МИНИСТЕРСТВО СЕЛЬСКОГО ХОЗЯЙСТВА РОССИЙСКОЙ

ФЕДЕРАЦИИ

Федеральное государственное образовательное учреждение высшего

профессионального образования

«МОСКОВСКАЯ ГОСУДАРСТВЕННАЯ АКАДЕМИЯ

ВЕТЕРИНАРНОЙ МЕДИЦИНЫ И БИОТЕХНОЛОГИИ ИМЕНИ К.И.

СКРЯБИНА»

На правах рукописи

ХУРАНОВ

АЛАН МУХАДИНОВИЧ

ЦИТОЛОГИЧЕСКАЯ ДИФФЕРЕНЦИАЛЬНАЯ ДИАГНОСТИКА

СОСТОЯНИЯ ОРГАНОВ РАЗМНОЖЕНИЯ У КОРОВ ДО- И ПОСЛЕ

ОПЛОДОТВОРЕНИЯ

06.02.06. – ветеринарное акушерство и биотехника репродукции животных

ДИССЕРТАЦИЯ

на соискание ученой степени кандидата ветеринарных наук

Научный руководитель:

доктор ветеринарных наук,

профессор Б.Г. Панков

МОСКВА - 2010

2

СОДЕРЖАНИЕ

ВВЕДЕНИЕ…………………………………………………………………......4

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ……………………………………… …………..15

1.1. Ранняя диагностика, фармакопрофилактика и лечение послеродовых

акушерско-гинекологических заболеваний у коров…………………...........15

1.2. Фармакопрофилактика и лечение субинволюции матки………………19

1.3. Проблемы воспроизводства на молочных фермах……………………..22

1.4. Гибель эмбриона на ранних стадиях развития……………………….....28

1.5. Методы диагностики стельности у коров……………………………….36

2. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ………………………………….40

2.1. Материалы и методы……………………………………………………..40

2.1.1. Применение АЛП для диагностики состояния половых органов у

коров……………………………………………………………………………41

2.1.2. Методика приготовления мазков маточных выделений……………..45

2.1.3. Применение схемы ранней диагностики, фармакопрофилактики и

лечения послеродовых осложнений у коров………………………………...45

2.1.4. Применение суспензии ФЛЭКС-2 в сочетании с миотропным

препаратом «Гетеротон»……………………………………………………...46

2.1.5. Методика ректального исследования коров на норму и патологию

половых органов и диагностики стельности………………………………...50

2.1.6. Диагностика стельности при применении иммунно-ферментного

анализа………………………………………………………………………….51

2.1.7. Определение контаминации патогенной микрофлорой маточных

выделений у коров больных скрытым эндометритом……………………....53

2.1.8. Биохимическое исследование проб крови…………………………….56

2.1.9. Биометрическая обработка результатов исследования………………56

2.2. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ…………………………………...58

2.2.1. Цитограммы маточных выделений у коров в послеродовой период..58

3

2.2.2. Цитологическая диагностика, и фармакопрофилактика клинических

эндометритов у коров…………………………………………………………70

2.2.3. Фармакопрофилактика и лечение субинволюции матки…………….74

2.2.4. Цитологическая диагностика состояния (статуса) половых органов

коров при проведении фармакопрофилактики скрытых эндометритов…...86

2.2.5. Мониторинг цитограмм в пробах маточных выделений после

внутриматочного введения суспензии ФЛЭКС-2…………………………....90

2.2.6. Контроль беременности исследованием проб молока методом

иммунно-ферментного анализа (ИФА)………………………………………95

2.2.7. Количественный и качественный состав влагалищной слизи, взятой

у коров, больных клиническим эндометритом……………………………..100

2.2.8. Определение бактерицидной активности суспензии ФЛЭКС-2........104

2.2.9. Результаты биохимических исследований проб крови.......................105

2.2.10. Биометрическая обработка полученных результатов……………...106

2.2.11. Оценка экономической эффективности цитологического контроля

состояния органов размножения после отела и диагностика стельности или

бесплодия у коров…………………………………………………………….108

3. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЙ………………110

4. ВЫВОДЫ......................................................................................................120

5. СВЕДЕНИЯ О ПРАКТИЧЕСКОМ ИСПОЛЬЗОВАНИИ

РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЙ...........................................................121

6. РЕКОМЕНДАЦИИ ПО ИСПОЛЬЗОВАНИЮ НАУЧНЫХ И

ПРАКТИЧЕСКИХ ВЫВОДОВ....................................................................122

7. СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННОЙ ЛИТЕРАТУРЫ...............................123

8. ПРИЛОЖЕНИЯ..........................................................................................147

4

ВВЕДЕНИЕ

Начало XXI в. отличается дальнейшей интенсификацией

сельскохозяйственного производства, быстрой сменой выпускаемой

продукции и внедрением биотехнологии в животноводстве. Уровень

интенсификации животноводства определяется степенью использования

генетического потенциала животных, их биологических возможностей,

которые проявляются в продуктивности. Интенсивный путь развития

животноводства предполагает увеличение производимой продукции на

основе новых инновационных технологий.

Для интенсивного развития животноводства необходимо базироваться

не только на использовании экономических законов, но и быть хорошо

вооруженным знаниями биологических закономерностей, составляющих

основы развития живых организмов, их физиологических функций (Шкис

П.Л., 1987; Чернюс Ю.Л., Петров В.А., Костенко В.Ф., 1991; Кузьмин Р.Г.,

2000).

В западных странах агропромышленный комплекс в условиях

цивилизованной рыночной экономики, представляет собой формы

производства с высокой хозяйственной и экономической

самостоятельностью и с государственным правовым и экономическим

регулированием. Это позволяет большинству стран обеспечить свою

продовольственную безопасность (А.С. Козлов, 2010).

Одной из причин, сдерживающих повышение эффективности

продовольственной безопасности страны, является недостаточно развитая

связь сельскохозяйственной науки с агропромышленным комплексом.

Поэтому в стране сравнительно не высока продуктивность и

конкурентоспособность животноводства. Отсутствует эффективная

консалтинговая служба и низка профессиональная подготовка у фермеров, не

соответствует требованиям государственное регулирование в виде

5

ассоциаций по заказу, переработке и сбыту животноводческой продукции

(А.С. Козлов, 2010).

Фермер в Западных странах четко выполняет все рекомендации: от

стада в 350 коров он получает прибыль около 0,5 млн долларов и по 8…12

тыс. кг. молока от каждой коровы.

Фермер в России надаивает 3500…4000 кг. молока, находится в

трудном материальном положении, но производит 17 млн. т. молока (56,67

%) из 30 млн. т. в год, производимых всеми крупными молочными

хозяйствами и фермерами в России.

В России лидерами по наличию крупного рогатого скота на убой

являются федеральные округа: Приволжский, Центральный, Сибирский. На

их долю приходится 74 % произведенной говядины (агенство АгроФакт,

АПК-информ, май 2010).

Оптимальный выход из трудностей сегодняшнего дня в

животноводстве это: научная организация производства, возрастание роли

государственного регулирования и субсидирования сельхозпроизводства

(пока только 2,0 % составляет государственное субсидирование), увеличение

доли государственной собственности и плановой экономике в АПК (А.С.

Козлов, 2010, Ж. «Агрорынок» № 1, 2010).

Стремление селекционеров России добиться максимальных удоев

коров приводят к резкому снижению воспроизводства стада (42…56

новорожденных телят от 100 коров). Одновременно снизилась численность

поголовья коров более чем трехкратно. Это создало не только продуктовую,

но и социальную проблему (безработица на селе).

В последние годы в Нечерноземной зоне РФ за последние 15 лет выход

телят на 100 коров не превышал 84%, а в отдельные годы недополучено 36%

телят, что объясняется, по-видимому, физиологически необоснованными

системами кормления и содержания маточного поголовья, глубокими

нарушениями обмена веществ и репродуктивной функции у коров

(Сковородин E.H., с соавт., 1999).

6

По данным Департамента ветеринарии Минсельхозпрода России

ежегодно в стране подвергается гинекологической диспансеризации около

8,8 млн. коров, из них 2,3 млн. коров ежегодно болеют гинекологическими

болезнями, а наивысший уровень заболеваемости коров установлен в

хозяйствах Северо-Западного района - 41,2% (Иноземцев В.П. с соавт., 2000).

Вместе с тем патология органов размножения является одной из основных

причин бесплодия и яловости маточного поголовья крупного рогатого скота,

недополучения приплода и снижения его сохранности. Наиболее часто

болезни половых органов у коров развиваются во время родов и в

послеродовой период (Мисайлов В.Д., Нежданов А.Г., Иноземцев В.П.,

2000).

Успешному воспроизводству крупного рогатого скота и увеличению

его продуктивности в значительной степени мешают акушерско-

гинекологические заболевания, яловость коров и телок, наносящие большой

экономический ущерб хозяйству из-за недополучения приплода, снижения

продуктивности, дополнительных затрат на лечение и преждевременной

выбраковки животных. Данные заболевания возникают у животных во время

стельности, но чаще всего при родах и в послеродовой период (Гончаров

В.П., 1990).

Основными причинами низких результатов воспроизводства,

возникновения акушерских и гинекологических болезней у коров являются:

несбалансированное кормление (дефицит в рационах витаминов, макро- и

микроэлементов, белка, углеводов или одностороннее высококонцентратное

силосно-жомовое кормление), скармливание недоброкачественных кормов

(пораженных грибами, содержащих афлатоксины, нитраты, соли тяжелых

металлов, повышенное содержание масляной кислоты и др.); неправильное

содержание (полное отсутствие или ограниченный моцион, недостаточность

ультрафиолетового облучения – инсоляции, недостаток помещений для

коров в сухостойный период и глубокостельных нетелей, сменных

родильных отделений с боксами для отелов, нарушение требований

7

зоогигиены к параметрам микроклимата, влияние отрицательных стресс-

факторов); неправильная эксплуатация животных (удлинение лактации,

несвоевременный запуск, нарушение правил машинного доения,

преждевременное использование молодых животных, полная изоляция

самцов и самок при их выращивании и эксплуатации). Все эти

неблагоприятные факторы вызывают нарушение обмена веществ,

эндокринную недостаточность, гормональные расстройства. При этом

наступают функциональные, структурные изменения в половых железах и

создаются благоприятные условия для развития в репродуктивных органах

условно-патогенных микроорганизмов, вызывающих воспалительные

процессы и субклиническую патологию гениталий как заразной, так и

незаразной этиологии. Клиническое проявление этих процессов: характерная

картина синдрома стад с субклинической патологией гениталий,

многократные повторные осеменения, анафродизия, неполноценные половые

циклы, эмбриональная смертность, аборты, мертворожденность, затяжные

роды, задержание последа, субинволюция матки, эндометриты, гипофункция

яичников и увеличение количества дней бесплодия. Такое многообразие

патологии репродуктивных органов является результатом полифакторной

этиологии, приводящей к низким результатам воспроизводства.

Многочисленными отечественными учеными выяснено, что на

оплодотворяемость влияют самые различные факторы: сезон, тепловой

стресс, низкая гетерозиготность производителей, повышающая частоту

эмбриональной смертности, оплодотворяющая способность спермы

производителей, возраст осеменения телок племенной зрелости, стадия

половой охоты, выживаемость спермиев после осеменения, гормональный

фон в организме, клиническое состояние органов размножения.

В современных условиях (2001…2010 г.г.) у высокопродуктивных

коров диагностируется эмбриональная смертность и иммунная форма

беспродия до 70 % при их осеменении в первые две половые охоты. Этому

способствует субинволюция матки (около 75…80 %), скрытые эндометриты

8

(до 75 %), гиповитаминоз А и нарушение обмена веществ по типу ацидоза

(Б.Г. Панков, 2010).

Рядом ученых и практиков установлено, что главным источником

вариации, оказывающим влияние на оплодотворяемость коров, был оператор

по искусственному осеменению. По их данным, оплодотворяемость коров от

первого осеменения разными техниками-осеменаторами колеблется от 40 до

63 %. Знания, умения и опыт техников-осеменаторов оказывают

значительное влияние на оплодотворяемость животных. Не случайно

основоположник метода искусственного осеменения И.И. Иванов писал, что

«процент оплодотворяемости прямо пропорционален квалификации и

честности работника» (В.А. Середин, 2008).

Для интенсификации воспроизводства маточного поголовья коров, при

сохранении суточных удоев на оптимальном уровне необходимо повышение

процента плодотворно осемененных коров в первые две после отела половые

охоты. Этого можно добиться только регулярным проведением ранней

экспресс-диагностики состояния органов размножения начиная с отела до

плодотворного осеменения. Своевременное выявление коров, больных

субинволюцией матки, клиническими и скрытыми формами эндометрита и

эффективное их лечение в стадию уравновешивания полового цикла,

позволяет в несколько раз увеличивать количество плодотворно

осемененных коров в первую и вторую половые охоты и снижать процент

эмбриональной смертности.

Сегодня на молочных фермах ветеринарные врачи и операторы по

искусственному осеменению диагностируют скрытые эндометриты только

«классическим» методом – нерегулярным наблюдением за примесью гноя в

течковой слизи перед запланированным осеменением. Осеменение больных

эндометритом коров в эту стадию полового цикла крайне нежелательно, так

как низок процент плодотворных осеменений и высока вероятность

эмбриональной смертности, а также такое осеменение дает начало развитию

иммунного бесплодия.

9

Лабораторная диагностика стельности методом ИФА, по определению

концентрации гормона прогестерона в молоке, на 19…21 день после

осеменения, не всегда достоверна. Достоверность такой диагностики

снижается повышением уровня прогестерона в молоке коров при

субинволюции матки, при которой происходит персистенция желтых тел, а

также при эмбриональной смертности, когда уровень прогестерона

снижается уже после установленного диагноза на стельность. Если уровень

прогестерона превышает 7 нг/мл, корова считается стельной. При

персистенции желтого тела гормон прогестерон не перестает выделяться и

его концентрация в молоке может достигать 7 нг/мл. и более, в таком случае

диагностика стельности может быть ошибочной.

При анализе мазков из проб маточных выделений, не придавалось

значения токсическому фактору и не выводился процент гнойных телец. Не

были разработаны цитологические критерии прогнозирования течения

беременности, диагностики эмбриональной смертности, скрытых и неполных

абортов у многоплодных животных, ранней дифференциальной диагностики

токсических и скрыто протекающих процессов в матке коров. Не были

разработаны четкие критерии диагностики патологических процессов по их

локализации, а также состояние местного клеточного фагоцитоза. В связи с

этим наше внимание было обращено именно к данным проблемам.

Функциональные расстройства матки (субинволюция, атония и др.)

вызывают не только бесплодие, но также снижение удоев коров, ухудшение

санитарных и технологических свойств молока.

ЦЕЛЬ И ЗАДАЧИ ИССЛЕДОВАНИЙ

Основными целями исследований являлись: разработка метода

цитологической диагностики беременности с учетом количества гнойных

телец в мазке маточной слизи и выведение двух критериев: тканевого

индекса и токсического фактора, повышение процента оплодотворяемости

коров в первые две послеродовые половые охоты, а также экспресс-

10

диагностика состояния органов размножения акушерской ложкой Б.Г.

Панкова (АЛП) в послеродовой период, фармакопрофилактика и лечение

послеродовых заболеваний у коров суспензией ФЛЭКС-2, для повышения

процента плодотворно осемененных коров в первые два после отела половых

цикла.

Для реализации данной цели были поставлены следующие задачи:

1. Изучить цитограммы в пробах, взятых АЛП из влагалища стельных

коров.

2. Провести оценку диагностической точности (значимости)

цитоморфологического и гормонального (ИФА) методов, с целью

определения стельности.

3. Изучить значение экспресс-диагностики акушерской ложкой Панкова

Б.Г. и влияние фармакопрофилактики послеродовых осложнений у коров,

внутриматочным введением суспензии ФЛЭКС-2 в сочетании с миотропным

препаратом «Гетеротон», на снижение послеродовых заболеваний, снижения

эмбриональной смертности у коров в послеродовой период.

4. Изучить цитоморфологические изменения в половых органах коров на

6-й, 9-й, 12-й, 15-й и 19…21-й дни после отела, а также в стадию

уравновешивания полового цикла между второй и третьей половыми

охотами при проведении фармакопрофилактики послеродовых осложнений.

5. Определить показатели тканевого индекса и токсического фактора по

мазкам из проб маточных выделений у коров в послеродовой период при

патологических процессах.

6. Определить ассоциацию условно-патогенной микрофлоры в маточных

выделениях (экссудате) коров, больных эндометритами.

7. Определить спектр антимикробной активности лекарственного

средства – суспензии «ФЛЭКС-2», используемого для фармакопрофилактики

и лечения эндометритов у коров подопытной группы.

11

НА ЗАЩИТУ ВЫНОСЯТСЯ ОСНОВНЫЕ РЕЗУЛЬТАТЫ

РАБОТЫ

1. Разработка цитоморфологического метода для диагностики стельности,

как более достоверного, по сравнению с гормональным;

2. Определение диагностической значимости процентного соотношения

эпителиальных клеток, нейтрофилов и гнойных телец в мазках из маточных

выделений при заболевании коров клиническими и скрытыми

эндометритами, субинволюции матки, при стельности и эмбриональной

смертности, при стельности в сочетании с вагинитом.

3. Определение эффективности цитоморфологической диагностики

состояния половых органов коров в послеродовой период, стельности и

эмбриональной смертности;

4. Определение значения тканевого индекса и токсического фактора в

цитограммах мазков из маточных выделений для оценки «норма –

патология» в гениталиях коров в послеродовой период.

НАУЧНАЯ НОВИЗНА ИССЛЕДОВАНИЙ

Впервые реализована идея Б.Г. Панкова проводить цитологическую

диагностику стельности по мазкам проб, взятых АЛП, по наличию только

клеток влагалищного эпителия и слизистых клеток пробки беременности,

при отсутствии эпителиальных клеток других отделов гениталий;

Установлен факт начального процесса эмбриональной смертности по

появлению в мазках эпителиальных клеток шейки и рогов матки повторными

цитологическими исследованиями, проводимыми через 21…35 дней после

установления беременности цитологическим, гормональным и ректальным

методами. Появление эпителиальных клеток тела и рогов матки

свидетельствует о гибели зародыша, эмбриона, которые будут рассасываться

или изгоняться;

Многократные цитологические исследования мазков из проб маточных и

влагалищных выделений от коров, находящихся в послеродовом периоде,

12

взятых АЛП, позволили, составить цитограммы, свойственные конкретным

физиологическим и патологическим процессам в гениталиях;

Установлено, что при наличии в мазках из маточных выделений

фагоцитоза, отсутствии нейтрофилов и гнойных телец, и если акушерская

ложка входит во влагалище только на половину длины стержня, значит

коровы клинически здоровые, инволюция матки завершена. Такие животные

плодотворно осеменяются в первые две после отела половые охоты;

Установлено, что отсутствие фагоцитоза, гнойных телец при наличии

нейтрофилов свидетельствует о наличии токсического состояния в среде

эндометрия. Таких животных осеменять нельзя, т.к. уже созданы условия для

эмбриональной смертности, многократных неплодотворных осеменений.

АПРОБАЦИЯ РЕЗУЛЬТАТОВ РАБОТЫ

Основные результаты диссертационной работы доложены, обсуждены

и одобрены на конференциях профессорско-преподавательского состава,

научных сотрудников и аспирантов ФГОУ ВПО МГАВМ и Б (2008-2010); на

всероссийском семинаре «Опыт создания и работы сервисных центров по

воспроизводству сельскохозяйственных животных в рамках реализации

Государственной программы развития сельского хозяйства», 2009 г.,

Дубровицы., на Всероссийском семинар-совещании по воспроизводству и

биотехнологии, 2010 г., Нальчик.

ПУБЛИКАЦИИ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

По материалам диссертации опубликовано 4 научные работы, в т.ч. 2 статьи

– в материалах всероссийских, региональных и республиканских научных

конференций и 2 статьи в журналах, рекомендованных ВАК РФ. Из них 2 статьи

в научно-практическом журнале «Ветеринарная медицина», 2 статьи в

материалах Всероссийского семинара «Опыт создания и работы сервисных

центров по воспроизводству сельскохозяйственных животных в рамках

13

реализации Государственной программы развития сельского хозяйства», 2009 г.,

Дубровицы.

ПРАКТИЧЕСКАЯ ЦЕННОСТЬ РЕЗУЛЬТАТОВ

ИССЛЕДОВАНИЙ

Практическая значимость результатов исследований заключается в

повышении оплодотворяемости коров в первые две послеродовые половые

охоты, а также быстрота и высокая достоверность цитоморфологического

метода диагностики состояния органов размножения и проведения

фармакопрофилактики задержания последа, послеродовых заболеваний.

Результаты наших исследований показывают, что в опытной группе

был снижен процент коров с послеродовыми осложнениями по сравнению с

контрольной: в опытной группе коров, было выявлено больных

субинволюцией матки - 20 %, с клиническим и скрытым эндометритами - 30

% и 20 %, а в контрольной группе данные показатели были - у 90 %, 80 %, 70

% коров соответственно.

Материалы исследований используются в учебном процессе в

Кабардино-Балкарской государственной сельскохозяйственной академии им.

В.М. Кокова, Московской государственной академии ветеринарной

медицины и биотехнологии им. К.И. Скрябина студентами ветеринарных

факультетов при изучении дисциплины «Ветеринарное акушерство,

гинекология и биотехника репродукции животных».

ОБЪЕМ И СТРУКТУРА ДИССЕРТАЦИИ

Диссертация изложена на 157 страницах машинописного текста и состоит из

введения, обзора литературы, результатов собственных исследований,

обсуждений полученных результатов, выводов, данных о практических

использованиях научных результатов, рекомендаций по использованию

научных выводов, списка использованной литературы (210 источников, в т.ч. 39

14

иностранных авторов) и приложений. Работа иллюстрирована 43 таблицами и

схемами, и 36 рисунками и фотографиями.

15

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Ранняя диагностика, фармакопрофилактика и лечение

послеродовых акушерско-гинекологических заболеваний у коров

Для интенсивного развития животноводства необходимо базироваться

не только на использовании экономических законов, но и быть хорошо

вооруженным знаниями биологических закономерностей, составляющих

основы развития живых организмов, их физиологических функций (П.Л.

Шкис, 1987; Ю.Л. Чернюс, В.А. Петров, В.Ф. Костенко, 1991; Р.Г. Кузьмин,

2000).

Успешному воспроизводству крупного рогатого скота и увеличению

его продуктивности в значительной степени мешают акушерско-

гинекологические заболевания, яловость коров и телок, наносящие большой

экономический ущерб хозяйству из-за недополучения приплода, снижения

продуктивности, дополнительных затрат на лечение и преждевременной

выбраковки животных. Данные заболевания возникают у животных во время

стельности, но чаще всего при родах и в послеродовой период (В.П.

Гончаров, 1990).

Болезни органов размножения воспалительного характера, главным

образом катарально-гнойного, гнойного и гнойно-некротического,

развиваются под влиянием условно-патогенных и патогенных

микроорганизмов (стрептококки, стафилококки, протеи, эшерихии коли,

синегнойная палочка, грибы, микоплазмы, хламидии, вирусы и т.д.). (Г.А.

Черемисинов, В.Д. Мисайлов, А.Г. Нежданов, В.А. Карамышев, В.Н.

Карымов, А.С. Лободин, С.А. Власов, 1988.).

В.А. Середин, Ц.Б. Кагермазов, Р.Т. Кадыкоев, 2008, считают что

главными критериями воспроизводства крупного рогатого скота считаются

следующие показатели:

16

- около 90 % коров после 30 дней послеродового периода должны быть

обнаружены в охоте в течение второго месяца после отела и осеменены;

- количество коров с анафродизией, т.е. отсутствием половых циклов, а

также количество коров, повторяющих половые циклы, после 3-х осеменений

не должно превышать 10 %;

- оплодотворяемость от 1-го осеменения должна быть не менее 60 %;

Многие ученые (Д.Д. Логвинов, 1975; Н.Н. Михайлов, 1979; А.П.

Студенцов, 1980; В.А. Середин, 2004; Б.Г. Панков, 2008 и др.), указывают,

что в этиологии послеродовых метритов, наряду со значением кормления и

содержания животных, подчеркивают важную роль микробного фактора, а по

данным S. Rantall (1986), в течение 10 суток после отела у 90 % коров в

гениталиях присутствует условнопатогенная микрофлора, у большинства

коров персистенция этой микрофлоры наблюдается в течение 50 суток после

отела. По данным Б.Г. Панкова (2008), высокий процент больных

клиническим эндометритом, можно объяснить тем, что уже в момент отела в

половых органах при атонии матки присутствует условнопатогенная

микрофлора. Сразу после извлечения плода силой, при слабых потугах и

схватках, матка снова опускается в брюшную полость и там расправляется.

