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UNIVERSIDADE DE BRASIacuteLIA
FACULDADE DE AGRONOMIA E MEDICINA VETERINAacuteRIA
CRESCIMENTO E DESENVOLVIMENTO DE ARTEMISIA (Artemisia annua L) EM
CASA DE VEGETACcedilAtildeO DO TIPO ldquoGLASSHOUSErdquo
NAYARA CARVALHO
BRASIacuteLIA DEZEMBRO DE 2013
UNIVERSIDADE DE BRASIacuteLIA
FACULDADE DE AGRONOMIA E MEDICINA VETERINAacuteRIA
CRESCIMENTO E DESENVOLVIMENTO DE ARTEMISIA (Artemisia annua L) EM
CASA DE VEGETACcedilAtildeO DO TIPO ldquoGLASSHOUSErdquo
NAYARA CARVALHO
ORIENTADOR Dr JEAN KLEBER A MATTOS
MONOGRAFIA DE GRADUACcedilAtildeO EM AGRONOMIA
BRASIacuteLIA DEZEMBRO DE 2013
UNIVERSIDADE DE BRASIacuteLIA
FACULDADE DE AGRONOMIA E MEDICINA VETERINAacuteRIA
CRESCIMENTO E DESENVOLVIMENTO DE ARTEMISIA (Artemisia annua L) EM
CASA DE VEGETACcedilAtildeO DO TIPO ldquoGLASSHOUSErdquo
NAYARA CARVALHO
TRABALHO FINAL DE CONCLUSAtildeO DE GRADUACcedilAtildeO SUBMETIDA Agrave
FACULDADE DE AGRONOMIA E MEDICINA VETERINAacuteRIA DA UNIVERSIDADE
DE BRASIacuteLIA COMO PARTE DOS REQUISITOS NECESSAacuteRIOS Agrave OBTENCcedilAtildeO
DO GRAU DE ENGENHEIRA AGROcircNOMA
APROVADO DA BANCA EXAMINADORA ________________________________________ Prof Jean Kleber de Abreu Mattos Engenheiro Agrocircnomo Drndash Orientador ndash FAV-UnB ________________________________________ Anna Paula Rodrigues dos Santos Engenheiro Agrocircnomo Msc ndash Membro ndash FAV-UnB ________________________________________ Fabriacuteccio D Pereira dos Santos
Eng Agr Membro
BRASIacuteLIA DEZEMBRO DE 2013
FICHA CATALOGRAacuteFICA
CARVALHO N Crescimento e desenvolvimento de Artemisia (Artemisia annua L) em casa de vegetaccedilatildeo do tipo ldquoglasshouserdquo ndash Brasiacutelia 2013 28 p il Trabalho final de conclusatildeo da Graduaccedilatildeo ndash Universidade de Brasiacutelia Faculdade de agronomia e Medicina Veterinaacuteria Orientaccedilatildeo Prof Jean Kleber A Mattos
REFEREcircNCIA BIBLIOGRAacuteFICA
CARVALHO N Crescimento e desenvolvimento de Artemisia (Artemisia annua L) em casa de vegetaccedilatildeo do tipo ldquoglasshouserdquo Trabalho final de Graduaccedilatildeo ndash Universidade de Brasiacutelia Faculdade de agronomia e Medicina Veterinaacuteria ndash Brasiacutelia 2013 28 p il
CESSAtildeO DE DIREITOS
NOME DA AUTORA Nayara Carvalho
TIacuteTULO DO TRABALHO Crescimento e desenvolvimento de Artemisia (Artemisia annua L) em casa de vegetaccedilatildeo do tipo ldquoglasshouserdquo Ano 2013 Eacute concedida agrave Universidade de Brasiacutelia permissatildeo para reproduzir coacutepias desta dissertaccedilatildeo de graduaccedilatildeo e para emprestar ou vender tais coacutepias somente para propoacutesitos acadecircmicos e cientiacuteficos O autor reserva-se os outros direitos de publicaccedilatildeo e nenhuma parte desta dissertaccedilatildeo de graduaccedilatildeo pode ser reproduzida sem autorizaccedilatildeo por escrito do autor _________________________________
Nayara Carvalho
BRASIacuteLIA DF ndash Dezembro de 2013
AGRADECIMENTOS
Aos meus pais que sempre estiveram presentes em todas as
jornadas que percorri me apoiando nas decisotildees mais difiacuteceis e me guiando pelos
melhores caminhos
Aos meus irmatildeos por quem estimo muito e tenho muito carinho
Ao meu orientador o professor Jean Kleber com quem pude
compartilhar e absorver conhecimentos pela paciecircncia motivaccedilatildeo e pela
oportunidade de trabalhar ao lado de um profissional de gabarito reconhecido no
mundo acadecircmico e cientiacutefico
Aos amigos que fizeram parte direta ou indiretamente dessa minha
caminhada gratificante Aline Ronaldo e Fabriacuteccio
SUMAacuteRIO
LISTA DE FIGURAS vii
RESUMO viii
INTRODUCcedilAtildeO 1
OBJETIVO 2
REVISAtildeO BIBLIOGRAacuteFICA 2
Descriccedilatildeo da planta 2
COMPOSICcedilAtildeO E USO 3
ARTEMISININA 5
ASPECTOS AGRONOcircMICOS 7
Propagaccedilatildeo 7
Adubaccedilatildeo 8
Outros aspectos 8
MATERIAIS E MEacuteTODOS 9
RESUTADOS E DISCUSSAtildeO 11
CONCLUSAtildeO 14
REFEREcircNCIAS BIBLIOGRAacuteFICAS 15
DOCUMENTAacuteRIO FOTOGRAacuteFICO 17
vii
LISTA DE FIGURAS
1 Figura 1 ndash Crescimento meacutedio de Artemisia annua em vasos em
casa-de-vegetaccedilatildeo durante vinte semanas ndash paacuteg 25
2 Figura 2 ndash Evoluccedilatildeo da taxa diaacuteria de crescimento de Artemisia annua
em casa de vegetaccedilatildeo por 20 semanas ndash paacuteg 25
viii
RESUMO
A Artemisia annua L (Asteraceae) eacute originaacuteria de regiotildees de clima temperado da
Aacutesia e tem sido utilizada pela medicina tradicional chinesa haacute vaacuterios seacuteculos no
tratamento de malaacuteria A espeacutecie reveste-se portanto de indiscutiacutevel importacircncia
em paiacuteses tropicais onde a presenccedila da malaacuteria ainda preocupa as autoridades
da aacuterea da sauacutede o que eacute o caso da Regiatildeo Centro-Oeste do Brasil O objetivo
do presente trabalho foi estudar o crescimento e o desenvolvimento de A annua
mediante cultivo em vasos em casa de vegetaccedilatildeo As sementes de Aannua
foram produzidas em campo da proacutepria estaccedilatildeo e utilizadas para a semeadura em
sementeiras tipo caixa contendo a mistura EEB (Estaccedilatildeo Experimental de Biologia
da UnB ndash Brasiacutelia- DF) mais a formulaccedilatildeo 4-14-8 na dose de 100g para 40L da
mistura Apoacutes 42 dias da semeadura foram selecionadas 20 mudas que estavam
no ponto de transplante (meacutedia de 15 cm de altura) Dessa forma foram
transplantadas para vasos com capacidade para 25L preenchidos com a mistura
EEB Apoacutes nove semana de mensuraccedilotildees de altura as plantas foram pesadas
para obtenccedilatildeo das massas fresca e seca da parte aeacuterea Nas condiccedilotildees do
presente ensaio concluiu-se que o cultivo de Artemisia annua em vasos e em
casa-de-vegetaccedilatildeo eacute viaacutevel e pode ser notavelmente expressivo com porte
superior a 15m de altura e massa seca da parte aeacuterea com meacutedia de 30g
1
INTRODUCcedilAtildeO
A Artemisia annua L (Asteraceae) eacute originaacuteria de regiotildees de clima
temperado da Aacutesia e tem sido utilizada pela medicina tradicional chinesa haacute vaacuterios
seacuteculos no tratamento de malaacuteria Pesquisadores chineses estudaram mais de 30
espeacutecies do gecircnero Artemisia para confirmar a atividade antimalaacuterica das
mesmas Somente A annua e A apiacea Hance foram eficazes em combater
o Plasmodium vivax e o Plasmodium falciparum agentes etimoloacutegicos da malaacuteria
(DIAS 1997) Entre os metaboacutelitos secundaacuterios isolados das diversas espeacutecies do
gecircnero Artemisia os mais caracteriacutesticos satildeo as lactonas sesquiterpecircnicas
(RODRIGUES et al 2006)
As lactonas sesquiterpecircnicas pertencem a um grande grupo de produtos
naturais encontradas principalmente em plantas de vaacuterios gecircneros da famiacutelia
Asteraceae (SANTOS 2009)
A espeacutecie reveste-se portanto de indiscutiacutevel importacircncia em paiacuteses
tropicais onde a presenccedila da malaacuteria ainda preocupa as autoridades da aacuterea da
sauacutede o que eacute o caso da Regiatildeo Centro-Oeste do Brasil
Mediante solicitaccedilatildeo ao pesquisador Pedro Melillo Magalhatildees do CPQBA
(Centro Pluridisciplinar de pesquisas quiacutemicas bioloacutegicas e agriacutecolas ndash vinculado
agrave Unicamp ndash Universidade Estadual de Campinas) foi obtida uma pequena
partida de sementes de A annua com a qual obtivemos plantas adultas agrave campo
que produziram sementes feacuterteis possibilitando por conseguinte a realizaccedilatildeo de
ensaios agronocircmicos na Estaccedilatildeo Experimental de Biologia da Universidade de
Brasiacutelia (EEB ndash UnB)
O estudo do comportamento desta espeacutecie em nossa regiatildeo reveste-se de
consideraacutevel importacircncia uma vez que eacute fato conhecido de pesquisas da aacuterea que
o perfil de aromaacuteticos e outros componentes quiacutemicos varia bastante conforme a
condiccedilotildees ambientais em que as plantas satildeo cultivadas
Desta forma satildeo necessaacuterios ensaios agronocircmicos precedentes aos
ensaios quiacutemicos para que haja uma convivecircncia inicial com a espeacutecie visando o
conhecimento de suas possibilidades quanto agrave produccedilatildeo de mateacuteria prima
2
OBJETIVO
O objetivo do presente trabalho foi estudar o crescimento e o
desenvolvimento de A annua mediante cultivo em vasos em casa de vegetaccedilatildeo
REVISAtildeO BIBLIOGRAacuteFICA
Descriccedilatildeo da planta
Artemisia annua L (Syn Artemisia chamomilla C Winkl) Asteraceae
Nome vulgar Sweet wormwood eacute uma erva doce aromaacutetica com a flores
pequenas amarelas em capiacutetulos A annua conteacutem o componente quiacutemico
artemisinina em suas partes aeacutereas que satildeo usadas em drogas anti-malaacutericas
Outros nomes satildeo Sweet annie Wormwood annual (inglecircs) qing hao (chinecircs
artemiacutesia verde azulada) Difundida e naturalizada extensamente eacute
frequentemente abundante natildeo sendo do interesse do conservacionismo pois
ainda natildeo foi avaliada de acordo com criteacuterios da lista vermelha do IUCN ndash
International Union for Conservation of Nature Tem como habitat colinas bordas
das florestas e terrenos baldios Trata-se de uma planta medicinal antimalaacuterica
importante cujo oacuteleo essencial eacute usado tambeacutem em cosmeacuteticos A planta eacute
cultivada como um ornamental na Indoneacutesia (httpwwwkeworgplants-
fungiArtemisia-annuahtm)
A annua eacute nativa da Euraacutesia do sudeste da Europa (incluindo Albacircnia
Bulgaacuteria Montenegro Romecircnia Ruacutessia Servia Turquia) ao Vietnam e norte da
India Naturalizado em muitos paiacuteses (incluindo Argentina Aacuteustria a repuacuteblica
Tcheca Franccedila Alemanha Hungria Itaacutelia Polocircnia Eslovaacutequia Espanha Suiacuteccedila e
Estados Unidos) Foi registrada como de crescimento ruderal no Reino Unido
levada por paacutessaros ou nas latildes tendo sido cultivada experimentalmente tatildeo ao
norte como na Finlacircndia A espeacutecie e foi usada na China para tratar febres por
mais de 2000 anos O gecircnero Artemisia pertence agrave famiacutelia Asteraceae
(Compositae) que inclui plantas bem conhecidas usadas na medicina
perfumaria alimentaccedilatildeo e na induacutestria da bebida tal como a A dracunculus
(estragatildeo) A absinthium (absinto) e A vulgaris (artemiacutesia)
(httpwwwkeworgplants-fungiArtemisia-annuahtm )
3
A descriccedilatildeo botacircnica menciona que A annua eacute uma planta anual de haste
uacutenica glabra doce-aromaacutetica que cresce ateacute 1 m de altura (2 m como ruderal) A
haste eacute ereta nervada e marrom ou violeta-marrom As folhas basais satildeo 3-
pinatissectas (divididas trecircs vezes em foliacuteolos profundamente cortados) 3-5 cm
de comprimento e 2-4 cm de largura as folhas superiores satildeo 1-2-pinatissectas
menores e seacutesseis (sem peciacuteolo) Os capiacutetulos satildeo globosas com 2-25
miliacutemetros de diacircmetro em paniacuteculas frouxas O invoacutelucro (seacuterie das braacutecteas em
torno do capiacutetulo) eacute composto de braacutecteas glabras imbricadas As braacutecteas
exteriores satildeo verdes e linear-oblongas as braacutecteas internas satildeo brilhantes e
oval-arredondadas com uma margem larga fina seca Os capiacutetulos satildeo
disciformes e compostos de floretes filiformes exteriores (femininas) e de floretes
internos no disco (hermafroditas) Os floretes centrais numerosos do disco satildeo
esverdeados ou amarelados O fruto eacute um aquecircnio amarelo-marrom de parede
fina (pequeno seco) 06-08 miliacutemetros de tamanho com uma superfiacutecie
brilhante marcada com sulcos verticais e contendo uma uacutenica semente Os
aquecircnios natildeo tecircm nenhum papo e portanto natildeo satildeo dispersados pelo vento
como satildeo muitos outros da famiacutelia Asteraceae (Compositae)
(httpwwwkeworgplants-fungiArtemisia-annuahtm)
COMPOSICcedilAtildeO E USO A espeacutecie A annua eacute conhecida como ldquoQing Haordquo na China e eacute a fonte da
Medicina Tradicional Chinesa (MTC) que foi usada por mais de 2000 anos para
aliviar febres Na MTC prescreve-se frequentemente em combinaccedilatildeo com outros
ervas para tratar (aleacutem agraves febres) a icteriacutecia a dor de cabeccedila a vertigem e os
sangramentos nasais A pesquisa cientiacutefica da atividade anti-malaacuterica de A annua
comeccedilou no princiacutepio dos anos 70 em resposta agrave resistecircncia crescente agraves drogas
anti-malaacutericas estabelecidas por parte dos protozoaacuterios parasitas que causam a
malaacuteria (Protozoaacuterios do gecircnero Plasmodium ) O componente quiacutemico
artemisinina que ocorre naturalmente nas folhas da Aannua eacute um potente
agente anti-malaacuterico e pode matar o parasita mais agressivo o Plasmodium
falciparum (eacute seletivamente toacutexico ao estaacutegio assexual de eritrocito dos parasitas)
A artemisinina extraiacuteda de Aannua tornou-se extremamente importante em tratar
a malaacuteria desde que a resistecircncia do parasita a muitos outros antimalaacutericos se
tornou difundida (httpwwwkeworgplants-fungiArtemisia-annuahtm)
4
A planta A annua (Asteraceae) eacute listada na medicina chinesa como um
remeacutedio para vaacuterias febres incluindo a malaacuteria e contem um bem estabelecido
composto antimalaacuterico a artemisinina Neste estudo um hiacutebrido de A annua foi
cultivado com sucesso na Aacutefrica Central As partes aeacutereas da planta continham
063 - 070 de artemisinina por massa seca e aproximadamente 40 desta
artemisinina poderia ser extraiacuteda por meacutetodos simples da preparaccedilatildeo do chaacute
Cinco pacientes da malaacuteria que foram tratados com A annua mostraram um
desaparecimento raacutepido do parasita dentro de 2-4 dias Uma experimentaccedilatildeo
adicional com os 48 pacientes de malaacuteria mostrou um desaparecimento do
parasita em 44 pacientes (92) dentro de 4 dias Ambas as experimentaccedilotildees
mostraram uma melhoria marcada dos sintomas Estes resultados justificam
pesquisas adicionais do efeito antimalaacuterico de preparaccedilotildees de A annua
(MUELLER et al 2000)
Em fases de crescimento e desenvolvimento diferentes foi pesquisada a
variaccedilatildeo na quantidade e na qualidade do oacuteleo essencial de A annua incluindo
preacute- floraccedilatildeo floraccedilatildeo e poacutes - floraccedilatildeo Os oacuteleos foram obtidos por hidrodestilaccedilatildeo
das amostras secas ao ar Os rendimentos dos oacuteleos ( pp) nas diferentes
fases foram da ordem de preacute- floraccedilatildeo (097) floraccedilatildeo (1 23) e poacutes- floraccedilatildeo
(087) Os oacuteleos foram analisados por espectrometria de massa e cromatografia
em fase gasosa No total 32 35 e 33 constituintes foram identificados e
quantificados no oacuteleo de preacute - floraccedilatildeo floraccedilatildeo e poacutes - floraccedilatildeo representando
9767 92 e 92 4 dos oacuteleos respectivamente Cacircnfora 18-cineol canfeno
spatulenol alfandashpineno e artemiacutesia-cetona foram os principais componentes em
todas as amostras Monoterpenos eram o principal grupo de compostos em preacute-
floraccedilatildeo (6996) floraccedilatildeo (7244) e poacutes- floraccedilatildeo (7096)
(MOHAMMADREZA 2008)
A comparaccedilatildeo do perfil de cromatografia de gaacutes do oacuteleo essencial da A
annua produzido no Brasil com aqueles de outras origens revelou a variaccedilatildeo
significativa de seus constituintes O comportamento sazonal do iacutendice do
artemisinina 13 contra a produccedilatildeo de oacuteleo essencial foi observado durante um
periacuteodo da colheita A viabilidade econocircmica de diversos metodologias de
purificaccedilatildeo para a produccedilatildeo da artemisinina foi testada Foi produzido o composto
anti-malaacuterico 13 a um custo total de US$ 115 por grama (FOGLIO 1996)
5
ARTEMISININA
Artemisinina eacute uma lactona sesquiterpecircnica com uma ponte endoperoacutexido
e foi produzida semi-sinteticamente como uma droga antimalaacuterica A eficaacutecia do
chaacute feito de A annua no tratamento da malaacuteria eacute contencioso De acordo com
alguns autores a artemesinina natildeo eacute soluacutevel em aacutegua e as concentraccedilotildees nestas
infusotildees satildeo consideradas insuficientes para tratar a malaacuteria (MUELER et al
2004 RATH et al 2004 JANSEN 2006)
Em 2004 o ministro da sauacutede da Etioacutepia mudou a droga antimalaacuterica de
primeira linha da Etioacutepia de sulfadoxinaprimetamina (Fansidar) que tem uma
taxa de falha em meacutedia de 36 no tratamento para a artemetherlumefantrine
(Coartem) uma terapia de droga que conteacutem a artemisinina que eacute 100 eficaz
quando usado corretamente apesar de uma relativa falta mundial do produto do
derivado de A annua (MALARIA UPDATE 20052013)
A malaacuteria eacute causada primeiramente pelo Plasmodium falciparum que
invade as hemaacutecias e conteacutem heme-grupos ricos em ferro (na forma do
hemozoina) (POSNER amp OrsquoNEIL 2004)
O mecanismo de accedilatildeo proposto da artemisinina contra a malaacuteria envolve a
clivagem de pontes de endoperoacutexido pelo ferro produzindo os radicais livres
(ferro-oxo hipervalente espeacutecies epoacutexidos aldeiacutedos e compostos do dicarbonil)
que danificam as macromoleacuteculas bioloacutegicas causando estresse oxidativo nas
ceacutelulas do parasita (CUMMING 1997)
Com a possibilidade de isolarem maiores quantidades de artemisinina
(quinghaosu) plantas de A annua foram cultivadas por Liersch et al (1986) e
analisadas em estaacutegios diferentes de desenvolvimento O iacutendice mais elevado de
artemisinina foi encontrado imediatamente antes do florescimento Era tambeacutem
possiacutevel correlacionar o desenvolvimento das plantas com o iacutendice maacuteximo do
artemisinina As plantas de A annua cultivadas de vaacuterias outras fontes tambeacutem
foram examinadas para o iacutendice de artemisinina De acordo com os resultados
obtidos nenhuma dessas plantas contiveram quantidades suficientes do
composto (artemisinina) para justificar isolamento em uma escala teacutecnica Aleacutem
disso outras espeacutecies de Artemisia foram testadas e foi encontrada artemisinina
em somente uma outra espeacutecie Para aumentar a quantidade de artemisinina
durante o periacuteodo do crescimento da planta foram testados dois reguladores
6
hormonais de crescimento em A annua genoacutetipo 811 Os resultados mostraram
que o chlormequat podia aumentar o teor do composto(artemisinina) em 30 em
relaccedilatildeo agraves plantas natildeo tratadas Foram encontrados tambeacutem alguns discretos
efeitos dos reguladores de crescimento na morfologia dos trichomas glandulares
Para finalidades de produccedilatildeo plantas com um iacutendice elevado de
artemisinina satildeo requeridas Woerdenbag et al (1994) acompanharam o
desenvolvimento do conteuacutedo de artemisinina e dos sesquiterpenes
biosinteticamente relacionados aacutecido artemisiacutenico arteannuina B e artemisiteno
em plantas de A annua durante um periacuteodo da vegetaccedilatildeo no Vietnam onde esta
espeacutecie eacute indiacutegena Aleacutem disso o iacutendice do oacuteleo essencial e sua composiccedilatildeo
foram estudados As amostras das folhas gemas as flores ou as flores de poacutes-
florescimento e frutos foram analisados nos diferentes estaacutegios vegetativo (5 6 e
8 meses de idade) na formaccedilatildeo maciccedila das gemas (9 meses) no pleno
florescimento (10 meses) e poacutes-florescimento (10frac12 meses) O iacutendice mais
elevado de artemisinina (086 da massa seca) estava nas folhas de plantas com
5 meses de idade Neste estaacutegio o rendimento mais elevado da folha tambeacutem foi
encontrado Subsequentemente o iacutendice de artemisinina caiu gradualmente Na
idade de 5 meses os maiores conteuacutedos de aacutecido artemisinico e arteannuina-B
016 e 008 da massa seca respectivamente foram tambeacutem encontrados O
artemisiteno estava presente em todos os estaacutegios do desenvolvimento variando
de 0002 a 009 da massa seca Com 19 volumemassa o iacutendice do oacuteleo
essencial (OE) foi maacuteximo imediatamente antes do florescimento e foi composto
de 55 de monoterpenos e 45 de sesquiterpenes Em todos os outros estaacutegios
(04 ndash 10 volumemassa do oacuteleo essencial) esta relaccedilatildeo foi de 30 70 Os
principais componentes do OE foram cacircnfora e germacreno-D
Observaccedilotildees mostraram que o rendimento da artemisinina esteve
correlacionado positivamente com o rendimento da folha e o nuacutemero das
colheitas Os rendimentos elevados de artemisinina ocorreram quando a colheita
produziu folhas artemisinina-ricas acompanhadas pelo menor crescimento
possiacutevel do tecido da haste alcanccedilado em colheitas muacuteltiplas em plantas
crescidas a tempo integral e plantadas mais cedo As colheitas crescidas por ge30
semanas e colhidas trecircs a quatro vezes deram os rendimentos meacutedios de
441plusmn142 e de 742plusmn156 respectivamente Muito mais altos do que o rendimento
maacuteximo de 25 quilogramas haminus1 relatado para a A annua em estudos anteriores
7
Concluiu-se que para obter artemisinina em altos niacuteveis A annua deve ser
colhida quatro vezes (KUMAR et al 2004)
ASPECTOS AGRONOcircMICOS
Propagaccedilatildeo
Em meacutedia 1000 sementes pesam 003 g e natildeo diminuem sua viabilidade
ao secar Satildeo acessiacuteveis ao armazenamento agrave frio de longo prazo Germinam de
janeiro a marccedilo A germinaccedilatildeo de 100 foi obtida em um meio de germinaccedilatildeo de
aacutegar a 1 em uma temperatura de 15degC sob um fotoperiacuteodo 816 horas claro-
escuro (MOHAMMADREZA 2008)
A Artemisia annua eacute plantada extensamente e comercialmente
principalmente como uma fonte de oacuteleos essenciais e tambeacutem de artemisinina
sobretudo em regiotildees da China e VietnamNessas regiotildees o ciclo da planta em
condiccedilotildees naturais chega a 10 meses Na Europa e na Ameacuterica as plantas
crescem mais rapidamente terminando seu ciclo de vida em apenas seis meses
mesmo no campo Cresce melhor em talhotildees abertos e ensolarados em solos
arenosos e aluviais feacuterteis que sejam neutros a ligeiramente aacutecidos e que tenham
uma boa retenccedilatildeo de umidade e natildeo tolera a seca ou o encharcamento As
sementes germinam de janeiro a marccedilo e a frutificaccedilatildeo (colheita das sementes)
ocorre entre outubro e novembro (httpwwwkeworgplants-fungiArtemisia-
annuahtm)
Conceiccedilatildeo et al (2013) testaram a germinaccedilatildeo da semente de A annua
cultivar Silves sob duas condiccedilotildees ambientais a fim de fornecer informaccedilotildees
sobre seu cultivo Na primeira condiccedilatildeo realizou-se o teste padratildeo com 4 lotes de
100g de sementes semeadas em gerbox sobre papel mata-borratildeo e dispostas
em germinador agrave temperatura de 25-30deg C expostas agrave luz durante 8 horas diaacuterias
e umedecidas quando necessaacuterio ateacute sua emergecircncia Na segunda etapa foi
realizado o mesmo procedimento anterior poreacutem as sementes permaneceram no
germinador em ausecircncia de luz sob as mesmas condiccedilotildees de temperatura e
umidade Segundo anaacutelise estatiacutestica em Tukey a 5 aplicada aqui sobre as
meacutedias de cada lote de 100g sementes os tratamentos obtiveram diferenccedilas
significativas sendo que as sementes expostas agrave luz obtiveram maiores valores
8
de germinaccedilatildeo Em ambiente com total ausecircncia de luz as sementes obtiveram
baixiacutessima taxa de germinaccedilatildeo no mesmo periacuteodo que as sementes em ambiente
iluminado Esse fato indica que a semente de A annua eacute fotoblaacutestica positiva e
assim necessita de um miacutenimo de luz para que ocorra sua germinaccedilatildeo por esse
motivo natildeo podem ser enterradas e sua semeadura deve ser apenas a lanccedilo ou
em superfiacutecie sem cobertura com terra Esta caracteriacutestica eacute comum agrave muitas
espeacutecies que produzem sementes miuacutedas
Adubaccedilatildeo
Em 2004 e 2005 um estudo foi realizado com o objetivo de determinar o
rendimento os componentes do rendimento e o iacutendice da artemisinina de A
annua cultivada sob quatro aplicaccedilotildees do nitrogecircnio (0 40 80 e 120 quilogramas
haminus1) na regiatildeo de Ccedilukurova na Turquia As experimentaccedilotildees de campo foram
conduzidas na universidade de Ccedilukurova no departamento de agricultura da
faculdade Nesse estudo a altura da planta o nuacutemero de ramos o rendimento
fresco e seco da erva o rendimento fresco e seco da folha o iacutendice do oacuteleo
essencial e o iacutendice da artemisinina (por cromatografia liacutequida pelo HPLC de
desempenho elevado) foram examinados Pela anaacutelise de variaccedilatildeo as doses de
nitrogecircnio natildeo tiveram nenhum efeito estatiacutestico nas caracteriacutesticas investigadas
agrave exceccedilatildeo do iacutendice de artemisinina Esse iacutendice nas folhas secas foi afetado
significativamente pelas aplicaccedilotildees do nitrogecircnio que variaram de 632 a 2750
mg 100 gminus1 (OZGUVEN et al 2008)
Outros aspectos
Uma pesquisa desenvolvida em MEDIPLANT (Suiacuteccedila) e no CPQBA-
UNICAPM (Brasil) envolveu a seleccedilatildeo e produccedilatildeo de genoacutetipos ricos em
artemisinina apresentando biomassa elevada seguido por uma segunda seleccedilatildeo
para a adaptaccedilatildeo agraves circunstacircncias climaacuteticas do Brasil Com hibridizaccedilatildeo
controlada entre genoacutetipos selecionados da China e do Vietnam o ganho
geneacutetico foi obtido nos termos do iacutendice da artemisinina e da uniformidade da
populaccedilatildeo Com o aumento do iacutendice de biomassa e da artemisinina (estimado
pela monitoraccedilatildeo analiacutetica) era possiacutevel aumentar a produccedilatildeo de artemisinina de
9
5 Kgha (populaccedilatildeo baacutesica) para aproximadamente 25 Kgha (populaccedilatildeo
geneticamente produzida) No cultivo realizado no Brasil em 3 de 7 linhas
hiacutebridas 239 de x 1V Ch x Viet55 e 1V x 243 produziram respectivamente
2543 2305 e 2127 quilogramas de artemisininahacorte com as 2 colheitas
possiacuteveis por o ano O cultivo destas linhas hiacutebridas novas no Brasil eacute uma
teacutecnica praticaacutevel e altamente competitiva devido agrave produccedilatildeo obtida
(MAGALHAtildeES et al 1997)
Foi pesquisado o efeito do aumento da irradiacircncia (15 a 100 da luz solar
cheia L15 a L100) sobre o crescimento a taxa fotossinteacutetica liacutequida maacutexima
(Pmax) a compensaccedilatildeo (CI) a saturaccedilatildeo de irradiacircncia de A annua e a produccedilatildeo
de artemisinina Na luz solar plena A annua apresentou uma capacidade elevada
de fotossiacutentese com irradiacircncia baixa manteve um Pmax relativamente elevado
com um CI baixo O crescimento da altura e do diacircmetro biomassa total e da
folha e iacutendice de artemisinina diminuiu com a diminuiccedilatildeo da irradiacircncia que pocircde
ser conectado com a fotossiacutentese mais baixa na irradiacircncia mais baixa em
relaccedilatildeo agrave irradiacircncia mais elevada As irradiacircncias mudaram a alocaccedilatildeo de
biomassa em A annua A relaccedilatildeo massa de folhamassa total da espeacutecie
aumentou com a diminuiccedilatildeo da irradiacircncia mas a relaccedilatildeo raizmassa total e
raizmassa da parte aeacuterea aumentaram geralmente com a irradiacircncia crescente
Assim A annua pode crescer na luz solar parcial e plena Entretanto o
rendimento elevado da biomassa e da artemisinina requerem o cultivo em um
habitat aberto com luz solar adequada (WANG et al 2008)
MATERIAIS E MEacuteTODOS
O ensaio foi conduzido na Estaccedilatildeo Experimental de Biologia da
Universidade de Brasiacutelia (EEB ndash UnB) em casa-de-vegetaccedilatildeo do tipo
ldquoglasshouserdquo no periacuteodo de 19 de abril de 2013 a 6 de dezembro de 2013
(primeiro e segundo semestres respectivamente) Durante o ensaio a casa-de-
vegetaccedilatildeo apresentou uma temperatura meacutedia de aproximadamente 250deg C com
meacutedia das miacutenimas de 1325degC e das maacuteximas de 3675degC aferidas com
termocircmetro convencional de maacutexima e miacutenima O iacutendice de radiaccedilatildeo luminosa
esteve em trono de 50 determinado por fotocircmetro automaacutetico modelo Asahi-
Pentax SP-500
10
A partida de sementes de Aannua foi doada pelo pesquisador Pedro
Melillo Magalhatildees oriundas do CPQBA ndash UNICAMP e produzidas em campo da
proacutepria estaccedilatildeo e utilizadas para a semeadura em sementeiras tipo caixa
contendo a mistura EEB (Estaccedilatildeo Experimental de Biologia) com a seguinte
composiccedilatildeo Latossolo vermelho de cerrado areia vermiculita e composto
orgacircnico na proporccedilatildeo 3311 respectivamente mais a formulaccedilatildeo 4-14-8 na
dose de 100g para 40L da mistura Apoacutes 42 dias da semeadura foram
selecionadas 20 mudas que estavam no ponto de transplante (meacutedia de 15 cm
de altura) Dessa forma foram transplantadas para vasos com capacidade para
25L preenchidos com a mistura EEB
Apoacutes o transplante a altura da parte aeacuterea de todas as plantas foi aferida
semanalmente com o uso de uma trena com o objetivo de desenhar-se a curva
de crescimento As mediccedilotildees tiveram iniacutecio uma semana apoacutes o transplante no
dia 14 de maio
No dia 26 de julho de 201349 dias apoacutes o transplante as plantas foram
transferidas dos vasos de 25L para vasos com maior capacidade (325L) para
favorecer o seu crescimento e desenvolvimento e no dia 17 de setembro102 dias
apoacutes o transplante foi feita uma suplementaccedilatildeo de terra para as 20 plantas com o
mesmo objetivo mediante a colocaccedilatildeo por baixo de um outro vaso de mesmo
tamanho contendo metade de seu volume em Substrato EEB Isso permitiu que
as raiacutezes crescessem no volume adicional de mistura atraveacutes dos furos de
drenagem do vaso original
O controle de plantas daninhas foi feito manualmente e o controle
fitossanitaacuterio atraveacutes de acompanhamento e sucessivas observaccedilotildees Ao fim do
ensaio foi observada uma pequena infestaccedilatildeo com cochonilhas As cochonilhas
foram identificadas por Pseudococcus citri Risso ndash mais conhecida por
ldquocochonilha algodatildeordquo Foi parcialmente controlada em curto prazo com uma
pulverizaccedilatildeo manual de soluccedilatildeo de detergente (10 ml 1 litro de aacutegua)
Ao fim do ensaio dia 18 de outubro foram obtidas as massas fresca e
seca das plantas bem como os coeficientes de variaccedilatildeo dos dados
11
RESUTADOS E DISCUSSAtildeO
Os resultados do presente ensaio encontram-se representados nas Figuras
4 e 5 as quais representam respectivamente a curva de crescimento de Aannua
em vinte semana (s) em casa-de-vegetaccedilatildeo e a evoluccedilatildeo da taxa meacutedia diaacuteria de
crescimento
Observando-se a Figura 2 que apresenta a evoluccedilatildeo da taxa meacutedia de
crescimento verificou-se que entre a quinta e a setima semanas a taxa meacutedia
diaacuteria de crescimento cresceu de 08 cm ao dia para em torno de 20 cm por dia
tendo havido um decrescimo e um estabilidade entre a oitava e a deacutecima segunda
semanas quando entatildeo ocorreu o segundo pico passando a taxa meacutedia diaacuteria de
crescimento de 12 cm para 18 cm seguindo-se um decrescimo ateacute 05 cmdia
nas deacutecima sexta e deacutecima seacutetimas semanas quando entatildeo houve o terceiro
pico na deacutecima oitava semana atingindo 08cmdia e novamente decaindo ateacute 04
cmdia na vigeacutesima semana
0
50
100
150
1s 3s 5s 7s 9s 11s 13s 15s 17s 19s
Alt
ura
em
cm
Crescimento meacutedio de Artemisia annua em vasos em casa de vegataccedilatildeo durante 20 semanas
(s)
Figura 1 ndash Crescimento meacutedio de A annua em vasos em casa-de-vegetaccedilatildeo durante 20 semanas (s) ndash Observa-se que a altura das plantas aumentou
notavelmente a partir da quinta semana apoacutes o transplante correspondendo ao primeiro pico de crescimento
12
Os picos de crescimento de A annua submetida ao cultivo em vasos em
casa-de-vegetaccedilatildeo podem ser explicados pelas interferecircncias do pesquisador que
visava maximizar o desenvolvimento das plantas O primeiro pico pode ser
atribuiacutedo ao padratildeo de crescimento da planta Por ocasiatildeo da primeira troca de
vasos quando a planta ganhou 2145 de volume de substrato para explorar
teria havido o segundo pico por volta da deacutecima segunda semana O terceiro pico
se deu em consequecircncia da segunda suplementaccedilatildeo de substrato ocorrida por
volta da deacutecima seacutetima semana
O aproveitamento da segunda suplementaccedilatildeo foi efetivo tendo as plantas
explorado o volume de substrato adicional em sua totalidade ocupando-o por
inteiro o volume (Figura 6)
Eacute consenso entre pesquisadores que as plantas crescidas em vasos nunca
alcanccedilam seu potencial maior conforme imagens de suas raiacutezes mostram Uma
teacutecnica meacutedica da imagem chamada a imagem de ressonacircncia magneacutetico (MRI)
foi usada por investigadores para capturar instantacircneos da raiz da planta no vaso
As figuras obtidas revelam que as raiacutezes ldquodetectam o tamanho do vasordquo e emitem
um sinal que resulta na restriccedilatildeo o crescimento da planta (POORTER et al 2012)
Poorter et al (2012) esclarecem que a maioria das experiecircncias em
biologia de plantas usa plantas crescidas em algum tipo de recipiente ou vaso
Uma meta-anaacutelise em 65 estudos que analisaram o efeito do tamanho do vaso no
0
05
1
15
2
25
1s 3s 5s 7s 9s 11s 13s 15s 17s 19s
Ce
ntiacute
met
ros
po
r d
ia
Evoluccedilatildeo da taxa meacutedia diaacuteria de crescimento de Artemisia annua em casa de vegetaccedilatildeo por
20 semanas
Figura 2 ndash Evoluccedilatildeo da taxa diaacuteria de cresimento de A annua em casa de vegetaccedilatildeo por 20 semanas (s)
13
crescimento e em variaacuteveis afins foi conduzida e verificou que em meacutedia dobrar o
tamanho do vaso aumentou a produccedilatildeo da biomassa da planta em 43 Uma
anaacutelise adicional de efeitos do tamanho do vaso nos componentes afins do
crescimento sugere que o crescimento reduzido em vasos menores eacute causado
principalmente por uma reduccedilatildeo na fotossiacutentese por aacuterea da folha da unidade
mais do que por mudanccedilas na morfologia da folha ou no alocamento de
biomassa O tamanho apropriado do vaso dependeraacute logicamente do tamanho
das plantas que crescem neles Baseado em vaacuterias linhas da evidecircncia noacutes
sugerimos que um tamanho apropriado do vaso eacute um no qual a biomassa da
planta natildeo exceda 1 g L-1 Na praacutetica atual da pesquisa 65 das experiecircncias
excedem essa referecircncia Noacutes sugerimos que os investigadores devam
considerar com cuidado o tamanho do vaso em suas experiecircncias porque os
vasos pequenos podem mudar resultados experimentais e sabotar a finalidade da
experiecircncia
No presente ensaio de vasos foi obtido uma massa seca da parte aeacuterea
meacutedia de 2995g com um coeficiente de variaccedilatildeo de 3001 com uma planta por
vaso com dois transplantes para ganho de volume de solo a ser explorado O
corte das plantas se deu com 80 dias apoacutes o transplante
Quiteacuterio (2006) tambeacutem em ensaio de vasos obteve a meacutedia 25g de massa
seca de A annua em ensaio de vasos com duas plantas onde a colheita foi feita
75 dias apoacutes a semeadura no preacute-florescimento Os dois resultados apresentam
coerecircncia entre si
O ataque de cochonilhas observado era esperado como um reflexo natural
do estresse das plantas que satildeo submetidas ao cultivo em vaso em casa-de-
vegetaccedilatildeo
14
CONCLUSAtildeO
Nas condiccedilotildees do presente ensaio concluiu-se que o cultivo de Artemisia annua
em vasos e em casa-de-vegetaccedilatildeo eacute viaacutevel e pode ser notavelmente expressivo
com porte superior a 15m de altura e massa seca da parte aeacuterea meacutedia em torno
de 30g
Numa etapa posterior visualizam-se os ensaios objetivando a geraccedilatildeo de uma
tecnologia de produccedilatildeo tendo como alvo a produtividade em artesinina-A que eacute o
componente ativo contra malaacuteria
15
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17
DOCUMENTAacuteRIO FOTOGRAacuteFICO
Foto 1 ndash Mudas na sementeira prontas para transplante - Foto da autora Nayara Carvalho
Foto 2 ndash Mudas de Artemisia annua no dia do transplante ndash Foto da autora Nayara
Carvalho
18
Foto 3 ndash Aspecto geral do ensaio ndash Foto da autora Nayara Carvalho
Foto 4 ndash Suplementaccedilatildeo de substrato ndash Foto do orientador Jean Kleber
19
Foto 5 ndash Aproveitamento pela planta di suplemento de substrato ndash Foto do orientador Jean Kleber
Foto 6 ndash A planta mais alta ao final do ensaio ndash Foto do orientador Jean Kleber
20
Foto 8 ndash Ataque de colchonilhas em A annua ndash Foto da autora Nayara Carvalho
Foto 7 ndash A planta mais baixa ao final do ensaio
UNIVERSIDADE DE BRASIacuteLIA
FACULDADE DE AGRONOMIA E MEDICINA VETERINAacuteRIA
CRESCIMENTO E DESENVOLVIMENTO DE ARTEMISIA (Artemisia annua L) EM
CASA DE VEGETACcedilAtildeO DO TIPO ldquoGLASSHOUSErdquo
NAYARA CARVALHO
ORIENTADOR Dr JEAN KLEBER A MATTOS
MONOGRAFIA DE GRADUACcedilAtildeO EM AGRONOMIA
BRASIacuteLIA DEZEMBRO DE 2013
UNIVERSIDADE DE BRASIacuteLIA
FACULDADE DE AGRONOMIA E MEDICINA VETERINAacuteRIA
CRESCIMENTO E DESENVOLVIMENTO DE ARTEMISIA (Artemisia annua L) EM
CASA DE VEGETACcedilAtildeO DO TIPO ldquoGLASSHOUSErdquo
NAYARA CARVALHO
TRABALHO FINAL DE CONCLUSAtildeO DE GRADUACcedilAtildeO SUBMETIDA Agrave
FACULDADE DE AGRONOMIA E MEDICINA VETERINAacuteRIA DA UNIVERSIDADE
DE BRASIacuteLIA COMO PARTE DOS REQUISITOS NECESSAacuteRIOS Agrave OBTENCcedilAtildeO
DO GRAU DE ENGENHEIRA AGROcircNOMA
APROVADO DA BANCA EXAMINADORA ________________________________________ Prof Jean Kleber de Abreu Mattos Engenheiro Agrocircnomo Drndash Orientador ndash FAV-UnB ________________________________________ Anna Paula Rodrigues dos Santos Engenheiro Agrocircnomo Msc ndash Membro ndash FAV-UnB ________________________________________ Fabriacuteccio D Pereira dos Santos
Eng Agr Membro
BRASIacuteLIA DEZEMBRO DE 2013
FICHA CATALOGRAacuteFICA
CARVALHO N Crescimento e desenvolvimento de Artemisia (Artemisia annua L) em casa de vegetaccedilatildeo do tipo ldquoglasshouserdquo ndash Brasiacutelia 2013 28 p il Trabalho final de conclusatildeo da Graduaccedilatildeo ndash Universidade de Brasiacutelia Faculdade de agronomia e Medicina Veterinaacuteria Orientaccedilatildeo Prof Jean Kleber A Mattos
REFEREcircNCIA BIBLIOGRAacuteFICA
CARVALHO N Crescimento e desenvolvimento de Artemisia (Artemisia annua L) em casa de vegetaccedilatildeo do tipo ldquoglasshouserdquo Trabalho final de Graduaccedilatildeo ndash Universidade de Brasiacutelia Faculdade de agronomia e Medicina Veterinaacuteria ndash Brasiacutelia 2013 28 p il
CESSAtildeO DE DIREITOS
NOME DA AUTORA Nayara Carvalho
TIacuteTULO DO TRABALHO Crescimento e desenvolvimento de Artemisia (Artemisia annua L) em casa de vegetaccedilatildeo do tipo ldquoglasshouserdquo Ano 2013 Eacute concedida agrave Universidade de Brasiacutelia permissatildeo para reproduzir coacutepias desta dissertaccedilatildeo de graduaccedilatildeo e para emprestar ou vender tais coacutepias somente para propoacutesitos acadecircmicos e cientiacuteficos O autor reserva-se os outros direitos de publicaccedilatildeo e nenhuma parte desta dissertaccedilatildeo de graduaccedilatildeo pode ser reproduzida sem autorizaccedilatildeo por escrito do autor _________________________________
Nayara Carvalho
BRASIacuteLIA DF ndash Dezembro de 2013
AGRADECIMENTOS
Aos meus pais que sempre estiveram presentes em todas as
jornadas que percorri me apoiando nas decisotildees mais difiacuteceis e me guiando pelos
melhores caminhos
Aos meus irmatildeos por quem estimo muito e tenho muito carinho
Ao meu orientador o professor Jean Kleber com quem pude
compartilhar e absorver conhecimentos pela paciecircncia motivaccedilatildeo e pela
oportunidade de trabalhar ao lado de um profissional de gabarito reconhecido no
mundo acadecircmico e cientiacutefico
Aos amigos que fizeram parte direta ou indiretamente dessa minha
caminhada gratificante Aline Ronaldo e Fabriacuteccio
SUMAacuteRIO
LISTA DE FIGURAS vii
RESUMO viii
INTRODUCcedilAtildeO 1
OBJETIVO 2
REVISAtildeO BIBLIOGRAacuteFICA 2
Descriccedilatildeo da planta 2
COMPOSICcedilAtildeO E USO 3
ARTEMISININA 5
ASPECTOS AGRONOcircMICOS 7
Propagaccedilatildeo 7
Adubaccedilatildeo 8
Outros aspectos 8
MATERIAIS E MEacuteTODOS 9
RESUTADOS E DISCUSSAtildeO 11
CONCLUSAtildeO 14
REFEREcircNCIAS BIBLIOGRAacuteFICAS 15
DOCUMENTAacuteRIO FOTOGRAacuteFICO 17
vii
LISTA DE FIGURAS
1 Figura 1 ndash Crescimento meacutedio de Artemisia annua em vasos em
casa-de-vegetaccedilatildeo durante vinte semanas ndash paacuteg 25
2 Figura 2 ndash Evoluccedilatildeo da taxa diaacuteria de crescimento de Artemisia annua
em casa de vegetaccedilatildeo por 20 semanas ndash paacuteg 25
viii
RESUMO
A Artemisia annua L (Asteraceae) eacute originaacuteria de regiotildees de clima temperado da
Aacutesia e tem sido utilizada pela medicina tradicional chinesa haacute vaacuterios seacuteculos no
tratamento de malaacuteria A espeacutecie reveste-se portanto de indiscutiacutevel importacircncia
em paiacuteses tropicais onde a presenccedila da malaacuteria ainda preocupa as autoridades
da aacuterea da sauacutede o que eacute o caso da Regiatildeo Centro-Oeste do Brasil O objetivo
do presente trabalho foi estudar o crescimento e o desenvolvimento de A annua
mediante cultivo em vasos em casa de vegetaccedilatildeo As sementes de Aannua
foram produzidas em campo da proacutepria estaccedilatildeo e utilizadas para a semeadura em
sementeiras tipo caixa contendo a mistura EEB (Estaccedilatildeo Experimental de Biologia
da UnB ndash Brasiacutelia- DF) mais a formulaccedilatildeo 4-14-8 na dose de 100g para 40L da
mistura Apoacutes 42 dias da semeadura foram selecionadas 20 mudas que estavam
no ponto de transplante (meacutedia de 15 cm de altura) Dessa forma foram
transplantadas para vasos com capacidade para 25L preenchidos com a mistura
EEB Apoacutes nove semana de mensuraccedilotildees de altura as plantas foram pesadas
para obtenccedilatildeo das massas fresca e seca da parte aeacuterea Nas condiccedilotildees do
presente ensaio concluiu-se que o cultivo de Artemisia annua em vasos e em
casa-de-vegetaccedilatildeo eacute viaacutevel e pode ser notavelmente expressivo com porte
superior a 15m de altura e massa seca da parte aeacuterea com meacutedia de 30g
1
INTRODUCcedilAtildeO
A Artemisia annua L (Asteraceae) eacute originaacuteria de regiotildees de clima
temperado da Aacutesia e tem sido utilizada pela medicina tradicional chinesa haacute vaacuterios
seacuteculos no tratamento de malaacuteria Pesquisadores chineses estudaram mais de 30
espeacutecies do gecircnero Artemisia para confirmar a atividade antimalaacuterica das
mesmas Somente A annua e A apiacea Hance foram eficazes em combater
o Plasmodium vivax e o Plasmodium falciparum agentes etimoloacutegicos da malaacuteria
(DIAS 1997) Entre os metaboacutelitos secundaacuterios isolados das diversas espeacutecies do
gecircnero Artemisia os mais caracteriacutesticos satildeo as lactonas sesquiterpecircnicas
(RODRIGUES et al 2006)
As lactonas sesquiterpecircnicas pertencem a um grande grupo de produtos
naturais encontradas principalmente em plantas de vaacuterios gecircneros da famiacutelia
Asteraceae (SANTOS 2009)
A espeacutecie reveste-se portanto de indiscutiacutevel importacircncia em paiacuteses
tropicais onde a presenccedila da malaacuteria ainda preocupa as autoridades da aacuterea da
sauacutede o que eacute o caso da Regiatildeo Centro-Oeste do Brasil
Mediante solicitaccedilatildeo ao pesquisador Pedro Melillo Magalhatildees do CPQBA
(Centro Pluridisciplinar de pesquisas quiacutemicas bioloacutegicas e agriacutecolas ndash vinculado
agrave Unicamp ndash Universidade Estadual de Campinas) foi obtida uma pequena
partida de sementes de A annua com a qual obtivemos plantas adultas agrave campo
que produziram sementes feacuterteis possibilitando por conseguinte a realizaccedilatildeo de
ensaios agronocircmicos na Estaccedilatildeo Experimental de Biologia da Universidade de
Brasiacutelia (EEB ndash UnB)
O estudo do comportamento desta espeacutecie em nossa regiatildeo reveste-se de
consideraacutevel importacircncia uma vez que eacute fato conhecido de pesquisas da aacuterea que
o perfil de aromaacuteticos e outros componentes quiacutemicos varia bastante conforme a
condiccedilotildees ambientais em que as plantas satildeo cultivadas
Desta forma satildeo necessaacuterios ensaios agronocircmicos precedentes aos
ensaios quiacutemicos para que haja uma convivecircncia inicial com a espeacutecie visando o
conhecimento de suas possibilidades quanto agrave produccedilatildeo de mateacuteria prima
2
OBJETIVO
O objetivo do presente trabalho foi estudar o crescimento e o
desenvolvimento de A annua mediante cultivo em vasos em casa de vegetaccedilatildeo
REVISAtildeO BIBLIOGRAacuteFICA
Descriccedilatildeo da planta
Artemisia annua L (Syn Artemisia chamomilla C Winkl) Asteraceae
Nome vulgar Sweet wormwood eacute uma erva doce aromaacutetica com a flores
pequenas amarelas em capiacutetulos A annua conteacutem o componente quiacutemico
artemisinina em suas partes aeacutereas que satildeo usadas em drogas anti-malaacutericas
Outros nomes satildeo Sweet annie Wormwood annual (inglecircs) qing hao (chinecircs
artemiacutesia verde azulada) Difundida e naturalizada extensamente eacute
frequentemente abundante natildeo sendo do interesse do conservacionismo pois
ainda natildeo foi avaliada de acordo com criteacuterios da lista vermelha do IUCN ndash
International Union for Conservation of Nature Tem como habitat colinas bordas
das florestas e terrenos baldios Trata-se de uma planta medicinal antimalaacuterica
importante cujo oacuteleo essencial eacute usado tambeacutem em cosmeacuteticos A planta eacute
cultivada como um ornamental na Indoneacutesia (httpwwwkeworgplants-
fungiArtemisia-annuahtm)
A annua eacute nativa da Euraacutesia do sudeste da Europa (incluindo Albacircnia
Bulgaacuteria Montenegro Romecircnia Ruacutessia Servia Turquia) ao Vietnam e norte da
India Naturalizado em muitos paiacuteses (incluindo Argentina Aacuteustria a repuacuteblica
Tcheca Franccedila Alemanha Hungria Itaacutelia Polocircnia Eslovaacutequia Espanha Suiacuteccedila e
Estados Unidos) Foi registrada como de crescimento ruderal no Reino Unido
levada por paacutessaros ou nas latildes tendo sido cultivada experimentalmente tatildeo ao
norte como na Finlacircndia A espeacutecie e foi usada na China para tratar febres por
mais de 2000 anos O gecircnero Artemisia pertence agrave famiacutelia Asteraceae
(Compositae) que inclui plantas bem conhecidas usadas na medicina
perfumaria alimentaccedilatildeo e na induacutestria da bebida tal como a A dracunculus
(estragatildeo) A absinthium (absinto) e A vulgaris (artemiacutesia)
(httpwwwkeworgplants-fungiArtemisia-annuahtm )
3
A descriccedilatildeo botacircnica menciona que A annua eacute uma planta anual de haste
uacutenica glabra doce-aromaacutetica que cresce ateacute 1 m de altura (2 m como ruderal) A
haste eacute ereta nervada e marrom ou violeta-marrom As folhas basais satildeo 3-
pinatissectas (divididas trecircs vezes em foliacuteolos profundamente cortados) 3-5 cm
de comprimento e 2-4 cm de largura as folhas superiores satildeo 1-2-pinatissectas
menores e seacutesseis (sem peciacuteolo) Os capiacutetulos satildeo globosas com 2-25
miliacutemetros de diacircmetro em paniacuteculas frouxas O invoacutelucro (seacuterie das braacutecteas em
torno do capiacutetulo) eacute composto de braacutecteas glabras imbricadas As braacutecteas
exteriores satildeo verdes e linear-oblongas as braacutecteas internas satildeo brilhantes e
oval-arredondadas com uma margem larga fina seca Os capiacutetulos satildeo
disciformes e compostos de floretes filiformes exteriores (femininas) e de floretes
internos no disco (hermafroditas) Os floretes centrais numerosos do disco satildeo
esverdeados ou amarelados O fruto eacute um aquecircnio amarelo-marrom de parede
fina (pequeno seco) 06-08 miliacutemetros de tamanho com uma superfiacutecie
brilhante marcada com sulcos verticais e contendo uma uacutenica semente Os
aquecircnios natildeo tecircm nenhum papo e portanto natildeo satildeo dispersados pelo vento
como satildeo muitos outros da famiacutelia Asteraceae (Compositae)
(httpwwwkeworgplants-fungiArtemisia-annuahtm)
COMPOSICcedilAtildeO E USO A espeacutecie A annua eacute conhecida como ldquoQing Haordquo na China e eacute a fonte da
Medicina Tradicional Chinesa (MTC) que foi usada por mais de 2000 anos para
aliviar febres Na MTC prescreve-se frequentemente em combinaccedilatildeo com outros
ervas para tratar (aleacutem agraves febres) a icteriacutecia a dor de cabeccedila a vertigem e os
sangramentos nasais A pesquisa cientiacutefica da atividade anti-malaacuterica de A annua
comeccedilou no princiacutepio dos anos 70 em resposta agrave resistecircncia crescente agraves drogas
anti-malaacutericas estabelecidas por parte dos protozoaacuterios parasitas que causam a
malaacuteria (Protozoaacuterios do gecircnero Plasmodium ) O componente quiacutemico
artemisinina que ocorre naturalmente nas folhas da Aannua eacute um potente
agente anti-malaacuterico e pode matar o parasita mais agressivo o Plasmodium
falciparum (eacute seletivamente toacutexico ao estaacutegio assexual de eritrocito dos parasitas)
A artemisinina extraiacuteda de Aannua tornou-se extremamente importante em tratar
a malaacuteria desde que a resistecircncia do parasita a muitos outros antimalaacutericos se
tornou difundida (httpwwwkeworgplants-fungiArtemisia-annuahtm)
4
A planta A annua (Asteraceae) eacute listada na medicina chinesa como um
remeacutedio para vaacuterias febres incluindo a malaacuteria e contem um bem estabelecido
composto antimalaacuterico a artemisinina Neste estudo um hiacutebrido de A annua foi
cultivado com sucesso na Aacutefrica Central As partes aeacutereas da planta continham
063 - 070 de artemisinina por massa seca e aproximadamente 40 desta
artemisinina poderia ser extraiacuteda por meacutetodos simples da preparaccedilatildeo do chaacute
Cinco pacientes da malaacuteria que foram tratados com A annua mostraram um
desaparecimento raacutepido do parasita dentro de 2-4 dias Uma experimentaccedilatildeo
adicional com os 48 pacientes de malaacuteria mostrou um desaparecimento do
parasita em 44 pacientes (92) dentro de 4 dias Ambas as experimentaccedilotildees
mostraram uma melhoria marcada dos sintomas Estes resultados justificam
pesquisas adicionais do efeito antimalaacuterico de preparaccedilotildees de A annua
(MUELLER et al 2000)
Em fases de crescimento e desenvolvimento diferentes foi pesquisada a
variaccedilatildeo na quantidade e na qualidade do oacuteleo essencial de A annua incluindo
preacute- floraccedilatildeo floraccedilatildeo e poacutes - floraccedilatildeo Os oacuteleos foram obtidos por hidrodestilaccedilatildeo
das amostras secas ao ar Os rendimentos dos oacuteleos ( pp) nas diferentes
fases foram da ordem de preacute- floraccedilatildeo (097) floraccedilatildeo (1 23) e poacutes- floraccedilatildeo
(087) Os oacuteleos foram analisados por espectrometria de massa e cromatografia
em fase gasosa No total 32 35 e 33 constituintes foram identificados e
quantificados no oacuteleo de preacute - floraccedilatildeo floraccedilatildeo e poacutes - floraccedilatildeo representando
9767 92 e 92 4 dos oacuteleos respectivamente Cacircnfora 18-cineol canfeno
spatulenol alfandashpineno e artemiacutesia-cetona foram os principais componentes em
todas as amostras Monoterpenos eram o principal grupo de compostos em preacute-
floraccedilatildeo (6996) floraccedilatildeo (7244) e poacutes- floraccedilatildeo (7096)
(MOHAMMADREZA 2008)
A comparaccedilatildeo do perfil de cromatografia de gaacutes do oacuteleo essencial da A
annua produzido no Brasil com aqueles de outras origens revelou a variaccedilatildeo
significativa de seus constituintes O comportamento sazonal do iacutendice do
artemisinina 13 contra a produccedilatildeo de oacuteleo essencial foi observado durante um
periacuteodo da colheita A viabilidade econocircmica de diversos metodologias de
purificaccedilatildeo para a produccedilatildeo da artemisinina foi testada Foi produzido o composto
anti-malaacuterico 13 a um custo total de US$ 115 por grama (FOGLIO 1996)
5
ARTEMISININA
Artemisinina eacute uma lactona sesquiterpecircnica com uma ponte endoperoacutexido
e foi produzida semi-sinteticamente como uma droga antimalaacuterica A eficaacutecia do
chaacute feito de A annua no tratamento da malaacuteria eacute contencioso De acordo com
alguns autores a artemesinina natildeo eacute soluacutevel em aacutegua e as concentraccedilotildees nestas
infusotildees satildeo consideradas insuficientes para tratar a malaacuteria (MUELER et al
2004 RATH et al 2004 JANSEN 2006)
Em 2004 o ministro da sauacutede da Etioacutepia mudou a droga antimalaacuterica de
primeira linha da Etioacutepia de sulfadoxinaprimetamina (Fansidar) que tem uma
taxa de falha em meacutedia de 36 no tratamento para a artemetherlumefantrine
(Coartem) uma terapia de droga que conteacutem a artemisinina que eacute 100 eficaz
quando usado corretamente apesar de uma relativa falta mundial do produto do
derivado de A annua (MALARIA UPDATE 20052013)
A malaacuteria eacute causada primeiramente pelo Plasmodium falciparum que
invade as hemaacutecias e conteacutem heme-grupos ricos em ferro (na forma do
hemozoina) (POSNER amp OrsquoNEIL 2004)
O mecanismo de accedilatildeo proposto da artemisinina contra a malaacuteria envolve a
clivagem de pontes de endoperoacutexido pelo ferro produzindo os radicais livres
(ferro-oxo hipervalente espeacutecies epoacutexidos aldeiacutedos e compostos do dicarbonil)
que danificam as macromoleacuteculas bioloacutegicas causando estresse oxidativo nas
ceacutelulas do parasita (CUMMING 1997)
Com a possibilidade de isolarem maiores quantidades de artemisinina
(quinghaosu) plantas de A annua foram cultivadas por Liersch et al (1986) e
analisadas em estaacutegios diferentes de desenvolvimento O iacutendice mais elevado de
artemisinina foi encontrado imediatamente antes do florescimento Era tambeacutem
possiacutevel correlacionar o desenvolvimento das plantas com o iacutendice maacuteximo do
artemisinina As plantas de A annua cultivadas de vaacuterias outras fontes tambeacutem
foram examinadas para o iacutendice de artemisinina De acordo com os resultados
obtidos nenhuma dessas plantas contiveram quantidades suficientes do
composto (artemisinina) para justificar isolamento em uma escala teacutecnica Aleacutem
disso outras espeacutecies de Artemisia foram testadas e foi encontrada artemisinina
em somente uma outra espeacutecie Para aumentar a quantidade de artemisinina
durante o periacuteodo do crescimento da planta foram testados dois reguladores
6
hormonais de crescimento em A annua genoacutetipo 811 Os resultados mostraram
que o chlormequat podia aumentar o teor do composto(artemisinina) em 30 em
relaccedilatildeo agraves plantas natildeo tratadas Foram encontrados tambeacutem alguns discretos
efeitos dos reguladores de crescimento na morfologia dos trichomas glandulares
Para finalidades de produccedilatildeo plantas com um iacutendice elevado de
artemisinina satildeo requeridas Woerdenbag et al (1994) acompanharam o
desenvolvimento do conteuacutedo de artemisinina e dos sesquiterpenes
biosinteticamente relacionados aacutecido artemisiacutenico arteannuina B e artemisiteno
em plantas de A annua durante um periacuteodo da vegetaccedilatildeo no Vietnam onde esta
espeacutecie eacute indiacutegena Aleacutem disso o iacutendice do oacuteleo essencial e sua composiccedilatildeo
foram estudados As amostras das folhas gemas as flores ou as flores de poacutes-
florescimento e frutos foram analisados nos diferentes estaacutegios vegetativo (5 6 e
8 meses de idade) na formaccedilatildeo maciccedila das gemas (9 meses) no pleno
florescimento (10 meses) e poacutes-florescimento (10frac12 meses) O iacutendice mais
elevado de artemisinina (086 da massa seca) estava nas folhas de plantas com
5 meses de idade Neste estaacutegio o rendimento mais elevado da folha tambeacutem foi
encontrado Subsequentemente o iacutendice de artemisinina caiu gradualmente Na
idade de 5 meses os maiores conteuacutedos de aacutecido artemisinico e arteannuina-B
016 e 008 da massa seca respectivamente foram tambeacutem encontrados O
artemisiteno estava presente em todos os estaacutegios do desenvolvimento variando
de 0002 a 009 da massa seca Com 19 volumemassa o iacutendice do oacuteleo
essencial (OE) foi maacuteximo imediatamente antes do florescimento e foi composto
de 55 de monoterpenos e 45 de sesquiterpenes Em todos os outros estaacutegios
(04 ndash 10 volumemassa do oacuteleo essencial) esta relaccedilatildeo foi de 30 70 Os
principais componentes do OE foram cacircnfora e germacreno-D
Observaccedilotildees mostraram que o rendimento da artemisinina esteve
correlacionado positivamente com o rendimento da folha e o nuacutemero das
colheitas Os rendimentos elevados de artemisinina ocorreram quando a colheita
produziu folhas artemisinina-ricas acompanhadas pelo menor crescimento
possiacutevel do tecido da haste alcanccedilado em colheitas muacuteltiplas em plantas
crescidas a tempo integral e plantadas mais cedo As colheitas crescidas por ge30
semanas e colhidas trecircs a quatro vezes deram os rendimentos meacutedios de
441plusmn142 e de 742plusmn156 respectivamente Muito mais altos do que o rendimento
maacuteximo de 25 quilogramas haminus1 relatado para a A annua em estudos anteriores
7
Concluiu-se que para obter artemisinina em altos niacuteveis A annua deve ser
colhida quatro vezes (KUMAR et al 2004)
ASPECTOS AGRONOcircMICOS
Propagaccedilatildeo
Em meacutedia 1000 sementes pesam 003 g e natildeo diminuem sua viabilidade
ao secar Satildeo acessiacuteveis ao armazenamento agrave frio de longo prazo Germinam de
janeiro a marccedilo A germinaccedilatildeo de 100 foi obtida em um meio de germinaccedilatildeo de
aacutegar a 1 em uma temperatura de 15degC sob um fotoperiacuteodo 816 horas claro-
escuro (MOHAMMADREZA 2008)
A Artemisia annua eacute plantada extensamente e comercialmente
principalmente como uma fonte de oacuteleos essenciais e tambeacutem de artemisinina
sobretudo em regiotildees da China e VietnamNessas regiotildees o ciclo da planta em
condiccedilotildees naturais chega a 10 meses Na Europa e na Ameacuterica as plantas
crescem mais rapidamente terminando seu ciclo de vida em apenas seis meses
mesmo no campo Cresce melhor em talhotildees abertos e ensolarados em solos
arenosos e aluviais feacuterteis que sejam neutros a ligeiramente aacutecidos e que tenham
uma boa retenccedilatildeo de umidade e natildeo tolera a seca ou o encharcamento As
sementes germinam de janeiro a marccedilo e a frutificaccedilatildeo (colheita das sementes)
ocorre entre outubro e novembro (httpwwwkeworgplants-fungiArtemisia-
annuahtm)
Conceiccedilatildeo et al (2013) testaram a germinaccedilatildeo da semente de A annua
cultivar Silves sob duas condiccedilotildees ambientais a fim de fornecer informaccedilotildees
sobre seu cultivo Na primeira condiccedilatildeo realizou-se o teste padratildeo com 4 lotes de
100g de sementes semeadas em gerbox sobre papel mata-borratildeo e dispostas
em germinador agrave temperatura de 25-30deg C expostas agrave luz durante 8 horas diaacuterias
e umedecidas quando necessaacuterio ateacute sua emergecircncia Na segunda etapa foi
realizado o mesmo procedimento anterior poreacutem as sementes permaneceram no
germinador em ausecircncia de luz sob as mesmas condiccedilotildees de temperatura e
umidade Segundo anaacutelise estatiacutestica em Tukey a 5 aplicada aqui sobre as
meacutedias de cada lote de 100g sementes os tratamentos obtiveram diferenccedilas
significativas sendo que as sementes expostas agrave luz obtiveram maiores valores
8
de germinaccedilatildeo Em ambiente com total ausecircncia de luz as sementes obtiveram
baixiacutessima taxa de germinaccedilatildeo no mesmo periacuteodo que as sementes em ambiente
iluminado Esse fato indica que a semente de A annua eacute fotoblaacutestica positiva e
assim necessita de um miacutenimo de luz para que ocorra sua germinaccedilatildeo por esse
motivo natildeo podem ser enterradas e sua semeadura deve ser apenas a lanccedilo ou
em superfiacutecie sem cobertura com terra Esta caracteriacutestica eacute comum agrave muitas
espeacutecies que produzem sementes miuacutedas
Adubaccedilatildeo
Em 2004 e 2005 um estudo foi realizado com o objetivo de determinar o
rendimento os componentes do rendimento e o iacutendice da artemisinina de A
annua cultivada sob quatro aplicaccedilotildees do nitrogecircnio (0 40 80 e 120 quilogramas
haminus1) na regiatildeo de Ccedilukurova na Turquia As experimentaccedilotildees de campo foram
conduzidas na universidade de Ccedilukurova no departamento de agricultura da
faculdade Nesse estudo a altura da planta o nuacutemero de ramos o rendimento
fresco e seco da erva o rendimento fresco e seco da folha o iacutendice do oacuteleo
essencial e o iacutendice da artemisinina (por cromatografia liacutequida pelo HPLC de
desempenho elevado) foram examinados Pela anaacutelise de variaccedilatildeo as doses de
nitrogecircnio natildeo tiveram nenhum efeito estatiacutestico nas caracteriacutesticas investigadas
agrave exceccedilatildeo do iacutendice de artemisinina Esse iacutendice nas folhas secas foi afetado
significativamente pelas aplicaccedilotildees do nitrogecircnio que variaram de 632 a 2750
mg 100 gminus1 (OZGUVEN et al 2008)
Outros aspectos
Uma pesquisa desenvolvida em MEDIPLANT (Suiacuteccedila) e no CPQBA-
UNICAPM (Brasil) envolveu a seleccedilatildeo e produccedilatildeo de genoacutetipos ricos em
artemisinina apresentando biomassa elevada seguido por uma segunda seleccedilatildeo
para a adaptaccedilatildeo agraves circunstacircncias climaacuteticas do Brasil Com hibridizaccedilatildeo
controlada entre genoacutetipos selecionados da China e do Vietnam o ganho
geneacutetico foi obtido nos termos do iacutendice da artemisinina e da uniformidade da
populaccedilatildeo Com o aumento do iacutendice de biomassa e da artemisinina (estimado
pela monitoraccedilatildeo analiacutetica) era possiacutevel aumentar a produccedilatildeo de artemisinina de
9
5 Kgha (populaccedilatildeo baacutesica) para aproximadamente 25 Kgha (populaccedilatildeo
geneticamente produzida) No cultivo realizado no Brasil em 3 de 7 linhas
hiacutebridas 239 de x 1V Ch x Viet55 e 1V x 243 produziram respectivamente
2543 2305 e 2127 quilogramas de artemisininahacorte com as 2 colheitas
possiacuteveis por o ano O cultivo destas linhas hiacutebridas novas no Brasil eacute uma
teacutecnica praticaacutevel e altamente competitiva devido agrave produccedilatildeo obtida
(MAGALHAtildeES et al 1997)
Foi pesquisado o efeito do aumento da irradiacircncia (15 a 100 da luz solar
cheia L15 a L100) sobre o crescimento a taxa fotossinteacutetica liacutequida maacutexima
(Pmax) a compensaccedilatildeo (CI) a saturaccedilatildeo de irradiacircncia de A annua e a produccedilatildeo
de artemisinina Na luz solar plena A annua apresentou uma capacidade elevada
de fotossiacutentese com irradiacircncia baixa manteve um Pmax relativamente elevado
com um CI baixo O crescimento da altura e do diacircmetro biomassa total e da
folha e iacutendice de artemisinina diminuiu com a diminuiccedilatildeo da irradiacircncia que pocircde
ser conectado com a fotossiacutentese mais baixa na irradiacircncia mais baixa em
relaccedilatildeo agrave irradiacircncia mais elevada As irradiacircncias mudaram a alocaccedilatildeo de
biomassa em A annua A relaccedilatildeo massa de folhamassa total da espeacutecie
aumentou com a diminuiccedilatildeo da irradiacircncia mas a relaccedilatildeo raizmassa total e
raizmassa da parte aeacuterea aumentaram geralmente com a irradiacircncia crescente
Assim A annua pode crescer na luz solar parcial e plena Entretanto o
rendimento elevado da biomassa e da artemisinina requerem o cultivo em um
habitat aberto com luz solar adequada (WANG et al 2008)
MATERIAIS E MEacuteTODOS
O ensaio foi conduzido na Estaccedilatildeo Experimental de Biologia da
Universidade de Brasiacutelia (EEB ndash UnB) em casa-de-vegetaccedilatildeo do tipo
ldquoglasshouserdquo no periacuteodo de 19 de abril de 2013 a 6 de dezembro de 2013
