FAN renatonisihara@up.com.br

FAN

FAN é feito por IFI há mais de 60 anos

(1950 by Coons and Kaplan)

Termo tem gerado confusão

Acs Anti-celular termo mais apropriado

Anti-nucleo (constituintes)

Anti-nucleo (envelope nuclear)

Anti-citosol (proteínas citosólicas)

Anti-citoplasma (organelas citoplasmáticas)

Solomon DH, Kavanaugh AJ, Schur PH. Evidence-based guidelines for the use of immunologic tests: antinuclear antibody testing.

Arthritis Rheum 2002;47:434–44.

FAN

Acs específicos podem aparecer anos antes dos sintomas clínicos

Presente em doenças autoimunes

Triagem

Arbuckle MR, McClain MT, Rubertone MV, et al. Development of autoantibodies before the

clinical onset of systemic lupus erythematosus. N Engl J Med 2003; 349:1526–33.

FAN

Técnica de Imunofluorescência Indireta

Células HEp-2

Série de diluições do soro até o final

Determinação visual da positividade e padrão

Determinação do antígeno específico

IV Brazilian guidelines

for autoantibodies on

HEp-2 cells.

Francescantonio PL, et al.

Rev Bras Reumatol. 2014

Jan-Feb;54(1):44-50.

Exemplo de laudo descritivo conforme as

recomendações do IV consenso (2014),

apresentando-se como primeira informação a

definição do padrão.

FAN

FATORES QUE INFLUENCIAM

Onde o exame foi realizado

Leitura da fluorescência (subjetividade)

Exige treinamento e experiência

Variabilidade de resultados

FAN

Alta variação na leitura dos testes entre países europeus e mesmo

dentro do mesmo País (2014)

No Brasil, estudo feito em 2013 analisou 17 padrões

Reações e leitura feitos de forma cega e independente por três

centros diagnósticos.

Evidenciou-se boa reprodutibilidade dos 17 padrões testados

Damoiseaux J1, Agmon-Levin N, Van Blerk M,et al.From ANA-screening to antigen-specificity: an EASI-survey on the daily practice in

European countries. Clin Exp Rheumatol. 2014 Jul-Aug;32(4):539-46.

Dellavance A, Cruvinel W de M, Francescantonio PLC, Mangueira CLP, Drugowick IC, Rodrigues SH, et al. Variability in the recognition of

distinctive immunofluorescence patterns in different brands of HEp-2 cell slides. J Bras Patot Med Lab. 2013;49(3):182-90.

FAN

Especificidade do exame depende:

Diluição inicial

Titulo encontrado

Padrão

População estudada

Idade

FAN E FATOR REUMATÓIDE EM IDOSOS DE CURITIBA-PR

Table - IgM-RF and ANA positivity according to age in studied groups

Age

(years)

n=336 Positive RF*

(22/336)

Positive ANA**

(58/336)

≤50 56 16.6% 2/56 3.6% 1/56 1.8%

51 - 60 51 15.2% 3/51 5.9% 5/51 9.8%

61 - 70 120 35.7% 6/120 5.0% 27/120 22.5%

71 - 80 79 23.5% 6/79 7.6% 19/79 24.0%

> 81 30 8.9% 5/30 16.6% 6/30 20.0%

Nisihara R, Kubis MM, Rodrigues PC, Skare T et al. Antinuclear antibodies and rheumatoid factor positivity in healthy elderly adults: a cross-

sectional study in 336 individuals. J Am Geriatr Soc. 2013 Nov;61(11):2044-6

Nisihara R, Kubis MM, Rodrigues PC, Skare T et al. Antinuclear antibodies and rheumatoid factor positivity in healthy elderly adults: a cross-

sectional study in 336 individuals.J Am Geriatr Soc. 2013 Nov;61(11):2044-6

FAN E FATOR REUMATÓIDE EM IDOSOS DE CURITIBA-PR

Maioria dos casos positivos:

título 1:80 e

padrão granular fino denso-

DFS)

FAN – PADRÃO DFS

Ac anti DFS 70 feito por IFI foi positivo em até 33% pessoas sadias,

MAS não é encontrado em

pacientes com doenças reumáticas

sistêmicas.

Mahler M1, Hanly JG, Fritzler MJ.

Importance of the dense fine speckled pattern on HEp-2 cells and anti-DFS70 antibodies for the

diagnosis of systemic autoimmune diseases. Autoimmun Rev. 2012 Jul;11(9):642-5.

Ac ANTI DSF70

n = 3263 sadios - Ac anti DFS70 por ELISA

251 pacientes com LES

8,9% em indivíduos saudáveis

2,8% no LES,

2,6% na artrite reumatóide

4,0% na asma

5,0% na cistite intersticial

1,7% em Graves

6,0% em Hashimoto..