Это создает условия для «засасывания» в полость матки воздуха (иногда со

звуком вибрации половых губ – «пневмоматка») с содержащейся в ней

условнопатогенной микрофлорой, которая вызывает заболевание

клиническим эндометритом на фоне предрасполагающих факторов (ацидоз,

кетоз, авитаминоз и др.).

Так как в момент выхода плода в матке образуется вакуум, и

микрофлора находящаяся во взвешенном состоянии в воздухе со свистом

всасывается в половые органы, где на фоне низкой резистентности иммунной

системы роженицы, размножается микрофлора и в дальнейшем экзотоксины

микрофлоры в сочетании с токсинами, образующимися при разложении

лохий и карункулов вызывают интоксикацию организма.

17

Микроорганизмы попадают в половые органы коров и телок через

открытый канал преддверия влагалища и шейки матки при несоблюдении

ветеринарно-санитарных правил во время отела коров и ухода за ними в

послеродовой период, при естественном осеменении, после абортов, при

задержании последа, родовспоможении, а также гематогенным и

лимфогенным путем при маститах, болезнях конечностей и других органов.

Инфицированию половых органов здоровых животных способствует наличие

в стаде больных коров, повышенная микробная загрязненность помещений,

особенно родильных отделений и высокая патогенность микрофлоры в

результате ее многократных пассажей при отсутствии дезинфекций (Г.А.

Черемисинов, В.Д. Мисайлов, А.Г. Нежданов, В.А. Карамышев, В.Н.

Карымов, А.С. Лободин, С.А. Власов, 1988).

Ослаблению общей резистентности коров и телок случного возраста

способствует нарушение обмена веществ, которое вызывается

несбалансированностью рациона по кислотно-щелочным эквивалентам, по

минеральным веществам и витаминам. Нарушение обмена веществ вызывает

эндокринную недостаточность и гормональные нарушения, снижение

естественной резистентности. Эти нарушения приводят к расстройству

нейрогуморальной регуляции половых функций и создаются благоприятные

условия для развития в половых органах патогенной микрофлоры,

вызывающей воспалительные процессы. (Б.Г. Панков, А.В. Жаров, 2008).

Нормированное полноценное кормление является основой

расширенного воспроизводства стада.

Между кормлением и плодовитостью, плодовитостью и

продуктивностью существует прямая связь. Из-за недооценки условий

кормления и содержания в критические периоды воспроизводительной

функции снижаются результаты воспроизводства стада. Нормализация

обменных процессов, особенно в сухостойный и послеродовой периоды,

обеспечивает снижение пренатальных потерь, уменьшение

мертворожденных и абортов, благополучие отела, выживаемость

18

новорожденных телят, возобновление половых циклов и успешное

осеменение животного, сокращает период отрицательного баланса энергии и

потерю живой массы коровой в начале лактации. Ошибки в нормированном

кормлении молочного скота в основном приходятся на конец лактации,

сухостойный и особенно, предродовой периоды, и они значительно влияют

на воспроизводительную функцию (возникает задержание последа,

кетонемия, гипомагниемия и другая патология) (В.А. Середин, 2004).

Необходимость активного моциона на самом раннем этапе

послеродового периода диктуется анатомо-топографическими

особенностями матки коровы, которая в отличие от других животных после

родов очень глубоко опущена в брюшную полость, а шейка матки

длительное время открыта. Это создает благоприятные условия для

скопления в матке лохий и их инфицирования. Поэтому, чем выше нервно-

мышечный тонус матки, тем сильнее ее сокращение, тем быстрее происходит

инволюция всех половых органов. При предоставлении коровам активного

моциона до родов и начиная со второго-третьего дня после родов матка на

десятый день уменьшается до размера как при трех месяцах беременности и

к 18-21 дню ее инволюция полностью завершается и имеются все условия

для наступления новой беременности. При отсутствии моциона инволюция

матки протекает медленно и на десятый день после родов она имеет размеры,

подобные 4-4,5 месяцам беременности. При предоставлении активного

моциона с десятого дня после родов инволюция матки значительно

усиливается, но заканчивается она не ранее 23-25 дня после родов.Применяя

активный моцион в комплексе с другими ветеринарно-зоотехническими

мероприятиями, можно не только не допустить яловости, избежать

гинекологических заболеваний, но за счет уплотнения отелов получать от

каждой коровы за пять лет по шесть телят и лактаций (В.С. Шипилов, 1966).

В целях интенсификации воспроизводства, обеспечения инволюции

полового аппарата, своевременной подготовки коров к осеменению,

сокращения интервала между отелами организуется активный моцион всему

19

маточному поголовью, начиная с 3-4-го дня после отела, на расстояние 3-5

км ежедневно. (В.А. Середин, 2004).

К неблагоприятным факторам, также вызывающим нарушения обмена

веществ, снижение резистентности организма и гормональные расстройства

относятся: нарушение зоогигиенических параметров микроклимата и

санитарных норм в помещениях, отсутствие родильных помещений,

чрезмерные стрессовые воздействия; неправильная эксплуатация животных

(продолжительная предыдущая лактация, нарушения режимов машинного

доения, несоблюдение ветеринарно-санитарных и гигиенических правил при

воспроизводстве, преждевременное или позднее использование телок и др.),

а также невыполнение правил ведения родов и родовспоможения (В.П.

Гончаров, 1990).

1.2. Фармакопрофилактика и лечение субинволюции матки

При субинволюции матки происходит ослабление сократительной

функции матки, замедляется ретракция мышечных волокон (А.П. Студенцов,

2000).

Функциональные расстройства матки (субинволюция, атония и др.)

вызывают не только бесплодие, но также снижение удоев коров, ухудшение

санитарных и технологических свойств молока.

Если учитывать не отделившиеся последы у коров по истечении 6 – 8

ч., то частота задержания последов поднимается до 71 – 85% и она

соответствует частоте атонии и субинволюции матки у коров, при которых в

матке имеются все условия для возникновения эндометритов. Эти

заболевания чаще регистрируются в зимнее – стойловый период у животных

с пониженным щелочным резервом на фоне гиповитаминоза А.

Субинволюция матки также может осложняться субклинической (скрытой)

формой эндометрита. Субинволюция матки встречается у 30% отелившихся

коров, при этом в пастбищный период – у 25%, а в стойловый при отсутствии

прогулок – у 46% (О.П. Ивашкевич, Р.Н. Азизян, 1987).

20

Причин атонии и субинволюции матки может быть несколько:

- Отсутствие активного моциона (особенно во второй половине

беременности), недостаточное или однообразное кормление, в особенности

минеральная и витаминная недостаточность, избыточное скармливание

сочных кормов (силоса, барды, жома), В.П. Гончаров, В.А. Карпов, 1981).

Необходимость активного моциона на самом раннем этапе послеродового

периода диктуется анатомо-топографическими особенностями матки коровы,

которая в отличие от других животных после родов очень глубоко опущена в

брюшную полость, а шейка матки длительное время открыта. Это создает

благоприятные условия для скопления в матке лохий и их инфицирования.

Поэтому, чем выше нервно-мышечный тонус матки, тем сильнее ее

сокращение, тем быстрее происходит инволюция всех половых органов. При

предоставлении коровам активного моциона до родов и начиная со второго-

третьего дня после родов матка на десятый день уменьшается до размера как

при трех месяцах беременности и к 18 – 21 дню ее инволюция полностью

завершается и имеются все условия для наступления новой беременности.

При отсутствии моциона инволюция матки протекает медленно и на десятый

день после родов она имеет размеры, подобные 4 – 4,5 месяцам

беременности. При предоставлении активного моциона с десятого дня после

родов инволюция матки значительно усиливается, но заканчивается она не

ранее 23 – 25 дня после родов (В.С. Шипилов, 1966).

- В следствие нарушения нейрогуморальной регуляции функции половых

органов при нарушении обмена веществ по типу субклинический кетоз и

ацидоз, с клиническим проявлением атонии и субинволюции матки, условно-

патогенная микрофлора проникает в полость матки сразу после выведения

плода. Концентрация условно-патогенной микрофлоры в животноводческих

помещениях достигает 300 тыс. микробных тел в 1 м3.( Б.Г. Панков, А.В.

Жаров, 2008).

- Токсическое воздействие на эндометрий, размножающейся в лохиях

микрофлоры с умеренной степенью вирулентности, не вызывающей

21

осложнений в виде клинических эндометритов. Как отмечает Е.В. Ильинский

(1968), при соответствующих условиях (ослабление резистентности

организма, травмы) они усиливают свои вирулентные свойства, что приводит

к активизации микрофлоры матки.

Инфицирование половых органов происходит не только в результате

осеменения или родовспоможения, но и лимфогенным и гематогенным

путем. Поэтому способность организма животных противостоять

возбудителю болезни определяется степенью его реактивности,

резистентности и иммунитета (Н.Н. Михайлов, 1979).

Как отмечают П.А. Волосков (1956), Е.В. Ильинский (1968), в 98%

случаев неспецифическое воспаление непосредственно связано с внедрением

в ткани половых органов условно-патогенной микрофлоры.

В сухостойный период в шейке матки у большинства животных

микрофлора отсутствует. Микробная контаминация наступает во время

отела. В содержимом проб здоровых животных обнаружены микрококки,

кишечная палочка, сапрофиты, тогда как у больных животных кроме

простейшей микрофлоры выявлена и патогенная (вульгарный протей,

стафилококк белый и лимонно-желтый) (В.С. Кувшинова, 1985).

По данным С. Георгиева (1989), микрофлора содержимого матки

увеличивалась у коров с нормально текущим послеродовым периодом с 410

тыс. мл в день отела до 1723 тыс. мл на 5-ый день, после чего быстро

снижалась до 163 тыс. мл на 15-ый день после родов. У коров с

патологическим течением послеродового периода количество

микроорганизмов в маточном секрете в 1-ый день после отела составило

1200 тыс. мл, достигло максимума – 8050 тыс. мл на 7-ой и постепенно

снизилось до 3700 тыс. мл на 15-ый день после отела.

- Д.Д. Логвинов (1975) считает, что возникновение субинволюции матки

возможна на фоне маститов, в результате которых нарушается рефлекторная

связь между маткой и молочной железой, а также в результате

22

недостаточного проявления материнского инстинкта роженицей, если ей не

предоставляется возможность облизать теленка.

- Угнетающее влияние на моторику матки могут оказывать и токсины,

образующиеся при разложении лохий и карункулов. Тканевые эндотоксины и

экзотоксины микрофлоры воздействуют раздражающе на миометрий и в

яичнике не рассасывается желтое тело и оно персистирует. Оно вызывает

атонию матки (для снижения болевых раздражений), (Панков Б.Г., Жаров

А.В., 2008).

1.3. Проблемы воспроизводства на молочных фермах

Проблема воспроизводства маточного стада на товарных молочных

фермах решается только лечением задержания последа, клинических

эндометритов и гипофункции яичников. Но не проводится: профилактика

кетозов, ацидозов, фармакопрофилактики задержания последов и

субинволюции матки, ранней диагностики скрытых эндометритов

акушерской ложкой Б.Г. Панкова (патент 2001 г.). Ветеринарные врачи ферм,

как правило, не дифференцируют эндометриты от метритов ректальным

методом, не учитывают в своей работе эмбриональную смертность. Они не

диагносцируют частоту эмбриональной смертности ни по течковой слизи, ни

по интервалам между половыми охотами, хотя это заболевание

регистрируется в 55…65% случаев (Б.Г. Панков, А.В. Жаров, 1995).

Показатели воспроизводительной способности коров в молочно-

товарных хозяйствах Московской области не высоки, так как на 100 коров

получают 63 – 72 % новорожденных телят. Например, в ЗАО «Шестаково»

Волоколамского района Московской области в 2007…2008 г. получены

следующие показатели: деловой выход новорожденных телят 63 – 67 %,

индекс осеменения 2,1-3,6, МОП (межотельный период) до 14 мес. у 6 %

коров, 15…18 мес. – у 17,4 %, до 22 мес. – у 28,4 %, более 22 мес. – у 46,7%.

Сервис-период менее 60 дней у 10,1% коров и первотёлок, до 90 сут. – у

15,6%, до 120 – у 14,7%, более 120 сут. – у 59,6% (Б.Г.Панков, 2008). Первая

23

послеродовая охота наступает в разные сроки: 1,2% до 30 сут., 8,4% до 42,

28,3% - до 63, 62,2% - до 63 сут. (Б.Г. Панков, 2008).

В племенных хозяйствах часто не осеменяют новотельных коров в

первые три половые охоты после отела, чтобы получить высокие удои за

удлинённые лактации, и допускаются наличие яловых коров. Межотёльный

период (МОП) у племенных животных колеблется от 365 до 404 дней. После

таких 7 – 8 – тысячных удоев за год и более, на фоне преобладания в рационе

концентрированных кормов. В результате этого возникает нарушение обмена

веществ по типу ацидоз и кетоз (П.А. Волосков, 1964; Б.Г. Панков, 1994;

Ю.Д. Клинский, 1994; А.Я. Батраков, 1994; А.И. Варганов, 1990; В.В.

Горчаков, 2002; Силосно-концентратный тип кормления нарушает обмен

веществ по типу ацидоз – кетоз, при котором происходит дистрофия желез

внутренней секреции, нарушение нейроэндокринной регуляции функций

воспроизводства, печень подвергается жировой дистрофии, и снижается

синтез гликогена и организм, лишается источника глюкозы. Поэтому при

отелах снижаются сила схваток и потуг, повышается частота

мёртворождённых и дистоций. Последы задерживаются у всех

высокопродуктивных коров, т.к. отделяются позже 12 часов после выхода

плода. При ацидозе констатируется атония матки, которая после извлечения

плода вновь опускается в брюшную полость, расправляется, создает вакуум в

полости матки и с воздухом всасывается условно-патогенная микрофлора,

вызывая заболеваемость клиническим эндометритом. Частота

заболеваемости клиническим эндометритом составляет 85 – 90 %. (Б.Г.

Панков, Н.А. Соколова, 1986). При подострой и хронической субинволюции

матки коровы заболевают скрытой формой эндометритов. Искусственное

осеменение животных, больных скрытыми формами эндометритов дает

начало развитию иммунного бесплодия.

Нарушение гисто-гематического барьера при скрытом эндометрите

способствует возникновению иммунного бесплодия, которое возникает в

результате фагоцитоза спермиев или зародыша лейкоцитами, которые

24

«информируют» иммунную систему о наличии чужеродного белка (быка) и

она реагирует выработкой спермоантител: спермотоксинов, спермолизинов,

спермопреципитинов, спермоагглютининов (И.И. Соколовская, В.К.

Милованов, 1981). Этим и объясняется эмбриональная смертность,

происходящая в течение критических периодов развития зародыша (И.И.

Соколовская, 1978; А.М. Чомаев, 2003). Эмбрион гибнет через дегидратацию

и частичного распада тканей. Иммунитет против беременности сохраняется в

течение 2…3 месяцев. Это удлиняет лактацию и позволяет получить нужное

количество молока.

Скрытые эндометриты диагностируются за 20…30 секунд акушерской

ложкой Панкова Б.Г. (АЛП) (устройство - патент 2001 г) взятием пробы

маточных выделений под шейкой матки. Критерием диагностики

субклинического эндометрита является наличие в слизи примеси гноя.

Субинволюция матки диагностируется акушерской ложкой с 5…6 дня после

родов по лохиям красного цвета и выходу из влагалища одной трети длины

стержня ложки. Функция яичника диагностируется акушерской ложкой по

консистенции слизи маточных выделений. Если слизь густая и клейкая –

функционирует желтое тело – (лютеальная фаза), жидкая – созрел

доминантный фолликул (фолликулярная фаза), полужидкая – происходит

атрофия желтого тела и созревание фолликула (Б.Г. Панков, 2001).

Следует запрещать проводить осеменение коров при скрытых

эндометритах и субинволюции матки. Б.Г. Панков рекомендует

диагностировать скрытые эндометриты АЛП в следующие сроки после

отёла: на 15-й день новотельности, после выздоровления от клинической

формы эндометрита, за 10…12 дней до запланированной половой охоты, т. е.

в стадию уравновешивания полового цикла. Лечение скрытого эндометрита

проводится в день постановки диагноза (стадия уравновешивания полового

цикла) введением в оба рога матки по 20 мл суспензии ФЛЭКС или

подтитрованных лечебных средств на чувствительность к ним микробных

ассоциаций, вызвавших заболевание эндометритом.

25

В стадию уравновешивания полового цикла канал шейки матки не

закрыт поперечными складками, так как складки образуют щелевидную

спираль. Этот канал у здоровых не стельных и у беременных коров

закрывается только густой слизью при наличии желтого тела в яичнике.

Канал шейки матки открыт для введения осеменительной пипетки в стадию

половой охоты и при заболевании коров и тёлок скрытой формой

эндометрита. Животные, вылеченные от скрытого эндометрита, плодотворно

осеменяются в очередную охоту в 86,7 % (Б.Г. Панков, 2001).

У высокоудойных коров первая половая охота проявляется на 52…63

дни после отёла. Не следует принимать этот факт за норму, но считать как

следствие эксплуатационной формой бесплодия. Они не оплодотворяются

при субинволюции матки, в результате нарушенных - неполноценных

половых циклов.

При кетозе и ацидозе дистрофии подвергаются яичники, половые

циклы становятся алибидными (тихая половая охота), анэстральными,

ановуляторными, асинхронными. Повышается частота фолликулярных кист в

яичниках. На фоне хронической субинволюции матки после родов и абортов,

яйцеклетки медленно созревают, и после её оплодотворения закладывается

нежизнеспособный зародыш, погибающий в первые 12-25 дней своего

развития (А.М. Чомаев, 2003). Перечисленные факторы обусловливают

эмбриональную смертность (скрытые аборты), т. к. зародыш рассасывается.

Частота эмбриональной смертности достигает 57…65 %, но они не

учитываемые как аборты в зоотехнической отчетности.

При хронической субинволюции матки миометрий вытесняется

бесструктурной инертной массой (ценкеровский некроз). Матка теряет

эластичность, не дает возможности к росту плода, поэтому происходят

привычные (клинические) аборты.

Большие удои достигаются концентрированными кормами с высокой

энергией, на фоне нарушения рубцового пищеварения, снижения числа

микрофлоры рубца переваривающей клетчатку с 2-3 млн. в одном грамме

26

рубцового содержимого до 1 500. Поэтому у коров возникает дефицит

незаменимых аминокислот и витаминов группы В. Это вызывает заболевание

кетозом, при котором повышается частота эмбриональной смертности,

снижается длительность продуктивного использования коров и нарушается

их плодовитость.

При преобладании в рационе высокоэнергетических (кислых) кормов,

кетоновые тела свободно преодолевают плацентарный барьер и угнетают

закладку полноценных тканей. Развитие органов и тканей у эмбриона

задерживается. Предвестники родов и процесс родов начинается с момента,

когда у зрелого плода в передней доли гипофиза выработается достаточное

количество АКТГ, который повышает секрецию стероидных гормонов

надпочечников (С-19). Стероиды стимулируют секрецию простагландина Ф-

2а в маточной плаценте и секреция прогестерона прекращается. Повышается

чувствительность миометрия к окситоцину. Любое движение плода

усиливает «вбрасывание» окситоцина из терминалий в кровь.

Но при ацидозах и кетозах задерживается темп «созревания» плода.

Если рацион не сбалансирован по углеводам, то плод созревает не к 275 дню

у "голштинов" и к 285 дню у чернопестрой породы, а на одну – две недели

позже. За каждый «дополнительный» день развития плод повышает массу

тела на 0,6…0,8 кг., поэтому плод рождается не 28 килограмовым, а

достигает 45…50 кг. Это проводит к разрыв шейки матки от крупного плода,

к ослаблению родовых сил, к задержанию последа, к субинволюции матки, к

метритам и эндометритам. Рождаются крупные слабые, нежизнеспособные

телята (Б.Г. Панков, 2003).

Проблеме профилактики эмбриональной смертности посвящали

исследования ряд учёных: Милованов и Соколовская, 1964 (титры

спермоантител); А.П. Устинов, 1968 (гипофункция желтого тела); Мингазов,

1978 (частота эмбриональной смертности при нарушении условий кормления

и содержания коров в критические периоды развития эмбриона; J.H. Ball

27

(1978); U. Huhn (1979); П.А. Волосков и Н.Н. Михайлов (1960, 1964); И.

Чешкина (ожирение и эмбриональная смертность), (1998).

Эмбриональная смертность происходит при: генетической

наследственной патологии, летальные гены у производителей с

рецессивными генами, при инбридинге, клонировании.

Эмбриональная смертность является последствием повреждения

слизистой оболочки матки, гемато-генитального (гистогематического)

барьера при контаминации полости матки патогенной микрофлорой. Это

происходит при скрытых эндометритах, субинволюции матки,

проникновении диплококков и синегнойной палочки, сальмонелл,

стафилококков, коринобактерий из крови матери в полость матки, а затем и в

кровь плода. Гибнет эмбрион при: повторных половых охотах у беременных,

раннем осеменении с клиникой субинволюции матки, осеменении в 4…5

половой цикл после родов (на пике лактации), гиповитаминозах А, Е, В2, В3,

Н, при дефиците линолевой кислоты, отравлении токсинами грибов

(фурманизин, фузариофурманон, охратоксин), дефицитах незаменимых АМК

(лизин, метионин, триптофан, аргинин, треонин. Эмбриотоксично действуют

продукты распада печени при её дистрофии, нарушение функции почек,

масляная кислота силоса и сенажа, токсины комбикормов.

При гиповитаминозе А происходит кератинизация слизистой оболочки

эндометрия и плацентация эмбриона становится невозможной.

Выживаемость эмбриона зависит от количества и вирулентности

патогенов (R. Agrimm, 1959), от «информированности» иммунной системы о

наличии чужеродных белков в матке при скрытых эндометритах (Вязов и

Вербицкий, 1973), от многих нарушенных взаимоотношений между матерью

и плодом (А.М. Чомаев, 2003) .

При интенсивном использовании коров с удлиненной лактации можно

получать 83…90 телят на 100 коров, если ликвидировать эмбриональную

смертность, и балансировать рацион по СПО, макро- и микроэлементам,

витаминам. Но для адаптации ветеринарной службы к бизнес эксплуатации

28

коров необходимо в штат ветеринарной службы включить должность

ветврача - гинеколога, который будет чётко выполнять «схему ранней

акушерской диспансеризации» по Б.Г. Панкову. По этой схеме

предусматривается ежедневный контроль за состоянием здоровья каждой

отелившейся коровы первотёлки от отёла до оплодотворения. Высокие удои

за год можно получить, оплодотворив корову в первые две половые охоты.

Это позволит получить одну лактацию и ещё один 60–дневный раздой.

Каждый раздой это 49% молока от всей лактации.

1.4. Гибель эмбриона на ранних стадиях развития

Гибель эмбриона на ранних стадиях развития у высокопродуктивных

коров является одной из причин бесплодия.

Выяснение причин, способствовавших гибели зародыша, а также

разработка действенных мероприятий, направленных на повышение его

жизнеспособности в критические периоды своего развития, является одной

из важнейших задач, стоящих перед специалистами в области биотехнологии

воспроизводства.

Проблеме эмбриональной смертности у сельскохозяйственных

животных посвящено большое количество научных исследований.

Впервые в 1914 г. J. Hammond обнаружил пренатальные потери у

свиней. При вскрытии в середине супоросности он обнаружил, что из 23

плодов нормально развивались лишь 12, а 11 были на разных стадиях

нарушения.

По многочисленным данным отечественных и зарубежных

исследователей оплодотворяемость у крупного рогатого скота составляет 90-

95%, а переживало все критические периоды лишь 50-55% зародышей.

Наибольшие пренатальные потери происходят в предплацентационный и

плацентационный периоды внутриутробного развития (Милованов В.К.,

1982; Sreenan J.M. et.al, 1997; Wrenzychi C. et. al, 1999; Gallagher D.S. et. al,

29

1999). Следовательно, 25-30% эмбрионов погибают в течение первых 19 дней

и 40-45% - до 40-го дня развития(Agolon, 1972).

По данным разных исследователей потери стельности от зачатия до 15-

17 дня беременности составляют у коров 28%, у нетелей 15%.

Увеличение продолжительности интервала между осеменением и

повторным эструсом отражает в основном эмбриональные потери. Точно

определить их уровень можно при вынужденном убое животных через 3 и 35

дней после осеменения. Полученная разница в числе нормальных эмбрионов

показывает величину потерь (J. Agolon, 1981.).