(primeiro e segundo semestres respectivamente) Durante o ensaio a casa-de-
vegetaccedilatildeo apresentou uma temperatura meacutedia de aproximadamente 250deg C com
meacutedia das miacutenimas de 1325degC e das maacuteximas de 3675degC aferidas com
termocircmetro convencional de maacutexima e miacutenima O iacutendice de radiaccedilatildeo luminosa
esteve em trono de 50 determinado por fotocircmetro automaacutetico modelo Asahi-
Pentax SP-500
10
A partida de sementes de Aannua foi doada pelo pesquisador Pedro
Melillo Magalhatildees oriundas do CPQBA ndash UNICAMP e produzidas em campo da
proacutepria estaccedilatildeo e utilizadas para a semeadura em sementeiras tipo caixa
contendo a mistura EEB (Estaccedilatildeo Experimental de Biologia) com a seguinte
composiccedilatildeo Latossolo vermelho de cerrado areia vermiculita e composto
orgacircnico na proporccedilatildeo 3311 respectivamente mais a formulaccedilatildeo 4-14-8 na
dose de 100g para 40L da mistura Apoacutes 42 dias da semeadura foram
selecionadas 20 mudas que estavam no ponto de transplante (meacutedia de 15 cm
de altura) Dessa forma foram transplantadas para vasos com capacidade para
25L preenchidos com a mistura EEB
Apoacutes o transplante a altura da parte aeacuterea de todas as plantas foi aferida
semanalmente com o uso de uma trena com o objetivo de desenhar-se a curva
de crescimento As mediccedilotildees tiveram iniacutecio uma semana apoacutes o transplante no
dia 14 de maio
No dia 26 de julho de 201349 dias apoacutes o transplante as plantas foram
transferidas dos vasos de 25L para vasos com maior capacidade (325L) para
favorecer o seu crescimento e desenvolvimento e no dia 17 de setembro102 dias
apoacutes o transplante foi feita uma suplementaccedilatildeo de terra para as 20 plantas com o
mesmo objetivo mediante a colocaccedilatildeo por baixo de um outro vaso de mesmo
tamanho contendo metade de seu volume em Substrato EEB Isso permitiu que
as raiacutezes crescessem no volume adicional de mistura atraveacutes dos furos de
drenagem do vaso original
O controle de plantas daninhas foi feito manualmente e o controle
fitossanitaacuterio atraveacutes de acompanhamento e sucessivas observaccedilotildees Ao fim do
ensaio foi observada uma pequena infestaccedilatildeo com cochonilhas As cochonilhas
foram identificadas por Pseudococcus citri Risso ndash mais conhecida por
ldquocochonilha algodatildeordquo Foi parcialmente controlada em curto prazo com uma
pulverizaccedilatildeo manual de soluccedilatildeo de detergente (10 ml 1 litro de aacutegua)
Ao fim do ensaio dia 18 de outubro foram obtidas as massas fresca e
seca das plantas bem como os coeficientes de variaccedilatildeo dos dados
11
RESUTADOS E DISCUSSAtildeO
Os resultados do presente ensaio encontram-se representados nas Figuras
4 e 5 as quais representam respectivamente a curva de crescimento de Aannua
em vinte semana (s) em casa-de-vegetaccedilatildeo e a evoluccedilatildeo da taxa meacutedia diaacuteria de
crescimento
Observando-se a Figura 2 que apresenta a evoluccedilatildeo da taxa meacutedia de
crescimento verificou-se que entre a quinta e a setima semanas a taxa meacutedia
diaacuteria de crescimento cresceu de 08 cm ao dia para em torno de 20 cm por dia
tendo havido um decrescimo e um estabilidade entre a oitava e a deacutecima segunda
semanas quando entatildeo ocorreu o segundo pico passando a taxa meacutedia diaacuteria de
crescimento de 12 cm para 18 cm seguindo-se um decrescimo ateacute 05 cmdia
nas deacutecima sexta e deacutecima seacutetimas semanas quando entatildeo houve o terceiro
pico na deacutecima oitava semana atingindo 08cmdia e novamente decaindo ateacute 04
cmdia na vigeacutesima semana
0
50
100
150
1s 3s 5s 7s 9s 11s 13s 15s 17s 19s
Alt
ura
em
cm
Crescimento meacutedio de Artemisia annua em vasos em casa de vegataccedilatildeo durante 20 semanas
(s)
Figura 1 ndash Crescimento meacutedio de A annua em vasos em casa-de-vegetaccedilatildeo durante 20 semanas (s) ndash Observa-se que a altura das plantas aumentou
notavelmente a partir da quinta semana apoacutes o transplante correspondendo ao primeiro pico de crescimento
12
Os picos de crescimento de A annua submetida ao cultivo em vasos em
casa-de-vegetaccedilatildeo podem ser explicados pelas interferecircncias do pesquisador que
visava maximizar o desenvolvimento das plantas O primeiro pico pode ser
atribuiacutedo ao padratildeo de crescimento da planta Por ocasiatildeo da primeira troca de
vasos quando a planta ganhou 2145 de volume de substrato para explorar
teria havido o segundo pico por volta da deacutecima segunda semana O terceiro pico
se deu em consequecircncia da segunda suplementaccedilatildeo de substrato ocorrida por
volta da deacutecima seacutetima semana
O aproveitamento da segunda suplementaccedilatildeo foi efetivo tendo as plantas
explorado o volume de substrato adicional em sua totalidade ocupando-o por
inteiro o volume (Figura 6)
Eacute consenso entre pesquisadores que as plantas crescidas em vasos nunca
alcanccedilam seu potencial maior conforme imagens de suas raiacutezes mostram Uma
teacutecnica meacutedica da imagem chamada a imagem de ressonacircncia magneacutetico (MRI)
foi usada por investigadores para capturar instantacircneos da raiz da planta no vaso
As figuras obtidas revelam que as raiacutezes ldquodetectam o tamanho do vasordquo e emitem
um sinal que resulta na restriccedilatildeo o crescimento da planta (POORTER et al 2012)
Poorter et al (2012) esclarecem que a maioria das experiecircncias em
biologia de plantas usa plantas crescidas em algum tipo de recipiente ou vaso
Uma meta-anaacutelise em 65 estudos que analisaram o efeito do tamanho do vaso no
0
05
1
15
2
25
1s 3s 5s 7s 9s 11s 13s 15s 17s 19s
Ce
ntiacute
met
ros
po
r d
ia
Evoluccedilatildeo da taxa meacutedia diaacuteria de crescimento de Artemisia annua em casa de vegetaccedilatildeo por
20 semanas
Figura 2 ndash Evoluccedilatildeo da taxa diaacuteria de cresimento de A annua em casa de vegetaccedilatildeo por 20 semanas (s)
13
crescimento e em variaacuteveis afins foi conduzida e verificou que em meacutedia dobrar o
tamanho do vaso aumentou a produccedilatildeo da biomassa da planta em 43 Uma
anaacutelise adicional de efeitos do tamanho do vaso nos componentes afins do
crescimento sugere que o crescimento reduzido em vasos menores eacute causado
principalmente por uma reduccedilatildeo na fotossiacutentese por aacuterea da folha da unidade
mais do que por mudanccedilas na morfologia da folha ou no alocamento de
biomassa O tamanho apropriado do vaso dependeraacute logicamente do tamanho
das plantas que crescem neles Baseado em vaacuterias linhas da evidecircncia noacutes
sugerimos que um tamanho apropriado do vaso eacute um no qual a biomassa da
planta natildeo exceda 1 g L-1 Na praacutetica atual da pesquisa 65 das experiecircncias
excedem essa referecircncia Noacutes sugerimos que os investigadores devam
considerar com cuidado o tamanho do vaso em suas experiecircncias porque os
vasos pequenos podem mudar resultados experimentais e sabotar a finalidade da
experiecircncia
No presente ensaio de vasos foi obtido uma massa seca da parte aeacuterea
meacutedia de 2995g com um coeficiente de variaccedilatildeo de 3001 com uma planta por
vaso com dois transplantes para ganho de volume de solo a ser explorado O
corte das plantas se deu com 80 dias apoacutes o transplante
Quiteacuterio (2006) tambeacutem em ensaio de vasos obteve a meacutedia 25g de massa
seca de A annua em ensaio de vasos com duas plantas onde a colheita foi feita
75 dias apoacutes a semeadura no preacute-florescimento Os dois resultados apresentam
coerecircncia entre si
O ataque de cochonilhas observado era esperado como um reflexo natural
do estresse das plantas que satildeo submetidas ao cultivo em vaso em casa-de-
vegetaccedilatildeo
14
CONCLUSAtildeO
Nas condiccedilotildees do presente ensaio concluiu-se que o cultivo de Artemisia annua
em vasos e em casa-de-vegetaccedilatildeo eacute viaacutevel e pode ser notavelmente expressivo
com porte superior a 15m de altura e massa seca da parte aeacuterea meacutedia em torno
de 30g
Numa etapa posterior visualizam-se os ensaios objetivando a geraccedilatildeo de uma
tecnologia de produccedilatildeo tendo como alvo a produtividade em artesinina-A que eacute o
componente ativo contra malaacuteria
15
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17
DOCUMENTAacuteRIO FOTOGRAacuteFICO
Foto 1 ndash Mudas na sementeira prontas para transplante - Foto da autora Nayara Carvalho
Foto 2 ndash Mudas de Artemisia annua no dia do transplante ndash Foto da autora Nayara
Carvalho
18
Foto 3 ndash Aspecto geral do ensaio ndash Foto da autora Nayara Carvalho
Foto 4 ndash Suplementaccedilatildeo de substrato ndash Foto do orientador Jean Kleber
19
Foto 5 ndash Aproveitamento pela planta di suplemento de substrato ndash Foto do orientador Jean Kleber
Foto 6 ndash A planta mais alta ao final do ensaio ndash Foto do orientador Jean Kleber
20
Foto 8 ndash Ataque de colchonilhas em A annua ndash Foto da autora Nayara Carvalho
Foto 7 ndash A planta mais baixa ao final do ensaio
UNIVERSIDADE DE BRASIacuteLIA
FACULDADE DE AGRONOMIA E MEDICINA VETERINAacuteRIA
CRESCIMENTO E DESENVOLVIMENTO DE ARTEMISIA (Artemisia annua L) EM
CASA DE VEGETACcedilAtildeO DO TIPO ldquoGLASSHOUSErdquo
NAYARA CARVALHO
TRABALHO FINAL DE CONCLUSAtildeO DE GRADUACcedilAtildeO SUBMETIDA Agrave
FACULDADE DE AGRONOMIA E MEDICINA VETERINAacuteRIA DA UNIVERSIDADE
DE BRASIacuteLIA COMO PARTE DOS REQUISITOS NECESSAacuteRIOS Agrave OBTENCcedilAtildeO
DO GRAU DE ENGENHEIRA AGROcircNOMA
APROVADO DA BANCA EXAMINADORA ________________________________________ Prof Jean Kleber de Abreu Mattos Engenheiro Agrocircnomo Drndash Orientador ndash FAV-UnB ________________________________________ Anna Paula Rodrigues dos Santos Engenheiro Agrocircnomo Msc ndash Membro ndash FAV-UnB ________________________________________ Fabriacuteccio D Pereira dos Santos
Eng Agr Membro
BRASIacuteLIA DEZEMBRO DE 2013
FICHA CATALOGRAacuteFICA
CARVALHO N Crescimento e desenvolvimento de Artemisia (Artemisia annua L) em casa de vegetaccedilatildeo do tipo ldquoglasshouserdquo ndash Brasiacutelia 2013 28 p il Trabalho final de conclusatildeo da Graduaccedilatildeo ndash Universidade de Brasiacutelia Faculdade de agronomia e Medicina Veterinaacuteria Orientaccedilatildeo Prof Jean Kleber A Mattos
REFEREcircNCIA BIBLIOGRAacuteFICA
CARVALHO N Crescimento e desenvolvimento de Artemisia (Artemisia annua L) em casa de vegetaccedilatildeo do tipo ldquoglasshouserdquo Trabalho final de Graduaccedilatildeo ndash Universidade de Brasiacutelia Faculdade de agronomia e Medicina Veterinaacuteria ndash Brasiacutelia 2013 28 p il
CESSAtildeO DE DIREITOS
NOME DA AUTORA Nayara Carvalho
TIacuteTULO DO TRABALHO Crescimento e desenvolvimento de Artemisia (Artemisia annua L) em casa de vegetaccedilatildeo do tipo ldquoglasshouserdquo Ano 2013 Eacute concedida agrave Universidade de Brasiacutelia permissatildeo para reproduzir coacutepias desta dissertaccedilatildeo de graduaccedilatildeo e para emprestar ou vender tais coacutepias somente para propoacutesitos acadecircmicos e cientiacuteficos O autor reserva-se os outros direitos de publicaccedilatildeo e nenhuma parte desta dissertaccedilatildeo de graduaccedilatildeo pode ser reproduzida sem autorizaccedilatildeo por escrito do autor _________________________________
Nayara Carvalho
BRASIacuteLIA DF ndash Dezembro de 2013
AGRADECIMENTOS
Aos meus pais que sempre estiveram presentes em todas as
jornadas que percorri me apoiando nas decisotildees mais difiacuteceis e me guiando pelos
melhores caminhos
Aos meus irmatildeos por quem estimo muito e tenho muito carinho
Ao meu orientador o professor Jean Kleber com quem pude
compartilhar e absorver conhecimentos pela paciecircncia motivaccedilatildeo e pela
oportunidade de trabalhar ao lado de um profissional de gabarito reconhecido no
mundo acadecircmico e cientiacutefico
Aos amigos que fizeram parte direta ou indiretamente dessa minha
caminhada gratificante Aline Ronaldo e Fabriacuteccio
SUMAacuteRIO
LISTA DE FIGURAS vii
RESUMO viii
INTRODUCcedilAtildeO 1
OBJETIVO 2
REVISAtildeO BIBLIOGRAacuteFICA 2
Descriccedilatildeo da planta 2
COMPOSICcedilAtildeO E USO 3
ARTEMISININA 5
ASPECTOS AGRONOcircMICOS 7
Propagaccedilatildeo 7
Adubaccedilatildeo 8
Outros aspectos 8
MATERIAIS E MEacuteTODOS 9
RESUTADOS E DISCUSSAtildeO 11
CONCLUSAtildeO 14
REFEREcircNCIAS BIBLIOGRAacuteFICAS 15
DOCUMENTAacuteRIO FOTOGRAacuteFICO 17
vii
LISTA DE FIGURAS
1 Figura 1 ndash Crescimento meacutedio de Artemisia annua em vasos em
casa-de-vegetaccedilatildeo durante vinte semanas ndash paacuteg 25
2 Figura 2 ndash Evoluccedilatildeo da taxa diaacuteria de crescimento de Artemisia annua
em casa de vegetaccedilatildeo por 20 semanas ndash paacuteg 25
viii
RESUMO
A Artemisia annua L (Asteraceae) eacute originaacuteria de regiotildees de clima temperado da
Aacutesia e tem sido utilizada pela medicina tradicional chinesa haacute vaacuterios seacuteculos no
tratamento de malaacuteria A espeacutecie reveste-se portanto de indiscutiacutevel importacircncia
em paiacuteses tropicais onde a presenccedila da malaacuteria ainda preocupa as autoridades
da aacuterea da sauacutede o que eacute o caso da Regiatildeo Centro-Oeste do Brasil O objetivo
do presente trabalho foi estudar o crescimento e o desenvolvimento de A annua
mediante cultivo em vasos em casa de vegetaccedilatildeo As sementes de Aannua
foram produzidas em campo da proacutepria estaccedilatildeo e utilizadas para a semeadura em
sementeiras tipo caixa contendo a mistura EEB (Estaccedilatildeo Experimental de Biologia
da UnB ndash Brasiacutelia- DF) mais a formulaccedilatildeo 4-14-8 na dose de 100g para 40L da
mistura Apoacutes 42 dias da semeadura foram selecionadas 20 mudas que estavam
no ponto de transplante (meacutedia de 15 cm de altura) Dessa forma foram
transplantadas para vasos com capacidade para 25L preenchidos com a mistura
EEB Apoacutes nove semana de mensuraccedilotildees de altura as plantas foram pesadas
para obtenccedilatildeo das massas fresca e seca da parte aeacuterea Nas condiccedilotildees do
presente ensaio concluiu-se que o cultivo de Artemisia annua em vasos e em
casa-de-vegetaccedilatildeo eacute viaacutevel e pode ser notavelmente expressivo com porte
superior a 15m de altura e massa seca da parte aeacuterea com meacutedia de 30g
1
INTRODUCcedilAtildeO
A Artemisia annua L (Asteraceae) eacute originaacuteria de regiotildees de clima
temperado da Aacutesia e tem sido utilizada pela medicina tradicional chinesa haacute vaacuterios
seacuteculos no tratamento de malaacuteria Pesquisadores chineses estudaram mais de 30
espeacutecies do gecircnero Artemisia para confirmar a atividade antimalaacuterica das
mesmas Somente A annua e A apiacea Hance foram eficazes em combater
o Plasmodium vivax e o Plasmodium falciparum agentes etimoloacutegicos da malaacuteria
(DIAS 1997) Entre os metaboacutelitos secundaacuterios isolados das diversas espeacutecies do
gecircnero Artemisia os mais caracteriacutesticos satildeo as lactonas sesquiterpecircnicas
(RODRIGUES et al 2006)
As lactonas sesquiterpecircnicas pertencem a um grande grupo de produtos
naturais encontradas principalmente em plantas de vaacuterios gecircneros da famiacutelia
Asteraceae (SANTOS 2009)
A espeacutecie reveste-se portanto de indiscutiacutevel importacircncia em paiacuteses
tropicais onde a presenccedila da malaacuteria ainda preocupa as autoridades da aacuterea da
sauacutede o que eacute o caso da Regiatildeo Centro-Oeste do Brasil
Mediante solicitaccedilatildeo ao pesquisador Pedro Melillo Magalhatildees do CPQBA
(Centro Pluridisciplinar de pesquisas quiacutemicas bioloacutegicas e agriacutecolas ndash vinculado
agrave Unicamp ndash Universidade Estadual de Campinas) foi obtida uma pequena
partida de sementes de A annua com a qual obtivemos plantas adultas agrave campo
que produziram sementes feacuterteis possibilitando por conseguinte a realizaccedilatildeo de
ensaios agronocircmicos na Estaccedilatildeo Experimental de Biologia da Universidade de
Brasiacutelia (EEB ndash UnB)
O estudo do comportamento desta espeacutecie em nossa regiatildeo reveste-se de
consideraacutevel importacircncia uma vez que eacute fato conhecido de pesquisas da aacuterea que
o perfil de aromaacuteticos e outros componentes quiacutemicos varia bastante conforme a
condiccedilotildees ambientais em que as plantas satildeo cultivadas
Desta forma satildeo necessaacuterios ensaios agronocircmicos precedentes aos
ensaios quiacutemicos para que haja uma convivecircncia inicial com a espeacutecie visando o
conhecimento de suas possibilidades quanto agrave produccedilatildeo de mateacuteria prima
2
OBJETIVO
O objetivo do presente trabalho foi estudar o crescimento e o
desenvolvimento de A annua mediante cultivo em vasos em casa de vegetaccedilatildeo
REVISAtildeO BIBLIOGRAacuteFICA
Descriccedilatildeo da planta
Artemisia annua L (Syn Artemisia chamomilla C Winkl) Asteraceae
Nome vulgar Sweet wormwood eacute uma erva doce aromaacutetica com a flores
pequenas amarelas em capiacutetulos A annua conteacutem o componente quiacutemico
artemisinina em suas partes aeacutereas que satildeo usadas em drogas anti-malaacutericas
Outros nomes satildeo Sweet annie Wormwood annual (inglecircs) qing hao (chinecircs
artemiacutesia verde azulada) Difundida e naturalizada extensamente eacute
frequentemente abundante natildeo sendo do interesse do conservacionismo pois
ainda natildeo foi avaliada de acordo com criteacuterios da lista vermelha do IUCN ndash
International Union for Conservation of Nature Tem como habitat colinas bordas
das florestas e terrenos baldios Trata-se de uma planta medicinal antimalaacuterica
importante cujo oacuteleo essencial eacute usado tambeacutem em cosmeacuteticos A planta eacute
cultivada como um ornamental na Indoneacutesia (httpwwwkeworgplants-
fungiArtemisia-annuahtm)
A annua eacute nativa da Euraacutesia do sudeste da Europa (incluindo Albacircnia
Bulgaacuteria Montenegro Romecircnia Ruacutessia Servia Turquia) ao Vietnam e norte da
India Naturalizado em muitos paiacuteses (incluindo Argentina Aacuteustria a repuacuteblica
Tcheca Franccedila Alemanha Hungria Itaacutelia Polocircnia Eslovaacutequia Espanha Suiacuteccedila e
Estados Unidos) Foi registrada como de crescimento ruderal no Reino Unido
levada por paacutessaros ou nas latildes tendo sido cultivada experimentalmente tatildeo ao
norte como na Finlacircndia A espeacutecie e foi usada na China para tratar febres por
mais de 2000 anos O gecircnero Artemisia pertence agrave famiacutelia Asteraceae
(Compositae) que inclui plantas bem conhecidas usadas na medicina
perfumaria alimentaccedilatildeo e na induacutestria da bebida tal como a A dracunculus
(estragatildeo) A absinthium (absinto) e A vulgaris (artemiacutesia)
(httpwwwkeworgplants-fungiArtemisia-annuahtm )
3
A descriccedilatildeo botacircnica menciona que A annua eacute uma planta anual de haste
uacutenica glabra doce-aromaacutetica que cresce ateacute 1 m de altura (2 m como ruderal) A
haste eacute ereta nervada e marrom ou violeta-marrom As folhas basais satildeo 3-
pinatissectas (divididas trecircs vezes em foliacuteolos profundamente cortados) 3-5 cm
de comprimento e 2-4 cm de largura as folhas superiores satildeo 1-2-pinatissectas
menores e seacutesseis (sem peciacuteolo) Os capiacutetulos satildeo globosas com 2-25
miliacutemetros de diacircmetro em paniacuteculas frouxas O invoacutelucro (seacuterie das braacutecteas em
torno do capiacutetulo) eacute composto de braacutecteas glabras imbricadas As braacutecteas
exteriores satildeo verdes e linear-oblongas as braacutecteas internas satildeo brilhantes e
oval-arredondadas com uma margem larga fina seca Os capiacutetulos satildeo
disciformes e compostos de floretes filiformes exteriores (femininas) e de floretes
internos no disco (hermafroditas) Os floretes centrais numerosos do disco satildeo
esverdeados ou amarelados O fruto eacute um aquecircnio amarelo-marrom de parede
fina (pequeno seco) 06-08 miliacutemetros de tamanho com uma superfiacutecie
brilhante marcada com sulcos verticais e contendo uma uacutenica semente Os
aquecircnios natildeo tecircm nenhum papo e portanto natildeo satildeo dispersados pelo vento
como satildeo muitos outros da famiacutelia Asteraceae (Compositae)
(httpwwwkeworgplants-fungiArtemisia-annuahtm)
COMPOSICcedilAtildeO E USO A espeacutecie A annua eacute conhecida como ldquoQing Haordquo na China e eacute a fonte da
Medicina Tradicional Chinesa (MTC) que foi usada por mais de 2000 anos para
aliviar febres Na MTC prescreve-se frequentemente em combinaccedilatildeo com outros
ervas para tratar (aleacutem agraves febres) a icteriacutecia a dor de cabeccedila a vertigem e os
sangramentos nasais A pesquisa cientiacutefica da atividade anti-malaacuterica de A annua
comeccedilou no princiacutepio dos anos 70 em resposta agrave resistecircncia crescente agraves drogas
anti-malaacutericas estabelecidas por parte dos protozoaacuterios parasitas que causam a
malaacuteria (Protozoaacuterios do gecircnero Plasmodium ) O componente quiacutemico
artemisinina que ocorre naturalmente nas folhas da Aannua eacute um potente
agente anti-malaacuterico e pode matar o parasita mais agressivo o Plasmodium
falciparum (eacute seletivamente toacutexico ao estaacutegio assexual de eritrocito dos parasitas)
A artemisinina extraiacuteda de Aannua tornou-se extremamente importante em tratar
a malaacuteria desde que a resistecircncia do parasita a muitos outros antimalaacutericos se
tornou difundida (httpwwwkeworgplants-fungiArtemisia-annuahtm)
4
A planta A annua (Asteraceae) eacute listada na medicina chinesa como um
remeacutedio para vaacuterias febres incluindo a malaacuteria e contem um bem estabelecido
composto antimalaacuterico a artemisinina Neste estudo um hiacutebrido de A annua foi
cultivado com sucesso na Aacutefrica Central As partes aeacutereas da planta continham
063 - 070 de artemisinina por massa seca e aproximadamente 40 desta
artemisinina poderia ser extraiacuteda por meacutetodos simples da preparaccedilatildeo do chaacute
Cinco pacientes da malaacuteria que foram tratados com A annua mostraram um
desaparecimento raacutepido do parasita dentro de 2-4 dias Uma experimentaccedilatildeo
adicional com os 48 pacientes de malaacuteria mostrou um desaparecimento do
parasita em 44 pacientes (92) dentro de 4 dias Ambas as experimentaccedilotildees
mostraram uma melhoria marcada dos sintomas Estes resultados justificam
pesquisas adicionais do efeito antimalaacuterico de preparaccedilotildees de A annua
(MUELLER et al 2000)
Em fases de crescimento e desenvolvimento diferentes foi pesquisada a
variaccedilatildeo na quantidade e na qualidade do oacuteleo essencial de A annua incluindo
preacute- floraccedilatildeo floraccedilatildeo e poacutes - floraccedilatildeo Os oacuteleos foram obtidos por hidrodestilaccedilatildeo
das amostras secas ao ar Os rendimentos dos oacuteleos ( pp) nas diferentes
fases foram da ordem de preacute- floraccedilatildeo (097) floraccedilatildeo (1 23) e poacutes- floraccedilatildeo
(087) Os oacuteleos foram analisados por espectrometria de massa e cromatografia
em fase gasosa No total 32 35 e 33 constituintes foram identificados e
quantificados no oacuteleo de preacute - floraccedilatildeo floraccedilatildeo e poacutes - floraccedilatildeo representando
9767 92 e 92 4 dos oacuteleos respectivamente Cacircnfora 18-cineol canfeno
spatulenol alfandashpineno e artemiacutesia-cetona foram os principais componentes em
todas as amostras Monoterpenos eram o principal grupo de compostos em preacute-
floraccedilatildeo (6996) floraccedilatildeo (7244) e poacutes- floraccedilatildeo (7096)
(MOHAMMADREZA 2008)
A comparaccedilatildeo do perfil de cromatografia de gaacutes do oacuteleo essencial da A
annua produzido no Brasil com aqueles de outras origens revelou a variaccedilatildeo
significativa de seus constituintes O comportamento sazonal do iacutendice do
artemisinina 13 contra a produccedilatildeo de oacuteleo essencial foi observado durante um
periacuteodo da colheita A viabilidade econocircmica de diversos metodologias de
purificaccedilatildeo para a produccedilatildeo da artemisinina foi testada Foi produzido o composto
anti-malaacuterico 13 a um custo total de US$ 115 por grama (FOGLIO 1996)
5
ARTEMISININA
Artemisinina eacute uma lactona sesquiterpecircnica com uma ponte endoperoacutexido
e foi produzida semi-sinteticamente como uma droga antimalaacuterica A eficaacutecia do
chaacute feito de A annua no tratamento da malaacuteria eacute contencioso De acordo com
alguns autores a artemesinina natildeo eacute soluacutevel em aacutegua e as concentraccedilotildees nestas
infusotildees satildeo consideradas insuficientes para tratar a malaacuteria (MUELER et al
2004 RATH et al 2004 JANSEN 2006)
Em 2004 o ministro da sauacutede da Etioacutepia mudou a droga antimalaacuterica de
primeira linha da Etioacutepia de sulfadoxinaprimetamina (Fansidar) que tem uma
taxa de falha em meacutedia de 36 no tratamento para a artemetherlumefantrine
(Coartem) uma terapia de droga que conteacutem a artemisinina que eacute 100 eficaz
quando usado corretamente apesar de uma relativa falta mundial do produto do
derivado de A annua (MALARIA UPDATE 20052013)
A malaacuteria eacute causada primeiramente pelo Plasmodium falciparum que
invade as hemaacutecias e conteacutem heme-grupos ricos em ferro (na forma do
hemozoina) (POSNER amp OrsquoNEIL 2004)
O mecanismo de accedilatildeo proposto da artemisinina contra a malaacuteria envolve a
clivagem de pontes de endoperoacutexido pelo ferro produzindo os radicais livres
(ferro-oxo hipervalente espeacutecies epoacutexidos aldeiacutedos e compostos do dicarbonil)
que danificam as macromoleacuteculas bioloacutegicas causando estresse oxidativo nas
ceacutelulas do parasita (CUMMING 1997)
Com a possibilidade de isolarem maiores quantidades de artemisinina
(quinghaosu) plantas de A annua foram cultivadas por Liersch et al (1986) e
analisadas em estaacutegios diferentes de desenvolvimento O iacutendice mais elevado de
artemisinina foi encontrado imediatamente antes do florescimento Era tambeacutem
possiacutevel correlacionar o desenvolvimento das plantas com o iacutendice maacuteximo do
artemisinina As plantas de A annua cultivadas de vaacuterias outras fontes tambeacutem
foram examinadas para o iacutendice de artemisinina De acordo com os resultados
obtidos nenhuma dessas plantas contiveram quantidades suficientes do
composto (artemisinina) para justificar isolamento em uma escala teacutecnica Aleacutem
disso outras espeacutecies de Artemisia foram testadas e foi encontrada artemisinina
em somente uma outra espeacutecie Para aumentar a quantidade de artemisinina
durante o periacuteodo do crescimento da planta foram testados dois reguladores
6
hormonais de crescimento em A annua genoacutetipo 811 Os resultados mostraram
que o chlormequat podia aumentar o teor do composto(artemisinina) em 30 em
relaccedilatildeo agraves plantas natildeo tratadas Foram encontrados tambeacutem alguns discretos
efeitos dos reguladores de crescimento na morfologia dos trichomas glandulares
Para finalidades de produccedilatildeo plantas com um iacutendice elevado de
artemisinina satildeo requeridas Woerdenbag et al (1994) acompanharam o
desenvolvimento do conteuacutedo de artemisinina e dos sesquiterpenes
biosinteticamente relacionados aacutecido artemisiacutenico arteannuina B e artemisiteno
em plantas de A annua durante um periacuteodo da vegetaccedilatildeo no Vietnam onde esta
espeacutecie eacute indiacutegena Aleacutem disso o iacutendice do oacuteleo essencial e sua composiccedilatildeo
foram estudados As amostras das folhas gemas as flores ou as flores de poacutes-
florescimento e frutos foram analisados nos diferentes estaacutegios vegetativo (5 6 e
8 meses de idade) na formaccedilatildeo maciccedila das gemas (9 meses) no pleno
florescimento (10 meses) e poacutes-florescimento (10frac12 meses) O iacutendice mais
elevado de artemisinina (086 da massa seca) estava nas folhas de plantas com
5 meses de idade Neste estaacutegio o rendimento mais elevado da folha tambeacutem foi
encontrado Subsequentemente o iacutendice de artemisinina caiu gradualmente Na
idade de 5 meses os maiores conteuacutedos de aacutecido artemisinico e arteannuina-B
016 e 008 da massa seca respectivamente foram tambeacutem encontrados O
artemisiteno estava presente em todos os estaacutegios do desenvolvimento variando
de 0002 a 009 da massa seca Com 19 volumemassa o iacutendice do oacuteleo
essencial (OE) foi maacuteximo imediatamente antes do florescimento e foi composto
de 55 de monoterpenos e 45 de sesquiterpenes Em todos os outros estaacutegios
(04 ndash 10 volumemassa do oacuteleo essencial) esta relaccedilatildeo foi de 30 70 Os
principais componentes do OE foram cacircnfora e germacreno-D
Observaccedilotildees mostraram que o rendimento da artemisinina esteve
correlacionado positivamente com o rendimento da folha e o nuacutemero das
colheitas Os rendimentos elevados de artemisinina ocorreram quando a colheita
produziu folhas artemisinina-ricas acompanhadas pelo menor crescimento
possiacutevel do tecido da haste alcanccedilado em colheitas muacuteltiplas em plantas
crescidas a tempo integral e plantadas mais cedo As colheitas crescidas por ge30
semanas e colhidas trecircs a quatro vezes deram os rendimentos meacutedios de
441plusmn142 e de 742plusmn156 respectivamente Muito mais altos do que o rendimento
maacuteximo de 25 quilogramas haminus1 relatado para a A annua em estudos anteriores
7
Concluiu-se que para obter artemisinina em altos niacuteveis A annua deve ser
colhida quatro vezes (KUMAR et al 2004)
ASPECTOS AGRONOcircMICOS
Propagaccedilatildeo
Em meacutedia 1000 sementes pesam 003 g e natildeo diminuem sua viabilidade
ao secar Satildeo acessiacuteveis ao armazenamento agrave frio de longo prazo Germinam de
janeiro a marccedilo A germinaccedilatildeo de 100 foi obtida em um meio de germinaccedilatildeo de
aacutegar a 1 em uma temperatura de 15degC sob um fotoperiacuteodo 816 horas claro-
escuro (MOHAMMADREZA 2008)
A Artemisia annua eacute plantada extensamente e comercialmente
principalmente como uma fonte de oacuteleos essenciais e tambeacutem de artemisinina
sobretudo em regiotildees da China e VietnamNessas regiotildees o ciclo da planta em
condiccedilotildees naturais chega a 10 meses Na Europa e na Ameacuterica as plantas
crescem mais rapidamente terminando seu ciclo de vida em apenas seis meses
mesmo no campo Cresce melhor em talhotildees abertos e ensolarados em solos
arenosos e aluviais feacuterteis que sejam neutros a ligeiramente aacutecidos e que tenham
uma boa retenccedilatildeo de umidade e natildeo tolera a seca ou o encharcamento As
sementes germinam de janeiro a marccedilo e a frutificaccedilatildeo (colheita das sementes)
ocorre entre outubro e novembro (httpwwwkeworgplants-fungiArtemisia-
annuahtm)
Conceiccedilatildeo et al (2013) testaram a germinaccedilatildeo da semente de A annua
cultivar Silves sob duas condiccedilotildees ambientais a fim de fornecer informaccedilotildees
sobre seu cultivo Na primeira condiccedilatildeo realizou-se o teste padratildeo com 4 lotes de
100g de sementes semeadas em gerbox sobre papel mata-borratildeo e dispostas
em germinador agrave temperatura de 25-30deg C expostas agrave luz durante 8 horas diaacuterias
e umedecidas quando necessaacuterio ateacute sua emergecircncia Na segunda etapa foi
realizado o mesmo procedimento anterior poreacutem as sementes permaneceram no
germinador em ausecircncia de luz sob as mesmas condiccedilotildees de temperatura e
umidade Segundo anaacutelise estatiacutestica em Tukey a 5 aplicada aqui sobre as
meacutedias de cada lote de 100g sementes os tratamentos obtiveram diferenccedilas
significativas sendo que as sementes expostas agrave luz obtiveram maiores valores
8
de germinaccedilatildeo Em ambiente com total ausecircncia de luz as sementes obtiveram
baixiacutessima taxa de germinaccedilatildeo no mesmo periacuteodo que as sementes em ambiente
iluminado Esse fato indica que a semente de A annua eacute fotoblaacutestica positiva e
assim necessita de um miacutenimo de luz para que ocorra sua germinaccedilatildeo por esse
motivo natildeo podem ser enterradas e sua semeadura deve ser apenas a lanccedilo ou
em superfiacutecie sem cobertura com terra Esta caracteriacutestica eacute comum agrave muitas
espeacutecies que produzem sementes miuacutedas
Adubaccedilatildeo
Em 2004 e 2005 um estudo foi realizado com o objetivo de determinar o
rendimento os componentes do rendimento e o iacutendice da artemisinina de A
annua cultivada sob quatro aplicaccedilotildees do nitrogecircnio (0 40 80 e 120 quilogramas
haminus1) na regiatildeo de Ccedilukurova na Turquia As experimentaccedilotildees de campo foram
conduzidas na universidade de Ccedilukurova no departamento de agricultura da
faculdade Nesse estudo a altura da planta o nuacutemero de ramos o rendimento
fresco e seco da erva o rendimento fresco e seco da folha o iacutendice do oacuteleo
essencial e o iacutendice da artemisinina (por cromatografia liacutequida pelo HPLC de
desempenho elevado) foram examinados Pela anaacutelise de variaccedilatildeo as doses de
nitrogecircnio natildeo tiveram nenhum efeito estatiacutestico nas caracteriacutesticas investigadas
agrave exceccedilatildeo do iacutendice de artemisinina Esse iacutendice nas folhas secas foi afetado
significativamente pelas aplicaccedilotildees do nitrogecircnio que variaram de 632 a 2750
mg 100 gminus1 (OZGUVEN et al 2008)
Outros aspectos
Uma pesquisa desenvolvida em MEDIPLANT (Suiacuteccedila) e no CPQBA-
UNICAPM (Brasil) envolveu a seleccedilatildeo e produccedilatildeo de genoacutetipos ricos em
artemisinina apresentando biomassa elevada seguido por uma segunda seleccedilatildeo
para a adaptaccedilatildeo agraves circunstacircncias climaacuteticas do Brasil Com hibridizaccedilatildeo
controlada entre genoacutetipos selecionados da China e do Vietnam o ganho
geneacutetico foi obtido nos termos do iacutendice da artemisinina e da uniformidade da
populaccedilatildeo Com o aumento do iacutendice de biomassa e da artemisinina (estimado
pela monitoraccedilatildeo analiacutetica) era possiacutevel aumentar a produccedilatildeo de artemisinina de
9
5 Kgha (populaccedilatildeo baacutesica) para aproximadamente 25 Kgha (populaccedilatildeo
geneticamente produzida) No cultivo realizado no Brasil em 3 de 7 linhas
hiacutebridas 239 de x 1V Ch x Viet55 e 1V x 243 produziram respectivamente
2543 2305 e 2127 quilogramas de artemisininahacorte com as 2 colheitas
possiacuteveis por o ano O cultivo destas linhas hiacutebridas novas no Brasil eacute uma
teacutecnica praticaacutevel e altamente competitiva devido agrave produccedilatildeo obtida
(MAGALHAtildeES et al 1997)
Foi pesquisado o efeito do aumento da irradiacircncia (15 a 100 da luz solar
cheia L15 a L100) sobre o crescimento a taxa fotossinteacutetica liacutequida maacutexima
(Pmax) a compensaccedilatildeo (CI) a saturaccedilatildeo de irradiacircncia de A annua e a produccedilatildeo
de artemisinina Na luz solar plena A annua apresentou uma capacidade elevada
de fotossiacutentese com irradiacircncia baixa manteve um Pmax relativamente elevado
com um CI baixo O crescimento da altura e do diacircmetro biomassa total e da
folha e iacutendice de artemisinina diminuiu com a diminuiccedilatildeo da irradiacircncia que pocircde
ser conectado com a fotossiacutentese mais baixa na irradiacircncia mais baixa em
relaccedilatildeo agrave irradiacircncia mais elevada As irradiacircncias mudaram a alocaccedilatildeo de
biomassa em A annua A relaccedilatildeo massa de folhamassa total da espeacutecie
aumentou com a diminuiccedilatildeo da irradiacircncia mas a relaccedilatildeo raizmassa total e
raizmassa da parte aeacuterea aumentaram geralmente com a irradiacircncia crescente
Assim A annua pode crescer na luz solar parcial e plena Entretanto o
rendimento elevado da biomassa e da artemisinina requerem o cultivo em um
habitat aberto com luz solar adequada (WANG et al 2008)
MATERIAIS E MEacuteTODOS
O ensaio foi conduzido na Estaccedilatildeo Experimental de Biologia da
Universidade de Brasiacutelia (EEB ndash UnB) em casa-de-vegetaccedilatildeo do tipo
ldquoglasshouserdquo no periacuteodo de 19 de abril de 2013 a 6 de dezembro de 2013
(primeiro e segundo semestres respectivamente) Durante o ensaio a casa-de-
vegetaccedilatildeo apresentou uma temperatura meacutedia de aproximadamente 250deg C com
meacutedia das miacutenimas de 1325degC e das maacuteximas de 3675degC aferidas com
termocircmetro convencional de maacutexima e miacutenima O iacutendice de radiaccedilatildeo luminosa
esteve em trono de 50 determinado por fotocircmetro automaacutetico modelo Asahi-
Pentax SP-500
10
A partida de sementes de Aannua foi doada pelo pesquisador Pedro
Melillo Magalhatildees oriundas do CPQBA ndash UNICAMP e produzidas em campo da
proacutepria estaccedilatildeo e utilizadas para a semeadura em sementeiras tipo caixa
contendo a mistura EEB (Estaccedilatildeo Experimental de Biologia) com a seguinte
composiccedilatildeo Latossolo vermelho de cerrado areia vermiculita e composto
orgacircnico na proporccedilatildeo 3311 respectivamente mais a formulaccedilatildeo 4-14-8 na
dose de 100g para 40L da mistura Apoacutes 42 dias da semeadura foram
selecionadas 20 mudas que estavam no ponto de transplante (meacutedia de 15 cm
de altura) Dessa forma foram transplantadas para vasos com capacidade para
25L preenchidos com a mistura EEB
Apoacutes o transplante a altura da parte aeacuterea de todas as plantas foi aferida
semanalmente com o uso de uma trena com o objetivo de desenhar-se a curva
de crescimento As mediccedilotildees tiveram iniacutecio uma semana apoacutes o transplante no
dia 14 de maio
No dia 26 de julho de 201349 dias apoacutes o transplante as plantas foram
transferidas dos vasos de 25L para vasos com maior capacidade (325L) para
favorecer o seu crescimento e desenvolvimento e no dia 17 de setembro102 dias
apoacutes o transplante foi feita uma suplementaccedilatildeo de terra para as 20 plantas com o
mesmo objetivo mediante a colocaccedilatildeo por baixo de um outro vaso de mesmo
tamanho contendo metade de seu volume em Substrato EEB Isso permitiu que
as raiacutezes crescessem no volume adicional de mistura atraveacutes dos furos de
drenagem do vaso original
O controle de plantas daninhas foi feito manualmente e o controle
fitossanitaacuterio atraveacutes de acompanhamento e sucessivas observaccedilotildees Ao fim do
ensaio foi observada uma pequena infestaccedilatildeo com cochonilhas As cochonilhas
foram identificadas por Pseudococcus citri Risso ndash mais conhecida por
ldquocochonilha algodatildeordquo Foi parcialmente controlada em curto prazo com uma
pulverizaccedilatildeo manual de soluccedilatildeo de detergente (10 ml 1 litro de aacutegua)
Ao fim do ensaio dia 18 de outubro foram obtidas as massas fresca e
seca das plantas bem como os coeficientes de variaccedilatildeo dos dados
11
RESUTADOS E DISCUSSAtildeO
Os resultados do presente ensaio encontram-se representados nas Figuras
4 e 5 as quais representam respectivamente a curva de crescimento de Aannua
em vinte semana (s) em casa-de-vegetaccedilatildeo e a evoluccedilatildeo da taxa meacutedia diaacuteria de
crescimento
Observando-se a Figura 2 que apresenta a evoluccedilatildeo da taxa meacutedia de
crescimento verificou-se que entre a quinta e a setima semanas a taxa meacutedia
diaacuteria de crescimento cresceu de 08 cm ao dia para em torno de 20 cm por dia
tendo havido um decrescimo e um estabilidade entre a oitava e a deacutecima segunda
semanas quando entatildeo ocorreu o segundo pico passando a taxa meacutedia diaacuteria de
crescimento de 12 cm para 18 cm seguindo-se um decrescimo ateacute 05 cmdia
nas deacutecima sexta e deacutecima seacutetimas semanas quando entatildeo houve o terceiro
pico na deacutecima oitava semana atingindo 08cmdia e novamente decaindo ateacute 04
cmdia na vigeacutesima semana
0
50
100
150
1s 3s 5s 7s 9s 11s 13s 15s 17s 19s
Alt
ura
em
cm
Crescimento meacutedio de Artemisia annua em vasos em casa de vegataccedilatildeo durante 20 semanas
(s)
Figura 1 ndash Crescimento meacutedio de A annua em vasos em casa-de-vegetaccedilatildeo durante 20 semanas (s) ndash Observa-se que a altura das plantas aumentou
notavelmente a partir da quinta semana apoacutes o transplante correspondendo ao primeiro pico de crescimento
12
Os picos de crescimento de A annua submetida ao cultivo em vasos em
casa-de-vegetaccedilatildeo podem ser explicados pelas interferecircncias do pesquisador que
visava maximizar o desenvolvimento das plantas O primeiro pico pode ser
atribuiacutedo ao padratildeo de crescimento da planta Por ocasiatildeo da primeira troca de
vasos quando a planta ganhou 2145 de volume de substrato para explorar
teria havido o segundo pico por volta da deacutecima segunda semana O terceiro pico
se deu em consequecircncia da segunda suplementaccedilatildeo de substrato ocorrida por
volta da deacutecima seacutetima semana
O aproveitamento da segunda suplementaccedilatildeo foi efetivo tendo as plantas
explorado o volume de substrato adicional em sua totalidade ocupando-o por
inteiro o volume (Figura 6)
Eacute consenso entre pesquisadores que as plantas crescidas em vasos nunca
alcanccedilam seu potencial maior conforme imagens de suas raiacutezes mostram Uma
teacutecnica meacutedica da imagem chamada a imagem de ressonacircncia magneacutetico (MRI)
foi usada por investigadores para capturar instantacircneos da raiz da planta no vaso
As figuras obtidas revelam que as raiacutezes ldquodetectam o tamanho do vasordquo e emitem
um sinal que resulta na restriccedilatildeo o crescimento da planta (POORTER et al 2012)
Poorter et al (2012) esclarecem que a maioria das experiecircncias em
biologia de plantas usa plantas crescidas em algum tipo de recipiente ou vaso
Uma meta-anaacutelise em 65 estudos que analisaram o efeito do tamanho do vaso no
0
05
1
15
2
25
1s 3s 5s 7s 9s 11s 13s 15s 17s 19s
Ce
ntiacute
met
ros
po
r d
ia
Evoluccedilatildeo da taxa meacutedia diaacuteria de crescimento de Artemisia annua em casa de vegetaccedilatildeo por
20 semanas
Figura 2 ndash Evoluccedilatildeo da taxa diaacuteria de cresimento de A annua em casa de vegetaccedilatildeo por 20 semanas (s)
13
crescimento e em variaacuteveis afins foi conduzida e verificou que em meacutedia dobrar o
tamanho do vaso aumentou a produccedilatildeo da biomassa da planta em 43 Uma
anaacutelise adicional de efeitos do tamanho do vaso nos componentes afins do
crescimento sugere que o crescimento reduzido em vasos menores eacute causado
principalmente por uma reduccedilatildeo na fotossiacutentese por aacuterea da folha da unidade
mais do que por mudanccedilas na morfologia da folha ou no alocamento de
biomassa O tamanho apropriado do vaso dependeraacute logicamente do tamanho
das plantas que crescem neles Baseado em vaacuterias linhas da evidecircncia noacutes
sugerimos que um tamanho apropriado do vaso eacute um no qual a biomassa da
planta natildeo exceda 1 g L-1 Na praacutetica atual da pesquisa 65 das experiecircncias
excedem essa referecircncia Noacutes sugerimos que os investigadores devam
considerar com cuidado o tamanho do vaso em suas experiecircncias porque os
vasos pequenos podem mudar resultados experimentais e sabotar a finalidade da
experiecircncia
No presente ensaio de vasos foi obtido uma massa seca da parte aeacuterea
meacutedia de 2995g com um coeficiente de variaccedilatildeo de 3001 com uma planta por
vaso com dois transplantes para ganho de volume de solo a ser explorado O
corte das plantas se deu com 80 dias apoacutes o transplante
Quiteacuterio (2006) tambeacutem em ensaio de vasos obteve a meacutedia 25g de massa
seca de A annua em ensaio de vasos com duas plantas onde a colheita foi feita
75 dias apoacutes a semeadura no preacute-florescimento Os dois resultados apresentam
coerecircncia entre si
O ataque de cochonilhas observado era esperado como um reflexo natural
do estresse das plantas que satildeo submetidas ao cultivo em vaso em casa-de-
vegetaccedilatildeo
14
CONCLUSAtildeO
Nas condiccedilotildees do presente ensaio concluiu-se que o cultivo de Artemisia annua
em vasos e em casa-de-vegetaccedilatildeo eacute viaacutevel e pode ser notavelmente expressivo
com porte superior a 15m de altura e massa seca da parte aeacuterea meacutedia em torno
de 30g
Numa etapa posterior visualizam-se os ensaios objetivando a geraccedilatildeo de uma
tecnologia de produccedilatildeo tendo como alvo a produtividade em artesinina-A que eacute o
componente ativo contra malaacuteria
15
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17
DOCUMENTAacuteRIO FOTOGRAacuteFICO
Foto 1 ndash Mudas na sementeira prontas para transplante - Foto da autora Nayara Carvalho
Foto 2 ndash Mudas de Artemisia annua no dia do transplante ndash Foto da autora Nayara
Carvalho
18
Foto 3 ndash Aspecto geral do ensaio ndash Foto da autora Nayara Carvalho
Foto 4 ndash Suplementaccedilatildeo de substrato ndash Foto do orientador Jean Kleber
19
Foto 5 ndash Aproveitamento pela planta di suplemento de substrato ndash Foto do orientador Jean Kleber
Foto 6 ndash A planta mais alta ao final do ensaio ndash Foto do orientador Jean Kleber
20
Foto 8 ndash Ataque de colchonilhas em A annua ndash Foto da autora Nayara Carvalho
Foto 7 ndash A planta mais baixa ao final do ensaio
FICHA CATALOGRAacuteFICA
CARVALHO N Crescimento e desenvolvimento de Artemisia (Artemisia annua L) em casa de vegetaccedilatildeo do tipo ldquoglasshouserdquo ndash Brasiacutelia 2013 28 p il Trabalho final de conclusatildeo da Graduaccedilatildeo ndash Universidade de Brasiacutelia Faculdade de agronomia e Medicina Veterinaacuteria Orientaccedilatildeo Prof Jean Kleber A Mattos
REFEREcircNCIA BIBLIOGRAacuteFICA
CARVALHO N Crescimento e desenvolvimento de Artemisia (Artemisia annua L) em casa de vegetaccedilatildeo do tipo ldquoglasshouserdquo Trabalho final de Graduaccedilatildeo ndash Universidade de Brasiacutelia Faculdade de agronomia e Medicina Veterinaacuteria ndash Brasiacutelia 2013 28 p il
CESSAtildeO DE DIREITOS
NOME DA AUTORA Nayara Carvalho
TIacuteTULO DO TRABALHO Crescimento e desenvolvimento de Artemisia (Artemisia annua L) em casa de vegetaccedilatildeo do tipo ldquoglasshouserdquo Ano 2013 Eacute concedida agrave Universidade de Brasiacutelia permissatildeo para reproduzir coacutepias desta dissertaccedilatildeo de graduaccedilatildeo e para emprestar ou vender tais coacutepias somente para propoacutesitos acadecircmicos e cientiacuteficos O autor reserva-se os outros direitos de publicaccedilatildeo e nenhuma parte desta dissertaccedilatildeo de graduaccedilatildeo pode ser reproduzida sem autorizaccedilatildeo por escrito do autor _________________________________
Nayara Carvalho
BRASIacuteLIA DF ndash Dezembro de 2013
AGRADECIMENTOS
Aos meus pais que sempre estiveram presentes em todas as
jornadas que percorri me apoiando nas decisotildees mais difiacuteceis e me guiando pelos
melhores caminhos
Aos meus irmatildeos por quem estimo muito e tenho muito carinho
Ao meu orientador o professor Jean Kleber com quem pude
compartilhar e absorver conhecimentos pela paciecircncia motivaccedilatildeo e pela
oportunidade de trabalhar ao lado de um profissional de gabarito reconhecido no
mundo acadecircmico e cientiacutefico
Aos amigos que fizeram parte direta ou indiretamente dessa minha
caminhada gratificante Aline Ronaldo e Fabriacuteccio
SUMAacuteRIO
LISTA DE FIGURAS vii
RESUMO viii
INTRODUCcedilAtildeO 1
OBJETIVO 2
REVISAtildeO BIBLIOGRAacuteFICA 2
Descriccedilatildeo da planta 2
COMPOSICcedilAtildeO E USO 3
ARTEMISININA 5
ASPECTOS AGRONOcircMICOS 7
Propagaccedilatildeo 7
Adubaccedilatildeo 8
Outros aspectos 8
MATERIAIS E MEacuteTODOS 9
RESUTADOS E DISCUSSAtildeO 11
CONCLUSAtildeO 14
REFEREcircNCIAS BIBLIOGRAacuteFICAS 15
DOCUMENTAacuteRIO FOTOGRAacuteFICO 17
vii
LISTA DE FIGURAS
1 Figura 1 ndash Crescimento meacutedio de Artemisia annua em vasos em
casa-de-vegetaccedilatildeo durante vinte semanas ndash paacuteg 25
2 Figura 2 ndash Evoluccedilatildeo da taxa diaacuteria de crescimento de Artemisia annua
em casa de vegetaccedilatildeo por 20 semanas ndash paacuteg 25
viii
RESUMO
A Artemisia annua L (Asteraceae) eacute originaacuteria de regiotildees de clima temperado da
Aacutesia e tem sido utilizada pela medicina tradicional chinesa haacute vaacuterios seacuteculos no
tratamento de malaacuteria A espeacutecie reveste-se portanto de indiscutiacutevel importacircncia
em paiacuteses tropicais onde a presenccedila da malaacuteria ainda preocupa as autoridades
da aacuterea da sauacutede o que eacute o caso da Regiatildeo Centro-Oeste do Brasil O objetivo
do presente trabalho foi estudar o crescimento e o desenvolvimento de A annua
mediante cultivo em vasos em casa de vegetaccedilatildeo As sementes de Aannua
foram produzidas em campo da proacutepria estaccedilatildeo e utilizadas para a semeadura em
sementeiras tipo caixa contendo a mistura EEB (Estaccedilatildeo Experimental de Biologia
da UnB ndash Brasiacutelia- DF) mais a formulaccedilatildeo 4-14-8 na dose de 100g para 40L da
mistura Apoacutes 42 dias da semeadura foram selecionadas 20 mudas que estavam
no ponto de transplante (meacutedia de 15 cm de altura) Dessa forma foram
transplantadas para vasos com capacidade para 25L preenchidos com a mistura
EEB Apoacutes nove semana de mensuraccedilotildees de altura as plantas foram pesadas
para obtenccedilatildeo das massas fresca e seca da parte aeacuterea Nas condiccedilotildees do
presente ensaio concluiu-se que o cultivo de Artemisia annua em vasos e em
casa-de-vegetaccedilatildeo eacute viaacutevel e pode ser notavelmente expressivo com porte
superior a 15m de altura e massa seca da parte aeacuterea com meacutedia de 30g
1
INTRODUCcedilAtildeO
A Artemisia annua L (Asteraceae) eacute originaacuteria de regiotildees de clima
temperado da Aacutesia e tem sido utilizada pela medicina tradicional chinesa haacute vaacuterios
seacuteculos no tratamento de malaacuteria Pesquisadores chineses estudaram mais de 30
espeacutecies do gecircnero Artemisia para confirmar a atividade antimalaacuterica das
mesmas Somente A annua e A apiacea Hance foram eficazes em combater
o Plasmodium vivax e o Plasmodium falciparum agentes etimoloacutegicos da malaacuteria
(DIAS 1997) Entre os metaboacutelitos secundaacuterios isolados das diversas espeacutecies do
gecircnero Artemisia os mais caracteriacutesticos satildeo as lactonas sesquiterpecircnicas
(RODRIGUES et al 2006)
As lactonas sesquiterpecircnicas pertencem a um grande grupo de produtos
naturais encontradas principalmente em plantas de vaacuterios gecircneros da famiacutelia
Asteraceae (SANTOS 2009)
A espeacutecie reveste-se portanto de indiscutiacutevel importacircncia em paiacuteses
tropicais onde a presenccedila da malaacuteria ainda preocupa as autoridades da aacuterea da
sauacutede o que eacute o caso da Regiatildeo Centro-Oeste do Brasil
Mediante solicitaccedilatildeo ao pesquisador Pedro Melillo Magalhatildees do CPQBA
(Centro Pluridisciplinar de pesquisas quiacutemicas bioloacutegicas e agriacutecolas ndash vinculado
agrave Unicamp ndash Universidade Estadual de Campinas) foi obtida uma pequena
partida de sementes de A annua com a qual obtivemos plantas adultas agrave campo
que produziram sementes feacuterteis possibilitando por conseguinte a realizaccedilatildeo de
ensaios agronocircmicos na Estaccedilatildeo Experimental de Biologia da Universidade de
Brasiacutelia (EEB ndash UnB)
O estudo do comportamento desta espeacutecie em nossa regiatildeo reveste-se de
consideraacutevel importacircncia uma vez que eacute fato conhecido de pesquisas da aacuterea que
o perfil de aromaacuteticos e outros componentes quiacutemicos varia bastante conforme a
condiccedilotildees ambientais em que as plantas satildeo cultivadas
Desta forma satildeo necessaacuterios ensaios agronocircmicos precedentes aos
ensaios quiacutemicos para que haja uma convivecircncia inicial com a espeacutecie visando o
conhecimento de suas possibilidades quanto agrave produccedilatildeo de mateacuteria prima
2
OBJETIVO
O objetivo do presente trabalho foi estudar o crescimento e o
desenvolvimento de A annua mediante cultivo em vasos em casa de vegetaccedilatildeo
REVISAtildeO BIBLIOGRAacuteFICA
Descriccedilatildeo da planta
Artemisia annua L (Syn Artemisia chamomilla C Winkl) Asteraceae
Nome vulgar Sweet wormwood eacute uma erva doce aromaacutetica com a flores
pequenas amarelas em capiacutetulos A annua conteacutem o componente quiacutemico
artemisinina em suas partes aeacutereas que satildeo usadas em drogas anti-malaacutericas
Outros nomes satildeo Sweet annie Wormwood annual (inglecircs) qing hao (chinecircs
artemiacutesia verde azulada) Difundida e naturalizada extensamente eacute
frequentemente abundante natildeo sendo do interesse do conservacionismo pois
ainda natildeo foi avaliada de acordo com criteacuterios da lista vermelha do IUCN ndash
International Union for Conservation of Nature Tem como habitat colinas bordas
das florestas e terrenos baldios Trata-se de uma planta medicinal antimalaacuterica
importante cujo oacuteleo essencial eacute usado tambeacutem em cosmeacuteticos A planta eacute
cultivada como um ornamental na Indoneacutesia (httpwwwkeworgplants-
fungiArtemisia-annuahtm)
A annua eacute nativa da Euraacutesia do sudeste da Europa (incluindo Albacircnia
Bulgaacuteria Montenegro Romecircnia Ruacutessia Servia Turquia) ao Vietnam e norte da
India Naturalizado em muitos paiacuteses (incluindo Argentina Aacuteustria a repuacuteblica
Tcheca Franccedila Alemanha Hungria Itaacutelia Polocircnia Eslovaacutequia Espanha Suiacuteccedila e
Estados Unidos) Foi registrada como de crescimento ruderal no Reino Unido
levada por paacutessaros ou nas latildes tendo sido cultivada experimentalmente tatildeo ao
norte como na Finlacircndia A espeacutecie e foi usada na China para tratar febres por
mais de 2000 anos O gecircnero Artemisia pertence agrave famiacutelia Asteraceae
(Compositae) que inclui plantas bem conhecidas usadas na medicina
perfumaria alimentaccedilatildeo e na induacutestria da bebida tal como a A dracunculus
(estragatildeo) A absinthium (absinto) e A vulgaris (artemiacutesia)
(httpwwwkeworgplants-fungiArtemisia-annuahtm )
3
A descriccedilatildeo botacircnica menciona que A annua eacute uma planta anual de haste
uacutenica glabra doce-aromaacutetica que cresce ateacute 1 m de altura (2 m como ruderal) A
haste eacute ereta nervada e marrom ou violeta-marrom As folhas basais satildeo 3-
pinatissectas (divididas trecircs vezes em foliacuteolos profundamente cortados) 3-5 cm
de comprimento e 2-4 cm de largura as folhas superiores satildeo 1-2-pinatissectas
menores e seacutesseis (sem peciacuteolo) Os capiacutetulos satildeo globosas com 2-25
miliacutemetros de diacircmetro em paniacuteculas frouxas O invoacutelucro (seacuterie das braacutecteas em
torno do capiacutetulo) eacute composto de braacutecteas glabras imbricadas As braacutecteas
exteriores satildeo verdes e linear-oblongas as braacutecteas internas satildeo brilhantes e
oval-arredondadas com uma margem larga fina seca Os capiacutetulos satildeo
disciformes e compostos de floretes filiformes exteriores (femininas) e de floretes
internos no disco (hermafroditas) Os floretes centrais numerosos do disco satildeo
esverdeados ou amarelados O fruto eacute um aquecircnio amarelo-marrom de parede
fina (pequeno seco) 06-08 miliacutemetros de tamanho com uma superfiacutecie
brilhante marcada com sulcos verticais e contendo uma uacutenica semente Os
aquecircnios natildeo tecircm nenhum papo e portanto natildeo satildeo dispersados pelo vento
como satildeo muitos outros da famiacutelia Asteraceae (Compositae)
(httpwwwkeworgplants-fungiArtemisia-annuahtm)
COMPOSICcedilAtildeO E USO A espeacutecie A annua eacute conhecida como ldquoQing Haordquo na China e eacute a fonte da
Medicina Tradicional Chinesa (MTC) que foi usada por mais de 2000 anos para
aliviar febres Na MTC prescreve-se frequentemente em combinaccedilatildeo com outros
ervas para tratar (aleacutem agraves febres) a icteriacutecia a dor de cabeccedila a vertigem e os
sangramentos nasais A pesquisa cientiacutefica da atividade anti-malaacuterica de A annua
comeccedilou no princiacutepio dos anos 70 em resposta agrave resistecircncia crescente agraves drogas
anti-malaacutericas estabelecidas por parte dos protozoaacuterios parasitas que causam a
malaacuteria (Protozoaacuterios do gecircnero Plasmodium ) O componente quiacutemico
artemisinina que ocorre naturalmente nas folhas da Aannua eacute um potente
agente anti-malaacuterico e pode matar o parasita mais agressivo o Plasmodium
falciparum (eacute seletivamente toacutexico ao estaacutegio assexual de eritrocito dos parasitas)
A artemisinina extraiacuteda de Aannua tornou-se extremamente importante em tratar
a malaacuteria desde que a resistecircncia do parasita a muitos outros antimalaacutericos se
tornou difundida (httpwwwkeworgplants-fungiArtemisia-annuahtm)
4
A planta A annua (Asteraceae) eacute listada na medicina chinesa como um
remeacutedio para vaacuterias febres incluindo a malaacuteria e contem um bem estabelecido
composto antimalaacuterico a artemisinina Neste estudo um hiacutebrido de A annua foi
cultivado com sucesso na Aacutefrica Central As partes aeacutereas da planta continham
063 - 070 de artemisinina por massa seca e aproximadamente 40 desta
artemisinina poderia ser extraiacuteda por meacutetodos simples da preparaccedilatildeo do chaacute
Cinco pacientes da malaacuteria que foram tratados com A annua mostraram um
desaparecimento raacutepido do parasita dentro de 2-4 dias Uma experimentaccedilatildeo
adicional com os 48 pacientes de malaacuteria mostrou um desaparecimento do
parasita em 44 pacientes (92) dentro de 4 dias Ambas as experimentaccedilotildees
mostraram uma melhoria marcada dos sintomas Estes resultados justificam
pesquisas adicionais do efeito antimalaacuterico de preparaccedilotildees de A annua
(MUELLER et al 2000)
Em fases de crescimento e desenvolvimento diferentes foi pesquisada a
variaccedilatildeo na quantidade e na qualidade do oacuteleo essencial de A annua incluindo
preacute- floraccedilatildeo floraccedilatildeo e poacutes - floraccedilatildeo Os oacuteleos foram obtidos por hidrodestilaccedilatildeo
das amostras secas ao ar Os rendimentos dos oacuteleos ( pp) nas diferentes
fases foram da ordem de preacute- floraccedilatildeo (097) floraccedilatildeo (1 23) e poacutes- floraccedilatildeo
(087) Os oacuteleos foram analisados por espectrometria de massa e cromatografia
em fase gasosa No total 32 35 e 33 constituintes foram identificados e
quantificados no oacuteleo de preacute - floraccedilatildeo floraccedilatildeo e poacutes - floraccedilatildeo representando
9767 92 e 92 4 dos oacuteleos respectivamente Cacircnfora 18-cineol canfeno
spatulenol alfandashpineno e artemiacutesia-cetona foram os principais componentes em
todas as amostras Monoterpenos eram o principal grupo de compostos em preacute-
floraccedilatildeo (6996) floraccedilatildeo (7244) e poacutes- floraccedilatildeo (7096)
(MOHAMMADREZA 2008)
A comparaccedilatildeo do perfil de cromatografia de gaacutes do oacuteleo essencial da A
annua produzido no Brasil com aqueles de outras origens revelou a variaccedilatildeo
significativa de seus constituintes O comportamento sazonal do iacutendice do
artemisinina 13 contra a produccedilatildeo de oacuteleo essencial foi observado durante um
periacuteodo da colheita A viabilidade econocircmica de diversos metodologias de
purificaccedilatildeo para a produccedilatildeo da artemisinina foi testada Foi produzido o composto
anti-malaacuterico 13 a um custo total de US$ 115 por grama (FOGLIO 1996)
5
ARTEMISININA
Artemisinina eacute uma lactona sesquiterpecircnica com uma ponte endoperoacutexido
e foi produzida semi-sinteticamente como uma droga antimalaacuterica A eficaacutecia do
chaacute feito de A annua no tratamento da malaacuteria eacute contencioso De acordo com
alguns autores a artemesinina natildeo eacute soluacutevel em aacutegua e as concentraccedilotildees nestas
infusotildees satildeo consideradas insuficientes para tratar a malaacuteria (MUELER et al
2004 RATH et al 2004 JANSEN 2006)
Em 2004 o ministro da sauacutede da Etioacutepia mudou a droga antimalaacuterica de
primeira linha da Etioacutepia de sulfadoxinaprimetamina (Fansidar) que tem uma
taxa de falha em meacutedia de 36 no tratamento para a artemetherlumefantrine
(Coartem) uma terapia de droga que conteacutem a artemisinina que eacute 100 eficaz
quando usado corretamente apesar de uma relativa falta mundial do produto do
derivado de A annua (MALARIA UPDATE 20052013)
A malaacuteria eacute causada primeiramente pelo Plasmodium falciparum que
invade as hemaacutecias e conteacutem heme-grupos ricos em ferro (na forma do
hemozoina) (POSNER amp OrsquoNEIL 2004)
O mecanismo de accedilatildeo proposto da artemisinina contra a malaacuteria envolve a
clivagem de pontes de endoperoacutexido pelo ferro produzindo os radicais livres
(ferro-oxo hipervalente espeacutecies epoacutexidos aldeiacutedos e compostos do dicarbonil)
que danificam as macromoleacuteculas bioloacutegicas causando estresse oxidativo nas
ceacutelulas do parasita (CUMMING 1997)
Com a possibilidade de isolarem maiores quantidades de artemisinina
(quinghaosu) plantas de A annua foram cultivadas por Liersch et al (1986) e
analisadas em estaacutegios diferentes de desenvolvimento O iacutendice mais elevado de
artemisinina foi encontrado imediatamente antes do florescimento Era tambeacutem
possiacutevel correlacionar o desenvolvimento das plantas com o iacutendice maacuteximo do
artemisinina As plantas de A annua cultivadas de vaacuterias outras fontes tambeacutem
foram examinadas para o iacutendice de artemisinina De acordo com os resultados
obtidos nenhuma dessas plantas contiveram quantidades suficientes do
composto (artemisinina) para justificar isolamento em uma escala teacutecnica Aleacutem
disso outras espeacutecies de Artemisia foram testadas e foi encontrada artemisinina
em somente uma outra espeacutecie Para aumentar a quantidade de artemisinina
durante o periacuteodo do crescimento da planta foram testados dois reguladores
6
hormonais de crescimento em A annua genoacutetipo 811 Os resultados mostraram
que o chlormequat podia aumentar o teor do composto(artemisinina) em 30 em
relaccedilatildeo agraves plantas natildeo tratadas Foram encontrados tambeacutem alguns discretos
efeitos dos reguladores de crescimento na morfologia dos trichomas glandulares
Para finalidades de produccedilatildeo plantas com um iacutendice elevado de
artemisinina satildeo requeridas Woerdenbag et al (1994) acompanharam o
desenvolvimento do conteuacutedo de artemisinina e dos sesquiterpenes
biosinteticamente relacionados aacutecido artemisiacutenico arteannuina B e artemisiteno
em plantas de A annua durante um periacuteodo da vegetaccedilatildeo no Vietnam onde esta
espeacutecie eacute indiacutegena Aleacutem disso o iacutendice do oacuteleo essencial e sua composiccedilatildeo
foram estudados As amostras das folhas gemas as flores ou as flores de poacutes-
florescimento e frutos foram analisados nos diferentes estaacutegios vegetativo (5 6 e
8 meses de idade) na formaccedilatildeo maciccedila das gemas (9 meses) no pleno
florescimento (10 meses) e poacutes-florescimento (10frac12 meses) O iacutendice mais
elevado de artemisinina (086 da massa seca) estava nas folhas de plantas com
5 meses de idade Neste estaacutegio o rendimento mais elevado da folha tambeacutem foi
encontrado Subsequentemente o iacutendice de artemisinina caiu gradualmente Na
idade de 5 meses os maiores conteuacutedos de aacutecido artemisinico e arteannuina-B
016 e 008 da massa seca respectivamente foram tambeacutem encontrados O
artemisiteno estava presente em todos os estaacutegios do desenvolvimento variando
de 0002 a 009 da massa seca Com 19 volumemassa o iacutendice do oacuteleo
essencial (OE) foi maacuteximo imediatamente antes do florescimento e foi composto
de 55 de monoterpenos e 45 de sesquiterpenes Em todos os outros estaacutegios
(04 ndash 10 volumemassa do oacuteleo essencial) esta relaccedilatildeo foi de 30 70 Os
principais componentes do OE foram cacircnfora e germacreno-D
Observaccedilotildees mostraram que o rendimento da artemisinina esteve
correlacionado positivamente com o rendimento da folha e o nuacutemero das
colheitas Os rendimentos elevados de artemisinina ocorreram quando a colheita
