Glibenklamid)

38.3 225 - -

  46.4 281 80.8 62

  41 282.4 88.9 40

Kelompok Kontrol

48.7 205 - -52.7 197.5 187.2 189

Negatif (CmcNa) 46.3 190 - -

  47.9 159 143 137.8  56.2 215 206.8 204.1

Kelompok Dosis I57.8 161 81 39.852.8 235 - -

100 mg/kgBB 49 166.4 77.5 63

  51.3 219 59 61.7

  62.4 240 80 43.3

Kelompok Dosis II

48.1 227 95 9453.7 260 - -

200 mg/kgBB 58.9 189 82.3 86

  81.5 239 - -

  64.8 165 79 35

Kelompok Dosis III

70.9 217 72.2 6941.9 264 - -

250 mg/kgBB 83.9 244 85.5 68

  62 190 62 35

  59.2 227 88.6 98

Lampiran 2

Data Hasil Penrurunan Glukosa Darah Pretest-Posttest

KelompokPost Aloksan /

PretestPost

Ekstrak/PosttestPenurunan

H4Post

Ekstrak/PosttestPenuruna

n H7(mg/dL) H+4 (mg/dL) (%) H+7 (mg/dL) (%)

Kelompok Kontrol

213 68 62.0 44.4 74.9219 49.7 72.2 41 76.8

Positif (Glibenklamid

)225 - - -

-  281 80.8 54.9 62 65.0  282.4 88.9 50.3 40 77.4

Kelompok Kontrol

205 - - - -197.5 187.2 5.2 189 4.3

Negatif (CmcNa)

190 - - - -

  159 143 10.1 137.8 13.3  215 206.8 3.8 204.1 5.1

Kelompok Dosis I

161 81 57.4 39.8 77.5235 - - - -

100 mg/kgBB 166.4 77.5 56.7 63 64.4  219 59 67.0 61.7 65.1  240 80 55.3 43.3 75.5