Принимая во внимание достижения науки в данной области, можно

сказать что причинами гибели плода на ранних стадиях своего развития, а

также большое количество неплодотворных осеменений обусловлены

нарушением генетических (инбридинг, хромосомные расстройства),

иммунных (выработка антител против спермиев), эндокринных

взаимоотношений в системе самка – зародыш, а также под влиянием

различных инфекций, патологическими изменениями половых органов и

факторами внешней среды. К последним относятся такие как:

а) Несбалансированное кормление (недостаток в рационе макро- и

микроэлементов, витаминов, белков, углеводов, а также скармливание

недоброкачественных кормов с высоким содержанием солей тяжелых

металлов, нитратов, масляной кислоты и др.)

На эмбриогенез отрицательно влияют слишком низкий и слишком

высокий энергетические уровни питания. При голодании в крови резко

снижается уровень глюкозы, что нарушает гонадотропную функцию

гипофиза, вследствие этого ухудшается процесс имплантации и зародыш

гибнет. У ожиревших животных оплодотворение может не произойти из-за

биологической неполноценности яйцеклеток или гибели зародыша на ранних

стадиях эмбриогенеза. Отрицательно влияет дефицит незаменимых

аминокислот, а избыток концентрированных кормов в рационе при

недостатке грубых и сочных резко снижает оплодотворяемость самок и

30

жизнеспособность новорожденных. Для физиологически полноценной

беременности большое значение имеет достаточное содержание в кормах

макро- и микроэлементов, играющих существенную роль как в кислотно-

щелочном балансе, так и в биосинтезе необходимых биологически активных

веществ (Л.Н. Бахмут, А.В. Вагенлейтнер, Г.А. Кононов, Л.Д. Римарова, В.Н.

Столбов, О.Л. Харитошин, Л.М. Шалявина, 1994).

б) Неправильное содержание (ограниченный моцион или полное его

отсутствие, содержание глубокостельных коров и нетелей вместе с

небеременными животными, нарушение требований зоогигиены и др.)

Нежданов А.Г. и др. изучал влияние теплового стресса на

функциональную активность яичников в ранний период эмбриогенеза у

коров. Исследования показали, что в летний жаркий сезон года при

температуре 24…270С на 11…13 день осеменения у 42,9% животных была

обнаружена низкая гормонопродуцирующая активность желтого тела.

Концентрация прогестерона в крови была равна 0,97… 2,17 нг/мл.

Температурный стресс в период проявления половой цикличности,

осеменения и оплодотворения, внутриутробного развития эмбриона и

формирования фетоплацентарной системы отрицательно влияет на

воспроизводительную функцию животных и внутриутробное развитие плода

как во время воздействия этого фактора, так и при завершении периода

плодоношения.

Оплодотворяемость коров зависела от содержания прогестерона в

крови. При концентрации прогестерона 3 нг/мл оплодотворяемость составила

около 50%, в то время как при концентрации более 3,3 нг/мл – 81,2%. При

низкой функциональной активности желтого тела и недостаточной секреции

прогестерона авторы наблюдали слабую секрецию железистых клеток

эндометрия. В результате в матке нарушились условия питания и развития

зародыша, что могло быть причиной его гибели на ранних стадиях развития

или проявления синдрома отставания в развитии эмбриона, плода и плаценты

(А.Г. Нежданов, К.Г. Дашукаева, 1995).

31

в) Неправильная эксплуатация животных (преднамеренное удлинение

лактации, с целью получения большего количества молока за одну лактацию,

несвоевременный запуск, использование молодых животных, не достигших

физиологической зрелости).

Эмбриональная смертность может быть вызвана несвоевременным

осеменением в период течки, которое может привести к развитию

нежизнеспособного приплода; осеменение в чрезмерно ранние сроки после

родов во время инволюции матки. При осеменении таких коров, в некоторых

случаях возникают заболевания органов размножения и бесплодие.

Оплодотворение яйцеклетки может наступить при раннем послеотельном

осеменении, так как это происходит в яйцеводе, но имплантации зародыша в

матке не наступает, что ведет к его гибели (В.И. Нетеча, Т.В. Агалакова,

Ю.Н. Щепина, 2005).

Полигиповитаминозное состояние, фосфорно-кальциевая, макро- и

микроэлементная недостаточность, интоксикация ингредиентами кормов,

снижение резервной щелочности крови с развитием ацидоза разной степени

приводят к снижению общей резистентности организма и вызывают

нарушения тканевого обмена в органах полового аппарата. Возникают

расстройства регионального кровообращения. Изменения

микроциркуляторной гемодинамики приводят к изменениям в газовом,

кислотно-солевом, водно-солевом, аминокислотном составе содержимого

половых путей самки, что препятствует нормальному протеканию

оплодотворения, развитию зиготы, бластоцисты, ее нидации и имплантации.

Недостаточная секреция железами эндометрия гликогена,

мукополисахаридов, глюкозы, изменения гормонального баланса нарушают

условия питания бластоцисты, при этом увеличиваются пренатальные

потери, число животных с перерывами в половых циклах от 1 до 6 месяцев

(В.А. Середин, 2004.).

Установлено, что на ранних стадиях развития зародыша существуют

кратковременные периоды особенно высокой чувствительности к

32

повреждающим агентам. Эти периоды называются критическими периодами

развития.

Положил начало о так называемых критических периодах развития

животных организмов Ц.Р. Стоккард, 1921 (Англия). Термин «критические

периоды» ввел П.И. Броунов, 1897 (он говорил о периодах наибольшей

чувствительности сеянцев злаков, всходов картофеля и др.).

Критические периоды являются узловыми точками развития, когда

определяются условия для осуществления одного из основных этапов

развития зародыша в целом или отдельных его зачатков (П.Г. Светлов, 1934).

П.Г. Светлов различает 3 группы воздействий внешней среды:

1) Повреждающие воздействия, приводящие к смерти или вызывающие

патологические явления.

2) Модифицирующие воздействия внешней среды, вызывающие отклонения

от нормы, - эти отклонения не носят патологического характера («морфозы»,

мутации).

3) Закономерное действие среды, обеспечивающее «норму развития». Эти

воздействия (наличие кислорода, питание, температура и т.д.) не бросаются в

глаза, но они-то и представляют наибольший интерес для эмбриологии (А.М.

Петров, Г.М. Удалов, 2009).

Первый критический период предшествует стадии клеточного роста,

когда мелкие клетки, на которые раздробилась зигота, - бластомеры – еще

равноценны морфологически и функционально. Второй период

соответствует началу образования двух специализированных клеточных

слоев: внутренний выполняет функцию усвоения пищи, а наружный –

защитную. Наконец, третий период – это начало образования нервной

пластинки (будущей нервной системы) и осевого скелета – хорды. Эти

критические периоды являются общими для всех позвоночных животных, в

том числе и сельскохозяйственных. Однако тщательные наблюдения за

ходом развития зародыша млекопитающих показывает, что фактически

критических моментов бывает больше (Н.А. Мартыненко 1971).

33

Изучая ранний эмбриогенез свиньи, А.В.Квасницкий пришел к

заключению, что одним из переломных, трудных для зародыша периодов

является момент денудации бластоцисты. Эластические свойства zona

pellucida допускают значительное ее растяжение стенками растущей

бластоцисты. Однако наступает такой момент, когда для дальнейшего

развития зародышу необходимо выйти из прозрачной оболочки. Многие из

молодых зародышей, как показали исследования А.В. Квасницкого, не

выдерживают во время выхода из прозрачной оболочки резкой смены

условий и гибнут (А.В. Квасницкий, 1967).

Наибольшую эмбриональную смертность животных устанавливали

между 8-м и 16-м днем после оплодотворения, то есть в период

освобождения из прозрачной оболочки бластоцист (P. Humblot, M.A. Dalla

Porta, J.Z. Echwartz, 1982, J.P. Berain, 1984).

Следующий критический период в жизни зародыша млекопитающих

наблюдается во время установления первичной связи его с материнским

организмом – имплантации (П.Г. Светлов, 1960).

Исследования П.Г. Светлова и его учеников показали наличие второго

пика эмбриональной смертности во время формирования аланто –

хориальной плаценты.

Факторами, способствующими нарушению плацентации в

естественных условиях, могут быть: недостаток витаминов (в частности,

витамина А), генетическая несовместимость матери и плода, нарушения

гормонального равновесия в организме матери, внедрение в половые пути

самки патогенных микробов, резкие отклонения от оптимума климатических

условий и т. п. (Н.А. Мартыненко 1971).

Имеются сообщения о способах повышения оплодотворяемости и

профилактике ранней эмбриональной смертности с применением следующих

схем:

- Введение ХГЧ (хорионический гормон человеческий) на 4-11-й день

после осеменения повышало концентрацию прогестерона на 0,9 нг/мл, а

34

оплодотворяемость – на 37% (K.F. Brenel et al., 1989), инъекция прогестерона

на 3-10-й день повышала оплодотворяемость на 30% (Г.И. Судаков, и соавт.,

1990; J.S. Stevenson, M.O. Mee, 1991).Инъекция на 4-7-й день Гн-Рг также

способствует повышению оплодотворяемости на 5-12% (K. Okyere, H.

Bostedt, 1986; R.Clays, H. Zwianes, 1993; K.L. MacMillan et al., 1994) (А.М.

Чомаев, Ч.Б. Колодиев, 2003).

- Назначение холиномиметических препаратов (прозерина,

карбохолина, фурамона и др.) в критические периоды эмбрионального

развития (2, 9, 20 дней после осеменения) способствуют увеличению до 40%

сохранности оплодотворения (Б. Муртазин, Г. Пулатов, 1994).

- Г. Елезов и соавт. (1981) сообщили, что после введения в матку

коровам, которых до этого один – семь раз безрезультатно осеменяли, по 500

тыс. ЕД. пенициллина и стрептомицина в 50 мл 7%-ного раствора глюкозы

оплодотворилось 50,4%, в контроле – 26,1%.

- Введение в полость матки бесплодным коровам

йодвисмутсульфамида на полимерной основе в дозе 15 мл. через 30 – 60 мин

после искусственного осеменения повышает их оплодотворяемость в первую

стадию возбуждения полового цикла с 10 – 18 до 58,3 – 72,7%, при этом

сокращается на 36 – 40 дней срок от отела до оплодотворения (Н.И.

Полянцев, 1985).

- Е.В. Михайленко, (2000), рекомендует проводить двукратную

внутримышечную иммунизацию специфическими иммуномодуляторами

(спермиями быков-производителей) в дозе 2х10 спермиев/мл в первые сутки

после осеменения (16).

- Л.Н. Бахмут и сотр. для борьбы с эмбриональной смертностью

использовали комплекс препаратов по следующей схеме. Витамин А в дозе 1

млн. ИЕ и витамин Е в дозе 0,9 г инъецировали коровам внутримышечно 2-

кратно на 3 и 14…16 сутки после искусственного осеменения.

Дополнительно к витаминам вводили прогестерон в дозе 70 мг

внутримышечно на 3-и сутки после осеменения. В итоге выживаемость

35

эмбрионов у коров опытной группы была выше на 16,3%, чем в контроле, а

сервис-период короче на 11,8 суток.

Дополнительное 3-х кратное введение прогестерона в этой же дозе на

5,7,9-й дни после осеменения улучшило выживаемость до 19,4% и сервис-

период стал меньше на 23,9 дней (Л.Н. Бахмут, А.В. Вагенлейтнер, Г.А.

Кононов, Л.Д. Римарова, В.Н. Столбов, О.Л. Харитошин, Л.М. Шалявина,

1994).

-Использование антиоксиданта колицина Е2 в комплексе с тетравитом

и сурфагоном. Наиболее высокие результаты получены в группе, где

применяли колицин Е2 в дозе 10 мл, тетравит 10 мл однократно в течение

месяца: гибель ранних эмбрионов снизилась на 24,2%, сервис-период был

короче на 43,4 дня по сравнению с контрольной группой животных (Н.А.

Мартыненко, 1972).

-Трех-пятикратное введение различных доз прогестерона коровам

снижало эмбриональную смертность на 10-15% (K.R. Johnson, R.H. Ross, D.

Fourt, (1958), А.П. Устинов, (1979)). Десятикратное введение 1000 – 1500 ИЕ

ХГ или 100 мг прогестерона, начиная с 10-го дня после осеменения,

повышало оплодотворяемость телок на 10-13% (L.M. Morris, E. Gonzalez-

Padillae, G.D. Niswender, J.N. Wiitbank, 1976).

-М.И.Прокофьев и соавт. предлагают в качестве способа снижения

эмбриональной смертности у коров однократное применение прогестагена

пролонгированного действия 17-КОП в дозе 1500 мг, в сочетании с 10 мг

эстрадиола бензоата. В результате такой обработки эмбриональная

смертность у первично осеменяемых коров сократилась с 36,1 до 12,5%, а у

многократно осеменяемых с 45,4 до 13,3% (М.И. Прокофьев, В.Я. Черных,

В.М. Долженков, Г.М. Кадатский, 1983).

Введение коровам на начальных стадиях развития эмбриона

биологически активных веществ позволяет снизить их гибель, сервис-период

и индекс осеменения.

36

Правильная и своевременная постановка диагноза даст возможность

организовать целенаправленную профилактику гибели ранних эмбрионов и

повысить продуктивность молочного скота.

1.5. Методы диагностики стельности у коров

Чтобы правильно организовать работу по воспроизводству поголовья,

необходимо организовать диагностику беременности и бесплодия. А.П.

Студенцов (1949; 1950; 1953) все существующие методы диагностики

беременности подразделил на две группы: методы клинической диагностики,

включающие анамнез, наружное и внутреннее исследование - ректальное и

вагинальное, и методы лабораторной диагностики путем исследования крови,

мочи, молока, обнаружения гормонов, прочие лабораторные способы. Я.Г.

Губаревич (1949) выделил метод внешних признаков или

рефлексологический метод и рентгеноскопию. Значительный технический

прогресс во вторую половину XX века позволяет выделить раздел

исследования беременности диагностическими приборами (аппаратные

методы): ультразвуковую эхографию или ультрасонографию, инфрад,

рентгенологический, радиографический и другие методы.

Анамнезом выявляются вероятные (неспецифические) и истинные

признаки беременности, например движение плода. Я.Г. Губаревич считает,

что отсутствие охоты через 3-4 недели после покрытия указывает обычно на

беременность. В.С. Шипилов предложил применять быков-пробников для

более точного выявления отсутствия охоты в сроки, когда она должна

появиться, однако при наличии инфекционных заболеваний в стаде это не

всегда возможно.

Самым точным клиническим методом является ректальное

(интерректальное) исследование, разработанное Н.Ф. Мышкиным (1931),

позволяющее с большой объективностью диагностировать беременность И

37

бесплодие. Основным является точное выявление топографии небеременной

матки.

В настоящее время все большее значение приобретают аппаратные

методы, или исследования диагностическими приборами, которые позволяют

выявить беременность уже в ранние сроки, что значительно облегчает работу

специалистов.

Особое значение имеет ультразвуковая эхография или

ультрасонография - это ультразвуковая диагностика получения изображения

среза внутренних органов, соответствующее их реальным размерам и

состоянию. Описан новый ультразвуковой прибор - электронное секторное

сканирующее устройство с кольцевым секционным искателем со сдвигом фаз

(К.Х. Курц).

Конструктивные особенности современных УЗИ позволяют

объединить их в единый комплекс с современной видеоаппаратурой,

компьютерами, принтерами, позволяя записывать и сохранять полученную

сканером видеокартинку внутренних органов животных, достоверно

документировать факт беременности.

Фирма «Букинвест» (г. Черновцы) предлагает прибор «Инфрад» для

ранней диагностики стельности у коров, который способен регистрировать

градиент мощности теплового излучения в различных зонах тела животного

и, в отличие от общеизвестных способов диагностики, выполняется

дистанционно, бесконтактным способом на 18-20-й день после

плодотворного осеменения с достоверностью наличия стельности 90-92%.

Из-за высокой стоимости аппаратуры радиографический,

рентгенологический и другие аппаратные методы применяются в основном в

научно-исследовательской работе, хотя ультразвуковая диагностика

приобретает все большее производственное значение.

Из лабораторных методов наибольшее значение имеет определение

прогестерона в молоке. Определение уровня прогестерона возможно методом

радиоиммуного анализа (Robertson H.A. аnd Sаrdа I.R., 1971).

38

Радиоиммунологический метод определения концентрации прогестерона в

крови или молоке на 19-24-й дни после осеменения позволяет со 100%-й

достоверностью установить стельность. Метод основан на том, что ЖТБ

вырабатывает прогестерон в течение всего периода стельности. Его

концентрация с 5-7-го дня после осеменения увеличивается, достигая пика на

12-17-й день, и если беременность не наступает, то за 1-3 дня до очередного

ПЦ содержание прогестерона резко падает с 4,9 нг/мл и больше до 1,7 нг/мл.

Начиная с 1992 года фирма «Биорепродукция» начала производство наборов

для цветной реакции, с помощью которых визуально прямо на ферме можно

за 2-3 минуты определить уровень прогестерона в молоке и, таким образом,

достоверно установить наличие или отсутствие стельности.

Также уровень прогестерона можно определить методом

иммунноферментного анализа, который чаще используется в последнее

время, потому что он точнее и можно проводить его в обычной лаборатории

(Nakao T. Еt al, 1982, Sauer M.L. Еt аl, 1986, Elmore G., 1986).

Ценность этого метода в том, что он позволяет определить отсутствие

беременности раньше, чем другие методы, например, ректальное

исследование (Arthur G.H. Et al, 1989). Наивысшая точность, возможная при

применении этого метода, это 76-85% у беременных коров (Dobson H. Аnd

Fitzpatrick R., 1976, Gоwаn E.W. Еt аl, 1982, Heаp R.B. Аnd Hоldsworth R.J.,

1981, Pеnnington J.А. Еt al, 1976). Высокая возможность ошибочного

установления беременности возникает из-за того, что:

1. Пробы крови или молока получены не в период 21-24 дня со дня

осеменения.

2. Осеменение произведено не вовремя.

3. Различной продолжительности полового цикла у коров.

4. Возможно продолжение продуцирования прогестерона желтым телом

при наличии различных патологий: заболевания матки и яичников,

ранняя внутриутробная гибель плода (Noakes D., 1985, Elmore G.,

1986).

39

Осадочная реакция на стельность (В.П. Короткоручко, И.И. Кузьменко,

1965). В основе ее лежит принцип выявления в сыворотке крови стельных

животных белка, характерного для состояния беременности (одна из

популяций иммуноглобулина G). Постановка этой реакции требует наличия

соляной и серной кислот марки «ХЧ» или «ЧДА» и рН-метра, следовательно,

не всегда возможна на ферме. Начиная с 16-го дня после осеменения

точность метода по группе стельных животных составляет 86,9-97,3%, а

группе нестельных 92,2-97,8%.

Другие лабораторные методы, ввиду кропотливости и низкой

производительности, имеют малое значение в производственных условиях.

Заключение

На сегодняшний день существует большое количество проблем,

препятствующих повышению воспроизводительной способности коров.

Существует необходимость разработки более действенных и надежных

способов ранней диагностики нормы и патологического состояния органов

размножения, а также методов ранней диагностики стельности коров с целью

сокращения сервис-периода.

40

2. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1. Материалы и методы

Исследования по теме диссертации проводились с 2008 по 2010 гг. на

кафедрах акушерства, гинекологии и биотехники репродукции

сельскохозяйственных животных, в лабораториях кафедр микробиологии и

радиобиологии Московской государственной академии ветеринарной

медицины и биотехнологии им. К.И. Скрябина и в МТФ «Бессоново»

Воскресенского района Московской области, учебном хозяйстве МГАВМ и Б

им. К.И. Скрябина.

Под наблюдением в период исследований находились коровы черно-

пестрой породы с удоем 3200 кг молока за лактацию. Доение, кормление,

снабжение водой и уборка навоза механизированы. Животные регулярно

подвергались ветеринарно-санитарному осмотру и профилактическим

обработкам. В период опытов хозяйство было благополучно по

инфекционным и инвазионным болезням.

Объектом исследования служили 20 коров. Из них были сформированы

две группы: одна опытная и одна контрольная по 10 голов в каждой.

Животных подбирали по принципу аналогов.

Для разработки экспресс-метода морфологической дифференциальной

диагностики состояния органов размножения после отела, а также

фармакопрофилактики послеродовых заболеваний (субинволюции матки,

клинических и скрытых эндометритов) у коров нами были использованы

несколько методов исследования. Предметом исследования были пробы

маточных выделений.

41

2.1.1. Применение АЛП для диагностики состояния половых

органов у коров

В основу экспресс-метода морфологической дифференциальной

диагностики нормально протекающей беременности и эмбриональной

смертности (ЭС) нами был взят анализ мазка, полученный из пробы

маточных выделений. Пробы брали акушерской ложкой Панкова Б.Г. (АЛП),

которая была запатентована в 2001 г. АЛП извлекается из футляра,

содержащего 70 % спирт ректификат, затем вводится во влагалище до шейки

матки. Затем АЛП поворачивается открытой стороной ко дну влагалища и с

легким нажимом извлекается с образцом слизи (от здоровой коровы) или

экссудата (при болезни). Задача решается за счет того, что ложка для взятия

образцов (секрета при норме или экссудата при патологии) снабжена

цилиндрическим футляром и тест карточкой. Ложка и футляр для нее

изготовлены из полипропилена, стойкого к дезинфицирующим веществам:

70 % - ному раствору карболовой кислоты или перекиси водорода.

Ложка состоит из круглого стержня с эллипсоидной ложечкой с одного

и плоской ручкой с другого конца эластично упругого стержня. На плоскости

ручки, со стороны открытой части эллипсовидной ложечки, имеется

углубление для контроля положения ложечки в «глубине» влагалища

животного. Для закрепления ложки в футляре, на границе стержня имеется

конус с диаметрами 23 и 27 мм, совпадающим с коническим расширением на

футляре. Плотное соприкосновение конусов ложки и футляра предотвращает

разлив дезосредств из футляра.

Стерильность ложки поддерживается протиранием ее сухим ватным

тампоном после отбора образцов слизи-экссудата и помещением ее в футляр,

который заранее налит дезинфицирующий раствор в объеме 60 – 80 мл.

Размеры отдельных частей и ложки в целом соответствуют

анатомическим особенностям строения родовых путей коров и

эргономически мотивированы. Длина стержня АЛП – 27 см., что вполне

42

достаточно для взятия образцов маточной слизи или экссудата, а также для

определения топографии шейки матки в тазовой полости. Определение

топографии шейки матки позволяет оценить степень инволюции или

субинволюции матки в аспекте отдельных форм течения патологического

процесса. По цвету, консистенции, запаху и примесям в образце можно

диагностировать норму или конкретную патологию в половых органах самок

крупного рогатого скота.

В комплект устройства входит тест карточка для помещения на нее

образца секрета или экссудата и сравнения их с цветными метками,

нанесенными на нее. В верхней части тест карточки имеется отверстие для

закрепления ее с возможностью перемещения на шнуре. Она выполнена из

полимерного материала белого цвета, например, на пластиковой бумаге,

ламинированной с двух сторон полипропиленовыми пластинами. Поэтому не

смачиваются при обработке дезинфицирующими растворами, они не

окрашивают поверхность тест-карточки, а после протирания сухой ватой на

карте не остаются царапины.

В центре тест карточки имеется начерченный овал, на котором

помещается образец и визуально сравнивается по цвету и прозрачности

(мутности) с цветными метками, каждая из которых соответствует цвету

лохий или экссудата, находящегося в половых органах коров (и в образце) во

время определенной фазы нормального или формы патологического

состояния половых органов. Каждый цветной овал на тест-карте к АЛП

подписан названием формы клинического эндометрита, нормальной

инволюции или субинволюции матки. Для взятия образца маточно-

влагалищных выделений и постановки диагноза затрачивается 30 секунд на

корову или телку.

При субинволюции матки цвет лохий меняется также как и при

инволюции (стадийно), но каждая из трех стадий длится дольше на 4 – 18

дней.

43

При клинических и скрытых эндометритах цвет и консистенция

экссудатов в пробе различна:

- острый гнойно-катаральный эндометрит – экссудат жидкий,

серобурого или желто-бурого цвета;

- катарально-гнойный – экссудат мутная слизь с примесью желтовато-

белых хлопьев гноя;

- фибринозный – экссудат жидкий серо-коричневого цвета;

- некротический – экссудат красно-бурого цвета с примесью сгустков

фибрина в виде пленок или зернышек (крошковатых включений) серого

цвета;

- гангренозный септический – экссудат буро-красного (почти черного)

цвета с примесью кашицеобразных или отрубьевидных масс разлагающихся

тканей;

- хронический эндометрит – экссудат мутный, слизистый, слизисто-

гнойный сливкообразной консистенции с примесью прожилок и хлопьев

гноя;

- скрытый эндометрит – экссудат в виде прозрачной или мутноватой

слизи объемом 0,5 – 1 мл с включением нити или комочка гноя.