produziu folhas artemisinina-ricas acompanhadas pelo menor crescimento
possiacutevel do tecido da haste alcanccedilado em colheitas muacuteltiplas em plantas
crescidas a tempo integral e plantadas mais cedo As colheitas crescidas por ge30
semanas e colhidas trecircs a quatro vezes deram os rendimentos meacutedios de
441plusmn142 e de 742plusmn156 respectivamente Muito mais altos do que o rendimento
maacuteximo de 25 quilogramas haminus1 relatado para a A annua em estudos anteriores
7
Concluiu-se que para obter artemisinina em altos niacuteveis A annua deve ser
colhida quatro vezes (KUMAR et al 2004)
ASPECTOS AGRONOcircMICOS
Propagaccedilatildeo
Em meacutedia 1000 sementes pesam 003 g e natildeo diminuem sua viabilidade
ao secar Satildeo acessiacuteveis ao armazenamento agrave frio de longo prazo Germinam de
janeiro a marccedilo A germinaccedilatildeo de 100 foi obtida em um meio de germinaccedilatildeo de
aacutegar a 1 em uma temperatura de 15degC sob um fotoperiacuteodo 816 horas claro-
escuro (MOHAMMADREZA 2008)
A Artemisia annua eacute plantada extensamente e comercialmente
principalmente como uma fonte de oacuteleos essenciais e tambeacutem de artemisinina
sobretudo em regiotildees da China e VietnamNessas regiotildees o ciclo da planta em
condiccedilotildees naturais chega a 10 meses Na Europa e na Ameacuterica as plantas
crescem mais rapidamente terminando seu ciclo de vida em apenas seis meses
mesmo no campo Cresce melhor em talhotildees abertos e ensolarados em solos
arenosos e aluviais feacuterteis que sejam neutros a ligeiramente aacutecidos e que tenham
uma boa retenccedilatildeo de umidade e natildeo tolera a seca ou o encharcamento As
sementes germinam de janeiro a marccedilo e a frutificaccedilatildeo (colheita das sementes)
ocorre entre outubro e novembro (httpwwwkeworgplants-fungiArtemisia-
annuahtm)
Conceiccedilatildeo et al (2013) testaram a germinaccedilatildeo da semente de A annua
cultivar Silves sob duas condiccedilotildees ambientais a fim de fornecer informaccedilotildees
sobre seu cultivo Na primeira condiccedilatildeo realizou-se o teste padratildeo com 4 lotes de
100g de sementes semeadas em gerbox sobre papel mata-borratildeo e dispostas
em germinador agrave temperatura de 25-30deg C expostas agrave luz durante 8 horas diaacuterias
e umedecidas quando necessaacuterio ateacute sua emergecircncia Na segunda etapa foi
realizado o mesmo procedimento anterior poreacutem as sementes permaneceram no
germinador em ausecircncia de luz sob as mesmas condiccedilotildees de temperatura e
umidade Segundo anaacutelise estatiacutestica em Tukey a 5 aplicada aqui sobre as
meacutedias de cada lote de 100g sementes os tratamentos obtiveram diferenccedilas
significativas sendo que as sementes expostas agrave luz obtiveram maiores valores
8
de germinaccedilatildeo Em ambiente com total ausecircncia de luz as sementes obtiveram
baixiacutessima taxa de germinaccedilatildeo no mesmo periacuteodo que as sementes em ambiente
iluminado Esse fato indica que a semente de A annua eacute fotoblaacutestica positiva e
assim necessita de um miacutenimo de luz para que ocorra sua germinaccedilatildeo por esse
motivo natildeo podem ser enterradas e sua semeadura deve ser apenas a lanccedilo ou
em superfiacutecie sem cobertura com terra Esta caracteriacutestica eacute comum agrave muitas
espeacutecies que produzem sementes miuacutedas
Adubaccedilatildeo
Em 2004 e 2005 um estudo foi realizado com o objetivo de determinar o
rendimento os componentes do rendimento e o iacutendice da artemisinina de A
annua cultivada sob quatro aplicaccedilotildees do nitrogecircnio (0 40 80 e 120 quilogramas
haminus1) na regiatildeo de Ccedilukurova na Turquia As experimentaccedilotildees de campo foram
conduzidas na universidade de Ccedilukurova no departamento de agricultura da
faculdade Nesse estudo a altura da planta o nuacutemero de ramos o rendimento
fresco e seco da erva o rendimento fresco e seco da folha o iacutendice do oacuteleo
essencial e o iacutendice da artemisinina (por cromatografia liacutequida pelo HPLC de
desempenho elevado) foram examinados Pela anaacutelise de variaccedilatildeo as doses de
nitrogecircnio natildeo tiveram nenhum efeito estatiacutestico nas caracteriacutesticas investigadas
agrave exceccedilatildeo do iacutendice de artemisinina Esse iacutendice nas folhas secas foi afetado
significativamente pelas aplicaccedilotildees do nitrogecircnio que variaram de 632 a 2750
mg 100 gminus1 (OZGUVEN et al 2008)
Outros aspectos
Uma pesquisa desenvolvida em MEDIPLANT (Suiacuteccedila) e no CPQBA-
UNICAPM (Brasil) envolveu a seleccedilatildeo e produccedilatildeo de genoacutetipos ricos em
artemisinina apresentando biomassa elevada seguido por uma segunda seleccedilatildeo
para a adaptaccedilatildeo agraves circunstacircncias climaacuteticas do Brasil Com hibridizaccedilatildeo
controlada entre genoacutetipos selecionados da China e do Vietnam o ganho
geneacutetico foi obtido nos termos do iacutendice da artemisinina e da uniformidade da
populaccedilatildeo Com o aumento do iacutendice de biomassa e da artemisinina (estimado
pela monitoraccedilatildeo analiacutetica) era possiacutevel aumentar a produccedilatildeo de artemisinina de
9
5 Kgha (populaccedilatildeo baacutesica) para aproximadamente 25 Kgha (populaccedilatildeo
geneticamente produzida) No cultivo realizado no Brasil em 3 de 7 linhas
hiacutebridas 239 de x 1V Ch x Viet55 e 1V x 243 produziram respectivamente
2543 2305 e 2127 quilogramas de artemisininahacorte com as 2 colheitas
possiacuteveis por o ano O cultivo destas linhas hiacutebridas novas no Brasil eacute uma
teacutecnica praticaacutevel e altamente competitiva devido agrave produccedilatildeo obtida
(MAGALHAtildeES et al 1997)
Foi pesquisado o efeito do aumento da irradiacircncia (15 a 100 da luz solar
cheia L15 a L100) sobre o crescimento a taxa fotossinteacutetica liacutequida maacutexima
(Pmax) a compensaccedilatildeo (CI) a saturaccedilatildeo de irradiacircncia de A annua e a produccedilatildeo
de artemisinina Na luz solar plena A annua apresentou uma capacidade elevada
de fotossiacutentese com irradiacircncia baixa manteve um Pmax relativamente elevado
com um CI baixo O crescimento da altura e do diacircmetro biomassa total e da
folha e iacutendice de artemisinina diminuiu com a diminuiccedilatildeo da irradiacircncia que pocircde
ser conectado com a fotossiacutentese mais baixa na irradiacircncia mais baixa em
relaccedilatildeo agrave irradiacircncia mais elevada As irradiacircncias mudaram a alocaccedilatildeo de
biomassa em A annua A relaccedilatildeo massa de folhamassa total da espeacutecie
aumentou com a diminuiccedilatildeo da irradiacircncia mas a relaccedilatildeo raizmassa total e
raizmassa da parte aeacuterea aumentaram geralmente com a irradiacircncia crescente
Assim A annua pode crescer na luz solar parcial e plena Entretanto o
rendimento elevado da biomassa e da artemisinina requerem o cultivo em um
habitat aberto com luz solar adequada (WANG et al 2008)
MATERIAIS E MEacuteTODOS
O ensaio foi conduzido na Estaccedilatildeo Experimental de Biologia da
Universidade de Brasiacutelia (EEB ndash UnB) em casa-de-vegetaccedilatildeo do tipo
ldquoglasshouserdquo no periacuteodo de 19 de abril de 2013 a 6 de dezembro de 2013
(primeiro e segundo semestres respectivamente) Durante o ensaio a casa-de-
vegetaccedilatildeo apresentou uma temperatura meacutedia de aproximadamente 250deg C com
meacutedia das miacutenimas de 1325degC e das maacuteximas de 3675degC aferidas com
termocircmetro convencional de maacutexima e miacutenima O iacutendice de radiaccedilatildeo luminosa
esteve em trono de 50 determinado por fotocircmetro automaacutetico modelo Asahi-
Pentax SP-500
10
A partida de sementes de Aannua foi doada pelo pesquisador Pedro
Melillo Magalhatildees oriundas do CPQBA ndash UNICAMP e produzidas em campo da
proacutepria estaccedilatildeo e utilizadas para a semeadura em sementeiras tipo caixa
contendo a mistura EEB (Estaccedilatildeo Experimental de Biologia) com a seguinte
composiccedilatildeo Latossolo vermelho de cerrado areia vermiculita e composto
orgacircnico na proporccedilatildeo 3311 respectivamente mais a formulaccedilatildeo 4-14-8 na
dose de 100g para 40L da mistura Apoacutes 42 dias da semeadura foram
selecionadas 20 mudas que estavam no ponto de transplante (meacutedia de 15 cm
de altura) Dessa forma foram transplantadas para vasos com capacidade para
25L preenchidos com a mistura EEB
Apoacutes o transplante a altura da parte aeacuterea de todas as plantas foi aferida
semanalmente com o uso de uma trena com o objetivo de desenhar-se a curva
de crescimento As mediccedilotildees tiveram iniacutecio uma semana apoacutes o transplante no
dia 14 de maio
No dia 26 de julho de 201349 dias apoacutes o transplante as plantas foram
transferidas dos vasos de 25L para vasos com maior capacidade (325L) para
favorecer o seu crescimento e desenvolvimento e no dia 17 de setembro102 dias
apoacutes o transplante foi feita uma suplementaccedilatildeo de terra para as 20 plantas com o
mesmo objetivo mediante a colocaccedilatildeo por baixo de um outro vaso de mesmo
tamanho contendo metade de seu volume em Substrato EEB Isso permitiu que
as raiacutezes crescessem no volume adicional de mistura atraveacutes dos furos de
drenagem do vaso original
O controle de plantas daninhas foi feito manualmente e o controle
fitossanitaacuterio atraveacutes de acompanhamento e sucessivas observaccedilotildees Ao fim do
ensaio foi observada uma pequena infestaccedilatildeo com cochonilhas As cochonilhas
foram identificadas por Pseudococcus citri Risso ndash mais conhecida por
ldquocochonilha algodatildeordquo Foi parcialmente controlada em curto prazo com uma
pulverizaccedilatildeo manual de soluccedilatildeo de detergente (10 ml 1 litro de aacutegua)
Ao fim do ensaio dia 18 de outubro foram obtidas as massas fresca e
seca das plantas bem como os coeficientes de variaccedilatildeo dos dados
11
RESUTADOS E DISCUSSAtildeO
Os resultados do presente ensaio encontram-se representados nas Figuras
4 e 5 as quais representam respectivamente a curva de crescimento de Aannua
em vinte semana (s) em casa-de-vegetaccedilatildeo e a evoluccedilatildeo da taxa meacutedia diaacuteria de
crescimento
Observando-se a Figura 2 que apresenta a evoluccedilatildeo da taxa meacutedia de
crescimento verificou-se que entre a quinta e a setima semanas a taxa meacutedia
diaacuteria de crescimento cresceu de 08 cm ao dia para em torno de 20 cm por dia
tendo havido um decrescimo e um estabilidade entre a oitava e a deacutecima segunda
semanas quando entatildeo ocorreu o segundo pico passando a taxa meacutedia diaacuteria de
crescimento de 12 cm para 18 cm seguindo-se um decrescimo ateacute 05 cmdia
nas deacutecima sexta e deacutecima seacutetimas semanas quando entatildeo houve o terceiro
pico na deacutecima oitava semana atingindo 08cmdia e novamente decaindo ateacute 04
cmdia na vigeacutesima semana
0
50
100
150
1s 3s 5s 7s 9s 11s 13s 15s 17s 19s
Alt
ura
em
cm
Crescimento meacutedio de Artemisia annua em vasos em casa de vegataccedilatildeo durante 20 semanas
(s)
Figura 1 ndash Crescimento meacutedio de A annua em vasos em casa-de-vegetaccedilatildeo durante 20 semanas (s) ndash Observa-se que a altura das plantas aumentou
notavelmente a partir da quinta semana apoacutes o transplante correspondendo ao primeiro pico de crescimento
12
Os picos de crescimento de A annua submetida ao cultivo em vasos em
casa-de-vegetaccedilatildeo podem ser explicados pelas interferecircncias do pesquisador que
visava maximizar o desenvolvimento das plantas O primeiro pico pode ser
atribuiacutedo ao padratildeo de crescimento da planta Por ocasiatildeo da primeira troca de
vasos quando a planta ganhou 2145 de volume de substrato para explorar
teria havido o segundo pico por volta da deacutecima segunda semana O terceiro pico
se deu em consequecircncia da segunda suplementaccedilatildeo de substrato ocorrida por
volta da deacutecima seacutetima semana
O aproveitamento da segunda suplementaccedilatildeo foi efetivo tendo as plantas
explorado o volume de substrato adicional em sua totalidade ocupando-o por
inteiro o volume (Figura 6)
Eacute consenso entre pesquisadores que as plantas crescidas em vasos nunca
alcanccedilam seu potencial maior conforme imagens de suas raiacutezes mostram Uma
teacutecnica meacutedica da imagem chamada a imagem de ressonacircncia magneacutetico (MRI)
foi usada por investigadores para capturar instantacircneos da raiz da planta no vaso
As figuras obtidas revelam que as raiacutezes ldquodetectam o tamanho do vasordquo e emitem
um sinal que resulta na restriccedilatildeo o crescimento da planta (POORTER et al 2012)
Poorter et al (2012) esclarecem que a maioria das experiecircncias em
biologia de plantas usa plantas crescidas em algum tipo de recipiente ou vaso
Uma meta-anaacutelise em 65 estudos que analisaram o efeito do tamanho do vaso no
0
05
1
15
2
25
1s 3s 5s 7s 9s 11s 13s 15s 17s 19s
Ce
ntiacute
met
ros
po
r d
ia
Evoluccedilatildeo da taxa meacutedia diaacuteria de crescimento de Artemisia annua em casa de vegetaccedilatildeo por
20 semanas
Figura 2 ndash Evoluccedilatildeo da taxa diaacuteria de cresimento de A annua em casa de vegetaccedilatildeo por 20 semanas (s)
13
crescimento e em variaacuteveis afins foi conduzida e verificou que em meacutedia dobrar o
tamanho do vaso aumentou a produccedilatildeo da biomassa da planta em 43 Uma
anaacutelise adicional de efeitos do tamanho do vaso nos componentes afins do
crescimento sugere que o crescimento reduzido em vasos menores eacute causado
principalmente por uma reduccedilatildeo na fotossiacutentese por aacuterea da folha da unidade
mais do que por mudanccedilas na morfologia da folha ou no alocamento de
biomassa O tamanho apropriado do vaso dependeraacute logicamente do tamanho
das plantas que crescem neles Baseado em vaacuterias linhas da evidecircncia noacutes
sugerimos que um tamanho apropriado do vaso eacute um no qual a biomassa da
planta natildeo exceda 1 g L-1 Na praacutetica atual da pesquisa 65 das experiecircncias
excedem essa referecircncia Noacutes sugerimos que os investigadores devam
considerar com cuidado o tamanho do vaso em suas experiecircncias porque os
vasos pequenos podem mudar resultados experimentais e sabotar a finalidade da
experiecircncia
No presente ensaio de vasos foi obtido uma massa seca da parte aeacuterea
meacutedia de 2995g com um coeficiente de variaccedilatildeo de 3001 com uma planta por
vaso com dois transplantes para ganho de volume de solo a ser explorado O
corte das plantas se deu com 80 dias apoacutes o transplante
Quiteacuterio (2006) tambeacutem em ensaio de vasos obteve a meacutedia 25g de massa
seca de A annua em ensaio de vasos com duas plantas onde a colheita foi feita
75 dias apoacutes a semeadura no preacute-florescimento Os dois resultados apresentam
coerecircncia entre si
O ataque de cochonilhas observado era esperado como um reflexo natural
do estresse das plantas que satildeo submetidas ao cultivo em vaso em casa-de-
vegetaccedilatildeo
14
CONCLUSAtildeO
Nas condiccedilotildees do presente ensaio concluiu-se que o cultivo de Artemisia annua
em vasos e em casa-de-vegetaccedilatildeo eacute viaacutevel e pode ser notavelmente expressivo
com porte superior a 15m de altura e massa seca da parte aeacuterea meacutedia em torno
de 30g
Numa etapa posterior visualizam-se os ensaios objetivando a geraccedilatildeo de uma
tecnologia de produccedilatildeo tendo como alvo a produtividade em artesinina-A que eacute o
componente ativo contra malaacuteria
15
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17
DOCUMENTAacuteRIO FOTOGRAacuteFICO
Foto 1 ndash Mudas na sementeira prontas para transplante - Foto da autora Nayara Carvalho
Foto 2 ndash Mudas de Artemisia annua no dia do transplante ndash Foto da autora Nayara
Carvalho
18
Foto 3 ndash Aspecto geral do ensaio ndash Foto da autora Nayara Carvalho
Foto 4 ndash Suplementaccedilatildeo de substrato ndash Foto do orientador Jean Kleber
19
Foto 5 ndash Aproveitamento pela planta di suplemento de substrato ndash Foto do orientador Jean Kleber
Foto 6 ndash A planta mais alta ao final do ensaio ndash Foto do orientador Jean Kleber
20
Foto 8 ndash Ataque de colchonilhas em A annua ndash Foto da autora Nayara Carvalho
Foto 7 ndash A planta mais baixa ao final do ensaio
AGRADECIMENTOS
Aos meus pais que sempre estiveram presentes em todas as
jornadas que percorri me apoiando nas decisotildees mais difiacuteceis e me guiando pelos
melhores caminhos
Aos meus irmatildeos por quem estimo muito e tenho muito carinho
Ao meu orientador o professor Jean Kleber com quem pude
compartilhar e absorver conhecimentos pela paciecircncia motivaccedilatildeo e pela
oportunidade de trabalhar ao lado de um profissional de gabarito reconhecido no
mundo acadecircmico e cientiacutefico
Aos amigos que fizeram parte direta ou indiretamente dessa minha
caminhada gratificante Aline Ronaldo e Fabriacuteccio
SUMAacuteRIO
LISTA DE FIGURAS vii
RESUMO viii
INTRODUCcedilAtildeO 1
OBJETIVO 2
REVISAtildeO BIBLIOGRAacuteFICA 2
Descriccedilatildeo da planta 2
COMPOSICcedilAtildeO E USO 3
ARTEMISININA 5
ASPECTOS AGRONOcircMICOS 7
Propagaccedilatildeo 7
Adubaccedilatildeo 8
Outros aspectos 8
MATERIAIS E MEacuteTODOS 9
RESUTADOS E DISCUSSAtildeO 11
CONCLUSAtildeO 14
REFEREcircNCIAS BIBLIOGRAacuteFICAS 15
DOCUMENTAacuteRIO FOTOGRAacuteFICO 17
vii
LISTA DE FIGURAS
1 Figura 1 ndash Crescimento meacutedio de Artemisia annua em vasos em
casa-de-vegetaccedilatildeo durante vinte semanas ndash paacuteg 25
2 Figura 2 ndash Evoluccedilatildeo da taxa diaacuteria de crescimento de Artemisia annua
em casa de vegetaccedilatildeo por 20 semanas ndash paacuteg 25
viii
RESUMO
A Artemisia annua L (Asteraceae) eacute originaacuteria de regiotildees de clima temperado da
Aacutesia e tem sido utilizada pela medicina tradicional chinesa haacute vaacuterios seacuteculos no
tratamento de malaacuteria A espeacutecie reveste-se portanto de indiscutiacutevel importacircncia
em paiacuteses tropicais onde a presenccedila da malaacuteria ainda preocupa as autoridades
da aacuterea da sauacutede o que eacute o caso da Regiatildeo Centro-Oeste do Brasil O objetivo
do presente trabalho foi estudar o crescimento e o desenvolvimento de A annua
mediante cultivo em vasos em casa de vegetaccedilatildeo As sementes de Aannua
foram produzidas em campo da proacutepria estaccedilatildeo e utilizadas para a semeadura em
sementeiras tipo caixa contendo a mistura EEB (Estaccedilatildeo Experimental de Biologia
da UnB ndash Brasiacutelia- DF) mais a formulaccedilatildeo 4-14-8 na dose de 100g para 40L da
mistura Apoacutes 42 dias da semeadura foram selecionadas 20 mudas que estavam
no ponto de transplante (meacutedia de 15 cm de altura) Dessa forma foram
transplantadas para vasos com capacidade para 25L preenchidos com a mistura
EEB Apoacutes nove semana de mensuraccedilotildees de altura as plantas foram pesadas
para obtenccedilatildeo das massas fresca e seca da parte aeacuterea Nas condiccedilotildees do
presente ensaio concluiu-se que o cultivo de Artemisia annua em vasos e em
casa-de-vegetaccedilatildeo eacute viaacutevel e pode ser notavelmente expressivo com porte
superior a 15m de altura e massa seca da parte aeacuterea com meacutedia de 30g
1
INTRODUCcedilAtildeO
A Artemisia annua L (Asteraceae) eacute originaacuteria de regiotildees de clima
temperado da Aacutesia e tem sido utilizada pela medicina tradicional chinesa haacute vaacuterios
seacuteculos no tratamento de malaacuteria Pesquisadores chineses estudaram mais de 30
espeacutecies do gecircnero Artemisia para confirmar a atividade antimalaacuterica das
mesmas Somente A annua e A apiacea Hance foram eficazes em combater
o Plasmodium vivax e o Plasmodium falciparum agentes etimoloacutegicos da malaacuteria
(DIAS 1997) Entre os metaboacutelitos secundaacuterios isolados das diversas espeacutecies do
gecircnero Artemisia os mais caracteriacutesticos satildeo as lactonas sesquiterpecircnicas
(RODRIGUES et al 2006)
As lactonas sesquiterpecircnicas pertencem a um grande grupo de produtos
naturais encontradas principalmente em plantas de vaacuterios gecircneros da famiacutelia
Asteraceae (SANTOS 2009)
A espeacutecie reveste-se portanto de indiscutiacutevel importacircncia em paiacuteses
tropicais onde a presenccedila da malaacuteria ainda preocupa as autoridades da aacuterea da
sauacutede o que eacute o caso da Regiatildeo Centro-Oeste do Brasil
Mediante solicitaccedilatildeo ao pesquisador Pedro Melillo Magalhatildees do CPQBA
(Centro Pluridisciplinar de pesquisas quiacutemicas bioloacutegicas e agriacutecolas ndash vinculado
agrave Unicamp ndash Universidade Estadual de Campinas) foi obtida uma pequena
partida de sementes de A annua com a qual obtivemos plantas adultas agrave campo
que produziram sementes feacuterteis possibilitando por conseguinte a realizaccedilatildeo de
ensaios agronocircmicos na Estaccedilatildeo Experimental de Biologia da Universidade de
Brasiacutelia (EEB ndash UnB)
O estudo do comportamento desta espeacutecie em nossa regiatildeo reveste-se de
consideraacutevel importacircncia uma vez que eacute fato conhecido de pesquisas da aacuterea que
o perfil de aromaacuteticos e outros componentes quiacutemicos varia bastante conforme a
condiccedilotildees ambientais em que as plantas satildeo cultivadas
Desta forma satildeo necessaacuterios ensaios agronocircmicos precedentes aos
ensaios quiacutemicos para que haja uma convivecircncia inicial com a espeacutecie visando o
conhecimento de suas possibilidades quanto agrave produccedilatildeo de mateacuteria prima
2
OBJETIVO
O objetivo do presente trabalho foi estudar o crescimento e o
desenvolvimento de A annua mediante cultivo em vasos em casa de vegetaccedilatildeo
REVISAtildeO BIBLIOGRAacuteFICA
Descriccedilatildeo da planta
Artemisia annua L (Syn Artemisia chamomilla C Winkl) Asteraceae
Nome vulgar Sweet wormwood eacute uma erva doce aromaacutetica com a flores
pequenas amarelas em capiacutetulos A annua conteacutem o componente quiacutemico
artemisinina em suas partes aeacutereas que satildeo usadas em drogas anti-malaacutericas
Outros nomes satildeo Sweet annie Wormwood annual (inglecircs) qing hao (chinecircs
artemiacutesia verde azulada) Difundida e naturalizada extensamente eacute
frequentemente abundante natildeo sendo do interesse do conservacionismo pois
ainda natildeo foi avaliada de acordo com criteacuterios da lista vermelha do IUCN ndash
International Union for Conservation of Nature Tem como habitat colinas bordas
das florestas e terrenos baldios Trata-se de uma planta medicinal antimalaacuterica
importante cujo oacuteleo essencial eacute usado tambeacutem em cosmeacuteticos A planta eacute
cultivada como um ornamental na Indoneacutesia (httpwwwkeworgplants-
fungiArtemisia-annuahtm)
A annua eacute nativa da Euraacutesia do sudeste da Europa (incluindo Albacircnia
Bulgaacuteria Montenegro Romecircnia Ruacutessia Servia Turquia) ao Vietnam e norte da
India Naturalizado em muitos paiacuteses (incluindo Argentina Aacuteustria a repuacuteblica
Tcheca Franccedila Alemanha Hungria Itaacutelia Polocircnia Eslovaacutequia Espanha Suiacuteccedila e
Estados Unidos) Foi registrada como de crescimento ruderal no Reino Unido
levada por paacutessaros ou nas latildes tendo sido cultivada experimentalmente tatildeo ao
norte como na Finlacircndia A espeacutecie e foi usada na China para tratar febres por
mais de 2000 anos O gecircnero Artemisia pertence agrave famiacutelia Asteraceae
(Compositae) que inclui plantas bem conhecidas usadas na medicina
perfumaria alimentaccedilatildeo e na induacutestria da bebida tal como a A dracunculus
(estragatildeo) A absinthium (absinto) e A vulgaris (artemiacutesia)
(httpwwwkeworgplants-fungiArtemisia-annuahtm )
3
A descriccedilatildeo botacircnica menciona que A annua eacute uma planta anual de haste
uacutenica glabra doce-aromaacutetica que cresce ateacute 1 m de altura (2 m como ruderal) A
haste eacute ereta nervada e marrom ou violeta-marrom As folhas basais satildeo 3-
pinatissectas (divididas trecircs vezes em foliacuteolos profundamente cortados) 3-5 cm
de comprimento e 2-4 cm de largura as folhas superiores satildeo 1-2-pinatissectas
menores e seacutesseis (sem peciacuteolo) Os capiacutetulos satildeo globosas com 2-25
miliacutemetros de diacircmetro em paniacuteculas frouxas O invoacutelucro (seacuterie das braacutecteas em
torno do capiacutetulo) eacute composto de braacutecteas glabras imbricadas As braacutecteas
exteriores satildeo verdes e linear-oblongas as braacutecteas internas satildeo brilhantes e
oval-arredondadas com uma margem larga fina seca Os capiacutetulos satildeo
disciformes e compostos de floretes filiformes exteriores (femininas) e de floretes
internos no disco (hermafroditas) Os floretes centrais numerosos do disco satildeo
esverdeados ou amarelados O fruto eacute um aquecircnio amarelo-marrom de parede
fina (pequeno seco) 06-08 miliacutemetros de tamanho com uma superfiacutecie
brilhante marcada com sulcos verticais e contendo uma uacutenica semente Os
aquecircnios natildeo tecircm nenhum papo e portanto natildeo satildeo dispersados pelo vento
como satildeo muitos outros da famiacutelia Asteraceae (Compositae)
(httpwwwkeworgplants-fungiArtemisia-annuahtm)
COMPOSICcedilAtildeO E USO A espeacutecie A annua eacute conhecida como ldquoQing Haordquo na China e eacute a fonte da
Medicina Tradicional Chinesa (MTC) que foi usada por mais de 2000 anos para
aliviar febres Na MTC prescreve-se frequentemente em combinaccedilatildeo com outros
ervas para tratar (aleacutem agraves febres) a icteriacutecia a dor de cabeccedila a vertigem e os
sangramentos nasais A pesquisa cientiacutefica da atividade anti-malaacuterica de A annua
comeccedilou no princiacutepio dos anos 70 em resposta agrave resistecircncia crescente agraves drogas
anti-malaacutericas estabelecidas por parte dos protozoaacuterios parasitas que causam a
malaacuteria (Protozoaacuterios do gecircnero Plasmodium ) O componente quiacutemico
artemisinina que ocorre naturalmente nas folhas da Aannua eacute um potente
agente anti-malaacuterico e pode matar o parasita mais agressivo o Plasmodium
falciparum (eacute seletivamente toacutexico ao estaacutegio assexual de eritrocito dos parasitas)
A artemisinina extraiacuteda de Aannua tornou-se extremamente importante em tratar
a malaacuteria desde que a resistecircncia do parasita a muitos outros antimalaacutericos se
tornou difundida (httpwwwkeworgplants-fungiArtemisia-annuahtm)
4
A planta A annua (Asteraceae) eacute listada na medicina chinesa como um
remeacutedio para vaacuterias febres incluindo a malaacuteria e contem um bem estabelecido
composto antimalaacuterico a artemisinina Neste estudo um hiacutebrido de A annua foi
cultivado com sucesso na Aacutefrica Central As partes aeacutereas da planta continham
063 - 070 de artemisinina por massa seca e aproximadamente 40 desta
artemisinina poderia ser extraiacuteda por meacutetodos simples da preparaccedilatildeo do chaacute
Cinco pacientes da malaacuteria que foram tratados com A annua mostraram um
desaparecimento raacutepido do parasita dentro de 2-4 dias Uma experimentaccedilatildeo
adicional com os 48 pacientes de malaacuteria mostrou um desaparecimento do
parasita em 44 pacientes (92) dentro de 4 dias Ambas as experimentaccedilotildees
mostraram uma melhoria marcada dos sintomas Estes resultados justificam
pesquisas adicionais do efeito antimalaacuterico de preparaccedilotildees de A annua
(MUELLER et al 2000)
Em fases de crescimento e desenvolvimento diferentes foi pesquisada a
variaccedilatildeo na quantidade e na qualidade do oacuteleo essencial de A annua incluindo
preacute- floraccedilatildeo floraccedilatildeo e poacutes - floraccedilatildeo Os oacuteleos foram obtidos por hidrodestilaccedilatildeo
das amostras secas ao ar Os rendimentos dos oacuteleos ( pp) nas diferentes
fases foram da ordem de preacute- floraccedilatildeo (097) floraccedilatildeo (1 23) e poacutes- floraccedilatildeo
(087) Os oacuteleos foram analisados por espectrometria de massa e cromatografia
em fase gasosa No total 32 35 e 33 constituintes foram identificados e
quantificados no oacuteleo de preacute - floraccedilatildeo floraccedilatildeo e poacutes - floraccedilatildeo representando
9767 92 e 92 4 dos oacuteleos respectivamente Cacircnfora 18-cineol canfeno
spatulenol alfandashpineno e artemiacutesia-cetona foram os principais componentes em
todas as amostras Monoterpenos eram o principal grupo de compostos em preacute-
floraccedilatildeo (6996) floraccedilatildeo (7244) e poacutes- floraccedilatildeo (7096)
(MOHAMMADREZA 2008)
A comparaccedilatildeo do perfil de cromatografia de gaacutes do oacuteleo essencial da A
annua produzido no Brasil com aqueles de outras origens revelou a variaccedilatildeo
significativa de seus constituintes O comportamento sazonal do iacutendice do
artemisinina 13 contra a produccedilatildeo de oacuteleo essencial foi observado durante um
periacuteodo da colheita A viabilidade econocircmica de diversos metodologias de
purificaccedilatildeo para a produccedilatildeo da artemisinina foi testada Foi produzido o composto
anti-malaacuterico 13 a um custo total de US$ 115 por grama (FOGLIO 1996)
5
ARTEMISININA
Artemisinina eacute uma lactona sesquiterpecircnica com uma ponte endoperoacutexido
e foi produzida semi-sinteticamente como uma droga antimalaacuterica A eficaacutecia do
chaacute feito de A annua no tratamento da malaacuteria eacute contencioso De acordo com
alguns autores a artemesinina natildeo eacute soluacutevel em aacutegua e as concentraccedilotildees nestas
infusotildees satildeo consideradas insuficientes para tratar a malaacuteria (MUELER et al
2004 RATH et al 2004 JANSEN 2006)
Em 2004 o ministro da sauacutede da Etioacutepia mudou a droga antimalaacuterica de
primeira linha da Etioacutepia de sulfadoxinaprimetamina (Fansidar) que tem uma
taxa de falha em meacutedia de 36 no tratamento para a artemetherlumefantrine
(Coartem) uma terapia de droga que conteacutem a artemisinina que eacute 100 eficaz
quando usado corretamente apesar de uma relativa falta mundial do produto do
derivado de A annua (MALARIA UPDATE 20052013)
A malaacuteria eacute causada primeiramente pelo Plasmodium falciparum que
invade as hemaacutecias e conteacutem heme-grupos ricos em ferro (na forma do
hemozoina) (POSNER amp OrsquoNEIL 2004)
O mecanismo de accedilatildeo proposto da artemisinina contra a malaacuteria envolve a
clivagem de pontes de endoperoacutexido pelo ferro produzindo os radicais livres
(ferro-oxo hipervalente espeacutecies epoacutexidos aldeiacutedos e compostos do dicarbonil)
que danificam as macromoleacuteculas bioloacutegicas causando estresse oxidativo nas
ceacutelulas do parasita (CUMMING 1997)
Com a possibilidade de isolarem maiores quantidades de artemisinina
(quinghaosu) plantas de A annua foram cultivadas por Liersch et al (1986) e
analisadas em estaacutegios diferentes de desenvolvimento O iacutendice mais elevado de
artemisinina foi encontrado imediatamente antes do florescimento Era tambeacutem
possiacutevel correlacionar o desenvolvimento das plantas com o iacutendice maacuteximo do
artemisinina As plantas de A annua cultivadas de vaacuterias outras fontes tambeacutem
foram examinadas para o iacutendice de artemisinina De acordo com os resultados
obtidos nenhuma dessas plantas contiveram quantidades suficientes do
composto (artemisinina) para justificar isolamento em uma escala teacutecnica Aleacutem
disso outras espeacutecies de Artemisia foram testadas e foi encontrada artemisinina
em somente uma outra espeacutecie Para aumentar a quantidade de artemisinina
durante o periacuteodo do crescimento da planta foram testados dois reguladores
6
hormonais de crescimento em A annua genoacutetipo 811 Os resultados mostraram
que o chlormequat podia aumentar o teor do composto(artemisinina) em 30 em
relaccedilatildeo agraves plantas natildeo tratadas Foram encontrados tambeacutem alguns discretos
efeitos dos reguladores de crescimento na morfologia dos trichomas glandulares
Para finalidades de produccedilatildeo plantas com um iacutendice elevado de
artemisinina satildeo requeridas Woerdenbag et al (1994) acompanharam o
desenvolvimento do conteuacutedo de artemisinina e dos sesquiterpenes
biosinteticamente relacionados aacutecido artemisiacutenico arteannuina B e artemisiteno
em plantas de A annua durante um periacuteodo da vegetaccedilatildeo no Vietnam onde esta
espeacutecie eacute indiacutegena Aleacutem disso o iacutendice do oacuteleo essencial e sua composiccedilatildeo
foram estudados As amostras das folhas gemas as flores ou as flores de poacutes-
florescimento e frutos foram analisados nos diferentes estaacutegios vegetativo (5 6 e
8 meses de idade) na formaccedilatildeo maciccedila das gemas (9 meses) no pleno
florescimento (10 meses) e poacutes-florescimento (10frac12 meses) O iacutendice mais
elevado de artemisinina (086 da massa seca) estava nas folhas de plantas com
5 meses de idade Neste estaacutegio o rendimento mais elevado da folha tambeacutem foi
encontrado Subsequentemente o iacutendice de artemisinina caiu gradualmente Na
idade de 5 meses os maiores conteuacutedos de aacutecido artemisinico e arteannuina-B
016 e 008 da massa seca respectivamente foram tambeacutem encontrados O
artemisiteno estava presente em todos os estaacutegios do desenvolvimento variando
de 0002 a 009 da massa seca Com 19 volumemassa o iacutendice do oacuteleo
essencial (OE) foi maacuteximo imediatamente antes do florescimento e foi composto
de 55 de monoterpenos e 45 de sesquiterpenes Em todos os outros estaacutegios
(04 ndash 10 volumemassa do oacuteleo essencial) esta relaccedilatildeo foi de 30 70 Os
principais componentes do OE foram cacircnfora e germacreno-D
Observaccedilotildees mostraram que o rendimento da artemisinina esteve
correlacionado positivamente com o rendimento da folha e o nuacutemero das
colheitas Os rendimentos elevados de artemisinina ocorreram quando a colheita
produziu folhas artemisinina-ricas acompanhadas pelo menor crescimento
possiacutevel do tecido da haste alcanccedilado em colheitas muacuteltiplas em plantas
crescidas a tempo integral e plantadas mais cedo As colheitas crescidas por ge30
semanas e colhidas trecircs a quatro vezes deram os rendimentos meacutedios de
441plusmn142 e de 742plusmn156 respectivamente Muito mais altos do que o rendimento
maacuteximo de 25 quilogramas haminus1 relatado para a A annua em estudos anteriores
7
Concluiu-se que para obter artemisinina em altos niacuteveis A annua deve ser
colhida quatro vezes (KUMAR et al 2004)
ASPECTOS AGRONOcircMICOS
Propagaccedilatildeo
Em meacutedia 1000 sementes pesam 003 g e natildeo diminuem sua viabilidade
ao secar Satildeo acessiacuteveis ao armazenamento agrave frio de longo prazo Germinam de
janeiro a marccedilo A germinaccedilatildeo de 100 foi obtida em um meio de germinaccedilatildeo de
aacutegar a 1 em uma temperatura de 15degC sob um fotoperiacuteodo 816 horas claro-
escuro (MOHAMMADREZA 2008)
A Artemisia annua eacute plantada extensamente e comercialmente
principalmente como uma fonte de oacuteleos essenciais e tambeacutem de artemisinina
sobretudo em regiotildees da China e VietnamNessas regiotildees o ciclo da planta em
condiccedilotildees naturais chega a 10 meses Na Europa e na Ameacuterica as plantas
crescem mais rapidamente terminando seu ciclo de vida em apenas seis meses
mesmo no campo Cresce melhor em talhotildees abertos e ensolarados em solos
arenosos e aluviais feacuterteis que sejam neutros a ligeiramente aacutecidos e que tenham
uma boa retenccedilatildeo de umidade e natildeo tolera a seca ou o encharcamento As
sementes germinam de janeiro a marccedilo e a frutificaccedilatildeo (colheita das sementes)
ocorre entre outubro e novembro (httpwwwkeworgplants-fungiArtemisia-
annuahtm)
Conceiccedilatildeo et al (2013) testaram a germinaccedilatildeo da semente de A annua
cultivar Silves sob duas condiccedilotildees ambientais a fim de fornecer informaccedilotildees
sobre seu cultivo Na primeira condiccedilatildeo realizou-se o teste padratildeo com 4 lotes de
100g de sementes semeadas em gerbox sobre papel mata-borratildeo e dispostas
em germinador agrave temperatura de 25-30deg C expostas agrave luz durante 8 horas diaacuterias
e umedecidas quando necessaacuterio ateacute sua emergecircncia Na segunda etapa foi
realizado o mesmo procedimento anterior poreacutem as sementes permaneceram no
germinador em ausecircncia de luz sob as mesmas condiccedilotildees de temperatura e
umidade Segundo anaacutelise estatiacutestica em Tukey a 5 aplicada aqui sobre as
meacutedias de cada lote de 100g sementes os tratamentos obtiveram diferenccedilas
significativas sendo que as sementes expostas agrave luz obtiveram maiores valores
8
de germinaccedilatildeo Em ambiente com total ausecircncia de luz as sementes obtiveram
baixiacutessima taxa de germinaccedilatildeo no mesmo periacuteodo que as sementes em ambiente
iluminado Esse fato indica que a semente de A annua eacute fotoblaacutestica positiva e
assim necessita de um miacutenimo de luz para que ocorra sua germinaccedilatildeo por esse
motivo natildeo podem ser enterradas e sua semeadura deve ser apenas a lanccedilo ou
em superfiacutecie sem cobertura com terra Esta caracteriacutestica eacute comum agrave muitas
espeacutecies que produzem sementes miuacutedas
Adubaccedilatildeo
Em 2004 e 2005 um estudo foi realizado com o objetivo de determinar o
rendimento os componentes do rendimento e o iacutendice da artemisinina de A
annua cultivada sob quatro aplicaccedilotildees do nitrogecircnio (0 40 80 e 120 quilogramas
haminus1) na regiatildeo de Ccedilukurova na Turquia As experimentaccedilotildees de campo foram
conduzidas na universidade de Ccedilukurova no departamento de agricultura da
faculdade Nesse estudo a altura da planta o nuacutemero de ramos o rendimento
fresco e seco da erva o rendimento fresco e seco da folha o iacutendice do oacuteleo
essencial e o iacutendice da artemisinina (por cromatografia liacutequida pelo HPLC de
desempenho elevado) foram examinados Pela anaacutelise de variaccedilatildeo as doses de
nitrogecircnio natildeo tiveram nenhum efeito estatiacutestico nas caracteriacutesticas investigadas
agrave exceccedilatildeo do iacutendice de artemisinina Esse iacutendice nas folhas secas foi afetado
significativamente pelas aplicaccedilotildees do nitrogecircnio que variaram de 632 a 2750
mg 100 gminus1 (OZGUVEN et al 2008)
Outros aspectos
Uma pesquisa desenvolvida em MEDIPLANT (Suiacuteccedila) e no CPQBA-
UNICAPM (Brasil) envolveu a seleccedilatildeo e produccedilatildeo de genoacutetipos ricos em
artemisinina apresentando biomassa elevada seguido por uma segunda seleccedilatildeo
para a adaptaccedilatildeo agraves circunstacircncias climaacuteticas do Brasil Com hibridizaccedilatildeo
controlada entre genoacutetipos selecionados da China e do Vietnam o ganho
geneacutetico foi obtido nos termos do iacutendice da artemisinina e da uniformidade da
populaccedilatildeo Com o aumento do iacutendice de biomassa e da artemisinina (estimado
pela monitoraccedilatildeo analiacutetica) era possiacutevel aumentar a produccedilatildeo de artemisinina de
9
5 Kgha (populaccedilatildeo baacutesica) para aproximadamente 25 Kgha (populaccedilatildeo
geneticamente produzida) No cultivo realizado no Brasil em 3 de 7 linhas
hiacutebridas 239 de x 1V Ch x Viet55 e 1V x 243 produziram respectivamente
2543 2305 e 2127 quilogramas de artemisininahacorte com as 2 colheitas
possiacuteveis por o ano O cultivo destas linhas hiacutebridas novas no Brasil eacute uma
teacutecnica praticaacutevel e altamente competitiva devido agrave produccedilatildeo obtida
(MAGALHAtildeES et al 1997)
Foi pesquisado o efeito do aumento da irradiacircncia (15 a 100 da luz solar
cheia L15 a L100) sobre o crescimento a taxa fotossinteacutetica liacutequida maacutexima
(Pmax) a compensaccedilatildeo (CI) a saturaccedilatildeo de irradiacircncia de A annua e a produccedilatildeo
de artemisinina Na luz solar plena A annua apresentou uma capacidade elevada
de fotossiacutentese com irradiacircncia baixa manteve um Pmax relativamente elevado
com um CI baixo O crescimento da altura e do diacircmetro biomassa total e da
folha e iacutendice de artemisinina diminuiu com a diminuiccedilatildeo da irradiacircncia que pocircde
ser conectado com a fotossiacutentese mais baixa na irradiacircncia mais baixa em
relaccedilatildeo agrave irradiacircncia mais elevada As irradiacircncias mudaram a alocaccedilatildeo de
biomassa em A annua A relaccedilatildeo massa de folhamassa total da espeacutecie
aumentou com a diminuiccedilatildeo da irradiacircncia mas a relaccedilatildeo raizmassa total e
raizmassa da parte aeacuterea aumentaram geralmente com a irradiacircncia crescente
Assim A annua pode crescer na luz solar parcial e plena Entretanto o
rendimento elevado da biomassa e da artemisinina requerem o cultivo em um
habitat aberto com luz solar adequada (WANG et al 2008)
MATERIAIS E MEacuteTODOS
O ensaio foi conduzido na Estaccedilatildeo Experimental de Biologia da
Universidade de Brasiacutelia (EEB ndash UnB) em casa-de-vegetaccedilatildeo do tipo
ldquoglasshouserdquo no periacuteodo de 19 de abril de 2013 a 6 de dezembro de 2013
(primeiro e segundo semestres respectivamente) Durante o ensaio a casa-de-
vegetaccedilatildeo apresentou uma temperatura meacutedia de aproximadamente 250deg C com
meacutedia das miacutenimas de 1325degC e das maacuteximas de 3675degC aferidas com
termocircmetro convencional de maacutexima e miacutenima O iacutendice de radiaccedilatildeo luminosa
esteve em trono de 50 determinado por fotocircmetro automaacutetico modelo Asahi-
Pentax SP-500
10
A partida de sementes de Aannua foi doada pelo pesquisador Pedro
Melillo Magalhatildees oriundas do CPQBA ndash UNICAMP e produzidas em campo da
proacutepria estaccedilatildeo e utilizadas para a semeadura em sementeiras tipo caixa
contendo a mistura EEB (Estaccedilatildeo Experimental de Biologia) com a seguinte
composiccedilatildeo Latossolo vermelho de cerrado areia vermiculita e composto
orgacircnico na proporccedilatildeo 3311 respectivamente mais a formulaccedilatildeo 4-14-8 na
dose de 100g para 40L da mistura Apoacutes 42 dias da semeadura foram
selecionadas 20 mudas que estavam no ponto de transplante (meacutedia de 15 cm
de altura) Dessa forma foram transplantadas para vasos com capacidade para
25L preenchidos com a mistura EEB
Apoacutes o transplante a altura da parte aeacuterea de todas as plantas foi aferida
semanalmente com o uso de uma trena com o objetivo de desenhar-se a curva
de crescimento As mediccedilotildees tiveram iniacutecio uma semana apoacutes o transplante no
dia 14 de maio
No dia 26 de julho de 201349 dias apoacutes o transplante as plantas foram
transferidas dos vasos de 25L para vasos com maior capacidade (325L) para
favorecer o seu crescimento e desenvolvimento e no dia 17 de setembro102 dias
apoacutes o transplante foi feita uma suplementaccedilatildeo de terra para as 20 plantas com o
mesmo objetivo mediante a colocaccedilatildeo por baixo de um outro vaso de mesmo
tamanho contendo metade de seu volume em Substrato EEB Isso permitiu que
as raiacutezes crescessem no volume adicional de mistura atraveacutes dos furos de
drenagem do vaso original
O controle de plantas daninhas foi feito manualmente e o controle
fitossanitaacuterio atraveacutes de acompanhamento e sucessivas observaccedilotildees Ao fim do
ensaio foi observada uma pequena infestaccedilatildeo com cochonilhas As cochonilhas
foram identificadas por Pseudococcus citri Risso ndash mais conhecida por
ldquocochonilha algodatildeordquo Foi parcialmente controlada em curto prazo com uma
pulverizaccedilatildeo manual de soluccedilatildeo de detergente (10 ml 1 litro de aacutegua)
Ao fim do ensaio dia 18 de outubro foram obtidas as massas fresca e
seca das plantas bem como os coeficientes de variaccedilatildeo dos dados
11
RESUTADOS E DISCUSSAtildeO
Os resultados do presente ensaio encontram-se representados nas Figuras
4 e 5 as quais representam respectivamente a curva de crescimento de Aannua
em vinte semana (s) em casa-de-vegetaccedilatildeo e a evoluccedilatildeo da taxa meacutedia diaacuteria de
crescimento
Observando-se a Figura 2 que apresenta a evoluccedilatildeo da taxa meacutedia de
crescimento verificou-se que entre a quinta e a setima semanas a taxa meacutedia
diaacuteria de crescimento cresceu de 08 cm ao dia para em torno de 20 cm por dia
tendo havido um decrescimo e um estabilidade entre a oitava e a deacutecima segunda
semanas quando entatildeo ocorreu o segundo pico passando a taxa meacutedia diaacuteria de
crescimento de 12 cm para 18 cm seguindo-se um decrescimo ateacute 05 cmdia
nas deacutecima sexta e deacutecima seacutetimas semanas quando entatildeo houve o terceiro
pico na deacutecima oitava semana atingindo 08cmdia e novamente decaindo ateacute 04
cmdia na vigeacutesima semana
0
50
100
150
1s 3s 5s 7s 9s 11s 13s 15s 17s 19s
Alt
ura
em
cm
Crescimento meacutedio de Artemisia annua em vasos em casa de vegataccedilatildeo durante 20 semanas
(s)
Figura 1 ndash Crescimento meacutedio de A annua em vasos em casa-de-vegetaccedilatildeo durante 20 semanas (s) ndash Observa-se que a altura das plantas aumentou
notavelmente a partir da quinta semana apoacutes o transplante correspondendo ao primeiro pico de crescimento
12
Os picos de crescimento de A annua submetida ao cultivo em vasos em
casa-de-vegetaccedilatildeo podem ser explicados pelas interferecircncias do pesquisador que
visava maximizar o desenvolvimento das plantas O primeiro pico pode ser
atribuiacutedo ao padratildeo de crescimento da planta Por ocasiatildeo da primeira troca de
vasos quando a planta ganhou 2145 de volume de substrato para explorar
teria havido o segundo pico por volta da deacutecima segunda semana O terceiro pico
se deu em consequecircncia da segunda suplementaccedilatildeo de substrato ocorrida por
volta da deacutecima seacutetima semana
O aproveitamento da segunda suplementaccedilatildeo foi efetivo tendo as plantas
explorado o volume de substrato adicional em sua totalidade ocupando-o por
inteiro o volume (Figura 6)
Eacute consenso entre pesquisadores que as plantas crescidas em vasos nunca
alcanccedilam seu potencial maior conforme imagens de suas raiacutezes mostram Uma
teacutecnica meacutedica da imagem chamada a imagem de ressonacircncia magneacutetico (MRI)
foi usada por investigadores para capturar instantacircneos da raiz da planta no vaso
As figuras obtidas revelam que as raiacutezes ldquodetectam o tamanho do vasordquo e emitem
um sinal que resulta na restriccedilatildeo o crescimento da planta (POORTER et al 2012)
Poorter et al (2012) esclarecem que a maioria das experiecircncias em
biologia de plantas usa plantas crescidas em algum tipo de recipiente ou vaso
Uma meta-anaacutelise em 65 estudos que analisaram o efeito do tamanho do vaso no
0
05
1
15
2
25
1s 3s 5s 7s 9s 11s 13s 15s 17s 19s
Ce
ntiacute
met
ros
po
r d
ia
Evoluccedilatildeo da taxa meacutedia diaacuteria de crescimento de Artemisia annua em casa de vegetaccedilatildeo por
20 semanas
Figura 2 ndash Evoluccedilatildeo da taxa diaacuteria de cresimento de A annua em casa de vegetaccedilatildeo por 20 semanas (s)
13
crescimento e em variaacuteveis afins foi conduzida e verificou que em meacutedia dobrar o
tamanho do vaso aumentou a produccedilatildeo da biomassa da planta em 43 Uma
anaacutelise adicional de efeitos do tamanho do vaso nos componentes afins do
crescimento sugere que o crescimento reduzido em vasos menores eacute causado
principalmente por uma reduccedilatildeo na fotossiacutentese por aacuterea da folha da unidade
mais do que por mudanccedilas na morfologia da folha ou no alocamento de
biomassa O tamanho apropriado do vaso dependeraacute logicamente do tamanho
das plantas que crescem neles Baseado em vaacuterias linhas da evidecircncia noacutes
sugerimos que um tamanho apropriado do vaso eacute um no qual a biomassa da
planta natildeo exceda 1 g L-1 Na praacutetica atual da pesquisa 65 das experiecircncias
excedem essa referecircncia Noacutes sugerimos que os investigadores devam
considerar com cuidado o tamanho do vaso em suas experiecircncias porque os
vasos pequenos podem mudar resultados experimentais e sabotar a finalidade da
experiecircncia
No presente ensaio de vasos foi obtido uma massa seca da parte aeacuterea
meacutedia de 2995g com um coeficiente de variaccedilatildeo de 3001 com uma planta por
vaso com dois transplantes para ganho de volume de solo a ser explorado O
corte das plantas se deu com 80 dias apoacutes o transplante
Quiteacuterio (2006) tambeacutem em ensaio de vasos obteve a meacutedia 25g de massa
seca de A annua em ensaio de vasos com duas plantas onde a colheita foi feita
75 dias apoacutes a semeadura no preacute-florescimento Os dois resultados apresentam
coerecircncia entre si
O ataque de cochonilhas observado era esperado como um reflexo natural
do estresse das plantas que satildeo submetidas ao cultivo em vaso em casa-de-
vegetaccedilatildeo
14
CONCLUSAtildeO
Nas condiccedilotildees do presente ensaio concluiu-se que o cultivo de Artemisia annua
em vasos e em casa-de-vegetaccedilatildeo eacute viaacutevel e pode ser notavelmente expressivo
com porte superior a 15m de altura e massa seca da parte aeacuterea meacutedia em torno
de 30g
Numa etapa posterior visualizam-se os ensaios objetivando a geraccedilatildeo de uma
tecnologia de produccedilatildeo tendo como alvo a produtividade em artesinina-A que eacute o
componente ativo contra malaacuteria
15
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17
DOCUMENTAacuteRIO FOTOGRAacuteFICO
Foto 1 ndash Mudas na sementeira prontas para transplante - Foto da autora Nayara Carvalho
Foto 2 ndash Mudas de Artemisia annua no dia do transplante ndash Foto da autora Nayara
Carvalho
18
Foto 3 ndash Aspecto geral do ensaio ndash Foto da autora Nayara Carvalho
Foto 4 ndash Suplementaccedilatildeo de substrato ndash Foto do orientador Jean Kleber
19
Foto 5 ndash Aproveitamento pela planta di suplemento de substrato ndash Foto do orientador Jean Kleber
Foto 6 ndash A planta mais alta ao final do ensaio ndash Foto do orientador Jean Kleber
20
Foto 8 ndash Ataque de colchonilhas em A annua ndash Foto da autora Nayara Carvalho
Foto 7 ndash A planta mais baixa ao final do ensaio
SUMAacuteRIO
LISTA DE FIGURAS vii
RESUMO viii
INTRODUCcedilAtildeO 1
OBJETIVO 2
REVISAtildeO BIBLIOGRAacuteFICA 2
Descriccedilatildeo da planta 2
COMPOSICcedilAtildeO E USO 3
ARTEMISININA 5
ASPECTOS AGRONOcircMICOS 7
Propagaccedilatildeo 7
Adubaccedilatildeo 8
Outros aspectos 8
MATERIAIS E MEacuteTODOS 9
RESUTADOS E DISCUSSAtildeO 11
CONCLUSAtildeO 14
REFEREcircNCIAS BIBLIOGRAacuteFICAS 15
DOCUMENTAacuteRIO FOTOGRAacuteFICO 17
vii
LISTA DE FIGURAS
1 Figura 1 ndash Crescimento meacutedio de Artemisia annua em vasos em
casa-de-vegetaccedilatildeo durante vinte semanas ndash paacuteg 25
2 Figura 2 ndash Evoluccedilatildeo da taxa diaacuteria de crescimento de Artemisia annua
em casa de vegetaccedilatildeo por 20 semanas ndash paacuteg 25
viii
RESUMO
A Artemisia annua L (Asteraceae) eacute originaacuteria de regiotildees de clima temperado da
Aacutesia e tem sido utilizada pela medicina tradicional chinesa haacute vaacuterios seacuteculos no
tratamento de malaacuteria A espeacutecie reveste-se portanto de indiscutiacutevel importacircncia
em paiacuteses tropicais onde a presenccedila da malaacuteria ainda preocupa as autoridades
da aacuterea da sauacutede o que eacute o caso da Regiatildeo Centro-Oeste do Brasil O objetivo
do presente trabalho foi estudar o crescimento e o desenvolvimento de A annua
mediante cultivo em vasos em casa de vegetaccedilatildeo As sementes de Aannua
foram produzidas em campo da proacutepria estaccedilatildeo e utilizadas para a semeadura em
sementeiras tipo caixa contendo a mistura EEB (Estaccedilatildeo Experimental de Biologia
da UnB ndash Brasiacutelia- DF) mais a formulaccedilatildeo 4-14-8 na dose de 100g para 40L da
mistura Apoacutes 42 dias da semeadura foram selecionadas 20 mudas que estavam
no ponto de transplante (meacutedia de 15 cm de altura) Dessa forma foram
transplantadas para vasos com capacidade para 25L preenchidos com a mistura
EEB Apoacutes nove semana de mensuraccedilotildees de altura as plantas foram pesadas
para obtenccedilatildeo das massas fresca e seca da parte aeacuterea Nas condiccedilotildees do
presente ensaio concluiu-se que o cultivo de Artemisia annua em vasos e em
casa-de-vegetaccedilatildeo eacute viaacutevel e pode ser notavelmente expressivo com porte
superior a 15m de altura e massa seca da parte aeacuterea com meacutedia de 30g
1
INTRODUCcedilAtildeO
A Artemisia annua L (Asteraceae) eacute originaacuteria de regiotildees de clima
temperado da Aacutesia e tem sido utilizada pela medicina tradicional chinesa haacute vaacuterios
seacuteculos no tratamento de malaacuteria Pesquisadores chineses estudaram mais de 30
espeacutecies do gecircnero Artemisia para confirmar a atividade antimalaacuterica das
mesmas Somente A annua e A apiacea Hance foram eficazes em combater
o Plasmodium vivax e o Plasmodium falciparum agentes etimoloacutegicos da malaacuteria
(DIAS 1997) Entre os metaboacutelitos secundaacuterios isolados das diversas espeacutecies do
gecircnero Artemisia os mais caracteriacutesticos satildeo as lactonas sesquiterpecircnicas
(RODRIGUES et al 2006)
As lactonas sesquiterpecircnicas pertencem a um grande grupo de produtos
naturais encontradas principalmente em plantas de vaacuterios gecircneros da famiacutelia
Asteraceae (SANTOS 2009)
A espeacutecie reveste-se portanto de indiscutiacutevel importacircncia em paiacuteses
tropicais onde a presenccedila da malaacuteria ainda preocupa as autoridades da aacuterea da
sauacutede o que eacute o caso da Regiatildeo Centro-Oeste do Brasil
Mediante solicitaccedilatildeo ao pesquisador Pedro Melillo Magalhatildees do CPQBA
(Centro Pluridisciplinar de pesquisas quiacutemicas bioloacutegicas e agriacutecolas ndash vinculado
agrave Unicamp ndash Universidade Estadual de Campinas) foi obtida uma pequena
partida de sementes de A annua com a qual obtivemos plantas adultas agrave campo
que produziram sementes feacuterteis possibilitando por conseguinte a realizaccedilatildeo de
ensaios agronocircmicos na Estaccedilatildeo Experimental de Biologia da Universidade de
Brasiacutelia (EEB ndash UnB)
O estudo do comportamento desta espeacutecie em nossa regiatildeo reveste-se de
consideraacutevel importacircncia uma vez que eacute fato conhecido de pesquisas da aacuterea que
o perfil de aromaacuteticos e outros componentes quiacutemicos varia bastante conforme a
condiccedilotildees ambientais em que as plantas satildeo cultivadas
Desta forma satildeo necessaacuterios ensaios agronocircmicos precedentes aos
ensaios quiacutemicos para que haja uma convivecircncia inicial com a espeacutecie visando o
conhecimento de suas possibilidades quanto agrave produccedilatildeo de mateacuteria prima
2
OBJETIVO
O objetivo do presente trabalho foi estudar o crescimento e o
desenvolvimento de A annua mediante cultivo em vasos em casa de vegetaccedilatildeo
REVISAtildeO BIBLIOGRAacuteFICA
Descriccedilatildeo da planta
Artemisia annua L (Syn Artemisia chamomilla C Winkl) Asteraceae
Nome vulgar Sweet wormwood eacute uma erva doce aromaacutetica com a flores
pequenas amarelas em capiacutetulos A annua conteacutem o componente quiacutemico
artemisinina em suas partes aeacutereas que satildeo usadas em drogas anti-malaacutericas
Outros nomes satildeo Sweet annie Wormwood annual (inglecircs) qing hao (chinecircs
artemiacutesia verde azulada) Difundida e naturalizada extensamente eacute
frequentemente abundante natildeo sendo do interesse do conservacionismo pois
ainda natildeo foi avaliada de acordo com criteacuterios da lista vermelha do IUCN ndash
International Union for Conservation of Nature Tem como habitat colinas bordas
das florestas e terrenos baldios Trata-se de uma planta medicinal antimalaacuterica
importante cujo oacuteleo essencial eacute usado tambeacutem em cosmeacuteticos A planta eacute
cultivada como um ornamental na Indoneacutesia (httpwwwkeworgplants-
fungiArtemisia-annuahtm)
A annua eacute nativa da Euraacutesia do sudeste da Europa (incluindo Albacircnia
Bulgaacuteria Montenegro Romecircnia Ruacutessia Servia Turquia) ao Vietnam e norte da
India Naturalizado em muitos paiacuteses (incluindo Argentina Aacuteustria a repuacuteblica
Tcheca Franccedila Alemanha Hungria Itaacutelia Polocircnia Eslovaacutequia Espanha Suiacuteccedila e
Estados Unidos) Foi registrada como de crescimento ruderal no Reino Unido
levada por paacutessaros ou nas latildes tendo sido cultivada experimentalmente tatildeo ao
norte como na Finlacircndia A espeacutecie e foi usada na China para tratar febres por
mais de 2000 anos O gecircnero Artemisia pertence agrave famiacutelia Asteraceae
(Compositae) que inclui plantas bem conhecidas usadas na medicina
perfumaria alimentaccedilatildeo e na induacutestria da bebida tal como a A dracunculus
(estragatildeo) A absinthium (absinto) e A vulgaris (artemiacutesia)
(httpwwwkeworgplants-fungiArtemisia-annuahtm )
3
A descriccedilatildeo botacircnica menciona que A annua eacute uma planta anual de haste
uacutenica glabra doce-aromaacutetica que cresce ateacute 1 m de altura (2 m como ruderal) A
haste eacute ereta nervada e marrom ou violeta-marrom As folhas basais satildeo 3-
pinatissectas (divididas trecircs vezes em foliacuteolos profundamente cortados) 3-5 cm
de comprimento e 2-4 cm de largura as folhas superiores satildeo 1-2-pinatissectas
menores e seacutesseis (sem peciacuteolo) Os capiacutetulos satildeo globosas com 2-25
miliacutemetros de diacircmetro em paniacuteculas frouxas O invoacutelucro (seacuterie das braacutecteas em
torno do capiacutetulo) eacute composto de braacutecteas glabras imbricadas As braacutecteas
exteriores satildeo verdes e linear-oblongas as braacutecteas internas satildeo brilhantes e
oval-arredondadas com uma margem larga fina seca Os capiacutetulos satildeo
disciformes e compostos de floretes filiformes exteriores (femininas) e de floretes
internos no disco (hermafroditas) Os floretes centrais numerosos do disco satildeo
esverdeados ou amarelados O fruto eacute um aquecircnio amarelo-marrom de parede
fina (pequeno seco) 06-08 miliacutemetros de tamanho com uma superfiacutecie
brilhante marcada com sulcos verticais e contendo uma uacutenica semente Os
aquecircnios natildeo tecircm nenhum papo e portanto natildeo satildeo dispersados pelo vento
como satildeo muitos outros da famiacutelia Asteraceae (Compositae)
(httpwwwkeworgplants-fungiArtemisia-annuahtm)
COMPOSICcedilAtildeO E USO A espeacutecie A annua eacute conhecida como ldquoQing Haordquo na China e eacute a fonte da
Medicina Tradicional Chinesa (MTC) que foi usada por mais de 2000 anos para
aliviar febres Na MTC prescreve-se frequentemente em combinaccedilatildeo com outros
ervas para tratar (aleacutem agraves febres) a icteriacutecia a dor de cabeccedila a vertigem e os
sangramentos nasais A pesquisa cientiacutefica da atividade anti-malaacuterica de A annua
comeccedilou no princiacutepio dos anos 70 em resposta agrave resistecircncia crescente agraves drogas
anti-malaacutericas estabelecidas por parte dos protozoaacuterios parasitas que causam a
malaacuteria (Protozoaacuterios do gecircnero Plasmodium ) O componente quiacutemico
artemisinina que ocorre naturalmente nas folhas da Aannua eacute um potente
agente anti-malaacuterico e pode matar o parasita mais agressivo o Plasmodium
falciparum (eacute seletivamente toacutexico ao estaacutegio assexual de eritrocito dos parasitas)
A artemisinina extraiacuteda de Aannua tornou-se extremamente importante em tratar
a malaacuteria desde que a resistecircncia do parasita a muitos outros antimalaacutericos se
tornou difundida (httpwwwkeworgplants-fungiArtemisia-annuahtm)
4
A planta A annua (Asteraceae) eacute listada na medicina chinesa como um
remeacutedio para vaacuterias febres incluindo a malaacuteria e contem um bem estabelecido
composto antimalaacuterico a artemisinina Neste estudo um hiacutebrido de A annua foi
cultivado com sucesso na Aacutefrica Central As partes aeacutereas da planta continham
063 - 070 de artemisinina por massa seca e aproximadamente 40 desta
artemisinina poderia ser extraiacuteda por meacutetodos simples da preparaccedilatildeo do chaacute
Cinco pacientes da malaacuteria que foram tratados com A annua mostraram um
desaparecimento raacutepido do parasita dentro de 2-4 dias Uma experimentaccedilatildeo
adicional com os 48 pacientes de malaacuteria mostrou um desaparecimento do
parasita em 44 pacientes (92) dentro de 4 dias Ambas as experimentaccedilotildees
mostraram uma melhoria marcada dos sintomas Estes resultados justificam
pesquisas adicionais do efeito antimalaacuterico de preparaccedilotildees de A annua
(MUELLER et al 2000)
Em fases de crescimento e desenvolvimento diferentes foi pesquisada a
variaccedilatildeo na quantidade e na qualidade do oacuteleo essencial de A annua incluindo
preacute- floraccedilatildeo floraccedilatildeo e poacutes - floraccedilatildeo Os oacuteleos foram obtidos por hidrodestilaccedilatildeo
das amostras secas ao ar Os rendimentos dos oacuteleos ( pp) nas diferentes
fases foram da ordem de preacute- floraccedilatildeo (097) floraccedilatildeo (1 23) e poacutes- floraccedilatildeo
(087) Os oacuteleos foram analisados por espectrometria de massa e cromatografia
em fase gasosa No total 32 35 e 33 constituintes foram identificados e
quantificados no oacuteleo de preacute - floraccedilatildeo floraccedilatildeo e poacutes - floraccedilatildeo representando
9767 92 e 92 4 dos oacuteleos respectivamente Cacircnfora 18-cineol canfeno
spatulenol alfandashpineno e artemiacutesia-cetona foram os principais componentes em
todas as amostras Monoterpenos eram o principal grupo de compostos em preacute-
floraccedilatildeo (6996) floraccedilatildeo (7244) e poacutes- floraccedilatildeo (7096)
(MOHAMMADREZA 2008)
A comparaccedilatildeo do perfil de cromatografia de gaacutes do oacuteleo essencial da A
annua produzido no Brasil com aqueles de outras origens revelou a variaccedilatildeo
significativa de seus constituintes O comportamento sazonal do iacutendice do
artemisinina 13 contra a produccedilatildeo de oacuteleo essencial foi observado durante um
periacuteodo da colheita A viabilidade econocircmica de diversos metodologias de
purificaccedilatildeo para a produccedilatildeo da artemisinina foi testada Foi produzido o composto
anti-malaacuterico 13 a um custo total de US$ 115 por grama (FOGLIO 1996)
5
ARTEMISININA
Artemisinina eacute uma lactona sesquiterpecircnica com uma ponte endoperoacutexido
e foi produzida semi-sinteticamente como uma droga antimalaacuterica A eficaacutecia do
chaacute feito de A annua no tratamento da malaacuteria eacute contencioso De acordo com
alguns autores a artemesinina natildeo eacute soluacutevel em aacutegua e as concentraccedilotildees nestas
infusotildees satildeo consideradas insuficientes para tratar a malaacuteria (MUELER et al
2004 RATH et al 2004 JANSEN 2006)
Em 2004 o ministro da sauacutede da Etioacutepia mudou a droga antimalaacuterica de
primeira linha da Etioacutepia de sulfadoxinaprimetamina (Fansidar) que tem uma
taxa de falha em meacutedia de 36 no tratamento para a artemetherlumefantrine
(Coartem) uma terapia de droga que conteacutem a artemisinina que eacute 100 eficaz
quando usado corretamente apesar de uma relativa falta mundial do produto do
derivado de A annua (MALARIA UPDATE 20052013)
A malaacuteria eacute causada primeiramente pelo Plasmodium falciparum que
invade as hemaacutecias e conteacutem heme-grupos ricos em ferro (na forma do
hemozoina) (POSNER amp OrsquoNEIL 2004)
O mecanismo de accedilatildeo proposto da artemisinina contra a malaacuteria envolve a
clivagem de pontes de endoperoacutexido pelo ferro produzindo os radicais livres
(ferro-oxo hipervalente espeacutecies epoacutexidos aldeiacutedos e compostos do dicarbonil)
que danificam as macromoleacuteculas bioloacutegicas causando estresse oxidativo nas
ceacutelulas do parasita (CUMMING 1997)
Com a possibilidade de isolarem maiores quantidades de artemisinina
(quinghaosu) plantas de A annua foram cultivadas por Liersch et al (1986) e
analisadas em estaacutegios diferentes de desenvolvimento O iacutendice mais elevado de
artemisinina foi encontrado imediatamente antes do florescimento Era tambeacutem
possiacutevel correlacionar o desenvolvimento das plantas com o iacutendice maacuteximo do