Kelompok Dosis II

227 95 46.9 94 46.9260 - - - -

200 mg/kgBB 189 82.3 54.0 86 51.4  239 - - - -  165 79 55.9 35 80.2

Kelompok Dosis III

217 72.2 59.7 69 61.0264 - - - -

250 mg/kgBB 244 85.5 52.2 68 61.6  190 62 65.4 35 80.2  227 88.6 50.5 98 44.6

Lampiran 3

a. Rerata Kadar Glukosa Darah Pretest

Hasil

Kadar

Kelompok Mean N Std. Deviation

Std. Error of

Mean

Kontrol + 244.0800 5 34.60682 15.47664

Kontrol - 193.3000 5 21.28849 9.52050

Dosis I 204.2800 5 37.89580 16.94752

Dosis II 216.0000 5 38.45777 17.19884

Dosis III 228.4000 5 27.91595 12.48439

Total 217.2120 25 34.95154 6.99031

b. Rerata Kadar Glukosa Darah Posttest H4

Report

Kadar

Kelompok Mean N Std. Deviation

Std. Error of

Mean

Kontrol + 71.8500 4 17.09045 8.54522

Kontrol - 179.0000 3 32.68088 18.86832

Dosis I 74.3750 4 10.35515 5.17758

Dosis II 85.4333 3 8.44768 4.87727

Dosis III 77.0750 4 12.31297 6.15648

Total 93.6944 18 42.33892 9.97938

c. Rerata Kadar Glukosa Darah Posttest H7

Report

Kadar

Kelompok Mean N Std. Deviation

Std. Error of

Mean

Kontrol + 46.8500 4 10.27408 5.13704

Kontrol - 176.9667 3 34.74944 20.06260

Dosis I 51.9500 4 12.10523 6.05262

Dosis II 71.6667 3 32.00521 18.47822

Dosis III 67.5000 4 25.74879 12.87439

Total 78.3944 18 50.72790 11.95668

d. Rerata % Penurunan Kadar Glukosa Darah H4

Report

Kadar

Kelompok Mean N Std. Deviation

Std. Error of

Mean

Kontrol + 59.8500 4 9.53677 4.76839

Kontrol - 6.3667 3 3.30807 1.90992

Dosis I 59.0500 4 12.10523 6.05262

Dosis II 52.2667 3 4.74377 2.73882

Dosis III 56.9500 4 6.90724 3.45362

Total 47.2722 18 20.45379 4.82100

e. Rerata % Penurunan Kadar Glukosa Darah H7

Report

Kadar

Kelompok Mean N Std. Deviation

Std. Error of

Mean

Kontrol + 73.5250 4 5.78237 2.89119

Kontrol - 7.5667 3 4.98130 2.87595

Dosis I 70.5000 4 6.67383 3.33691

Dosis II 59.5000 3 18.06737 10.43120

Dosis III 61.8500 4 14.54957 7.27479

Total 56.9278 18 25.24759 5.95091

f. Presentase Rerata Penurunan Kadar Glukosa Darah

KelompokRata-Rata ± Standart Deviasi

H+4 (%) H+7 (%)

Kontrol + 59,9 ± 9,536 73,5 ± 5,782

Kontrol - 6,4 ± 3,308 7,6 ± 4,981

Dosis I 59,1 ± 12,105 70,5 ± 6,673

Dosis II 52,3 ± 4,743 59,5 ± 18,067

Dosis III 56,9 ± 6,907 61,9 ± 14,549

Lampiran 4

Uji Normalitas

Data H+4 setelah induksi Aloksan

Tests of Normality

Kolmogorov-Smirnova Shapiro-Wilk

Statistic df Sig. Statistic df Sig.

PretestPosttest .194 15 .132 .942 15 .412

a. Lilliefors Significance Correction

Data H+7 setelah induksi Aloksan

Tests of Normality

Kolmogorov-Smirnova Shapiro-Wilk

Statistic df Sig. Statistic df Sig.

PretestPosttest .215 15 .059 .887 15 .061

a. Lilliefors Significance Correction

Lampiran 5

Uji Homogenitas Varian dan One Way ANOVA

Data H+4

Test of Homogeneity of Variances

kadar

Levene Statistic df1 df2 Sig.

1.339 4 13 .308

ANOVA

kadar

Sum of Squares df Mean Square F Sig.

Between Groups 6562.337 4 1640.584 36.581 .000

Within Groups 583.021 13 44.848

Total 7145.358 17

Data H+7

Test of Homogeneity of Variances

Kadar

Levene Statistic df1 df2 Sig.

1.736 4 13 .202

ANOVA

Kadar

Sum of Squares df Mean Square F Sig.

Between Groups 9278.633 4 2319.658 19.108 .000

Within Groups 1578.172 13 121.398

Total 10856.804 17

Lampiran 6

Uji LSD (Least Significant Difference)

Data H+4

Multiple Comparisons

kadar

LSD

(I)

Kelompok

(J)

Kelompok

Mean Difference

(I-J) Std. Error Sig.

95% Confidence Interval

Lower Bound Upper Bound

K+ K- 53.48333* 5.11480 .000 42.4335 64.5332

Dosis I 1.42500 4.73539 .768 -8.8052 11.6552

Dosis II 7.58333 5.11480 .162 -3.4665 18.6332

Dosis III 2.90000 4.73539 .551 -7.3302 13.1302

K- K+ -53.48333* 5.11480 .000 -64.5332 -42.4335

Dosis I -52.05833* 5.11480 .000 -63.1082 -41.0085

Dosis II -45.90000* 5.46795 .000 -57.7128 -34.0872

Dosis III -50.58333* 5.11480 .000 -61.6332 -39.5335

Dosis I K+ -1.42500 4.73539 .768 -11.6552 8.8052

K- 52.05833* 5.11480 .000 41.0085 63.1082

Dosis II 6.15833 5.11480 .250 -4.8915 17.2082

Dosis III 1.47500 4.73539 .760 -8.7552 11.7052

Dosis II K+ -7.58333 5.11480 .162 -18.6332 3.4665

K- 45.90000* 5.46795 .000 34.0872 57.7128

Dosis I -6.15833 5.11480 .250 -17.2082 4.8915

Dosis III -4.68333 5.11480 .377 -15.7332 6.3665

Dosis III K+ -2.90000 4.73539 .551 -13.1302 7.3302

K- 50.58333* 5.11480 .000 39.5335 61.6332

Dosis I -1.47500 4.73539 .760 -11.7052 8.7552

Dosis II 4.68333 5.11480 .377 -6.3665 15.7332

*. The mean difference is significant at the 0.05 level.