По мере выздоровления животного в образце маточной слизи, взятой из

влагалища, снижается содержание включений, слизь светлеет и густеет,

становится прозрачной. Если такую слизь поместить на тест-карточку, то

цвет фона карты не изменится. Такое животное выздоровело от заболевания

эндометритом.

Диагностика осуществляется следующим образом:

В день использования акушерской ложки (устройства) в ее футляр

наливают 60 – 80 мл 70%-ного раствора спирта.

Перед взятием образца слизи или экссудата из влагалища половые губы

вытирают насухо от кала и воспалительного экссудата ватным тампоном.

44

Затем одна из половых губ отводится в сторону (наружу), сферической

частью ложка прижимается к стенке влагалища. Удерживая стержень ложки

под углом 35 – 45°, снизу вверх, она вводится на 8 – 12 см во влагалище по

его верхней стенке, затем ей придают горизонтальное направление и

поочередно прижимая выпуклой стороной ложки к левой – правой стенке

влагалища, вводят рабочую часть (сферическую ложечку) под шейку матки

(в вентральный свод влагалища).

Образец слизи или экссудата помещают на площадку, очерченную на

тест карточке (овал) и сравнивают цвет взятого образца с цветными метками

на карточке. Диагноз ставится на основании сходства цвета и фона образца с

цветом и фоном одной из меток и с учетом срока, прошедшего со дня отела.

После взятия образцов маточной слизи или экссудата из влагалища

ложка тщательно очищается тампоном белой ваты, начиная с удаления слизи

или экссудата из эллипсовидной части, затем очищают ее стержень по

направлению к ручке. Чистая ложка опускается в футляр с

дезинфицирующим раствором, например, спиртом и дезинфицируется до

момента взятия образцов слизи или экссудата у следующего животного.

Использование устройства для диагностики состояния половых

органов у коров показало, что по сравнению с известными техническими

решениями предложенное устройство позволяет получать необходимое

количество маточной слизи или экссудата из влагалища, независимо от

стадии полового цикла, не травмируя его слизистую оболочку. Кроме того,

использование устройства во многих случаях исключает необходимость в

проведении ректального исследования для диагностики, например при

инволюции и субинволюции матки, сапремии, дифференциальной

диагностике клинических эндометритов, для диагностики скрытых

эндометритов в стадию уравновешивания полового цикла (ректальным

исследованием он не диагностируется), дифференциальной диагностике

наличия в яичнике персистентного желтого тела, желтого тела полового

цикла или фолликула, фолликулярных кист от лютеиновых.

45

Только по образцам слизи или экссудата, отобранных с помощью

предложенного устройства можно за 30 сек. поставить диагноз на норму, а

при своевременной и быстрой диагностике клинических и скрытых

эндометритов (в стадию уравновешивания полового цикла) или заболевания

яичников имеется возможность провести своевременное эффективное

лечение, пока в половых органах не произошли необратимые патологические

изменения. Это позволяет успешно бороться с бесплодием у коров и телок.

2.1.2. Методика приготовления мазков маточных выделений.

Для получения мазка образец маточно-влагалищных выделений

помещался на предметное стекло, смешивался стеклянной палочкой с

несколькими каплями физиологического раствора. При смешивании сгусток

и примеси отмывались от включений и примесей, а из жидкой части брали

каплю смыва для приготовления мазка. Мазок высушивали, фиксировали и

окрашивается по методу Романовского. Приготовленный мазок изучали под

микроскопом. Проводился подсчет в каждом мазке 100 клеток (клетки

влагалища, шейки, тела и рогов матки, яйцепроводов, лимфоциты,

нейтрофилы, гнойные тельца, процент фагоцитоза). После чего выводили

два критерия: тканевой индекс и токсический фактор, которые

характеризуют состояние половых органов. Мазки маточных выделений

приготавливали на 6, 9, 12, 15, 19 – 21, на 50-ый дни после отела, у коров

опытной и контрольной группы. Всего приготовлено и изучено 150 мазков.

2.1.3. Применение схемы ранней диагностики,

фармакопрофилактики и лечения послеродовых осложнений у коров

С целью снижения случаев возникновения послеродовых заболеваний в

опытной группе была применена таблица 1.

46

Таблица 1. Схема ранней диагностики, фармакопрофилактики и

лечения послеродовых осложнений у коров (разработчик Б.Г.Панков).

Дни

новотель

ности

Диагноз Способы

Профилактика Лечение

1-2 Задержание

последа

внутримышечно 4-5мл

препарата гетеротон

через 3-4 ч после

выхода плода

Через 48ч после отела

внутриматочно ввести

20г порошка ФЛЭКС-2 в

80мл разбавителя

2-4 Задержание

последа до 48ч

Однократное

внутриматочное

введение 20г порошка

ФЛЭКС-2 в 80мл 7%-

го раствора ихтиола

Через 2-3 дня после

введения в матку

препарата ФЛЭКС-2

вытянуть послед

натяжением руки

3-12 Субинволюция

матки

Профилактика

субклинических

кетозов

Если проведена

фармакопрофилактика на

3-й день, то инъекции

проводят на 6, 9 и 12-й

дни после отела

4-10 Клинические

эндометриты

Профилактика кетозов

и патологических

родов, соблюдать

стерильность при

акушерской помощи.

Однократное

внутриматочное

введение 20г порошка

ФЛЭКС-2 в 80мл 7%-

го раствора ихтиола

3кратное с 7дневными

интервалами,

внутриматочное введение

по 20гр порошка

ФЛЭКС-2 в 80мл

разбавителя

15 Скрытые

эндометриты

Диагностируется АЛП

за 10-12 дней до

запланированного

осеменения

Однократное

внутриматочное введение

10гр препарата ФЛЭКС-2

в 50мл разбавителя

2.1.4. Применение суспензии ФЛЭКС-2 в сочетании с миотропным

препаратом «Гетеротон»

С целью профилактики и лечения клинических и скрытых

эндометритов применялась суспензия ФЛЭКС-2. При внутриматочном

47

введении препарат оказывает бактерицидное, кровоостанавливающее,

сосудосуживающее, антитоксическое, противовоспалительное,

дезодорирующее и регенеративное действие на слизистую оболочку матки

животных.

Препарат ФЛЭКС-2 состоит из порошковой и жидкой частей.

Порошковая часть препарата ФЛЭКС-2 упаковывается в черные

полиэтиленовые пакеты (герметично) по 500,0 гр. (25 доз). Жидкая часть

расфасовывается раздельно по 250 мл. в пластмассовые флаконы емкостью

300 мл. с завинчивающимися крышками.

ФЛЭКС-2 – раствор-суспензия для внутриматочного введения коровам,

больным эндометритами. Применение данного препарата в ветеринарной

практике позволяет резко сократить процент заболеваемости животных

клиническими и скрытыми эндометритами даже в период стойлового

содержания (октябрь – май). Лечение скрытых эндометритов в течение всего

календарного года позволяет существенно сократить сервис-период, снизить

индекс осеменения и предотвратить экономический ущерб, вызываемый

бесплодием.

При использовании ФЛЭКС-2 не происходит «привыкания» и потери

чувствительности патогенной и условно-патогенной микрофлоры к данному

препарату. ФЛЭКС-2 обладает пролонгированным комплексным лечебно-

профилактическим действием, что позволяет значительно сократить

количество лечебных процедур, добиваясь при этом максимального эффекта.

Следует отметить, что ФЛЭКС-2 не прижигает слизистую оболочку матки,

способствует ее быстрой регенерации. Препарат безвреден для спермиев,

искусственное осеменение можно проводить через 6 дней после последнего

внутриматочного введения препарата. ФЛЭКС-2 является экологически

чистым препаратом, т.к. его активное вещество не растворимо в воде и

тканевых жидкостях, не всасывается в кровь, не обнаруживается ни в мясе,

ни в молоке животных, находящихся на курсовом лечении. Препарат

обладает максимально широким спектром бактерицидного действия на

48

вегетативные формы условно патогенных и патогенных микроорганизмов,

поэтому отпадает необходимость в предварительной его подтитровке на

чувствительность к биологическим агентам, осложняющим воспалительные

процессы в матке животного.

Препарат ФЛЭКС-2 нельзя использовать для коров с заболеванием

почек; убой животных на мясо производится через 3 дня после последнего

внутриматочного введения препарата ФЛЭКС-2.

Таблица 2. Показания, дозировка и схема применения препарата

ФЛЭКС-2

Показания к

применению

Кратность

применения

(внутриматочно)

Количество

порошка

Объем 10%-го

раствора ихтиола

с содержанием

3% перекиси

водорода

Профилактика Однократно на 3-

5-й день после

отела

20,0 гр. 90,0 мл.

Лечение

клинических

эндометритов

3-кратно с 7-

дневными

интервалами

между

введениями

По 20,0 гр. По 90,0 мл.

Лечение скрытых

эндометритов

Однократно за

12-15 дней до

иск. осеменения

5,0 гр. 15,0 мл.

(примечание: жидкая часть препарата готовится в день использования и

смешивания с порошковой частью в шприце непосредственно перед

внутриматочным введением)

Преимущества препарата ФЛЭКС-2 при лечении и профилактике

эндометритов у коров.

49

1. Активнодействующее вещество препарата ФЛЭКС-2 не растворимо в

виде и тканевых соках и поэтому не всасывается в кровь и его не

обнаруживают ни в молоке, ни в мышечной ткани животных,

находящихся на курсовом лечении, в результате чего ФЛЭКС-2

является экологически чистым;

2. Препарат ФЛЭКС-2 при внутриматочном введении не прижигает

слизистую оболочку матки и способствует быстрой ее регенерации;

3. Препарат бактерициден почти для всех вегетативных форм патогенных

и условно-патогенных микроорганизмов и поэтому нет необходимости

в подтитровке его на чувствительность к микроагентам, осложняющим

воспалительный процесс в матке коров;

4. За семь лет испытания препарата ФЛЭКС-2 для профилактики и

лечения клинических и скрытых эндометритов у коров не наблюдалось

«привыкания» и потери чувствительности патогенной и условно-

патогенной микрофлоры к препарату, поэтому нет необходимости

закупать большой перечень препаратов, обладающих ограниченными

спектрами бактерицидного действия;

5. Препарат обладает пролонгированным комплексным лечебно-

профилактическим действием и поэтому достаточно однократного

внутриматочного введения для профилактики клинических и лечения

скрытых эндометритов, а при лечении клинических эндометритов

препарат вводится в матку один раз в неделю и животное

выздоравливает после трех лечебных процедур;

6. Компоненты препарата сохраняют лечебную активность в течение 5-10

лет;

7. Препарат безвреден для спермиев и плодотворного осеменения, если

он вводится в матку за 6 и более дней до запланированного

искусственного осеменения;

8. Внедрение «Технологии фармакопрофилактики», лечения клинических

и скрытых эндометритов у коров препаратом ФЛЭКС-2, позволяет

50

резко сократить частоту заболеваемости клиническими эндометритами

в период стойлового содержания (октябрь-май), когда это заболевание

достигает своего максимума. Лечение скрытых эндометритов в течение

всего календарного года при равномерных отелах, за 12-15 дней до

осеменения позволяет резко сократить сервис-период, снизить индекс

осеменения и предотвратить экономический ущерб от бесплодия.

Для профилактики гипотонии и атонии матки, с целью недопущения

субинволюции матки применялся препарат «Гетеротон».

«Гетеротон» – комплексный препарат, представляет собой бесцветную,

прозрачную жидкость без запаха, содержит триметилэтанаминия хлорид.

Преимущественно действует на периферические холинэргитические

структуры, стимулируя окончания М- Н-холинорецепторы (холиномиметик).

Усиливает сокращение гладких мышц матки, желудочно-кишечного тракта,

мочевого пузыря и других органов, не проникает через

гематоэнцефалический и плацентарный барьеры.

«Гетеротон» применяли для повышения тонуса матки при слабости

родовых потуг, при задержании последа, для предупреждения и лечения

субинволюции матки, эндометритах различной этиологии. «Гетеротон»

вводили коровам подкожно и внутримышечно: при задержании последа – по

1,5 мл на 100 кг живой массы, через 3-4 часа после выхода плода, а затем

через 24 часа; при эндометритах по 1,5 мл на 100 кг трехкратно через 48

часов.

2.1.5. Методика ректального исследования коров на норму и

патологию половых органов и диагностики стельности

В опытной и контрольной группах применялся метод ректальной

диагностики состояния органов размножения у коров в норме и при

патологических состояниях, а также диагностика стельности на 90-ый день

после отела.

51

2.1.6. Диагностика стельности при применении иммунно-ферментного

анализа

С целью определения уровня прогестерона в коровьем молоке применялся

иммунно – ферментный анализ. Определение прогестерона основано на

использовании конкурентного иммуноферментного анализа. На внутренней

поверхности лунок планшета иммобилизованы мышиные моноклональные

антитела к прогестерону. Прогестерон в коровьем или козьем молоке из

образца конкурирует с конъюгированным прогестероном за связывание с

антителами на поверхности лунки. В результате образуется связанный с

пластиком «сэндвич», содержащий пероксидазу. Во время инкубации с

раствором субстрата тетраметилбензидина (ТМБ) происходит окрашивание

растворов в лунках. Интенсивность окраски обратно пропорциональна

концентрации прогестерона в исследуемом образце. Концентрацию

прогестерона в исследуемых образцах определяют по калибровочному

графику зависимости оптической плотности от содержания прогестерона в

калибровочных пробах.

При работе по определению концентрации прогестерона были в

наличии: планшет 96-луночный полистироловый, стрипированный;

калибровочные пробы на основе трисбуфера (рН 7,2-7,4), содержащие

известные количества прогестерона – 0; 1; 3; 10; 30; 100 нг/мл., (по 0,8 мл.

каждая); конъюгат (22 мл.); раствор субстрата тетраметилбензидина (ТМБ),

(11 мл.); концентрат отмывочного раствора, 21-х кратный (22 мл.); стоп-

реагент (11 мл.); бумага для заклеивания планшета; фотометр вертикального

сканирования, позволяющий измерять оптическую плотность содержимого

лунок планшета при длине волны 450 нм.; термостат, поддерживающий

температуру +37±0,1 °С; дозаторы со сменными наконечниками,

позволяющие отбирать объемы в диапазоне 25-250 мкл.; мерный цилиндр

вместимостью 500 мл.; вода дистиллированная; перчатки резиновые или

пластиковые; бумага фильтровальная.

52

В начале поместили в рамку необходимое количество стрипов –

исследуемые образцы в 2 повторах и 12 лунок для калибровочных проб.

Затем внесли в соответствующие лунки в дубликатах по 25 мкл.

калибровочной пробы. В остальные лунки внесли в дубликатах по 25 мкл.

исследуемых образцов коровьего молока. Внесение калибровочных проб и

исследуемых образцов производилось в течение 5-10 минут. Внесли во все

лунки по 200 мкл. конъюгата, заклеили планшет бумагой для заклеивания

планшета и инкубировали его в течение 60 минут при температуре +37 °С.

По окончании инкубации удалили содержимое лунок и отмыли лунки 5 раз.

При каждой отмывке добавляли во все лунки по 250 мкл. отмывочного

раствора, встряхнули планшет круговыми движениями по горизонтальной

поверхности с последующей аспирацией или декантированием. Задержка при

отмывке (замачивание лунок) не требуется. При каждом декантировании

тщательно удалили остатки жидкости из лунок постукиванием планшета в

перевернутом положении по фильтровальной бумаге. Затем внесли во все

лунки по 100 мкл. раствора субстрата тетраметилбензидина. Внесение

раствора субстрата тетраметилбензидина в лунки необходимо произвести в

течение 2-3 минут. Планшет инкубировали в темноте при комнатной

температуре (+18-25 °С) в течение 10-20 минут в зависимости от степени

развития синего окрашивания. После чего внесли во все лунки с той же

скоростью и в той же последовательности, как и раствор субстрата

тетраметилбензидина, по 100 мкл. стоп-реагента, при этом содержимое лунок

окрашивается в ярко-желтый цвет. Измерили величину оптической

плотности (ОП) содержимого лунок планшета на фотометре вертикального

сканирования при длине волны 450 нм. Измерение оптической плотности

содержимого лунок планшета произвели в течение 15 минут после внесения

стоп-реагента. Бланк фотометра выставили по воздуху.

Построили в полулогарифмических координатах калибровочный

график: ось абсцисс (х) – десятичный логарифм концентрации прогестерона в

калибровочных пробах (нг/мл.), ось ординат (у) – оптическая плотность

53

калибровочных проб (ОП 450 нм.). Для алгоритма обсчета (аппроксимации)

калибровочного графика используется интервальный (кусочно-линейный,

«от точки к точке») метод. Прировняли концентрацию калибровочной пробы

0 нг/мл. к несущественно малой величине, например, 0,001 нг/мл. и

определили по калибровочному графику содержание прогестерона в

исследуемых образцах.

2.1.7. Определение контаминации патогенной микрофлорой маточных

выделений у коров больных скрытым эндометритом

Бактериологическое исследование проводилось на кафедре

микробиологии ФГОУ ВПО МГАВМ и Б. Патологический материал

поступил из учебного хозяйства ФГОУ ВПО МГАВМ и Б.

У больных скрытым эндометритом коров акушерской ложкой Панкова

Б.Г. брали маточную слизь-экссудат для определения контаминации пробы

микроорганизмами. При заборе материала исключалась возможность

загрязнения его микроорганизмами из окружающей среды. Пробы для

бактериологического исследования брали до начала фаго-

антибиотикотерапии.

При использовании консервантов материал пригоден для исследования

в течение 12-24 ч. В качестве консервантов использовался изотонический

раствор хлорида натрия (рН – 7,2-7,4).

При посеве материала для выделения чистой культуры используют

пластинчатые селективно-дифференциальные среды.

Для количественной характеристики аэробной микрофлоры проводят

дозированный посев на пластинчатые среды из четырех диагностически

значимых разведений исходного материала (10-4, 10-5, 10-6, 10-8). Разведения

готовят в пяти бактериологических пробирках. В две пробирки наливают по

9,9 мл изотонического раствора хлорида натрия (для разведений 10-3, 10-8), в

54

три пробирки – 4,5 мл (для разведений 10-4, 10-5) и последовательно

переносят взвесь из предыдущего разведения в последующее в объемах.

Вся работа проводилась с соблюдением стерильности, со сменой

пипеток при переходе от предыдущего разведения к последующему. Каждую

взвесь хорошо перемешивали.

Перед работой пластинчатые среды подсушивали в сушильном шкафу

при температуре 60±1ºС в течение 20 мин, при 40±1ºС в течение 45 мин. На

поверхности агара не должно оставаться конденсационной влаги.

Использовались следующие среды, обеспечивающие выделение

патогенных и условно-патогенных энтеробактерий:

- дифференциально-диагностическую среду Эндо (посев проводили пипеткой

в объеме 0,05 мл из разведения 10-8);

- 5%-ный кровяной агар для выделения гемолитических форм

микроорганизмов (посев проводили пипеткой из разведений 10-5, 10-6 в

объеме 0,05 мл с последующим растиранием шпателем).

Все посевы инкубируют в термостате при 37±1ºС.

При пересеве клеток микроорганизмов с одной среды на другую все

манипуляции проводили вблизи пламени горелки, по возможности быстро,

чтобы не загрязнять культуру посторонними микроорганизмами. При взятии

материала, пробирки удерживали в наклонном положении, чтобы

гарантировать стерильность культуры. Если держать их вертикально, то

возможно попадание в культуру посторонней микрофлоры.

Если микроорганизмы высевают на плотную скошенную питательную

среду, то бактериологической петлей или иглой с культурой, по поверхности

среды проводят прямую или волнообразную черту (легким движением, не

разрезая среды), Такой способ называется «посев штрихом».

Зигзагообразный штрих проводят в тех случаях, когда необходимо получить

больше посевного материала (для смывов и т. д.). Если культуру высевают в

столбик питательной среды, то иглу или петлю вводят в центральную часть,

в толщу среды до дна пробирки. Такой способ называется «посев уколом».

55

Культуру поместили в термостат при соответствующей температуре.

Наблюдения за ее развитием вели ежедневно до тех пор, пока она не

перестала изменяться визуально и провели описание роста микроорганизмов

по штриху или по уколу.

Если посев делается в жидкую среду (или из жидкой среды), лучше

пользоваться пипеткой или петлей. Пробирки держат слегка наклонив, чтобы

не замочить их края и пробки. Перед тем как закрыть пробирки, пробки и

края пробирок обжигают в пламени.

При посеве материала на плотные среды необходимо получить рост

изолированных колоний, в противном случае идентификация невозможна.

Чашки с посевом просматривали невооруженным глазом. В числе

характеристик колоний учитывают их размер, форму, возвышение над

поверхностью, особенности края и поверхности, цвет, плотность и

консистенцию.

Для определения качественного состава бактерий, колонии на чашке

группируются по культуральным признакам, которые являются наиболее

существенной особенностью роста микроорганизмов на плотной питательной

среде.

Так, колонии Escherichia coli многообразны по окраске, плотности и

форме; могут быть плоские, выпуклые или со слегка волнистым слоем;

влажные, сухие, иногда слизистые; прозрачные или полупрозрачные;

напоминают колонии клебсиелл. На МПА – гладкие, выпуклые, блестящие, с

ровными краями колонии, хорошо суспендируемые в растворе хлорида

натрия (S-форма) и более плоские, сухие, с неровными краями, плохо

суспендируемые в растворе хлорида натрия колонии (R-форма). На среде

Эндо – у лактозоположительных штаммов – темно-красные, с металлическим

блеском или без него, розовые или с бесцветным ободком и интенсивно

красным или розовым центром; у лактозоотрицательных штаммов – под цвет

среды или с розоватым оттенком.

56

Колонии Citrobacter – гладкие, слегка выпуклые, влажные, сероватые

колонии с блестящей поверхностью. Встречаются слизистые и шероховатые

формы. На среде Эндо – у лактозоположительных штаммов – интенсивно-

розовые или красные с темным центром, но не дающие характерного для

эшерихий металлического блеска; у лактозоотрицательных штаммов – слегка

опалесцируют, в тон среды или с розоватым оттенком.

Определяли бактерицидную активность суспензии ФЛЭКС-2 к

патогенной микрофлоре, вызывающей послеродовые осложнения в половых

органах животных: E. Coli, S. Aureus, P. Aeruginosa, C. Albicans, P. Mirabilis.

При проведении исследований были использованы метод диффузии в

агаре (бумажных дисков), и метод серийных разведений.

2.1.8. Биохимическое исследование проб крови

Биохимическое исследование проб крови проводилось в Московской

областной ветеринарной лаборатории Воскресенского района Московской

области. Всего было направлено шесть проб крови для определения

содержания в ней Са, Р, общего белка, резервной щелочности, каротина (2

пробы от новотельных коров, через 7 дней после отела; 2 пробы от

новотельных коров, через 21 день после отела; 2 пробы от сухостойных

глубокостельных коров, на 8 месяце стельности).

2.1.9. Биометрическая обработка результатов исследования

Биометрическая обработка полученных результатов по определению

стельности через уровень концентрации прогестерона в молоке, и

количественный показатель влагалищных клеток в приготовленных из

маточной слизи мазков проводилась на кафедре математики и информатики

МГАВМ и Б им. К.И. Скрябина, с помощью однофакторного дисперсионного

анализа (критерий Фишера) и двух выборочного t-теста с одинаковыми

57

дисперсиями (критерий Стьюдента). Обработка проводилась с помощью

анализа данных табличного процессора MS Excel.

58

2.2. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.2.1. Цитограммы маточных выделений у коров в послеродовой период

Слизистые оболочки половых органов непрерывно, но с разной

интенсивностью секретируют слизь и с их поверхности отделяются по типу

апоптоза эпителиальные клетки, в связи с их физиологической регенерацией.

По И.И. Соколовской и В.К. Милованову (1981), при скрытых эндометритах

всегда происходит оплодотворение, но погибает зародыш в процессе

нидации в роге матки. Каждое последующее осеменение таких животных

будет являться «прививкой» против оплодотворения.