artemisinina As plantas de A annua cultivadas de vaacuterias outras fontes tambeacutem
foram examinadas para o iacutendice de artemisinina De acordo com os resultados
obtidos nenhuma dessas plantas contiveram quantidades suficientes do
composto (artemisinina) para justificar isolamento em uma escala teacutecnica Aleacutem
disso outras espeacutecies de Artemisia foram testadas e foi encontrada artemisinina
em somente uma outra espeacutecie Para aumentar a quantidade de artemisinina
durante o periacuteodo do crescimento da planta foram testados dois reguladores
6
hormonais de crescimento em A annua genoacutetipo 811 Os resultados mostraram
que o chlormequat podia aumentar o teor do composto(artemisinina) em 30 em
relaccedilatildeo agraves plantas natildeo tratadas Foram encontrados tambeacutem alguns discretos
efeitos dos reguladores de crescimento na morfologia dos trichomas glandulares
Para finalidades de produccedilatildeo plantas com um iacutendice elevado de
artemisinina satildeo requeridas Woerdenbag et al (1994) acompanharam o
desenvolvimento do conteuacutedo de artemisinina e dos sesquiterpenes
biosinteticamente relacionados aacutecido artemisiacutenico arteannuina B e artemisiteno
em plantas de A annua durante um periacuteodo da vegetaccedilatildeo no Vietnam onde esta
espeacutecie eacute indiacutegena Aleacutem disso o iacutendice do oacuteleo essencial e sua composiccedilatildeo
foram estudados As amostras das folhas gemas as flores ou as flores de poacutes-
florescimento e frutos foram analisados nos diferentes estaacutegios vegetativo (5 6 e
8 meses de idade) na formaccedilatildeo maciccedila das gemas (9 meses) no pleno
florescimento (10 meses) e poacutes-florescimento (10frac12 meses) O iacutendice mais
elevado de artemisinina (086 da massa seca) estava nas folhas de plantas com
5 meses de idade Neste estaacutegio o rendimento mais elevado da folha tambeacutem foi
encontrado Subsequentemente o iacutendice de artemisinina caiu gradualmente Na
idade de 5 meses os maiores conteuacutedos de aacutecido artemisinico e arteannuina-B
016 e 008 da massa seca respectivamente foram tambeacutem encontrados O
artemisiteno estava presente em todos os estaacutegios do desenvolvimento variando
de 0002 a 009 da massa seca Com 19 volumemassa o iacutendice do oacuteleo
essencial (OE) foi maacuteximo imediatamente antes do florescimento e foi composto
de 55 de monoterpenos e 45 de sesquiterpenes Em todos os outros estaacutegios
(04 ndash 10 volumemassa do oacuteleo essencial) esta relaccedilatildeo foi de 30 70 Os
principais componentes do OE foram cacircnfora e germacreno-D
Observaccedilotildees mostraram que o rendimento da artemisinina esteve
correlacionado positivamente com o rendimento da folha e o nuacutemero das
colheitas Os rendimentos elevados de artemisinina ocorreram quando a colheita
produziu folhas artemisinina-ricas acompanhadas pelo menor crescimento
possiacutevel do tecido da haste alcanccedilado em colheitas muacuteltiplas em plantas
crescidas a tempo integral e plantadas mais cedo As colheitas crescidas por ge30
semanas e colhidas trecircs a quatro vezes deram os rendimentos meacutedios de
441plusmn142 e de 742plusmn156 respectivamente Muito mais altos do que o rendimento
maacuteximo de 25 quilogramas haminus1 relatado para a A annua em estudos anteriores
7
Concluiu-se que para obter artemisinina em altos niacuteveis A annua deve ser
colhida quatro vezes (KUMAR et al 2004)
ASPECTOS AGRONOcircMICOS
Propagaccedilatildeo
Em meacutedia 1000 sementes pesam 003 g e natildeo diminuem sua viabilidade
ao secar Satildeo acessiacuteveis ao armazenamento agrave frio de longo prazo Germinam de
janeiro a marccedilo A germinaccedilatildeo de 100 foi obtida em um meio de germinaccedilatildeo de
aacutegar a 1 em uma temperatura de 15degC sob um fotoperiacuteodo 816 horas claro-
escuro (MOHAMMADREZA 2008)
A Artemisia annua eacute plantada extensamente e comercialmente
principalmente como uma fonte de oacuteleos essenciais e tambeacutem de artemisinina
sobretudo em regiotildees da China e VietnamNessas regiotildees o ciclo da planta em
condiccedilotildees naturais chega a 10 meses Na Europa e na Ameacuterica as plantas
crescem mais rapidamente terminando seu ciclo de vida em apenas seis meses
mesmo no campo Cresce melhor em talhotildees abertos e ensolarados em solos
arenosos e aluviais feacuterteis que sejam neutros a ligeiramente aacutecidos e que tenham
uma boa retenccedilatildeo de umidade e natildeo tolera a seca ou o encharcamento As
sementes germinam de janeiro a marccedilo e a frutificaccedilatildeo (colheita das sementes)
ocorre entre outubro e novembro (httpwwwkeworgplants-fungiArtemisia-
annuahtm)
Conceiccedilatildeo et al (2013) testaram a germinaccedilatildeo da semente de A annua
cultivar Silves sob duas condiccedilotildees ambientais a fim de fornecer informaccedilotildees
sobre seu cultivo Na primeira condiccedilatildeo realizou-se o teste padratildeo com 4 lotes de
100g de sementes semeadas em gerbox sobre papel mata-borratildeo e dispostas
em germinador agrave temperatura de 25-30deg C expostas agrave luz durante 8 horas diaacuterias
e umedecidas quando necessaacuterio ateacute sua emergecircncia Na segunda etapa foi
realizado o mesmo procedimento anterior poreacutem as sementes permaneceram no
germinador em ausecircncia de luz sob as mesmas condiccedilotildees de temperatura e
umidade Segundo anaacutelise estatiacutestica em Tukey a 5 aplicada aqui sobre as
meacutedias de cada lote de 100g sementes os tratamentos obtiveram diferenccedilas
significativas sendo que as sementes expostas agrave luz obtiveram maiores valores
8
de germinaccedilatildeo Em ambiente com total ausecircncia de luz as sementes obtiveram
baixiacutessima taxa de germinaccedilatildeo no mesmo periacuteodo que as sementes em ambiente
iluminado Esse fato indica que a semente de A annua eacute fotoblaacutestica positiva e
assim necessita de um miacutenimo de luz para que ocorra sua germinaccedilatildeo por esse
motivo natildeo podem ser enterradas e sua semeadura deve ser apenas a lanccedilo ou
em superfiacutecie sem cobertura com terra Esta caracteriacutestica eacute comum agrave muitas
espeacutecies que produzem sementes miuacutedas
Adubaccedilatildeo
Em 2004 e 2005 um estudo foi realizado com o objetivo de determinar o
rendimento os componentes do rendimento e o iacutendice da artemisinina de A
annua cultivada sob quatro aplicaccedilotildees do nitrogecircnio (0 40 80 e 120 quilogramas
haminus1) na regiatildeo de Ccedilukurova na Turquia As experimentaccedilotildees de campo foram
conduzidas na universidade de Ccedilukurova no departamento de agricultura da
faculdade Nesse estudo a altura da planta o nuacutemero de ramos o rendimento
fresco e seco da erva o rendimento fresco e seco da folha o iacutendice do oacuteleo
essencial e o iacutendice da artemisinina (por cromatografia liacutequida pelo HPLC de
desempenho elevado) foram examinados Pela anaacutelise de variaccedilatildeo as doses de
nitrogecircnio natildeo tiveram nenhum efeito estatiacutestico nas caracteriacutesticas investigadas
agrave exceccedilatildeo do iacutendice de artemisinina Esse iacutendice nas folhas secas foi afetado
significativamente pelas aplicaccedilotildees do nitrogecircnio que variaram de 632 a 2750
mg 100 gminus1 (OZGUVEN et al 2008)
Outros aspectos
Uma pesquisa desenvolvida em MEDIPLANT (Suiacuteccedila) e no CPQBA-
UNICAPM (Brasil) envolveu a seleccedilatildeo e produccedilatildeo de genoacutetipos ricos em
artemisinina apresentando biomassa elevada seguido por uma segunda seleccedilatildeo
para a adaptaccedilatildeo agraves circunstacircncias climaacuteticas do Brasil Com hibridizaccedilatildeo
controlada entre genoacutetipos selecionados da China e do Vietnam o ganho
geneacutetico foi obtido nos termos do iacutendice da artemisinina e da uniformidade da
populaccedilatildeo Com o aumento do iacutendice de biomassa e da artemisinina (estimado
pela monitoraccedilatildeo analiacutetica) era possiacutevel aumentar a produccedilatildeo de artemisinina de
9
5 Kgha (populaccedilatildeo baacutesica) para aproximadamente 25 Kgha (populaccedilatildeo
geneticamente produzida) No cultivo realizado no Brasil em 3 de 7 linhas
hiacutebridas 239 de x 1V Ch x Viet55 e 1V x 243 produziram respectivamente
2543 2305 e 2127 quilogramas de artemisininahacorte com as 2 colheitas
possiacuteveis por o ano O cultivo destas linhas hiacutebridas novas no Brasil eacute uma
teacutecnica praticaacutevel e altamente competitiva devido agrave produccedilatildeo obtida
(MAGALHAtildeES et al 1997)
Foi pesquisado o efeito do aumento da irradiacircncia (15 a 100 da luz solar
cheia L15 a L100) sobre o crescimento a taxa fotossinteacutetica liacutequida maacutexima
(Pmax) a compensaccedilatildeo (CI) a saturaccedilatildeo de irradiacircncia de A annua e a produccedilatildeo
de artemisinina Na luz solar plena A annua apresentou uma capacidade elevada
de fotossiacutentese com irradiacircncia baixa manteve um Pmax relativamente elevado
com um CI baixo O crescimento da altura e do diacircmetro biomassa total e da
folha e iacutendice de artemisinina diminuiu com a diminuiccedilatildeo da irradiacircncia que pocircde
ser conectado com a fotossiacutentese mais baixa na irradiacircncia mais baixa em
relaccedilatildeo agrave irradiacircncia mais elevada As irradiacircncias mudaram a alocaccedilatildeo de
biomassa em A annua A relaccedilatildeo massa de folhamassa total da espeacutecie
aumentou com a diminuiccedilatildeo da irradiacircncia mas a relaccedilatildeo raizmassa total e
raizmassa da parte aeacuterea aumentaram geralmente com a irradiacircncia crescente
Assim A annua pode crescer na luz solar parcial e plena Entretanto o
rendimento elevado da biomassa e da artemisinina requerem o cultivo em um
habitat aberto com luz solar adequada (WANG et al 2008)
MATERIAIS E MEacuteTODOS
O ensaio foi conduzido na Estaccedilatildeo Experimental de Biologia da
Universidade de Brasiacutelia (EEB ndash UnB) em casa-de-vegetaccedilatildeo do tipo
ldquoglasshouserdquo no periacuteodo de 19 de abril de 2013 a 6 de dezembro de 2013
(primeiro e segundo semestres respectivamente) Durante o ensaio a casa-de-
vegetaccedilatildeo apresentou uma temperatura meacutedia de aproximadamente 250deg C com
meacutedia das miacutenimas de 1325degC e das maacuteximas de 3675degC aferidas com
termocircmetro convencional de maacutexima e miacutenima O iacutendice de radiaccedilatildeo luminosa
esteve em trono de 50 determinado por fotocircmetro automaacutetico modelo Asahi-
Pentax SP-500
10
A partida de sementes de Aannua foi doada pelo pesquisador Pedro
Melillo Magalhatildees oriundas do CPQBA ndash UNICAMP e produzidas em campo da
proacutepria estaccedilatildeo e utilizadas para a semeadura em sementeiras tipo caixa
contendo a mistura EEB (Estaccedilatildeo Experimental de Biologia) com a seguinte
composiccedilatildeo Latossolo vermelho de cerrado areia vermiculita e composto
orgacircnico na proporccedilatildeo 3311 respectivamente mais a formulaccedilatildeo 4-14-8 na
dose de 100g para 40L da mistura Apoacutes 42 dias da semeadura foram
selecionadas 20 mudas que estavam no ponto de transplante (meacutedia de 15 cm
de altura) Dessa forma foram transplantadas para vasos com capacidade para
25L preenchidos com a mistura EEB
Apoacutes o transplante a altura da parte aeacuterea de todas as plantas foi aferida
semanalmente com o uso de uma trena com o objetivo de desenhar-se a curva
de crescimento As mediccedilotildees tiveram iniacutecio uma semana apoacutes o transplante no
dia 14 de maio
No dia 26 de julho de 201349 dias apoacutes o transplante as plantas foram
transferidas dos vasos de 25L para vasos com maior capacidade (325L) para
favorecer o seu crescimento e desenvolvimento e no dia 17 de setembro102 dias
apoacutes o transplante foi feita uma suplementaccedilatildeo de terra para as 20 plantas com o
mesmo objetivo mediante a colocaccedilatildeo por baixo de um outro vaso de mesmo
tamanho contendo metade de seu volume em Substrato EEB Isso permitiu que
as raiacutezes crescessem no volume adicional de mistura atraveacutes dos furos de
drenagem do vaso original
O controle de plantas daninhas foi feito manualmente e o controle
fitossanitaacuterio atraveacutes de acompanhamento e sucessivas observaccedilotildees Ao fim do
ensaio foi observada uma pequena infestaccedilatildeo com cochonilhas As cochonilhas
foram identificadas por Pseudococcus citri Risso ndash mais conhecida por
ldquocochonilha algodatildeordquo Foi parcialmente controlada em curto prazo com uma
pulverizaccedilatildeo manual de soluccedilatildeo de detergente (10 ml 1 litro de aacutegua)
Ao fim do ensaio dia 18 de outubro foram obtidas as massas fresca e
seca das plantas bem como os coeficientes de variaccedilatildeo dos dados
11
RESUTADOS E DISCUSSAtildeO
Os resultados do presente ensaio encontram-se representados nas Figuras
4 e 5 as quais representam respectivamente a curva de crescimento de Aannua
em vinte semana (s) em casa-de-vegetaccedilatildeo e a evoluccedilatildeo da taxa meacutedia diaacuteria de
crescimento
Observando-se a Figura 2 que apresenta a evoluccedilatildeo da taxa meacutedia de
crescimento verificou-se que entre a quinta e a setima semanas a taxa meacutedia
diaacuteria de crescimento cresceu de 08 cm ao dia para em torno de 20 cm por dia
tendo havido um decrescimo e um estabilidade entre a oitava e a deacutecima segunda
semanas quando entatildeo ocorreu o segundo pico passando a taxa meacutedia diaacuteria de
crescimento de 12 cm para 18 cm seguindo-se um decrescimo ateacute 05 cmdia
nas deacutecima sexta e deacutecima seacutetimas semanas quando entatildeo houve o terceiro
pico na deacutecima oitava semana atingindo 08cmdia e novamente decaindo ateacute 04
cmdia na vigeacutesima semana
0
50
100
150
1s 3s 5s 7s 9s 11s 13s 15s 17s 19s
Alt
ura
em
cm
Crescimento meacutedio de Artemisia annua em vasos em casa de vegataccedilatildeo durante 20 semanas
(s)
Figura 1 ndash Crescimento meacutedio de A annua em vasos em casa-de-vegetaccedilatildeo durante 20 semanas (s) ndash Observa-se que a altura das plantas aumentou
notavelmente a partir da quinta semana apoacutes o transplante correspondendo ao primeiro pico de crescimento
12
Os picos de crescimento de A annua submetida ao cultivo em vasos em
casa-de-vegetaccedilatildeo podem ser explicados pelas interferecircncias do pesquisador que
visava maximizar o desenvolvimento das plantas O primeiro pico pode ser
atribuiacutedo ao padratildeo de crescimento da planta Por ocasiatildeo da primeira troca de
vasos quando a planta ganhou 2145 de volume de substrato para explorar
teria havido o segundo pico por volta da deacutecima segunda semana O terceiro pico
se deu em consequecircncia da segunda suplementaccedilatildeo de substrato ocorrida por
volta da deacutecima seacutetima semana
O aproveitamento da segunda suplementaccedilatildeo foi efetivo tendo as plantas
explorado o volume de substrato adicional em sua totalidade ocupando-o por
inteiro o volume (Figura 6)
Eacute consenso entre pesquisadores que as plantas crescidas em vasos nunca
alcanccedilam seu potencial maior conforme imagens de suas raiacutezes mostram Uma
teacutecnica meacutedica da imagem chamada a imagem de ressonacircncia magneacutetico (MRI)
foi usada por investigadores para capturar instantacircneos da raiz da planta no vaso
As figuras obtidas revelam que as raiacutezes ldquodetectam o tamanho do vasordquo e emitem
um sinal que resulta na restriccedilatildeo o crescimento da planta (POORTER et al 2012)
Poorter et al (2012) esclarecem que a maioria das experiecircncias em
biologia de plantas usa plantas crescidas em algum tipo de recipiente ou vaso
Uma meta-anaacutelise em 65 estudos que analisaram o efeito do tamanho do vaso no
0
05
1
15
2
25
1s 3s 5s 7s 9s 11s 13s 15s 17s 19s
Ce
ntiacute
met
ros
po
r d
ia
Evoluccedilatildeo da taxa meacutedia diaacuteria de crescimento de Artemisia annua em casa de vegetaccedilatildeo por
20 semanas
Figura 2 ndash Evoluccedilatildeo da taxa diaacuteria de cresimento de A annua em casa de vegetaccedilatildeo por 20 semanas (s)
13
crescimento e em variaacuteveis afins foi conduzida e verificou que em meacutedia dobrar o
tamanho do vaso aumentou a produccedilatildeo da biomassa da planta em 43 Uma
anaacutelise adicional de efeitos do tamanho do vaso nos componentes afins do
crescimento sugere que o crescimento reduzido em vasos menores eacute causado
principalmente por uma reduccedilatildeo na fotossiacutentese por aacuterea da folha da unidade
mais do que por mudanccedilas na morfologia da folha ou no alocamento de
biomassa O tamanho apropriado do vaso dependeraacute logicamente do tamanho
das plantas que crescem neles Baseado em vaacuterias linhas da evidecircncia noacutes
sugerimos que um tamanho apropriado do vaso eacute um no qual a biomassa da
planta natildeo exceda 1 g L-1 Na praacutetica atual da pesquisa 65 das experiecircncias
excedem essa referecircncia Noacutes sugerimos que os investigadores devam
considerar com cuidado o tamanho do vaso em suas experiecircncias porque os
vasos pequenos podem mudar resultados experimentais e sabotar a finalidade da
experiecircncia
No presente ensaio de vasos foi obtido uma massa seca da parte aeacuterea
meacutedia de 2995g com um coeficiente de variaccedilatildeo de 3001 com uma planta por
vaso com dois transplantes para ganho de volume de solo a ser explorado O
corte das plantas se deu com 80 dias apoacutes o transplante
Quiteacuterio (2006) tambeacutem em ensaio de vasos obteve a meacutedia 25g de massa
seca de A annua em ensaio de vasos com duas plantas onde a colheita foi feita
75 dias apoacutes a semeadura no preacute-florescimento Os dois resultados apresentam
coerecircncia entre si
O ataque de cochonilhas observado era esperado como um reflexo natural
do estresse das plantas que satildeo submetidas ao cultivo em vaso em casa-de-
vegetaccedilatildeo
14
CONCLUSAtildeO
Nas condiccedilotildees do presente ensaio concluiu-se que o cultivo de Artemisia annua
em vasos e em casa-de-vegetaccedilatildeo eacute viaacutevel e pode ser notavelmente expressivo
com porte superior a 15m de altura e massa seca da parte aeacuterea meacutedia em torno
de 30g
Numa etapa posterior visualizam-se os ensaios objetivando a geraccedilatildeo de uma
tecnologia de produccedilatildeo tendo como alvo a produtividade em artesinina-A que eacute o
componente ativo contra malaacuteria
15
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17
DOCUMENTAacuteRIO FOTOGRAacuteFICO
Foto 1 ndash Mudas na sementeira prontas para transplante - Foto da autora Nayara Carvalho
Foto 2 ndash Mudas de Artemisia annua no dia do transplante ndash Foto da autora Nayara
Carvalho
18
Foto 3 ndash Aspecto geral do ensaio ndash Foto da autora Nayara Carvalho
Foto 4 ndash Suplementaccedilatildeo de substrato ndash Foto do orientador Jean Kleber
19
Foto 5 ndash Aproveitamento pela planta di suplemento de substrato ndash Foto do orientador Jean Kleber
Foto 6 ndash A planta mais alta ao final do ensaio ndash Foto do orientador Jean Kleber
20
Foto 8 ndash Ataque de colchonilhas em A annua ndash Foto da autora Nayara Carvalho
Foto 7 ndash A planta mais baixa ao final do ensaio
vii
LISTA DE FIGURAS
1 Figura 1 ndash Crescimento meacutedio de Artemisia annua em vasos em
casa-de-vegetaccedilatildeo durante vinte semanas ndash paacuteg 25
2 Figura 2 ndash Evoluccedilatildeo da taxa diaacuteria de crescimento de Artemisia annua
em casa de vegetaccedilatildeo por 20 semanas ndash paacuteg 25
viii
RESUMO
A Artemisia annua L (Asteraceae) eacute originaacuteria de regiotildees de clima temperado da
Aacutesia e tem sido utilizada pela medicina tradicional chinesa haacute vaacuterios seacuteculos no
tratamento de malaacuteria A espeacutecie reveste-se portanto de indiscutiacutevel importacircncia
em paiacuteses tropicais onde a presenccedila da malaacuteria ainda preocupa as autoridades
da aacuterea da sauacutede o que eacute o caso da Regiatildeo Centro-Oeste do Brasil O objetivo
do presente trabalho foi estudar o crescimento e o desenvolvimento de A annua
mediante cultivo em vasos em casa de vegetaccedilatildeo As sementes de Aannua
foram produzidas em campo da proacutepria estaccedilatildeo e utilizadas para a semeadura em
sementeiras tipo caixa contendo a mistura EEB (Estaccedilatildeo Experimental de Biologia
da UnB ndash Brasiacutelia- DF) mais a formulaccedilatildeo 4-14-8 na dose de 100g para 40L da
mistura Apoacutes 42 dias da semeadura foram selecionadas 20 mudas que estavam
no ponto de transplante (meacutedia de 15 cm de altura) Dessa forma foram
transplantadas para vasos com capacidade para 25L preenchidos com a mistura
EEB Apoacutes nove semana de mensuraccedilotildees de altura as plantas foram pesadas
para obtenccedilatildeo das massas fresca e seca da parte aeacuterea Nas condiccedilotildees do
presente ensaio concluiu-se que o cultivo de Artemisia annua em vasos e em
casa-de-vegetaccedilatildeo eacute viaacutevel e pode ser notavelmente expressivo com porte
superior a 15m de altura e massa seca da parte aeacuterea com meacutedia de 30g
1
INTRODUCcedilAtildeO
A Artemisia annua L (Asteraceae) eacute originaacuteria de regiotildees de clima
temperado da Aacutesia e tem sido utilizada pela medicina tradicional chinesa haacute vaacuterios
seacuteculos no tratamento de malaacuteria Pesquisadores chineses estudaram mais de 30
espeacutecies do gecircnero Artemisia para confirmar a atividade antimalaacuterica das
mesmas Somente A annua e A apiacea Hance foram eficazes em combater
o Plasmodium vivax e o Plasmodium falciparum agentes etimoloacutegicos da malaacuteria
(DIAS 1997) Entre os metaboacutelitos secundaacuterios isolados das diversas espeacutecies do
gecircnero Artemisia os mais caracteriacutesticos satildeo as lactonas sesquiterpecircnicas
(RODRIGUES et al 2006)
As lactonas sesquiterpecircnicas pertencem a um grande grupo de produtos
naturais encontradas principalmente em plantas de vaacuterios gecircneros da famiacutelia
Asteraceae (SANTOS 2009)
A espeacutecie reveste-se portanto de indiscutiacutevel importacircncia em paiacuteses
tropicais onde a presenccedila da malaacuteria ainda preocupa as autoridades da aacuterea da
sauacutede o que eacute o caso da Regiatildeo Centro-Oeste do Brasil
Mediante solicitaccedilatildeo ao pesquisador Pedro Melillo Magalhatildees do CPQBA
(Centro Pluridisciplinar de pesquisas quiacutemicas bioloacutegicas e agriacutecolas ndash vinculado
agrave Unicamp ndash Universidade Estadual de Campinas) foi obtida uma pequena
partida de sementes de A annua com a qual obtivemos plantas adultas agrave campo
que produziram sementes feacuterteis possibilitando por conseguinte a realizaccedilatildeo de
ensaios agronocircmicos na Estaccedilatildeo Experimental de Biologia da Universidade de
Brasiacutelia (EEB ndash UnB)
O estudo do comportamento desta espeacutecie em nossa regiatildeo reveste-se de
consideraacutevel importacircncia uma vez que eacute fato conhecido de pesquisas da aacuterea que
o perfil de aromaacuteticos e outros componentes quiacutemicos varia bastante conforme a
condiccedilotildees ambientais em que as plantas satildeo cultivadas
Desta forma satildeo necessaacuterios ensaios agronocircmicos precedentes aos
ensaios quiacutemicos para que haja uma convivecircncia inicial com a espeacutecie visando o
conhecimento de suas possibilidades quanto agrave produccedilatildeo de mateacuteria prima
2
OBJETIVO
O objetivo do presente trabalho foi estudar o crescimento e o
desenvolvimento de A annua mediante cultivo em vasos em casa de vegetaccedilatildeo
REVISAtildeO BIBLIOGRAacuteFICA
Descriccedilatildeo da planta
Artemisia annua L (Syn Artemisia chamomilla C Winkl) Asteraceae
Nome vulgar Sweet wormwood eacute uma erva doce aromaacutetica com a flores
pequenas amarelas em capiacutetulos A annua conteacutem o componente quiacutemico
artemisinina em suas partes aeacutereas que satildeo usadas em drogas anti-malaacutericas
Outros nomes satildeo Sweet annie Wormwood annual (inglecircs) qing hao (chinecircs
artemiacutesia verde azulada) Difundida e naturalizada extensamente eacute
frequentemente abundante natildeo sendo do interesse do conservacionismo pois
ainda natildeo foi avaliada de acordo com criteacuterios da lista vermelha do IUCN ndash
International Union for Conservation of Nature Tem como habitat colinas bordas
das florestas e terrenos baldios Trata-se de uma planta medicinal antimalaacuterica
importante cujo oacuteleo essencial eacute usado tambeacutem em cosmeacuteticos A planta eacute
cultivada como um ornamental na Indoneacutesia (httpwwwkeworgplants-
fungiArtemisia-annuahtm)
A annua eacute nativa da Euraacutesia do sudeste da Europa (incluindo Albacircnia
Bulgaacuteria Montenegro Romecircnia Ruacutessia Servia Turquia) ao Vietnam e norte da
India Naturalizado em muitos paiacuteses (incluindo Argentina Aacuteustria a repuacuteblica
Tcheca Franccedila Alemanha Hungria Itaacutelia Polocircnia Eslovaacutequia Espanha Suiacuteccedila e
Estados Unidos) Foi registrada como de crescimento ruderal no Reino Unido
levada por paacutessaros ou nas latildes tendo sido cultivada experimentalmente tatildeo ao
norte como na Finlacircndia A espeacutecie e foi usada na China para tratar febres por
mais de 2000 anos O gecircnero Artemisia pertence agrave famiacutelia Asteraceae
(Compositae) que inclui plantas bem conhecidas usadas na medicina
perfumaria alimentaccedilatildeo e na induacutestria da bebida tal como a A dracunculus
(estragatildeo) A absinthium (absinto) e A vulgaris (artemiacutesia)
(httpwwwkeworgplants-fungiArtemisia-annuahtm )
3
A descriccedilatildeo botacircnica menciona que A annua eacute uma planta anual de haste
uacutenica glabra doce-aromaacutetica que cresce ateacute 1 m de altura (2 m como ruderal) A
haste eacute ereta nervada e marrom ou violeta-marrom As folhas basais satildeo 3-
pinatissectas (divididas trecircs vezes em foliacuteolos profundamente cortados) 3-5 cm
de comprimento e 2-4 cm de largura as folhas superiores satildeo 1-2-pinatissectas
menores e seacutesseis (sem peciacuteolo) Os capiacutetulos satildeo globosas com 2-25
miliacutemetros de diacircmetro em paniacuteculas frouxas O invoacutelucro (seacuterie das braacutecteas em
torno do capiacutetulo) eacute composto de braacutecteas glabras imbricadas As braacutecteas
exteriores satildeo verdes e linear-oblongas as braacutecteas internas satildeo brilhantes e
oval-arredondadas com uma margem larga fina seca Os capiacutetulos satildeo
disciformes e compostos de floretes filiformes exteriores (femininas) e de floretes
internos no disco (hermafroditas) Os floretes centrais numerosos do disco satildeo
esverdeados ou amarelados O fruto eacute um aquecircnio amarelo-marrom de parede
fina (pequeno seco) 06-08 miliacutemetros de tamanho com uma superfiacutecie
brilhante marcada com sulcos verticais e contendo uma uacutenica semente Os
aquecircnios natildeo tecircm nenhum papo e portanto natildeo satildeo dispersados pelo vento
como satildeo muitos outros da famiacutelia Asteraceae (Compositae)
(httpwwwkeworgplants-fungiArtemisia-annuahtm)
COMPOSICcedilAtildeO E USO A espeacutecie A annua eacute conhecida como ldquoQing Haordquo na China e eacute a fonte da
Medicina Tradicional Chinesa (MTC) que foi usada por mais de 2000 anos para
aliviar febres Na MTC prescreve-se frequentemente em combinaccedilatildeo com outros
ervas para tratar (aleacutem agraves febres) a icteriacutecia a dor de cabeccedila a vertigem e os
sangramentos nasais A pesquisa cientiacutefica da atividade anti-malaacuterica de A annua
comeccedilou no princiacutepio dos anos 70 em resposta agrave resistecircncia crescente agraves drogas
anti-malaacutericas estabelecidas por parte dos protozoaacuterios parasitas que causam a
malaacuteria (Protozoaacuterios do gecircnero Plasmodium ) O componente quiacutemico
artemisinina que ocorre naturalmente nas folhas da Aannua eacute um potente
agente anti-malaacuterico e pode matar o parasita mais agressivo o Plasmodium
falciparum (eacute seletivamente toacutexico ao estaacutegio assexual de eritrocito dos parasitas)
A artemisinina extraiacuteda de Aannua tornou-se extremamente importante em tratar
a malaacuteria desde que a resistecircncia do parasita a muitos outros antimalaacutericos se
tornou difundida (httpwwwkeworgplants-fungiArtemisia-annuahtm)
4
A planta A annua (Asteraceae) eacute listada na medicina chinesa como um
remeacutedio para vaacuterias febres incluindo a malaacuteria e contem um bem estabelecido
composto antimalaacuterico a artemisinina Neste estudo um hiacutebrido de A annua foi
cultivado com sucesso na Aacutefrica Central As partes aeacutereas da planta continham
063 - 070 de artemisinina por massa seca e aproximadamente 40 desta
artemisinina poderia ser extraiacuteda por meacutetodos simples da preparaccedilatildeo do chaacute
Cinco pacientes da malaacuteria que foram tratados com A annua mostraram um
desaparecimento raacutepido do parasita dentro de 2-4 dias Uma experimentaccedilatildeo
adicional com os 48 pacientes de malaacuteria mostrou um desaparecimento do
parasita em 44 pacientes (92) dentro de 4 dias Ambas as experimentaccedilotildees
mostraram uma melhoria marcada dos sintomas Estes resultados justificam
pesquisas adicionais do efeito antimalaacuterico de preparaccedilotildees de A annua
(MUELLER et al 2000)
Em fases de crescimento e desenvolvimento diferentes foi pesquisada a
variaccedilatildeo na quantidade e na qualidade do oacuteleo essencial de A annua incluindo
preacute- floraccedilatildeo floraccedilatildeo e poacutes - floraccedilatildeo Os oacuteleos foram obtidos por hidrodestilaccedilatildeo
das amostras secas ao ar Os rendimentos dos oacuteleos ( pp) nas diferentes
fases foram da ordem de preacute- floraccedilatildeo (097) floraccedilatildeo (1 23) e poacutes- floraccedilatildeo
(087) Os oacuteleos foram analisados por espectrometria de massa e cromatografia
em fase gasosa No total 32 35 e 33 constituintes foram identificados e
quantificados no oacuteleo de preacute - floraccedilatildeo floraccedilatildeo e poacutes - floraccedilatildeo representando
9767 92 e 92 4 dos oacuteleos respectivamente Cacircnfora 18-cineol canfeno
spatulenol alfandashpineno e artemiacutesia-cetona foram os principais componentes em
todas as amostras Monoterpenos eram o principal grupo de compostos em preacute-
floraccedilatildeo (6996) floraccedilatildeo (7244) e poacutes- floraccedilatildeo (7096)
(MOHAMMADREZA 2008)
A comparaccedilatildeo do perfil de cromatografia de gaacutes do oacuteleo essencial da A
annua produzido no Brasil com aqueles de outras origens revelou a variaccedilatildeo
significativa de seus constituintes O comportamento sazonal do iacutendice do
artemisinina 13 contra a produccedilatildeo de oacuteleo essencial foi observado durante um
periacuteodo da colheita A viabilidade econocircmica de diversos metodologias de
purificaccedilatildeo para a produccedilatildeo da artemisinina foi testada Foi produzido o composto
anti-malaacuterico 13 a um custo total de US$ 115 por grama (FOGLIO 1996)
5
ARTEMISININA
Artemisinina eacute uma lactona sesquiterpecircnica com uma ponte endoperoacutexido
e foi produzida semi-sinteticamente como uma droga antimalaacuterica A eficaacutecia do
chaacute feito de A annua no tratamento da malaacuteria eacute contencioso De acordo com
alguns autores a artemesinina natildeo eacute soluacutevel em aacutegua e as concentraccedilotildees nestas
infusotildees satildeo consideradas insuficientes para tratar a malaacuteria (MUELER et al
2004 RATH et al 2004 JANSEN 2006)
Em 2004 o ministro da sauacutede da Etioacutepia mudou a droga antimalaacuterica de
primeira linha da Etioacutepia de sulfadoxinaprimetamina (Fansidar) que tem uma
taxa de falha em meacutedia de 36 no tratamento para a artemetherlumefantrine
(Coartem) uma terapia de droga que conteacutem a artemisinina que eacute 100 eficaz
quando usado corretamente apesar de uma relativa falta mundial do produto do
derivado de A annua (MALARIA UPDATE 20052013)
A malaacuteria eacute causada primeiramente pelo Plasmodium falciparum que
invade as hemaacutecias e conteacutem heme-grupos ricos em ferro (na forma do
hemozoina) (POSNER amp OrsquoNEIL 2004)
O mecanismo de accedilatildeo proposto da artemisinina contra a malaacuteria envolve a
clivagem de pontes de endoperoacutexido pelo ferro produzindo os radicais livres
(ferro-oxo hipervalente espeacutecies epoacutexidos aldeiacutedos e compostos do dicarbonil)
que danificam as macromoleacuteculas bioloacutegicas causando estresse oxidativo nas
ceacutelulas do parasita (CUMMING 1997)
Com a possibilidade de isolarem maiores quantidades de artemisinina
(quinghaosu) plantas de A annua foram cultivadas por Liersch et al (1986) e
analisadas em estaacutegios diferentes de desenvolvimento O iacutendice mais elevado de
artemisinina foi encontrado imediatamente antes do florescimento Era tambeacutem
possiacutevel correlacionar o desenvolvimento das plantas com o iacutendice maacuteximo do
artemisinina As plantas de A annua cultivadas de vaacuterias outras fontes tambeacutem
foram examinadas para o iacutendice de artemisinina De acordo com os resultados
obtidos nenhuma dessas plantas contiveram quantidades suficientes do
composto (artemisinina) para justificar isolamento em uma escala teacutecnica Aleacutem
disso outras espeacutecies de Artemisia foram testadas e foi encontrada artemisinina
em somente uma outra espeacutecie Para aumentar a quantidade de artemisinina
durante o periacuteodo do crescimento da planta foram testados dois reguladores
6
hormonais de crescimento em A annua genoacutetipo 811 Os resultados mostraram
que o chlormequat podia aumentar o teor do composto(artemisinina) em 30 em
relaccedilatildeo agraves plantas natildeo tratadas Foram encontrados tambeacutem alguns discretos
efeitos dos reguladores de crescimento na morfologia dos trichomas glandulares
Para finalidades de produccedilatildeo plantas com um iacutendice elevado de
artemisinina satildeo requeridas Woerdenbag et al (1994) acompanharam o
desenvolvimento do conteuacutedo de artemisinina e dos sesquiterpenes
biosinteticamente relacionados aacutecido artemisiacutenico arteannuina B e artemisiteno
em plantas de A annua durante um periacuteodo da vegetaccedilatildeo no Vietnam onde esta
espeacutecie eacute indiacutegena Aleacutem disso o iacutendice do oacuteleo essencial e sua composiccedilatildeo
foram estudados As amostras das folhas gemas as flores ou as flores de poacutes-
florescimento e frutos foram analisados nos diferentes estaacutegios vegetativo (5 6 e
8 meses de idade) na formaccedilatildeo maciccedila das gemas (9 meses) no pleno
florescimento (10 meses) e poacutes-florescimento (10frac12 meses) O iacutendice mais
elevado de artemisinina (086 da massa seca) estava nas folhas de plantas com
5 meses de idade Neste estaacutegio o rendimento mais elevado da folha tambeacutem foi
encontrado Subsequentemente o iacutendice de artemisinina caiu gradualmente Na
idade de 5 meses os maiores conteuacutedos de aacutecido artemisinico e arteannuina-B
016 e 008 da massa seca respectivamente foram tambeacutem encontrados O
artemisiteno estava presente em todos os estaacutegios do desenvolvimento variando
de 0002 a 009 da massa seca Com 19 volumemassa o iacutendice do oacuteleo
essencial (OE) foi maacuteximo imediatamente antes do florescimento e foi composto
de 55 de monoterpenos e 45 de sesquiterpenes Em todos os outros estaacutegios
(04 ndash 10 volumemassa do oacuteleo essencial) esta relaccedilatildeo foi de 30 70 Os
principais componentes do OE foram cacircnfora e germacreno-D
Observaccedilotildees mostraram que o rendimento da artemisinina esteve
correlacionado positivamente com o rendimento da folha e o nuacutemero das
colheitas Os rendimentos elevados de artemisinina ocorreram quando a colheita
produziu folhas artemisinina-ricas acompanhadas pelo menor crescimento
possiacutevel do tecido da haste alcanccedilado em colheitas muacuteltiplas em plantas
crescidas a tempo integral e plantadas mais cedo As colheitas crescidas por ge30
semanas e colhidas trecircs a quatro vezes deram os rendimentos meacutedios de
441plusmn142 e de 742plusmn156 respectivamente Muito mais altos do que o rendimento
maacuteximo de 25 quilogramas haminus1 relatado para a A annua em estudos anteriores
7
Concluiu-se que para obter artemisinina em altos niacuteveis A annua deve ser
colhida quatro vezes (KUMAR et al 2004)
ASPECTOS AGRONOcircMICOS
Propagaccedilatildeo
Em meacutedia 1000 sementes pesam 003 g e natildeo diminuem sua viabilidade
ao secar Satildeo acessiacuteveis ao armazenamento agrave frio de longo prazo Germinam de
janeiro a marccedilo A germinaccedilatildeo de 100 foi obtida em um meio de germinaccedilatildeo de
aacutegar a 1 em uma temperatura de 15degC sob um fotoperiacuteodo 816 horas claro-
escuro (MOHAMMADREZA 2008)
A Artemisia annua eacute plantada extensamente e comercialmente
principalmente como uma fonte de oacuteleos essenciais e tambeacutem de artemisinina
sobretudo em regiotildees da China e VietnamNessas regiotildees o ciclo da planta em
condiccedilotildees naturais chega a 10 meses Na Europa e na Ameacuterica as plantas
crescem mais rapidamente terminando seu ciclo de vida em apenas seis meses
mesmo no campo Cresce melhor em talhotildees abertos e ensolarados em solos
arenosos e aluviais feacuterteis que sejam neutros a ligeiramente aacutecidos e que tenham
uma boa retenccedilatildeo de umidade e natildeo tolera a seca ou o encharcamento As
sementes germinam de janeiro a marccedilo e a frutificaccedilatildeo (colheita das sementes)
ocorre entre outubro e novembro (httpwwwkeworgplants-fungiArtemisia-
annuahtm)
Conceiccedilatildeo et al (2013) testaram a germinaccedilatildeo da semente de A annua
cultivar Silves sob duas condiccedilotildees ambientais a fim de fornecer informaccedilotildees
sobre seu cultivo Na primeira condiccedilatildeo realizou-se o teste padratildeo com 4 lotes de
100g de sementes semeadas em gerbox sobre papel mata-borratildeo e dispostas
em germinador agrave temperatura de 25-30deg C expostas agrave luz durante 8 horas diaacuterias
e umedecidas quando necessaacuterio ateacute sua emergecircncia Na segunda etapa foi
realizado o mesmo procedimento anterior poreacutem as sementes permaneceram no
germinador em ausecircncia de luz sob as mesmas condiccedilotildees de temperatura e
umidade Segundo anaacutelise estatiacutestica em Tukey a 5 aplicada aqui sobre as
meacutedias de cada lote de 100g sementes os tratamentos obtiveram diferenccedilas
significativas sendo que as sementes expostas agrave luz obtiveram maiores valores
8
de germinaccedilatildeo Em ambiente com total ausecircncia de luz as sementes obtiveram
baixiacutessima taxa de germinaccedilatildeo no mesmo periacuteodo que as sementes em ambiente
iluminado Esse fato indica que a semente de A annua eacute fotoblaacutestica positiva e
assim necessita de um miacutenimo de luz para que ocorra sua germinaccedilatildeo por esse
motivo natildeo podem ser enterradas e sua semeadura deve ser apenas a lanccedilo ou
em superfiacutecie sem cobertura com terra Esta caracteriacutestica eacute comum agrave muitas
espeacutecies que produzem sementes miuacutedas
Adubaccedilatildeo
Em 2004 e 2005 um estudo foi realizado com o objetivo de determinar o
rendimento os componentes do rendimento e o iacutendice da artemisinina de A
annua cultivada sob quatro aplicaccedilotildees do nitrogecircnio (0 40 80 e 120 quilogramas
haminus1) na regiatildeo de Ccedilukurova na Turquia As experimentaccedilotildees de campo foram
conduzidas na universidade de Ccedilukurova no departamento de agricultura da
faculdade Nesse estudo a altura da planta o nuacutemero de ramos o rendimento
fresco e seco da erva o rendimento fresco e seco da folha o iacutendice do oacuteleo
essencial e o iacutendice da artemisinina (por cromatografia liacutequida pelo HPLC de
desempenho elevado) foram examinados Pela anaacutelise de variaccedilatildeo as doses de
nitrogecircnio natildeo tiveram nenhum efeito estatiacutestico nas caracteriacutesticas investigadas
agrave exceccedilatildeo do iacutendice de artemisinina Esse iacutendice nas folhas secas foi afetado
significativamente pelas aplicaccedilotildees do nitrogecircnio que variaram de 632 a 2750
mg 100 gminus1 (OZGUVEN et al 2008)
Outros aspectos
Uma pesquisa desenvolvida em MEDIPLANT (Suiacuteccedila) e no CPQBA-
UNICAPM (Brasil) envolveu a seleccedilatildeo e produccedilatildeo de genoacutetipos ricos em
artemisinina apresentando biomassa elevada seguido por uma segunda seleccedilatildeo
para a adaptaccedilatildeo agraves circunstacircncias climaacuteticas do Brasil Com hibridizaccedilatildeo
controlada entre genoacutetipos selecionados da China e do Vietnam o ganho
geneacutetico foi obtido nos termos do iacutendice da artemisinina e da uniformidade da
populaccedilatildeo Com o aumento do iacutendice de biomassa e da artemisinina (estimado
pela monitoraccedilatildeo analiacutetica) era possiacutevel aumentar a produccedilatildeo de artemisinina de
9
5 Kgha (populaccedilatildeo baacutesica) para aproximadamente 25 Kgha (populaccedilatildeo
geneticamente produzida) No cultivo realizado no Brasil em 3 de 7 linhas
hiacutebridas 239 de x 1V Ch x Viet55 e 1V x 243 produziram respectivamente
2543 2305 e 2127 quilogramas de artemisininahacorte com as 2 colheitas
possiacuteveis por o ano O cultivo destas linhas hiacutebridas novas no Brasil eacute uma
teacutecnica praticaacutevel e altamente competitiva devido agrave produccedilatildeo obtida
(MAGALHAtildeES et al 1997)
Foi pesquisado o efeito do aumento da irradiacircncia (15 a 100 da luz solar
cheia L15 a L100) sobre o crescimento a taxa fotossinteacutetica liacutequida maacutexima
(Pmax) a compensaccedilatildeo (CI) a saturaccedilatildeo de irradiacircncia de A annua e a produccedilatildeo
de artemisinina Na luz solar plena A annua apresentou uma capacidade elevada
de fotossiacutentese com irradiacircncia baixa manteve um Pmax relativamente elevado
com um CI baixo O crescimento da altura e do diacircmetro biomassa total e da
folha e iacutendice de artemisinina diminuiu com a diminuiccedilatildeo da irradiacircncia que pocircde
ser conectado com a fotossiacutentese mais baixa na irradiacircncia mais baixa em
relaccedilatildeo agrave irradiacircncia mais elevada As irradiacircncias mudaram a alocaccedilatildeo de
biomassa em A annua A relaccedilatildeo massa de folhamassa total da espeacutecie
aumentou com a diminuiccedilatildeo da irradiacircncia mas a relaccedilatildeo raizmassa total e
raizmassa da parte aeacuterea aumentaram geralmente com a irradiacircncia crescente
Assim A annua pode crescer na luz solar parcial e plena Entretanto o
rendimento elevado da biomassa e da artemisinina requerem o cultivo em um
habitat aberto com luz solar adequada (WANG et al 2008)
MATERIAIS E MEacuteTODOS
O ensaio foi conduzido na Estaccedilatildeo Experimental de Biologia da
Universidade de Brasiacutelia (EEB ndash UnB) em casa-de-vegetaccedilatildeo do tipo
ldquoglasshouserdquo no periacuteodo de 19 de abril de 2013 a 6 de dezembro de 2013
(primeiro e segundo semestres respectivamente) Durante o ensaio a casa-de-
vegetaccedilatildeo apresentou uma temperatura meacutedia de aproximadamente 250deg C com
meacutedia das miacutenimas de 1325degC e das maacuteximas de 3675degC aferidas com
termocircmetro convencional de maacutexima e miacutenima O iacutendice de radiaccedilatildeo luminosa
esteve em trono de 50 determinado por fotocircmetro automaacutetico modelo Asahi-
Pentax SP-500
10
A partida de sementes de Aannua foi doada pelo pesquisador Pedro
Melillo Magalhatildees oriundas do CPQBA ndash UNICAMP e produzidas em campo da
proacutepria estaccedilatildeo e utilizadas para a semeadura em sementeiras tipo caixa
contendo a mistura EEB (Estaccedilatildeo Experimental de Biologia) com a seguinte
composiccedilatildeo Latossolo vermelho de cerrado areia vermiculita e composto
orgacircnico na proporccedilatildeo 3311 respectivamente mais a formulaccedilatildeo 4-14-8 na
dose de 100g para 40L da mistura Apoacutes 42 dias da semeadura foram
selecionadas 20 mudas que estavam no ponto de transplante (meacutedia de 15 cm
de altura) Dessa forma foram transplantadas para vasos com capacidade para
25L preenchidos com a mistura EEB
Apoacutes o transplante a altura da parte aeacuterea de todas as plantas foi aferida
semanalmente com o uso de uma trena com o objetivo de desenhar-se a curva
de crescimento As mediccedilotildees tiveram iniacutecio uma semana apoacutes o transplante no
dia 14 de maio
No dia 26 de julho de 201349 dias apoacutes o transplante as plantas foram
transferidas dos vasos de 25L para vasos com maior capacidade (325L) para
favorecer o seu crescimento e desenvolvimento e no dia 17 de setembro102 dias
apoacutes o transplante foi feita uma suplementaccedilatildeo de terra para as 20 plantas com o
mesmo objetivo mediante a colocaccedilatildeo por baixo de um outro vaso de mesmo
tamanho contendo metade de seu volume em Substrato EEB Isso permitiu que
as raiacutezes crescessem no volume adicional de mistura atraveacutes dos furos de
drenagem do vaso original
O controle de plantas daninhas foi feito manualmente e o controle
fitossanitaacuterio atraveacutes de acompanhamento e sucessivas observaccedilotildees Ao fim do
ensaio foi observada uma pequena infestaccedilatildeo com cochonilhas As cochonilhas
foram identificadas por Pseudococcus citri Risso ndash mais conhecida por
ldquocochonilha algodatildeordquo Foi parcialmente controlada em curto prazo com uma
pulverizaccedilatildeo manual de soluccedilatildeo de detergente (10 ml 1 litro de aacutegua)
Ao fim do ensaio dia 18 de outubro foram obtidas as massas fresca e
seca das plantas bem como os coeficientes de variaccedilatildeo dos dados
11
RESUTADOS E DISCUSSAtildeO
Os resultados do presente ensaio encontram-se representados nas Figuras
4 e 5 as quais representam respectivamente a curva de crescimento de Aannua
em vinte semana (s) em casa-de-vegetaccedilatildeo e a evoluccedilatildeo da taxa meacutedia diaacuteria de
crescimento
Observando-se a Figura 2 que apresenta a evoluccedilatildeo da taxa meacutedia de
crescimento verificou-se que entre a quinta e a setima semanas a taxa meacutedia
diaacuteria de crescimento cresceu de 08 cm ao dia para em torno de 20 cm por dia
tendo havido um decrescimo e um estabilidade entre a oitava e a deacutecima segunda
semanas quando entatildeo ocorreu o segundo pico passando a taxa meacutedia diaacuteria de
crescimento de 12 cm para 18 cm seguindo-se um decrescimo ateacute 05 cmdia
nas deacutecima sexta e deacutecima seacutetimas semanas quando entatildeo houve o terceiro
pico na deacutecima oitava semana atingindo 08cmdia e novamente decaindo ateacute 04
cmdia na vigeacutesima semana
0
50
100
150
1s 3s 5s 7s 9s 11s 13s 15s 17s 19s
Alt
ura
em
cm
Crescimento meacutedio de Artemisia annua em vasos em casa de vegataccedilatildeo durante 20 semanas
(s)
Figura 1 ndash Crescimento meacutedio de A annua em vasos em casa-de-vegetaccedilatildeo durante 20 semanas (s) ndash Observa-se que a altura das plantas aumentou
notavelmente a partir da quinta semana apoacutes o transplante correspondendo ao primeiro pico de crescimento
12
Os picos de crescimento de A annua submetida ao cultivo em vasos em
casa-de-vegetaccedilatildeo podem ser explicados pelas interferecircncias do pesquisador que
visava maximizar o desenvolvimento das plantas O primeiro pico pode ser
atribuiacutedo ao padratildeo de crescimento da planta Por ocasiatildeo da primeira troca de
vasos quando a planta ganhou 2145 de volume de substrato para explorar
teria havido o segundo pico por volta da deacutecima segunda semana O terceiro pico
se deu em consequecircncia da segunda suplementaccedilatildeo de substrato ocorrida por
volta da deacutecima seacutetima semana
O aproveitamento da segunda suplementaccedilatildeo foi efetivo tendo as plantas
explorado o volume de substrato adicional em sua totalidade ocupando-o por
inteiro o volume (Figura 6)
Eacute consenso entre pesquisadores que as plantas crescidas em vasos nunca
alcanccedilam seu potencial maior conforme imagens de suas raiacutezes mostram Uma
teacutecnica meacutedica da imagem chamada a imagem de ressonacircncia magneacutetico (MRI)
foi usada por investigadores para capturar instantacircneos da raiz da planta no vaso
As figuras obtidas revelam que as raiacutezes ldquodetectam o tamanho do vasordquo e emitem
um sinal que resulta na restriccedilatildeo o crescimento da planta (POORTER et al 2012)
Poorter et al (2012) esclarecem que a maioria das experiecircncias em
biologia de plantas usa plantas crescidas em algum tipo de recipiente ou vaso
Uma meta-anaacutelise em 65 estudos que analisaram o efeito do tamanho do vaso no
0
05
1
15
2
25
1s 3s 5s 7s 9s 11s 13s 15s 17s 19s
Ce
ntiacute
met
ros
po
r d
ia
Evoluccedilatildeo da taxa meacutedia diaacuteria de crescimento de Artemisia annua em casa de vegetaccedilatildeo por
20 semanas
Figura 2 ndash Evoluccedilatildeo da taxa diaacuteria de cresimento de A annua em casa de vegetaccedilatildeo por 20 semanas (s)
13
crescimento e em variaacuteveis afins foi conduzida e verificou que em meacutedia dobrar o
tamanho do vaso aumentou a produccedilatildeo da biomassa da planta em 43 Uma
anaacutelise adicional de efeitos do tamanho do vaso nos componentes afins do
crescimento sugere que o crescimento reduzido em vasos menores eacute causado
principalmente por uma reduccedilatildeo na fotossiacutentese por aacuterea da folha da unidade
mais do que por mudanccedilas na morfologia da folha ou no alocamento de
biomassa O tamanho apropriado do vaso dependeraacute logicamente do tamanho
das plantas que crescem neles Baseado em vaacuterias linhas da evidecircncia noacutes
sugerimos que um tamanho apropriado do vaso eacute um no qual a biomassa da
planta natildeo exceda 1 g L-1 Na praacutetica atual da pesquisa 65 das experiecircncias
excedem essa referecircncia Noacutes sugerimos que os investigadores devam
considerar com cuidado o tamanho do vaso em suas experiecircncias porque os
vasos pequenos podem mudar resultados experimentais e sabotar a finalidade da
experiecircncia
No presente ensaio de vasos foi obtido uma massa seca da parte aeacuterea
meacutedia de 2995g com um coeficiente de variaccedilatildeo de 3001 com uma planta por
vaso com dois transplantes para ganho de volume de solo a ser explorado O
corte das plantas se deu com 80 dias apoacutes o transplante
Quiteacuterio (2006) tambeacutem em ensaio de vasos obteve a meacutedia 25g de massa
seca de A annua em ensaio de vasos com duas plantas onde a colheita foi feita
75 dias apoacutes a semeadura no preacute-florescimento Os dois resultados apresentam
coerecircncia entre si
O ataque de cochonilhas observado era esperado como um reflexo natural
do estresse das plantas que satildeo submetidas ao cultivo em vaso em casa-de-
vegetaccedilatildeo
14
CONCLUSAtildeO
Nas condiccedilotildees do presente ensaio concluiu-se que o cultivo de Artemisia annua
em vasos e em casa-de-vegetaccedilatildeo eacute viaacutevel e pode ser notavelmente expressivo
com porte superior a 15m de altura e massa seca da parte aeacuterea meacutedia em torno
de 30g
Numa etapa posterior visualizam-se os ensaios objetivando a geraccedilatildeo de uma
tecnologia de produccedilatildeo tendo como alvo a produtividade em artesinina-A que eacute o
componente ativo contra malaacuteria
15
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17
DOCUMENTAacuteRIO FOTOGRAacuteFICO
Foto 1 ndash Mudas na sementeira prontas para transplante - Foto da autora Nayara Carvalho
Foto 2 ndash Mudas de Artemisia annua no dia do transplante ndash Foto da autora Nayara
Carvalho
18
Foto 3 ndash Aspecto geral do ensaio ndash Foto da autora Nayara Carvalho
Foto 4 ndash Suplementaccedilatildeo de substrato ndash Foto do orientador Jean Kleber
19
Foto 5 ndash Aproveitamento pela planta di suplemento de substrato ndash Foto do orientador Jean Kleber
Foto 6 ndash A planta mais alta ao final do ensaio ndash Foto do orientador Jean Kleber
20
Foto 8 ndash Ataque de colchonilhas em A annua ndash Foto da autora Nayara Carvalho
Foto 7 ndash A planta mais baixa ao final do ensaio
viii
RESUMO
A Artemisia annua L (Asteraceae) eacute originaacuteria de regiotildees de clima temperado da
Aacutesia e tem sido utilizada pela medicina tradicional chinesa haacute vaacuterios seacuteculos no
tratamento de malaacuteria A espeacutecie reveste-se portanto de indiscutiacutevel importacircncia
em paiacuteses tropicais onde a presenccedila da malaacuteria ainda preocupa as autoridades
da aacuterea da sauacutede o que eacute o caso da Regiatildeo Centro-Oeste do Brasil O objetivo
do presente trabalho foi estudar o crescimento e o desenvolvimento de A annua
mediante cultivo em vasos em casa de vegetaccedilatildeo As sementes de Aannua
foram produzidas em campo da proacutepria estaccedilatildeo e utilizadas para a semeadura em
sementeiras tipo caixa contendo a mistura EEB (Estaccedilatildeo Experimental de Biologia
da UnB ndash Brasiacutelia- DF) mais a formulaccedilatildeo 4-14-8 na dose de 100g para 40L da
mistura Apoacutes 42 dias da semeadura foram selecionadas 20 mudas que estavam
no ponto de transplante (meacutedia de 15 cm de altura) Dessa forma foram
transplantadas para vasos com capacidade para 25L preenchidos com a mistura
EEB Apoacutes nove semana de mensuraccedilotildees de altura as plantas foram pesadas
para obtenccedilatildeo das massas fresca e seca da parte aeacuterea Nas condiccedilotildees do
presente ensaio concluiu-se que o cultivo de Artemisia annua em vasos e em
casa-de-vegetaccedilatildeo eacute viaacutevel e pode ser notavelmente expressivo com porte
superior a 15m de altura e massa seca da parte aeacuterea com meacutedia de 30g
1
INTRODUCcedilAtildeO
A Artemisia annua L (Asteraceae) eacute originaacuteria de regiotildees de clima
temperado da Aacutesia e tem sido utilizada pela medicina tradicional chinesa haacute vaacuterios
seacuteculos no tratamento de malaacuteria Pesquisadores chineses estudaram mais de 30
espeacutecies do gecircnero Artemisia para confirmar a atividade antimalaacuterica das
mesmas Somente A annua e A apiacea Hance foram eficazes em combater
o Plasmodium vivax e o Plasmodium falciparum agentes etimoloacutegicos da malaacuteria
(DIAS 1997) Entre os metaboacutelitos secundaacuterios isolados das diversas espeacutecies do
gecircnero Artemisia os mais caracteriacutesticos satildeo as lactonas sesquiterpecircnicas
(RODRIGUES et al 2006)
As lactonas sesquiterpecircnicas pertencem a um grande grupo de produtos
naturais encontradas principalmente em plantas de vaacuterios gecircneros da famiacutelia
Asteraceae (SANTOS 2009)
A espeacutecie reveste-se portanto de indiscutiacutevel importacircncia em paiacuteses
tropicais onde a presenccedila da malaacuteria ainda preocupa as autoridades da aacuterea da
sauacutede o que eacute o caso da Regiatildeo Centro-Oeste do Brasil
Mediante solicitaccedilatildeo ao pesquisador Pedro Melillo Magalhatildees do CPQBA
(Centro Pluridisciplinar de pesquisas quiacutemicas bioloacutegicas e agriacutecolas ndash vinculado
agrave Unicamp ndash Universidade Estadual de Campinas) foi obtida uma pequena
partida de sementes de A annua com a qual obtivemos plantas adultas agrave campo
que produziram sementes feacuterteis possibilitando por conseguinte a realizaccedilatildeo de
ensaios agronocircmicos na Estaccedilatildeo Experimental de Biologia da Universidade de
Brasiacutelia (EEB ndash UnB)
O estudo do comportamento desta espeacutecie em nossa regiatildeo reveste-se de
consideraacutevel importacircncia uma vez que eacute fato conhecido de pesquisas da aacuterea que
o perfil de aromaacuteticos e outros componentes quiacutemicos varia bastante conforme a
condiccedilotildees ambientais em que as plantas satildeo cultivadas
Desta forma satildeo necessaacuterios ensaios agronocircmicos precedentes aos
ensaios quiacutemicos para que haja uma convivecircncia inicial com a espeacutecie visando o
conhecimento de suas possibilidades quanto agrave produccedilatildeo de mateacuteria prima
2
OBJETIVO
O objetivo do presente trabalho foi estudar o crescimento e o
desenvolvimento de A annua mediante cultivo em vasos em casa de vegetaccedilatildeo
REVISAtildeO BIBLIOGRAacuteFICA
Descriccedilatildeo da planta
Artemisia annua L (Syn Artemisia chamomilla C Winkl) Asteraceae
Nome vulgar Sweet wormwood eacute uma erva doce aromaacutetica com a flores
pequenas amarelas em capiacutetulos A annua conteacutem o componente quiacutemico
artemisinina em suas partes aeacutereas que satildeo usadas em drogas anti-malaacutericas
Outros nomes satildeo Sweet annie Wormwood annual (inglecircs) qing hao (chinecircs
artemiacutesia verde azulada) Difundida e naturalizada extensamente eacute
frequentemente abundante natildeo sendo do interesse do conservacionismo pois
ainda natildeo foi avaliada de acordo com criteacuterios da lista vermelha do IUCN ndash
International Union for Conservation of Nature Tem como habitat colinas bordas
das florestas e terrenos baldios Trata-se de uma planta medicinal antimalaacuterica
importante cujo oacuteleo essencial eacute usado tambeacutem em cosmeacuteticos A planta eacute
cultivada como um ornamental na Indoneacutesia (httpwwwkeworgplants-
fungiArtemisia-annuahtm)
A annua eacute nativa da Euraacutesia do sudeste da Europa (incluindo Albacircnia
Bulgaacuteria Montenegro Romecircnia Ruacutessia Servia Turquia) ao Vietnam e norte da
India Naturalizado em muitos paiacuteses (incluindo Argentina Aacuteustria a repuacuteblica
Tcheca Franccedila Alemanha Hungria Itaacutelia Polocircnia Eslovaacutequia Espanha Suiacuteccedila e
Estados Unidos) Foi registrada como de crescimento ruderal no Reino Unido
levada por paacutessaros ou nas latildes tendo sido cultivada experimentalmente tatildeo ao
norte como na Finlacircndia A espeacutecie e foi usada na China para tratar febres por
mais de 2000 anos O gecircnero Artemisia pertence agrave famiacutelia Asteraceae
(Compositae) que inclui plantas bem conhecidas usadas na medicina
perfumaria alimentaccedilatildeo e na induacutestria da bebida tal como a A dracunculus
(estragatildeo) A absinthium (absinto) e A vulgaris (artemiacutesia)
(httpwwwkeworgplants-fungiArtemisia-annuahtm )
3
A descriccedilatildeo botacircnica menciona que A annua eacute uma planta anual de haste
uacutenica glabra doce-aromaacutetica que cresce ateacute 1 m de altura (2 m como ruderal) A
haste eacute ereta nervada e marrom ou violeta-marrom As folhas basais satildeo 3-
pinatissectas (divididas trecircs vezes em foliacuteolos profundamente cortados) 3-5 cm
de comprimento e 2-4 cm de largura as folhas superiores satildeo 1-2-pinatissectas
menores e seacutesseis (sem peciacuteolo) Os capiacutetulos satildeo globosas com 2-25
miliacutemetros de diacircmetro em paniacuteculas frouxas O invoacutelucro (seacuterie das braacutecteas em
torno do capiacutetulo) eacute composto de braacutecteas glabras imbricadas As braacutecteas
exteriores satildeo verdes e linear-oblongas as braacutecteas internas satildeo brilhantes e
oval-arredondadas com uma margem larga fina seca Os capiacutetulos satildeo
disciformes e compostos de floretes filiformes exteriores (femininas) e de floretes
internos no disco (hermafroditas) Os floretes centrais numerosos do disco satildeo
esverdeados ou amarelados O fruto eacute um aquecircnio amarelo-marrom de parede
fina (pequeno seco) 06-08 miliacutemetros de tamanho com uma superfiacutecie
brilhante marcada com sulcos verticais e contendo uma uacutenica semente Os
aquecircnios natildeo tecircm nenhum papo e portanto natildeo satildeo dispersados pelo vento
como satildeo muitos outros da famiacutelia Asteraceae (Compositae)
(httpwwwkeworgplants-fungiArtemisia-annuahtm)
COMPOSICcedilAtildeO E USO A espeacutecie A annua eacute conhecida como ldquoQing Haordquo na China e eacute a fonte da
Medicina Tradicional Chinesa (MTC) que foi usada por mais de 2000 anos para
aliviar febres Na MTC prescreve-se frequentemente em combinaccedilatildeo com outros
ervas para tratar (aleacutem agraves febres) a icteriacutecia a dor de cabeccedila a vertigem e os
sangramentos nasais A pesquisa cientiacutefica da atividade anti-malaacuterica de A annua
comeccedilou no princiacutepio dos anos 70 em resposta agrave resistecircncia crescente agraves drogas
anti-malaacutericas estabelecidas por parte dos protozoaacuterios parasitas que causam a
malaacuteria (Protozoaacuterios do gecircnero Plasmodium ) O componente quiacutemico
artemisinina que ocorre naturalmente nas folhas da Aannua eacute um potente
agente anti-malaacuterico e pode matar o parasita mais agressivo o Plasmodium
falciparum (eacute seletivamente toacutexico ao estaacutegio assexual de eritrocito dos parasitas)
A artemisinina extraiacuteda de Aannua tornou-se extremamente importante em tratar
a malaacuteria desde que a resistecircncia do parasita a muitos outros antimalaacutericos se
tornou difundida (httpwwwkeworgplants-fungiArtemisia-annuahtm)
4
A planta A annua (Asteraceae) eacute listada na medicina chinesa como um
remeacutedio para vaacuterias febres incluindo a malaacuteria e contem um bem estabelecido
composto antimalaacuterico a artemisinina Neste estudo um hiacutebrido de A annua foi
cultivado com sucesso na Aacutefrica Central As partes aeacutereas da planta continham
063 - 070 de artemisinina por massa seca e aproximadamente 40 desta
artemisinina poderia ser extraiacuteda por meacutetodos simples da preparaccedilatildeo do chaacute
Cinco pacientes da malaacuteria que foram tratados com A annua mostraram um
desaparecimento raacutepido do parasita dentro de 2-4 dias Uma experimentaccedilatildeo
adicional com os 48 pacientes de malaacuteria mostrou um desaparecimento do
parasita em 44 pacientes (92) dentro de 4 dias Ambas as experimentaccedilotildees
mostraram uma melhoria marcada dos sintomas Estes resultados justificam
pesquisas adicionais do efeito antimalaacuterico de preparaccedilotildees de A annua
(MUELLER et al 2000)
Em fases de crescimento e desenvolvimento diferentes foi pesquisada a
variaccedilatildeo na quantidade e na qualidade do oacuteleo essencial de A annua incluindo
preacute- floraccedilatildeo floraccedilatildeo e poacutes - floraccedilatildeo Os oacuteleos foram obtidos por hidrodestilaccedilatildeo
das amostras secas ao ar Os rendimentos dos oacuteleos ( pp) nas diferentes
fases foram da ordem de preacute- floraccedilatildeo (097) floraccedilatildeo (1 23) e poacutes- floraccedilatildeo
(087) Os oacuteleos foram analisados por espectrometria de massa e cromatografia
em fase gasosa No total 32 35 e 33 constituintes foram identificados e
quantificados no oacuteleo de preacute - floraccedilatildeo floraccedilatildeo e poacutes - floraccedilatildeo representando
9767 92 e 92 4 dos oacuteleos respectivamente Cacircnfora 18-cineol canfeno
spatulenol alfandashpineno e artemiacutesia-cetona foram os principais componentes em
todas as amostras Monoterpenos eram o principal grupo de compostos em preacute-
floraccedilatildeo (6996) floraccedilatildeo (7244) e poacutes- floraccedilatildeo (7096)
(MOHAMMADREZA 2008)
A comparaccedilatildeo do perfil de cromatografia de gaacutes do oacuteleo essencial da A
annua produzido no Brasil com aqueles de outras origens revelou a variaccedilatildeo
significativa de seus constituintes O comportamento sazonal do iacutendice do
artemisinina 13 contra a produccedilatildeo de oacuteleo essencial foi observado durante um
periacuteodo da colheita A viabilidade econocircmica de diversos metodologias de
purificaccedilatildeo para a produccedilatildeo da artemisinina foi testada Foi produzido o composto
anti-malaacuterico 13 a um custo total de US$ 115 por grama (FOGLIO 1996)
5
ARTEMISININA
Artemisinina eacute uma lactona sesquiterpecircnica com uma ponte endoperoacutexido
e foi produzida semi-sinteticamente como uma droga antimalaacuterica A eficaacutecia do
chaacute feito de A annua no tratamento da malaacuteria eacute contencioso De acordo com
alguns autores a artemesinina natildeo eacute soluacutevel em aacutegua e as concentraccedilotildees nestas
infusotildees satildeo consideradas insuficientes para tratar a malaacuteria (MUELER et al
2004 RATH et al 2004 JANSEN 2006)
Em 2004 o ministro da sauacutede da Etioacutepia mudou a droga antimalaacuterica de
primeira linha da Etioacutepia de sulfadoxinaprimetamina (Fansidar) que tem uma
taxa de falha em meacutedia de 36 no tratamento para a artemetherlumefantrine
(Coartem) uma terapia de droga que conteacutem a artemisinina que eacute 100 eficaz
quando usado corretamente apesar de uma relativa falta mundial do produto do
derivado de A annua (MALARIA UPDATE 20052013)