Data H+7

Multiple Comparisons

Kadar

LSD

(I)

Kelompok

(J)

Kelompok

Mean Difference

(I-J) Std. Error Sig.

95% Confidence Interval

Lower Bound Upper Bound

K+ K- 65.95833* 8.41519 .000 47.7784 84.1382

Dosis I 2.90000 7.79095 .716 -13.9313 19.7313

Dosis II 14.02500 8.41519 .119 -4.1549 32.2049

Dosis III 11.67500 7.79095 .158 -5.1563 28.5063

K- K+ -65.95833* 8.41519 .000 -84.1382 -47.7784

Dosis I -63.05833* 8.41519 .000 -81.2382 -44.8784

Dosis II -51.93333* 8.99621 .000 -71.3685 -32.4982

Dosis III -54.28333* 8.41519 .000 -72.4632 -36.1034

Dosis I K+ -2.90000 7.79095 .716 -19.7313 13.9313

K- 63.05833* 8.41519 .000 44.8784 81.2382

Dosis II 11.12500 8.41519 .209 -7.0549 29.3049

Dosis III 8.77500 7.79095 .280 -8.0563 25.6063

Dosis II K+ -14.02500 8.41519 .119 -32.2049 4.1549

K- 51.93333* 8.99621 .000 32.4982 71.3685

Dosis I -11.12500 8.41519 .209 -29.3049 7.0549

Dosis III -2.35000 8.41519 .784 -20.5299 15.8299

Dosis III K+ -11.67500 7.79095 .158 -28.5063 5.1563

K- 54.28333* 8.41519 .000 36.1034 72.4632

Dosis I -8.77500 7.79095 .280 -25.6063 8.0563

Dosis II 2.35000 8.41519 .784 -15.8299 20.5299

*. The mean difference is significant at the 0.05 level.

Lampiran 7

Konversi Perhitungan Dosis untuk Berbagai Jenis (species) Hewan Uji

SubyekMencit 20 g

Tikus 200 gr

Marmot 400 gr

Kelinci 1,5 kg

Kucing 2 kg

Kera 4 kg

Anjing 12 kg

Manusia 70 kg

Mencit 20 g 1,0 7,0 12,25 27,8 29,7 64,1 124,2 387,9

Tikus 200 gr

0,14 1,0 1,74 3,9 4,2 9,2 17,8 56,0

Marmot 400 gr

0,08 0,57 1,0 2,25 2,4 5,2 10,2 31,5

Kelinci 1,5 kg

0,04 0,25 0,44 1,0 1,08 2,4 4,5 14,2

Kucing 2 kg 0,03 0,23 0,41 0,92 1,0 2,2 4,1 13,0

Kera 4 kg 0,016 0,11 0,19 0,42 0,45 1,0 1,9 6,1

Anjing 12 kg

0,008 0,06 0,10 0,22 0,24 0,52 1,0 3,1

Manusia 70 kg

0,0026 0,018 0,031 0,07 0,076 0,16 0,32 1,0

Lampiran 8

Volume Maksimum Larutan yang Diberikan pada Hewan Uji

Binatang

Volume maksimum (ml)

Cara Pemberian

i.v i.m i.p s.c p.o

Mencit (20-30g)

0,5 0,05 1,0 0,5-1,0 1,0

Tikus 200 gr 1,0 0,1 2,0-5,0 2,0-5,0 5,0

Kelinci 250 g 5,0-10,0 0,5 10,0-20,0 5,0-10,0 20,0

Marmot 250 gr - 0,25 2,0-5,0 5,0 10,0

Hamster (50 g) - 0,1 1,0-5,0 2,5 2,5

Merpati (300g) 2,0 0,5 2,0 2,0 1,0

Kucing (3kg) 5,0-10,0 1,0 10,0-20,0 5,0-10,0 50,0

Anjing (5kg) 10,0-20,0 5,0 20,0-50,0 5,0-10,0 100,0

Lampiran 9

Surat Keterangan Determinasi

Lampiran 10

Surat Keterangan Selesai Penelitian KLT

Lampiran 11

Surat Keterangan Selesai Penelitian Glukosa Darah