Материал для цитологических исследований (маточные выделения)

брали от коров на МТФ «Бессоново» Воскресенского района, учебного

хозяйства ФГОУ ВПО МГАВМ и Б. Всего исследованы мазки от 20 коров:

(по 10 коров в опытной и контрольной группах). Мазки были приготовлены

на 6, 9, 12, 15, 19-21 дни и через 40 дней после отела. Всего было

приготовлено 150 мазков. Далее, под микроскопом подсчитывали 100

соматических клеток и клеток белой крови. Были составлены таблицы для

каждого мазка (всего 150 таблиц). В таблицах было отражено 9 видов клеток:

влагалищные; шейки, тела и рогов матки; яйцепроводов; лимфоциты;

нейтрофилы; гнойные тельца; фагоцитоз. Затем выводилось 2 критерия – ТИ

и ТФ, характеризующих норму или патологию в половых органах по

цитограммам. ТИ – тканевой индекс – это частное от деления числа

соматических клеток (эпителиальных, покровных, секреторных) на число

клеток белой крови; ТФ – токсический фактор – это число от деления

процента гнойных телец на суммарный процент остальных клеток в мазке.

Для каждого физиологического состояния и воспалительного процесса

характерны конкретные ТИ и ТФ.

При воспалительном процессе любой слизистой оболочки всегда

наблюдается гиперемия, экссудация белых кровяных телец и десквамация

59

покровного эпителия. В слизистой оболочке половых органов наблюдаются

эти процессы в следующем порядке: у здоровых животных в стадию

уравновешивания полового цикла в выделяемой слизи находятся только

эпителиальные клетки. В стадию полового возбуждения клеточный состав

соматических (эпителиальных) клеток пополняется лимфоцитами и

нейтрофилами (гиперемия).

При заболевании половых органов к соматическим клеткам

прибавляются нейтрофилы и если местный иммунитет не подавлен, то они

окружают отторгнутые "гибнущие" соматические клетки, образуя фагоцитоз.

Но по мере нарастания вирулентности микрофлоры и накопления их

экзотоксинов и токсинов от распадающихся тканей эндометрия нейтрофилы

гибнут, превращаясь в гнойные тельца.

Для косвенной оценки местного клеточного фагоцитоза учитывались

клеточные розетки, т.е. отторгнутые соматические клетки, окруженные

сегментоядерными нейтрофилами.

У осемененных коров по цитограммам мазков из влагалища,

приготовленных в стадию уравновешивания полового цикла, можно

диагностировать стельность, бесплодие и эмбриональную смертность.

Для изучения мониторинга цитограмм из проб маточных выделений

мы исследовали мазки, взятые АЛП у коров после отела на 6, 9, 12, 15, 19-21

дни после отела и в стадию уравновешивания полового цикла после второй

половой охоты. Результаты цитологических исследований мазков от коров

опытной группы приведены в таблицах № 3…12,а контрольной группы в

таблицах № 13…22.

В таблицах было отражено 9 видов клеток: влагалищные (Влаг); шейки

(ШМ), тела (ТМ) и рогов матки (РМ); яйцепроводов (Япр); лимфоциты

(ЛФЦ); нейтрофилы (Неф); гнойные тельца (ГТ); фагоцитирующиеся

эпителиальные клетки (ФКл), затем выводили тканевой индекс (ТИ) и

токсический фактор (ТФ).

60

Таблица 3. Клеточный состав маточной слизи, взятой из влагалища

акушерской ложкой Панкова, у коровы опытной группы № 1

вид кл Влаг ШМ ТМ РМ Япр ЛФЦ Неф ГТ ФКл ТИ ТФ

дни

6 20 11 23 3 0 3 30 9 1 1,73 0,1

9 16 10 7 2 0 1 46 12 6 0,75 0,14

12 11 7 4 1 0 0 53 21 3 0,43 0,27

15 10 2 4 0 0 0 65 17 2 0,25 0,2

19-21 19 16 13 5 1 2 38 4 2 1,35 0,04

м\у 2-3 ох 89 3 0 0 0 0 2 3 3 46 0,03

Таблица 4. Клеточный состав маточной слизи, взятой из влагалища

акушерской ложкой Панкова, у коровы опытной группы № 2

вид кл Влаг ШМ ТМ РМ Япр ЛФЦ Неф ГТ ФКл ТИ ТФ

дни

6 16 13 8 2 0 0 53 3 5 0,74 0,03

9 18 11 9 2 1 0 51 2 6 0,8 0,02

12 23 20 15 4 1 0 26 7 4 2,42 0,08

15 16 7 14 3 0 0 56 0 4 0,71 0

19-21 32 15 28 2 0 3 14 2 4 4,53 0,02

м\у 2-3 ох 62 9 0 0 0 0 12 15 2 5,92 0,18

Таблица 5. Клеточный состав маточной слизи, взятой из влагалища

акушерской ложкой Панкова, у коровы опытной группы № 3

вид кл Влаг ШМ ТМ РМ Япр ЛФЦ Неф ГТ ФКл ТИ ТФ

дни

6 22 17 27 3 1 3 17 9 1 3,5 0,1

9 11 13 9 3 0 0 36 23 5 1 0,3

12 13 11 8 3 1 0 33 28 3 1,09 0,4

15 14 19 22 4 1 2 9 22 7 5,46 0,28

19-21 27 18 13 5 0 4 20 9 4 2,63 0,1

м\у 2-3 ох 33 4 7 0 0 2 33 5 16 1,26 0,05

61

Таблица 6. Клеточный состав маточной слизи, взятой из влагалища

акушерской ложкой Панкова, у коровы опытной группы № 4

вид кл Влаг ШМ ТМ РМ Япр ЛФЦ Неф ГТ ФКл ТИ ТФ

дни

6 6 3 9 2 1 4 46 23 6 0,42 0,3

9 10 9 9 3 0 2 52 10 5 0,57 0,1

12 5 2 5 1 0 4 65 14 4 0,19 0,2

15 17 7 9 5 0 0 33 24 5 1,15 0,32

19-21 54 10 19 8 2 0 7 0 0 13,29 0

м\у 2-3 ох 24 3 3 0 0 0 42 19 9 0,71 0,24

Таблица 7. Клеточный состав маточной слизи, взятой из влагалища

акушерской ложкой Панкова, у коровы опытной группы № 5

вид кл Влаг ШМ ТМ РМ Япр ЛФЦ Неф ГТ ФКл ТИ ТФ

дни

6 9 15 12 2 0 0 54 6 2 0,7 0,06

9 14 14 16 4 0 4 32 8 8 1,33 0,09

12 20 9 22 3 1 0 27 12 6 2,04 0,14

15 17 8 20 4 0 4 31 11 5 1,4 0,12

19-21 19 22 17 5 0 1 22 7 7 2,74 0,08

м\у 2-3 ох 88 3 0 0 0 0 5 2 2 18,2 0,02

Таблица 8. Клеточный состав маточной слизи, взятой из влагалища

акушерской ложкой Панкова, у коровы опытной группы № 6

вид кл Влаг ШМ ТМ РМ Япр ЛФЦ Неф ГТ ФКл ТИ ТФ

дни

6 20 12 11 2 0 0 34 18 3 1,32 0,22

9 15 7 8 2 0 2 22 42 2 1,33 0,72

12 17 12 10 2 1 0 38 16 4 1,11 0,2

15 11 19 10 4 2 3 29 18 4 1,44 0,22

19-21 22 27 19 4 0 2 17 3 6 3,79 0,03

м\у 2-3 ох 87 4 0 0 0 0 4 2 3 22,75 0,02

62

Таблица 9. Клеточный состав маточной слизи, взятой из влагалища

акушерской ложкой Панкова, у коровы опытной группы № 7

вид кл Влаг ШМ ТМ РМ Япр ЛФЦ Неф ГТ ФКл ТИ ТФ

дни

6 9 4 5 2 0 5 44 30 1 0,41 0,43

9 16 10 16 3 0 2 44 9 0 0,98 0,1

12 13 14 19 6 1 0 35 4 8 1,51 0,04

15 10 8 11 4 2 0 52 0 13 0,67 0

19-21 30 13 21 5 1 0 21 2 7 3,33 0,02

м\у 2-3 ох 78 7 1 0 0 1 8 2 3 9,6 0,02

Таблица 10. Клеточный состав маточной слизи, взятой из влагалища

акушерской ложкой Панкова, у коровы опытной группы № 8

вид кл Влаг ШМ ТМ РМ Япр ЛФЦ Неф ГТ ФКл ТИ ТФ

дни

6 21 12 23 6 1 2 21 6 8 2,74 0,06

9 18 9 7 3 0 2 51 4 6 0,7 0,04

12 13 17 18 5 3 0 34 3 7 1,65 0,03

15 7 8 6 1 0 0 69 5 4 0,32 0,05

19-21 27 15 23 3 1 0 22 4 5 3,14 0,04

м\у 2-3 ох 90 2 0 0 0 0 3 2 3 30,7 0,02

Таблица 11. Клеточный состав маточной слизи, взятой из влагалища

акушерской ложкой Панкова, у коровы опытной группы № 9

вид кл Влаг ШМ ТМ РМ Япр ЛФЦ Неф ГТ ФКл ТИ ТФ

дни

6 37 19 26 9 4 0 2 1 2 47,5 0,1

9 18 10 16 6 2 0 28 15 5 1,86 0,18

12 15 7 13 3 0 5 41 11 5 0,83 0,12

15 20 11 11 3 1 0 35 13 6 1,31 0,15

19-21 24 14 33 4 0 4 16 2 3 3,75 0,02

м\у 2-3 ох 87 4 0 0 0 0 4 2 3 22,75 0,02

63

Таблица 12. Клеточный состав маточной слизи, взятой из влагалища

акушерской ложкой Панкова, у коровы опытной группы № 10

вид кл Влаг ШМ ТМ РМ Япр ЛФЦ Неф ГТ ФКл ТИ ТФ

дни

6 16 7 15 3 0 3 44 11 1 0,87 0,12

9 19 15 13 4 1 0 37 9 2 1,41 0,1

12 25 9 12 4 1 0 40 6 3 1,28 0,06

15 31 12 20 3 2 2 23 4 3 2,72 0,04

19-21 25 11 20 5 2 1 28 3 5 2,17 0,03

м\у 2-3 ох 84 5 1 0 0 1 7 2 0 11,25 0,02

Таблица 13. Клеточный состав маточной слизи, взятой из влагалища

акушерской ложкой Панкова, у коровы контрольной группы № 1

вид кл Влаг ШМ ТМ РМ Япр ЛФЦ Неф ГТ ФКл ТИ ТФ

дни

6 9 4 7 2 0 5 39 32 2 0,5 0,47

9 5 2 8 1 0 0 54 28 2 0,3 0,39

12 3 6 4 2 0 0 61 23 1 0,25 0,3

15 2 5 5 0 0 3 66 18 1 0,17 0,22

19-21 9 5 14 3 1 2 59 7 0 0,53 0,08

м\у 2-3 ох 35 12 11 4 1 5 15 17 0 3,1 0,21

Таблица 14. Клеточный состав маточной слизи, взятой из влагалища

акушерской ложкой Панкова, у коровы контрольной группы № 2

вид кл Влаг ШМ ТМ РМ Япр ЛФЦ Неф ГТ ФКл ТИ ТФ

дни

6 6 8 18 4 1 0 42 20 1 0,88 0,25

9 15 9 11 2 1 0 40 20 2 0,95 0,25

12 6 11 9 1 0 0 20 51 2 1,35 1,04

15 8 17 16 3 0 7 32 15 2 1,13 0,18

19-21 10 12 18 3 2 6 26 23 0 1,41 0,3

м\у 2-3 ох 77 3 5 1 0 0 11 3 0 7,85 0,03

64

Таблица 15. Клеточный состав маточной слизи, взятой из влагалища

акушерской ложкой Панкова, у коровы контрольной группы № 3

вид кл Влаг ШМ ТМ РМ Япр ЛФЦ Неф ГТ ФКл ТИ ТФ

дни

6 6 5 10 2 0 6 45 26 0 0,45 0,35

9 7 35 20 1 0 0 23 12 2 2,74 0,14

12 2 13 4 0 0 14 42 25 0 0,34 0,33

15 4 15 9 2 0 0 24 46 0 1,25 0,85

19-21 11 30 20 3 0 0 22 14 0 2,91 0,16

м\у 2-3 ох 62 7 12 10 0 0 6 3 0 15,2 0,03

Таблица 16. Клеточный состав маточной слизи, взятой из влагалища

акушерской ложкой Панкова, у коровы контрольной группы № 4

вид кл Влаг ШМ ТМ РМ Япр ЛФЦ Неф ГТ ФКл ТИ ТФ

дни

6 10 5 4 0 0 3 63 14 1 0,29 0,16

9 9 4 7 2 0 0 72 4 2 0,31 0,04

12 20 5 9 4 2 0 44 14 2 0,91 0,16

15 14 9 12 4 1 0 54 5 1 0,74 0,05

19-21 12 8 6 1 1 0 60 11 1 0,47 0,12

м\у 2-3 ох 12 0 0 0 0 4 72 10 2 0,16 0,11

Таблица 17. Клеточный состав маточной слизи, взятой из влагалища

акушерской ложкой Панкова. у коровы контрольной группы № 5

вид кл Влаг ШМ ТМ РМ Япр ЛФЦ Неф ГТ ФКл ТИ ТФ

дни

6 18 13 7 3 0 3 39 17 0 0,98 0,2

9 13 42 19 4 2 0 15 5 0 5,33 0,05

12 7 10 5 0 0 0 32 45 1 0,69 0,82

15 7 4 3 1 0 0 66 19 0 0,23 0,24

19-21 13 5 4 2 0 1 59 16 0 0,4 0,2

м\у 2-3 ох 28 10 23 7 0 4 19 9 0 2,96 0,1

65

Таблица 18. Клеточный состав маточной слизи, взятой из влагалища

акушерской ложкой Панкова, у коровы контрольной группы № 6

вид кл Влаг ШМ ТМ РМ Япр ЛФЦ Неф ГТ ФКл ТИ ТФ

дни

6 15 4 8 1 0 3 53 15 1 0,5 0,18

9 6 4 1 0 0 0 69 18 2 0,16 0,22

12 19 4 12 3 0 2 44 16 0 0,83 0,2

15 22 11 10 3 0 0 41 13 0 1,12 0,15

19-21 24 12 15 5 1 0 37 6 0 1,54 0,06

м\у 2-3 ох 38 12 17 6 0 4 19 4 0 3,17 0,04

Таблица 19. Клеточный состав маточной слизи, взятой из влагалища

акушерской ложкой Панкова, у коровы контрольной группы № 7

вид кл Влаг ШМ ТМ РМ Япр ЛФЦ Неф ГТ ФКл ТИ ТФ

дни

6 9 37 10 3 1 4 16 20 0 3 0,25

9 6 3 5 1 0 0 34 49 2 0,44 0,96

12 5 4 4 0 0 2 58 27 0 0,22 0,37

15 2 30 6 2 0 3 31 26 0 1,18 0,35

19-21 9 22 4 4 0 3 20 38 0 1,7 0,6

м\у 2-3 ох 88 2 1 0 0 2 10 3 2 6,92 0,03

Таблица 20. Клеточный состав маточной слизи, взятой из влагалища

акушерской ложкой Панкова, у коровы контрольной группы № 8

вид кл Влаг ШМ ТМ РМ Япр ЛФЦ Неф ГТ ФКл ТИ ТФ

дни

6 7 5 5 2 1 3 58 19 0 0,33 0,24

9 8 4 5 2 0 3 67 11 0 0,28 0,12

12 4 4 5 1 0 2 73 11 0 0,19 0,12

15 26 13 20 4 2 0 28 7 0 2,32 0,08

19-21 17 6 13 3 1 1 43 14 2 0,91 0,16

м\у 2-3 ох 69 4 2 0 0 0 22 3 0 3,41 0,03

66

Таблица 21. Клеточный состав маточной слизи, взятой из влагалища

акушерской ложкой Панкова, у коровы контрольной группы № 9

вид кл Влаг ШМ ТМ РМ Япр ЛФЦ Неф ГТ ФКл ТИ ТФ

дни

6 4 6 4 2 0 8 45 31 0 0,3 0,45

9 6 9 7 2 0 2 50 21 3 0,46 0,27

12 17 7 9 3 0 0 24 40 0 1,5 0,67

15 16 8 8 4 2 0 46 16 0 0,83 0,2

19-21 12 5 7 3 0 0 33 40 0 0,82 0,67

м\у 2-3 ох 22 6 7 3 0 7 45 9 1 0,73 0,1

Таблица 22. Клеточный состав маточной слизи, взятой из влагалища

акушерской ложкой Панкова, у коровы контрольной группы № 10

вид кл Влаг ШМ ТМ РМ Япр ЛФЦ Неф ГТ ФКл ТИ ТФ

дни

6 6 1 2 0 0 6 59 25 1 0,14 0,33

9 3 6 3 1 0 4 50 31 2 0,24 0,45

12 12 14 14 4 1 2 20 31 2 2,05 0,45

15 12 7 9 5 2 3 23 36 3 1,35 0,56

19-21 14 8 8 3 1 0 43 23 0 0,79 0,3

м\у 2-3 ох 24 2 3 1 0 5 60 4 1 0,46 0,04

У здоровых стельных животных в мазках повышается число

нейтрофилов с четкой структурой ядер в стадию, по времени совпадающую

со стадией полового возбуждения у нестельных. Но при этом в мазках

отсутствуют клетки эндометрия.

Появление в мазках стельных животных клеток эндометрия является

признаком развития скрытого аборта.

Таким образом, цитологические исследования позволяют четко

дифференцировать физиологические, воспалительные, а также токсико-

дистрофические (инфицирование полости матки УПМ) процессы в половых

органах коров и телок.

67

При сравнении средних показателей по опытной и контрольной

группам, видно, что в опытной группе процесс инволюции матки идет более

равномерней чем контрольной группе, так на 6-ой день после родов в мазках

опытной группы количество клеток влагалища, матки и яицепроводов

больше чем у коров контрольной группы. Количество нейтрофилов и

гнойных телец в обеих группах высокое, но в опыте меньше чем в контроле.

Количество иммунных розеток на всем протяжении исследований в опытной

группе было значительно больше чем в контрольной, это свидетельствует в

первую очередь о более высоком клеточном (местном) иммунном статусе

коров опытной группы. На 9-ый, 12-ый и 15-ый дни процесс инволюции у

коров опытной группы проходит значительно быстрее, происходит снижение

процента нейтрофилов и гнойных телец, увеличивается процент

соматических клеток.

Таблица 23. Средние показатели клеточного состава маточных

выделений, взятых из влагалища коров опытной группы и стандартные

отклонения по выборке

вид кл Влаг ШМ ТМ РМ Япр ЛФЦ Неф ГТ ФКл ТИ ТФ

дни

6 17,6

±8,9

11,3

±5,27

15,9

±8,13

3,4

±2,32

0,7

±1,25

2

±1,89

34,5

±17

11,6

±9,26

3

±2,49

5,99

±14,6

0,35

±0,19

9 15,5

±3,06

10,8

±2,49

11

±3,83

3,2

±1,23

0,4

±0,7

1,3

±1,34

39,9

±10,5

13,4

±11,6

4,5

±2,42

1,07

±0,4

0,42

±0,51

12 15,5

±5,95

10,8

±5,25

12,6

±6

3,2

±1,62

0,9

±0,88

0,9

±1,91

39,2

±11,9

12,2

±7,91

4,7

±1,77

1,26

±0,69

0,32

±0,27

15 15,3

±6,83

10,1

±5,38

12,7

±6,17

3,1

±1,52

0,8

±0,92

1,1

±1,52

40,2

±19,4

11,4

±8,85

5,3

±3,06

1,54

±1,55

0,45

±0,6

19-21 27,9

±10,1

16,1

±5,13

20,6

±6,22

4,6

±1,58

0,7

±0,82

1,7

±1,57

20,5

±8,33

3,6

±2,63

4,3

±2,21

4,07

±3,36

0,15

±0,11

м\у 2-3 ох

72,2

±24,6

4,4

±2,12

1,2

±2,25 0 0

0,4

±0,7

12

±13,9

5,4

±6,26

4,4

±4,67

16,91

±14,2

0,57

±0,45

68

Таблица 24. Средние показатели клеточного состава маточных

выделений, взятых из влагалища коров контрольной группы и

стандартные отклонения по выборке

вид кл Влаг ШМ ТМ РМ Япр ЛФЦ Неф ГТ ФКл ТИ ТФ

дни

6 9

±4,4

8,8

±10,39

7,5

±4,53

1,9

±1,29

0,3

±0,48

4,1

±2,23

45,9

±13,61

21,9

±6,33

0,6

±0,7

0,74

±0,84

0,49

±0,24

9 7,8

±3,68

11,8

±14,36

8,6

±6,36

1,6

±1,08

0,3

±0,68

0,9

±1,52

47,4

±19,4

19,9

±13,57

1,7

±0,95

1,12

±1,67

0,48

±0,38

12 9,5

±6,92

7,8

±3,88

7,5

±3,63

1,8

±1,62

0,3

±0,68

2,2

±4,26

41,8

±18,19

28,3

±13,48

0,8

±0,92

0,83

±0,63

0,91

±0,8

15 11,3

±8,27

11,9

±7,62

9,8

±5,12

2,8

±1,55

0,7

±0,95

1,6

±2,37

41,1

±16,35

20,1

±12,72

0,7

±1,06

1,03

±0,61

0,6

±0,59

19-21 13,1

±4,53

11,3

±8,39

10,9

±5,84

3

±1,05

0,7

±0,68

1,3

±1,95

40,2

±15,34

19,2

±11,88

0,3

±0,68

1,15

±0,77

0,58

±0,5

м\у 2-3 ох

45,5

±26,32

5,8

±4,34

8,1

±7,56

3,2

±3,49

0,1

±0,32

3,1

±2,47

27,9

±22,88

6,5

±4,67

0,6

±0,84

4,4

±4,57

0,29

±0,24

Количество больных коров клиническим эндометритом в контрольной

группе составляет 80 %, а в опытной группе 20 %, что подтверждает и

большое количество нейтрофилов и гнойных телец в контрольной группе,

причем количество гнойных телец в контрольной в два раза больше чем в

опытной группе. На 19 – 21 дни после родов количество клеток влагалища,

матки и яицепроводов в опытной группе превышает процент таких же клеток

в контрольной группе почти в два раза.

По приготовленным, в период предположительно между второй и

третьей половыми охотами мазкам, можно определить стельность коров. У

стельных коров в мазках обнаруживаются только клетки влагалища и

слизистые клетки шейки матки, а у нестельных коров в мазках присутствуют,

помимо вышеуказанных клеток, клетки тела, рогов матки и яицепроводов. В

ранний период стельности в мазках еще обнаруживаются клетки тела и рогов

матки, но они уже набухшие, находятся на последних стадиях распада. Если

69

сравнивать данные мазки, то в опытной группе у коров под № 1, 2, 4, 5, 6, 7,

8, 9, 10 – мазки соответствуют мазкам стельных коров. Результаты

иммуноферментного анализа молока, взятого в этот же день показывают, что

уровень прогестерона у коров опытной группы под № 1, 4, 5, 6, 8, 9, 10 –

соответствует уровню содержания прогестерона для стельных коров, а у №

2, 3, 7 – соответствует уровню прогестерона коров, сомнительно стельных,

т.е. у данных коров могут идти первые дни стельности, и концентрацию

прогестерона необходимо перепроверить через несколько дней. Причем у

коровы под № 2 картина мазка не имеет ярко выраженного патологического

процесса, а отсутствие клеток тела, рогов матки, и яйцепроводов говорит о ее

стельности. Корова под № 3, которой на 15-ый день был поставлен диагноз –

скрытый эндометрит, была вылечена, но в мазке еще присутствует 5%

гнойных телец, хотя ярко выраженного патологического процесса также не

наблюдается.

Судя по мазкам, коров контрольной группы под № 1, 2, 3, 5, 6, 9, 10 –

коровы не являются стельными, т.к. в мазках высокий процент гнойных

телец (от 9 % до 45 %), а также присутствуют клетки тела и рогов матки, а

также яйцепроводов. Стельной по мазкам можно считать только корову под

№ 4, но, учитывая, что в мазке присутствует огромное количество

нейтрофилов (72%), стельность сомнительна. Но если даже она и есть, то

высока вероятность гибели эмбриона в критические периоды своего

развития. В контрольной группе стельной можно считать только коров под №

7, 8. У коров контрольной группы под № 1, 2, 4, 6 – уровень прогестерона

показывает что коровы стельные. Стельность сомнительна у коров № 3, 5, 7,

а коровы под № 8, 9, 10 – являются не стельными, т.к. уровень прогестерона

в молоке ниже 3,0 нг/мл.

Ректальным исследованием коров, проведенным через 90 дней после

отела, установлено совпадение результатов с цитологическим заключением

для подопытных и контрольных животных.

70

Результаты метода ИФА на прогестерон (гормональных исследований)

не всегда совпадало с результатами цитологических и ректальных

исследований на стельность и ее исключение.