A malaacuteria eacute causada primeiramente pelo Plasmodium falciparum que
invade as hemaacutecias e conteacutem heme-grupos ricos em ferro (na forma do
hemozoina) (POSNER amp OrsquoNEIL 2004)
O mecanismo de accedilatildeo proposto da artemisinina contra a malaacuteria envolve a
clivagem de pontes de endoperoacutexido pelo ferro produzindo os radicais livres
(ferro-oxo hipervalente espeacutecies epoacutexidos aldeiacutedos e compostos do dicarbonil)
que danificam as macromoleacuteculas bioloacutegicas causando estresse oxidativo nas
ceacutelulas do parasita (CUMMING 1997)
Com a possibilidade de isolarem maiores quantidades de artemisinina
(quinghaosu) plantas de A annua foram cultivadas por Liersch et al (1986) e
analisadas em estaacutegios diferentes de desenvolvimento O iacutendice mais elevado de
artemisinina foi encontrado imediatamente antes do florescimento Era tambeacutem
possiacutevel correlacionar o desenvolvimento das plantas com o iacutendice maacuteximo do
artemisinina As plantas de A annua cultivadas de vaacuterias outras fontes tambeacutem
foram examinadas para o iacutendice de artemisinina De acordo com os resultados
obtidos nenhuma dessas plantas contiveram quantidades suficientes do
composto (artemisinina) para justificar isolamento em uma escala teacutecnica Aleacutem
disso outras espeacutecies de Artemisia foram testadas e foi encontrada artemisinina
em somente uma outra espeacutecie Para aumentar a quantidade de artemisinina
durante o periacuteodo do crescimento da planta foram testados dois reguladores
6
hormonais de crescimento em A annua genoacutetipo 811 Os resultados mostraram
que o chlormequat podia aumentar o teor do composto(artemisinina) em 30 em
relaccedilatildeo agraves plantas natildeo tratadas Foram encontrados tambeacutem alguns discretos
efeitos dos reguladores de crescimento na morfologia dos trichomas glandulares
Para finalidades de produccedilatildeo plantas com um iacutendice elevado de
artemisinina satildeo requeridas Woerdenbag et al (1994) acompanharam o
desenvolvimento do conteuacutedo de artemisinina e dos sesquiterpenes
biosinteticamente relacionados aacutecido artemisiacutenico arteannuina B e artemisiteno
em plantas de A annua durante um periacuteodo da vegetaccedilatildeo no Vietnam onde esta
espeacutecie eacute indiacutegena Aleacutem disso o iacutendice do oacuteleo essencial e sua composiccedilatildeo
foram estudados As amostras das folhas gemas as flores ou as flores de poacutes-
florescimento e frutos foram analisados nos diferentes estaacutegios vegetativo (5 6 e
8 meses de idade) na formaccedilatildeo maciccedila das gemas (9 meses) no pleno
florescimento (10 meses) e poacutes-florescimento (10frac12 meses) O iacutendice mais
elevado de artemisinina (086 da massa seca) estava nas folhas de plantas com
5 meses de idade Neste estaacutegio o rendimento mais elevado da folha tambeacutem foi
encontrado Subsequentemente o iacutendice de artemisinina caiu gradualmente Na
idade de 5 meses os maiores conteuacutedos de aacutecido artemisinico e arteannuina-B
016 e 008 da massa seca respectivamente foram tambeacutem encontrados O
artemisiteno estava presente em todos os estaacutegios do desenvolvimento variando
de 0002 a 009 da massa seca Com 19 volumemassa o iacutendice do oacuteleo
essencial (OE) foi maacuteximo imediatamente antes do florescimento e foi composto
de 55 de monoterpenos e 45 de sesquiterpenes Em todos os outros estaacutegios
(04 ndash 10 volumemassa do oacuteleo essencial) esta relaccedilatildeo foi de 30 70 Os
principais componentes do OE foram cacircnfora e germacreno-D
Observaccedilotildees mostraram que o rendimento da artemisinina esteve
correlacionado positivamente com o rendimento da folha e o nuacutemero das
colheitas Os rendimentos elevados de artemisinina ocorreram quando a colheita
produziu folhas artemisinina-ricas acompanhadas pelo menor crescimento
possiacutevel do tecido da haste alcanccedilado em colheitas muacuteltiplas em plantas
crescidas a tempo integral e plantadas mais cedo As colheitas crescidas por ge30
semanas e colhidas trecircs a quatro vezes deram os rendimentos meacutedios de
441plusmn142 e de 742plusmn156 respectivamente Muito mais altos do que o rendimento
maacuteximo de 25 quilogramas haminus1 relatado para a A annua em estudos anteriores
7
Concluiu-se que para obter artemisinina em altos niacuteveis A annua deve ser
colhida quatro vezes (KUMAR et al 2004)
ASPECTOS AGRONOcircMICOS
Propagaccedilatildeo
Em meacutedia 1000 sementes pesam 003 g e natildeo diminuem sua viabilidade
ao secar Satildeo acessiacuteveis ao armazenamento agrave frio de longo prazo Germinam de
janeiro a marccedilo A germinaccedilatildeo de 100 foi obtida em um meio de germinaccedilatildeo de
aacutegar a 1 em uma temperatura de 15degC sob um fotoperiacuteodo 816 horas claro-
escuro (MOHAMMADREZA 2008)
A Artemisia annua eacute plantada extensamente e comercialmente
principalmente como uma fonte de oacuteleos essenciais e tambeacutem de artemisinina
sobretudo em regiotildees da China e VietnamNessas regiotildees o ciclo da planta em
condiccedilotildees naturais chega a 10 meses Na Europa e na Ameacuterica as plantas
crescem mais rapidamente terminando seu ciclo de vida em apenas seis meses
mesmo no campo Cresce melhor em talhotildees abertos e ensolarados em solos
arenosos e aluviais feacuterteis que sejam neutros a ligeiramente aacutecidos e que tenham
uma boa retenccedilatildeo de umidade e natildeo tolera a seca ou o encharcamento As
sementes germinam de janeiro a marccedilo e a frutificaccedilatildeo (colheita das sementes)
ocorre entre outubro e novembro (httpwwwkeworgplants-fungiArtemisia-
annuahtm)
Conceiccedilatildeo et al (2013) testaram a germinaccedilatildeo da semente de A annua
cultivar Silves sob duas condiccedilotildees ambientais a fim de fornecer informaccedilotildees
sobre seu cultivo Na primeira condiccedilatildeo realizou-se o teste padratildeo com 4 lotes de
100g de sementes semeadas em gerbox sobre papel mata-borratildeo e dispostas
em germinador agrave temperatura de 25-30deg C expostas agrave luz durante 8 horas diaacuterias
e umedecidas quando necessaacuterio ateacute sua emergecircncia Na segunda etapa foi
realizado o mesmo procedimento anterior poreacutem as sementes permaneceram no
germinador em ausecircncia de luz sob as mesmas condiccedilotildees de temperatura e
umidade Segundo anaacutelise estatiacutestica em Tukey a 5 aplicada aqui sobre as
meacutedias de cada lote de 100g sementes os tratamentos obtiveram diferenccedilas
significativas sendo que as sementes expostas agrave luz obtiveram maiores valores
8
de germinaccedilatildeo Em ambiente com total ausecircncia de luz as sementes obtiveram
baixiacutessima taxa de germinaccedilatildeo no mesmo periacuteodo que as sementes em ambiente
iluminado Esse fato indica que a semente de A annua eacute fotoblaacutestica positiva e
assim necessita de um miacutenimo de luz para que ocorra sua germinaccedilatildeo por esse
motivo natildeo podem ser enterradas e sua semeadura deve ser apenas a lanccedilo ou
em superfiacutecie sem cobertura com terra Esta caracteriacutestica eacute comum agrave muitas
espeacutecies que produzem sementes miuacutedas
Adubaccedilatildeo
Em 2004 e 2005 um estudo foi realizado com o objetivo de determinar o
rendimento os componentes do rendimento e o iacutendice da artemisinina de A
annua cultivada sob quatro aplicaccedilotildees do nitrogecircnio (0 40 80 e 120 quilogramas
haminus1) na regiatildeo de Ccedilukurova na Turquia As experimentaccedilotildees de campo foram
conduzidas na universidade de Ccedilukurova no departamento de agricultura da
faculdade Nesse estudo a altura da planta o nuacutemero de ramos o rendimento
fresco e seco da erva o rendimento fresco e seco da folha o iacutendice do oacuteleo
essencial e o iacutendice da artemisinina (por cromatografia liacutequida pelo HPLC de
desempenho elevado) foram examinados Pela anaacutelise de variaccedilatildeo as doses de
nitrogecircnio natildeo tiveram nenhum efeito estatiacutestico nas caracteriacutesticas investigadas
agrave exceccedilatildeo do iacutendice de artemisinina Esse iacutendice nas folhas secas foi afetado
significativamente pelas aplicaccedilotildees do nitrogecircnio que variaram de 632 a 2750
mg 100 gminus1 (OZGUVEN et al 2008)
Outros aspectos
Uma pesquisa desenvolvida em MEDIPLANT (Suiacuteccedila) e no CPQBA-
UNICAPM (Brasil) envolveu a seleccedilatildeo e produccedilatildeo de genoacutetipos ricos em
artemisinina apresentando biomassa elevada seguido por uma segunda seleccedilatildeo
para a adaptaccedilatildeo agraves circunstacircncias climaacuteticas do Brasil Com hibridizaccedilatildeo
controlada entre genoacutetipos selecionados da China e do Vietnam o ganho
geneacutetico foi obtido nos termos do iacutendice da artemisinina e da uniformidade da
populaccedilatildeo Com o aumento do iacutendice de biomassa e da artemisinina (estimado
pela monitoraccedilatildeo analiacutetica) era possiacutevel aumentar a produccedilatildeo de artemisinina de
9
5 Kgha (populaccedilatildeo baacutesica) para aproximadamente 25 Kgha (populaccedilatildeo
geneticamente produzida) No cultivo realizado no Brasil em 3 de 7 linhas
hiacutebridas 239 de x 1V Ch x Viet55 e 1V x 243 produziram respectivamente
2543 2305 e 2127 quilogramas de artemisininahacorte com as 2 colheitas
possiacuteveis por o ano O cultivo destas linhas hiacutebridas novas no Brasil eacute uma
teacutecnica praticaacutevel e altamente competitiva devido agrave produccedilatildeo obtida
(MAGALHAtildeES et al 1997)
Foi pesquisado o efeito do aumento da irradiacircncia (15 a 100 da luz solar
cheia L15 a L100) sobre o crescimento a taxa fotossinteacutetica liacutequida maacutexima
(Pmax) a compensaccedilatildeo (CI) a saturaccedilatildeo de irradiacircncia de A annua e a produccedilatildeo
de artemisinina Na luz solar plena A annua apresentou uma capacidade elevada
de fotossiacutentese com irradiacircncia baixa manteve um Pmax relativamente elevado
com um CI baixo O crescimento da altura e do diacircmetro biomassa total e da
folha e iacutendice de artemisinina diminuiu com a diminuiccedilatildeo da irradiacircncia que pocircde
ser conectado com a fotossiacutentese mais baixa na irradiacircncia mais baixa em
relaccedilatildeo agrave irradiacircncia mais elevada As irradiacircncias mudaram a alocaccedilatildeo de
biomassa em A annua A relaccedilatildeo massa de folhamassa total da espeacutecie
aumentou com a diminuiccedilatildeo da irradiacircncia mas a relaccedilatildeo raizmassa total e
raizmassa da parte aeacuterea aumentaram geralmente com a irradiacircncia crescente
Assim A annua pode crescer na luz solar parcial e plena Entretanto o
rendimento elevado da biomassa e da artemisinina requerem o cultivo em um
habitat aberto com luz solar adequada (WANG et al 2008)
MATERIAIS E MEacuteTODOS
O ensaio foi conduzido na Estaccedilatildeo Experimental de Biologia da
Universidade de Brasiacutelia (EEB ndash UnB) em casa-de-vegetaccedilatildeo do tipo
ldquoglasshouserdquo no periacuteodo de 19 de abril de 2013 a 6 de dezembro de 2013
(primeiro e segundo semestres respectivamente) Durante o ensaio a casa-de-
vegetaccedilatildeo apresentou uma temperatura meacutedia de aproximadamente 250deg C com
meacutedia das miacutenimas de 1325degC e das maacuteximas de 3675degC aferidas com
termocircmetro convencional de maacutexima e miacutenima O iacutendice de radiaccedilatildeo luminosa
esteve em trono de 50 determinado por fotocircmetro automaacutetico modelo Asahi-
Pentax SP-500
10
A partida de sementes de Aannua foi doada pelo pesquisador Pedro
Melillo Magalhatildees oriundas do CPQBA ndash UNICAMP e produzidas em campo da
proacutepria estaccedilatildeo e utilizadas para a semeadura em sementeiras tipo caixa
contendo a mistura EEB (Estaccedilatildeo Experimental de Biologia) com a seguinte
composiccedilatildeo Latossolo vermelho de cerrado areia vermiculita e composto
orgacircnico na proporccedilatildeo 3311 respectivamente mais a formulaccedilatildeo 4-14-8 na
dose de 100g para 40L da mistura Apoacutes 42 dias da semeadura foram
selecionadas 20 mudas que estavam no ponto de transplante (meacutedia de 15 cm
de altura) Dessa forma foram transplantadas para vasos com capacidade para
25L preenchidos com a mistura EEB
Apoacutes o transplante a altura da parte aeacuterea de todas as plantas foi aferida
semanalmente com o uso de uma trena com o objetivo de desenhar-se a curva
de crescimento As mediccedilotildees tiveram iniacutecio uma semana apoacutes o transplante no
dia 14 de maio
No dia 26 de julho de 201349 dias apoacutes o transplante as plantas foram
transferidas dos vasos de 25L para vasos com maior capacidade (325L) para
favorecer o seu crescimento e desenvolvimento e no dia 17 de setembro102 dias
apoacutes o transplante foi feita uma suplementaccedilatildeo de terra para as 20 plantas com o
mesmo objetivo mediante a colocaccedilatildeo por baixo de um outro vaso de mesmo
tamanho contendo metade de seu volume em Substrato EEB Isso permitiu que
as raiacutezes crescessem no volume adicional de mistura atraveacutes dos furos de
drenagem do vaso original
O controle de plantas daninhas foi feito manualmente e o controle
fitossanitaacuterio atraveacutes de acompanhamento e sucessivas observaccedilotildees Ao fim do
ensaio foi observada uma pequena infestaccedilatildeo com cochonilhas As cochonilhas
foram identificadas por Pseudococcus citri Risso ndash mais conhecida por
ldquocochonilha algodatildeordquo Foi parcialmente controlada em curto prazo com uma
pulverizaccedilatildeo manual de soluccedilatildeo de detergente (10 ml 1 litro de aacutegua)
Ao fim do ensaio dia 18 de outubro foram obtidas as massas fresca e
seca das plantas bem como os coeficientes de variaccedilatildeo dos dados
11
RESUTADOS E DISCUSSAtildeO
Os resultados do presente ensaio encontram-se representados nas Figuras
4 e 5 as quais representam respectivamente a curva de crescimento de Aannua
em vinte semana (s) em casa-de-vegetaccedilatildeo e a evoluccedilatildeo da taxa meacutedia diaacuteria de
crescimento
Observando-se a Figura 2 que apresenta a evoluccedilatildeo da taxa meacutedia de
crescimento verificou-se que entre a quinta e a setima semanas a taxa meacutedia
diaacuteria de crescimento cresceu de 08 cm ao dia para em torno de 20 cm por dia
tendo havido um decrescimo e um estabilidade entre a oitava e a deacutecima segunda
semanas quando entatildeo ocorreu o segundo pico passando a taxa meacutedia diaacuteria de
crescimento de 12 cm para 18 cm seguindo-se um decrescimo ateacute 05 cmdia
nas deacutecima sexta e deacutecima seacutetimas semanas quando entatildeo houve o terceiro
pico na deacutecima oitava semana atingindo 08cmdia e novamente decaindo ateacute 04
cmdia na vigeacutesima semana
0
50
100
150
1s 3s 5s 7s 9s 11s 13s 15s 17s 19s
Alt
ura
em
cm
Crescimento meacutedio de Artemisia annua em vasos em casa de vegataccedilatildeo durante 20 semanas
(s)
Figura 1 ndash Crescimento meacutedio de A annua em vasos em casa-de-vegetaccedilatildeo durante 20 semanas (s) ndash Observa-se que a altura das plantas aumentou
notavelmente a partir da quinta semana apoacutes o transplante correspondendo ao primeiro pico de crescimento
12
Os picos de crescimento de A annua submetida ao cultivo em vasos em
casa-de-vegetaccedilatildeo podem ser explicados pelas interferecircncias do pesquisador que
visava maximizar o desenvolvimento das plantas O primeiro pico pode ser
atribuiacutedo ao padratildeo de crescimento da planta Por ocasiatildeo da primeira troca de
vasos quando a planta ganhou 2145 de volume de substrato para explorar
teria havido o segundo pico por volta da deacutecima segunda semana O terceiro pico
se deu em consequecircncia da segunda suplementaccedilatildeo de substrato ocorrida por
volta da deacutecima seacutetima semana
O aproveitamento da segunda suplementaccedilatildeo foi efetivo tendo as plantas
explorado o volume de substrato adicional em sua totalidade ocupando-o por
inteiro o volume (Figura 6)
Eacute consenso entre pesquisadores que as plantas crescidas em vasos nunca
alcanccedilam seu potencial maior conforme imagens de suas raiacutezes mostram Uma
teacutecnica meacutedica da imagem chamada a imagem de ressonacircncia magneacutetico (MRI)
foi usada por investigadores para capturar instantacircneos da raiz da planta no vaso
As figuras obtidas revelam que as raiacutezes ldquodetectam o tamanho do vasordquo e emitem
um sinal que resulta na restriccedilatildeo o crescimento da planta (POORTER et al 2012)
Poorter et al (2012) esclarecem que a maioria das experiecircncias em
biologia de plantas usa plantas crescidas em algum tipo de recipiente ou vaso
Uma meta-anaacutelise em 65 estudos que analisaram o efeito do tamanho do vaso no
0
05
1
15
2
25
1s 3s 5s 7s 9s 11s 13s 15s 17s 19s
Ce
ntiacute
met
ros
po
r d
ia
Evoluccedilatildeo da taxa meacutedia diaacuteria de crescimento de Artemisia annua em casa de vegetaccedilatildeo por
20 semanas
Figura 2 ndash Evoluccedilatildeo da taxa diaacuteria de cresimento de A annua em casa de vegetaccedilatildeo por 20 semanas (s)
13
crescimento e em variaacuteveis afins foi conduzida e verificou que em meacutedia dobrar o
tamanho do vaso aumentou a produccedilatildeo da biomassa da planta em 43 Uma
anaacutelise adicional de efeitos do tamanho do vaso nos componentes afins do
crescimento sugere que o crescimento reduzido em vasos menores eacute causado
principalmente por uma reduccedilatildeo na fotossiacutentese por aacuterea da folha da unidade
mais do que por mudanccedilas na morfologia da folha ou no alocamento de
biomassa O tamanho apropriado do vaso dependeraacute logicamente do tamanho
das plantas que crescem neles Baseado em vaacuterias linhas da evidecircncia noacutes
sugerimos que um tamanho apropriado do vaso eacute um no qual a biomassa da
planta natildeo exceda 1 g L-1 Na praacutetica atual da pesquisa 65 das experiecircncias
excedem essa referecircncia Noacutes sugerimos que os investigadores devam
considerar com cuidado o tamanho do vaso em suas experiecircncias porque os
vasos pequenos podem mudar resultados experimentais e sabotar a finalidade da
experiecircncia
No presente ensaio de vasos foi obtido uma massa seca da parte aeacuterea
meacutedia de 2995g com um coeficiente de variaccedilatildeo de 3001 com uma planta por
vaso com dois transplantes para ganho de volume de solo a ser explorado O
corte das plantas se deu com 80 dias apoacutes o transplante
Quiteacuterio (2006) tambeacutem em ensaio de vasos obteve a meacutedia 25g de massa
seca de A annua em ensaio de vasos com duas plantas onde a colheita foi feita
75 dias apoacutes a semeadura no preacute-florescimento Os dois resultados apresentam
coerecircncia entre si
O ataque de cochonilhas observado era esperado como um reflexo natural
do estresse das plantas que satildeo submetidas ao cultivo em vaso em casa-de-
vegetaccedilatildeo
14
CONCLUSAtildeO
Nas condiccedilotildees do presente ensaio concluiu-se que o cultivo de Artemisia annua
em vasos e em casa-de-vegetaccedilatildeo eacute viaacutevel e pode ser notavelmente expressivo
com porte superior a 15m de altura e massa seca da parte aeacuterea meacutedia em torno
de 30g
Numa etapa posterior visualizam-se os ensaios objetivando a geraccedilatildeo de uma
tecnologia de produccedilatildeo tendo como alvo a produtividade em artesinina-A que eacute o
componente ativo contra malaacuteria
15
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17
DOCUMENTAacuteRIO FOTOGRAacuteFICO
Foto 1 ndash Mudas na sementeira prontas para transplante - Foto da autora Nayara Carvalho
Foto 2 ndash Mudas de Artemisia annua no dia do transplante ndash Foto da autora Nayara
Carvalho
18
Foto 3 ndash Aspecto geral do ensaio ndash Foto da autora Nayara Carvalho
Foto 4 ndash Suplementaccedilatildeo de substrato ndash Foto do orientador Jean Kleber
19
Foto 5 ndash Aproveitamento pela planta di suplemento de substrato ndash Foto do orientador Jean Kleber
Foto 6 ndash A planta mais alta ao final do ensaio ndash Foto do orientador Jean Kleber
20
Foto 8 ndash Ataque de colchonilhas em A annua ndash Foto da autora Nayara Carvalho
Foto 7 ndash A planta mais baixa ao final do ensaio
1
INTRODUCcedilAtildeO
A Artemisia annua L (Asteraceae) eacute originaacuteria de regiotildees de clima
temperado da Aacutesia e tem sido utilizada pela medicina tradicional chinesa haacute vaacuterios
seacuteculos no tratamento de malaacuteria Pesquisadores chineses estudaram mais de 30
espeacutecies do gecircnero Artemisia para confirmar a atividade antimalaacuterica das
mesmas Somente A annua e A apiacea Hance foram eficazes em combater
o Plasmodium vivax e o Plasmodium falciparum agentes etimoloacutegicos da malaacuteria
(DIAS 1997) Entre os metaboacutelitos secundaacuterios isolados das diversas espeacutecies do
gecircnero Artemisia os mais caracteriacutesticos satildeo as lactonas sesquiterpecircnicas
(RODRIGUES et al 2006)
As lactonas sesquiterpecircnicas pertencem a um grande grupo de produtos
naturais encontradas principalmente em plantas de vaacuterios gecircneros da famiacutelia
Asteraceae (SANTOS 2009)
A espeacutecie reveste-se portanto de indiscutiacutevel importacircncia em paiacuteses
tropicais onde a presenccedila da malaacuteria ainda preocupa as autoridades da aacuterea da
sauacutede o que eacute o caso da Regiatildeo Centro-Oeste do Brasil
Mediante solicitaccedilatildeo ao pesquisador Pedro Melillo Magalhatildees do CPQBA
(Centro Pluridisciplinar de pesquisas quiacutemicas bioloacutegicas e agriacutecolas ndash vinculado
agrave Unicamp ndash Universidade Estadual de Campinas) foi obtida uma pequena
partida de sementes de A annua com a qual obtivemos plantas adultas agrave campo
que produziram sementes feacuterteis possibilitando por conseguinte a realizaccedilatildeo de
ensaios agronocircmicos na Estaccedilatildeo Experimental de Biologia da Universidade de
Brasiacutelia (EEB ndash UnB)
O estudo do comportamento desta espeacutecie em nossa regiatildeo reveste-se de
consideraacutevel importacircncia uma vez que eacute fato conhecido de pesquisas da aacuterea que
o perfil de aromaacuteticos e outros componentes quiacutemicos varia bastante conforme a
condiccedilotildees ambientais em que as plantas satildeo cultivadas
Desta forma satildeo necessaacuterios ensaios agronocircmicos precedentes aos
ensaios quiacutemicos para que haja uma convivecircncia inicial com a espeacutecie visando o
conhecimento de suas possibilidades quanto agrave produccedilatildeo de mateacuteria prima
2
OBJETIVO
O objetivo do presente trabalho foi estudar o crescimento e o
desenvolvimento de A annua mediante cultivo em vasos em casa de vegetaccedilatildeo
REVISAtildeO BIBLIOGRAacuteFICA
Descriccedilatildeo da planta
Artemisia annua L (Syn Artemisia chamomilla C Winkl) Asteraceae
Nome vulgar Sweet wormwood eacute uma erva doce aromaacutetica com a flores
pequenas amarelas em capiacutetulos A annua conteacutem o componente quiacutemico
artemisinina em suas partes aeacutereas que satildeo usadas em drogas anti-malaacutericas
Outros nomes satildeo Sweet annie Wormwood annual (inglecircs) qing hao (chinecircs
artemiacutesia verde azulada) Difundida e naturalizada extensamente eacute
frequentemente abundante natildeo sendo do interesse do conservacionismo pois
ainda natildeo foi avaliada de acordo com criteacuterios da lista vermelha do IUCN ndash
International Union for Conservation of Nature Tem como habitat colinas bordas
das florestas e terrenos baldios Trata-se de uma planta medicinal antimalaacuterica
importante cujo oacuteleo essencial eacute usado tambeacutem em cosmeacuteticos A planta eacute
cultivada como um ornamental na Indoneacutesia (httpwwwkeworgplants-
fungiArtemisia-annuahtm)
A annua eacute nativa da Euraacutesia do sudeste da Europa (incluindo Albacircnia
Bulgaacuteria Montenegro Romecircnia Ruacutessia Servia Turquia) ao Vietnam e norte da
India Naturalizado em muitos paiacuteses (incluindo Argentina Aacuteustria a repuacuteblica
Tcheca Franccedila Alemanha Hungria Itaacutelia Polocircnia Eslovaacutequia Espanha Suiacuteccedila e
Estados Unidos) Foi registrada como de crescimento ruderal no Reino Unido
levada por paacutessaros ou nas latildes tendo sido cultivada experimentalmente tatildeo ao
norte como na Finlacircndia A espeacutecie e foi usada na China para tratar febres por
mais de 2000 anos O gecircnero Artemisia pertence agrave famiacutelia Asteraceae
(Compositae) que inclui plantas bem conhecidas usadas na medicina
perfumaria alimentaccedilatildeo e na induacutestria da bebida tal como a A dracunculus
(estragatildeo) A absinthium (absinto) e A vulgaris (artemiacutesia)
(httpwwwkeworgplants-fungiArtemisia-annuahtm )
3
A descriccedilatildeo botacircnica menciona que A annua eacute uma planta anual de haste
uacutenica glabra doce-aromaacutetica que cresce ateacute 1 m de altura (2 m como ruderal) A
haste eacute ereta nervada e marrom ou violeta-marrom As folhas basais satildeo 3-
pinatissectas (divididas trecircs vezes em foliacuteolos profundamente cortados) 3-5 cm
de comprimento e 2-4 cm de largura as folhas superiores satildeo 1-2-pinatissectas
menores e seacutesseis (sem peciacuteolo) Os capiacutetulos satildeo globosas com 2-25
miliacutemetros de diacircmetro em paniacuteculas frouxas O invoacutelucro (seacuterie das braacutecteas em
torno do capiacutetulo) eacute composto de braacutecteas glabras imbricadas As braacutecteas
exteriores satildeo verdes e linear-oblongas as braacutecteas internas satildeo brilhantes e
oval-arredondadas com uma margem larga fina seca Os capiacutetulos satildeo
disciformes e compostos de floretes filiformes exteriores (femininas) e de floretes
internos no disco (hermafroditas) Os floretes centrais numerosos do disco satildeo
esverdeados ou amarelados O fruto eacute um aquecircnio amarelo-marrom de parede
fina (pequeno seco) 06-08 miliacutemetros de tamanho com uma superfiacutecie
brilhante marcada com sulcos verticais e contendo uma uacutenica semente Os
aquecircnios natildeo tecircm nenhum papo e portanto natildeo satildeo dispersados pelo vento
como satildeo muitos outros da famiacutelia Asteraceae (Compositae)
(httpwwwkeworgplants-fungiArtemisia-annuahtm)
COMPOSICcedilAtildeO E USO A espeacutecie A annua eacute conhecida como ldquoQing Haordquo na China e eacute a fonte da
Medicina Tradicional Chinesa (MTC) que foi usada por mais de 2000 anos para
aliviar febres Na MTC prescreve-se frequentemente em combinaccedilatildeo com outros
ervas para tratar (aleacutem agraves febres) a icteriacutecia a dor de cabeccedila a vertigem e os
sangramentos nasais A pesquisa cientiacutefica da atividade anti-malaacuterica de A annua
comeccedilou no princiacutepio dos anos 70 em resposta agrave resistecircncia crescente agraves drogas
anti-malaacutericas estabelecidas por parte dos protozoaacuterios parasitas que causam a
malaacuteria (Protozoaacuterios do gecircnero Plasmodium ) O componente quiacutemico
artemisinina que ocorre naturalmente nas folhas da Aannua eacute um potente
agente anti-malaacuterico e pode matar o parasita mais agressivo o Plasmodium
falciparum (eacute seletivamente toacutexico ao estaacutegio assexual de eritrocito dos parasitas)
A artemisinina extraiacuteda de Aannua tornou-se extremamente importante em tratar
a malaacuteria desde que a resistecircncia do parasita a muitos outros antimalaacutericos se
tornou difundida (httpwwwkeworgplants-fungiArtemisia-annuahtm)
4
A planta A annua (Asteraceae) eacute listada na medicina chinesa como um
remeacutedio para vaacuterias febres incluindo a malaacuteria e contem um bem estabelecido
composto antimalaacuterico a artemisinina Neste estudo um hiacutebrido de A annua foi
cultivado com sucesso na Aacutefrica Central As partes aeacutereas da planta continham
063 - 070 de artemisinina por massa seca e aproximadamente 40 desta
artemisinina poderia ser extraiacuteda por meacutetodos simples da preparaccedilatildeo do chaacute
Cinco pacientes da malaacuteria que foram tratados com A annua mostraram um
desaparecimento raacutepido do parasita dentro de 2-4 dias Uma experimentaccedilatildeo
adicional com os 48 pacientes de malaacuteria mostrou um desaparecimento do
parasita em 44 pacientes (92) dentro de 4 dias Ambas as experimentaccedilotildees
mostraram uma melhoria marcada dos sintomas Estes resultados justificam
pesquisas adicionais do efeito antimalaacuterico de preparaccedilotildees de A annua
(MUELLER et al 2000)
Em fases de crescimento e desenvolvimento diferentes foi pesquisada a
variaccedilatildeo na quantidade e na qualidade do oacuteleo essencial de A annua incluindo
preacute- floraccedilatildeo floraccedilatildeo e poacutes - floraccedilatildeo Os oacuteleos foram obtidos por hidrodestilaccedilatildeo
das amostras secas ao ar Os rendimentos dos oacuteleos ( pp) nas diferentes
fases foram da ordem de preacute- floraccedilatildeo (097) floraccedilatildeo (1 23) e poacutes- floraccedilatildeo
(087) Os oacuteleos foram analisados por espectrometria de massa e cromatografia
em fase gasosa No total 32 35 e 33 constituintes foram identificados e
quantificados no oacuteleo de preacute - floraccedilatildeo floraccedilatildeo e poacutes - floraccedilatildeo representando
9767 92 e 92 4 dos oacuteleos respectivamente Cacircnfora 18-cineol canfeno
spatulenol alfandashpineno e artemiacutesia-cetona foram os principais componentes em
todas as amostras Monoterpenos eram o principal grupo de compostos em preacute-
floraccedilatildeo (6996) floraccedilatildeo (7244) e poacutes- floraccedilatildeo (7096)
(MOHAMMADREZA 2008)
A comparaccedilatildeo do perfil de cromatografia de gaacutes do oacuteleo essencial da A
annua produzido no Brasil com aqueles de outras origens revelou a variaccedilatildeo
significativa de seus constituintes O comportamento sazonal do iacutendice do
artemisinina 13 contra a produccedilatildeo de oacuteleo essencial foi observado durante um
periacuteodo da colheita A viabilidade econocircmica de diversos metodologias de
purificaccedilatildeo para a produccedilatildeo da artemisinina foi testada Foi produzido o composto
anti-malaacuterico 13 a um custo total de US$ 115 por grama (FOGLIO 1996)
5
ARTEMISININA
Artemisinina eacute uma lactona sesquiterpecircnica com uma ponte endoperoacutexido
e foi produzida semi-sinteticamente como uma droga antimalaacuterica A eficaacutecia do
chaacute feito de A annua no tratamento da malaacuteria eacute contencioso De acordo com
alguns autores a artemesinina natildeo eacute soluacutevel em aacutegua e as concentraccedilotildees nestas
infusotildees satildeo consideradas insuficientes para tratar a malaacuteria (MUELER et al
2004 RATH et al 2004 JANSEN 2006)
Em 2004 o ministro da sauacutede da Etioacutepia mudou a droga antimalaacuterica de
primeira linha da Etioacutepia de sulfadoxinaprimetamina (Fansidar) que tem uma
taxa de falha em meacutedia de 36 no tratamento para a artemetherlumefantrine
(Coartem) uma terapia de droga que conteacutem a artemisinina que eacute 100 eficaz
quando usado corretamente apesar de uma relativa falta mundial do produto do
derivado de A annua (MALARIA UPDATE 20052013)
A malaacuteria eacute causada primeiramente pelo Plasmodium falciparum que
invade as hemaacutecias e conteacutem heme-grupos ricos em ferro (na forma do
hemozoina) (POSNER amp OrsquoNEIL 2004)
O mecanismo de accedilatildeo proposto da artemisinina contra a malaacuteria envolve a
clivagem de pontes de endoperoacutexido pelo ferro produzindo os radicais livres
(ferro-oxo hipervalente espeacutecies epoacutexidos aldeiacutedos e compostos do dicarbonil)
que danificam as macromoleacuteculas bioloacutegicas causando estresse oxidativo nas
ceacutelulas do parasita (CUMMING 1997)
Com a possibilidade de isolarem maiores quantidades de artemisinina
(quinghaosu) plantas de A annua foram cultivadas por Liersch et al (1986) e
analisadas em estaacutegios diferentes de desenvolvimento O iacutendice mais elevado de
artemisinina foi encontrado imediatamente antes do florescimento Era tambeacutem
possiacutevel correlacionar o desenvolvimento das plantas com o iacutendice maacuteximo do
artemisinina As plantas de A annua cultivadas de vaacuterias outras fontes tambeacutem
foram examinadas para o iacutendice de artemisinina De acordo com os resultados
obtidos nenhuma dessas plantas contiveram quantidades suficientes do
composto (artemisinina) para justificar isolamento em uma escala teacutecnica Aleacutem
disso outras espeacutecies de Artemisia foram testadas e foi encontrada artemisinina
em somente uma outra espeacutecie Para aumentar a quantidade de artemisinina
durante o periacuteodo do crescimento da planta foram testados dois reguladores
6
hormonais de crescimento em A annua genoacutetipo 811 Os resultados mostraram
que o chlormequat podia aumentar o teor do composto(artemisinina) em 30 em
relaccedilatildeo agraves plantas natildeo tratadas Foram encontrados tambeacutem alguns discretos
efeitos dos reguladores de crescimento na morfologia dos trichomas glandulares
Para finalidades de produccedilatildeo plantas com um iacutendice elevado de
artemisinina satildeo requeridas Woerdenbag et al (1994) acompanharam o
desenvolvimento do conteuacutedo de artemisinina e dos sesquiterpenes
biosinteticamente relacionados aacutecido artemisiacutenico arteannuina B e artemisiteno
em plantas de A annua durante um periacuteodo da vegetaccedilatildeo no Vietnam onde esta
espeacutecie eacute indiacutegena Aleacutem disso o iacutendice do oacuteleo essencial e sua composiccedilatildeo
foram estudados As amostras das folhas gemas as flores ou as flores de poacutes-
florescimento e frutos foram analisados nos diferentes estaacutegios vegetativo (5 6 e
8 meses de idade) na formaccedilatildeo maciccedila das gemas (9 meses) no pleno
florescimento (10 meses) e poacutes-florescimento (10frac12 meses) O iacutendice mais
elevado de artemisinina (086 da massa seca) estava nas folhas de plantas com
5 meses de idade Neste estaacutegio o rendimento mais elevado da folha tambeacutem foi
encontrado Subsequentemente o iacutendice de artemisinina caiu gradualmente Na
idade de 5 meses os maiores conteuacutedos de aacutecido artemisinico e arteannuina-B
016 e 008 da massa seca respectivamente foram tambeacutem encontrados O
artemisiteno estava presente em todos os estaacutegios do desenvolvimento variando
de 0002 a 009 da massa seca Com 19 volumemassa o iacutendice do oacuteleo
essencial (OE) foi maacuteximo imediatamente antes do florescimento e foi composto
de 55 de monoterpenos e 45 de sesquiterpenes Em todos os outros estaacutegios
(04 ndash 10 volumemassa do oacuteleo essencial) esta relaccedilatildeo foi de 30 70 Os
principais componentes do OE foram cacircnfora e germacreno-D
Observaccedilotildees mostraram que o rendimento da artemisinina esteve
correlacionado positivamente com o rendimento da folha e o nuacutemero das
colheitas Os rendimentos elevados de artemisinina ocorreram quando a colheita
produziu folhas artemisinina-ricas acompanhadas pelo menor crescimento
possiacutevel do tecido da haste alcanccedilado em colheitas muacuteltiplas em plantas
crescidas a tempo integral e plantadas mais cedo As colheitas crescidas por ge30
semanas e colhidas trecircs a quatro vezes deram os rendimentos meacutedios de
441plusmn142 e de 742plusmn156 respectivamente Muito mais altos do que o rendimento
maacuteximo de 25 quilogramas haminus1 relatado para a A annua em estudos anteriores
7
Concluiu-se que para obter artemisinina em altos niacuteveis A annua deve ser
colhida quatro vezes (KUMAR et al 2004)
ASPECTOS AGRONOcircMICOS
Propagaccedilatildeo
Em meacutedia 1000 sementes pesam 003 g e natildeo diminuem sua viabilidade
ao secar Satildeo acessiacuteveis ao armazenamento agrave frio de longo prazo Germinam de
janeiro a marccedilo A germinaccedilatildeo de 100 foi obtida em um meio de germinaccedilatildeo de
aacutegar a 1 em uma temperatura de 15degC sob um fotoperiacuteodo 816 horas claro-
escuro (MOHAMMADREZA 2008)
A Artemisia annua eacute plantada extensamente e comercialmente
principalmente como uma fonte de oacuteleos essenciais e tambeacutem de artemisinina
sobretudo em regiotildees da China e VietnamNessas regiotildees o ciclo da planta em
condiccedilotildees naturais chega a 10 meses Na Europa e na Ameacuterica as plantas
crescem mais rapidamente terminando seu ciclo de vida em apenas seis meses
mesmo no campo Cresce melhor em talhotildees abertos e ensolarados em solos
arenosos e aluviais feacuterteis que sejam neutros a ligeiramente aacutecidos e que tenham
uma boa retenccedilatildeo de umidade e natildeo tolera a seca ou o encharcamento As
sementes germinam de janeiro a marccedilo e a frutificaccedilatildeo (colheita das sementes)
ocorre entre outubro e novembro (httpwwwkeworgplants-fungiArtemisia-
annuahtm)
Conceiccedilatildeo et al (2013) testaram a germinaccedilatildeo da semente de A annua
cultivar Silves sob duas condiccedilotildees ambientais a fim de fornecer informaccedilotildees
sobre seu cultivo Na primeira condiccedilatildeo realizou-se o teste padratildeo com 4 lotes de
100g de sementes semeadas em gerbox sobre papel mata-borratildeo e dispostas
em germinador agrave temperatura de 25-30deg C expostas agrave luz durante 8 horas diaacuterias
e umedecidas quando necessaacuterio ateacute sua emergecircncia Na segunda etapa foi
realizado o mesmo procedimento anterior poreacutem as sementes permaneceram no
germinador em ausecircncia de luz sob as mesmas condiccedilotildees de temperatura e
umidade Segundo anaacutelise estatiacutestica em Tukey a 5 aplicada aqui sobre as
meacutedias de cada lote de 100g sementes os tratamentos obtiveram diferenccedilas
significativas sendo que as sementes expostas agrave luz obtiveram maiores valores
8
de germinaccedilatildeo Em ambiente com total ausecircncia de luz as sementes obtiveram
baixiacutessima taxa de germinaccedilatildeo no mesmo periacuteodo que as sementes em ambiente
iluminado Esse fato indica que a semente de A annua eacute fotoblaacutestica positiva e
assim necessita de um miacutenimo de luz para que ocorra sua germinaccedilatildeo por esse
motivo natildeo podem ser enterradas e sua semeadura deve ser apenas a lanccedilo ou
em superfiacutecie sem cobertura com terra Esta caracteriacutestica eacute comum agrave muitas
espeacutecies que produzem sementes miuacutedas
Adubaccedilatildeo
Em 2004 e 2005 um estudo foi realizado com o objetivo de determinar o
rendimento os componentes do rendimento e o iacutendice da artemisinina de A
annua cultivada sob quatro aplicaccedilotildees do nitrogecircnio (0 40 80 e 120 quilogramas
haminus1) na regiatildeo de Ccedilukurova na Turquia As experimentaccedilotildees de campo foram
conduzidas na universidade de Ccedilukurova no departamento de agricultura da
faculdade Nesse estudo a altura da planta o nuacutemero de ramos o rendimento
fresco e seco da erva o rendimento fresco e seco da folha o iacutendice do oacuteleo
essencial e o iacutendice da artemisinina (por cromatografia liacutequida pelo HPLC de
desempenho elevado) foram examinados Pela anaacutelise de variaccedilatildeo as doses de
nitrogecircnio natildeo tiveram nenhum efeito estatiacutestico nas caracteriacutesticas investigadas
agrave exceccedilatildeo do iacutendice de artemisinina Esse iacutendice nas folhas secas foi afetado
significativamente pelas aplicaccedilotildees do nitrogecircnio que variaram de 632 a 2750
mg 100 gminus1 (OZGUVEN et al 2008)
Outros aspectos
Uma pesquisa desenvolvida em MEDIPLANT (Suiacuteccedila) e no CPQBA-
UNICAPM (Brasil) envolveu a seleccedilatildeo e produccedilatildeo de genoacutetipos ricos em
artemisinina apresentando biomassa elevada seguido por uma segunda seleccedilatildeo
para a adaptaccedilatildeo agraves circunstacircncias climaacuteticas do Brasil Com hibridizaccedilatildeo
controlada entre genoacutetipos selecionados da China e do Vietnam o ganho
geneacutetico foi obtido nos termos do iacutendice da artemisinina e da uniformidade da
populaccedilatildeo Com o aumento do iacutendice de biomassa e da artemisinina (estimado
pela monitoraccedilatildeo analiacutetica) era possiacutevel aumentar a produccedilatildeo de artemisinina de
9
5 Kgha (populaccedilatildeo baacutesica) para aproximadamente 25 Kgha (populaccedilatildeo
geneticamente produzida) No cultivo realizado no Brasil em 3 de 7 linhas
hiacutebridas 239 de x 1V Ch x Viet55 e 1V x 243 produziram respectivamente
2543 2305 e 2127 quilogramas de artemisininahacorte com as 2 colheitas
possiacuteveis por o ano O cultivo destas linhas hiacutebridas novas no Brasil eacute uma
teacutecnica praticaacutevel e altamente competitiva devido agrave produccedilatildeo obtida
(MAGALHAtildeES et al 1997)
Foi pesquisado o efeito do aumento da irradiacircncia (15 a 100 da luz solar
cheia L15 a L100) sobre o crescimento a taxa fotossinteacutetica liacutequida maacutexima
(Pmax) a compensaccedilatildeo (CI) a saturaccedilatildeo de irradiacircncia de A annua e a produccedilatildeo
de artemisinina Na luz solar plena A annua apresentou uma capacidade elevada
de fotossiacutentese com irradiacircncia baixa manteve um Pmax relativamente elevado
com um CI baixo O crescimento da altura e do diacircmetro biomassa total e da
folha e iacutendice de artemisinina diminuiu com a diminuiccedilatildeo da irradiacircncia que pocircde
ser conectado com a fotossiacutentese mais baixa na irradiacircncia mais baixa em
relaccedilatildeo agrave irradiacircncia mais elevada As irradiacircncias mudaram a alocaccedilatildeo de
biomassa em A annua A relaccedilatildeo massa de folhamassa total da espeacutecie
aumentou com a diminuiccedilatildeo da irradiacircncia mas a relaccedilatildeo raizmassa total e
raizmassa da parte aeacuterea aumentaram geralmente com a irradiacircncia crescente
Assim A annua pode crescer na luz solar parcial e plena Entretanto o
rendimento elevado da biomassa e da artemisinina requerem o cultivo em um
habitat aberto com luz solar adequada (WANG et al 2008)
MATERIAIS E MEacuteTODOS
O ensaio foi conduzido na Estaccedilatildeo Experimental de Biologia da
Universidade de Brasiacutelia (EEB ndash UnB) em casa-de-vegetaccedilatildeo do tipo
ldquoglasshouserdquo no periacuteodo de 19 de abril de 2013 a 6 de dezembro de 2013
(primeiro e segundo semestres respectivamente) Durante o ensaio a casa-de-
vegetaccedilatildeo apresentou uma temperatura meacutedia de aproximadamente 250deg C com
meacutedia das miacutenimas de 1325degC e das maacuteximas de 3675degC aferidas com
termocircmetro convencional de maacutexima e miacutenima O iacutendice de radiaccedilatildeo luminosa
esteve em trono de 50 determinado por fotocircmetro automaacutetico modelo Asahi-
Pentax SP-500
10
A partida de sementes de Aannua foi doada pelo pesquisador Pedro
Melillo Magalhatildees oriundas do CPQBA ndash UNICAMP e produzidas em campo da
proacutepria estaccedilatildeo e utilizadas para a semeadura em sementeiras tipo caixa
contendo a mistura EEB (Estaccedilatildeo Experimental de Biologia) com a seguinte
composiccedilatildeo Latossolo vermelho de cerrado areia vermiculita e composto
orgacircnico na proporccedilatildeo 3311 respectivamente mais a formulaccedilatildeo 4-14-8 na
dose de 100g para 40L da mistura Apoacutes 42 dias da semeadura foram
selecionadas 20 mudas que estavam no ponto de transplante (meacutedia de 15 cm
de altura) Dessa forma foram transplantadas para vasos com capacidade para
25L preenchidos com a mistura EEB
Apoacutes o transplante a altura da parte aeacuterea de todas as plantas foi aferida
semanalmente com o uso de uma trena com o objetivo de desenhar-se a curva
de crescimento As mediccedilotildees tiveram iniacutecio uma semana apoacutes o transplante no
dia 14 de maio
No dia 26 de julho de 201349 dias apoacutes o transplante as plantas foram
transferidas dos vasos de 25L para vasos com maior capacidade (325L) para
favorecer o seu crescimento e desenvolvimento e no dia 17 de setembro102 dias
apoacutes o transplante foi feita uma suplementaccedilatildeo de terra para as 20 plantas com o
mesmo objetivo mediante a colocaccedilatildeo por baixo de um outro vaso de mesmo
tamanho contendo metade de seu volume em Substrato EEB Isso permitiu que
as raiacutezes crescessem no volume adicional de mistura atraveacutes dos furos de
drenagem do vaso original
O controle de plantas daninhas foi feito manualmente e o controle
fitossanitaacuterio atraveacutes de acompanhamento e sucessivas observaccedilotildees Ao fim do
ensaio foi observada uma pequena infestaccedilatildeo com cochonilhas As cochonilhas
foram identificadas por Pseudococcus citri Risso ndash mais conhecida por
ldquocochonilha algodatildeordquo Foi parcialmente controlada em curto prazo com uma
pulverizaccedilatildeo manual de soluccedilatildeo de detergente (10 ml 1 litro de aacutegua)
Ao fim do ensaio dia 18 de outubro foram obtidas as massas fresca e
seca das plantas bem como os coeficientes de variaccedilatildeo dos dados
11
RESUTADOS E DISCUSSAtildeO
Os resultados do presente ensaio encontram-se representados nas Figuras
4 e 5 as quais representam respectivamente a curva de crescimento de Aannua
em vinte semana (s) em casa-de-vegetaccedilatildeo e a evoluccedilatildeo da taxa meacutedia diaacuteria de
crescimento
Observando-se a Figura 2 que apresenta a evoluccedilatildeo da taxa meacutedia de
crescimento verificou-se que entre a quinta e a setima semanas a taxa meacutedia
diaacuteria de crescimento cresceu de 08 cm ao dia para em torno de 20 cm por dia
tendo havido um decrescimo e um estabilidade entre a oitava e a deacutecima segunda
semanas quando entatildeo ocorreu o segundo pico passando a taxa meacutedia diaacuteria de
crescimento de 12 cm para 18 cm seguindo-se um decrescimo ateacute 05 cmdia
nas deacutecima sexta e deacutecima seacutetimas semanas quando entatildeo houve o terceiro
pico na deacutecima oitava semana atingindo 08cmdia e novamente decaindo ateacute 04
cmdia na vigeacutesima semana
0
50
100
150
1s 3s 5s 7s 9s 11s 13s 15s 17s 19s
Alt
ura
em
cm
Crescimento meacutedio de Artemisia annua em vasos em casa de vegataccedilatildeo durante 20 semanas
(s)
Figura 1 ndash Crescimento meacutedio de A annua em vasos em casa-de-vegetaccedilatildeo durante 20 semanas (s) ndash Observa-se que a altura das plantas aumentou
notavelmente a partir da quinta semana apoacutes o transplante correspondendo ao primeiro pico de crescimento
12
Os picos de crescimento de A annua submetida ao cultivo em vasos em
casa-de-vegetaccedilatildeo podem ser explicados pelas interferecircncias do pesquisador que
visava maximizar o desenvolvimento das plantas O primeiro pico pode ser
atribuiacutedo ao padratildeo de crescimento da planta Por ocasiatildeo da primeira troca de
vasos quando a planta ganhou 2145 de volume de substrato para explorar
teria havido o segundo pico por volta da deacutecima segunda semana O terceiro pico
se deu em consequecircncia da segunda suplementaccedilatildeo de substrato ocorrida por
volta da deacutecima seacutetima semana
O aproveitamento da segunda suplementaccedilatildeo foi efetivo tendo as plantas
explorado o volume de substrato adicional em sua totalidade ocupando-o por
inteiro o volume (Figura 6)
Eacute consenso entre pesquisadores que as plantas crescidas em vasos nunca
alcanccedilam seu potencial maior conforme imagens de suas raiacutezes mostram Uma
teacutecnica meacutedica da imagem chamada a imagem de ressonacircncia magneacutetico (MRI)
foi usada por investigadores para capturar instantacircneos da raiz da planta no vaso
As figuras obtidas revelam que as raiacutezes ldquodetectam o tamanho do vasordquo e emitem
um sinal que resulta na restriccedilatildeo o crescimento da planta (POORTER et al 2012)
Poorter et al (2012) esclarecem que a maioria das experiecircncias em
biologia de plantas usa plantas crescidas em algum tipo de recipiente ou vaso
Uma meta-anaacutelise em 65 estudos que analisaram o efeito do tamanho do vaso no
0
05
1
15
2
25
1s 3s 5s 7s 9s 11s 13s 15s 17s 19s
Ce
ntiacute
met
ros
po
r d
ia
Evoluccedilatildeo da taxa meacutedia diaacuteria de crescimento de Artemisia annua em casa de vegetaccedilatildeo por
20 semanas
Figura 2 ndash Evoluccedilatildeo da taxa diaacuteria de cresimento de A annua em casa de vegetaccedilatildeo por 20 semanas (s)
13
crescimento e em variaacuteveis afins foi conduzida e verificou que em meacutedia dobrar o
tamanho do vaso aumentou a produccedilatildeo da biomassa da planta em 43 Uma
anaacutelise adicional de efeitos do tamanho do vaso nos componentes afins do
crescimento sugere que o crescimento reduzido em vasos menores eacute causado
principalmente por uma reduccedilatildeo na fotossiacutentese por aacuterea da folha da unidade
mais do que por mudanccedilas na morfologia da folha ou no alocamento de
biomassa O tamanho apropriado do vaso dependeraacute logicamente do tamanho
das plantas que crescem neles Baseado em vaacuterias linhas da evidecircncia noacutes
sugerimos que um tamanho apropriado do vaso eacute um no qual a biomassa da
planta natildeo exceda 1 g L-1 Na praacutetica atual da pesquisa 65 das experiecircncias
excedem essa referecircncia Noacutes sugerimos que os investigadores devam
considerar com cuidado o tamanho do vaso em suas experiecircncias porque os
vasos pequenos podem mudar resultados experimentais e sabotar a finalidade da
experiecircncia
No presente ensaio de vasos foi obtido uma massa seca da parte aeacuterea
meacutedia de 2995g com um coeficiente de variaccedilatildeo de 3001 com uma planta por
vaso com dois transplantes para ganho de volume de solo a ser explorado O
corte das plantas se deu com 80 dias apoacutes o transplante
Quiteacuterio (2006) tambeacutem em ensaio de vasos obteve a meacutedia 25g de massa
seca de A annua em ensaio de vasos com duas plantas onde a colheita foi feita
75 dias apoacutes a semeadura no preacute-florescimento Os dois resultados apresentam
coerecircncia entre si
O ataque de cochonilhas observado era esperado como um reflexo natural
do estresse das plantas que satildeo submetidas ao cultivo em vaso em casa-de-
vegetaccedilatildeo
14
CONCLUSAtildeO
Nas condiccedilotildees do presente ensaio concluiu-se que o cultivo de Artemisia annua
em vasos e em casa-de-vegetaccedilatildeo eacute viaacutevel e pode ser notavelmente expressivo
com porte superior a 15m de altura e massa seca da parte aeacuterea meacutedia em torno
de 30g
Numa etapa posterior visualizam-se os ensaios objetivando a geraccedilatildeo de uma
tecnologia de produccedilatildeo tendo como alvo a produtividade em artesinina-A que eacute o
componente ativo contra malaacuteria
15
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17
DOCUMENTAacuteRIO FOTOGRAacuteFICO
Foto 1 ndash Mudas na sementeira prontas para transplante - Foto da autora Nayara Carvalho
Foto 2 ndash Mudas de Artemisia annua no dia do transplante ndash Foto da autora Nayara
Carvalho
18
Foto 3 ndash Aspecto geral do ensaio ndash Foto da autora Nayara Carvalho
Foto 4 ndash Suplementaccedilatildeo de substrato ndash Foto do orientador Jean Kleber
19
Foto 5 ndash Aproveitamento pela planta di suplemento de substrato ndash Foto do orientador Jean Kleber
Foto 6 ndash A planta mais alta ao final do ensaio ndash Foto do orientador Jean Kleber
20
Foto 8 ndash Ataque de colchonilhas em A annua ndash Foto da autora Nayara Carvalho
Foto 7 ndash A planta mais baixa ao final do ensaio
2
OBJETIVO
O objetivo do presente trabalho foi estudar o crescimento e o
desenvolvimento de A annua mediante cultivo em vasos em casa de vegetaccedilatildeo
REVISAtildeO BIBLIOGRAacuteFICA
Descriccedilatildeo da planta
Artemisia annua L (Syn Artemisia chamomilla C Winkl) Asteraceae
Nome vulgar Sweet wormwood eacute uma erva doce aromaacutetica com a flores
pequenas amarelas em capiacutetulos A annua conteacutem o componente quiacutemico
artemisinina em suas partes aeacutereas que satildeo usadas em drogas anti-malaacutericas
Outros nomes satildeo Sweet annie Wormwood annual (inglecircs) qing hao (chinecircs
artemiacutesia verde azulada) Difundida e naturalizada extensamente eacute
frequentemente abundante natildeo sendo do interesse do conservacionismo pois
ainda natildeo foi avaliada de acordo com criteacuterios da lista vermelha do IUCN ndash
International Union for Conservation of Nature Tem como habitat colinas bordas
das florestas e terrenos baldios Trata-se de uma planta medicinal antimalaacuterica
importante cujo oacuteleo essencial eacute usado tambeacutem em cosmeacuteticos A planta eacute
cultivada como um ornamental na Indoneacutesia (httpwwwkeworgplants-
fungiArtemisia-annuahtm)
A annua eacute nativa da Euraacutesia do sudeste da Europa (incluindo Albacircnia
Bulgaacuteria Montenegro Romecircnia Ruacutessia Servia Turquia) ao Vietnam e norte da
India Naturalizado em muitos paiacuteses (incluindo Argentina Aacuteustria a repuacuteblica
Tcheca Franccedila Alemanha Hungria Itaacutelia Polocircnia Eslovaacutequia Espanha Suiacuteccedila e
Estados Unidos) Foi registrada como de crescimento ruderal no Reino Unido
levada por paacutessaros ou nas latildes tendo sido cultivada experimentalmente tatildeo ao
norte como na Finlacircndia A espeacutecie e foi usada na China para tratar febres por
mais de 2000 anos O gecircnero Artemisia pertence agrave famiacutelia Asteraceae
(Compositae) que inclui plantas bem conhecidas usadas na medicina
perfumaria alimentaccedilatildeo e na induacutestria da bebida tal como a A dracunculus
(estragatildeo) A absinthium (absinto) e A vulgaris (artemiacutesia)
(httpwwwkeworgplants-fungiArtemisia-annuahtm )
3
A descriccedilatildeo botacircnica menciona que A annua eacute uma planta anual de haste
uacutenica glabra doce-aromaacutetica que cresce ateacute 1 m de altura (2 m como ruderal) A
haste eacute ereta nervada e marrom ou violeta-marrom As folhas basais satildeo 3-
pinatissectas (divididas trecircs vezes em foliacuteolos profundamente cortados) 3-5 cm
de comprimento e 2-4 cm de largura as folhas superiores satildeo 1-2-pinatissectas
menores e seacutesseis (sem peciacuteolo) Os capiacutetulos satildeo globosas com 2-25
miliacutemetros de diacircmetro em paniacuteculas frouxas O invoacutelucro (seacuterie das braacutecteas em
torno do capiacutetulo) eacute composto de braacutecteas glabras imbricadas As braacutecteas
exteriores satildeo verdes e linear-oblongas as braacutecteas internas satildeo brilhantes e
oval-arredondadas com uma margem larga fina seca Os capiacutetulos satildeo
disciformes e compostos de floretes filiformes exteriores (femininas) e de floretes
internos no disco (hermafroditas) Os floretes centrais numerosos do disco satildeo
esverdeados ou amarelados O fruto eacute um aquecircnio amarelo-marrom de parede
fina (pequeno seco) 06-08 miliacutemetros de tamanho com uma superfiacutecie
brilhante marcada com sulcos verticais e contendo uma uacutenica semente Os
aquecircnios natildeo tecircm nenhum papo e portanto natildeo satildeo dispersados pelo vento
como satildeo muitos outros da famiacutelia Asteraceae (Compositae)
(httpwwwkeworgplants-fungiArtemisia-annuahtm)
COMPOSICcedilAtildeO E USO A espeacutecie A annua eacute conhecida como ldquoQing Haordquo na China e eacute a fonte da
Medicina Tradicional Chinesa (MTC) que foi usada por mais de 2000 anos para
aliviar febres Na MTC prescreve-se frequentemente em combinaccedilatildeo com outros
ervas para tratar (aleacutem agraves febres) a icteriacutecia a dor de cabeccedila a vertigem e os
sangramentos nasais A pesquisa cientiacutefica da atividade anti-malaacuterica de A annua
comeccedilou no princiacutepio dos anos 70 em resposta agrave resistecircncia crescente agraves drogas
anti-malaacutericas estabelecidas por parte dos protozoaacuterios parasitas que causam a
malaacuteria (Protozoaacuterios do gecircnero Plasmodium ) O componente quiacutemico
artemisinina que ocorre naturalmente nas folhas da Aannua eacute um potente
agente anti-malaacuterico e pode matar o parasita mais agressivo o Plasmodium
falciparum (eacute seletivamente toacutexico ao estaacutegio assexual de eritrocito dos parasitas)
A artemisinina extraiacuteda de Aannua tornou-se extremamente importante em tratar
a malaacuteria desde que a resistecircncia do parasita a muitos outros antimalaacutericos se
tornou difundida (httpwwwkeworgplants-fungiArtemisia-annuahtm)
4
A planta A annua (Asteraceae) eacute listada na medicina chinesa como um
remeacutedio para vaacuterias febres incluindo a malaacuteria e contem um bem estabelecido
composto antimalaacuterico a artemisinina Neste estudo um hiacutebrido de A annua foi
cultivado com sucesso na Aacutefrica Central As partes aeacutereas da planta continham
063 - 070 de artemisinina por massa seca e aproximadamente 40 desta
artemisinina poderia ser extraiacuteda por meacutetodos simples da preparaccedilatildeo do chaacute
Cinco pacientes da malaacuteria que foram tratados com A annua mostraram um
desaparecimento raacutepido do parasita dentro de 2-4 dias Uma experimentaccedilatildeo
adicional com os 48 pacientes de malaacuteria mostrou um desaparecimento do
parasita em 44 pacientes (92) dentro de 4 dias Ambas as experimentaccedilotildees
mostraram uma melhoria marcada dos sintomas Estes resultados justificam
pesquisas adicionais do efeito antimalaacuterico de preparaccedilotildees de A annua
(MUELLER et al 2000)
Em fases de crescimento e desenvolvimento diferentes foi pesquisada a
variaccedilatildeo na quantidade e na qualidade do oacuteleo essencial de A annua incluindo
preacute- floraccedilatildeo floraccedilatildeo e poacutes - floraccedilatildeo Os oacuteleos foram obtidos por hidrodestilaccedilatildeo
das amostras secas ao ar Os rendimentos dos oacuteleos ( pp) nas diferentes
fases foram da ordem de preacute- floraccedilatildeo (097) floraccedilatildeo (1 23) e poacutes- floraccedilatildeo
(087) Os oacuteleos foram analisados por espectrometria de massa e cromatografia
em fase gasosa No total 32 35 e 33 constituintes foram identificados e
quantificados no oacuteleo de preacute - floraccedilatildeo floraccedilatildeo e poacutes - floraccedilatildeo representando
9767 92 e 92 4 dos oacuteleos respectivamente Cacircnfora 18-cineol canfeno
spatulenol alfandashpineno e artemiacutesia-cetona foram os principais componentes em
todas as amostras Monoterpenos eram o principal grupo de compostos em preacute-
floraccedilatildeo (6996) floraccedilatildeo (7244) e poacutes- floraccedilatildeo (7096)
(MOHAMMADREZA 2008)
A comparaccedilatildeo do perfil de cromatografia de gaacutes do oacuteleo essencial da A
annua produzido no Brasil com aqueles de outras origens revelou a variaccedilatildeo
significativa de seus constituintes O comportamento sazonal do iacutendice do
artemisinina 13 contra a produccedilatildeo de oacuteleo essencial foi observado durante um
periacuteodo da colheita A viabilidade econocircmica de diversos metodologias de
purificaccedilatildeo para a produccedilatildeo da artemisinina foi testada Foi produzido o composto
anti-malaacuterico 13 a um custo total de US$ 115 por grama (FOGLIO 1996)
5
ARTEMISININA
Artemisinina eacute uma lactona sesquiterpecircnica com uma ponte endoperoacutexido
e foi produzida semi-sinteticamente como uma droga antimalaacuterica A eficaacutecia do
chaacute feito de A annua no tratamento da malaacuteria eacute contencioso De acordo com
alguns autores a artemesinina natildeo eacute soluacutevel em aacutegua e as concentraccedilotildees nestas
infusotildees satildeo consideradas insuficientes para tratar a malaacuteria (MUELER et al
2004 RATH et al 2004 JANSEN 2006)
Em 2004 o ministro da sauacutede da Etioacutepia mudou a droga antimalaacuterica de
primeira linha da Etioacutepia de sulfadoxinaprimetamina (Fansidar) que tem uma
taxa de falha em meacutedia de 36 no tratamento para a artemetherlumefantrine
(Coartem) uma terapia de droga que conteacutem a artemisinina que eacute 100 eficaz
quando usado corretamente apesar de uma relativa falta mundial do produto do
derivado de A annua (MALARIA UPDATE 20052013)
A malaacuteria eacute causada primeiramente pelo Plasmodium falciparum que
invade as hemaacutecias e conteacutem heme-grupos ricos em ferro (na forma do
hemozoina) (POSNER amp OrsquoNEIL 2004)
O mecanismo de accedilatildeo proposto da artemisinina contra a malaacuteria envolve a
clivagem de pontes de endoperoacutexido pelo ferro produzindo os radicais livres
(ferro-oxo hipervalente espeacutecies epoacutexidos aldeiacutedos e compostos do dicarbonil)
que danificam as macromoleacuteculas bioloacutegicas causando estresse oxidativo nas
ceacutelulas do parasita (CUMMING 1997)
Com a possibilidade de isolarem maiores quantidades de artemisinina
(quinghaosu) plantas de A annua foram cultivadas por Liersch et al (1986) e
analisadas em estaacutegios diferentes de desenvolvimento O iacutendice mais elevado de
artemisinina foi encontrado imediatamente antes do florescimento Era tambeacutem
possiacutevel correlacionar o desenvolvimento das plantas com o iacutendice maacuteximo do
artemisinina As plantas de A annua cultivadas de vaacuterias outras fontes tambeacutem
foram examinadas para o iacutendice de artemisinina De acordo com os resultados
obtidos nenhuma dessas plantas contiveram quantidades suficientes do
composto (artemisinina) para justificar isolamento em uma escala teacutecnica Aleacutem
disso outras espeacutecies de Artemisia foram testadas e foi encontrada artemisinina
em somente uma outra espeacutecie Para aumentar a quantidade de artemisinina
durante o periacuteodo do crescimento da planta foram testados dois reguladores
6
hormonais de crescimento em A annua genoacutetipo 811 Os resultados mostraram
que o chlormequat podia aumentar o teor do composto(artemisinina) em 30 em
relaccedilatildeo agraves plantas natildeo tratadas Foram encontrados tambeacutem alguns discretos
efeitos dos reguladores de crescimento na morfologia dos trichomas glandulares
Para finalidades de produccedilatildeo plantas com um iacutendice elevado de
artemisinina satildeo requeridas Woerdenbag et al (1994) acompanharam o
desenvolvimento do conteuacutedo de artemisinina e dos sesquiterpenes
biosinteticamente relacionados aacutecido artemisiacutenico arteannuina B e artemisiteno
em plantas de A annua durante um periacuteodo da vegetaccedilatildeo no Vietnam onde esta
espeacutecie eacute indiacutegena Aleacutem disso o iacutendice do oacuteleo essencial e sua composiccedilatildeo
foram estudados As amostras das folhas gemas as flores ou as flores de poacutes-
florescimento e frutos foram analisados nos diferentes estaacutegios vegetativo (5 6 e
8 meses de idade) na formaccedilatildeo maciccedila das gemas (9 meses) no pleno
florescimento (10 meses) e poacutes-florescimento (10frac12 meses) O iacutendice mais
elevado de artemisinina (086 da massa seca) estava nas folhas de plantas com
5 meses de idade Neste estaacutegio o rendimento mais elevado da folha tambeacutem foi
encontrado Subsequentemente o iacutendice de artemisinina caiu gradualmente Na
idade de 5 meses os maiores conteuacutedos de aacutecido artemisinico e arteannuina-B
016 e 008 da massa seca respectivamente foram tambeacutem encontrados O
artemisiteno estava presente em todos os estaacutegios do desenvolvimento variando
de 0002 a 009 da massa seca Com 19 volumemassa o iacutendice do oacuteleo
essencial (OE) foi maacuteximo imediatamente antes do florescimento e foi composto
de 55 de monoterpenos e 45 de sesquiterpenes Em todos os outros estaacutegios
(04 ndash 10 volumemassa do oacuteleo essencial) esta relaccedilatildeo foi de 30 70 Os
principais componentes do OE foram cacircnfora e germacreno-D
Observaccedilotildees mostraram que o rendimento da artemisinina esteve
correlacionado positivamente com o rendimento da folha e o nuacutemero das
colheitas Os rendimentos elevados de artemisinina ocorreram quando a colheita
produziu folhas artemisinina-ricas acompanhadas pelo menor crescimento
possiacutevel do tecido da haste alcanccedilado em colheitas muacuteltiplas em plantas
crescidas a tempo integral e plantadas mais cedo As colheitas crescidas por ge30
semanas e colhidas trecircs a quatro vezes deram os rendimentos meacutedios de
441plusmn142 e de 742plusmn156 respectivamente Muito mais altos do que o rendimento
maacuteximo de 25 quilogramas haminus1 relatado para a A annua em estudos anteriores
7
Concluiu-se que para obter artemisinina em altos niacuteveis A annua deve ser
colhida quatro vezes (KUMAR et al 2004)
ASPECTOS AGRONOcircMICOS
Propagaccedilatildeo
Em meacutedia 1000 sementes pesam 003 g e natildeo diminuem sua viabilidade
ao secar Satildeo acessiacuteveis ao armazenamento agrave frio de longo prazo Germinam de
janeiro a marccedilo A germinaccedilatildeo de 100 foi obtida em um meio de germinaccedilatildeo de
aacutegar a 1 em uma temperatura de 15degC sob um fotoperiacuteodo 816 horas claro-