Mahler M, Parker T, Peebles CL et al. Anti-DFS70 antibodies are more prevalent in healthy individuals compared to patients

with systemic autoimmune rheumatic diseases. J Rheumatol. 2012 Nov;39(11):2104-10

Novos métodos de imunoadsorção de Ac anti-DFS70

Aumentar a especificidade do FAN

Ac ANTI DSF70

FAN

Aumento no número de solicitações

Teste presente no check-up

Tentativas de outras técnicas laboratoriais como

ELISA

quimioluminescência,

fluorimetria...

Kivity S, Gilburd B, Agmon-Levin N, et al. A novel automated indirect

immunofluorescence autoantibody evaluation. Clin Rheumatol 2012;31:503–9.

NOVAS METODOLOGIAS PARA O FAN

Uso de Antígenos sintéticos

Não dão os mesmos resultados

Poderiam ser complementares ?

American College of Rheumatology – gold standard - IFI

O IV Consenso não recomenda a utilização de ensaios

automatizados na triagem de autoanticorpos

FAN

Estudo de coorte (n=1306 consultas) onde 232 pacientes

foram encaminhados ao reumatologista por FAN positivo

(solicitado por pediatra, obstetra, clinico-geral)

A razão mais comum para solicitação do FAN: dor

generalizada.

The clinical utility of a positive antinuclear antibody test result.

Abeles AM, Abeles M.

Am J Med. 2013 Apr;126(4):342-8. doi:

10.1016/j.amjmed.2012.09.014. Epub 2013 Feb 8

FAN

5/232 confirmaram LES (VPP= 2,1%)

23/232 tinham outra doença reumática associada ao

FAN (VPP 9,1%)

Nenhuma doença reumática associada tinha título

menor que 1:160

The clinical utility of a positive antinuclear antibody test result.

Abeles AM, Abeles M.

Am J Med. 2013 Apr;126(4):342-8. doi: 10.1016/j.amjmed.2012.09.014. Epub 2013 Feb 8

NO ENTANTO,

Autores não levaram em consideração baixo título inicial

Não consideraram padrão

Outras doenças não reumáticas não foram pesquisadas.

Meroni PL1, Chan EK, Tincani A, García de la Torre I, Andrade LE. Antinuclear antibody test: when to

order? Am J Med. 2013 Oct;126(10):e17. doi: 10.1016/j.amjmed.2013.04.022.

FAN

Pode ser precursor da doença

Exame de baixo custo

0,05% (1/2000) pessoas pode ter LES – triagem e diagnóstico precoce

FAN – PONTO DE CORTE

Estudo internacional demonstra

FAN 1:40 em 31,7% das pessoas sadias

FAN 1:80 em 13,3%

FAN 1:160* em 5% do grupo sadio

Importância do padrão de positividade

*Considerar perda de sensibilidade

Crianças: não há consenso.

Tan EM, Feltkamp TE, Smolen JS, et al. Range of antinuclear

antibodies in“healthy” individuals. Arthritis Rheum 1997;40:1601–11.

FAN

FAN negativo – Anti-ds dNA negativo

FAN negativo – Anti Ro (SSA) positivo

FAN

É importante para diagnóstico de DAÍ

Ampla discussão sobre seu uso

Recomendações para sua execução e interpretação

Necessidade de treinamento para os executores dos exames

Educação continuada para os solicitantes dos exames.

PONTOS CHAVES

Triagem

Interpretação do resultado

Outros exames mais específicos

Sm, RNP, Ro,La, Jo-1, Scl-70

Anti-dsDNA

Anti-p ribossomal

FAN – PROGNÓSTICO DE LES EM PACIENTES TRATADOS COM IMUNOBIOLÓGICOS

n=1000 pacientes com AR

n= 454 em uso de imunobiológicos

Infliximab = 31,7% FAN pos

Adalimumab = 16,1% FAN pos

Etanercept= 11,8% FAN pos

.

Takase et al,. What is the utility of routine ANA testing in predicting development of biological

DMARD-induced lupus and vasculitis in patients with rheumatoid arthritis? Data from a single-

centre cohort. Ann Rheum Dis 2014 Sep;73(9):1695-9. doi: 10.1136/annrheumdis-2014-205318.

Epub 2014 May 22

FAN

Não se observou utilidade em série de testes FAN / dsDNA para

prever o o desenvolvimento de lúpus / vasculite.

Sugeriu que pacientes que fazem FAN positivo podem apresentar

ausência de resposta secundária à terapia com imunobiológicos

.

Takase et al,. What is the utility of routine ANA testing in predicting development of biological

DMARD-induced lupus and vasculitis in patients with rheumatoid arthritis? Data from a single-

centre cohort. Ann Rheum Dis 2014 Sep;73(9):1695-9. doi: 10.1136/annrheumdis-2014-205318.

Epub 2014 May 22

OBRIGADO.

renatonisihara@up.com.br