Следует отметить тот факт, что у коров контрольной группы в мазках

присутствует большое количество нейтрофилов и гнойных телец, но мало

фагоцитоза, что говорит о развитии патологических процессов даже у

новотельных коров, которые часто провоцируют гибель зародыша. Тем

более, что в данной группе при проведении акушерско-гинекологической

диспансеризации с помощью акушерской ложки Панкова на 15-ый день

после родов было выявлено 6 коров, больных скрытым эндометритом. В

опытной группе, в тот же день, выявлено две коровы со скрытым

эндометритом. У коров опытной группы, в свою очередь, процент

нейтрофилов и гнойных телец низкий, а фагоцитоза.

2.2.2. Диагностика беременности коров цитоморфологическим методом и

исследованием проб молока методом иммунно-ферментного анализа

(ИФА)

В день взятия проб молока (19…24 дни после осеменения), для

определения уровня прогестерона, АЛП были взяты пробы маточной слизи

под шейкой матки, и приготовлены мазки, для определения клеточного

состава маточных выделений, дальнейшего их подсчета и сравнения

полученных результатов с результатами иммуноферментного анализа.

Результаты, полученные при морфологическом исследовании этих мазков

представлены в таблице 38, 39.

Таким образом, у коровы № 2 (Венера 175/2) опытной группы в мазке

присутствует 62% - влагалищных клеток, 9% - клеток шейки матки, 12% -

нейтрофилов, 15% - гнойных телец и 2% - фагоцитоза, и отсутствуют клетки

тела и рогов матки, яйцепроводов и лимфоциты, а уровень содержания

прогестерона в молоке в тот же день составлял 3,44 нг/мл., что ставит под

71

сомнение стельность коровы. Наличие 62 % эпителиальных клеток

влагалища и 15 % гнойных телец свидетельствует о клиническом вагините.

Таблица 38. Результаты подсчета клеток, в мазках

приготовленных через 24 дня после осеменения в опытной группе

№ п/п Влаг ШМ ТМ РМ Япр ЛФЦ Неф ГТ ФКл ТИ ТФ

1 89 3 0 0 0 0 2 3 3 46 0,03

2 62 9 0 0 0 0 12 15 2 5,92 0,18

3 33 4 7 0 0 2 33 5 16 1,26 0,05

4 24 3 3 0 0 0 42 19 9 0,71 0,24

5 88 3 0 0 0 0 5 2 2 18,2 0,02

6 87 4 0 0 0 0 4 2 3 22,75 0,02

7 78 7 1 0 0 1 8 2 3 9,6 0,02

8 90 2 0 0 0 0 3 2 3 30,7 0,02

9 87 4 0 0 0 0 4 2 3 22,75 0,02

10 84 5 1 0 0 1 7 2 0 11,25 0,02

ср. знач. 72,2 4,4 1,2 0 0 0,4 12 5,4 4,4 16,91 0,06

ст. откл ±24,6 ±2,12 ±2,25 0 0 ±0,7 ±13,9 ±6,26 ±4,67 ±14,22 ±0,08

дисперс 542,36 4,04 4,56 0 0 0,44 174 35,24 19,64 181,988 0,00574

Таблица 39. Результаты подсчета клеток, в мазках

приготовленных через 24 дня после осеменения в контрольной группе

№ п/п Влаг ШМ ТМ РМ Япр ЛФЦ Неф ГТ ФКл ТИ ТФ

1 35 12 11 4 1 5 15 17 0 3,1 0,21

2 77 3 5 1 0 0 11 3 0 7,85 0,03

3 62 7 12 10 0 0 6 3 0 15,2 0,03

4 12 0 0 0 0 4 72 10 2 0,16 0,11

5 28 10 23 7 0 4 19 9 0 2,96 0,1

6 38 12 17 6 0 4 19 4 0 3,17 0,04

7 88 2 1 0 0 2 10 3 2 6,92 0,03

8 69 4 2 0 0 0 22 3 0 3,41 0,03

9 22 6 7 3 0 7 45 9 1 0,73 0,1

10 24 2 3 1 0 5 60 4 1 0,46 0,04

ср. знач 45,5 5,8 8,1 3,2 0,1 3,1 27,9 6,5 0,6 4,4 0,07

ст. откл ±26,32 ±4,34 ±7,56 ±3,49 ±0,32 ±2,47 ±22,88 ±4,67 ±0,84 ±4,57 ±0,06

дисперс 623,25 16,96 51,49 10,96 0,09 5,49 471,29 19,65 0,64 18,8119 0,00312

У коровы № 3 (Утеха №37) опытной группы, в мазке присутствуют

относительно низкое содержание влагалищных клеток – 33%, высокое

72

содержание нейтрофилов – 33%, а также чрезмерно большое количество

фагоцитоза – 16% (у коровы был скрытый эндометрит, в процессе

выздоровления), но отсутствуют клетки рогов матки и яйцепроводов.

Стельность данной коровы под большим вопросом, о чем свидетельствует и

низкий уровень содержания прогестерона (3,62 нг/мл.).

Определение уровня гормона прогестерона в молоке проводились в

лаборатории кафедры радиобиологии МГАВМ и Б им. К.И. Скрябина. Пробы

молока были взяты у коров опытной и контрольной групп на 19-ый и 24-ый

дни после осеменения, и однократно заморожены, что является допустимым

по методике определения концентрации прогестерона в молоке.

Определение прогестерона было основано на использовании

конкурентного иммуноферментного анализа. Критерии уровня прогестерона,

характеризующие состояние стельности или ее отсутствие приведены в

таблице 35 (в соответствии с инструкцией по ИФА).

Таблица 35. Концентрация прогестерона в молоке коров, в

зависимости от физиологического состояния

Исследуемая группа

Единицы

Нг/мл

Нижний предел Верхний предел

Нестельные коровы (нест) - 4,0

Сомнительные (сомн) 4,0 7,0

Стельные коровы (ст) 7,0 -

В результате исследований были получены данные отраженные в

таблицах 36, 37.

Из полученных результатов следует, что в опытной группе у 70 %

коров прогестерон в молоке соответствует уровню содержания у стельных

животных (7,0 нг/мл и более), а у 30% коров по уровню содержания

прогестерона в молоке, можно судить о сомнительности стельности (4,0

нг/мл – 7,0 нг/мл). В контрольной группе у 50% коров уровень

содержащегося прогестерона в молоке предполагает их стельность (7,0 нг/мл

и более), у 30% коров стельность является сомнительной (4,0 нг/мл – 7,0

73

нг/мл), а у 20% коров уровень содержания прогестерона ниже 4,0 нг/мл, что

говорит о том, что коровы не стельные.

Таблица 36. Содержание прогестерона в пробах молока у коров

опытной группы

№

п/п

Инв № Кличка

коровы

Содержание прогестерона в

молоке, нг/мл

Заключение о

стельности: (нест,

сомн, ст) На 19 день п/о На 24 день п/о

1 55 Чага 4,23 12,19 Ст

2 175/2 Венера 3,44 11,24 Сомн

3 37 Утеха 3,62 4,37 Сомн

4 8, 585 - 43,25 79,32 Ст

5 Б2827 - 7,52 31,58 Ст

6 № 47 Золушка 42,69 50,91 Ст

7 № 393 - 3,52 37,82 Сомн

8 160 Обуза 8,73 12,58 Ст

9 577 - 56,46 63,43 Ст

10 - Полюшка 25,49 44,73 Ст

Таблица 37. Содержание прогестерона в пробах молока у коров

контрольной группы

№

п/п

Инв № Кличка

коровы

Содержание прогестерона в

молоке, нг/мл

Заключение о

стельности: (не ст,

сомн, ст) На 19 день п/о На 24 день п/о

1 - Птица 38,36 27,37 ст.

2 - Шхуна 28,3 37,2 ст.

3 - Маргарита 4,0 3,53 сомн.

4 1200 - 43,06 60,52 ст.

5 - Лань 4,93 6,78 сомн.

6 507 - 24,68 31,31 ст.

7 - Буза 6,79 29,88 ст.

8 481 - 2,25 4,32 не ст.

9 602 - 1,46 6,28 сомн.

10 Б2872 - 1,79 3,29 не ст.

У 2 коров опытной группы под номерами: 3, 4 – на 15-ый день после

отела при экспресс-диагностике акушерской ложкой Б.Г. Панкова (АЛП) был

поставлен диагноз на скрытый эндометрит, а в контрольной группе, в тот же

день после отела, диагноз на скрытый эндометрит был поставлен у 5 коров

под номерами: 3, 5, 7, 9, 10. Из полученных данных видно, что в контрольной

группе у коров под номерами: 3, 5, 9 – стельность сомнительная; 8, 10 не

74

стельные, а 1, 2, 4, 6, 7 – судя по концентрации прогестерона являются

стельными. В то время как в опытной группе корова под номером 4 после

введения на 15-ый день лечебной дозы суспензии ФЛЭКС, была вылечена и

плодотворно осеменилась, а стельность коровы под номером 3 осталась

сомнительной.

У коров опытной группы под № 1, 4, 5, 6, 8, 9, 10 – уровень

прогестерона в молоке свидетельствует о том что они стельные, результаты

по приготовленным мазкам также соответствуют показателям мазков

стельных коров, так как преобладают клетки влагалища, присутствует

небольшое количество клеток влагалищной части шейки матки. Тканевые

индексы выведенные по мазкам этих коров, также подтверждает их

стельность, токсический фактор у них близок к нулю, что также имеет

немаловажное значение как для плодотворного осеменения, так и для

сохранения здорового плода на весь срок стельности и недопущения его

гибели в критические периоды развития. Не исключается наличие вагинитов

у стельных коров, если в мазках нет клеток эндометрия и шейки матки, но

присутствуют клетки влагалища в стадии распада и гнойные тельца.

При сравнении результатов полученных при проведении

иммуноферментного анализа и изучении клеточного состава влагалищной

слизи, можно выявить закономерность, заключающуюся в том, что у

стельных коров (7,0 нг/мл и более), в мазках отсутствуют клетки эндометрия,

и преобладают влагалищные клетки, но может присутствовать небольшое

количество клеток влагалищной части шейки матки. В ранний период

стельности могут присутствовать в мазке «старые» клетки тела матки,

которые уже разрушаются и находятся на последних стадиях лизирования

(распада).

2.2.3. Цитологическая диагностика, и фармакопрофилактика

клинических эндометритов у коров

Субинволюция матки часто осложняется заболеванием коров

различными формами клинических и скрытых эндометритов. Возникновение

75

клинических эндометритов вызывает персистенцию желтого тела и

контаминацию полости матки условно-патогенной микрофлорой, что в свою

очередь затрудняет процесс инволюции матки, вызывая гипотонию или

атонию матки. Острый клинический эндометрит возникает в лохиальный

период. При несвоевременном выявлении больного животного, и

неправильном лечении клинический эндометрит переходит в скрытый.

С целью снижания процента заболеваемости коров в период после

отела в опытной группе применялась схема ранней экспресс-диагностики,

фармакопрофилактики и лечения послеродовых осложнений.

Диагностику клинических эндометритов мы проводили на шестой день

после отела в опытной и контрольной группах при помощи акушерской

ложки Панкова (АЛП). Характерными признаками данной формы

эндометритов является то, что АЛП введенной во влагалище больной

коровы, всегда извлекается воспалительный экссудат. Так, в контрольной

группе у восьми коров в пробах маточной слизи взятой из влагалища на 6-ой

день после отела, в лохиальных выделениях содержалась примесь гноя, и это

свидетельствовало о заболевании коров клиническим острым гнойно-

катаральным эндометритом. На 6-ой день после отела были приготовлены

мазки, по которым видно, что у всех десяти коров контрольной группы в

мазках (из 100 % клеток) преобладают нейтрофилы и гнойные тельца, что

говорит о воспалительных процессах, развивающихся в половых органах

данных коров.

Так, из 100 % клеток у коровы № 1 контрольной группы: нейтрофилов

– 39 %, гнойных телец – 32 %; № 2 – 42 и 20 %; № 3 – 45 и 26 %; № 4 – 63 и

14 %; № 5 – 39 и 17 %; № 6 – 53 и 15 %; № 7 – 16 и 20 %; № 8 – 58 и 19 %; №

9 – 45 и 31 %; № 10 – 59 и 25 % соответственно. Причем у коровы под № 7 в

мазке присутствует 37 % клеток шейки матки, что говорит о цервиците, при

ректальной диагностике шейка матки действительно была увеличена в

размерах и имела плотную консистенцию. Также в мазках присутствовали

клетки влагалища; шейки, тела и рогов матки; яйцепроводов; лимфоциты; и

76

что особенно важно у пяти коров фагоцитоз присутствовал в количестве 1 – 2

% у каждой, а у других пяти коров фагоцитоз отсутствовал.

Таблица 25. Клеточный состав мазков маточной слизи, на 6-ой день

после отела, в %, у коров опытной группы

Вид кл Влаг ШМ ТМ РМ Япр ЛФЦ Неф ГТ ФКл ТИ ТФ

№ п/п

1 20 11 23 3 0 3 30 9 1 1,73 0,1

2 16 13 8 2 0 0 53 3 5 0,74 0,03

3 22 17 27 3 1 3 17 9 1 3,5 0,1

4 6 3 9 2 1 4 46 23 6 0,42 0,3

5 9 15 12 2 0 0 54 6 2 0,7 0,06

6 20 12 11 2 0 0 34 18 3 1,32 0,22

7 9 4 5 2 0 5 44 30 1 0,41 0,43

8 21 12 23 6 1 2 21 6 8 2,74 0,06

9 37 19 26 9 4 0 2 1 2 47,5 0,1

10 16 7 15 3 0 3 44 11 1 0,87 0,12

ср. знач. 17,6 11,3 15,9 3,4 0,7 2 34,5 11,6 3 5,993 0,152

ст. откл ±8,9 ±5,27 ±8,13 ±2,32 ±1,25 ±1,89 ±17 ±9,26 ±2,49 ±14,62 ±0,13

дисперс 70,64 25,01 59,49 4,84 1,41 3,2 260,05 77,24 5,6 192,372 0,01448

Таблица 26. Клеточный состав мазков маточной слизи, на 6-ой день

после отела, в %, у коров контрольной группы

Вид кл Влаг ШМ ТМ РМ Япр ЛФЦ Неф ГТ ФКл ТИ ТФ

№ п/п

1 9 4 7 2 0 5 39 32 2 0,5 0,47

2 6 8 18 4 1 0 42 20 1 0,88 0,25

3 6 5 10 2 0 6 45 26 0 0,45 0,35

4 10 5 4 0 0 3 63 14 1 0,29 0,16

5 18 13 7 3 0 3 39 17 0 0,98 0,2

6 15 4 8 1 0 3 53 15 1 0,5 0,18

7 9 37 10 3 1 4 16 20 0 3 0,25

8 7 5 5 2 1 3 58 19 0 0,33 0,24

9 4 6 4 2 0 8 45 31 0 0,3 0,45

10 6 1 2 0 0 6 59 25 1 0,14 0,33

ср. знач 9 8,8 7,5 1,9 0,3 4,1 45,9 21,9 0,6 0,74 0,3

ст. откл ±4,4 ±10,39 ±4,53 ±1,29 ±0,48 ±2,23 ±13,61 ±6,33 ±0,7 ±0,84 ±0,1

дисперс 17,4 97,16 18,45 1,49 0,21 4,49 166,69 36,09 0,44 0,63082 0,0106

77

В опытной группе, по результатам данной акушерской

диспансеризации на шестой день выявлена одна корова (№ 7) больная

клиническим эндометритом. Так из 100 % клеток у коровы № 1 –

нейтрофилов – 30 %, гнойных телец – 9 %; № 2 – 53 и 3 %; № 3 – 17 и 9 %; №

4 – 46 и 23 %; № 5 – 54 и 6 %; № 6 – 34 и 18 %; № 7 – 44 и 30 %; № 8 – 21 и 6

%; № 9 – 2 и 1%; № 10 – 44 и 11 % соответственно. В среднем в опытной

группе влагалищных клеток – 17,6 (±8,9), а в контрольной – 9 (±4,4); клеток

шейки матки – 11,3 (±5,27) и 8,8 (±10,39); клеток тела матки – 15,9 (±8,13) и

7,5 (±4,53); клеток рогов матки – 3,4 (±2,32) и 1,9 (±1,29); клеток

яйцепроводов – 0,7 (±1,25) и 0,3 (±0,48); лимфоцитов – 2 (±1,89) и 4,1 (±2,23);

нейтрофилов – 34,5 (±17) и 45,9 (±13,61); гнойных телец – 11,6 (±9,26) и 21,9

(±6,33); фагоцитоза – 3 (±2,49) и 0,6 (±0,7); тканевой индекс – 5,99 (±14,62) и

0,74 (±0,84); токсический фактор – 0,15 (±0,13) и 0,49 (±0,24). Такое малое

количество коров, больных клиническими формами эндометритов,

объясняется тем, что в опытной группе нами проведена работа по

фармакопрофилактике клинических форм эндометрита по схеме № 1.

Следуя этой схеме, для профилактики и лечения гипотонии и атонии

матки, а следовательно и исключения развития субинволюции матки,

коровам опытной группы через 3 – 4 часа после отела, внутримышечно ввели

утеротропный препарат «Гетеротон». Затем, через 48 часов, т. е. на третьи

сутки после отела с целью профилактики и лечения клинических форм

эндометрита, внутриматочно ввели 100 мл. суспензии ФЛЭКС-2 (20 гр.

порошка в 80 мл. разбавителя).

Суспензия ФЛЭКС-2 обладает широким и пролонгированным (в

течение 6-7 суток) спектром антимикробного действия. Суспензия «ФЛЭКС-

2» смешивается в шприце Жанэ перед самым введением в полость матки.

При введении суспензии ФЛЭКС-2 в полость матки белок

условнопатогенных микроорганизмов денатурируется парами йода и

погибает от атомарного кислорода, выделяющимися после смешивания в

шприце Жанэ компонентов суспензии: раствора ихтиола, норсульфазола,

78

йодоформа и перекиси водорода. Матка санируется от УПМ, а карункулы,

подвергаясь протеолитическому аутолизу, выходят в виде бесструктурной

массы с лохиями.

Через два дня, после введения суспензии ФЛЭКС-2, полость матки

очищается значительно легче. И что не маловажно, отделение последа

неоперативным (консервативным) способом не сопровождается

заболеванием коров клиническими эндометритами.

По мере выздоровления в пробе маточной слизи снижается содержание

примесей гноя, фибрина, мутности, слизь густеет и светлеет (становится

прозрачной). При наличии желтого тела в яичнике слизь в АЛП густой

консистенции (клейкая), а при созревании фолликула - жидкая.

На завершающей стадии выздоровления животного от клинического

эндометрита и субинволюции матки акушерская ложка входит во влагалище

только на половину своей длины, т.к. шейка матки уже дошла до середины

дна таза. При таких показателях животное подготавливается к осеменению.

79

80

81

82

83

84

85

86

2.2.4. Фармакопрофилактика и лечение субинволюции матки

Направленная «селекция» крупного рогатого скота на высокую

молочную продуктивность за счет силосно-концентратного и концентратного

типов рациона, искусственное удлинение лактации пропуском половых охот

(без осеменений) приводит к массовому нарушению обмена веществ по типу

ацидоза и кетоза. Но степень ацидоза у коров прямопропорционально связана

с нарушением нейроэндокринной регуляцией функции воспроизводства:

слаборожденные телята, слабые схватки и потуги при отеле, субинволюция

матки (80…100 %), атония и гипотония матки, активное «всасывание»

условнопатогенной микрофлоры в полость матки (до 100 %). Контаминация

матки патогенной микрофлорой напрямую вызывает заболевание коров

клиническими эндометритами.

Без фармакопрофилактики субинволюции матки у животных она

переходит от острой, к подострой и хронической формам. Для

воспроизводства стада это большой вред, но для искусственного повышения

молочной продуктивности субинволюция матки «полезна». Чем дольше

болеет корова, тем дольше ее доят и она становится «племенной», на фоне

минимальной воспроизводительной способности.

Борьба с субинволюцией матки возможна сбалансированием рационов до

физиологических потребностей, а также проведением фармакопрофилактики

медикаментозными средствами, организацией активного моциона и создания

для коров комфортабельных условий содержания.

С целью контроля за процессом инволюции половых органов у коров

опытной и контрольной группы применялась акушерская ложка Б.Г.

Панкова. За показатель состояния инволюции и субинволюции матки был

принят процент (от 27 см. длины стержня АЛП), на который стержень АЛП

входит во влагалище до шейки матки. Но если масса матки не снизилась от

8…10 кг. при родах до 0,35…0,4 кг., то шейка матки будет находиться в

брюшной полости. При этом, в яичниках задерживается желтое тело и в

87

пробе АЛП содержится клейкая густая слизь. У клинически здоровых коров

при полном завершении инволюции матки этот показатель составляет 50-

55%. Также при помощи АЛП определялась сократительная способность

матки, что позволяло поставить диагноз на атонию и гипотонию матки.

В опытной группе к 24-му дню после отела у 80% коров инволюция

матки была завершена. У 20% коров на 15-ый день после отела был

поставлен диагноз на скрытый эндометрит, после чего проводились лечебные

мероприятия по схеме из таблицы по профилактике и лечению

клинических и скрытых эндометритов у коров (по Панкову Б.Г.). К 24-

му дню после отела процесс инволюции находился на заключительных

стадиях завершения.

Таблица 27. Показатели выхода стержня АЛП из влагалища в

опытной группе, при контроле процесса инволюции и субинволюции

матки после отела до 24 дня, (%) и общие, средние значения,

стандартные отклонения по выборке и дисперсия

Дни п/о 6 9 12 15 19-21 24

м\у 2-3

ох. № п/п

1 90 85 75 75 60 55 55

2 95 85 70 70 55 50 50

3 100 80 75 60 60 65 55

4 90 80 75 65 55 50 60

5 95 85 80 65 50 55 50

6 95 80 75 65 55 55 50

7 95 90 75 75 65 60 55

8 85 75 70 70 60 65 50

9 90 80 75 75 50 50 55

10 95 85 80 70 60 55 55

общ. 930 825 750 690 570 560 535

средн.

зн. 93 82,5 75 69 57 56 53,5

ст. откл. ±4,22 ±4,25 ±3,33 ±5,16 ±4,83 ±5,68 ±3,38

дисперс 16 16,25 10 24 21 29 10,25

Из полученых данных видно, что проведенные в опытной группе

лечебно-профилактические мероприятия, такие как трехкратное

88

внутримышечное введение препарата «Гетеротон» для профилактики и

лечения гипотонии и атонии матки, а также внутриматочное введение

суспензии «ФЛЭКС» для профилактики и лечения клинического и скрытого

эндометритов, способствовали своевременной инволюции половых органов.

Данные мероприятия значительно сокращают сервис-период, и увеличивает

процент плодотворных осеменений.

В контрольной группе к 24-му дню после отела 90%-ам коров

поставлен диагноз на субинволюцию матки. У 70% коров на 15-ый день

после отела был поставлен диагноз на скрытый эндометрит, который в

дальнейшем значительно осложнил процесс инволюции матки и удлинил

сервис-период.

Таблица 28. Показатели выхода стержня АЛП из влагалища в

контрольной группе, при контроле процесса инволюции и

субинволюции матки после отела до 24 дня, (%) и общие, средние

значения, стандартные отклонения по выборке и дисперсия

Дни п/о 6 9 12 15 19-21 24

м\у 2-3

ох. № п/п

1 100 95 90 85 75 75 60

2 90 85 80 70 60 60 55

3 100 90 80 80 75 75 65

4 100 90 90 85 80 70 55

5 95 90 90 85 80 80 65

6 100 95 95 80 80 70 55

7 90 90 80 80 70 55 50

8 100 80 80 75 75 70 55

9 95 90 75 80 80 75 60

10 90 85 85 80 80 70 60

всего 960 890 845 800 755 700 580

средн.

зн. 96 89 84,5 80 75,5 70 58

ст. откл. ±4,6 ±4,6 ±6,43 ±4,71 ±6,43 ±7,45 ±4,83

дисперс 19 19 37,25 20 37,25 50 21

АЛП позволяет диагностировать субинволюцию матки с 5…6 дня по

изменению цвета выделяемых лохий от красного до коричнево-шоколадного

89

цвета. Но, так как, субинволюция матки диагностировалась у большинства

коров в стаде, мы проводили фармакопрофилактику этой патологии

инъекцией препарата «Гетеротон», по 5 мл. на 6, 9, и 12 дни после отела.

Рис 27. Процесс инволюции матки до 24 дня и через 45 дней после отела

в опытной группе

Рис 28. Процесс инволюции матки до 24 дня и через 45 дней после отела

в контрольной группе

Где слева: процент выхода АЛП из влагалища коровы, снизу нумерация коров в

группе, а количество рядов соответствует дням, в которые проводился контроль

инволюции матки. Ряд 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7 соответствуют дням после отела: 6, 9, 12, 15, 19-21,

м/у 2-3 ох.