escuro (MOHAMMADREZA 2008)
A Artemisia annua eacute plantada extensamente e comercialmente
principalmente como uma fonte de oacuteleos essenciais e tambeacutem de artemisinina
sobretudo em regiotildees da China e VietnamNessas regiotildees o ciclo da planta em
condiccedilotildees naturais chega a 10 meses Na Europa e na Ameacuterica as plantas
crescem mais rapidamente terminando seu ciclo de vida em apenas seis meses
mesmo no campo Cresce melhor em talhotildees abertos e ensolarados em solos
arenosos e aluviais feacuterteis que sejam neutros a ligeiramente aacutecidos e que tenham
uma boa retenccedilatildeo de umidade e natildeo tolera a seca ou o encharcamento As
sementes germinam de janeiro a marccedilo e a frutificaccedilatildeo (colheita das sementes)
ocorre entre outubro e novembro (httpwwwkeworgplants-fungiArtemisia-
annuahtm)
Conceiccedilatildeo et al (2013) testaram a germinaccedilatildeo da semente de A annua
cultivar Silves sob duas condiccedilotildees ambientais a fim de fornecer informaccedilotildees
sobre seu cultivo Na primeira condiccedilatildeo realizou-se o teste padratildeo com 4 lotes de
100g de sementes semeadas em gerbox sobre papel mata-borratildeo e dispostas
em germinador agrave temperatura de 25-30deg C expostas agrave luz durante 8 horas diaacuterias
e umedecidas quando necessaacuterio ateacute sua emergecircncia Na segunda etapa foi
realizado o mesmo procedimento anterior poreacutem as sementes permaneceram no
germinador em ausecircncia de luz sob as mesmas condiccedilotildees de temperatura e
umidade Segundo anaacutelise estatiacutestica em Tukey a 5 aplicada aqui sobre as
meacutedias de cada lote de 100g sementes os tratamentos obtiveram diferenccedilas
significativas sendo que as sementes expostas agrave luz obtiveram maiores valores
8
de germinaccedilatildeo Em ambiente com total ausecircncia de luz as sementes obtiveram
baixiacutessima taxa de germinaccedilatildeo no mesmo periacuteodo que as sementes em ambiente
iluminado Esse fato indica que a semente de A annua eacute fotoblaacutestica positiva e
assim necessita de um miacutenimo de luz para que ocorra sua germinaccedilatildeo por esse
motivo natildeo podem ser enterradas e sua semeadura deve ser apenas a lanccedilo ou
em superfiacutecie sem cobertura com terra Esta caracteriacutestica eacute comum agrave muitas
espeacutecies que produzem sementes miuacutedas
Adubaccedilatildeo
Em 2004 e 2005 um estudo foi realizado com o objetivo de determinar o
rendimento os componentes do rendimento e o iacutendice da artemisinina de A
annua cultivada sob quatro aplicaccedilotildees do nitrogecircnio (0 40 80 e 120 quilogramas
haminus1) na regiatildeo de Ccedilukurova na Turquia As experimentaccedilotildees de campo foram
conduzidas na universidade de Ccedilukurova no departamento de agricultura da
faculdade Nesse estudo a altura da planta o nuacutemero de ramos o rendimento
fresco e seco da erva o rendimento fresco e seco da folha o iacutendice do oacuteleo
essencial e o iacutendice da artemisinina (por cromatografia liacutequida pelo HPLC de
desempenho elevado) foram examinados Pela anaacutelise de variaccedilatildeo as doses de
nitrogecircnio natildeo tiveram nenhum efeito estatiacutestico nas caracteriacutesticas investigadas
agrave exceccedilatildeo do iacutendice de artemisinina Esse iacutendice nas folhas secas foi afetado
significativamente pelas aplicaccedilotildees do nitrogecircnio que variaram de 632 a 2750
mg 100 gminus1 (OZGUVEN et al 2008)
Outros aspectos
Uma pesquisa desenvolvida em MEDIPLANT (Suiacuteccedila) e no CPQBA-
UNICAPM (Brasil) envolveu a seleccedilatildeo e produccedilatildeo de genoacutetipos ricos em
artemisinina apresentando biomassa elevada seguido por uma segunda seleccedilatildeo
para a adaptaccedilatildeo agraves circunstacircncias climaacuteticas do Brasil Com hibridizaccedilatildeo
controlada entre genoacutetipos selecionados da China e do Vietnam o ganho
geneacutetico foi obtido nos termos do iacutendice da artemisinina e da uniformidade da
populaccedilatildeo Com o aumento do iacutendice de biomassa e da artemisinina (estimado
pela monitoraccedilatildeo analiacutetica) era possiacutevel aumentar a produccedilatildeo de artemisinina de
9
5 Kgha (populaccedilatildeo baacutesica) para aproximadamente 25 Kgha (populaccedilatildeo
geneticamente produzida) No cultivo realizado no Brasil em 3 de 7 linhas
hiacutebridas 239 de x 1V Ch x Viet55 e 1V x 243 produziram respectivamente
2543 2305 e 2127 quilogramas de artemisininahacorte com as 2 colheitas
possiacuteveis por o ano O cultivo destas linhas hiacutebridas novas no Brasil eacute uma
teacutecnica praticaacutevel e altamente competitiva devido agrave produccedilatildeo obtida
(MAGALHAtildeES et al 1997)
Foi pesquisado o efeito do aumento da irradiacircncia (15 a 100 da luz solar
cheia L15 a L100) sobre o crescimento a taxa fotossinteacutetica liacutequida maacutexima
(Pmax) a compensaccedilatildeo (CI) a saturaccedilatildeo de irradiacircncia de A annua e a produccedilatildeo
de artemisinina Na luz solar plena A annua apresentou uma capacidade elevada
de fotossiacutentese com irradiacircncia baixa manteve um Pmax relativamente elevado
com um CI baixo O crescimento da altura e do diacircmetro biomassa total e da
folha e iacutendice de artemisinina diminuiu com a diminuiccedilatildeo da irradiacircncia que pocircde
ser conectado com a fotossiacutentese mais baixa na irradiacircncia mais baixa em
relaccedilatildeo agrave irradiacircncia mais elevada As irradiacircncias mudaram a alocaccedilatildeo de
biomassa em A annua A relaccedilatildeo massa de folhamassa total da espeacutecie
aumentou com a diminuiccedilatildeo da irradiacircncia mas a relaccedilatildeo raizmassa total e
raizmassa da parte aeacuterea aumentaram geralmente com a irradiacircncia crescente
Assim A annua pode crescer na luz solar parcial e plena Entretanto o
rendimento elevado da biomassa e da artemisinina requerem o cultivo em um
habitat aberto com luz solar adequada (WANG et al 2008)
MATERIAIS E MEacuteTODOS
O ensaio foi conduzido na Estaccedilatildeo Experimental de Biologia da
Universidade de Brasiacutelia (EEB ndash UnB) em casa-de-vegetaccedilatildeo do tipo
ldquoglasshouserdquo no periacuteodo de 19 de abril de 2013 a 6 de dezembro de 2013
(primeiro e segundo semestres respectivamente) Durante o ensaio a casa-de-
vegetaccedilatildeo apresentou uma temperatura meacutedia de aproximadamente 250deg C com
meacutedia das miacutenimas de 1325degC e das maacuteximas de 3675degC aferidas com
termocircmetro convencional de maacutexima e miacutenima O iacutendice de radiaccedilatildeo luminosa
esteve em trono de 50 determinado por fotocircmetro automaacutetico modelo Asahi-
Pentax SP-500
10
A partida de sementes de Aannua foi doada pelo pesquisador Pedro
Melillo Magalhatildees oriundas do CPQBA ndash UNICAMP e produzidas em campo da
proacutepria estaccedilatildeo e utilizadas para a semeadura em sementeiras tipo caixa
contendo a mistura EEB (Estaccedilatildeo Experimental de Biologia) com a seguinte
composiccedilatildeo Latossolo vermelho de cerrado areia vermiculita e composto
orgacircnico na proporccedilatildeo 3311 respectivamente mais a formulaccedilatildeo 4-14-8 na
dose de 100g para 40L da mistura Apoacutes 42 dias da semeadura foram
selecionadas 20 mudas que estavam no ponto de transplante (meacutedia de 15 cm
de altura) Dessa forma foram transplantadas para vasos com capacidade para
25L preenchidos com a mistura EEB
Apoacutes o transplante a altura da parte aeacuterea de todas as plantas foi aferida
semanalmente com o uso de uma trena com o objetivo de desenhar-se a curva
de crescimento As mediccedilotildees tiveram iniacutecio uma semana apoacutes o transplante no
dia 14 de maio
No dia 26 de julho de 201349 dias apoacutes o transplante as plantas foram
transferidas dos vasos de 25L para vasos com maior capacidade (325L) para
favorecer o seu crescimento e desenvolvimento e no dia 17 de setembro102 dias
apoacutes o transplante foi feita uma suplementaccedilatildeo de terra para as 20 plantas com o
mesmo objetivo mediante a colocaccedilatildeo por baixo de um outro vaso de mesmo
tamanho contendo metade de seu volume em Substrato EEB Isso permitiu que
as raiacutezes crescessem no volume adicional de mistura atraveacutes dos furos de
drenagem do vaso original
O controle de plantas daninhas foi feito manualmente e o controle
fitossanitaacuterio atraveacutes de acompanhamento e sucessivas observaccedilotildees Ao fim do
ensaio foi observada uma pequena infestaccedilatildeo com cochonilhas As cochonilhas
foram identificadas por Pseudococcus citri Risso ndash mais conhecida por
ldquocochonilha algodatildeordquo Foi parcialmente controlada em curto prazo com uma
pulverizaccedilatildeo manual de soluccedilatildeo de detergente (10 ml 1 litro de aacutegua)
Ao fim do ensaio dia 18 de outubro foram obtidas as massas fresca e
seca das plantas bem como os coeficientes de variaccedilatildeo dos dados
11
RESUTADOS E DISCUSSAtildeO
Os resultados do presente ensaio encontram-se representados nas Figuras
4 e 5 as quais representam respectivamente a curva de crescimento de Aannua
em vinte semana (s) em casa-de-vegetaccedilatildeo e a evoluccedilatildeo da taxa meacutedia diaacuteria de
crescimento
Observando-se a Figura 2 que apresenta a evoluccedilatildeo da taxa meacutedia de
crescimento verificou-se que entre a quinta e a setima semanas a taxa meacutedia
diaacuteria de crescimento cresceu de 08 cm ao dia para em torno de 20 cm por dia
tendo havido um decrescimo e um estabilidade entre a oitava e a deacutecima segunda
semanas quando entatildeo ocorreu o segundo pico passando a taxa meacutedia diaacuteria de
crescimento de 12 cm para 18 cm seguindo-se um decrescimo ateacute 05 cmdia
nas deacutecima sexta e deacutecima seacutetimas semanas quando entatildeo houve o terceiro
pico na deacutecima oitava semana atingindo 08cmdia e novamente decaindo ateacute 04
cmdia na vigeacutesima semana
0
50
100
150
1s 3s 5s 7s 9s 11s 13s 15s 17s 19s
Alt
ura
em
cm
Crescimento meacutedio de Artemisia annua em vasos em casa de vegataccedilatildeo durante 20 semanas
(s)
Figura 1 ndash Crescimento meacutedio de A annua em vasos em casa-de-vegetaccedilatildeo durante 20 semanas (s) ndash Observa-se que a altura das plantas aumentou
notavelmente a partir da quinta semana apoacutes o transplante correspondendo ao primeiro pico de crescimento
12
Os picos de crescimento de A annua submetida ao cultivo em vasos em
casa-de-vegetaccedilatildeo podem ser explicados pelas interferecircncias do pesquisador que
visava maximizar o desenvolvimento das plantas O primeiro pico pode ser
atribuiacutedo ao padratildeo de crescimento da planta Por ocasiatildeo da primeira troca de
vasos quando a planta ganhou 2145 de volume de substrato para explorar
teria havido o segundo pico por volta da deacutecima segunda semana O terceiro pico
se deu em consequecircncia da segunda suplementaccedilatildeo de substrato ocorrida por
volta da deacutecima seacutetima semana
O aproveitamento da segunda suplementaccedilatildeo foi efetivo tendo as plantas
explorado o volume de substrato adicional em sua totalidade ocupando-o por
inteiro o volume (Figura 6)
Eacute consenso entre pesquisadores que as plantas crescidas em vasos nunca
alcanccedilam seu potencial maior conforme imagens de suas raiacutezes mostram Uma
teacutecnica meacutedica da imagem chamada a imagem de ressonacircncia magneacutetico (MRI)
foi usada por investigadores para capturar instantacircneos da raiz da planta no vaso
As figuras obtidas revelam que as raiacutezes ldquodetectam o tamanho do vasordquo e emitem
um sinal que resulta na restriccedilatildeo o crescimento da planta (POORTER et al 2012)
Poorter et al (2012) esclarecem que a maioria das experiecircncias em
biologia de plantas usa plantas crescidas em algum tipo de recipiente ou vaso
Uma meta-anaacutelise em 65 estudos que analisaram o efeito do tamanho do vaso no
0
05
1
15
2
25
1s 3s 5s 7s 9s 11s 13s 15s 17s 19s
Ce
ntiacute
met
ros
po
r d
ia
Evoluccedilatildeo da taxa meacutedia diaacuteria de crescimento de Artemisia annua em casa de vegetaccedilatildeo por
20 semanas
Figura 2 ndash Evoluccedilatildeo da taxa diaacuteria de cresimento de A annua em casa de vegetaccedilatildeo por 20 semanas (s)
13
crescimento e em variaacuteveis afins foi conduzida e verificou que em meacutedia dobrar o
tamanho do vaso aumentou a produccedilatildeo da biomassa da planta em 43 Uma
anaacutelise adicional de efeitos do tamanho do vaso nos componentes afins do
crescimento sugere que o crescimento reduzido em vasos menores eacute causado
principalmente por uma reduccedilatildeo na fotossiacutentese por aacuterea da folha da unidade
mais do que por mudanccedilas na morfologia da folha ou no alocamento de
biomassa O tamanho apropriado do vaso dependeraacute logicamente do tamanho
das plantas que crescem neles Baseado em vaacuterias linhas da evidecircncia noacutes
sugerimos que um tamanho apropriado do vaso eacute um no qual a biomassa da
planta natildeo exceda 1 g L-1 Na praacutetica atual da pesquisa 65 das experiecircncias
excedem essa referecircncia Noacutes sugerimos que os investigadores devam
considerar com cuidado o tamanho do vaso em suas experiecircncias porque os
vasos pequenos podem mudar resultados experimentais e sabotar a finalidade da
experiecircncia
No presente ensaio de vasos foi obtido uma massa seca da parte aeacuterea
meacutedia de 2995g com um coeficiente de variaccedilatildeo de 3001 com uma planta por
vaso com dois transplantes para ganho de volume de solo a ser explorado O
corte das plantas se deu com 80 dias apoacutes o transplante
Quiteacuterio (2006) tambeacutem em ensaio de vasos obteve a meacutedia 25g de massa
seca de A annua em ensaio de vasos com duas plantas onde a colheita foi feita
75 dias apoacutes a semeadura no preacute-florescimento Os dois resultados apresentam
coerecircncia entre si
O ataque de cochonilhas observado era esperado como um reflexo natural
do estresse das plantas que satildeo submetidas ao cultivo em vaso em casa-de-
vegetaccedilatildeo
14
CONCLUSAtildeO
Nas condiccedilotildees do presente ensaio concluiu-se que o cultivo de Artemisia annua
em vasos e em casa-de-vegetaccedilatildeo eacute viaacutevel e pode ser notavelmente expressivo
com porte superior a 15m de altura e massa seca da parte aeacuterea meacutedia em torno
de 30g
Numa etapa posterior visualizam-se os ensaios objetivando a geraccedilatildeo de uma
tecnologia de produccedilatildeo tendo como alvo a produtividade em artesinina-A que eacute o
componente ativo contra malaacuteria
15
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17
DOCUMENTAacuteRIO FOTOGRAacuteFICO
Foto 1 ndash Mudas na sementeira prontas para transplante - Foto da autora Nayara Carvalho
Foto 2 ndash Mudas de Artemisia annua no dia do transplante ndash Foto da autora Nayara
Carvalho
18
Foto 3 ndash Aspecto geral do ensaio ndash Foto da autora Nayara Carvalho
Foto 4 ndash Suplementaccedilatildeo de substrato ndash Foto do orientador Jean Kleber
19
Foto 5 ndash Aproveitamento pela planta di suplemento de substrato ndash Foto do orientador Jean Kleber
Foto 6 ndash A planta mais alta ao final do ensaio ndash Foto do orientador Jean Kleber
20
Foto 8 ndash Ataque de colchonilhas em A annua ndash Foto da autora Nayara Carvalho
Foto 7 ndash A planta mais baixa ao final do ensaio
3
A descriccedilatildeo botacircnica menciona que A annua eacute uma planta anual de haste
uacutenica glabra doce-aromaacutetica que cresce ateacute 1 m de altura (2 m como ruderal) A
haste eacute ereta nervada e marrom ou violeta-marrom As folhas basais satildeo 3-
pinatissectas (divididas trecircs vezes em foliacuteolos profundamente cortados) 3-5 cm
de comprimento e 2-4 cm de largura as folhas superiores satildeo 1-2-pinatissectas
menores e seacutesseis (sem peciacuteolo) Os capiacutetulos satildeo globosas com 2-25
miliacutemetros de diacircmetro em paniacuteculas frouxas O invoacutelucro (seacuterie das braacutecteas em
torno do capiacutetulo) eacute composto de braacutecteas glabras imbricadas As braacutecteas
exteriores satildeo verdes e linear-oblongas as braacutecteas internas satildeo brilhantes e
oval-arredondadas com uma margem larga fina seca Os capiacutetulos satildeo
disciformes e compostos de floretes filiformes exteriores (femininas) e de floretes
internos no disco (hermafroditas) Os floretes centrais numerosos do disco satildeo
esverdeados ou amarelados O fruto eacute um aquecircnio amarelo-marrom de parede
fina (pequeno seco) 06-08 miliacutemetros de tamanho com uma superfiacutecie
brilhante marcada com sulcos verticais e contendo uma uacutenica semente Os
aquecircnios natildeo tecircm nenhum papo e portanto natildeo satildeo dispersados pelo vento
como satildeo muitos outros da famiacutelia Asteraceae (Compositae)
(httpwwwkeworgplants-fungiArtemisia-annuahtm)
COMPOSICcedilAtildeO E USO A espeacutecie A annua eacute conhecida como ldquoQing Haordquo na China e eacute a fonte da
Medicina Tradicional Chinesa (MTC) que foi usada por mais de 2000 anos para
aliviar febres Na MTC prescreve-se frequentemente em combinaccedilatildeo com outros
ervas para tratar (aleacutem agraves febres) a icteriacutecia a dor de cabeccedila a vertigem e os
sangramentos nasais A pesquisa cientiacutefica da atividade anti-malaacuterica de A annua
comeccedilou no princiacutepio dos anos 70 em resposta agrave resistecircncia crescente agraves drogas
anti-malaacutericas estabelecidas por parte dos protozoaacuterios parasitas que causam a
malaacuteria (Protozoaacuterios do gecircnero Plasmodium ) O componente quiacutemico
artemisinina que ocorre naturalmente nas folhas da Aannua eacute um potente
agente anti-malaacuterico e pode matar o parasita mais agressivo o Plasmodium
falciparum (eacute seletivamente toacutexico ao estaacutegio assexual de eritrocito dos parasitas)
A artemisinina extraiacuteda de Aannua tornou-se extremamente importante em tratar
a malaacuteria desde que a resistecircncia do parasita a muitos outros antimalaacutericos se
tornou difundida (httpwwwkeworgplants-fungiArtemisia-annuahtm)
4
A planta A annua (Asteraceae) eacute listada na medicina chinesa como um
remeacutedio para vaacuterias febres incluindo a malaacuteria e contem um bem estabelecido
composto antimalaacuterico a artemisinina Neste estudo um hiacutebrido de A annua foi
cultivado com sucesso na Aacutefrica Central As partes aeacutereas da planta continham
063 - 070 de artemisinina por massa seca e aproximadamente 40 desta
artemisinina poderia ser extraiacuteda por meacutetodos simples da preparaccedilatildeo do chaacute
Cinco pacientes da malaacuteria que foram tratados com A annua mostraram um
desaparecimento raacutepido do parasita dentro de 2-4 dias Uma experimentaccedilatildeo
adicional com os 48 pacientes de malaacuteria mostrou um desaparecimento do
parasita em 44 pacientes (92) dentro de 4 dias Ambas as experimentaccedilotildees
mostraram uma melhoria marcada dos sintomas Estes resultados justificam
pesquisas adicionais do efeito antimalaacuterico de preparaccedilotildees de A annua
(MUELLER et al 2000)
Em fases de crescimento e desenvolvimento diferentes foi pesquisada a
variaccedilatildeo na quantidade e na qualidade do oacuteleo essencial de A annua incluindo
preacute- floraccedilatildeo floraccedilatildeo e poacutes - floraccedilatildeo Os oacuteleos foram obtidos por hidrodestilaccedilatildeo
das amostras secas ao ar Os rendimentos dos oacuteleos ( pp) nas diferentes
fases foram da ordem de preacute- floraccedilatildeo (097) floraccedilatildeo (1 23) e poacutes- floraccedilatildeo
(087) Os oacuteleos foram analisados por espectrometria de massa e cromatografia
em fase gasosa No total 32 35 e 33 constituintes foram identificados e
quantificados no oacuteleo de preacute - floraccedilatildeo floraccedilatildeo e poacutes - floraccedilatildeo representando
9767 92 e 92 4 dos oacuteleos respectivamente Cacircnfora 18-cineol canfeno
spatulenol alfandashpineno e artemiacutesia-cetona foram os principais componentes em
todas as amostras Monoterpenos eram o principal grupo de compostos em preacute-
floraccedilatildeo (6996) floraccedilatildeo (7244) e poacutes- floraccedilatildeo (7096)
(MOHAMMADREZA 2008)
A comparaccedilatildeo do perfil de cromatografia de gaacutes do oacuteleo essencial da A
annua produzido no Brasil com aqueles de outras origens revelou a variaccedilatildeo
significativa de seus constituintes O comportamento sazonal do iacutendice do
artemisinina 13 contra a produccedilatildeo de oacuteleo essencial foi observado durante um
periacuteodo da colheita A viabilidade econocircmica de diversos metodologias de
purificaccedilatildeo para a produccedilatildeo da artemisinina foi testada Foi produzido o composto
anti-malaacuterico 13 a um custo total de US$ 115 por grama (FOGLIO 1996)
5
ARTEMISININA
Artemisinina eacute uma lactona sesquiterpecircnica com uma ponte endoperoacutexido
e foi produzida semi-sinteticamente como uma droga antimalaacuterica A eficaacutecia do
chaacute feito de A annua no tratamento da malaacuteria eacute contencioso De acordo com
alguns autores a artemesinina natildeo eacute soluacutevel em aacutegua e as concentraccedilotildees nestas
infusotildees satildeo consideradas insuficientes para tratar a malaacuteria (MUELER et al
2004 RATH et al 2004 JANSEN 2006)
Em 2004 o ministro da sauacutede da Etioacutepia mudou a droga antimalaacuterica de
primeira linha da Etioacutepia de sulfadoxinaprimetamina (Fansidar) que tem uma
taxa de falha em meacutedia de 36 no tratamento para a artemetherlumefantrine
(Coartem) uma terapia de droga que conteacutem a artemisinina que eacute 100 eficaz
quando usado corretamente apesar de uma relativa falta mundial do produto do
derivado de A annua (MALARIA UPDATE 20052013)
A malaacuteria eacute causada primeiramente pelo Plasmodium falciparum que
invade as hemaacutecias e conteacutem heme-grupos ricos em ferro (na forma do
hemozoina) (POSNER amp OrsquoNEIL 2004)
O mecanismo de accedilatildeo proposto da artemisinina contra a malaacuteria envolve a
clivagem de pontes de endoperoacutexido pelo ferro produzindo os radicais livres
(ferro-oxo hipervalente espeacutecies epoacutexidos aldeiacutedos e compostos do dicarbonil)
que danificam as macromoleacuteculas bioloacutegicas causando estresse oxidativo nas
ceacutelulas do parasita (CUMMING 1997)
Com a possibilidade de isolarem maiores quantidades de artemisinina
(quinghaosu) plantas de A annua foram cultivadas por Liersch et al (1986) e
analisadas em estaacutegios diferentes de desenvolvimento O iacutendice mais elevado de
artemisinina foi encontrado imediatamente antes do florescimento Era tambeacutem
possiacutevel correlacionar o desenvolvimento das plantas com o iacutendice maacuteximo do
artemisinina As plantas de A annua cultivadas de vaacuterias outras fontes tambeacutem
foram examinadas para o iacutendice de artemisinina De acordo com os resultados
obtidos nenhuma dessas plantas contiveram quantidades suficientes do
composto (artemisinina) para justificar isolamento em uma escala teacutecnica Aleacutem
disso outras espeacutecies de Artemisia foram testadas e foi encontrada artemisinina
em somente uma outra espeacutecie Para aumentar a quantidade de artemisinina
durante o periacuteodo do crescimento da planta foram testados dois reguladores
6
hormonais de crescimento em A annua genoacutetipo 811 Os resultados mostraram
que o chlormequat podia aumentar o teor do composto(artemisinina) em 30 em
relaccedilatildeo agraves plantas natildeo tratadas Foram encontrados tambeacutem alguns discretos
efeitos dos reguladores de crescimento na morfologia dos trichomas glandulares
Para finalidades de produccedilatildeo plantas com um iacutendice elevado de
artemisinina satildeo requeridas Woerdenbag et al (1994) acompanharam o
desenvolvimento do conteuacutedo de artemisinina e dos sesquiterpenes
biosinteticamente relacionados aacutecido artemisiacutenico arteannuina B e artemisiteno
em plantas de A annua durante um periacuteodo da vegetaccedilatildeo no Vietnam onde esta
espeacutecie eacute indiacutegena Aleacutem disso o iacutendice do oacuteleo essencial e sua composiccedilatildeo
foram estudados As amostras das folhas gemas as flores ou as flores de poacutes-
florescimento e frutos foram analisados nos diferentes estaacutegios vegetativo (5 6 e
8 meses de idade) na formaccedilatildeo maciccedila das gemas (9 meses) no pleno
florescimento (10 meses) e poacutes-florescimento (10frac12 meses) O iacutendice mais
elevado de artemisinina (086 da massa seca) estava nas folhas de plantas com
5 meses de idade Neste estaacutegio o rendimento mais elevado da folha tambeacutem foi
encontrado Subsequentemente o iacutendice de artemisinina caiu gradualmente Na
idade de 5 meses os maiores conteuacutedos de aacutecido artemisinico e arteannuina-B
016 e 008 da massa seca respectivamente foram tambeacutem encontrados O
artemisiteno estava presente em todos os estaacutegios do desenvolvimento variando
de 0002 a 009 da massa seca Com 19 volumemassa o iacutendice do oacuteleo
essencial (OE) foi maacuteximo imediatamente antes do florescimento e foi composto
de 55 de monoterpenos e 45 de sesquiterpenes Em todos os outros estaacutegios
(04 ndash 10 volumemassa do oacuteleo essencial) esta relaccedilatildeo foi de 30 70 Os
principais componentes do OE foram cacircnfora e germacreno-D
Observaccedilotildees mostraram que o rendimento da artemisinina esteve
correlacionado positivamente com o rendimento da folha e o nuacutemero das
colheitas Os rendimentos elevados de artemisinina ocorreram quando a colheita
produziu folhas artemisinina-ricas acompanhadas pelo menor crescimento
possiacutevel do tecido da haste alcanccedilado em colheitas muacuteltiplas em plantas
crescidas a tempo integral e plantadas mais cedo As colheitas crescidas por ge30
semanas e colhidas trecircs a quatro vezes deram os rendimentos meacutedios de
441plusmn142 e de 742plusmn156 respectivamente Muito mais altos do que o rendimento
maacuteximo de 25 quilogramas haminus1 relatado para a A annua em estudos anteriores
7
Concluiu-se que para obter artemisinina em altos niacuteveis A annua deve ser
colhida quatro vezes (KUMAR et al 2004)
ASPECTOS AGRONOcircMICOS
Propagaccedilatildeo
Em meacutedia 1000 sementes pesam 003 g e natildeo diminuem sua viabilidade
ao secar Satildeo acessiacuteveis ao armazenamento agrave frio de longo prazo Germinam de
janeiro a marccedilo A germinaccedilatildeo de 100 foi obtida em um meio de germinaccedilatildeo de
aacutegar a 1 em uma temperatura de 15degC sob um fotoperiacuteodo 816 horas claro-
escuro (MOHAMMADREZA 2008)
A Artemisia annua eacute plantada extensamente e comercialmente
principalmente como uma fonte de oacuteleos essenciais e tambeacutem de artemisinina
sobretudo em regiotildees da China e VietnamNessas regiotildees o ciclo da planta em
condiccedilotildees naturais chega a 10 meses Na Europa e na Ameacuterica as plantas
crescem mais rapidamente terminando seu ciclo de vida em apenas seis meses
mesmo no campo Cresce melhor em talhotildees abertos e ensolarados em solos
arenosos e aluviais feacuterteis que sejam neutros a ligeiramente aacutecidos e que tenham
uma boa retenccedilatildeo de umidade e natildeo tolera a seca ou o encharcamento As
sementes germinam de janeiro a marccedilo e a frutificaccedilatildeo (colheita das sementes)
ocorre entre outubro e novembro (httpwwwkeworgplants-fungiArtemisia-
annuahtm)
Conceiccedilatildeo et al (2013) testaram a germinaccedilatildeo da semente de A annua
cultivar Silves sob duas condiccedilotildees ambientais a fim de fornecer informaccedilotildees
sobre seu cultivo Na primeira condiccedilatildeo realizou-se o teste padratildeo com 4 lotes de
100g de sementes semeadas em gerbox sobre papel mata-borratildeo e dispostas
em germinador agrave temperatura de 25-30deg C expostas agrave luz durante 8 horas diaacuterias
e umedecidas quando necessaacuterio ateacute sua emergecircncia Na segunda etapa foi
realizado o mesmo procedimento anterior poreacutem as sementes permaneceram no
germinador em ausecircncia de luz sob as mesmas condiccedilotildees de temperatura e
umidade Segundo anaacutelise estatiacutestica em Tukey a 5 aplicada aqui sobre as
meacutedias de cada lote de 100g sementes os tratamentos obtiveram diferenccedilas
significativas sendo que as sementes expostas agrave luz obtiveram maiores valores
8
de germinaccedilatildeo Em ambiente com total ausecircncia de luz as sementes obtiveram
baixiacutessima taxa de germinaccedilatildeo no mesmo periacuteodo que as sementes em ambiente
iluminado Esse fato indica que a semente de A annua eacute fotoblaacutestica positiva e
assim necessita de um miacutenimo de luz para que ocorra sua germinaccedilatildeo por esse
motivo natildeo podem ser enterradas e sua semeadura deve ser apenas a lanccedilo ou
em superfiacutecie sem cobertura com terra Esta caracteriacutestica eacute comum agrave muitas
espeacutecies que produzem sementes miuacutedas
Adubaccedilatildeo
Em 2004 e 2005 um estudo foi realizado com o objetivo de determinar o
rendimento os componentes do rendimento e o iacutendice da artemisinina de A
annua cultivada sob quatro aplicaccedilotildees do nitrogecircnio (0 40 80 e 120 quilogramas
haminus1) na regiatildeo de Ccedilukurova na Turquia As experimentaccedilotildees de campo foram
conduzidas na universidade de Ccedilukurova no departamento de agricultura da
faculdade Nesse estudo a altura da planta o nuacutemero de ramos o rendimento
fresco e seco da erva o rendimento fresco e seco da folha o iacutendice do oacuteleo
essencial e o iacutendice da artemisinina (por cromatografia liacutequida pelo HPLC de
desempenho elevado) foram examinados Pela anaacutelise de variaccedilatildeo as doses de
nitrogecircnio natildeo tiveram nenhum efeito estatiacutestico nas caracteriacutesticas investigadas
agrave exceccedilatildeo do iacutendice de artemisinina Esse iacutendice nas folhas secas foi afetado
significativamente pelas aplicaccedilotildees do nitrogecircnio que variaram de 632 a 2750
mg 100 gminus1 (OZGUVEN et al 2008)
Outros aspectos
Uma pesquisa desenvolvida em MEDIPLANT (Suiacuteccedila) e no CPQBA-
UNICAPM (Brasil) envolveu a seleccedilatildeo e produccedilatildeo de genoacutetipos ricos em
artemisinina apresentando biomassa elevada seguido por uma segunda seleccedilatildeo
para a adaptaccedilatildeo agraves circunstacircncias climaacuteticas do Brasil Com hibridizaccedilatildeo
controlada entre genoacutetipos selecionados da China e do Vietnam o ganho
geneacutetico foi obtido nos termos do iacutendice da artemisinina e da uniformidade da
populaccedilatildeo Com o aumento do iacutendice de biomassa e da artemisinina (estimado
pela monitoraccedilatildeo analiacutetica) era possiacutevel aumentar a produccedilatildeo de artemisinina de
9
5 Kgha (populaccedilatildeo baacutesica) para aproximadamente 25 Kgha (populaccedilatildeo
geneticamente produzida) No cultivo realizado no Brasil em 3 de 7 linhas
hiacutebridas 239 de x 1V Ch x Viet55 e 1V x 243 produziram respectivamente
2543 2305 e 2127 quilogramas de artemisininahacorte com as 2 colheitas
possiacuteveis por o ano O cultivo destas linhas hiacutebridas novas no Brasil eacute uma
teacutecnica praticaacutevel e altamente competitiva devido agrave produccedilatildeo obtida
(MAGALHAtildeES et al 1997)
Foi pesquisado o efeito do aumento da irradiacircncia (15 a 100 da luz solar
cheia L15 a L100) sobre o crescimento a taxa fotossinteacutetica liacutequida maacutexima
(Pmax) a compensaccedilatildeo (CI) a saturaccedilatildeo de irradiacircncia de A annua e a produccedilatildeo
de artemisinina Na luz solar plena A annua apresentou uma capacidade elevada
de fotossiacutentese com irradiacircncia baixa manteve um Pmax relativamente elevado
com um CI baixo O crescimento da altura e do diacircmetro biomassa total e da
folha e iacutendice de artemisinina diminuiu com a diminuiccedilatildeo da irradiacircncia que pocircde
ser conectado com a fotossiacutentese mais baixa na irradiacircncia mais baixa em
relaccedilatildeo agrave irradiacircncia mais elevada As irradiacircncias mudaram a alocaccedilatildeo de
biomassa em A annua A relaccedilatildeo massa de folhamassa total da espeacutecie
aumentou com a diminuiccedilatildeo da irradiacircncia mas a relaccedilatildeo raizmassa total e
raizmassa da parte aeacuterea aumentaram geralmente com a irradiacircncia crescente
Assim A annua pode crescer na luz solar parcial e plena Entretanto o
rendimento elevado da biomassa e da artemisinina requerem o cultivo em um
habitat aberto com luz solar adequada (WANG et al 2008)
MATERIAIS E MEacuteTODOS
O ensaio foi conduzido na Estaccedilatildeo Experimental de Biologia da
Universidade de Brasiacutelia (EEB ndash UnB) em casa-de-vegetaccedilatildeo do tipo
ldquoglasshouserdquo no periacuteodo de 19 de abril de 2013 a 6 de dezembro de 2013
(primeiro e segundo semestres respectivamente) Durante o ensaio a casa-de-
vegetaccedilatildeo apresentou uma temperatura meacutedia de aproximadamente 250deg C com
meacutedia das miacutenimas de 1325degC e das maacuteximas de 3675degC aferidas com
termocircmetro convencional de maacutexima e miacutenima O iacutendice de radiaccedilatildeo luminosa
esteve em trono de 50 determinado por fotocircmetro automaacutetico modelo Asahi-
Pentax SP-500
10
A partida de sementes de Aannua foi doada pelo pesquisador Pedro
Melillo Magalhatildees oriundas do CPQBA ndash UNICAMP e produzidas em campo da
proacutepria estaccedilatildeo e utilizadas para a semeadura em sementeiras tipo caixa
contendo a mistura EEB (Estaccedilatildeo Experimental de Biologia) com a seguinte
composiccedilatildeo Latossolo vermelho de cerrado areia vermiculita e composto
orgacircnico na proporccedilatildeo 3311 respectivamente mais a formulaccedilatildeo 4-14-8 na
dose de 100g para 40L da mistura Apoacutes 42 dias da semeadura foram
selecionadas 20 mudas que estavam no ponto de transplante (meacutedia de 15 cm
de altura) Dessa forma foram transplantadas para vasos com capacidade para
25L preenchidos com a mistura EEB
Apoacutes o transplante a altura da parte aeacuterea de todas as plantas foi aferida
semanalmente com o uso de uma trena com o objetivo de desenhar-se a curva
de crescimento As mediccedilotildees tiveram iniacutecio uma semana apoacutes o transplante no
dia 14 de maio
No dia 26 de julho de 201349 dias apoacutes o transplante as plantas foram
transferidas dos vasos de 25L para vasos com maior capacidade (325L) para
favorecer o seu crescimento e desenvolvimento e no dia 17 de setembro102 dias
apoacutes o transplante foi feita uma suplementaccedilatildeo de terra para as 20 plantas com o
mesmo objetivo mediante a colocaccedilatildeo por baixo de um outro vaso de mesmo
tamanho contendo metade de seu volume em Substrato EEB Isso permitiu que
as raiacutezes crescessem no volume adicional de mistura atraveacutes dos furos de
drenagem do vaso original
O controle de plantas daninhas foi feito manualmente e o controle
fitossanitaacuterio atraveacutes de acompanhamento e sucessivas observaccedilotildees Ao fim do
ensaio foi observada uma pequena infestaccedilatildeo com cochonilhas As cochonilhas
foram identificadas por Pseudococcus citri Risso ndash mais conhecida por
ldquocochonilha algodatildeordquo Foi parcialmente controlada em curto prazo com uma
pulverizaccedilatildeo manual de soluccedilatildeo de detergente (10 ml 1 litro de aacutegua)
Ao fim do ensaio dia 18 de outubro foram obtidas as massas fresca e
seca das plantas bem como os coeficientes de variaccedilatildeo dos dados
11
RESUTADOS E DISCUSSAtildeO
Os resultados do presente ensaio encontram-se representados nas Figuras
4 e 5 as quais representam respectivamente a curva de crescimento de Aannua
em vinte semana (s) em casa-de-vegetaccedilatildeo e a evoluccedilatildeo da taxa meacutedia diaacuteria de
crescimento
Observando-se a Figura 2 que apresenta a evoluccedilatildeo da taxa meacutedia de
crescimento verificou-se que entre a quinta e a setima semanas a taxa meacutedia
diaacuteria de crescimento cresceu de 08 cm ao dia para em torno de 20 cm por dia
tendo havido um decrescimo e um estabilidade entre a oitava e a deacutecima segunda
semanas quando entatildeo ocorreu o segundo pico passando a taxa meacutedia diaacuteria de
crescimento de 12 cm para 18 cm seguindo-se um decrescimo ateacute 05 cmdia
nas deacutecima sexta e deacutecima seacutetimas semanas quando entatildeo houve o terceiro
pico na deacutecima oitava semana atingindo 08cmdia e novamente decaindo ateacute 04
cmdia na vigeacutesima semana
0
50
100
150
1s 3s 5s 7s 9s 11s 13s 15s 17s 19s
Alt
ura
em
cm
Crescimento meacutedio de Artemisia annua em vasos em casa de vegataccedilatildeo durante 20 semanas
(s)
Figura 1 ndash Crescimento meacutedio de A annua em vasos em casa-de-vegetaccedilatildeo durante 20 semanas (s) ndash Observa-se que a altura das plantas aumentou
notavelmente a partir da quinta semana apoacutes o transplante correspondendo ao primeiro pico de crescimento
12
Os picos de crescimento de A annua submetida ao cultivo em vasos em
casa-de-vegetaccedilatildeo podem ser explicados pelas interferecircncias do pesquisador que
visava maximizar o desenvolvimento das plantas O primeiro pico pode ser
atribuiacutedo ao padratildeo de crescimento da planta Por ocasiatildeo da primeira troca de
vasos quando a planta ganhou 2145 de volume de substrato para explorar
teria havido o segundo pico por volta da deacutecima segunda semana O terceiro pico
se deu em consequecircncia da segunda suplementaccedilatildeo de substrato ocorrida por
volta da deacutecima seacutetima semana
O aproveitamento da segunda suplementaccedilatildeo foi efetivo tendo as plantas
explorado o volume de substrato adicional em sua totalidade ocupando-o por
inteiro o volume (Figura 6)
Eacute consenso entre pesquisadores que as plantas crescidas em vasos nunca
alcanccedilam seu potencial maior conforme imagens de suas raiacutezes mostram Uma
teacutecnica meacutedica da imagem chamada a imagem de ressonacircncia magneacutetico (MRI)
foi usada por investigadores para capturar instantacircneos da raiz da planta no vaso
As figuras obtidas revelam que as raiacutezes ldquodetectam o tamanho do vasordquo e emitem
um sinal que resulta na restriccedilatildeo o crescimento da planta (POORTER et al 2012)
Poorter et al (2012) esclarecem que a maioria das experiecircncias em
biologia de plantas usa plantas crescidas em algum tipo de recipiente ou vaso
Uma meta-anaacutelise em 65 estudos que analisaram o efeito do tamanho do vaso no
0
05
1
15
2
25
1s 3s 5s 7s 9s 11s 13s 15s 17s 19s
Ce
ntiacute
met
ros
po
r d
ia
Evoluccedilatildeo da taxa meacutedia diaacuteria de crescimento de Artemisia annua em casa de vegetaccedilatildeo por
20 semanas
Figura 2 ndash Evoluccedilatildeo da taxa diaacuteria de cresimento de A annua em casa de vegetaccedilatildeo por 20 semanas (s)
13
crescimento e em variaacuteveis afins foi conduzida e verificou que em meacutedia dobrar o
tamanho do vaso aumentou a produccedilatildeo da biomassa da planta em 43 Uma
anaacutelise adicional de efeitos do tamanho do vaso nos componentes afins do
crescimento sugere que o crescimento reduzido em vasos menores eacute causado
principalmente por uma reduccedilatildeo na fotossiacutentese por aacuterea da folha da unidade
mais do que por mudanccedilas na morfologia da folha ou no alocamento de
biomassa O tamanho apropriado do vaso dependeraacute logicamente do tamanho
das plantas que crescem neles Baseado em vaacuterias linhas da evidecircncia noacutes
sugerimos que um tamanho apropriado do vaso eacute um no qual a biomassa da
planta natildeo exceda 1 g L-1 Na praacutetica atual da pesquisa 65 das experiecircncias
excedem essa referecircncia Noacutes sugerimos que os investigadores devam
considerar com cuidado o tamanho do vaso em suas experiecircncias porque os
vasos pequenos podem mudar resultados experimentais e sabotar a finalidade da
experiecircncia
No presente ensaio de vasos foi obtido uma massa seca da parte aeacuterea
meacutedia de 2995g com um coeficiente de variaccedilatildeo de 3001 com uma planta por
vaso com dois transplantes para ganho de volume de solo a ser explorado O
corte das plantas se deu com 80 dias apoacutes o transplante
Quiteacuterio (2006) tambeacutem em ensaio de vasos obteve a meacutedia 25g de massa
seca de A annua em ensaio de vasos com duas plantas onde a colheita foi feita
75 dias apoacutes a semeadura no preacute-florescimento Os dois resultados apresentam
coerecircncia entre si
O ataque de cochonilhas observado era esperado como um reflexo natural
do estresse das plantas que satildeo submetidas ao cultivo em vaso em casa-de-
vegetaccedilatildeo
14
CONCLUSAtildeO
Nas condiccedilotildees do presente ensaio concluiu-se que o cultivo de Artemisia annua
em vasos e em casa-de-vegetaccedilatildeo eacute viaacutevel e pode ser notavelmente expressivo
com porte superior a 15m de altura e massa seca da parte aeacuterea meacutedia em torno
de 30g
Numa etapa posterior visualizam-se os ensaios objetivando a geraccedilatildeo de uma
tecnologia de produccedilatildeo tendo como alvo a produtividade em artesinina-A que eacute o
componente ativo contra malaacuteria
15
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17
DOCUMENTAacuteRIO FOTOGRAacuteFICO
Foto 1 ndash Mudas na sementeira prontas para transplante - Foto da autora Nayara Carvalho
Foto 2 ndash Mudas de Artemisia annua no dia do transplante ndash Foto da autora Nayara
Carvalho
18
Foto 3 ndash Aspecto geral do ensaio ndash Foto da autora Nayara Carvalho
Foto 4 ndash Suplementaccedilatildeo de substrato ndash Foto do orientador Jean Kleber
19
Foto 5 ndash Aproveitamento pela planta di suplemento de substrato ndash Foto do orientador Jean Kleber
Foto 6 ndash A planta mais alta ao final do ensaio ndash Foto do orientador Jean Kleber
20
Foto 8 ndash Ataque de colchonilhas em A annua ndash Foto da autora Nayara Carvalho
Foto 7 ndash A planta mais baixa ao final do ensaio
4
A planta A annua (Asteraceae) eacute listada na medicina chinesa como um
remeacutedio para vaacuterias febres incluindo a malaacuteria e contem um bem estabelecido
composto antimalaacuterico a artemisinina Neste estudo um hiacutebrido de A annua foi
cultivado com sucesso na Aacutefrica Central As partes aeacutereas da planta continham
063 - 070 de artemisinina por massa seca e aproximadamente 40 desta
artemisinina poderia ser extraiacuteda por meacutetodos simples da preparaccedilatildeo do chaacute
Cinco pacientes da malaacuteria que foram tratados com A annua mostraram um
desaparecimento raacutepido do parasita dentro de 2-4 dias Uma experimentaccedilatildeo
adicional com os 48 pacientes de malaacuteria mostrou um desaparecimento do
parasita em 44 pacientes (92) dentro de 4 dias Ambas as experimentaccedilotildees
mostraram uma melhoria marcada dos sintomas Estes resultados justificam
pesquisas adicionais do efeito antimalaacuterico de preparaccedilotildees de A annua
(MUELLER et al 2000)
Em fases de crescimento e desenvolvimento diferentes foi pesquisada a
variaccedilatildeo na quantidade e na qualidade do oacuteleo essencial de A annua incluindo
preacute- floraccedilatildeo floraccedilatildeo e poacutes - floraccedilatildeo Os oacuteleos foram obtidos por hidrodestilaccedilatildeo
das amostras secas ao ar Os rendimentos dos oacuteleos ( pp) nas diferentes
fases foram da ordem de preacute- floraccedilatildeo (097) floraccedilatildeo (1 23) e poacutes- floraccedilatildeo
(087) Os oacuteleos foram analisados por espectrometria de massa e cromatografia
em fase gasosa No total 32 35 e 33 constituintes foram identificados e
quantificados no oacuteleo de preacute - floraccedilatildeo floraccedilatildeo e poacutes - floraccedilatildeo representando
9767 92 e 92 4 dos oacuteleos respectivamente Cacircnfora 18-cineol canfeno
spatulenol alfandashpineno e artemiacutesia-cetona foram os principais componentes em
todas as amostras Monoterpenos eram o principal grupo de compostos em preacute-
floraccedilatildeo (6996) floraccedilatildeo (7244) e poacutes- floraccedilatildeo (7096)
(MOHAMMADREZA 2008)
A comparaccedilatildeo do perfil de cromatografia de gaacutes do oacuteleo essencial da A
annua produzido no Brasil com aqueles de outras origens revelou a variaccedilatildeo
significativa de seus constituintes O comportamento sazonal do iacutendice do
artemisinina 13 contra a produccedilatildeo de oacuteleo essencial foi observado durante um
periacuteodo da colheita A viabilidade econocircmica de diversos metodologias de
purificaccedilatildeo para a produccedilatildeo da artemisinina foi testada Foi produzido o composto
anti-malaacuterico 13 a um custo total de US$ 115 por grama (FOGLIO 1996)
5
ARTEMISININA
Artemisinina eacute uma lactona sesquiterpecircnica com uma ponte endoperoacutexido
e foi produzida semi-sinteticamente como uma droga antimalaacuterica A eficaacutecia do
chaacute feito de A annua no tratamento da malaacuteria eacute contencioso De acordo com
alguns autores a artemesinina natildeo eacute soluacutevel em aacutegua e as concentraccedilotildees nestas
infusotildees satildeo consideradas insuficientes para tratar a malaacuteria (MUELER et al
2004 RATH et al 2004 JANSEN 2006)
Em 2004 o ministro da sauacutede da Etioacutepia mudou a droga antimalaacuterica de
primeira linha da Etioacutepia de sulfadoxinaprimetamina (Fansidar) que tem uma
taxa de falha em meacutedia de 36 no tratamento para a artemetherlumefantrine
(Coartem) uma terapia de droga que conteacutem a artemisinina que eacute 100 eficaz
quando usado corretamente apesar de uma relativa falta mundial do produto do
derivado de A annua (MALARIA UPDATE 20052013)
A malaacuteria eacute causada primeiramente pelo Plasmodium falciparum que
invade as hemaacutecias e conteacutem heme-grupos ricos em ferro (na forma do
hemozoina) (POSNER amp OrsquoNEIL 2004)
O mecanismo de accedilatildeo proposto da artemisinina contra a malaacuteria envolve a
clivagem de pontes de endoperoacutexido pelo ferro produzindo os radicais livres
(ferro-oxo hipervalente espeacutecies epoacutexidos aldeiacutedos e compostos do dicarbonil)
que danificam as macromoleacuteculas bioloacutegicas causando estresse oxidativo nas
ceacutelulas do parasita (CUMMING 1997)
Com a possibilidade de isolarem maiores quantidades de artemisinina
(quinghaosu) plantas de A annua foram cultivadas por Liersch et al (1986) e
analisadas em estaacutegios diferentes de desenvolvimento O iacutendice mais elevado de
artemisinina foi encontrado imediatamente antes do florescimento Era tambeacutem
possiacutevel correlacionar o desenvolvimento das plantas com o iacutendice maacuteximo do
artemisinina As plantas de A annua cultivadas de vaacuterias outras fontes tambeacutem
foram examinadas para o iacutendice de artemisinina De acordo com os resultados
obtidos nenhuma dessas plantas contiveram quantidades suficientes do
composto (artemisinina) para justificar isolamento em uma escala teacutecnica Aleacutem
disso outras espeacutecies de Artemisia foram testadas e foi encontrada artemisinina
em somente uma outra espeacutecie Para aumentar a quantidade de artemisinina
durante o periacuteodo do crescimento da planta foram testados dois reguladores
6
hormonais de crescimento em A annua genoacutetipo 811 Os resultados mostraram
que o chlormequat podia aumentar o teor do composto(artemisinina) em 30 em
relaccedilatildeo agraves plantas natildeo tratadas Foram encontrados tambeacutem alguns discretos
efeitos dos reguladores de crescimento na morfologia dos trichomas glandulares
Para finalidades de produccedilatildeo plantas com um iacutendice elevado de
artemisinina satildeo requeridas Woerdenbag et al (1994) acompanharam o
desenvolvimento do conteuacutedo de artemisinina e dos sesquiterpenes
biosinteticamente relacionados aacutecido artemisiacutenico arteannuina B e artemisiteno
em plantas de A annua durante um periacuteodo da vegetaccedilatildeo no Vietnam onde esta
espeacutecie eacute indiacutegena Aleacutem disso o iacutendice do oacuteleo essencial e sua composiccedilatildeo
foram estudados As amostras das folhas gemas as flores ou as flores de poacutes-
florescimento e frutos foram analisados nos diferentes estaacutegios vegetativo (5 6 e
8 meses de idade) na formaccedilatildeo maciccedila das gemas (9 meses) no pleno
florescimento (10 meses) e poacutes-florescimento (10frac12 meses) O iacutendice mais
elevado de artemisinina (086 da massa seca) estava nas folhas de plantas com
5 meses de idade Neste estaacutegio o rendimento mais elevado da folha tambeacutem foi
encontrado Subsequentemente o iacutendice de artemisinina caiu gradualmente Na
idade de 5 meses os maiores conteuacutedos de aacutecido artemisinico e arteannuina-B
016 e 008 da massa seca respectivamente foram tambeacutem encontrados O
artemisiteno estava presente em todos os estaacutegios do desenvolvimento variando
de 0002 a 009 da massa seca Com 19 volumemassa o iacutendice do oacuteleo
essencial (OE) foi maacuteximo imediatamente antes do florescimento e foi composto
de 55 de monoterpenos e 45 de sesquiterpenes Em todos os outros estaacutegios
(04 ndash 10 volumemassa do oacuteleo essencial) esta relaccedilatildeo foi de 30 70 Os
principais componentes do OE foram cacircnfora e germacreno-D
Observaccedilotildees mostraram que o rendimento da artemisinina esteve
correlacionado positivamente com o rendimento da folha e o nuacutemero das
colheitas Os rendimentos elevados de artemisinina ocorreram quando a colheita
produziu folhas artemisinina-ricas acompanhadas pelo menor crescimento
possiacutevel do tecido da haste alcanccedilado em colheitas muacuteltiplas em plantas
crescidas a tempo integral e plantadas mais cedo As colheitas crescidas por ge30
semanas e colhidas trecircs a quatro vezes deram os rendimentos meacutedios de
441plusmn142 e de 742plusmn156 respectivamente Muito mais altos do que o rendimento
maacuteximo de 25 quilogramas haminus1 relatado para a A annua em estudos anteriores
7
Concluiu-se que para obter artemisinina em altos niacuteveis A annua deve ser
colhida quatro vezes (KUMAR et al 2004)
ASPECTOS AGRONOcircMICOS
Propagaccedilatildeo
Em meacutedia 1000 sementes pesam 003 g e natildeo diminuem sua viabilidade
ao secar Satildeo acessiacuteveis ao armazenamento agrave frio de longo prazo Germinam de
janeiro a marccedilo A germinaccedilatildeo de 100 foi obtida em um meio de germinaccedilatildeo de
aacutegar a 1 em uma temperatura de 15degC sob um fotoperiacuteodo 816 horas claro-
escuro (MOHAMMADREZA 2008)
A Artemisia annua eacute plantada extensamente e comercialmente
principalmente como uma fonte de oacuteleos essenciais e tambeacutem de artemisinina
sobretudo em regiotildees da China e VietnamNessas regiotildees o ciclo da planta em
condiccedilotildees naturais chega a 10 meses Na Europa e na Ameacuterica as plantas
crescem mais rapidamente terminando seu ciclo de vida em apenas seis meses
mesmo no campo Cresce melhor em talhotildees abertos e ensolarados em solos
arenosos e aluviais feacuterteis que sejam neutros a ligeiramente aacutecidos e que tenham
uma boa retenccedilatildeo de umidade e natildeo tolera a seca ou o encharcamento As
sementes germinam de janeiro a marccedilo e a frutificaccedilatildeo (colheita das sementes)
ocorre entre outubro e novembro (httpwwwkeworgplants-fungiArtemisia-
annuahtm)
Conceiccedilatildeo et al (2013) testaram a germinaccedilatildeo da semente de A annua
cultivar Silves sob duas condiccedilotildees ambientais a fim de fornecer informaccedilotildees
sobre seu cultivo Na primeira condiccedilatildeo realizou-se o teste padratildeo com 4 lotes de
100g de sementes semeadas em gerbox sobre papel mata-borratildeo e dispostas
em germinador agrave temperatura de 25-30deg C expostas agrave luz durante 8 horas diaacuterias
e umedecidas quando necessaacuterio ateacute sua emergecircncia Na segunda etapa foi
realizado o mesmo procedimento anterior poreacutem as sementes permaneceram no
germinador em ausecircncia de luz sob as mesmas condiccedilotildees de temperatura e
umidade Segundo anaacutelise estatiacutestica em Tukey a 5 aplicada aqui sobre as
meacutedias de cada lote de 100g sementes os tratamentos obtiveram diferenccedilas
significativas sendo que as sementes expostas agrave luz obtiveram maiores valores
8
de germinaccedilatildeo Em ambiente com total ausecircncia de luz as sementes obtiveram
baixiacutessima taxa de germinaccedilatildeo no mesmo periacuteodo que as sementes em ambiente
iluminado Esse fato indica que a semente de A annua eacute fotoblaacutestica positiva e
assim necessita de um miacutenimo de luz para que ocorra sua germinaccedilatildeo por esse
motivo natildeo podem ser enterradas e sua semeadura deve ser apenas a lanccedilo ou
em superfiacutecie sem cobertura com terra Esta caracteriacutestica eacute comum agrave muitas
espeacutecies que produzem sementes miuacutedas
Adubaccedilatildeo
Em 2004 e 2005 um estudo foi realizado com o objetivo de determinar o
rendimento os componentes do rendimento e o iacutendice da artemisinina de A
annua cultivada sob quatro aplicaccedilotildees do nitrogecircnio (0 40 80 e 120 quilogramas
haminus1) na regiatildeo de Ccedilukurova na Turquia As experimentaccedilotildees de campo foram
conduzidas na universidade de Ccedilukurova no departamento de agricultura da
faculdade Nesse estudo a altura da planta o nuacutemero de ramos o rendimento
fresco e seco da erva o rendimento fresco e seco da folha o iacutendice do oacuteleo
essencial e o iacutendice da artemisinina (por cromatografia liacutequida pelo HPLC de
desempenho elevado) foram examinados Pela anaacutelise de variaccedilatildeo as doses de
nitrogecircnio natildeo tiveram nenhum efeito estatiacutestico nas caracteriacutesticas investigadas
agrave exceccedilatildeo do iacutendice de artemisinina Esse iacutendice nas folhas secas foi afetado
significativamente pelas aplicaccedilotildees do nitrogecircnio que variaram de 632 a 2750
mg 100 gminus1 (OZGUVEN et al 2008)
Outros aspectos
Uma pesquisa desenvolvida em MEDIPLANT (Suiacuteccedila) e no CPQBA-
UNICAPM (Brasil) envolveu a seleccedilatildeo e produccedilatildeo de genoacutetipos ricos em
artemisinina apresentando biomassa elevada seguido por uma segunda seleccedilatildeo
para a adaptaccedilatildeo agraves circunstacircncias climaacuteticas do Brasil Com hibridizaccedilatildeo
controlada entre genoacutetipos selecionados da China e do Vietnam o ganho
geneacutetico foi obtido nos termos do iacutendice da artemisinina e da uniformidade da
populaccedilatildeo Com o aumento do iacutendice de biomassa e da artemisinina (estimado
pela monitoraccedilatildeo analiacutetica) era possiacutevel aumentar a produccedilatildeo de artemisinina de
9
5 Kgha (populaccedilatildeo baacutesica) para aproximadamente 25 Kgha (populaccedilatildeo
geneticamente produzida) No cultivo realizado no Brasil em 3 de 7 linhas
hiacutebridas 239 de x 1V Ch x Viet55 e 1V x 243 produziram respectivamente
2543 2305 e 2127 quilogramas de artemisininahacorte com as 2 colheitas
possiacuteveis por o ano O cultivo destas linhas hiacutebridas novas no Brasil eacute uma
teacutecnica praticaacutevel e altamente competitiva devido agrave produccedilatildeo obtida
(MAGALHAtildeES et al 1997)
Foi pesquisado o efeito do aumento da irradiacircncia (15 a 100 da luz solar
cheia L15 a L100) sobre o crescimento a taxa fotossinteacutetica liacutequida maacutexima
(Pmax) a compensaccedilatildeo (CI) a saturaccedilatildeo de irradiacircncia de A annua e a produccedilatildeo
de artemisinina Na luz solar plena A annua apresentou uma capacidade elevada
de fotossiacutentese com irradiacircncia baixa manteve um Pmax relativamente elevado
com um CI baixo O crescimento da altura e do diacircmetro biomassa total e da
folha e iacutendice de artemisinina diminuiu com a diminuiccedilatildeo da irradiacircncia que pocircde
ser conectado com a fotossiacutentese mais baixa na irradiacircncia mais baixa em
relaccedilatildeo agrave irradiacircncia mais elevada As irradiacircncias mudaram a alocaccedilatildeo de
biomassa em A annua A relaccedilatildeo massa de folhamassa total da espeacutecie
aumentou com a diminuiccedilatildeo da irradiacircncia mas a relaccedilatildeo raizmassa total e
raizmassa da parte aeacuterea aumentaram geralmente com a irradiacircncia crescente
Assim A annua pode crescer na luz solar parcial e plena Entretanto o
rendimento elevado da biomassa e da artemisinina requerem o cultivo em um
habitat aberto com luz solar adequada (WANG et al 2008)
MATERIAIS E MEacuteTODOS
O ensaio foi conduzido na Estaccedilatildeo Experimental de Biologia da
Universidade de Brasiacutelia (EEB ndash UnB) em casa-de-vegetaccedilatildeo do tipo
ldquoglasshouserdquo no periacuteodo de 19 de abril de 2013 a 6 de dezembro de 2013
(primeiro e segundo semestres respectivamente) Durante o ensaio a casa-de-
vegetaccedilatildeo apresentou uma temperatura meacutedia de aproximadamente 250deg C com
meacutedia das miacutenimas de 1325degC e das maacuteximas de 3675degC aferidas com
termocircmetro convencional de maacutexima e miacutenima O iacutendice de radiaccedilatildeo luminosa
esteve em trono de 50 determinado por fotocircmetro automaacutetico modelo Asahi-
Pentax SP-500
10
A partida de sementes de Aannua foi doada pelo pesquisador Pedro
Melillo Magalhatildees oriundas do CPQBA ndash UNICAMP e produzidas em campo da
proacutepria estaccedilatildeo e utilizadas para a semeadura em sementeiras tipo caixa
contendo a mistura EEB (Estaccedilatildeo Experimental de Biologia) com a seguinte
composiccedilatildeo Latossolo vermelho de cerrado areia vermiculita e composto
orgacircnico na proporccedilatildeo 3311 respectivamente mais a formulaccedilatildeo 4-14-8 na
dose de 100g para 40L da mistura Apoacutes 42 dias da semeadura foram
selecionadas 20 mudas que estavam no ponto de transplante (meacutedia de 15 cm
de altura) Dessa forma foram transplantadas para vasos com capacidade para
25L preenchidos com a mistura EEB
Apoacutes o transplante a altura da parte aeacuterea de todas as plantas foi aferida
semanalmente com o uso de uma trena com o objetivo de desenhar-se a curva
de crescimento As mediccedilotildees tiveram iniacutecio uma semana apoacutes o transplante no
dia 14 de maio
No dia 26 de julho de 201349 dias apoacutes o transplante as plantas foram
transferidas dos vasos de 25L para vasos com maior capacidade (325L) para
favorecer o seu crescimento e desenvolvimento e no dia 17 de setembro102 dias
apoacutes o transplante foi feita uma suplementaccedilatildeo de terra para as 20 plantas com o
mesmo objetivo mediante a colocaccedilatildeo por baixo de um outro vaso de mesmo
tamanho contendo metade de seu volume em Substrato EEB Isso permitiu que
as raiacutezes crescessem no volume adicional de mistura atraveacutes dos furos de
drenagem do vaso original
O controle de plantas daninhas foi feito manualmente e o controle
fitossanitaacuterio atraveacutes de acompanhamento e sucessivas observaccedilotildees Ao fim do
ensaio foi observada uma pequena infestaccedilatildeo com cochonilhas As cochonilhas
foram identificadas por Pseudococcus citri Risso ndash mais conhecida por
ldquocochonilha algodatildeordquo Foi parcialmente controlada em curto prazo com uma
pulverizaccedilatildeo manual de soluccedilatildeo de detergente (10 ml 1 litro de aacutegua)
Ao fim do ensaio dia 18 de outubro foram obtidas as massas fresca e
seca das plantas bem como os coeficientes de variaccedilatildeo dos dados
11
RESUTADOS E DISCUSSAtildeO
Os resultados do presente ensaio encontram-se representados nas Figuras
4 e 5 as quais representam respectivamente a curva de crescimento de Aannua
em vinte semana (s) em casa-de-vegetaccedilatildeo e a evoluccedilatildeo da taxa meacutedia diaacuteria de
crescimento
Observando-se a Figura 2 que apresenta a evoluccedilatildeo da taxa meacutedia de
crescimento verificou-se que entre a quinta e a setima semanas a taxa meacutedia
diaacuteria de crescimento cresceu de 08 cm ao dia para em torno de 20 cm por dia
tendo havido um decrescimo e um estabilidade entre a oitava e a deacutecima segunda
semanas quando entatildeo ocorreu o segundo pico passando a taxa meacutedia diaacuteria de
crescimento de 12 cm para 18 cm seguindo-se um decrescimo ateacute 05 cmdia
nas deacutecima sexta e deacutecima seacutetimas semanas quando entatildeo houve o terceiro
pico na deacutecima oitava semana atingindo 08cmdia e novamente decaindo ateacute 04
cmdia na vigeacutesima semana
0
50
100
150
1s 3s 5s 7s 9s 11s 13s 15s 17s 19s
Alt
ura
em
cm
Crescimento meacutedio de Artemisia annua em vasos em casa de vegataccedilatildeo durante 20 semanas
(s)
Figura 1 ndash Crescimento meacutedio de A annua em vasos em casa-de-vegetaccedilatildeo durante 20 semanas (s) ndash Observa-se que a altura das plantas aumentou
notavelmente a partir da quinta semana apoacutes o transplante correspondendo ao primeiro pico de crescimento
12
Os picos de crescimento de A annua submetida ao cultivo em vasos em
casa-de-vegetaccedilatildeo podem ser explicados pelas interferecircncias do pesquisador que
visava maximizar o desenvolvimento das plantas O primeiro pico pode ser
atribuiacutedo ao padratildeo de crescimento da planta Por ocasiatildeo da primeira troca de
vasos quando a planta ganhou 2145 de volume de substrato para explorar
teria havido o segundo pico por volta da deacutecima segunda semana O terceiro pico
se deu em consequecircncia da segunda suplementaccedilatildeo de substrato ocorrida por
volta da deacutecima seacutetima semana
O aproveitamento da segunda suplementaccedilatildeo foi efetivo tendo as plantas
explorado o volume de substrato adicional em sua totalidade ocupando-o por
inteiro o volume (Figura 6)
Eacute consenso entre pesquisadores que as plantas crescidas em vasos nunca
alcanccedilam seu potencial maior conforme imagens de suas raiacutezes mostram Uma
teacutecnica meacutedica da imagem chamada a imagem de ressonacircncia magneacutetico (MRI)
foi usada por investigadores para capturar instantacircneos da raiz da planta no vaso
As figuras obtidas revelam que as raiacutezes ldquodetectam o tamanho do vasordquo e emitem
um sinal que resulta na restriccedilatildeo o crescimento da planta (POORTER et al 2012)
Poorter et al (2012) esclarecem que a maioria das experiecircncias em
biologia de plantas usa plantas crescidas em algum tipo de recipiente ou vaso
Uma meta-anaacutelise em 65 estudos que analisaram o efeito do tamanho do vaso no
0
05
1
15
2
25
1s 3s 5s 7s 9s 11s 13s 15s 17s 19s
Ce
ntiacute
met
ros
po
r d
ia
Evoluccedilatildeo da taxa meacutedia diaacuteria de crescimento de Artemisia annua em casa de vegetaccedilatildeo por
20 semanas
Figura 2 ndash Evoluccedilatildeo da taxa diaacuteria de cresimento de A annua em casa de vegetaccedilatildeo por 20 semanas (s)
13
crescimento e em variaacuteveis afins foi conduzida e verificou que em meacutedia dobrar o
tamanho do vaso aumentou a produccedilatildeo da biomassa da planta em 43 Uma
anaacutelise adicional de efeitos do tamanho do vaso nos componentes afins do
crescimento sugere que o crescimento reduzido em vasos menores eacute causado
principalmente por uma reduccedilatildeo na fotossiacutentese por aacuterea da folha da unidade
mais do que por mudanccedilas na morfologia da folha ou no alocamento de
biomassa O tamanho apropriado do vaso dependeraacute logicamente do tamanho
das plantas que crescem neles Baseado em vaacuterias linhas da evidecircncia noacutes
sugerimos que um tamanho apropriado do vaso eacute um no qual a biomassa da
planta natildeo exceda 1 g L-1 Na praacutetica atual da pesquisa 65 das experiecircncias
excedem essa referecircncia Noacutes sugerimos que os investigadores devam
considerar com cuidado o tamanho do vaso em suas experiecircncias porque os
vasos pequenos podem mudar resultados experimentais e sabotar a finalidade da
experiecircncia
No presente ensaio de vasos foi obtido uma massa seca da parte aeacuterea
meacutedia de 2995g com um coeficiente de variaccedilatildeo de 3001 com uma planta por
vaso com dois transplantes para ganho de volume de solo a ser explorado O
corte das plantas se deu com 80 dias apoacutes o transplante
Quiteacuterio (2006) tambeacutem em ensaio de vasos obteve a meacutedia 25g de massa
seca de A annua em ensaio de vasos com duas plantas onde a colheita foi feita
75 dias apoacutes a semeadura no preacute-florescimento Os dois resultados apresentam
coerecircncia entre si
O ataque de cochonilhas observado era esperado como um reflexo natural
do estresse das plantas que satildeo submetidas ao cultivo em vaso em casa-de-
vegetaccedilatildeo
14
CONCLUSAtildeO
Nas condiccedilotildees do presente ensaio concluiu-se que o cultivo de Artemisia annua