Из рисунков видно, что в среднем в опытной группе процент выхода АЛП

из влагалища составлял на 6 день – 93%; на 9 – 82,5%; на 12 – 75%; на 15 –

90

69%; на 19-21 – 57%; на 24 – 56%; м\у 2-3 ох. – 53,5%, а в контрольной

группе в те же дни составлял: 96%; 89%; 84,5%; 80%; 75,5%; 70%; 58%.

Субинволюция матки профилактируется еще в сухостойный период

нормализацией сахарно-протеинового соотношения, предоставлением

животным активного моциона, введением в рационы профилактических

кетостов, а после родов проводятся такие же мероприятия, но в рацион уже

вводят лечебные кетосты. Если не проводилась профилактика кетозов и

ацидоза в сухостойный период, то можно использовать

фармакопрофилактику 3-4-кратным внутримышечным введением препарата

"Гетеротон", или раствора карбахолина с 3-дневными интервалами между

введениями. Удаление лохий из полости матки будет способствовать

включению механизма ретракции и контракции, который ускорит

инволюцию матки за счет созревания фолликулов (эстроген).

Субинволюция матки является одной из причин удлинения сервис-

периода, а также снижения показателей воспроизводительной способности

коров, что обуславливает эмбриональную смертность до 50-70%.

Своевременная диагностика, а также проведение лечебно

профилактических мероприятий позволит снизить процент возникновения

послеродовых заболеваний, что позволит сократить сервис-период и

увеличить выход телят на 100 коров.

2.2.5. Цитологическая диагностика состояния (статуса) половых органов

коров при проведении фармакопрофилактики скрытых эндометритов

Диагноз на скрытый эндометрит ставится ветеринарным врачом или

предполагается техником по искусственному осеменению, если в течковой

слизи видны включения редких хлопьев или ниточки гноя в стадию полового

возбуждения. Если оператор по воспроизводству молочного стада заметит в

течковой слизи фрагменты гноя, то обращается к ветеринарному врачу

уточнить диагноз на скрытый эндометрит, так как такие животные не

91

оплодотворяются после многократных осеменений. Это приводит к развитию

иммунного бесплодия и удлиняет сервис-период на 2-3 половых цикла. К

лечебным мероприятиям часто приступают несвоевременно. При

низкоэффективных методах курации, лечебный эффект достигается не

всегда. Но даже если лечение завершилось полным выздоровлением

животного, плодотворное осеменение происходит не часто. Так как

иммунное бесплодие возникло уже при первом искусственном осеменении

больных скрытым эндометритом животных, для достижения наилучших

результатов лечение проводят в стадию полового возбуждения, после чего

осеменять можно только в очередную половую охоту. С целью определения

скрытого эндометрита проводят цитологическую диагностику.

При скрытом эндометрите канал шейки матки закрыт не полностью, и

поэтому в него можно ввести лекарственные растворы через осеменительную

пипетку. Б.Г. Панковым был разработан метод диагностики скрытого

эндометрита в стадию уравновешивания полового цикла, для того, чтобы в

день постановки диагноза провести лечение животного однократным

внутриматочным введением лечебного средства и плодотворно осеменить в

очередную половую охоту.

При проведении цитологических исследований маточной слизи, в

которой скапливаются отторгающиеся при воспалительных процессах

эпителиальные клетки и происходит иммиграция нейтрофилов, можно

получить большое количество информации о физиологическом состоянии

всех отделов половых органов, а не только во влагалище. Под действием

экзотоксинов патогенной микрофлоры нейтрофилы, присутствующие в

мазках в большом количестве при воспалительных процессах, гибнут и

превращаются в гнойные тельца. При скрытом эндометрите маточная слизь

всегда скапливается в небольшом количестве под шейкой матки, где в

вентральном своде влагалища его можно отбирать для проведения

диагностических исследований. Тем более, что для постановки диагноза на

норму или патологию достаточно только 0,1 – 0,2 мл. маточных выделений.

92

При скрытом эндометрите, субинволюции матки пипетка для

искусственного осеменения проходит через канал шейки матки, и это дает

оптимальные условия для высокого терапевтического эффекта. Лечение

скрытых эндометритов, проводимое в лютеальную фазу желтого тела, за 10 –

12 дней до очередной половой охоты, наиболее эффективно, так как гормон

прогестерон снижает моторику рогов матки, а лечебное средство, даже при

однократном внутриматочном введении будет оказывать лечебное действие

максимально долго, не выделяясь из полости матки. И только в стадию

полового возбуждения лекарственное средство, потерявшее свою активность,

будет удалено с течковой слизью.

При взятии проб слизи, описывали состояние завершенности

инволюции матки после отела, количество влагалищной слизи, наличие в ней

фрагментов гноя, свидетельствующих о наличии воспалительного процесса.

Таблица 29. Цитограммы маточных выделений на 12 и 15 дни после

отела в контрольной группе

№

кор

дни

п/о Влаг ШМ ТМ РМ Япр ЛФЦ Неф ГТ ФКл ТИ ТФ

2

12 6 11 9 1 0 0 20 51 2 1,35 2,55

15 8 17 16 3 0 7 32 15 2 1,13 0,39

19-21 10 12 18 3 2 6 26 23 0 1,41 0,72

3

12 2 13 4 0 0 14 42 25 0 0,34 0,45

15 4 15 9 2 0 0 24 46 0 1,25 1,92

19-21 11 30 20 3 0 0 22 14 0 2,91 0,64

5

12 7 10 5 0 0 0 32 45 1 0,69 1,41

15 7 4 3 1 0 0 66 19 0 0,23 0,29

19-21 13 5 4 2 0 1 59 16 0 0,4 0,27

7

12 5 4 4 0 0 2 58 27 0 0,22 0,45

15 2 30 6 2 0 3 31 26 0 1,18 0,76

19-21 9 22 4 4 0 3 20 38 0 1,7 1,65

9

12 17 7 9 3 0 0 24 40 0 1,5 1,67

15 16 8 8 4 2 0 46 16 0 0,83 0,35

19-21 12 5 7 3 0 0 33 40 0 0,82 1,21

11

12 12 14 14 4 1 2 20 31 2 2,05 1,41

15 12 7 9 5 2 3 23 36 3 1,35 1,39

19-21 14 8 8 3 1 0 43 23 0 0,79 0,54

93

На 15-ый день после отела проводили диагностику скрытого

эндометрита. У коров больных скрытым эндометритом экссудат, в виде

прозрачной или мутноватой слизи объемом 0,5-1 мл. содержал включения

гноя. Скрытый эндометрит является следствием субинволюции матки,

которая в свою очередь является следствием ацидоза и кетоза. Воздействие

на эндометрий токсинов, выделяющихся размножающейся патогенной

микрофлорой, вызывает ослабление резистентности организма, что приводит

к усилению вирулентности микрофлоры.

Скрытые эндометриты важно диагностировать за 10 – 12 дней до

предполагаемого осеменения. Немедленное проведение лечебных

мероприятий позволяют профилактировать как иммунное бесплодие так и

эмбриональную смертность у оплодотворившихся животных.

Диагностику скрытых эндометритов мы проводили на 12-ый и 15-ый

день после отела с АЛП. Характерным признаком скрытого эндометрита

является то, что АЛП вводится во влагалище без сопротивления на половину

своей длины (до шейки матки). В стадию уравновешивания полового цикла

(желтое тело) образец содержит (0,2 – 0,5 мл.) густоватой прозрачной или

мутноватой маточной слизи с незначительной примесью гноя в виде

зернышек.

В контрольной группе на 15-й день после отела у 60 %-ов коров был

выявлен скрытый эндометрит, у 90 %-ов субинволюция матки. Для мазков

маточной слизи, взятой во влагалище при скрытом эндометрите характерно

присутствие большого количества нейтрофилов и гнойных телец и

отсутствие фагоцитоза. Так, у коровы под № 3 мазок имел следующий

клеточный состав: соматические клетки – 30 %; нейтрофилов – 24 %;

гнойных телец – 46 %; ТИ – 1,25; ТФ – 1,92; фагоцитоза нет. У коровы под №

5 в мазке присутствовали: соматических клеток – 15 %; нейтрофилов – 66 %;

гнойных телец – 19 %; ТИ – 0,23; ТФ – 0,29, а на 12-ый день: 32 %

нейтрофилов и 45 % гнойных телец; фагоцитоза нет. У коровы под № 7 в

мазке присутствовали: соматических клеток – 40 %; нейтрофилов – 31 %;

94

гнойных телец – 26 %; фагоцитоза нет; ТИ – 1,18; ТФ – 0,76. В мазке коровы

№ 2: 44 % - соматических клеток; 7 % - лимфоцитов; 32 % - нейтрофилов; 15

% - гнойных телец; 2 % - фагоцитоза; ТИ – 1,13; ТФ – 0,39; а на 12-ый день в

мазке присутствовали: 20 % - нейтрофилов; 51 % - гнойных телец; 2 % -

фагоцитоза; ТИ – 1,35; ТФ – 2,55. У коровы № 9 в мазке присутствовали:

соматических клеток – 38 %; нейтрофилов – 46 %; гнойных телец – 16 %;

фагоцитоза нет; ТИ – 0,83; ТФ – 0,35. На 12-ый день: нейтрофилов – 24 %;

гнойных телец – 40 %; фагоцитоза нет; ТИ – 1,5; ТФ – 1,67. У коровы № 10 в

мазке присутствовали: соматических клеток – 35 %; нейтрофилов – 23 %;

гнойных телец – 36 %; фагоцитоз – 3 %; ТИ – 1,35; ТФ – 1,39. На 12-ый день:

нейтрофилов: 20 %; гнойных телец – 31 %; фагоцитоз – 2 %; ТИ – 2,05; ТФ –

1,41.

Таблица 30. Цитограммы маточных выделений на 12 и 15 дни после

отела в опытной группе

№ дни Влаг ШМ ТМ РМ Япр ЛФЦ Неф ГТ ФКл ТИ ТФ

кор п/о

3

12 13 11 8 3 1 0 33 28 3 1,09 0,85

15 14 19 22 4 1 2 9 22 7 5,46 2

19-21 27 18 13 5 0 4 20 9 4 2,63 0,38

5

12 20 9 22 3 1 0 27 12 6 2,04 0,44

15 17 8 20 4 0 4 31 11 5 1,4 0,31

19-21 19 22 17 5 0 1 22 7 7 2,74 0,3

В опытной группе на 15-й день после отела было выявлено 20 % коров

с признаками скрытого эндометрита: № 3 и № 4. Так, у коровы № 3 в мазках

присутствует: соматических клеток – 60 %; нейтрофилов – 9 %; гнойных

телец – 22 %; фагоцитоза – 7 %; ТИ – 5,46; ТФ – 2. У коровы № 4 в мазках

присутствует: соматических клеток – 38 %; нейтрофилов – 33; гнойных телец

– 24; фагоцитоза – 5 %; ТИ – 1,15; ТФ – 0,73. Причем у коров опытной

группы, больных скрытым эндометритом, в мазках присутствует большое

количество соматических клеток и фагоцитоза.

95

Руководствуясь схемой ранней диагностики, фармакопрофилактики и

лечения послеродовых осложнений у коров, на 15-ый день после отела

проводили диагностику скрытых эндометритов. Коровам опытной группы,

больных скрытым эндометритом, внутриматочно ввели суспензию ФЛЭКС-2

в количестве 50 мл. На 19-21 дни после отела провели повторную

диагностику с АЛП. У обеих коров в пробах маточной слизи, взятой из

влагалища, слизь была прозрачной без примеси гноя. Так в мазке коровы №

3, приготовленной на 19 – 21 дни после отела присутствовало: соматические

клетки – 63 %; нейтрофилов – 20 %; гнойных телец – 9 %; фагоцитоза – 4 %;

ТИ – 2,63; ТФ – 0,38. У коровы № 4 в те же дни в мазке содержалось:

соматических клеток – 93 %; нейтрофилов – 7 %; гнойных телец и

фагоцитоза нет; ТИ – 13,29; ТФ – 0. В дальнейшем по результатам

иммуноферментного анализа по определению содержания гормона

прогестерона у коровы под № 3 уровень содержания прогестерона был равен

3,44 нг./мл., что говорит о сомнительности стельности, а у коровы под № 4

уровень прогестерона равен 43,25 нг./мл., что подтверждает ее стельность.

При сопоставлении результатов морфологических исследований и данных

ИФА, в контрольной группе видно, что из коров, которым на 15-ый день

после отела был поставлен диагноз на скрытый эндометрит только одну

корову можно считать стельной, так как уровень прогестерона у коровы под

№ 2 был равен 28,3 нг./мл. У остальных пяти коров уровень прогестерона не

больше 7 нг./мл., так у № 3 – 3,9 (сомнит. ст.), у № 5 – 4,93 (сомнит. ст.), у №

7 – 6,79 (сомнит. ст.), у № 9 – 1,46 (не ст.), у № 10 – 1,79 (не ст.).

2.2.6. Мониторинг цитограмм в пробах маточных выделений после

внутриматочного введения суспензии ФЛЭКС-2

В приготовленных, через двое суток после введения суспензии

ФЛЭКС-2 (на 15-ый день после отела для фармакопрофилактики и лечения

скрытых эндометритов), мазках присутствует очень мало клеток, и

96

подсчитать 100 клеток затруднительно. Только через трое суток в половых

органах начинает увеличиваться видовой и количественный клеточный

состав. В мазках преобладают соматические клетки и значительно снижается

количество нейтрофилов и гнойных телец и увеличивается процент

фагоцитоза. Это показатель положительного влияния на процесс инволюции

матки, и в целом на состояние органов размножения, в том числе на

плодотворное осеменение в ближайшую половую охоту.

Таблица 31. Клеточный состав мазков маточной слизи у коров опытной

группы, на 15-ый день после отела (в %), до введения в матку суспензии

ФЛЭКС-2

Вид кл Влаг ШМ ТМ РМ Япр ЛФЦ Неф ГТ ФКл ТИ ТФ

№ п/п

1 10 2 4 0 0 0 65 17 2 0,25 0,2

2 16 7 14 3 0 0 56 0 4 0,71 0

3 14 19 22 4 1 2 9 22 7 5,46 0,28

4 17 7 9 5 0 0 33 24 5 1,15 0,32

5 17 8 20 4 0 4 31 11 5 1,4 0,12

6 11 19 10 4 2 3 29 18 4 1,44 0,22

7 10 8 11 4 2 0 52 0 13 0,67 0

8 7 8 6 1 0 0 69 5 4 0,32 0,05

9 20 11 11 3 1 0 35 13 6 1,31 0,15

10 31 12 20 3 2 2 23 4 3 2,72 0,04

ср. знач 15,3 10,1 12,7 3,1 0,8 1,1 40,2 11,4 5,3 1,54 0,14

ст. откл ±6,83 ±5,38 ±6,17 ±1,52 ±0,92 ±1,52 ±19,41 ±8,85 ±3,06 ±1,55 ±0,12

дисперс 42,01 26,09 34,21 2,09 0,76 2,09 339,16 70,44 8,41 2,15916 0,01198

Мы провели сравнения изменений в цитограммах мазков у коров

опытной группы, на 15 день после отела, т.е. в день внутриматочного

введения суспензии ФЛЭКС – 2, с целью фармакопрофилактики и лечения

скрытых эндометритов в количестве 50 мл.) и через 19 – 21 день после отела.

97

Таблица 32. Клеточный состав мазков маточной слизи у коров опытной

группы, на 19-21-ый дни после отела (в %), через 6 суток после введения

суспензии ФЛЭКС-2

Вид кл Влаг ШМ ТМ РМ Япр ЛФЦ Неф ГТ ФКл ТИ ТФ

№ п/п

1 19 16 13 5 1 2 38 4 2 1,35 0,04

2 32 15 28 2 0 3 14 2 4 4,53 0,02

3 27 18 13 5 0 4 20 9 4 2,63 0,1

4 54 10 19 8 2 0 7 0 0 13,29 0

5 19 22 17 5 0 1 22 7 7 2,74 0,08

6 22 27 19 4 0 2 17 3 6 3,79 0,03

7 30 13 21 5 1 0 21 2 7 3,33 0,02

8 27 15 23 3 1 0 22 4 5 3,14 0,04

9 24 14 33 4 0 4 16 2 3 3,75 0,02

10 25 11 20 5 2 1 28 3 5 2,17 0,03

ср. знач 27,9 16,1 20,6 4,6 0,7 1,7 20,5 3,6 4,3 4,07 0,04

ст. откл ±10,12 ±5,13 ±6,22 ±1,58 ±0,82 ±1,57 ±8,33 ±2,63 ±2,21 ±3,36 ±0,03

дисперс 92,09 23,69 34,84 2,24 0,61 2,21 62,45 6,24 4,41 10,1664 0,00082

Из составленных таблиц видно, что в мазках опытной группы, после

введения суспензии ФЛЭКС – 2 произошли резкие изменения. В мазках

контрольной группы картина осталась та же без каких-либо изменений. Так,

в опытной группе у коровы № 1 в мазке, приготовленном на 19-21 дни

значительно увеличилось количество соматических клеток: было 16 % -

стало 54 %; у № 2: 40 % - 77 %; у № 3: 60 % - 63 %; у № 4: 38 % - 93 %; у №

5: 49 % - 63 %; у № 6: 46 % - 72 %; у № 7: 35 % - 70 %; у № 8: 22 % - 69 %; у

№ 9: 46 % - 75 %; у № 10: 68 % - 63 % соответственно. Таким образом, у всех

коров опытной группы, к 19-21 дням процент соматических клеток был

достаточно высоким, а соответственно снизился процент нейтрофилов и

гнойных телец. Так, у коровы № 1: количество нейтрофилов было 65 % –

стало 38 %, а гнойных телец было 17 %, а стало 4 %; у № 2: 56 % - 14 % и 0 –

2 %; у № 3: 9 % - 20 % и 22 % - 9 %; у № 4: 33 % - 7 % и 24 % - 0; у № 5: 31 %

- 22 % и 11 % - 7 %; у № 6: 29 % - 17 % и 18 % - 3 %; у № 7: 52 % - 21 % и 0 –

2 %; у № 8: 69 % - 22 % и 5 % - 4 %; у № 9: 35 % - 16 % и 13 % - 2 %; у № 10:

23 % - 28 % и 4 % - 3 % соответственно. Больших изменений не претерпел

98

только процент фагоцитоза. В связи с увеличением количества соматических

клеток (у отдельных животных в 2 – 3 раза), и снижением количества

нейтрофилов и гнойных телец произошло увеличение тканевого индекса и

снижение токсического фактора.

Клеточный состав мазков коров контрольной группы за 5…6 дней

значительных изменений не претерпел. У коровы № 1на 15-ый день после

отела в мазке содержалось 12 % соматических клеток, а на 19-21 дни – 32 %,

и далее в такой же последовательности: у № 2: 44 % - 45 %; у № 3: 30 % - 64

%; у № 4: 40 % - 28 %; у № 5: 15 % - 24 %; у № 6: 46 % - 57 %; у № 7: 40 % -

39 %; у № 8: 65 % - 40 %; у № 9: 38 % - 27 %; у № 10: 35 % - 34 %.

Количество нейтрофилов и гнойных телец с 15-го по 19-21 дни, также как и в

предыдущие дни после отела, оставался на высоком уровне. Так, у коровы №

1 на 15-ый день после отела в мазке присутствовало: нейтрофилов – 66 %, а

на 19-21 дни – 59 % и гнойных телец соответственно: 18 % и 7 % и далее: у

№ 2: 32 % - 26 % и 15 % - 23 %; у № 3: 24 % - 22 % и 46 % - 14 %; у № 4: 54 %

- 60 % и 5 % - 11 %; у № 5: 66 % - 59 % и 19 % - 16 %; у № 6: 41 % - 37 % и 13

% - 6 %; у № 7: 31 % - 20 % и 26 % - 38 %; у № 8: 28 % - 43 % и 7 % - 14 %; у

№ 9: 46 % - 33 % и 16 % - 40 %; у № 10: 23 % - 43 % и 36 % - 23 %.

Фагоцитоза, как на 15-ый день, так и на 19-21 дни крайне мало. На 15-ый

день у четырех коров имеется фагоцитоз в количестве 1…3 %, у 6-и коров их

нет. На 19-21 день у двух коров есть фагоцитоз в количестве 1… 2 %, у 8-и

их нет. Тканевые индексы также имеют низкие показатели, а тканевые

факторы говорят о неблагоприятном состоянии половых органах.

У коров опытной группы после введения суспензии ФЛЭКС-2, в мазках

существенно увеличилось количество соматических клеток, количество

нейтрофилов снизилось в два раза, а количество гнойных телец снизилось в

три раза. Так, в среднем по группе количество влагалищных клеток с

15,3±6,83 % увеличилось до 27,9±10,12 %; клеток шейки матки с 10,1±5,38 %

увеличилось до 16,1±5,13 %; клеток тела матки с 12,7±6,17 % увеличилось до

20,6±6,22 %; клеток рогов матки с 3,1±1,52 % увеличилось до 4,6±1,58 %;

99

количество клеток яйцепроводов осталось практически неизменным, до

введения суспензии ФЛЭКС-2 0,8±0,92 %, после 0,7±0,82 %, а количество

лимфоцитов с 1,1±1,52 % увеличилось 1,7±1,57 %; количество нейтрофилов

снизилось с 40,2±19,41 % до 20,5±8,33 %; количество гнойных телец с

11,4±8,85 % снизилось до 3,6±2,63 %; процент фагоцитоза немного снизился

с 5,3±3,06 % до 4,3±2,21 %. Тканевой индекс до введения суспензии был

равен 1,54±1,55, а после введения вырос до 4,07±3,36; а токсический фактор с

0,14±0,12 снизился до 0,04±0,03.

Таблица 33. Клеточный состав мазков маточной слизи у коров

контрольной группы, на 15-ый день после отела, в %-ах

Вид кл Влаг ШМ ТМ РМ Япр ЛФЦ Неф ГТ ФКл ТИ ТФ

№ п/п

1 2 5 5 0 0 3 66 18 1 0,17 0,22

2 8 17 16 3 0 7 32 15 2 1,13 0,18

3 4 15 9 2 0 0 24 46 0 1,25 0,85

4 14 9 12 4 1 0 54 5 1 0,74 0,05

5 7 4 3 1 0 0 66 19 0 0,23 0,24

6 22 11 10 3 0 0 41 13 0 1,12 0,15

7 2 30 6 2 0 3 31 26 0 1,18 0,35

8 26 13 20 4 2 0 28 7 0 2,32 0,08

9 16 8 8 4 2 0 46 16 0 0,83 0,2

10 12 7 9 5 2 3 23 36 3 1,35 0,56

ср. знач 11,3 11,9 9,8 2,8 0,7 1,6 41,1 20,1 0,7 1,03 0,3

ст. откл ±8,27 ±7,62 ±5,12 ±1,55 ±0,95 ±2,37 ±16,35 ±12,72 ±1,06 ±0,61 ±0,25

дисперс 61,61 52,29 23,56 2,16 0,81 5,04 240,69 145,69 1,01 0,33592 0,0539

Так, у коров контрольной группы в мазках маточных выделений,

приготовленных на 15 день после отела, количество влагалищных клеток

было 11,3±8,27 %, а на 19 – 21 дни увеличилось до 13,1±4,53 %; количество

клеток шейки матки с 11,9±7,62 % снизилось до 11,3±8,39 %; количество

клеток тела матки с 9,8±5,12 % увеличилось до 10,9±5,84 %; количество

клеток рогов матки с 2,8±1,55 % увеличилось до 3±1,05 %; количество клеток

яйцепроводов с 0,7±0,95 % увеличилось до 0,7±0,68 %; количество

лимфоцитов с 1,6±2,37 % снизилось до 1,3±1,95 %; количество нейтрофилов

100

с 41,1±16,35 % снизилось до 40,2±15,34 %; количество гнойных телец с

20,1±12,72 % снизилось до 19,2±11,88 %; процент фагоцитоза с 0,7±1,06

снизился до 0,3±0,68 %. Тканевой индекс на 15 день после отела составлял

1,03±0,61, а на 19 – 21 дни после отела увеличился до 1,15±0,77; токсический

фактор с 0,3±0,25 увеличился до 0,3±0,2.