em vasos e em casa-de-vegetaccedilatildeo eacute viaacutevel e pode ser notavelmente expressivo
com porte superior a 15m de altura e massa seca da parte aeacuterea meacutedia em torno
de 30g
Numa etapa posterior visualizam-se os ensaios objetivando a geraccedilatildeo de uma
tecnologia de produccedilatildeo tendo como alvo a produtividade em artesinina-A que eacute o
componente ativo contra malaacuteria
15
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17
DOCUMENTAacuteRIO FOTOGRAacuteFICO
Foto 1 ndash Mudas na sementeira prontas para transplante - Foto da autora Nayara Carvalho
Foto 2 ndash Mudas de Artemisia annua no dia do transplante ndash Foto da autora Nayara
Carvalho
18
Foto 3 ndash Aspecto geral do ensaio ndash Foto da autora Nayara Carvalho
Foto 4 ndash Suplementaccedilatildeo de substrato ndash Foto do orientador Jean Kleber
19
Foto 5 ndash Aproveitamento pela planta di suplemento de substrato ndash Foto do orientador Jean Kleber
Foto 6 ndash A planta mais alta ao final do ensaio ndash Foto do orientador Jean Kleber
20
Foto 8 ndash Ataque de colchonilhas em A annua ndash Foto da autora Nayara Carvalho
Foto 7 ndash A planta mais baixa ao final do ensaio
5
ARTEMISININA
Artemisinina eacute uma lactona sesquiterpecircnica com uma ponte endoperoacutexido
e foi produzida semi-sinteticamente como uma droga antimalaacuterica A eficaacutecia do
chaacute feito de A annua no tratamento da malaacuteria eacute contencioso De acordo com
alguns autores a artemesinina natildeo eacute soluacutevel em aacutegua e as concentraccedilotildees nestas
infusotildees satildeo consideradas insuficientes para tratar a malaacuteria (MUELER et al
2004 RATH et al 2004 JANSEN 2006)
Em 2004 o ministro da sauacutede da Etioacutepia mudou a droga antimalaacuterica de
primeira linha da Etioacutepia de sulfadoxinaprimetamina (Fansidar) que tem uma
taxa de falha em meacutedia de 36 no tratamento para a artemetherlumefantrine
(Coartem) uma terapia de droga que conteacutem a artemisinina que eacute 100 eficaz
quando usado corretamente apesar de uma relativa falta mundial do produto do
derivado de A annua (MALARIA UPDATE 20052013)
A malaacuteria eacute causada primeiramente pelo Plasmodium falciparum que
invade as hemaacutecias e conteacutem heme-grupos ricos em ferro (na forma do
hemozoina) (POSNER amp OrsquoNEIL 2004)
O mecanismo de accedilatildeo proposto da artemisinina contra a malaacuteria envolve a
clivagem de pontes de endoperoacutexido pelo ferro produzindo os radicais livres
(ferro-oxo hipervalente espeacutecies epoacutexidos aldeiacutedos e compostos do dicarbonil)
que danificam as macromoleacuteculas bioloacutegicas causando estresse oxidativo nas
ceacutelulas do parasita (CUMMING 1997)
Com a possibilidade de isolarem maiores quantidades de artemisinina
(quinghaosu) plantas de A annua foram cultivadas por Liersch et al (1986) e
analisadas em estaacutegios diferentes de desenvolvimento O iacutendice mais elevado de
artemisinina foi encontrado imediatamente antes do florescimento Era tambeacutem
possiacutevel correlacionar o desenvolvimento das plantas com o iacutendice maacuteximo do
artemisinina As plantas de A annua cultivadas de vaacuterias outras fontes tambeacutem
foram examinadas para o iacutendice de artemisinina De acordo com os resultados
obtidos nenhuma dessas plantas contiveram quantidades suficientes do
composto (artemisinina) para justificar isolamento em uma escala teacutecnica Aleacutem
disso outras espeacutecies de Artemisia foram testadas e foi encontrada artemisinina
em somente uma outra espeacutecie Para aumentar a quantidade de artemisinina
durante o periacuteodo do crescimento da planta foram testados dois reguladores
6
hormonais de crescimento em A annua genoacutetipo 811 Os resultados mostraram
que o chlormequat podia aumentar o teor do composto(artemisinina) em 30 em
relaccedilatildeo agraves plantas natildeo tratadas Foram encontrados tambeacutem alguns discretos
efeitos dos reguladores de crescimento na morfologia dos trichomas glandulares
Para finalidades de produccedilatildeo plantas com um iacutendice elevado de
artemisinina satildeo requeridas Woerdenbag et al (1994) acompanharam o
desenvolvimento do conteuacutedo de artemisinina e dos sesquiterpenes
biosinteticamente relacionados aacutecido artemisiacutenico arteannuina B e artemisiteno
em plantas de A annua durante um periacuteodo da vegetaccedilatildeo no Vietnam onde esta
espeacutecie eacute indiacutegena Aleacutem disso o iacutendice do oacuteleo essencial e sua composiccedilatildeo
foram estudados As amostras das folhas gemas as flores ou as flores de poacutes-
florescimento e frutos foram analisados nos diferentes estaacutegios vegetativo (5 6 e
8 meses de idade) na formaccedilatildeo maciccedila das gemas (9 meses) no pleno
florescimento (10 meses) e poacutes-florescimento (10frac12 meses) O iacutendice mais
elevado de artemisinina (086 da massa seca) estava nas folhas de plantas com
5 meses de idade Neste estaacutegio o rendimento mais elevado da folha tambeacutem foi
encontrado Subsequentemente o iacutendice de artemisinina caiu gradualmente Na
idade de 5 meses os maiores conteuacutedos de aacutecido artemisinico e arteannuina-B
016 e 008 da massa seca respectivamente foram tambeacutem encontrados O
artemisiteno estava presente em todos os estaacutegios do desenvolvimento variando
de 0002 a 009 da massa seca Com 19 volumemassa o iacutendice do oacuteleo
essencial (OE) foi maacuteximo imediatamente antes do florescimento e foi composto
de 55 de monoterpenos e 45 de sesquiterpenes Em todos os outros estaacutegios
(04 ndash 10 volumemassa do oacuteleo essencial) esta relaccedilatildeo foi de 30 70 Os
principais componentes do OE foram cacircnfora e germacreno-D
Observaccedilotildees mostraram que o rendimento da artemisinina esteve
correlacionado positivamente com o rendimento da folha e o nuacutemero das
colheitas Os rendimentos elevados de artemisinina ocorreram quando a colheita
produziu folhas artemisinina-ricas acompanhadas pelo menor crescimento
possiacutevel do tecido da haste alcanccedilado em colheitas muacuteltiplas em plantas
crescidas a tempo integral e plantadas mais cedo As colheitas crescidas por ge30
semanas e colhidas trecircs a quatro vezes deram os rendimentos meacutedios de
441plusmn142 e de 742plusmn156 respectivamente Muito mais altos do que o rendimento
maacuteximo de 25 quilogramas haminus1 relatado para a A annua em estudos anteriores
7
Concluiu-se que para obter artemisinina em altos niacuteveis A annua deve ser
colhida quatro vezes (KUMAR et al 2004)
ASPECTOS AGRONOcircMICOS
Propagaccedilatildeo
Em meacutedia 1000 sementes pesam 003 g e natildeo diminuem sua viabilidade
ao secar Satildeo acessiacuteveis ao armazenamento agrave frio de longo prazo Germinam de
janeiro a marccedilo A germinaccedilatildeo de 100 foi obtida em um meio de germinaccedilatildeo de
aacutegar a 1 em uma temperatura de 15degC sob um fotoperiacuteodo 816 horas claro-
escuro (MOHAMMADREZA 2008)
A Artemisia annua eacute plantada extensamente e comercialmente
principalmente como uma fonte de oacuteleos essenciais e tambeacutem de artemisinina
sobretudo em regiotildees da China e VietnamNessas regiotildees o ciclo da planta em
condiccedilotildees naturais chega a 10 meses Na Europa e na Ameacuterica as plantas
crescem mais rapidamente terminando seu ciclo de vida em apenas seis meses
mesmo no campo Cresce melhor em talhotildees abertos e ensolarados em solos
arenosos e aluviais feacuterteis que sejam neutros a ligeiramente aacutecidos e que tenham
uma boa retenccedilatildeo de umidade e natildeo tolera a seca ou o encharcamento As
sementes germinam de janeiro a marccedilo e a frutificaccedilatildeo (colheita das sementes)
ocorre entre outubro e novembro (httpwwwkeworgplants-fungiArtemisia-
annuahtm)
Conceiccedilatildeo et al (2013) testaram a germinaccedilatildeo da semente de A annua
cultivar Silves sob duas condiccedilotildees ambientais a fim de fornecer informaccedilotildees
sobre seu cultivo Na primeira condiccedilatildeo realizou-se o teste padratildeo com 4 lotes de
100g de sementes semeadas em gerbox sobre papel mata-borratildeo e dispostas
em germinador agrave temperatura de 25-30deg C expostas agrave luz durante 8 horas diaacuterias
e umedecidas quando necessaacuterio ateacute sua emergecircncia Na segunda etapa foi
realizado o mesmo procedimento anterior poreacutem as sementes permaneceram no
germinador em ausecircncia de luz sob as mesmas condiccedilotildees de temperatura e
umidade Segundo anaacutelise estatiacutestica em Tukey a 5 aplicada aqui sobre as
meacutedias de cada lote de 100g sementes os tratamentos obtiveram diferenccedilas
significativas sendo que as sementes expostas agrave luz obtiveram maiores valores
8
de germinaccedilatildeo Em ambiente com total ausecircncia de luz as sementes obtiveram
baixiacutessima taxa de germinaccedilatildeo no mesmo periacuteodo que as sementes em ambiente
iluminado Esse fato indica que a semente de A annua eacute fotoblaacutestica positiva e
assim necessita de um miacutenimo de luz para que ocorra sua germinaccedilatildeo por esse
motivo natildeo podem ser enterradas e sua semeadura deve ser apenas a lanccedilo ou
em superfiacutecie sem cobertura com terra Esta caracteriacutestica eacute comum agrave muitas
espeacutecies que produzem sementes miuacutedas
Adubaccedilatildeo
Em 2004 e 2005 um estudo foi realizado com o objetivo de determinar o
rendimento os componentes do rendimento e o iacutendice da artemisinina de A
annua cultivada sob quatro aplicaccedilotildees do nitrogecircnio (0 40 80 e 120 quilogramas
haminus1) na regiatildeo de Ccedilukurova na Turquia As experimentaccedilotildees de campo foram
conduzidas na universidade de Ccedilukurova no departamento de agricultura da
faculdade Nesse estudo a altura da planta o nuacutemero de ramos o rendimento
fresco e seco da erva o rendimento fresco e seco da folha o iacutendice do oacuteleo
essencial e o iacutendice da artemisinina (por cromatografia liacutequida pelo HPLC de
desempenho elevado) foram examinados Pela anaacutelise de variaccedilatildeo as doses de
nitrogecircnio natildeo tiveram nenhum efeito estatiacutestico nas caracteriacutesticas investigadas
agrave exceccedilatildeo do iacutendice de artemisinina Esse iacutendice nas folhas secas foi afetado
significativamente pelas aplicaccedilotildees do nitrogecircnio que variaram de 632 a 2750
mg 100 gminus1 (OZGUVEN et al 2008)
Outros aspectos
Uma pesquisa desenvolvida em MEDIPLANT (Suiacuteccedila) e no CPQBA-
UNICAPM (Brasil) envolveu a seleccedilatildeo e produccedilatildeo de genoacutetipos ricos em
artemisinina apresentando biomassa elevada seguido por uma segunda seleccedilatildeo
para a adaptaccedilatildeo agraves circunstacircncias climaacuteticas do Brasil Com hibridizaccedilatildeo
controlada entre genoacutetipos selecionados da China e do Vietnam o ganho
geneacutetico foi obtido nos termos do iacutendice da artemisinina e da uniformidade da
populaccedilatildeo Com o aumento do iacutendice de biomassa e da artemisinina (estimado
pela monitoraccedilatildeo analiacutetica) era possiacutevel aumentar a produccedilatildeo de artemisinina de
9
5 Kgha (populaccedilatildeo baacutesica) para aproximadamente 25 Kgha (populaccedilatildeo
geneticamente produzida) No cultivo realizado no Brasil em 3 de 7 linhas
hiacutebridas 239 de x 1V Ch x Viet55 e 1V x 243 produziram respectivamente
2543 2305 e 2127 quilogramas de artemisininahacorte com as 2 colheitas
possiacuteveis por o ano O cultivo destas linhas hiacutebridas novas no Brasil eacute uma
teacutecnica praticaacutevel e altamente competitiva devido agrave produccedilatildeo obtida
(MAGALHAtildeES et al 1997)
Foi pesquisado o efeito do aumento da irradiacircncia (15 a 100 da luz solar
cheia L15 a L100) sobre o crescimento a taxa fotossinteacutetica liacutequida maacutexima
(Pmax) a compensaccedilatildeo (CI) a saturaccedilatildeo de irradiacircncia de A annua e a produccedilatildeo
de artemisinina Na luz solar plena A annua apresentou uma capacidade elevada
de fotossiacutentese com irradiacircncia baixa manteve um Pmax relativamente elevado
com um CI baixo O crescimento da altura e do diacircmetro biomassa total e da
folha e iacutendice de artemisinina diminuiu com a diminuiccedilatildeo da irradiacircncia que pocircde
ser conectado com a fotossiacutentese mais baixa na irradiacircncia mais baixa em
relaccedilatildeo agrave irradiacircncia mais elevada As irradiacircncias mudaram a alocaccedilatildeo de
biomassa em A annua A relaccedilatildeo massa de folhamassa total da espeacutecie
aumentou com a diminuiccedilatildeo da irradiacircncia mas a relaccedilatildeo raizmassa total e
raizmassa da parte aeacuterea aumentaram geralmente com a irradiacircncia crescente
Assim A annua pode crescer na luz solar parcial e plena Entretanto o
rendimento elevado da biomassa e da artemisinina requerem o cultivo em um
habitat aberto com luz solar adequada (WANG et al 2008)
MATERIAIS E MEacuteTODOS
O ensaio foi conduzido na Estaccedilatildeo Experimental de Biologia da
Universidade de Brasiacutelia (EEB ndash UnB) em casa-de-vegetaccedilatildeo do tipo
ldquoglasshouserdquo no periacuteodo de 19 de abril de 2013 a 6 de dezembro de 2013
(primeiro e segundo semestres respectivamente) Durante o ensaio a casa-de-
vegetaccedilatildeo apresentou uma temperatura meacutedia de aproximadamente 250deg C com
meacutedia das miacutenimas de 1325degC e das maacuteximas de 3675degC aferidas com
termocircmetro convencional de maacutexima e miacutenima O iacutendice de radiaccedilatildeo luminosa
esteve em trono de 50 determinado por fotocircmetro automaacutetico modelo Asahi-
Pentax SP-500
10
A partida de sementes de Aannua foi doada pelo pesquisador Pedro
Melillo Magalhatildees oriundas do CPQBA ndash UNICAMP e produzidas em campo da
proacutepria estaccedilatildeo e utilizadas para a semeadura em sementeiras tipo caixa
contendo a mistura EEB (Estaccedilatildeo Experimental de Biologia) com a seguinte
composiccedilatildeo Latossolo vermelho de cerrado areia vermiculita e composto
orgacircnico na proporccedilatildeo 3311 respectivamente mais a formulaccedilatildeo 4-14-8 na
dose de 100g para 40L da mistura Apoacutes 42 dias da semeadura foram
selecionadas 20 mudas que estavam no ponto de transplante (meacutedia de 15 cm
de altura) Dessa forma foram transplantadas para vasos com capacidade para
25L preenchidos com a mistura EEB
Apoacutes o transplante a altura da parte aeacuterea de todas as plantas foi aferida
semanalmente com o uso de uma trena com o objetivo de desenhar-se a curva
de crescimento As mediccedilotildees tiveram iniacutecio uma semana apoacutes o transplante no
dia 14 de maio
No dia 26 de julho de 201349 dias apoacutes o transplante as plantas foram
transferidas dos vasos de 25L para vasos com maior capacidade (325L) para
favorecer o seu crescimento e desenvolvimento e no dia 17 de setembro102 dias
apoacutes o transplante foi feita uma suplementaccedilatildeo de terra para as 20 plantas com o
mesmo objetivo mediante a colocaccedilatildeo por baixo de um outro vaso de mesmo
tamanho contendo metade de seu volume em Substrato EEB Isso permitiu que
as raiacutezes crescessem no volume adicional de mistura atraveacutes dos furos de
drenagem do vaso original
O controle de plantas daninhas foi feito manualmente e o controle
fitossanitaacuterio atraveacutes de acompanhamento e sucessivas observaccedilotildees Ao fim do
ensaio foi observada uma pequena infestaccedilatildeo com cochonilhas As cochonilhas
foram identificadas por Pseudococcus citri Risso ndash mais conhecida por
ldquocochonilha algodatildeordquo Foi parcialmente controlada em curto prazo com uma
pulverizaccedilatildeo manual de soluccedilatildeo de detergente (10 ml 1 litro de aacutegua)
Ao fim do ensaio dia 18 de outubro foram obtidas as massas fresca e
seca das plantas bem como os coeficientes de variaccedilatildeo dos dados
11
RESUTADOS E DISCUSSAtildeO
Os resultados do presente ensaio encontram-se representados nas Figuras
4 e 5 as quais representam respectivamente a curva de crescimento de Aannua
em vinte semana (s) em casa-de-vegetaccedilatildeo e a evoluccedilatildeo da taxa meacutedia diaacuteria de
crescimento
Observando-se a Figura 2 que apresenta a evoluccedilatildeo da taxa meacutedia de
crescimento verificou-se que entre a quinta e a setima semanas a taxa meacutedia
diaacuteria de crescimento cresceu de 08 cm ao dia para em torno de 20 cm por dia
tendo havido um decrescimo e um estabilidade entre a oitava e a deacutecima segunda
semanas quando entatildeo ocorreu o segundo pico passando a taxa meacutedia diaacuteria de
crescimento de 12 cm para 18 cm seguindo-se um decrescimo ateacute 05 cmdia
nas deacutecima sexta e deacutecima seacutetimas semanas quando entatildeo houve o terceiro
pico na deacutecima oitava semana atingindo 08cmdia e novamente decaindo ateacute 04
cmdia na vigeacutesima semana
0
50
100
150
1s 3s 5s 7s 9s 11s 13s 15s 17s 19s
Alt
ura
em
cm
Crescimento meacutedio de Artemisia annua em vasos em casa de vegataccedilatildeo durante 20 semanas
(s)
Figura 1 ndash Crescimento meacutedio de A annua em vasos em casa-de-vegetaccedilatildeo durante 20 semanas (s) ndash Observa-se que a altura das plantas aumentou
notavelmente a partir da quinta semana apoacutes o transplante correspondendo ao primeiro pico de crescimento
12
Os picos de crescimento de A annua submetida ao cultivo em vasos em
casa-de-vegetaccedilatildeo podem ser explicados pelas interferecircncias do pesquisador que
visava maximizar o desenvolvimento das plantas O primeiro pico pode ser
atribuiacutedo ao padratildeo de crescimento da planta Por ocasiatildeo da primeira troca de
vasos quando a planta ganhou 2145 de volume de substrato para explorar
teria havido o segundo pico por volta da deacutecima segunda semana O terceiro pico
se deu em consequecircncia da segunda suplementaccedilatildeo de substrato ocorrida por
volta da deacutecima seacutetima semana
O aproveitamento da segunda suplementaccedilatildeo foi efetivo tendo as plantas
explorado o volume de substrato adicional em sua totalidade ocupando-o por
inteiro o volume (Figura 6)
Eacute consenso entre pesquisadores que as plantas crescidas em vasos nunca
alcanccedilam seu potencial maior conforme imagens de suas raiacutezes mostram Uma
teacutecnica meacutedica da imagem chamada a imagem de ressonacircncia magneacutetico (MRI)
foi usada por investigadores para capturar instantacircneos da raiz da planta no vaso
As figuras obtidas revelam que as raiacutezes ldquodetectam o tamanho do vasordquo e emitem
um sinal que resulta na restriccedilatildeo o crescimento da planta (POORTER et al 2012)
Poorter et al (2012) esclarecem que a maioria das experiecircncias em
biologia de plantas usa plantas crescidas em algum tipo de recipiente ou vaso
Uma meta-anaacutelise em 65 estudos que analisaram o efeito do tamanho do vaso no
0
05
1
15
2
25
1s 3s 5s 7s 9s 11s 13s 15s 17s 19s
Ce
ntiacute
met
ros
po
r d
ia
Evoluccedilatildeo da taxa meacutedia diaacuteria de crescimento de Artemisia annua em casa de vegetaccedilatildeo por
20 semanas
Figura 2 ndash Evoluccedilatildeo da taxa diaacuteria de cresimento de A annua em casa de vegetaccedilatildeo por 20 semanas (s)
13
crescimento e em variaacuteveis afins foi conduzida e verificou que em meacutedia dobrar o
tamanho do vaso aumentou a produccedilatildeo da biomassa da planta em 43 Uma
anaacutelise adicional de efeitos do tamanho do vaso nos componentes afins do
crescimento sugere que o crescimento reduzido em vasos menores eacute causado
principalmente por uma reduccedilatildeo na fotossiacutentese por aacuterea da folha da unidade
mais do que por mudanccedilas na morfologia da folha ou no alocamento de
biomassa O tamanho apropriado do vaso dependeraacute logicamente do tamanho
das plantas que crescem neles Baseado em vaacuterias linhas da evidecircncia noacutes
sugerimos que um tamanho apropriado do vaso eacute um no qual a biomassa da
planta natildeo exceda 1 g L-1 Na praacutetica atual da pesquisa 65 das experiecircncias
excedem essa referecircncia Noacutes sugerimos que os investigadores devam
considerar com cuidado o tamanho do vaso em suas experiecircncias porque os
vasos pequenos podem mudar resultados experimentais e sabotar a finalidade da
experiecircncia
No presente ensaio de vasos foi obtido uma massa seca da parte aeacuterea
meacutedia de 2995g com um coeficiente de variaccedilatildeo de 3001 com uma planta por
vaso com dois transplantes para ganho de volume de solo a ser explorado O
corte das plantas se deu com 80 dias apoacutes o transplante
Quiteacuterio (2006) tambeacutem em ensaio de vasos obteve a meacutedia 25g de massa
seca de A annua em ensaio de vasos com duas plantas onde a colheita foi feita
75 dias apoacutes a semeadura no preacute-florescimento Os dois resultados apresentam
coerecircncia entre si
O ataque de cochonilhas observado era esperado como um reflexo natural
do estresse das plantas que satildeo submetidas ao cultivo em vaso em casa-de-
vegetaccedilatildeo
14
CONCLUSAtildeO
Nas condiccedilotildees do presente ensaio concluiu-se que o cultivo de Artemisia annua
em vasos e em casa-de-vegetaccedilatildeo eacute viaacutevel e pode ser notavelmente expressivo
com porte superior a 15m de altura e massa seca da parte aeacuterea meacutedia em torno
de 30g
Numa etapa posterior visualizam-se os ensaios objetivando a geraccedilatildeo de uma
tecnologia de produccedilatildeo tendo como alvo a produtividade em artesinina-A que eacute o
componente ativo contra malaacuteria
15
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17
DOCUMENTAacuteRIO FOTOGRAacuteFICO
Foto 1 ndash Mudas na sementeira prontas para transplante - Foto da autora Nayara Carvalho
Foto 2 ndash Mudas de Artemisia annua no dia do transplante ndash Foto da autora Nayara
Carvalho
18
Foto 3 ndash Aspecto geral do ensaio ndash Foto da autora Nayara Carvalho
Foto 4 ndash Suplementaccedilatildeo de substrato ndash Foto do orientador Jean Kleber
19
Foto 5 ndash Aproveitamento pela planta di suplemento de substrato ndash Foto do orientador Jean Kleber
Foto 6 ndash A planta mais alta ao final do ensaio ndash Foto do orientador Jean Kleber
20
Foto 8 ndash Ataque de colchonilhas em A annua ndash Foto da autora Nayara Carvalho
Foto 7 ndash A planta mais baixa ao final do ensaio
6
hormonais de crescimento em A annua genoacutetipo 811 Os resultados mostraram
que o chlormequat podia aumentar o teor do composto(artemisinina) em 30 em
relaccedilatildeo agraves plantas natildeo tratadas Foram encontrados tambeacutem alguns discretos
efeitos dos reguladores de crescimento na morfologia dos trichomas glandulares
Para finalidades de produccedilatildeo plantas com um iacutendice elevado de
artemisinina satildeo requeridas Woerdenbag et al (1994) acompanharam o
desenvolvimento do conteuacutedo de artemisinina e dos sesquiterpenes
biosinteticamente relacionados aacutecido artemisiacutenico arteannuina B e artemisiteno
em plantas de A annua durante um periacuteodo da vegetaccedilatildeo no Vietnam onde esta
espeacutecie eacute indiacutegena Aleacutem disso o iacutendice do oacuteleo essencial e sua composiccedilatildeo
foram estudados As amostras das folhas gemas as flores ou as flores de poacutes-
florescimento e frutos foram analisados nos diferentes estaacutegios vegetativo (5 6 e
8 meses de idade) na formaccedilatildeo maciccedila das gemas (9 meses) no pleno
florescimento (10 meses) e poacutes-florescimento (10frac12 meses) O iacutendice mais
elevado de artemisinina (086 da massa seca) estava nas folhas de plantas com
5 meses de idade Neste estaacutegio o rendimento mais elevado da folha tambeacutem foi
encontrado Subsequentemente o iacutendice de artemisinina caiu gradualmente Na
idade de 5 meses os maiores conteuacutedos de aacutecido artemisinico e arteannuina-B
016 e 008 da massa seca respectivamente foram tambeacutem encontrados O
artemisiteno estava presente em todos os estaacutegios do desenvolvimento variando
de 0002 a 009 da massa seca Com 19 volumemassa o iacutendice do oacuteleo
essencial (OE) foi maacuteximo imediatamente antes do florescimento e foi composto
de 55 de monoterpenos e 45 de sesquiterpenes Em todos os outros estaacutegios
(04 ndash 10 volumemassa do oacuteleo essencial) esta relaccedilatildeo foi de 30 70 Os
principais componentes do OE foram cacircnfora e germacreno-D
Observaccedilotildees mostraram que o rendimento da artemisinina esteve
correlacionado positivamente com o rendimento da folha e o nuacutemero das
colheitas Os rendimentos elevados de artemisinina ocorreram quando a colheita
produziu folhas artemisinina-ricas acompanhadas pelo menor crescimento
possiacutevel do tecido da haste alcanccedilado em colheitas muacuteltiplas em plantas
crescidas a tempo integral e plantadas mais cedo As colheitas crescidas por ge30
semanas e colhidas trecircs a quatro vezes deram os rendimentos meacutedios de
441plusmn142 e de 742plusmn156 respectivamente Muito mais altos do que o rendimento
maacuteximo de 25 quilogramas haminus1 relatado para a A annua em estudos anteriores
7
Concluiu-se que para obter artemisinina em altos niacuteveis A annua deve ser
colhida quatro vezes (KUMAR et al 2004)
ASPECTOS AGRONOcircMICOS
Propagaccedilatildeo
Em meacutedia 1000 sementes pesam 003 g e natildeo diminuem sua viabilidade
ao secar Satildeo acessiacuteveis ao armazenamento agrave frio de longo prazo Germinam de
janeiro a marccedilo A germinaccedilatildeo de 100 foi obtida em um meio de germinaccedilatildeo de
aacutegar a 1 em uma temperatura de 15degC sob um fotoperiacuteodo 816 horas claro-
escuro (MOHAMMADREZA 2008)
A Artemisia annua eacute plantada extensamente e comercialmente
principalmente como uma fonte de oacuteleos essenciais e tambeacutem de artemisinina
sobretudo em regiotildees da China e VietnamNessas regiotildees o ciclo da planta em
condiccedilotildees naturais chega a 10 meses Na Europa e na Ameacuterica as plantas
crescem mais rapidamente terminando seu ciclo de vida em apenas seis meses
mesmo no campo Cresce melhor em talhotildees abertos e ensolarados em solos
arenosos e aluviais feacuterteis que sejam neutros a ligeiramente aacutecidos e que tenham
uma boa retenccedilatildeo de umidade e natildeo tolera a seca ou o encharcamento As
sementes germinam de janeiro a marccedilo e a frutificaccedilatildeo (colheita das sementes)
ocorre entre outubro e novembro (httpwwwkeworgplants-fungiArtemisia-
annuahtm)
Conceiccedilatildeo et al (2013) testaram a germinaccedilatildeo da semente de A annua
cultivar Silves sob duas condiccedilotildees ambientais a fim de fornecer informaccedilotildees
sobre seu cultivo Na primeira condiccedilatildeo realizou-se o teste padratildeo com 4 lotes de
100g de sementes semeadas em gerbox sobre papel mata-borratildeo e dispostas
em germinador agrave temperatura de 25-30deg C expostas agrave luz durante 8 horas diaacuterias
e umedecidas quando necessaacuterio ateacute sua emergecircncia Na segunda etapa foi
realizado o mesmo procedimento anterior poreacutem as sementes permaneceram no
germinador em ausecircncia de luz sob as mesmas condiccedilotildees de temperatura e
umidade Segundo anaacutelise estatiacutestica em Tukey a 5 aplicada aqui sobre as
meacutedias de cada lote de 100g sementes os tratamentos obtiveram diferenccedilas
significativas sendo que as sementes expostas agrave luz obtiveram maiores valores
8
de germinaccedilatildeo Em ambiente com total ausecircncia de luz as sementes obtiveram
baixiacutessima taxa de germinaccedilatildeo no mesmo periacuteodo que as sementes em ambiente
iluminado Esse fato indica que a semente de A annua eacute fotoblaacutestica positiva e
assim necessita de um miacutenimo de luz para que ocorra sua germinaccedilatildeo por esse
motivo natildeo podem ser enterradas e sua semeadura deve ser apenas a lanccedilo ou
em superfiacutecie sem cobertura com terra Esta caracteriacutestica eacute comum agrave muitas
espeacutecies que produzem sementes miuacutedas
Adubaccedilatildeo
Em 2004 e 2005 um estudo foi realizado com o objetivo de determinar o
rendimento os componentes do rendimento e o iacutendice da artemisinina de A
annua cultivada sob quatro aplicaccedilotildees do nitrogecircnio (0 40 80 e 120 quilogramas
haminus1) na regiatildeo de Ccedilukurova na Turquia As experimentaccedilotildees de campo foram
conduzidas na universidade de Ccedilukurova no departamento de agricultura da
faculdade Nesse estudo a altura da planta o nuacutemero de ramos o rendimento
fresco e seco da erva o rendimento fresco e seco da folha o iacutendice do oacuteleo
essencial e o iacutendice da artemisinina (por cromatografia liacutequida pelo HPLC de
desempenho elevado) foram examinados Pela anaacutelise de variaccedilatildeo as doses de
nitrogecircnio natildeo tiveram nenhum efeito estatiacutestico nas caracteriacutesticas investigadas
agrave exceccedilatildeo do iacutendice de artemisinina Esse iacutendice nas folhas secas foi afetado
significativamente pelas aplicaccedilotildees do nitrogecircnio que variaram de 632 a 2750
mg 100 gminus1 (OZGUVEN et al 2008)
Outros aspectos
Uma pesquisa desenvolvida em MEDIPLANT (Suiacuteccedila) e no CPQBA-
UNICAPM (Brasil) envolveu a seleccedilatildeo e produccedilatildeo de genoacutetipos ricos em
artemisinina apresentando biomassa elevada seguido por uma segunda seleccedilatildeo
para a adaptaccedilatildeo agraves circunstacircncias climaacuteticas do Brasil Com hibridizaccedilatildeo
controlada entre genoacutetipos selecionados da China e do Vietnam o ganho
geneacutetico foi obtido nos termos do iacutendice da artemisinina e da uniformidade da
populaccedilatildeo Com o aumento do iacutendice de biomassa e da artemisinina (estimado
pela monitoraccedilatildeo analiacutetica) era possiacutevel aumentar a produccedilatildeo de artemisinina de
9
5 Kgha (populaccedilatildeo baacutesica) para aproximadamente 25 Kgha (populaccedilatildeo
geneticamente produzida) No cultivo realizado no Brasil em 3 de 7 linhas
hiacutebridas 239 de x 1V Ch x Viet55 e 1V x 243 produziram respectivamente
2543 2305 e 2127 quilogramas de artemisininahacorte com as 2 colheitas
possiacuteveis por o ano O cultivo destas linhas hiacutebridas novas no Brasil eacute uma
teacutecnica praticaacutevel e altamente competitiva devido agrave produccedilatildeo obtida
(MAGALHAtildeES et al 1997)
Foi pesquisado o efeito do aumento da irradiacircncia (15 a 100 da luz solar
cheia L15 a L100) sobre o crescimento a taxa fotossinteacutetica liacutequida maacutexima
(Pmax) a compensaccedilatildeo (CI) a saturaccedilatildeo de irradiacircncia de A annua e a produccedilatildeo
de artemisinina Na luz solar plena A annua apresentou uma capacidade elevada
de fotossiacutentese com irradiacircncia baixa manteve um Pmax relativamente elevado
com um CI baixo O crescimento da altura e do diacircmetro biomassa total e da
folha e iacutendice de artemisinina diminuiu com a diminuiccedilatildeo da irradiacircncia que pocircde
ser conectado com a fotossiacutentese mais baixa na irradiacircncia mais baixa em
relaccedilatildeo agrave irradiacircncia mais elevada As irradiacircncias mudaram a alocaccedilatildeo de
biomassa em A annua A relaccedilatildeo massa de folhamassa total da espeacutecie
aumentou com a diminuiccedilatildeo da irradiacircncia mas a relaccedilatildeo raizmassa total e
raizmassa da parte aeacuterea aumentaram geralmente com a irradiacircncia crescente
Assim A annua pode crescer na luz solar parcial e plena Entretanto o
rendimento elevado da biomassa e da artemisinina requerem o cultivo em um
habitat aberto com luz solar adequada (WANG et al 2008)
MATERIAIS E MEacuteTODOS
O ensaio foi conduzido na Estaccedilatildeo Experimental de Biologia da
Universidade de Brasiacutelia (EEB ndash UnB) em casa-de-vegetaccedilatildeo do tipo
ldquoglasshouserdquo no periacuteodo de 19 de abril de 2013 a 6 de dezembro de 2013
(primeiro e segundo semestres respectivamente) Durante o ensaio a casa-de-
vegetaccedilatildeo apresentou uma temperatura meacutedia de aproximadamente 250deg C com
meacutedia das miacutenimas de 1325degC e das maacuteximas de 3675degC aferidas com
termocircmetro convencional de maacutexima e miacutenima O iacutendice de radiaccedilatildeo luminosa
esteve em trono de 50 determinado por fotocircmetro automaacutetico modelo Asahi-
Pentax SP-500
10
A partida de sementes de Aannua foi doada pelo pesquisador Pedro
Melillo Magalhatildees oriundas do CPQBA ndash UNICAMP e produzidas em campo da
proacutepria estaccedilatildeo e utilizadas para a semeadura em sementeiras tipo caixa
contendo a mistura EEB (Estaccedilatildeo Experimental de Biologia) com a seguinte
composiccedilatildeo Latossolo vermelho de cerrado areia vermiculita e composto
orgacircnico na proporccedilatildeo 3311 respectivamente mais a formulaccedilatildeo 4-14-8 na
dose de 100g para 40L da mistura Apoacutes 42 dias da semeadura foram
selecionadas 20 mudas que estavam no ponto de transplante (meacutedia de 15 cm
de altura) Dessa forma foram transplantadas para vasos com capacidade para
25L preenchidos com a mistura EEB
Apoacutes o transplante a altura da parte aeacuterea de todas as plantas foi aferida
semanalmente com o uso de uma trena com o objetivo de desenhar-se a curva
de crescimento As mediccedilotildees tiveram iniacutecio uma semana apoacutes o transplante no
dia 14 de maio
No dia 26 de julho de 201349 dias apoacutes o transplante as plantas foram
transferidas dos vasos de 25L para vasos com maior capacidade (325L) para
favorecer o seu crescimento e desenvolvimento e no dia 17 de setembro102 dias
apoacutes o transplante foi feita uma suplementaccedilatildeo de terra para as 20 plantas com o
mesmo objetivo mediante a colocaccedilatildeo por baixo de um outro vaso de mesmo
tamanho contendo metade de seu volume em Substrato EEB Isso permitiu que
as raiacutezes crescessem no volume adicional de mistura atraveacutes dos furos de
drenagem do vaso original
O controle de plantas daninhas foi feito manualmente e o controle
fitossanitaacuterio atraveacutes de acompanhamento e sucessivas observaccedilotildees Ao fim do
ensaio foi observada uma pequena infestaccedilatildeo com cochonilhas As cochonilhas
foram identificadas por Pseudococcus citri Risso ndash mais conhecida por
ldquocochonilha algodatildeordquo Foi parcialmente controlada em curto prazo com uma
pulverizaccedilatildeo manual de soluccedilatildeo de detergente (10 ml 1 litro de aacutegua)
Ao fim do ensaio dia 18 de outubro foram obtidas as massas fresca e
seca das plantas bem como os coeficientes de variaccedilatildeo dos dados
11
RESUTADOS E DISCUSSAtildeO
Os resultados do presente ensaio encontram-se representados nas Figuras
4 e 5 as quais representam respectivamente a curva de crescimento de Aannua
em vinte semana (s) em casa-de-vegetaccedilatildeo e a evoluccedilatildeo da taxa meacutedia diaacuteria de
crescimento
Observando-se a Figura 2 que apresenta a evoluccedilatildeo da taxa meacutedia de
crescimento verificou-se que entre a quinta e a setima semanas a taxa meacutedia
diaacuteria de crescimento cresceu de 08 cm ao dia para em torno de 20 cm por dia
tendo havido um decrescimo e um estabilidade entre a oitava e a deacutecima segunda
semanas quando entatildeo ocorreu o segundo pico passando a taxa meacutedia diaacuteria de
crescimento de 12 cm para 18 cm seguindo-se um decrescimo ateacute 05 cmdia
nas deacutecima sexta e deacutecima seacutetimas semanas quando entatildeo houve o terceiro
pico na deacutecima oitava semana atingindo 08cmdia e novamente decaindo ateacute 04
cmdia na vigeacutesima semana
0
50
100
150
1s 3s 5s 7s 9s 11s 13s 15s 17s 19s
Alt
ura
em
cm
Crescimento meacutedio de Artemisia annua em vasos em casa de vegataccedilatildeo durante 20 semanas
(s)
Figura 1 ndash Crescimento meacutedio de A annua em vasos em casa-de-vegetaccedilatildeo durante 20 semanas (s) ndash Observa-se que a altura das plantas aumentou
notavelmente a partir da quinta semana apoacutes o transplante correspondendo ao primeiro pico de crescimento
12
Os picos de crescimento de A annua submetida ao cultivo em vasos em
casa-de-vegetaccedilatildeo podem ser explicados pelas interferecircncias do pesquisador que
visava maximizar o desenvolvimento das plantas O primeiro pico pode ser
atribuiacutedo ao padratildeo de crescimento da planta Por ocasiatildeo da primeira troca de
vasos quando a planta ganhou 2145 de volume de substrato para explorar
teria havido o segundo pico por volta da deacutecima segunda semana O terceiro pico
se deu em consequecircncia da segunda suplementaccedilatildeo de substrato ocorrida por
volta da deacutecima seacutetima semana
O aproveitamento da segunda suplementaccedilatildeo foi efetivo tendo as plantas
explorado o volume de substrato adicional em sua totalidade ocupando-o por
inteiro o volume (Figura 6)
Eacute consenso entre pesquisadores que as plantas crescidas em vasos nunca
alcanccedilam seu potencial maior conforme imagens de suas raiacutezes mostram Uma
teacutecnica meacutedica da imagem chamada a imagem de ressonacircncia magneacutetico (MRI)
foi usada por investigadores para capturar instantacircneos da raiz da planta no vaso
As figuras obtidas revelam que as raiacutezes ldquodetectam o tamanho do vasordquo e emitem
um sinal que resulta na restriccedilatildeo o crescimento da planta (POORTER et al 2012)
Poorter et al (2012) esclarecem que a maioria das experiecircncias em
biologia de plantas usa plantas crescidas em algum tipo de recipiente ou vaso
Uma meta-anaacutelise em 65 estudos que analisaram o efeito do tamanho do vaso no
0
05
1
15
2
25
1s 3s 5s 7s 9s 11s 13s 15s 17s 19s
Ce
ntiacute
met
ros
po
r d
ia
Evoluccedilatildeo da taxa meacutedia diaacuteria de crescimento de Artemisia annua em casa de vegetaccedilatildeo por
20 semanas
Figura 2 ndash Evoluccedilatildeo da taxa diaacuteria de cresimento de A annua em casa de vegetaccedilatildeo por 20 semanas (s)
13
crescimento e em variaacuteveis afins foi conduzida e verificou que em meacutedia dobrar o
tamanho do vaso aumentou a produccedilatildeo da biomassa da planta em 43 Uma
anaacutelise adicional de efeitos do tamanho do vaso nos componentes afins do
crescimento sugere que o crescimento reduzido em vasos menores eacute causado
principalmente por uma reduccedilatildeo na fotossiacutentese por aacuterea da folha da unidade
mais do que por mudanccedilas na morfologia da folha ou no alocamento de
biomassa O tamanho apropriado do vaso dependeraacute logicamente do tamanho
das plantas que crescem neles Baseado em vaacuterias linhas da evidecircncia noacutes
sugerimos que um tamanho apropriado do vaso eacute um no qual a biomassa da
planta natildeo exceda 1 g L-1 Na praacutetica atual da pesquisa 65 das experiecircncias
excedem essa referecircncia Noacutes sugerimos que os investigadores devam
considerar com cuidado o tamanho do vaso em suas experiecircncias porque os
vasos pequenos podem mudar resultados experimentais e sabotar a finalidade da
experiecircncia
No presente ensaio de vasos foi obtido uma massa seca da parte aeacuterea
meacutedia de 2995g com um coeficiente de variaccedilatildeo de 3001 com uma planta por
vaso com dois transplantes para ganho de volume de solo a ser explorado O
corte das plantas se deu com 80 dias apoacutes o transplante
Quiteacuterio (2006) tambeacutem em ensaio de vasos obteve a meacutedia 25g de massa
seca de A annua em ensaio de vasos com duas plantas onde a colheita foi feita
75 dias apoacutes a semeadura no preacute-florescimento Os dois resultados apresentam
coerecircncia entre si
O ataque de cochonilhas observado era esperado como um reflexo natural
do estresse das plantas que satildeo submetidas ao cultivo em vaso em casa-de-
vegetaccedilatildeo
14
CONCLUSAtildeO
Nas condiccedilotildees do presente ensaio concluiu-se que o cultivo de Artemisia annua
em vasos e em casa-de-vegetaccedilatildeo eacute viaacutevel e pode ser notavelmente expressivo
com porte superior a 15m de altura e massa seca da parte aeacuterea meacutedia em torno
de 30g
Numa etapa posterior visualizam-se os ensaios objetivando a geraccedilatildeo de uma
tecnologia de produccedilatildeo tendo como alvo a produtividade em artesinina-A que eacute o
componente ativo contra malaacuteria
15
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17
DOCUMENTAacuteRIO FOTOGRAacuteFICO
Foto 1 ndash Mudas na sementeira prontas para transplante - Foto da autora Nayara Carvalho
Foto 2 ndash Mudas de Artemisia annua no dia do transplante ndash Foto da autora Nayara
Carvalho
18
Foto 3 ndash Aspecto geral do ensaio ndash Foto da autora Nayara Carvalho
Foto 4 ndash Suplementaccedilatildeo de substrato ndash Foto do orientador Jean Kleber
19
Foto 5 ndash Aproveitamento pela planta di suplemento de substrato ndash Foto do orientador Jean Kleber
Foto 6 ndash A planta mais alta ao final do ensaio ndash Foto do orientador Jean Kleber
20
Foto 8 ndash Ataque de colchonilhas em A annua ndash Foto da autora Nayara Carvalho
Foto 7 ndash A planta mais baixa ao final do ensaio
7
Concluiu-se que para obter artemisinina em altos niacuteveis A annua deve ser
colhida quatro vezes (KUMAR et al 2004)
ASPECTOS AGRONOcircMICOS
Propagaccedilatildeo
Em meacutedia 1000 sementes pesam 003 g e natildeo diminuem sua viabilidade
ao secar Satildeo acessiacuteveis ao armazenamento agrave frio de longo prazo Germinam de
janeiro a marccedilo A germinaccedilatildeo de 100 foi obtida em um meio de germinaccedilatildeo de
aacutegar a 1 em uma temperatura de 15degC sob um fotoperiacuteodo 816 horas claro-
escuro (MOHAMMADREZA 2008)
A Artemisia annua eacute plantada extensamente e comercialmente
principalmente como uma fonte de oacuteleos essenciais e tambeacutem de artemisinina
sobretudo em regiotildees da China e VietnamNessas regiotildees o ciclo da planta em
condiccedilotildees naturais chega a 10 meses Na Europa e na Ameacuterica as plantas
crescem mais rapidamente terminando seu ciclo de vida em apenas seis meses
mesmo no campo Cresce melhor em talhotildees abertos e ensolarados em solos
arenosos e aluviais feacuterteis que sejam neutros a ligeiramente aacutecidos e que tenham
uma boa retenccedilatildeo de umidade e natildeo tolera a seca ou o encharcamento As
sementes germinam de janeiro a marccedilo e a frutificaccedilatildeo (colheita das sementes)
ocorre entre outubro e novembro (httpwwwkeworgplants-fungiArtemisia-
annuahtm)
Conceiccedilatildeo et al (2013) testaram a germinaccedilatildeo da semente de A annua
cultivar Silves sob duas condiccedilotildees ambientais a fim de fornecer informaccedilotildees
sobre seu cultivo Na primeira condiccedilatildeo realizou-se o teste padratildeo com 4 lotes de
100g de sementes semeadas em gerbox sobre papel mata-borratildeo e dispostas
em germinador agrave temperatura de 25-30deg C expostas agrave luz durante 8 horas diaacuterias
e umedecidas quando necessaacuterio ateacute sua emergecircncia Na segunda etapa foi
realizado o mesmo procedimento anterior poreacutem as sementes permaneceram no
germinador em ausecircncia de luz sob as mesmas condiccedilotildees de temperatura e
umidade Segundo anaacutelise estatiacutestica em Tukey a 5 aplicada aqui sobre as
meacutedias de cada lote de 100g sementes os tratamentos obtiveram diferenccedilas
significativas sendo que as sementes expostas agrave luz obtiveram maiores valores
8
de germinaccedilatildeo Em ambiente com total ausecircncia de luz as sementes obtiveram
baixiacutessima taxa de germinaccedilatildeo no mesmo periacuteodo que as sementes em ambiente
iluminado Esse fato indica que a semente de A annua eacute fotoblaacutestica positiva e
assim necessita de um miacutenimo de luz para que ocorra sua germinaccedilatildeo por esse
motivo natildeo podem ser enterradas e sua semeadura deve ser apenas a lanccedilo ou
em superfiacutecie sem cobertura com terra Esta caracteriacutestica eacute comum agrave muitas
espeacutecies que produzem sementes miuacutedas
Adubaccedilatildeo
Em 2004 e 2005 um estudo foi realizado com o objetivo de determinar o
rendimento os componentes do rendimento e o iacutendice da artemisinina de A
annua cultivada sob quatro aplicaccedilotildees do nitrogecircnio (0 40 80 e 120 quilogramas
haminus1) na regiatildeo de Ccedilukurova na Turquia As experimentaccedilotildees de campo foram
conduzidas na universidade de Ccedilukurova no departamento de agricultura da
faculdade Nesse estudo a altura da planta o nuacutemero de ramos o rendimento
fresco e seco da erva o rendimento fresco e seco da folha o iacutendice do oacuteleo
essencial e o iacutendice da artemisinina (por cromatografia liacutequida pelo HPLC de
desempenho elevado) foram examinados Pela anaacutelise de variaccedilatildeo as doses de
nitrogecircnio natildeo tiveram nenhum efeito estatiacutestico nas caracteriacutesticas investigadas
agrave exceccedilatildeo do iacutendice de artemisinina Esse iacutendice nas folhas secas foi afetado
significativamente pelas aplicaccedilotildees do nitrogecircnio que variaram de 632 a 2750
mg 100 gminus1 (OZGUVEN et al 2008)
Outros aspectos
Uma pesquisa desenvolvida em MEDIPLANT (Suiacuteccedila) e no CPQBA-
UNICAPM (Brasil) envolveu a seleccedilatildeo e produccedilatildeo de genoacutetipos ricos em
artemisinina apresentando biomassa elevada seguido por uma segunda seleccedilatildeo
para a adaptaccedilatildeo agraves circunstacircncias climaacuteticas do Brasil Com hibridizaccedilatildeo
controlada entre genoacutetipos selecionados da China e do Vietnam o ganho
geneacutetico foi obtido nos termos do iacutendice da artemisinina e da uniformidade da
populaccedilatildeo Com o aumento do iacutendice de biomassa e da artemisinina (estimado
pela monitoraccedilatildeo analiacutetica) era possiacutevel aumentar a produccedilatildeo de artemisinina de
9
5 Kgha (populaccedilatildeo baacutesica) para aproximadamente 25 Kgha (populaccedilatildeo
geneticamente produzida) No cultivo realizado no Brasil em 3 de 7 linhas
hiacutebridas 239 de x 1V Ch x Viet55 e 1V x 243 produziram respectivamente
2543 2305 e 2127 quilogramas de artemisininahacorte com as 2 colheitas
possiacuteveis por o ano O cultivo destas linhas hiacutebridas novas no Brasil eacute uma
teacutecnica praticaacutevel e altamente competitiva devido agrave produccedilatildeo obtida
(MAGALHAtildeES et al 1997)
Foi pesquisado o efeito do aumento da irradiacircncia (15 a 100 da luz solar
cheia L15 a L100) sobre o crescimento a taxa fotossinteacutetica liacutequida maacutexima
(Pmax) a compensaccedilatildeo (CI) a saturaccedilatildeo de irradiacircncia de A annua e a produccedilatildeo
de artemisinina Na luz solar plena A annua apresentou uma capacidade elevada
de fotossiacutentese com irradiacircncia baixa manteve um Pmax relativamente elevado
com um CI baixo O crescimento da altura e do diacircmetro biomassa total e da
folha e iacutendice de artemisinina diminuiu com a diminuiccedilatildeo da irradiacircncia que pocircde
ser conectado com a fotossiacutentese mais baixa na irradiacircncia mais baixa em
relaccedilatildeo agrave irradiacircncia mais elevada As irradiacircncias mudaram a alocaccedilatildeo de
biomassa em A annua A relaccedilatildeo massa de folhamassa total da espeacutecie
aumentou com a diminuiccedilatildeo da irradiacircncia mas a relaccedilatildeo raizmassa total e
raizmassa da parte aeacuterea aumentaram geralmente com a irradiacircncia crescente
Assim A annua pode crescer na luz solar parcial e plena Entretanto o
rendimento elevado da biomassa e da artemisinina requerem o cultivo em um
habitat aberto com luz solar adequada (WANG et al 2008)
MATERIAIS E MEacuteTODOS
O ensaio foi conduzido na Estaccedilatildeo Experimental de Biologia da
Universidade de Brasiacutelia (EEB ndash UnB) em casa-de-vegetaccedilatildeo do tipo
ldquoglasshouserdquo no periacuteodo de 19 de abril de 2013 a 6 de dezembro de 2013
(primeiro e segundo semestres respectivamente) Durante o ensaio a casa-de-
vegetaccedilatildeo apresentou uma temperatura meacutedia de aproximadamente 250deg C com
meacutedia das miacutenimas de 1325degC e das maacuteximas de 3675degC aferidas com
termocircmetro convencional de maacutexima e miacutenima O iacutendice de radiaccedilatildeo luminosa
esteve em trono de 50 determinado por fotocircmetro automaacutetico modelo Asahi-
Pentax SP-500
10
A partida de sementes de Aannua foi doada pelo pesquisador Pedro
Melillo Magalhatildees oriundas do CPQBA ndash UNICAMP e produzidas em campo da
proacutepria estaccedilatildeo e utilizadas para a semeadura em sementeiras tipo caixa
contendo a mistura EEB (Estaccedilatildeo Experimental de Biologia) com a seguinte
composiccedilatildeo Latossolo vermelho de cerrado areia vermiculita e composto
orgacircnico na proporccedilatildeo 3311 respectivamente mais a formulaccedilatildeo 4-14-8 na
dose de 100g para 40L da mistura Apoacutes 42 dias da semeadura foram
selecionadas 20 mudas que estavam no ponto de transplante (meacutedia de 15 cm
de altura) Dessa forma foram transplantadas para vasos com capacidade para
25L preenchidos com a mistura EEB
Apoacutes o transplante a altura da parte aeacuterea de todas as plantas foi aferida
semanalmente com o uso de uma trena com o objetivo de desenhar-se a curva
de crescimento As mediccedilotildees tiveram iniacutecio uma semana apoacutes o transplante no
dia 14 de maio
No dia 26 de julho de 201349 dias apoacutes o transplante as plantas foram
transferidas dos vasos de 25L para vasos com maior capacidade (325L) para
favorecer o seu crescimento e desenvolvimento e no dia 17 de setembro102 dias
apoacutes o transplante foi feita uma suplementaccedilatildeo de terra para as 20 plantas com o
mesmo objetivo mediante a colocaccedilatildeo por baixo de um outro vaso de mesmo
tamanho contendo metade de seu volume em Substrato EEB Isso permitiu que
as raiacutezes crescessem no volume adicional de mistura atraveacutes dos furos de
drenagem do vaso original
O controle de plantas daninhas foi feito manualmente e o controle
fitossanitaacuterio atraveacutes de acompanhamento e sucessivas observaccedilotildees Ao fim do
ensaio foi observada uma pequena infestaccedilatildeo com cochonilhas As cochonilhas
foram identificadas por Pseudococcus citri Risso ndash mais conhecida por
ldquocochonilha algodatildeordquo Foi parcialmente controlada em curto prazo com uma
pulverizaccedilatildeo manual de soluccedilatildeo de detergente (10 ml 1 litro de aacutegua)
Ao fim do ensaio dia 18 de outubro foram obtidas as massas fresca e
seca das plantas bem como os coeficientes de variaccedilatildeo dos dados
11
RESUTADOS E DISCUSSAtildeO
Os resultados do presente ensaio encontram-se representados nas Figuras
4 e 5 as quais representam respectivamente a curva de crescimento de Aannua
em vinte semana (s) em casa-de-vegetaccedilatildeo e a evoluccedilatildeo da taxa meacutedia diaacuteria de
crescimento
Observando-se a Figura 2 que apresenta a evoluccedilatildeo da taxa meacutedia de
crescimento verificou-se que entre a quinta e a setima semanas a taxa meacutedia
diaacuteria de crescimento cresceu de 08 cm ao dia para em torno de 20 cm por dia
tendo havido um decrescimo e um estabilidade entre a oitava e a deacutecima segunda
semanas quando entatildeo ocorreu o segundo pico passando a taxa meacutedia diaacuteria de
crescimento de 12 cm para 18 cm seguindo-se um decrescimo ateacute 05 cmdia
nas deacutecima sexta e deacutecima seacutetimas semanas quando entatildeo houve o terceiro
pico na deacutecima oitava semana atingindo 08cmdia e novamente decaindo ateacute 04
cmdia na vigeacutesima semana
0
50
100
150
1s 3s 5s 7s 9s 11s 13s 15s 17s 19s
Alt
ura
em
cm
Crescimento meacutedio de Artemisia annua em vasos em casa de vegataccedilatildeo durante 20 semanas
(s)
Figura 1 ndash Crescimento meacutedio de A annua em vasos em casa-de-vegetaccedilatildeo durante 20 semanas (s) ndash Observa-se que a altura das plantas aumentou
notavelmente a partir da quinta semana apoacutes o transplante correspondendo ao primeiro pico de crescimento
12
Os picos de crescimento de A annua submetida ao cultivo em vasos em
casa-de-vegetaccedilatildeo podem ser explicados pelas interferecircncias do pesquisador que
visava maximizar o desenvolvimento das plantas O primeiro pico pode ser
atribuiacutedo ao padratildeo de crescimento da planta Por ocasiatildeo da primeira troca de
vasos quando a planta ganhou 2145 de volume de substrato para explorar
teria havido o segundo pico por volta da deacutecima segunda semana O terceiro pico
se deu em consequecircncia da segunda suplementaccedilatildeo de substrato ocorrida por
volta da deacutecima seacutetima semana
O aproveitamento da segunda suplementaccedilatildeo foi efetivo tendo as plantas
explorado o volume de substrato adicional em sua totalidade ocupando-o por
inteiro o volume (Figura 6)
Eacute consenso entre pesquisadores que as plantas crescidas em vasos nunca
alcanccedilam seu potencial maior conforme imagens de suas raiacutezes mostram Uma
teacutecnica meacutedica da imagem chamada a imagem de ressonacircncia magneacutetico (MRI)
foi usada por investigadores para capturar instantacircneos da raiz da planta no vaso
As figuras obtidas revelam que as raiacutezes ldquodetectam o tamanho do vasordquo e emitem
um sinal que resulta na restriccedilatildeo o crescimento da planta (POORTER et al 2012)
Poorter et al (2012) esclarecem que a maioria das experiecircncias em
biologia de plantas usa plantas crescidas em algum tipo de recipiente ou vaso
Uma meta-anaacutelise em 65 estudos que analisaram o efeito do tamanho do vaso no
0
05
1
15
2
25
1s 3s 5s 7s 9s 11s 13s 15s 17s 19s
Ce
ntiacute
met
ros
po
r d
ia
Evoluccedilatildeo da taxa meacutedia diaacuteria de crescimento de Artemisia annua em casa de vegetaccedilatildeo por
20 semanas
Figura 2 ndash Evoluccedilatildeo da taxa diaacuteria de cresimento de A annua em casa de vegetaccedilatildeo por 20 semanas (s)
13
crescimento e em variaacuteveis afins foi conduzida e verificou que em meacutedia dobrar o
tamanho do vaso aumentou a produccedilatildeo da biomassa da planta em 43 Uma
anaacutelise adicional de efeitos do tamanho do vaso nos componentes afins do
crescimento sugere que o crescimento reduzido em vasos menores eacute causado
principalmente por uma reduccedilatildeo na fotossiacutentese por aacuterea da folha da unidade
mais do que por mudanccedilas na morfologia da folha ou no alocamento de
biomassa O tamanho apropriado do vaso dependeraacute logicamente do tamanho
das plantas que crescem neles Baseado em vaacuterias linhas da evidecircncia noacutes
sugerimos que um tamanho apropriado do vaso eacute um no qual a biomassa da
planta natildeo exceda 1 g L-1 Na praacutetica atual da pesquisa 65 das experiecircncias
excedem essa referecircncia Noacutes sugerimos que os investigadores devam
considerar com cuidado o tamanho do vaso em suas experiecircncias porque os
vasos pequenos podem mudar resultados experimentais e sabotar a finalidade da
experiecircncia
No presente ensaio de vasos foi obtido uma massa seca da parte aeacuterea
meacutedia de 2995g com um coeficiente de variaccedilatildeo de 3001 com uma planta por
vaso com dois transplantes para ganho de volume de solo a ser explorado O
corte das plantas se deu com 80 dias apoacutes o transplante
Quiteacuterio (2006) tambeacutem em ensaio de vasos obteve a meacutedia 25g de massa
seca de A annua em ensaio de vasos com duas plantas onde a colheita foi feita
75 dias apoacutes a semeadura no preacute-florescimento Os dois resultados apresentam
coerecircncia entre si
O ataque de cochonilhas observado era esperado como um reflexo natural
do estresse das plantas que satildeo submetidas ao cultivo em vaso em casa-de-
vegetaccedilatildeo
14
CONCLUSAtildeO
Nas condiccedilotildees do presente ensaio concluiu-se que o cultivo de Artemisia annua
em vasos e em casa-de-vegetaccedilatildeo eacute viaacutevel e pode ser notavelmente expressivo
com porte superior a 15m de altura e massa seca da parte aeacuterea meacutedia em torno
de 30g
Numa etapa posterior visualizam-se os ensaios objetivando a geraccedilatildeo de uma
tecnologia de produccedilatildeo tendo como alvo a produtividade em artesinina-A que eacute o
componente ativo contra malaacuteria
15
REFEREcircNCIAS BIBLIOGRAacuteFICAS
CONCEICcedilAtildeO DM RABONATO A C MAGALHAtildeES P M PEREIRA B
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of Artemisia annua L as a locally produced remedy for malaria in the tropics
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17
DOCUMENTAacuteRIO FOTOGRAacuteFICO
Foto 1 ndash Mudas na sementeira prontas para transplante - Foto da autora Nayara Carvalho
Foto 2 ndash Mudas de Artemisia annua no dia do transplante ndash Foto da autora Nayara
Carvalho
18
Foto 3 ndash Aspecto geral do ensaio ndash Foto da autora Nayara Carvalho
Foto 4 ndash Suplementaccedilatildeo de substrato ndash Foto do orientador Jean Kleber
19
Foto 5 ndash Aproveitamento pela planta di suplemento de substrato ndash Foto do orientador Jean Kleber
Foto 6 ndash A planta mais alta ao final do ensaio ndash Foto do orientador Jean Kleber
20
Foto 8 ndash Ataque de colchonilhas em A annua ndash Foto da autora Nayara Carvalho
Foto 7 ndash A planta mais baixa ao final do ensaio
8
de germinaccedilatildeo Em ambiente com total ausecircncia de luz as sementes obtiveram
baixiacutessima taxa de germinaccedilatildeo no mesmo periacuteodo que as sementes em ambiente
iluminado Esse fato indica que a semente de A annua eacute fotoblaacutestica positiva e
assim necessita de um miacutenimo de luz para que ocorra sua germinaccedilatildeo por esse
motivo natildeo podem ser enterradas e sua semeadura deve ser apenas a lanccedilo ou
em superfiacutecie sem cobertura com terra Esta caracteriacutestica eacute comum agrave muitas
espeacutecies que produzem sementes miuacutedas
Adubaccedilatildeo
Em 2004 e 2005 um estudo foi realizado com o objetivo de determinar o
rendimento os componentes do rendimento e o iacutendice da artemisinina de A
annua cultivada sob quatro aplicaccedilotildees do nitrogecircnio (0 40 80 e 120 quilogramas
haminus1) na regiatildeo de Ccedilukurova na Turquia As experimentaccedilotildees de campo foram
conduzidas na universidade de Ccedilukurova no departamento de agricultura da
faculdade Nesse estudo a altura da planta o nuacutemero de ramos o rendimento
fresco e seco da erva o rendimento fresco e seco da folha o iacutendice do oacuteleo
essencial e o iacutendice da artemisinina (por cromatografia liacutequida pelo HPLC de
desempenho elevado) foram examinados Pela anaacutelise de variaccedilatildeo as doses de
nitrogecircnio natildeo tiveram nenhum efeito estatiacutestico nas caracteriacutesticas investigadas
agrave exceccedilatildeo do iacutendice de artemisinina Esse iacutendice nas folhas secas foi afetado
significativamente pelas aplicaccedilotildees do nitrogecircnio que variaram de 632 a 2750
mg 100 gminus1 (OZGUVEN et al 2008)
Outros aspectos
Uma pesquisa desenvolvida em MEDIPLANT (Suiacuteccedila) e no CPQBA-
UNICAPM (Brasil) envolveu a seleccedilatildeo e produccedilatildeo de genoacutetipos ricos em
artemisinina apresentando biomassa elevada seguido por uma segunda seleccedilatildeo
para a adaptaccedilatildeo agraves circunstacircncias climaacuteticas do Brasil Com hibridizaccedilatildeo
controlada entre genoacutetipos selecionados da China e do Vietnam o ganho
geneacutetico foi obtido nos termos do iacutendice da artemisinina e da uniformidade da
populaccedilatildeo Com o aumento do iacutendice de biomassa e da artemisinina (estimado
pela monitoraccedilatildeo analiacutetica) era possiacutevel aumentar a produccedilatildeo de artemisinina de
9
5 Kgha (populaccedilatildeo baacutesica) para aproximadamente 25 Kgha (populaccedilatildeo
geneticamente produzida) No cultivo realizado no Brasil em 3 de 7 linhas
hiacutebridas 239 de x 1V Ch x Viet55 e 1V x 243 produziram respectivamente
2543 2305 e 2127 quilogramas de artemisininahacorte com as 2 colheitas
possiacuteveis por o ano O cultivo destas linhas hiacutebridas novas no Brasil eacute uma
teacutecnica praticaacutevel e altamente competitiva devido agrave produccedilatildeo obtida
(MAGALHAtildeES et al 1997)
Foi pesquisado o efeito do aumento da irradiacircncia (15 a 100 da luz solar
cheia L15 a L100) sobre o crescimento a taxa fotossinteacutetica liacutequida maacutexima
(Pmax) a compensaccedilatildeo (CI) a saturaccedilatildeo de irradiacircncia de A annua e a produccedilatildeo
de artemisinina Na luz solar plena A annua apresentou uma capacidade elevada
de fotossiacutentese com irradiacircncia baixa manteve um Pmax relativamente elevado
com um CI baixo O crescimento da altura e do diacircmetro biomassa total e da
folha e iacutendice de artemisinina diminuiu com a diminuiccedilatildeo da irradiacircncia que pocircde
ser conectado com a fotossiacutentese mais baixa na irradiacircncia mais baixa em
relaccedilatildeo agrave irradiacircncia mais elevada As irradiacircncias mudaram a alocaccedilatildeo de
biomassa em A annua A relaccedilatildeo massa de folhamassa total da espeacutecie
aumentou com a diminuiccedilatildeo da irradiacircncia mas a relaccedilatildeo raizmassa total e
raizmassa da parte aeacuterea aumentaram geralmente com a irradiacircncia crescente
Assim A annua pode crescer na luz solar parcial e plena Entretanto o
rendimento elevado da biomassa e da artemisinina requerem o cultivo em um
habitat aberto com luz solar adequada (WANG et al 2008)
MATERIAIS E MEacuteTODOS
O ensaio foi conduzido na Estaccedilatildeo Experimental de Biologia da
Universidade de Brasiacutelia (EEB ndash UnB) em casa-de-vegetaccedilatildeo do tipo
ldquoglasshouserdquo no periacuteodo de 19 de abril de 2013 a 6 de dezembro de 2013
(primeiro e segundo semestres respectivamente) Durante o ensaio a casa-de-
vegetaccedilatildeo apresentou uma temperatura meacutedia de aproximadamente 250deg C com
meacutedia das miacutenimas de 1325degC e das maacuteximas de 3675degC aferidas com
termocircmetro convencional de maacutexima e miacutenima O iacutendice de radiaccedilatildeo luminosa
esteve em trono de 50 determinado por fotocircmetro automaacutetico modelo Asahi-
Pentax SP-500
10
A partida de sementes de Aannua foi doada pelo pesquisador Pedro
Melillo Magalhatildees oriundas do CPQBA ndash UNICAMP e produzidas em campo da
proacutepria estaccedilatildeo e utilizadas para a semeadura em sementeiras tipo caixa
contendo a mistura EEB (Estaccedilatildeo Experimental de Biologia) com a seguinte
composiccedilatildeo Latossolo vermelho de cerrado areia vermiculita e composto
orgacircnico na proporccedilatildeo 3311 respectivamente mais a formulaccedilatildeo 4-14-8 na
dose de 100g para 40L da mistura Apoacutes 42 dias da semeadura foram
selecionadas 20 mudas que estavam no ponto de transplante (meacutedia de 15 cm
de altura) Dessa forma foram transplantadas para vasos com capacidade para
25L preenchidos com a mistura EEB
Apoacutes o transplante a altura da parte aeacuterea de todas as plantas foi aferida
semanalmente com o uso de uma trena com o objetivo de desenhar-se a curva
de crescimento As mediccedilotildees tiveram iniacutecio uma semana apoacutes o transplante no
dia 14 de maio
No dia 26 de julho de 201349 dias apoacutes o transplante as plantas foram
transferidas dos vasos de 25L para vasos com maior capacidade (325L) para
favorecer o seu crescimento e desenvolvimento e no dia 17 de setembro102 dias
apoacutes o transplante foi feita uma suplementaccedilatildeo de terra para as 20 plantas com o
mesmo objetivo mediante a colocaccedilatildeo por baixo de um outro vaso de mesmo
tamanho contendo metade de seu volume em Substrato EEB Isso permitiu que
as raiacutezes crescessem no volume adicional de mistura atraveacutes dos furos de
drenagem do vaso original
O controle de plantas daninhas foi feito manualmente e o controle
fitossanitaacuterio atraveacutes de acompanhamento e sucessivas observaccedilotildees Ao fim do
ensaio foi observada uma pequena infestaccedilatildeo com cochonilhas As cochonilhas
foram identificadas por Pseudococcus citri Risso ndash mais conhecida por
ldquocochonilha algodatildeordquo Foi parcialmente controlada em curto prazo com uma
pulverizaccedilatildeo manual de soluccedilatildeo de detergente (10 ml 1 litro de aacutegua)
Ao fim do ensaio dia 18 de outubro foram obtidas as massas fresca e
seca das plantas bem como os coeficientes de variaccedilatildeo dos dados
11
RESUTADOS E DISCUSSAtildeO
Os resultados do presente ensaio encontram-se representados nas Figuras
4 e 5 as quais representam respectivamente a curva de crescimento de Aannua
em vinte semana (s) em casa-de-vegetaccedilatildeo e a evoluccedilatildeo da taxa meacutedia diaacuteria de
crescimento
Observando-se a Figura 2 que apresenta a evoluccedilatildeo da taxa meacutedia de
crescimento verificou-se que entre a quinta e a setima semanas a taxa meacutedia
diaacuteria de crescimento cresceu de 08 cm ao dia para em torno de 20 cm por dia
tendo havido um decrescimo e um estabilidade entre a oitava e a deacutecima segunda
semanas quando entatildeo ocorreu o segundo pico passando a taxa meacutedia diaacuteria de
crescimento de 12 cm para 18 cm seguindo-se um decrescimo ateacute 05 cmdia
nas deacutecima sexta e deacutecima seacutetimas semanas quando entatildeo houve o terceiro
pico na deacutecima oitava semana atingindo 08cmdia e novamente decaindo ateacute 04
cmdia na vigeacutesima semana
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Crescimento meacutedio de Artemisia annua em vasos em casa de vegataccedilatildeo durante 20 semanas
(s)
Figura 1 ndash Crescimento meacutedio de A annua em vasos em casa-de-vegetaccedilatildeo durante 20 semanas (s) ndash Observa-se que a altura das plantas aumentou
notavelmente a partir da quinta semana apoacutes o transplante correspondendo ao primeiro pico de crescimento
12
Os picos de crescimento de A annua submetida ao cultivo em vasos em
casa-de-vegetaccedilatildeo podem ser explicados pelas interferecircncias do pesquisador que
visava maximizar o desenvolvimento das plantas O primeiro pico pode ser
atribuiacutedo ao padratildeo de crescimento da planta Por ocasiatildeo da primeira troca de
vasos quando a planta ganhou 2145 de volume de substrato para explorar
teria havido o segundo pico por volta da deacutecima segunda semana O terceiro pico
se deu em consequecircncia da segunda suplementaccedilatildeo de substrato ocorrida por
volta da deacutecima seacutetima semana
O aproveitamento da segunda suplementaccedilatildeo foi efetivo tendo as plantas
explorado o volume de substrato adicional em sua totalidade ocupando-o por
inteiro o volume (Figura 6)
Eacute consenso entre pesquisadores que as plantas crescidas em vasos nunca
alcanccedilam seu potencial maior conforme imagens de suas raiacutezes mostram Uma
teacutecnica meacutedica da imagem chamada a imagem de ressonacircncia magneacutetico (MRI)
foi usada por investigadores para capturar instantacircneos da raiz da planta no vaso
As figuras obtidas revelam que as raiacutezes ldquodetectam o tamanho do vasordquo e emitem
um sinal que resulta na restriccedilatildeo o crescimento da planta (POORTER et al 2012)
Poorter et al (2012) esclarecem que a maioria das experiecircncias em
biologia de plantas usa plantas crescidas em algum tipo de recipiente ou vaso
Uma meta-anaacutelise em 65 estudos que analisaram o efeito do tamanho do vaso no
0
05
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1s 3s 5s 7s 9s 11s 13s 15s 17s 19s
Ce
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Evoluccedilatildeo da taxa meacutedia diaacuteria de crescimento de Artemisia annua em casa de vegetaccedilatildeo por
20 semanas
Figura 2 ndash Evoluccedilatildeo da taxa diaacuteria de cresimento de A annua em casa de vegetaccedilatildeo por 20 semanas (s)
13
crescimento e em variaacuteveis afins foi conduzida e verificou que em meacutedia dobrar o
tamanho do vaso aumentou a produccedilatildeo da biomassa da planta em 43 Uma
anaacutelise adicional de efeitos do tamanho do vaso nos componentes afins do
crescimento sugere que o crescimento reduzido em vasos menores eacute causado
principalmente por uma reduccedilatildeo na fotossiacutentese por aacuterea da folha da unidade
mais do que por mudanccedilas na morfologia da folha ou no alocamento de
biomassa O tamanho apropriado do vaso dependeraacute logicamente do tamanho
das plantas que crescem neles Baseado em vaacuterias linhas da evidecircncia noacutes
sugerimos que um tamanho apropriado do vaso eacute um no qual a biomassa da
planta natildeo exceda 1 g L-1 Na praacutetica atual da pesquisa 65 das experiecircncias
excedem essa referecircncia Noacutes sugerimos que os investigadores devam
considerar com cuidado o tamanho do vaso em suas experiecircncias porque os
vasos pequenos podem mudar resultados experimentais e sabotar a finalidade da
experiecircncia
No presente ensaio de vasos foi obtido uma massa seca da parte aeacuterea
meacutedia de 2995g com um coeficiente de variaccedilatildeo de 3001 com uma planta por
vaso com dois transplantes para ganho de volume de solo a ser explorado O
corte das plantas se deu com 80 dias apoacutes o transplante
Quiteacuterio (2006) tambeacutem em ensaio de vasos obteve a meacutedia 25g de massa
seca de A annua em ensaio de vasos com duas plantas onde a colheita foi feita
75 dias apoacutes a semeadura no preacute-florescimento Os dois resultados apresentam
coerecircncia entre si
O ataque de cochonilhas observado era esperado como um reflexo natural
do estresse das plantas que satildeo submetidas ao cultivo em vaso em casa-de-
vegetaccedilatildeo
14
CONCLUSAtildeO
Nas condiccedilotildees do presente ensaio concluiu-se que o cultivo de Artemisia annua
em vasos e em casa-de-vegetaccedilatildeo eacute viaacutevel e pode ser notavelmente expressivo
com porte superior a 15m de altura e massa seca da parte aeacuterea meacutedia em torno
de 30g
Numa etapa posterior visualizam-se os ensaios objetivando a geraccedilatildeo de uma
tecnologia de produccedilatildeo tendo como alvo a produtividade em artesinina-A que eacute o
componente ativo contra malaacuteria
15
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of malaria Trans R Soc Trop Med Hyg 98(5) 318ndash21 2004
OZGUVEN M SENER B OTHAN I SEKEROGLI N KIRPIK M KARTAL
M PESIN I amp KAYA Z Effects of varying nitrogen doses on yield yield
components and artemisinina content of Artemisia annua L Industrial Crops
and Products v 27 n1 p 60-64 2008
POORTERH BUumlHLERJ VAN DUSSCHOTEN D CLIMENT J amp POSTMA
JA Pot size matters a meta-analysis of the effects of rooting volume on plant
growthFunctional Plant Biology 39(11) 839-8502012
POSNER G H amp OrsquoNEIL P M Knowledge of the Proposed Chemical
Mechanism of Action and Cytochrome P450 Metabolism of Antimalarial Trioxanes
Like Artemisinin Allows Rational Design of New Antimalarial Peroxides Acc
Chem Res 37 (6) 397ndash404 2004
QUITEacuteRIO G C M Produccedilatildeo de Artemisia annua L sob influecircncia de
micorriza arbuscular Campinas 2006 38f
RAumlTH K TAXIS K WALZ GH et al Pharmacokinetic study of artemisinin
after oral intake of a traditional preparation of Artemisia annua L (annual
wormwood) Am J Trop Med Hyg 70 (2) 128ndash32 2004
RODRIGUES R A F FOGLIO M A BOAVENTURA JR S SANTOS A S
REHDER V L G Otimizaccedilatildeo do processo de extraccedilatildeo e isolamento do anti-
malaacuterico artemisinina A a partir de Artemisia annua LQuim Nova 29 368
2006
SANTOS JO Siacutentese e avaliaccedilatildeo da atividade herbicida de lactonas
sesquiterpecircnicas UFVAGROQUIacuteMICA Tese de Mestrado 2009 100 p
WANG ML JIANG YS WEI JQ WEI X QI XX JIANG SY WANG ZM
Effects of irradiance on growth photosynthetic characteristics and artemisinin
content of Artemisia annua L Photosynthetica vol 46 no1 pp 17-20 2008
WOERDENBAG HJ PRAS N CHAN N G BANG B T BOS R UDEN
W VAN Y P BOI N V BATTERMAN S LUGT C B Artemisinin Related
Sesquiterpenes and Essential Oil inArtemisia annua During a Vegetation Period
in Vietnam Planta Med v60 n3p 272-275 1994
17
DOCUMENTAacuteRIO FOTOGRAacuteFICO
Foto 1 ndash Mudas na sementeira prontas para transplante - Foto da autora Nayara Carvalho
Foto 2 ndash Mudas de Artemisia annua no dia do transplante ndash Foto da autora Nayara
Carvalho
18
Foto 3 ndash Aspecto geral do ensaio ndash Foto da autora Nayara Carvalho
Foto 4 ndash Suplementaccedilatildeo de substrato ndash Foto do orientador Jean Kleber
19
Foto 5 ndash Aproveitamento pela planta di suplemento de substrato ndash Foto do orientador Jean Kleber
Foto 6 ndash A planta mais alta ao final do ensaio ndash Foto do orientador Jean Kleber
20
Foto 8 ndash Ataque de colchonilhas em A annua ndash Foto da autora Nayara Carvalho
Foto 7 ndash A planta mais baixa ao final do ensaio
9
5 Kgha (populaccedilatildeo baacutesica) para aproximadamente 25 Kgha (populaccedilatildeo
geneticamente produzida) No cultivo realizado no Brasil em 3 de 7 linhas
hiacutebridas 239 de x 1V Ch x Viet55 e 1V x 243 produziram respectivamente
2543 2305 e 2127 quilogramas de artemisininahacorte com as 2 colheitas
possiacuteveis por o ano O cultivo destas linhas hiacutebridas novas no Brasil eacute uma
teacutecnica praticaacutevel e altamente competitiva devido agrave produccedilatildeo obtida
(MAGALHAtildeES et al 1997)
Foi pesquisado o efeito do aumento da irradiacircncia (15 a 100 da luz solar
cheia L15 a L100) sobre o crescimento a taxa fotossinteacutetica liacutequida maacutexima
(Pmax) a compensaccedilatildeo (CI) a saturaccedilatildeo de irradiacircncia de A annua e a produccedilatildeo
de artemisinina Na luz solar plena A annua apresentou uma capacidade elevada
de fotossiacutentese com irradiacircncia baixa manteve um Pmax relativamente elevado
com um CI baixo O crescimento da altura e do diacircmetro biomassa total e da
folha e iacutendice de artemisinina diminuiu com a diminuiccedilatildeo da irradiacircncia que pocircde
ser conectado com a fotossiacutentese mais baixa na irradiacircncia mais baixa em
relaccedilatildeo agrave irradiacircncia mais elevada As irradiacircncias mudaram a alocaccedilatildeo de
biomassa em A annua A relaccedilatildeo massa de folhamassa total da espeacutecie
aumentou com a diminuiccedilatildeo da irradiacircncia mas a relaccedilatildeo raizmassa total e
raizmassa da parte aeacuterea aumentaram geralmente com a irradiacircncia crescente
Assim A annua pode crescer na luz solar parcial e plena Entretanto o
rendimento elevado da biomassa e da artemisinina requerem o cultivo em um
habitat aberto com luz solar adequada (WANG et al 2008)
MATERIAIS E MEacuteTODOS
O ensaio foi conduzido na Estaccedilatildeo Experimental de Biologia da
Universidade de Brasiacutelia (EEB ndash UnB) em casa-de-vegetaccedilatildeo do tipo
ldquoglasshouserdquo no periacuteodo de 19 de abril de 2013 a 6 de dezembro de 2013
(primeiro e segundo semestres respectivamente) Durante o ensaio a casa-de-
vegetaccedilatildeo apresentou uma temperatura meacutedia de aproximadamente 250deg C com
meacutedia das miacutenimas de 1325degC e das maacuteximas de 3675degC aferidas com
termocircmetro convencional de maacutexima e miacutenima O iacutendice de radiaccedilatildeo luminosa
esteve em trono de 50 determinado por fotocircmetro automaacutetico modelo Asahi-
Pentax SP-500
10
A partida de sementes de Aannua foi doada pelo pesquisador Pedro
Melillo Magalhatildees oriundas do CPQBA ndash UNICAMP e produzidas em campo da
proacutepria estaccedilatildeo e utilizadas para a semeadura em sementeiras tipo caixa
contendo a mistura EEB (Estaccedilatildeo Experimental de Biologia) com a seguinte
composiccedilatildeo Latossolo vermelho de cerrado areia vermiculita e composto
orgacircnico na proporccedilatildeo 3311 respectivamente mais a formulaccedilatildeo 4-14-8 na
dose de 100g para 40L da mistura Apoacutes 42 dias da semeadura foram
selecionadas 20 mudas que estavam no ponto de transplante (meacutedia de 15 cm
de altura) Dessa forma foram transplantadas para vasos com capacidade para
25L preenchidos com a mistura EEB
Apoacutes o transplante a altura da parte aeacuterea de todas as plantas foi aferida
semanalmente com o uso de uma trena com o objetivo de desenhar-se a curva
de crescimento As mediccedilotildees tiveram iniacutecio uma semana apoacutes o transplante no
dia 14 de maio
No dia 26 de julho de 201349 dias apoacutes o transplante as plantas foram
transferidas dos vasos de 25L para vasos com maior capacidade (325L) para
favorecer o seu crescimento e desenvolvimento e no dia 17 de setembro102 dias
apoacutes o transplante foi feita uma suplementaccedilatildeo de terra para as 20 plantas com o
mesmo objetivo mediante a colocaccedilatildeo por baixo de um outro vaso de mesmo
tamanho contendo metade de seu volume em Substrato EEB Isso permitiu que
as raiacutezes crescessem no volume adicional de mistura atraveacutes dos furos de
drenagem do vaso original
O controle de plantas daninhas foi feito manualmente e o controle
fitossanitaacuterio atraveacutes de acompanhamento e sucessivas observaccedilotildees Ao fim do
ensaio foi observada uma pequena infestaccedilatildeo com cochonilhas As cochonilhas
foram identificadas por Pseudococcus citri Risso ndash mais conhecida por
ldquocochonilha algodatildeordquo Foi parcialmente controlada em curto prazo com uma
pulverizaccedilatildeo manual de soluccedilatildeo de detergente (10 ml 1 litro de aacutegua)
Ao fim do ensaio dia 18 de outubro foram obtidas as massas fresca e
seca das plantas bem como os coeficientes de variaccedilatildeo dos dados
11
RESUTADOS E DISCUSSAtildeO
Os resultados do presente ensaio encontram-se representados nas Figuras
4 e 5 as quais representam respectivamente a curva de crescimento de Aannua
em vinte semana (s) em casa-de-vegetaccedilatildeo e a evoluccedilatildeo da taxa meacutedia diaacuteria de
crescimento
Observando-se a Figura 2 que apresenta a evoluccedilatildeo da taxa meacutedia de
crescimento verificou-se que entre a quinta e a setima semanas a taxa meacutedia
diaacuteria de crescimento cresceu de 08 cm ao dia para em torno de 20 cm por dia
tendo havido um decrescimo e um estabilidade entre a oitava e a deacutecima segunda
semanas quando entatildeo ocorreu o segundo pico passando a taxa meacutedia diaacuteria de
crescimento de 12 cm para 18 cm seguindo-se um decrescimo ateacute 05 cmdia
nas deacutecima sexta e deacutecima seacutetimas semanas quando entatildeo houve o terceiro
pico na deacutecima oitava semana atingindo 08cmdia e novamente decaindo ateacute 04
cmdia na vigeacutesima semana
0
50
100
150
1s 3s 5s 7s 9s 11s 13s 15s 17s 19s
Alt
ura
em
cm
Crescimento meacutedio de Artemisia annua em vasos em casa de vegataccedilatildeo durante 20 semanas
(s)
Figura 1 ndash Crescimento meacutedio de A annua em vasos em casa-de-vegetaccedilatildeo durante 20 semanas (s) ndash Observa-se que a altura das plantas aumentou
notavelmente a partir da quinta semana apoacutes o transplante correspondendo ao primeiro pico de crescimento
12
Os picos de crescimento de A annua submetida ao cultivo em vasos em
casa-de-vegetaccedilatildeo podem ser explicados pelas interferecircncias do pesquisador que
visava maximizar o desenvolvimento das plantas O primeiro pico pode ser
atribuiacutedo ao padratildeo de crescimento da planta Por ocasiatildeo da primeira troca de
vasos quando a planta ganhou 2145 de volume de substrato para explorar
teria havido o segundo pico por volta da deacutecima segunda semana O terceiro pico
se deu em consequecircncia da segunda suplementaccedilatildeo de substrato ocorrida por
volta da deacutecima seacutetima semana
O aproveitamento da segunda suplementaccedilatildeo foi efetivo tendo as plantas
explorado o volume de substrato adicional em sua totalidade ocupando-o por
inteiro o volume (Figura 6)
Eacute consenso entre pesquisadores que as plantas crescidas em vasos nunca
alcanccedilam seu potencial maior conforme imagens de suas raiacutezes mostram Uma
teacutecnica meacutedica da imagem chamada a imagem de ressonacircncia magneacutetico (MRI)
foi usada por investigadores para capturar instantacircneos da raiz da planta no vaso
As figuras obtidas revelam que as raiacutezes ldquodetectam o tamanho do vasordquo e emitem
um sinal que resulta na restriccedilatildeo o crescimento da planta (POORTER et al 2012)
Poorter et al (2012) esclarecem que a maioria das experiecircncias em
biologia de plantas usa plantas crescidas em algum tipo de recipiente ou vaso
Uma meta-anaacutelise em 65 estudos que analisaram o efeito do tamanho do vaso no
0
05
1
15
2
25
1s 3s 5s 7s 9s 11s 13s 15s 17s 19s
Ce
ntiacute
met
ros
po
r d
ia
Evoluccedilatildeo da taxa meacutedia diaacuteria de crescimento de Artemisia annua em casa de vegetaccedilatildeo por
20 semanas
Figura 2 ndash Evoluccedilatildeo da taxa diaacuteria de cresimento de A annua em casa de vegetaccedilatildeo por 20 semanas (s)
13
crescimento e em variaacuteveis afins foi conduzida e verificou que em meacutedia dobrar o
tamanho do vaso aumentou a produccedilatildeo da biomassa da planta em 43 Uma
anaacutelise adicional de efeitos do tamanho do vaso nos componentes afins do
crescimento sugere que o crescimento reduzido em vasos menores eacute causado
principalmente por uma reduccedilatildeo na fotossiacutentese por aacuterea da folha da unidade
mais do que por mudanccedilas na morfologia da folha ou no alocamento de
biomassa O tamanho apropriado do vaso dependeraacute logicamente do tamanho
das plantas que crescem neles Baseado em vaacuterias linhas da evidecircncia noacutes
sugerimos que um tamanho apropriado do vaso eacute um no qual a biomassa da
planta natildeo exceda 1 g L-1 Na praacutetica atual da pesquisa 65 das experiecircncias
excedem essa referecircncia Noacutes sugerimos que os investigadores devam
considerar com cuidado o tamanho do vaso em suas experiecircncias porque os
vasos pequenos podem mudar resultados experimentais e sabotar a finalidade da
experiecircncia
No presente ensaio de vasos foi obtido uma massa seca da parte aeacuterea
meacutedia de 2995g com um coeficiente de variaccedilatildeo de 3001 com uma planta por
vaso com dois transplantes para ganho de volume de solo a ser explorado O
corte das plantas se deu com 80 dias apoacutes o transplante
Quiteacuterio (2006) tambeacutem em ensaio de vasos obteve a meacutedia 25g de massa
seca de A annua em ensaio de vasos com duas plantas onde a colheita foi feita
75 dias apoacutes a semeadura no preacute-florescimento Os dois resultados apresentam
coerecircncia entre si
O ataque de cochonilhas observado era esperado como um reflexo natural
do estresse das plantas que satildeo submetidas ao cultivo em vaso em casa-de-
vegetaccedilatildeo
14
CONCLUSAtildeO
Nas condiccedilotildees do presente ensaio concluiu-se que o cultivo de Artemisia annua
em vasos e em casa-de-vegetaccedilatildeo eacute viaacutevel e pode ser notavelmente expressivo
com porte superior a 15m de altura e massa seca da parte aeacuterea meacutedia em torno
de 30g
Numa etapa posterior visualizam-se os ensaios objetivando a geraccedilatildeo de uma
tecnologia de produccedilatildeo tendo como alvo a produtividade em artesinina-A que eacute o
componente ativo contra malaacuteria
15
REFEREcircNCIAS BIBLIOGRAacuteFICAS
CONCEICcedilAtildeO DM RABONATO A C MAGALHAtildeES P M PEREIRA B
Germinaccedilatildeo de Artemisia annua L cultivar Silves
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CUMMING JN PLOYPRADITH P POSNER GH Antimalarial activity of
artemisinin (qinghaosu) and related trioxanes mechanism(s) of actionAdv
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de Campinas Brasil 1997
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Universidade de Campinas Instituto de Quiacutemica Tese de doutorado 1996 99 fls
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2013)
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annua L of different growth stages cultivated in Iran African Journal of Plant
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of Artemisia annua L as a locally produced remedy for malaria in the tropics
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components and artemisinina content of Artemisia annua L Industrial Crops
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JA Pot size matters a meta-analysis of the effects of rooting volume on plant
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POSNER G H amp OrsquoNEIL P M Knowledge of the Proposed Chemical
Mechanism of Action and Cytochrome P450 Metabolism of Antimalarial Trioxanes
Like Artemisinin Allows Rational Design of New Antimalarial Peroxides Acc
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micorriza arbuscular Campinas 2006 38f
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after oral intake of a traditional preparation of Artemisia annua L (annual
wormwood) Am J Trop Med Hyg 70 (2) 128ndash32 2004
RODRIGUES R A F FOGLIO M A BOAVENTURA JR S SANTOS A S
REHDER V L G Otimizaccedilatildeo do processo de extraccedilatildeo e isolamento do anti-
malaacuterico artemisinina A a partir de Artemisia annua LQuim Nova 29 368
2006
SANTOS JO Siacutentese e avaliaccedilatildeo da atividade herbicida de lactonas
sesquiterpecircnicas UFVAGROQUIacuteMICA Tese de Mestrado 2009 100 p
WANG ML JIANG YS WEI JQ WEI X QI XX JIANG SY WANG ZM
Effects of irradiance on growth photosynthetic characteristics and artemisinin
content of Artemisia annua L Photosynthetica vol 46 no1 pp 17-20 2008
WOERDENBAG HJ PRAS N CHAN N G BANG B T BOS R UDEN
W VAN Y P BOI N V BATTERMAN S LUGT C B Artemisinin Related
Sesquiterpenes and Essential Oil inArtemisia annua During a Vegetation Period
in Vietnam Planta Med v60 n3p 272-275 1994
17
DOCUMENTAacuteRIO FOTOGRAacuteFICO
Foto 1 ndash Mudas na sementeira prontas para transplante - Foto da autora Nayara Carvalho
Foto 2 ndash Mudas de Artemisia annua no dia do transplante ndash Foto da autora Nayara
Carvalho
18
Foto 3 ndash Aspecto geral do ensaio ndash Foto da autora Nayara Carvalho
Foto 4 ndash Suplementaccedilatildeo de substrato ndash Foto do orientador Jean Kleber
19
Foto 5 ndash Aproveitamento pela planta di suplemento de substrato ndash Foto do orientador Jean Kleber
Foto 6 ndash A planta mais alta ao final do ensaio ndash Foto do orientador Jean Kleber
20
Foto 8 ndash Ataque de colchonilhas em A annua ndash Foto da autora Nayara Carvalho
Foto 7 ndash A planta mais baixa ao final do ensaio
10
A partida de sementes de Aannua foi doada pelo pesquisador Pedro
Melillo Magalhatildees oriundas do CPQBA ndash UNICAMP e produzidas em campo da
proacutepria estaccedilatildeo e utilizadas para a semeadura em sementeiras tipo caixa
contendo a mistura EEB (Estaccedilatildeo Experimental de Biologia) com a seguinte
composiccedilatildeo Latossolo vermelho de cerrado areia vermiculita e composto
orgacircnico na proporccedilatildeo 3311 respectivamente mais a formulaccedilatildeo 4-14-8 na
dose de 100g para 40L da mistura Apoacutes 42 dias da semeadura foram
selecionadas 20 mudas que estavam no ponto de transplante (meacutedia de 15 cm
de altura) Dessa forma foram transplantadas para vasos com capacidade para
25L preenchidos com a mistura EEB
Apoacutes o transplante a altura da parte aeacuterea de todas as plantas foi aferida
semanalmente com o uso de uma trena com o objetivo de desenhar-se a curva
de crescimento As mediccedilotildees tiveram iniacutecio uma semana apoacutes o transplante no
dia 14 de maio
No dia 26 de julho de 201349 dias apoacutes o transplante as plantas foram
transferidas dos vasos de 25L para vasos com maior capacidade (325L) para
favorecer o seu crescimento e desenvolvimento e no dia 17 de setembro102 dias
apoacutes o transplante foi feita uma suplementaccedilatildeo de terra para as 20 plantas com o
mesmo objetivo mediante a colocaccedilatildeo por baixo de um outro vaso de mesmo
tamanho contendo metade de seu volume em Substrato EEB Isso permitiu que
as raiacutezes crescessem no volume adicional de mistura atraveacutes dos furos de
drenagem do vaso original
O controle de plantas daninhas foi feito manualmente e o controle
fitossanitaacuterio atraveacutes de acompanhamento e sucessivas observaccedilotildees Ao fim do
ensaio foi observada uma pequena infestaccedilatildeo com cochonilhas As cochonilhas
foram identificadas por Pseudococcus citri Risso ndash mais conhecida por
ldquocochonilha algodatildeordquo Foi parcialmente controlada em curto prazo com uma
pulverizaccedilatildeo manual de soluccedilatildeo de detergente (10 ml 1 litro de aacutegua)
Ao fim do ensaio dia 18 de outubro foram obtidas as massas fresca e
seca das plantas bem como os coeficientes de variaccedilatildeo dos dados
11
RESUTADOS E DISCUSSAtildeO
Os resultados do presente ensaio encontram-se representados nas Figuras
4 e 5 as quais representam respectivamente a curva de crescimento de Aannua
em vinte semana (s) em casa-de-vegetaccedilatildeo e a evoluccedilatildeo da taxa meacutedia diaacuteria de
crescimento
Observando-se a Figura 2 que apresenta a evoluccedilatildeo da taxa meacutedia de
crescimento verificou-se que entre a quinta e a setima semanas a taxa meacutedia
diaacuteria de crescimento cresceu de 08 cm ao dia para em torno de 20 cm por dia
tendo havido um decrescimo e um estabilidade entre a oitava e a deacutecima segunda
semanas quando entatildeo ocorreu o segundo pico passando a taxa meacutedia diaacuteria de
crescimento de 12 cm para 18 cm seguindo-se um decrescimo ateacute 05 cmdia
nas deacutecima sexta e deacutecima seacutetimas semanas quando entatildeo houve o terceiro
pico na deacutecima oitava semana atingindo 08cmdia e novamente decaindo ateacute 04
cmdia na vigeacutesima semana
0
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1s 3s 5s 7s 9s 11s 13s 15s 17s 19s
Alt
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cm
Crescimento meacutedio de Artemisia annua em vasos em casa de vegataccedilatildeo durante 20 semanas
(s)
Figura 1 ndash Crescimento meacutedio de A annua em vasos em casa-de-vegetaccedilatildeo durante 20 semanas (s) ndash Observa-se que a altura das plantas aumentou
notavelmente a partir da quinta semana apoacutes o transplante correspondendo ao primeiro pico de crescimento
12
Os picos de crescimento de A annua submetida ao cultivo em vasos em
casa-de-vegetaccedilatildeo podem ser explicados pelas interferecircncias do pesquisador que
visava maximizar o desenvolvimento das plantas O primeiro pico pode ser
atribuiacutedo ao padratildeo de crescimento da planta Por ocasiatildeo da primeira troca de
vasos quando a planta ganhou 2145 de volume de substrato para explorar
teria havido o segundo pico por volta da deacutecima segunda semana O terceiro pico
se deu em consequecircncia da segunda suplementaccedilatildeo de substrato ocorrida por
volta da deacutecima seacutetima semana
O aproveitamento da segunda suplementaccedilatildeo foi efetivo tendo as plantas
explorado o volume de substrato adicional em sua totalidade ocupando-o por
inteiro o volume (Figura 6)
Eacute consenso entre pesquisadores que as plantas crescidas em vasos nunca
alcanccedilam seu potencial maior conforme imagens de suas raiacutezes mostram Uma
teacutecnica meacutedica da imagem chamada a imagem de ressonacircncia magneacutetico (MRI)
foi usada por investigadores para capturar instantacircneos da raiz da planta no vaso
As figuras obtidas revelam que as raiacutezes ldquodetectam o tamanho do vasordquo e emitem
um sinal que resulta na restriccedilatildeo o crescimento da planta (POORTER et al 2012)
Poorter et al (2012) esclarecem que a maioria das experiecircncias em
biologia de plantas usa plantas crescidas em algum tipo de recipiente ou vaso
Uma meta-anaacutelise em 65 estudos que analisaram o efeito do tamanho do vaso no
0
05
1
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1s 3s 5s 7s 9s 11s 13s 15s 17s 19s
Ce
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r d
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Evoluccedilatildeo da taxa meacutedia diaacuteria de crescimento de Artemisia annua em casa de vegetaccedilatildeo por
20 semanas
Figura 2 ndash Evoluccedilatildeo da taxa diaacuteria de cresimento de A annua em casa de vegetaccedilatildeo por 20 semanas (s)
13
crescimento e em variaacuteveis afins foi conduzida e verificou que em meacutedia dobrar o
tamanho do vaso aumentou a produccedilatildeo da biomassa da planta em 43 Uma
anaacutelise adicional de efeitos do tamanho do vaso nos componentes afins do
crescimento sugere que o crescimento reduzido em vasos menores eacute causado
principalmente por uma reduccedilatildeo na fotossiacutentese por aacuterea da folha da unidade
mais do que por mudanccedilas na morfologia da folha ou no alocamento de
biomassa O tamanho apropriado do vaso dependeraacute logicamente do tamanho
das plantas que crescem neles Baseado em vaacuterias linhas da evidecircncia noacutes
sugerimos que um tamanho apropriado do vaso eacute um no qual a biomassa da
planta natildeo exceda 1 g L-1 Na praacutetica atual da pesquisa 65 das experiecircncias
excedem essa referecircncia Noacutes sugerimos que os investigadores devam
considerar com cuidado o tamanho do vaso em suas experiecircncias porque os
vasos pequenos podem mudar resultados experimentais e sabotar a finalidade da
experiecircncia
No presente ensaio de vasos foi obtido uma massa seca da parte aeacuterea
meacutedia de 2995g com um coeficiente de variaccedilatildeo de 3001 com uma planta por
vaso com dois transplantes para ganho de volume de solo a ser explorado O
corte das plantas se deu com 80 dias apoacutes o transplante
Quiteacuterio (2006) tambeacutem em ensaio de vasos obteve a meacutedia 25g de massa
seca de A annua em ensaio de vasos com duas plantas onde a colheita foi feita
75 dias apoacutes a semeadura no preacute-florescimento Os dois resultados apresentam
coerecircncia entre si
O ataque de cochonilhas observado era esperado como um reflexo natural
do estresse das plantas que satildeo submetidas ao cultivo em vaso em casa-de-
vegetaccedilatildeo
14
CONCLUSAtildeO
Nas condiccedilotildees do presente ensaio concluiu-se que o cultivo de Artemisia annua
em vasos e em casa-de-vegetaccedilatildeo eacute viaacutevel e pode ser notavelmente expressivo
com porte superior a 15m de altura e massa seca da parte aeacuterea meacutedia em torno
de 30g
Numa etapa posterior visualizam-se os ensaios objetivando a geraccedilatildeo de uma
tecnologia de produccedilatildeo tendo como alvo a produtividade em artesinina-A que eacute o
componente ativo contra malaacuteria
15
REFEREcircNCIAS BIBLIOGRAacuteFICAS
CONCEICcedilAtildeO DM RABONATO A C MAGALHAtildeES P M PEREIRA B
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httpwwwkeworgplants-fungiArtemisia-annuahtm Acesso em 2013
KUMAR S GUPTA SK SINGH P BAJPAI P GUPTA MM SINGH D
GUPTA AK RAM G SHASANY AK SHARMA S High yields of artemisinin
by multi-harvest of Artemisia annuacrops Industrial Crops and Products v19 n
1 p 77ndash90 2004
LIERSCH R SOICKE H STEHR C TUumlLLNER H-U Formation of
Artemisinin in Artemisia annua During One Vegetation Period Planta Med v52
n5 p 387-390 1986
MAGALHAtildeES P DELABYS N SATORATTO A New hybrid lines of the
antimalarial species Artemisia annua L guarantee its growth in Brazil Ciecircnc cult
(Saumlo Paulo) v 49v56 p 413-415 1997
MALARIA UPDATE Focus on Ethiopia April 2005UN-OCHA website (acesso
2013)
MOHAMMADREZA V Variation in the essential oil composition of Artemisia
annua L of different growth stages cultivated in Iran African Journal of Plant
Science v 2 (2) pp 016-018 February 2008
MUELLER MS KARHAGOMBA IB HIRT HM WEMAKOR E The potential
of Artemisia annua L as a locally produced remedy for malaria in the tropics
16
agricultural chemical and clinical aspects JEthnopharmacology v73 n3 p
487-493 2000
MUELLER MS RUNYAMBO WI et al Randomized controlled trial of a
traditional preparation of Artemisia annua L (Annual Wormwood) in the treatment
of malaria Trans R Soc Trop Med Hyg 98(5) 318ndash21 2004
OZGUVEN M SENER B OTHAN I SEKEROGLI N KIRPIK M KARTAL
M PESIN I amp KAYA Z Effects of varying nitrogen doses on yield yield
components and artemisinina content of Artemisia annua L Industrial Crops
and Products v 27 n1 p 60-64 2008
POORTERH BUumlHLERJ VAN DUSSCHOTEN D CLIMENT J amp POSTMA
JA Pot size matters a meta-analysis of the effects of rooting volume on plant
growthFunctional Plant Biology 39(11) 839-8502012
POSNER G H amp OrsquoNEIL P M Knowledge of the Proposed Chemical
Mechanism of Action and Cytochrome P450 Metabolism of Antimalarial Trioxanes
Like Artemisinin Allows Rational Design of New Antimalarial Peroxides Acc
Chem Res 37 (6) 397ndash404 2004
QUITEacuteRIO G C M Produccedilatildeo de Artemisia annua L sob influecircncia de
micorriza arbuscular Campinas 2006 38f
RAumlTH K TAXIS K WALZ GH et al Pharmacokinetic study of artemisinin
after oral intake of a traditional preparation of Artemisia annua L (annual
wormwood) Am J Trop Med Hyg 70 (2) 128ndash32 2004
RODRIGUES R A F FOGLIO M A BOAVENTURA JR S SANTOS A S
REHDER V L G Otimizaccedilatildeo do processo de extraccedilatildeo e isolamento do anti-
malaacuterico artemisinina A a partir de Artemisia annua LQuim Nova 29 368
2006
SANTOS JO Siacutentese e avaliaccedilatildeo da atividade herbicida de lactonas
sesquiterpecircnicas UFVAGROQUIacuteMICA Tese de Mestrado 2009 100 p
WANG ML JIANG YS WEI JQ WEI X QI XX JIANG SY WANG ZM
Effects of irradiance on growth photosynthetic characteristics and artemisinin
content of Artemisia annua L Photosynthetica vol 46 no1 pp 17-20 2008
WOERDENBAG HJ PRAS N CHAN N G BANG B T BOS R UDEN
W VAN Y P BOI N V BATTERMAN S LUGT C B Artemisinin Related
Sesquiterpenes and Essential Oil inArtemisia annua During a Vegetation Period
in Vietnam Planta Med v60 n3p 272-275 1994
17
DOCUMENTAacuteRIO FOTOGRAacuteFICO
Foto 1 ndash Mudas na sementeira prontas para transplante - Foto da autora Nayara Carvalho
Foto 2 ndash Mudas de Artemisia annua no dia do transplante ndash Foto da autora Nayara
Carvalho
18
Foto 3 ndash Aspecto geral do ensaio ndash Foto da autora Nayara Carvalho
Foto 4 ndash Suplementaccedilatildeo de substrato ndash Foto do orientador Jean Kleber
19
Foto 5 ndash Aproveitamento pela planta di suplemento de substrato ndash Foto do orientador Jean Kleber
Foto 6 ndash A planta mais alta ao final do ensaio ndash Foto do orientador Jean Kleber
20
Foto 8 ndash Ataque de colchonilhas em A annua ndash Foto da autora Nayara Carvalho
Foto 7 ndash A planta mais baixa ao final do ensaio
11
RESUTADOS E DISCUSSAtildeO
Os resultados do presente ensaio encontram-se representados nas Figuras
4 e 5 as quais representam respectivamente a curva de crescimento de Aannua
em vinte semana (s) em casa-de-vegetaccedilatildeo e a evoluccedilatildeo da taxa meacutedia diaacuteria de
crescimento
Observando-se a Figura 2 que apresenta a evoluccedilatildeo da taxa meacutedia de
crescimento verificou-se que entre a quinta e a setima semanas a taxa meacutedia
diaacuteria de crescimento cresceu de 08 cm ao dia para em torno de 20 cm por dia
tendo havido um decrescimo e um estabilidade entre a oitava e a deacutecima segunda
semanas quando entatildeo ocorreu o segundo pico passando a taxa meacutedia diaacuteria de
crescimento de 12 cm para 18 cm seguindo-se um decrescimo ateacute 05 cmdia
nas deacutecima sexta e deacutecima seacutetimas semanas quando entatildeo houve o terceiro
pico na deacutecima oitava semana atingindo 08cmdia e novamente decaindo ateacute 04
cmdia na vigeacutesima semana
0
50
100
150
1s 3s 5s 7s 9s 11s 13s 15s 17s 19s
Alt
ura
em
cm
Crescimento meacutedio de Artemisia annua em vasos em casa de vegataccedilatildeo durante 20 semanas
(s)
Figura 1 ndash Crescimento meacutedio de A annua em vasos em casa-de-vegetaccedilatildeo durante 20 semanas (s) ndash Observa-se que a altura das plantas aumentou
notavelmente a partir da quinta semana apoacutes o transplante correspondendo ao primeiro pico de crescimento
12
Os picos de crescimento de A annua submetida ao cultivo em vasos em
casa-de-vegetaccedilatildeo podem ser explicados pelas interferecircncias do pesquisador que
visava maximizar o desenvolvimento das plantas O primeiro pico pode ser
atribuiacutedo ao padratildeo de crescimento da planta Por ocasiatildeo da primeira troca de
vasos quando a planta ganhou 2145 de volume de substrato para explorar
teria havido o segundo pico por volta da deacutecima segunda semana O terceiro pico
se deu em consequecircncia da segunda suplementaccedilatildeo de substrato ocorrida por
volta da deacutecima seacutetima semana
O aproveitamento da segunda suplementaccedilatildeo foi efetivo tendo as plantas
explorado o volume de substrato adicional em sua totalidade ocupando-o por
inteiro o volume (Figura 6)
Eacute consenso entre pesquisadores que as plantas crescidas em vasos nunca
alcanccedilam seu potencial maior conforme imagens de suas raiacutezes mostram Uma
teacutecnica meacutedica da imagem chamada a imagem de ressonacircncia magneacutetico (MRI)
foi usada por investigadores para capturar instantacircneos da raiz da planta no vaso
As figuras obtidas revelam que as raiacutezes ldquodetectam o tamanho do vasordquo e emitem
um sinal que resulta na restriccedilatildeo o crescimento da planta (POORTER et al 2012)
Poorter et al (2012) esclarecem que a maioria das experiecircncias em
biologia de plantas usa plantas crescidas em algum tipo de recipiente ou vaso
Uma meta-anaacutelise em 65 estudos que analisaram o efeito do tamanho do vaso no
0
05
1
15
2
25
1s 3s 5s 7s 9s 11s 13s 15s 17s 19s
Ce
ntiacute
met
ros
po
r d
ia
Evoluccedilatildeo da taxa meacutedia diaacuteria de crescimento de Artemisia annua em casa de vegetaccedilatildeo por
20 semanas
Figura 2 ndash Evoluccedilatildeo da taxa diaacuteria de cresimento de A annua em casa de vegetaccedilatildeo por 20 semanas (s)
13
crescimento e em variaacuteveis afins foi conduzida e verificou que em meacutedia dobrar o
tamanho do vaso aumentou a produccedilatildeo da biomassa da planta em 43 Uma
anaacutelise adicional de efeitos do tamanho do vaso nos componentes afins do
crescimento sugere que o crescimento reduzido em vasos menores eacute causado
principalmente por uma reduccedilatildeo na fotossiacutentese por aacuterea da folha da unidade
mais do que por mudanccedilas na morfologia da folha ou no alocamento de
biomassa O tamanho apropriado do vaso dependeraacute logicamente do tamanho
das plantas que crescem neles Baseado em vaacuterias linhas da evidecircncia noacutes
sugerimos que um tamanho apropriado do vaso eacute um no qual a biomassa da
planta natildeo exceda 1 g L-1 Na praacutetica atual da pesquisa 65 das experiecircncias
excedem essa referecircncia Noacutes sugerimos que os investigadores devam
considerar com cuidado o tamanho do vaso em suas experiecircncias porque os
vasos pequenos podem mudar resultados experimentais e sabotar a finalidade da
experiecircncia
No presente ensaio de vasos foi obtido uma massa seca da parte aeacuterea
meacutedia de 2995g com um coeficiente de variaccedilatildeo de 3001 com uma planta por
vaso com dois transplantes para ganho de volume de solo a ser explorado O
corte das plantas se deu com 80 dias apoacutes o transplante
Quiteacuterio (2006) tambeacutem em ensaio de vasos obteve a meacutedia 25g de massa
seca de A annua em ensaio de vasos com duas plantas onde a colheita foi feita
75 dias apoacutes a semeadura no preacute-florescimento Os dois resultados apresentam
coerecircncia entre si
O ataque de cochonilhas observado era esperado como um reflexo natural
do estresse das plantas que satildeo submetidas ao cultivo em vaso em casa-de-
vegetaccedilatildeo
14
CONCLUSAtildeO
Nas condiccedilotildees do presente ensaio concluiu-se que o cultivo de Artemisia annua
em vasos e em casa-de-vegetaccedilatildeo eacute viaacutevel e pode ser notavelmente expressivo
com porte superior a 15m de altura e massa seca da parte aeacuterea meacutedia em torno
de 30g
Numa etapa posterior visualizam-se os ensaios objetivando a geraccedilatildeo de uma
tecnologia de produccedilatildeo tendo como alvo a produtividade em artesinina-A que eacute o
componente ativo contra malaacuteria
15
REFEREcircNCIAS BIBLIOGRAacuteFICAS
CONCEICcedilAtildeO DM RABONATO A C MAGALHAtildeES P M PEREIRA B
Germinaccedilatildeo de Artemisia annua L cultivar Silves
httpwwwportaldahorticulturaxpgcombrgermartemhtml Acesso 2013
CUMMING JN PLOYPRADITH P POSNER GH Antimalarial activity of
artemisinin (qinghaosu) and related trioxanes mechanism(s) of actionAdv
Pharmacol 37 253ndash971997
DIAS C P Artemisia annua Dissertaccedilatildeo de Mestrado Universidade Estadual
de Campinas Brasil 1997
FOGLIO MA Um estudo quimico da Artemisia annua L aclimatada no Brasil
Universidade de Campinas Instituto de Quiacutemica Tese de doutorado 1996 99 fls
JANSEN FHThe herbal tea approach for artemesinin as a therapy for
malaria Trans R Soc Trop Med Hyg 100 (3) 285ndash6 2006
KEW-ROYAL BOTANIC GARDENS Artemisia annua (sweet wormwood)
httpwwwkeworgplants-fungiArtemisia-annuahtm Acesso em 2013
KUMAR S GUPTA SK SINGH P BAJPAI P GUPTA MM SINGH D
GUPTA AK RAM G SHASANY AK SHARMA S High yields of artemisinin
by multi-harvest of Artemisia annuacrops Industrial Crops and Products v19 n
1 p 77ndash90 2004
LIERSCH R SOICKE H STEHR C TUumlLLNER H-U Formation of
Artemisinin in Artemisia annua During One Vegetation Period Planta Med v52
n5 p 387-390 1986
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antimalarial species Artemisia annua L guarantee its growth in Brazil Ciecircnc cult
(Saumlo Paulo) v 49v56 p 413-415 1997
MALARIA UPDATE Focus on Ethiopia April 2005UN-OCHA website (acesso
2013)
MOHAMMADREZA V Variation in the essential oil composition of Artemisia
annua L of different growth stages cultivated in Iran African Journal of Plant
Science v 2 (2) pp 016-018 February 2008
MUELLER MS KARHAGOMBA IB HIRT HM WEMAKOR E The potential
of Artemisia annua L as a locally produced remedy for malaria in the tropics
16
agricultural chemical and clinical aspects JEthnopharmacology v73 n3 p
487-493 2000
MUELLER MS RUNYAMBO WI et al Randomized controlled trial of a
traditional preparation of Artemisia annua L (Annual Wormwood) in the treatment
of malaria Trans R Soc Trop Med Hyg 98(5) 318ndash21 2004
OZGUVEN M SENER B OTHAN I SEKEROGLI N KIRPIK M KARTAL
M PESIN I amp KAYA Z Effects of varying nitrogen doses on yield yield
components and artemisinina content of Artemisia annua L Industrial Crops
and Products v 27 n1 p 60-64 2008
POORTERH BUumlHLERJ VAN DUSSCHOTEN D CLIMENT J amp POSTMA
JA Pot size matters a meta-analysis of the effects of rooting volume on plant
growthFunctional Plant Biology 39(11) 839-8502012
POSNER G H amp OrsquoNEIL P M Knowledge of the Proposed Chemical
Mechanism of Action and Cytochrome P450 Metabolism of Antimalarial Trioxanes
Like Artemisinin Allows Rational Design of New Antimalarial Peroxides Acc
Chem Res 37 (6) 397ndash404 2004
QUITEacuteRIO G C M Produccedilatildeo de Artemisia annua L sob influecircncia de
micorriza arbuscular Campinas 2006 38f
RAumlTH K TAXIS K WALZ GH et al Pharmacokinetic study of artemisinin
after oral intake of a traditional preparation of Artemisia annua L (annual
wormwood) Am J Trop Med Hyg 70 (2) 128ndash32 2004
RODRIGUES R A F FOGLIO M A BOAVENTURA JR S SANTOS A S
REHDER V L G Otimizaccedilatildeo do processo de extraccedilatildeo e isolamento do anti-
malaacuterico artemisinina A a partir de Artemisia annua LQuim Nova 29 368
2006
SANTOS JO Siacutentese e avaliaccedilatildeo da atividade herbicida de lactonas
sesquiterpecircnicas UFVAGROQUIacuteMICA Tese de Mestrado 2009 100 p
WANG ML JIANG YS WEI JQ WEI X QI XX JIANG SY WANG ZM
Effects of irradiance on growth photosynthetic characteristics and artemisinin
content of Artemisia annua L Photosynthetica vol 46 no1 pp 17-20 2008
WOERDENBAG HJ PRAS N CHAN N G BANG B T BOS R UDEN
W VAN Y P BOI N V BATTERMAN S LUGT C B Artemisinin Related
Sesquiterpenes and Essential Oil inArtemisia annua During a Vegetation Period
in Vietnam Planta Med v60 n3p 272-275 1994
17
DOCUMENTAacuteRIO FOTOGRAacuteFICO
Foto 1 ndash Mudas na sementeira prontas para transplante - Foto da autora Nayara Carvalho
Foto 2 ndash Mudas de Artemisia annua no dia do transplante ndash Foto da autora Nayara
Carvalho
18
Foto 3 ndash Aspecto geral do ensaio ndash Foto da autora Nayara Carvalho
Foto 4 ndash Suplementaccedilatildeo de substrato ndash Foto do orientador Jean Kleber
19
Foto 5 ndash Aproveitamento pela planta di suplemento de substrato ndash Foto do orientador Jean Kleber
Foto 6 ndash A planta mais alta ao final do ensaio ndash Foto do orientador Jean Kleber
20
Foto 8 ndash Ataque de colchonilhas em A annua ndash Foto da autora Nayara Carvalho
Foto 7 ndash A planta mais baixa ao final do ensaio
12
Os picos de crescimento de A annua submetida ao cultivo em vasos em
casa-de-vegetaccedilatildeo podem ser explicados pelas interferecircncias do pesquisador que
visava maximizar o desenvolvimento das plantas O primeiro pico pode ser
atribuiacutedo ao padratildeo de crescimento da planta Por ocasiatildeo da primeira troca de
vasos quando a planta ganhou 2145 de volume de substrato para explorar
teria havido o segundo pico por volta da deacutecima segunda semana O terceiro pico
se deu em consequecircncia da segunda suplementaccedilatildeo de substrato ocorrida por
volta da deacutecima seacutetima semana
O aproveitamento da segunda suplementaccedilatildeo foi efetivo tendo as plantas
explorado o volume de substrato adicional em sua totalidade ocupando-o por
inteiro o volume (Figura 6)
Eacute consenso entre pesquisadores que as plantas crescidas em vasos nunca
alcanccedilam seu potencial maior conforme imagens de suas raiacutezes mostram Uma
teacutecnica meacutedica da imagem chamada a imagem de ressonacircncia magneacutetico (MRI)
foi usada por investigadores para capturar instantacircneos da raiz da planta no vaso
As figuras obtidas revelam que as raiacutezes ldquodetectam o tamanho do vasordquo e emitem
um sinal que resulta na restriccedilatildeo o crescimento da planta (POORTER et al 2012)
Poorter et al (2012) esclarecem que a maioria das experiecircncias em
biologia de plantas usa plantas crescidas em algum tipo de recipiente ou vaso
Uma meta-anaacutelise em 65 estudos que analisaram o efeito do tamanho do vaso no
0
05
1
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1s 3s 5s 7s 9s 11s 13s 15s 17s 19s
Ce
ntiacute
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Evoluccedilatildeo da taxa meacutedia diaacuteria de crescimento de Artemisia annua em casa de vegetaccedilatildeo por
20 semanas
Figura 2 ndash Evoluccedilatildeo da taxa diaacuteria de cresimento de A annua em casa de vegetaccedilatildeo por 20 semanas (s)
13
crescimento e em variaacuteveis afins foi conduzida e verificou que em meacutedia dobrar o
tamanho do vaso aumentou a produccedilatildeo da biomassa da planta em 43 Uma
anaacutelise adicional de efeitos do tamanho do vaso nos componentes afins do
crescimento sugere que o crescimento reduzido em vasos menores eacute causado
principalmente por uma reduccedilatildeo na fotossiacutentese por aacuterea da folha da unidade
mais do que por mudanccedilas na morfologia da folha ou no alocamento de
biomassa O tamanho apropriado do vaso dependeraacute logicamente do tamanho
das plantas que crescem neles Baseado em vaacuterias linhas da evidecircncia noacutes
sugerimos que um tamanho apropriado do vaso eacute um no qual a biomassa da
planta natildeo exceda 1 g L-1 Na praacutetica atual da pesquisa 65 das experiecircncias
excedem essa referecircncia Noacutes sugerimos que os investigadores devam
considerar com cuidado o tamanho do vaso em suas experiecircncias porque os
vasos pequenos podem mudar resultados experimentais e sabotar a finalidade da
experiecircncia
No presente ensaio de vasos foi obtido uma massa seca da parte aeacuterea
meacutedia de 2995g com um coeficiente de variaccedilatildeo de 3001 com uma planta por
vaso com dois transplantes para ganho de volume de solo a ser explorado O
corte das plantas se deu com 80 dias apoacutes o transplante
Quiteacuterio (2006) tambeacutem em ensaio de vasos obteve a meacutedia 25g de massa
seca de A annua em ensaio de vasos com duas plantas onde a colheita foi feita
75 dias apoacutes a semeadura no preacute-florescimento Os dois resultados apresentam
coerecircncia entre si
O ataque de cochonilhas observado era esperado como um reflexo natural
do estresse das plantas que satildeo submetidas ao cultivo em vaso em casa-de-
vegetaccedilatildeo
14
CONCLUSAtildeO
Nas condiccedilotildees do presente ensaio concluiu-se que o cultivo de Artemisia annua
em vasos e em casa-de-vegetaccedilatildeo eacute viaacutevel e pode ser notavelmente expressivo
com porte superior a 15m de altura e massa seca da parte aeacuterea meacutedia em torno
de 30g
Numa etapa posterior visualizam-se os ensaios objetivando a geraccedilatildeo de uma
tecnologia de produccedilatildeo tendo como alvo a produtividade em artesinina-A que eacute o
componente ativo contra malaacuteria
15
REFEREcircNCIAS BIBLIOGRAacuteFICAS
CONCEICcedilAtildeO DM RABONATO A C MAGALHAtildeES P M PEREIRA B
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CUMMING JN PLOYPRADITH P POSNER GH Antimalarial activity of
artemisinin (qinghaosu) and related trioxanes mechanism(s) of actionAdv
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DIAS C P Artemisia annua Dissertaccedilatildeo de Mestrado Universidade Estadual
de Campinas Brasil 1997
FOGLIO MA Um estudo quimico da Artemisia annua L aclimatada no Brasil
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JANSEN FHThe herbal tea approach for artemesinin as a therapy for
malaria Trans R Soc Trop Med Hyg 100 (3) 285ndash6 2006
KEW-ROYAL BOTANIC GARDENS Artemisia annua (sweet wormwood)
httpwwwkeworgplants-fungiArtemisia-annuahtm Acesso em 2013
KUMAR S GUPTA SK SINGH P BAJPAI P GUPTA MM SINGH D
GUPTA AK RAM G SHASANY AK SHARMA S High yields of artemisinin
by multi-harvest of Artemisia annuacrops Industrial Crops and Products v19 n
1 p 77ndash90 2004
LIERSCH R SOICKE H STEHR C TUumlLLNER H-U Formation of
Artemisinin in Artemisia annua During One Vegetation Period Planta Med v52
n5 p 387-390 1986
MAGALHAtildeES P DELABYS N SATORATTO A New hybrid lines of the
antimalarial species Artemisia annua L guarantee its growth in Brazil Ciecircnc cult
(Saumlo Paulo) v 49v56 p 413-415 1997
MALARIA UPDATE Focus on Ethiopia April 2005UN-OCHA website (acesso
2013)
MOHAMMADREZA V Variation in the essential oil composition of Artemisia
annua L of different growth stages cultivated in Iran African Journal of Plant
Science v 2 (2) pp 016-018 February 2008
MUELLER MS KARHAGOMBA IB HIRT HM WEMAKOR E The potential
of Artemisia annua L as a locally produced remedy for malaria in the tropics
16
agricultural chemical and clinical aspects JEthnopharmacology v73 n3 p
487-493 2000
MUELLER MS RUNYAMBO WI et al Randomized controlled trial of a
traditional preparation of Artemisia annua L (Annual Wormwood) in the treatment
of malaria Trans R Soc Trop Med Hyg 98(5) 318ndash21 2004
OZGUVEN M SENER B OTHAN I SEKEROGLI N KIRPIK M KARTAL
M PESIN I amp KAYA Z Effects of varying nitrogen doses on yield yield
components and artemisinina content of Artemisia annua L Industrial Crops
and Products v 27 n1 p 60-64 2008
POORTERH BUumlHLERJ VAN DUSSCHOTEN D CLIMENT J amp POSTMA
JA Pot size matters a meta-analysis of the effects of rooting volume on plant
growthFunctional Plant Biology 39(11) 839-8502012
POSNER G H amp OrsquoNEIL P M Knowledge of the Proposed Chemical
Mechanism of Action and Cytochrome P450 Metabolism of Antimalarial Trioxanes
Like Artemisinin Allows Rational Design of New Antimalarial Peroxides Acc
Chem Res 37 (6) 397ndash404 2004
QUITEacuteRIO G C M Produccedilatildeo de Artemisia annua L sob influecircncia de
micorriza arbuscular Campinas 2006 38f
RAumlTH K TAXIS K WALZ GH et al Pharmacokinetic study of artemisinin
after oral intake of a traditional preparation of Artemisia annua L (annual
wormwood) Am J Trop Med Hyg 70 (2) 128ndash32 2004
RODRIGUES R A F FOGLIO M A BOAVENTURA JR S SANTOS A S
REHDER V L G Otimizaccedilatildeo do processo de extraccedilatildeo e isolamento do anti-
malaacuterico artemisinina A a partir de Artemisia annua LQuim Nova 29 368
2006
SANTOS JO Siacutentese e avaliaccedilatildeo da atividade herbicida de lactonas
sesquiterpecircnicas UFVAGROQUIacuteMICA Tese de Mestrado 2009 100 p
WANG ML JIANG YS WEI JQ WEI X QI XX JIANG SY WANG ZM
Effects of irradiance on growth photosynthetic characteristics and artemisinin
content of Artemisia annua L Photosynthetica vol 46 no1 pp 17-20 2008
WOERDENBAG HJ PRAS N CHAN N G BANG B T BOS R UDEN
W VAN Y P BOI N V BATTERMAN S LUGT C B Artemisinin Related
Sesquiterpenes and Essential Oil inArtemisia annua During a Vegetation Period
in Vietnam Planta Med v60 n3p 272-275 1994
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DOCUMENTAacuteRIO FOTOGRAacuteFICO
Foto 1 ndash Mudas na sementeira prontas para transplante - Foto da autora Nayara Carvalho
Foto 2 ndash Mudas de Artemisia annua no dia do transplante ndash Foto da autora Nayara
Carvalho
18
Foto 3 ndash Aspecto geral do ensaio ndash Foto da autora Nayara Carvalho
Foto 4 ndash Suplementaccedilatildeo de substrato ndash Foto do orientador Jean Kleber
19
Foto 5 ndash Aproveitamento pela planta di suplemento de substrato ndash Foto do orientador Jean Kleber
Foto 6 ndash A planta mais alta ao final do ensaio ndash Foto do orientador Jean Kleber
20
Foto 8 ndash Ataque de colchonilhas em A annua ndash Foto da autora Nayara Carvalho
Foto 7 ndash A planta mais baixa ao final do ensaio
13
crescimento e em variaacuteveis afins foi conduzida e verificou que em meacutedia dobrar o
tamanho do vaso aumentou a produccedilatildeo da biomassa da planta em 43 Uma
anaacutelise adicional de efeitos do tamanho do vaso nos componentes afins do
crescimento sugere que o crescimento reduzido em vasos menores eacute causado
principalmente por uma reduccedilatildeo na fotossiacutentese por aacuterea da folha da unidade
mais do que por mudanccedilas na morfologia da folha ou no alocamento de
biomassa O tamanho apropriado do vaso dependeraacute logicamente do tamanho
das plantas que crescem neles Baseado em vaacuterias linhas da evidecircncia noacutes
sugerimos que um tamanho apropriado do vaso eacute um no qual a biomassa da
planta natildeo exceda 1 g L-1 Na praacutetica atual da pesquisa 65 das experiecircncias
excedem essa referecircncia Noacutes sugerimos que os investigadores devam
considerar com cuidado o tamanho do vaso em suas experiecircncias porque os
vasos pequenos podem mudar resultados experimentais e sabotar a finalidade da
experiecircncia
No presente ensaio de vasos foi obtido uma massa seca da parte aeacuterea
meacutedia de 2995g com um coeficiente de variaccedilatildeo de 3001 com uma planta por
vaso com dois transplantes para ganho de volume de solo a ser explorado O
corte das plantas se deu com 80 dias apoacutes o transplante
Quiteacuterio (2006) tambeacutem em ensaio de vasos obteve a meacutedia 25g de massa
seca de A annua em ensaio de vasos com duas plantas onde a colheita foi feita
75 dias apoacutes a semeadura no preacute-florescimento Os dois resultados apresentam
coerecircncia entre si
O ataque de cochonilhas observado era esperado como um reflexo natural
do estresse das plantas que satildeo submetidas ao cultivo em vaso em casa-de-
vegetaccedilatildeo
14
CONCLUSAtildeO
Nas condiccedilotildees do presente ensaio concluiu-se que o cultivo de Artemisia annua
em vasos e em casa-de-vegetaccedilatildeo eacute viaacutevel e pode ser notavelmente expressivo
com porte superior a 15m de altura e massa seca da parte aeacuterea meacutedia em torno
de 30g
Numa etapa posterior visualizam-se os ensaios objetivando a geraccedilatildeo de uma
tecnologia de produccedilatildeo tendo como alvo a produtividade em artesinina-A que eacute o
componente ativo contra malaacuteria
15
REFEREcircNCIAS BIBLIOGRAacuteFICAS
CONCEICcedilAtildeO DM RABONATO A C MAGALHAtildeES P M PEREIRA B
Germinaccedilatildeo de Artemisia annua L cultivar Silves
httpwwwportaldahorticulturaxpgcombrgermartemhtml Acesso 2013
CUMMING JN PLOYPRADITH P POSNER GH Antimalarial activity of
artemisinin (qinghaosu) and related trioxanes mechanism(s) of actionAdv
Pharmacol 37 253ndash971997
DIAS C P Artemisia annua Dissertaccedilatildeo de Mestrado Universidade Estadual
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Artemisinin in Artemisia annua During One Vegetation Period Planta Med v52
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(Saumlo Paulo) v 49v56 p 413-415 1997
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2013)
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Science v 2 (2) pp 016-018 February 2008
MUELLER MS KARHAGOMBA IB HIRT HM WEMAKOR E The potential
of Artemisia annua L as a locally produced remedy for malaria in the tropics
16
agricultural chemical and clinical aspects JEthnopharmacology v73 n3 p
487-493 2000
MUELLER MS RUNYAMBO WI et al Randomized controlled trial of a
traditional preparation of Artemisia annua L (Annual Wormwood) in the treatment
of malaria Trans R Soc Trop Med Hyg 98(5) 318ndash21 2004
OZGUVEN M SENER B OTHAN I SEKEROGLI N KIRPIK M KARTAL
M PESIN I amp KAYA Z Effects of varying nitrogen doses on yield yield
components and artemisinina content of Artemisia annua L Industrial Crops
and Products v 27 n1 p 60-64 2008
POORTERH BUumlHLERJ VAN DUSSCHOTEN D CLIMENT J amp POSTMA
JA Pot size matters a meta-analysis of the effects of rooting volume on plant
growthFunctional Plant Biology 39(11) 839-8502012
POSNER G H amp OrsquoNEIL P M Knowledge of the Proposed Chemical
Mechanism of Action and Cytochrome P450 Metabolism of Antimalarial Trioxanes
Like Artemisinin Allows Rational Design of New Antimalarial Peroxides Acc
Chem Res 37 (6) 397ndash404 2004
QUITEacuteRIO G C M Produccedilatildeo de Artemisia annua L sob influecircncia de
micorriza arbuscular Campinas 2006 38f
RAumlTH K TAXIS K WALZ GH et al Pharmacokinetic study of artemisinin
after oral intake of a traditional preparation of Artemisia annua L (annual
wormwood) Am J Trop Med Hyg 70 (2) 128ndash32 2004
RODRIGUES R A F FOGLIO M A BOAVENTURA JR S SANTOS A S
REHDER V L G Otimizaccedilatildeo do processo de extraccedilatildeo e isolamento do anti-
malaacuterico artemisinina A a partir de Artemisia annua LQuim Nova 29 368
2006
SANTOS JO Siacutentese e avaliaccedilatildeo da atividade herbicida de lactonas
sesquiterpecircnicas UFVAGROQUIacuteMICA Tese de Mestrado 2009 100 p
WANG ML JIANG YS WEI JQ WEI X QI XX JIANG SY WANG ZM
Effects of irradiance on growth photosynthetic characteristics and artemisinin
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WOERDENBAG HJ PRAS N CHAN N G BANG B T BOS R UDEN
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Sesquiterpenes and Essential Oil inArtemisia annua During a Vegetation Period
in Vietnam Planta Med v60 n3p 272-275 1994
17
DOCUMENTAacuteRIO FOTOGRAacuteFICO
Foto 1 ndash Mudas na sementeira prontas para transplante - Foto da autora Nayara Carvalho
Foto 2 ndash Mudas de Artemisia annua no dia do transplante ndash Foto da autora Nayara
Carvalho
18
Foto 3 ndash Aspecto geral do ensaio ndash Foto da autora Nayara Carvalho
Foto 4 ndash Suplementaccedilatildeo de substrato ndash Foto do orientador Jean Kleber
19
Foto 5 ndash Aproveitamento pela planta di suplemento de substrato ndash Foto do orientador Jean Kleber
Foto 6 ndash A planta mais alta ao final do ensaio ndash Foto do orientador Jean Kleber
20
Foto 8 ndash Ataque de colchonilhas em A annua ndash Foto da autora Nayara Carvalho
Foto 7 ndash A planta mais baixa ao final do ensaio
14
CONCLUSAtildeO
Nas condiccedilotildees do presente ensaio concluiu-se que o cultivo de Artemisia annua
em vasos e em casa-de-vegetaccedilatildeo eacute viaacutevel e pode ser notavelmente expressivo
com porte superior a 15m de altura e massa seca da parte aeacuterea meacutedia em torno
de 30g
Numa etapa posterior visualizam-se os ensaios objetivando a geraccedilatildeo de uma
tecnologia de produccedilatildeo tendo como alvo a produtividade em artesinina-A que eacute o
componente ativo contra malaacuteria
15
REFEREcircNCIAS BIBLIOGRAacuteFICAS
CONCEICcedilAtildeO DM RABONATO A C MAGALHAtildeES P M PEREIRA B
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DOCUMENTAacuteRIO FOTOGRAacuteFICO
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Foto 2 ndash Mudas de Artemisia annua no dia do transplante ndash Foto da autora Nayara
Carvalho
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Foto 3 ndash Aspecto geral do ensaio ndash Foto da autora Nayara Carvalho
Foto 4 ndash Suplementaccedilatildeo de substrato ndash Foto do orientador Jean Kleber
19
Foto 5 ndash Aproveitamento pela planta di suplemento de substrato ndash Foto do orientador Jean Kleber
Foto 6 ndash A planta mais alta ao final do ensaio ndash Foto do orientador Jean Kleber
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Foto 8 ndash Ataque de colchonilhas em A annua ndash Foto da autora Nayara Carvalho
Foto 7 ndash A planta mais baixa ao final do ensaio
15
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16
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Foto 1 ndash Mudas na sementeira prontas para transplante - Foto da autora Nayara Carvalho
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Carvalho
18
Foto 3 ndash Aspecto geral do ensaio ndash Foto da autora Nayara Carvalho
Foto 4 ndash Suplementaccedilatildeo de substrato ndash Foto do orientador Jean Kleber
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Foto 5 ndash Aproveitamento pela planta di suplemento de substrato ndash Foto do orientador Jean Kleber
Foto 6 ndash A planta mais alta ao final do ensaio ndash Foto do orientador Jean Kleber
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Foto 8 ndash Ataque de colchonilhas em A annua ndash Foto da autora Nayara Carvalho
Foto 7 ndash A planta mais baixa ao final do ensaio
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JA Pot size matters a meta-analysis of the effects of rooting volume on plant
growthFunctional Plant Biology 39(11) 839-8502012
POSNER G H amp OrsquoNEIL P M Knowledge of the Proposed Chemical
Mechanism of Action and Cytochrome P450 Metabolism of Antimalarial Trioxanes
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Chem Res 37 (6) 397ndash404 2004
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micorriza arbuscular Campinas 2006 38f
RAumlTH K TAXIS K WALZ GH et al Pharmacokinetic study of artemisinin
after oral intake of a traditional preparation of Artemisia annua L (annual
wormwood) Am J Trop Med Hyg 70 (2) 128ndash32 2004
RODRIGUES R A F FOGLIO M A BOAVENTURA JR S SANTOS A S
REHDER V L G Otimizaccedilatildeo do processo de extraccedilatildeo e isolamento do anti-
malaacuterico artemisinina A a partir de Artemisia annua LQuim Nova 29 368
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WANG ML JIANG YS WEI JQ WEI X QI XX JIANG SY WANG ZM
Effects of irradiance on growth photosynthetic characteristics and artemisinin
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Foto 2 ndash Mudas de Artemisia annua no dia do transplante ndash Foto da autora Nayara
Carvalho
18
Foto 3 ndash Aspecto geral do ensaio ndash Foto da autora Nayara Carvalho
Foto 4 ndash Suplementaccedilatildeo de substrato ndash Foto do orientador Jean Kleber
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Foto 5 ndash Aproveitamento pela planta di suplemento de substrato ndash Foto do orientador Jean Kleber
Foto 6 ndash A planta mais alta ao final do ensaio ndash Foto do orientador Jean Kleber
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Foto 8 ndash Ataque de colchonilhas em A annua ndash Foto da autora Nayara Carvalho
Foto 7 ndash A planta mais baixa ao final do ensaio
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Carvalho
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Foto 3 ndash Aspecto geral do ensaio ndash Foto da autora Nayara Carvalho
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Foto 5 ndash Aproveitamento pela planta di suplemento de substrato ndash Foto do orientador Jean Kleber
Foto 6 ndash A planta mais alta ao final do ensaio ndash Foto do orientador Jean Kleber
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Foto 8 ndash Ataque de colchonilhas em A annua ndash Foto da autora Nayara Carvalho
Foto 7 ndash A planta mais baixa ao final do ensaio
18
Foto 3 ndash Aspecto geral do ensaio ndash Foto da autora Nayara Carvalho
Foto 4 ndash Suplementaccedilatildeo de substrato ndash Foto do orientador Jean Kleber
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Foto 5 ndash Aproveitamento pela planta di suplemento de substrato ndash Foto do orientador Jean Kleber
Foto 6 ndash A planta mais alta ao final do ensaio ndash Foto do orientador Jean Kleber
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Foto 8 ndash Ataque de colchonilhas em A annua ndash Foto da autora Nayara Carvalho
Foto 7 ndash A planta mais baixa ao final do ensaio
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Foto 5 ndash Aproveitamento pela planta di suplemento de substrato ndash Foto do orientador Jean Kleber
Foto 6 ndash A planta mais alta ao final do ensaio ndash Foto do orientador Jean Kleber
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Foto 8 ndash Ataque de colchonilhas em A annua ndash Foto da autora Nayara Carvalho
Foto 7 ndash A planta mais baixa ao final do ensaio
20
Foto 8 ndash Ataque de colchonilhas em A annua ndash Foto da autora Nayara Carvalho
Foto 7 ndash A planta mais baixa ao final do ensaio