Таблица 34. Клеточный состав мазков маточной слизи у коров

контрольной группы, на 19-21-ый дни после отела, в %-ах

Вид кл Влаг ШМ ТМ РМ Япр ЛФЦ Неф ГТ ФКл ТИ ТФ

№ п/п

1 9 5 14 3 1 2 59 7 0 0,53 0,08

2 10 12 18 3 2 6 26 23 0 1,41 0,3

3 11 30 20 3 0 0 22 14 0 2,91 0,16

4 12 8 6 1 1 0 60 11 1 0,47 0,12

5 13 5 4 2 0 1 59 16 0 0,4 0,2

6 24 12 15 5 1 0 37 6 0 1,54 0,06

7 9 22 4 4 0 3 20 38 0 1,7 0,6

8 17 6 13 3 1 1 43 14 2 0,91 0,16

9 12 5 7 3 0 0 33 40 0 0,82 0,67

10 14 8 8 3 1 0 43 23 0 0,79 0,3

ср. знач 13,1 11,3 10,9 3 0,7 1,3 40,2 19,2 0,3 1,15 0,3

ст. откл ±4,53 ±8,39 ±5,84 ±1,05 ±0,68 ±1,95 ±15,34 ±11,88 ±0,68 ±0,77 ±0,2

дисперс 18,49 63,41 30,69 1 0,41 3,41 211,76 126,96 0,41 0,53252 0,04023

2.2.7. Количественный и качественный состав влагалищной слизи,

взятой у коров, больных клиническим эндометритом

Важную роль в развитии воспалительных процессов в органах

размножения играет условно-патогенная микрофлора, которая обладает

полирезистентностью к антибиотикам и другим антибактериальным

препаратам.

У больных скрытым эндометритом коров, в пробах маточных

выделений часто наблюдаются смешанные культуры, в ассоциациях

которых, доминируют патогенная кишечная палочка, гемолитические

стрептококки и стафилококки.

101

Бактериологическое исследование проводилось на кафедре микробиологии

МГАВМ и Б им. К.И. Скрябина по общепринятой методике. Патологический

материал поступил из учебного хозяйства МГАВМ и Б им. К.И. Скрябина,

МТФ «Бессоново» от пяти коров, больных клиническим эндометритом.

Целью исследования было изучение количественного и качественного

состава микрофлоры в маточных выделениях, взятых акушерской ложкой

Б.Г. Панкова под шейкой матки. Материал был взят согласно правилам

отбора патологических материалов для микробиологических исследований.

Об этом говорит тот факт, что при несоблюдении правил асептики, пробы

могут быть загрязнены, может отмечаться рост спорообразующих бактерий –

бацилл и других сапрофитных микроорганизмов. На приготовленных нами

посевах рост спорообразующих микроорганизмов отсутствует. Задачами

исследования являлись: приготовление 10-кратных разведений и выполнение

посева проб на кровяной МПА, среду Эндо, среду Сабуро; Определение

количества выросших культур микроорганизмов; выделение чистых культур

бактерий и проведение идентификации по биологическим свойствам.

102

103

104

Рис. 36. Микробиологический состав влагалищной слизи, взятой у

коров, больных скрытым эндометритом

В результате проведенных исследований установлено, что в 1 мл.

пробы содержатся такие микроорганизмы, как: бактерии рода Staphylococcus

(208 КОЕ; 13,7%), бактерии рода Citrobacter (288 КОЕ; 19%), и β-

гемолитические E. Coli (1022 КОЕ; 67,3%). КОЕ – колониеобразующая

единица, характеризует биологическую концентрацию микроорганизмов

(количество живых бактерий).

2.2.8. Определение бактерицидной активности суспензии ФЛЭКС-2

Испытанная суспензия проявила выраженную бактерицидную

активность против таких штаммов микроорганизмов, как: E. coli, Salm.

enteritidis, Ps. aeruginosa, Staph. aureus, Bac. сereus.

В результате проведенных исследований пришли к заключению, что

испытанное лечебное средство ФЛЭКС-2 вполне может быть использовано

для внутриматочного введения животным для фармакопрофилактики и

лечения эндометритов, осложненных патогенной микрофлорой.

1. Staph. (13,7%)

2. Citrobacter (19%)

3. E. coli (67,3%)

105

2.2.9. Результаты биохимических исследований проб крови

Биохимическое исследование проб крови проводилось в Московской

областной ветеринарной лаборатории Воскресенского района Московской

области. Всего было направлено шесть проб крови для определения

содержания в ней Са, Р, общего белка, резервной щелочности, каротина (2

пробы от новотельных коров, через 7 дней после отела; 2 пробы от

новотельных коров, через 21 день после отела; 2 пробы от сухостойных

глубокостельных коров, на 8 месяце стельности).

Таблица 40. Количество коров с нормальными показателями и

отклонениями от нормы по составу микроэлементов в крови

показат. нормы N н/N в/N

микроэл.

Каротин - 6 -

Белок 1 5 -

Кальций 1 5 -

Фосфор 4 1 1

Щелочной резерв 6 - -

Таблица 41. Результаты исследования проб крови, взятой у коров в

различных физиологических состояниях

микроэл. Ca, мг %. P, мг %. Общ. бел., г %. Рез. щел., Об

% СО2

Каротин, мг

%. № коров

585 8,75 5,0 7,0 53,8 0,24

2827 10,0 4,75 6,70 58,2 0,2

400 8,0 4,25 7,0 49,3 0,19

497 7,5 6,5 6,70 50,2 0,2

1435 8,75 5,0 7,58 52,0 0,3

1185 8,5 5,75 6,70 54,7 0,18

нормы 10,0-12,5 4,5-6,0 7,2-8,6 46-66 0,4-1,0

106

В момент взятия проб крови коровы под № 585 и № 2827 находились

на 8-ом месяце стельности, коровы под № 400 и № 497 – через 7 дней после

отела, а коровы под № 1435 и № 1185 – через 21 день после отела. Из

полученных результатов видно, что показатели каротина у всех шести коров

ниже нормы, показатели общего белка в норме у коровы под № 1435, у

остальных ниже нормы. Кальций в норме у коровы под № 2827, у остальных

ниже нормы. Фосфор в норме у коров под № 585, 2827, 497, 1435, 1185, а под

№ 400 ниже нормы. Показатели щелочного резерва у всех шести коров в

норме.

Содержание кальция снижается при длительном, недостаточном

поступлении его с кормом, а также при дефиците в рационе витамина Д.

Содержание каротина снижается при дефиците его в кормах, недостатке в

рационе легкоусвояемых углеводов, витамина В12, а также при различных

токсикозах. Снижение содержания белка в сыворотке крови характеризует

длительный недокорм, плохое усвоение протеина из кормов вследствие

хронических расстройств желудочно-кишечного тракта, дефицита углеводов,

витаминов, макро- и микроэлементов в рационе.

Данный микроэлементный состав крови был получен от коров со

следующим суточным рационом: сено – 10 кг, силос – 10 – 15 кг, комбикорма

– из расчета 250 гр. на 1 литр молока, соль, трикальцийфосфат.

2.2.10. Биометрическая обработка полученных результатов

Биометрическая обработка полученных результатов по определению

стельности через уровень концентрации прогестерона в молоке, и

количественный показатель влагалищных клеток в приготовленных из

маточной слизи мазков проводилась на кафедре математики и информатики

МГАВМ и Б им. К.И. Скрябина, с помощью однофакторного дисперсионного

анализа (критерий Фишера).

107

Таблица 42. Результаты дисперсионного анализа влияния

стельности коровы на количество влагалищных клеток в мазке (%) и

уровень концентрации прогестерона в молоке (нг/мл)

Фактор

Показатели

количество влагалищных

клеток в мазке, (%)

уровень концентрации

прогестерона в молоке,

(нг/мл)

Доля

влияния

, (%)

Fф Fтаб

л

Р-

значени

е

Доля

влияния

, (%)

Fф Fтаб

л

Р-

значени

е

Физиологическо

е состояние

84 43,

2

6,2 <0,01 48 7,

5

6,2 <0,01

Поскольку Fф > Fтабл ( F- критерий Фишера) даже на 1% - ном уровне

значимости (Р < 0,01), следовательно, с вероятностью более 99% можно

заключить, что физиологическое состояние коровы оказывает существенное

влияние на процент влагалищных клеток в мазке и уровень концентрации

прогестерона в молоке.

84 % вариации процента влагалищных клеток в мазке обусловлено

фактическим состоянием половых органов коровы, остальные 16 % вариации

приходятся на неучтенные факторы (переходный период от одного

физиологического состояния в следующее, половая цикличность,

эмбриональная смертность после плодотворного осеменения). Необходим

цитологический контроль с интервалом 19-21 суток для уточнения состояния

органов размножения у коров.

48 % вариации уровня концентрации прогестерона в молоке

обусловлено фактическим состоянием половых органов коровы, остальные

52% вариации приходятся на неучтенные факторы (переходное состояние в

динамике половой цикличности, стадия охоты, торможения,

уравновешивания, персистентное желтое тело при субинволюции матки,

скрытый эндометрит).

108

В подтверждение полученных данных провели сравнительный анализ

средних значений процента эпителиальных клеток влагалища в мазке и

уровень концентрации прогестерона в молоке с помощью анализа данных

табличного процессора MS Excel. Использовали инструмент

Двухвыборочный t-тест с одинаковыми дисперсиями (t-критерий

Стьюдента), который служит для проверки гипотезы о существенности

разности между средними. Полученные результаты отражены в таблица 44.

Таблица 43. Средние значения процента влагалищных клеток и

уровня прогестерона в молоке

Методы

определения

стельности

Физиологическое состояние коров

Стельные Сомнительно

стельные

Не стельные

Процент влаг.

клеток, (%).

82,2±3,0 16,0±4,0*** 41,2±7,0***

Уровень

прогестерона,

(нг/мл)

28,1±5,3 3,5±0,5** 2,0±0,2*

*/ достоверно ниже по сравнению со стельными коровами при Р<0,05;

**/ при Р<0,01; ***/ при Р<0,001.

Таким образом, разница между уровнем прогестерона у стельных и не

стельных коров значима с вероятностью более 95 %, а разница между

процентом влагалищных клеток у стельных и не стельных коров значима с

вероятностью более 99 %.

2.2.11. Оценка экономической эффективности цитологического

контроля состояния органов размножения после отела и диагностика

стельности или бесплодия у коров

Для цитологической диагностики клинического состояния органов

размножения достаточно взять акушерской ложкой Панкова Б.Г. пробу

слизи-экссудата под шейкой матки и определить наличие или отсутствие

109

гнойных включений, консистенции цвета и запаха. Для подтверждения

диагноза можно сделать мазок маточной слизи и изучить клеточный состав

под микроскопом.

При помощи мазка маточной слизи можно диагностировать наличие

беременности или бесплодия, а также момент возникновения аборта. За один

рабочий день специалист может взять пробы маточных выделений от 100

коров и приготовить из них мазки. На второй день мазки окрашиваются и

изучаются под микроскопом. Производительность микроскопирования

составляет: 1 мазок с постановкой диагноза от 3 до 5 минут. За это время

можно определить клеточный состав мазка, и поставить диагноз на

стельность или ее отсутствие с высокой достоверностью, при необходимости

диагностику можно повторить в очередные 19-21 дни.

Стоимость иммуноферментного анализа молока на определение

содержания гормона прогестерона для постановки диагноза на стельность и

бесплодие – 690 рублей на одну корову однократно и без учета стоимости

транспортировки. А при сомнительном результате необходимо через неделю

проводить повторный анализ, причем при персистентном желтом теле

гормон прогестерон не перестает выделяться и уровень его в молоке может

оставаться на относительно высоком уровне.

110

3. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЙ

Борьба с послеродовыми заболеваниями и цитологическая диагностика

нормы и патологического состояния у коров в послеродовой период, по

мазкам из маточных выделений

Диагностика нормы и патологии половых органов проводилась

многими цитологами. Однако пробы маточных выделений обычно брались

ими в стадию полового возбуждения (при открытом канале шейки матки),

поэтому остались недостаточно изученными процессы, протекающие в

стадию уравновешивания полового цикла. При анализе мазков из проб

маточных выделений, не придавалось значения токсическому фактору и не

выводился процент гнойных телец. Не были разработаны цитологические

критерии прогнозирования течения беременности, диагностики

эмбриональной смертности, скрытых и неполных абортов у многоплодных

животных, ранней дифференциальной диагностики токсических и скрыто

протекающих процессов в матке коров.

При скармливании коровам силосно-концентратного рациона

происходит нарушение обмена веществ по типу ацидоза и кетоза. При таких

условиях, после отела диагностируются атония и субинволюция матки,

вызванные нарушением нейрогуморальной регуляции функций половых

органов, нарушением ретракции и контракции миометрия. Пониженный

щелочной резерв, гиповитаминозы, атония и субинволюция матки и

вовлечение с воздухом условно-патогенной микрофлоры (УПМ) в полость

матки создают все условия для развития клинических или скрытых

эндометритов. У таких животных сразу после выхода плода матка снова

расслабляется и при опускании ее в брюшную полость, через канал шейки

матки пассивно втягивается воздух животноводческого помещения,

насыщенный условно-патогенной микрофлорой. Пониженный щелочной

резерв, гиповитаминозы, атония и субинволюция матки и поступление с

воздухом условно-патогенной микрофлоры (УПМ) в полость матки создают

111

все условия для развития клинических у высокопродуктивных или скрытых

эндометритов у коров со средней и низкой продуктивностью.

На современных молочно-товарных фермах нет изоляторов для

больных животных, от которых гнойный экссудат выделяется во внешнюю

среду. Гнойный экссудат с патогенной микрофлорой разносится

транспортером и скребками при уборке навоза и экссудата из-под животных

и поэтому в инфицированном воздухе животноводческих помещений также

содержится условно патогенная микрофлора, которая накапливается до

350 000 микробных тел в кубическом метре воздуха коровника при норме до

50 000. Условно-патогенная микрофлора, попав в полость матки с воздухом,

усиливает свою вирулентность на ослабленном ацидозом организме коров и

становится патогенной. В хозяйствах необходимо регулярно проводить

дезинфекцию, а затем контролировать качество дезинфекции методом

смывов и направлением пробы в ветеринарные лаборатории. В таких

помещения в зимне-весенний период почти все новотельные животные

переболевают клиническими эндометритами, а частота скрытых

эндометритов не учитывается. Б.Г. Панков, (1986) установил частоту

скрытых эндометритов у клинически здоровых коров: 75% - у коров через 30

дней, в 55% - через 60 дней и у 35% - через 90 дней после отела.

Одной из главных задач исследований являлось: разработка

цитологической диагностики стельности, как самого достоверного и

объективного. Уже разработанные методы, как гормональный,

рефлексологический, УЗИ и другие являются весьма дорогими, редко

применимы в практике промышленного животноводства. Ранние методи

диагностики беременности не всегда нужны, так как после установления

оплодотворения эмбрион может погибнуть на стадии дробления.

Определение прогестерона способом ИФА не всегда объективно при

персистенции желтых тел. Ректальный метод трудоемкий, не является

ранним методом диагностики, ошибочным при гибели еще не

рассосавшегося плода, при грубом исполнении может вызвать аборт.

112

Цитологический метод диагностики по пробе, взятой из влагалища

стерильной акушерской ложкой Панкова Б.Г., является высоко объективным.

При беременности в 1 месяц в мазке должны быть выявлены только

эпителиальные клетки влагалища, поскольку слизистая пробка беременности

является непреодолимым препятствием для выхода эпителиальных клеток

тела, рогов матки и яйцепроводов.

При эмбриональной смертности в мазке начнут появляться клетки

эндометрия в связи с началом процесса отторжения его как инородного тела.

После срыва беременности слизистая пробка лизируется и открывается путь

для выделения десквамированного эпителия матки и клеток белой крови.

Другой важной задачей цитологических исследований маточных

выделений является определение статуса половых органов. При снижении

местного внутриматочного клеточного иммунитета, под действием токсинов

условнопатогенной микрофлоры, в мазке будет отсутствовать фагоцитоз т.к.

нейтрофилы уже теряют свои адгезивные свойства – тесное окружение

нейтрофилами десквамированных эпителиальных клеток. Это будет

сигналом для применения лечебных мероприятий в отношении скрытых

эндометритов на ранней стадии – стадии токсикоза. У здоровых животных

фагоцитоз в мазках должен присутствовать, при отсутствии гнойных телец.

При снижении естественной резистентности усиливается

вирулентность микрофлоры в полости матки, которая аспирирована

атоничной маткой при кетозах и ацидозах сразу после рождения плода.

Нейтрофилы гибнут и превращаются в гнойные тельца. Такая цитограмма

будет свидетельствовать о начале скрытых эндометритов, которые, без

фармакопрофилактики, переходят в клинические формы эндометритов.

Для диагностической характеристики степени воспаления в матке, при

цитологической диагностике статуса эндометрия по мазкам из маточных

выделений, нами взяты два критерия, разработанные Панковым Б.Г. Это

тканевой индекс и токсический фактор.

113

Снижение эмбриональной смертности у коров, которая достигает 70 %

на молочных фермах, была важной целью наших исследований. Для этого мы

в опытной группе коров использовали акушерскую ложку Панкова Б.Г. для

клинической экспресс-диагностики послеродовых осложнений и

разработанную Панковым Б.Г. схему ранней акушерской диспансеризации. А

цитологические исследования использованы для лабораторной диагностики

статуса половых органов: нормы, эмбриональной смертности и стадий

воспаления в половых органах коров.

В день постановки диагноза на клинический или скрытый эндометрит,

мы проводили лечение больного животного однократным внутриматочным

введением суспензии ФЛЭКС-2 (или другими лекарственными средствами)

для того, чтобы в очередную половую охоту осеменить выздоровевшее

животное. Мы диагностировали скрытые эндометриты АЛП у всех животных

за 10-12 дней до стадии возбуждения, т.е. в стадию уравновешивания

полового цикла.

Для более эффективной борьбы с бесплодием в том числе и с

эмбриональной смертностью, в течение 30 секунд провидили экспресс

диагностику скрытых эндометритов АЛП на 15-ый день после отела и за 10 -

12 дней до запланированного искусственного осеменения с одновременным

лечением внутриматочным введением суспензии ФЛЭКС-2 в дозах,

соответствующих объему рогов матки (50…30 мл.). Причем в каждый рог

матки необходимо ввести по равной половине дозы, чтобы не произошел

рецидив воспаления из непролеченного рога матки.

Тонкая осеменительная пипетка всегда проходит через канал шейки

матки коров, больных скрытым эндометритом. А суспензия ФЛЭКС-2,

введенная в фазу желтого тела не изгоняется из матки, т.к. прогестерон

нейтрализует действие окситоцина на миометрий. Суспензия проявляет

более полный лечебный эффект, находясь в полости матки более длительное

время. В стадию полового возбуждения остатки лекарственной смеси будут

114

выделяться с течковой слизью и не окажут негативного влияния на

оплодотворение при искусственном осеменении.

После проведенных мероприятий были приготовлены мазки через 3-5

дней и в них гнойных телец уже не было или был очень маленький процент.

А в мазках больных скрытым эндометритом коров контрольной группы,

существенных изменений с 15 –го по 21 дни после отела, не произошло.

Таким образом, коров больных скрытыми эндометритами,

цервицитами, вестибуло-вагинитами следует лечить одновременно

внутриматочным введением суспензии ФЛЭКС-2 или другими препаратами с

пролонгированным (7 суток) противовоспалительным и с широким спектром

антимикробного действия. За период действия препарата животное много раз

меняет позу (ложится и встает), а в процессе доения матка под действием

окситоцина повышает свой тонус и поэтому лекарственное средство мелкими

порциями выходит через канал шейки матки во внешнюю среду, оказывая

терапевтическое действие не только на эндометрий, но и на влагалище, и на

наружные половые органы. При лечебном снятии воспаления в эндометрии,

«медиаторы воспаления» поступающие по системе воротных вен в яичники

(к клеткам мишеням) подадут сигнал к рассасыванию желтого тела и к

созреванию фолликулов. Миометрий приобретает чувствительность к

действию окситоцина после снятия прогестеронового блока, поэтому

ФЛЭКС-2 начнет выделяться из рогов матки через половые пути и окажет

лечебное действие на соответствующие очаги воспаления. Поэтому отпадает

необходимость в дифференцированном лечении каждого из отделов половых

органов.

Ранняя диагностика клинических и скрытых эндометритов акушерской

ложкой Б.Г. Панкова, а также фармакопрофилактика субинволюции матки с

помощью миотропных препаратов, например «Гетеротон», и своевременное

лечение их суспензией ФЛЭКС-2 в стадию уравновешивания полового

цикла, в соответствии со схемой «ранней диагностики,

фармакопрофилактики и лечения послеродовых осложнений у коров» как

115

регулярный методический прием в плане борьбы с бесплодием, позволяет

значительно повысить воспроизводительную способность коров. После

проведенных нами исследований в соответствии с вышеизложенными

мероприятиями мы добились снижения процента заболеваемости коров

опытной группы. Так, на 6-ой день после отела мы проводили диагностики

клинических эндометритов у коров опытной и контрольной групп. У 10 %

коров опытной группы был диагностирован клинический эндометрит. У 80 %

коров контрольной группы АЛП из влагалища извлекался воспалительный

экссудат с примесью гноя. По мазкам приготовленным в тот же день у этих

коров преобладают нейтрофилы и гнойные тельца и мало соматических

клеток.

Исключение с помощью суспензии ФЛЭКС-2 воспалительного

процесса в органах размножения коров и поддержание сократительной

способности матки с помощью миотропного препарата «Гетеротон»

позволило снизить в опытной группе количество коров, больных

субинволюцией матки. Диагностику субинволюции матки проводили с

помощью АЛП. За показатель завершенности инволюции матки был принят

процент, на который стержневая часть акушерской ложки (длина которой

составляет 27 см.) входит во влагалище до шейки матки. В норме этот

показатель равен 50…55 %. Если в опытной группе к 24-му дню после отела

у 80 % коров инволюция матки была завершена, то в контрольной группе

субинволюция матки была диагностирована у 90 % коров.

Для профилактики бесплодия и эмбриональной смертности,

крайне важно проводить осеменение только после исключения заболевания

скрытым эндометритом. Диагноз на скрытый эндометрит можно легко

поставить по пробе маточных выделений, взятых под шейкой матки АЛП.

Если в прозрачной (густой или жидкой) слизи будут заметны включения

фрагментов гноя, то диагноз на скрытый эндометрит считается

установленным.

116

На 15-ый день после отела проводили диагностику скрытого

эндометрита. В опытной группе скрытый эндометрит был выявлен у 20 %

коров, после чего проводились лечебные мероприятия по схеме № 1. В

контрольной группе у 60 % коров был поставлен диагноз на скрытый

эндометрит. Такие показатели состояния органов размножения у коров

контрольной группы в дальнейшем значительно осложняют процесс

инволюции матки и значительно удлиняют сервис-период. Полученные

результаты были подтверждены цитологическим методом. Причем, в мазках

маточной слизи, взятой у коров больных скрытым эндометритом в опытной

группе в отличие от таких же коров контрольной группы процент

соматических клеток и фагоцитоза выше, а процент нейтрофилов и гнойных

телец ниже. После проведения лечебных мероприятий, коровы опытной

группы выздоровели, а в мазках контрольной группы существенных

изменений не произошло.

Нами установлено, что по клеточному составу мазков можно судить об

определенных процессах, происходящих в половых органах. Для суммарной

оценки нормы и патологии половых органов по цитограммам мазков из

влагалищных проб маточных выделений, отобранных АЛП, Б.Г. Панковым

выведены два критерия – ТИ и ТФ.

У коров больных клиническим эндометритом в мазках обнаруживается

большое количество гнойных телец и нейтрофилов, влагалищные и маточные

клетки находятся в стадии лизиса, тканевой индекс у таких коров равен

0,44±0,23, токсический фактор – 0,37±0,08. При вагините у стельных коров в

мазках присутствует много эпителиальных клеток влагалища и большое

количество гнойных телец и нейтрофилов. При цервиците в мазках

обнаруживается высокий процент клеток шейки матки, низкий процент

гнойных телей и очень мало фагоцитоза, при этом тканевой индекс равен

3,69±1,43, а токсический фактор равен 0,15±0,1. В мазках коров, больных

скрытым эндометритом картина мазках идентична мазкам при клиническом

эндометрите, присутствует высокий процент гнойных телец и нейтрофилов,

117

здесь тканевой индекс равен 1,2±0,24, токсический фактор – 0,63±0,26. У

здоровых стельных коров в мазке присутствуют эпителиальные клетки

влагалища, слизистые клетки шейки матки, отсутствуют фагоцитоз и

гнойные тельца, но при малых сроках стельности в первый месяц, еще не все

клетки тела и рогов матки лизируются и иногда присутствует небольшой

процент нейтрофилов, гнойных телец и фагоцитоза, при этом у коров в

первый месяц стельности тканевой индекс равен 14,6±9,4, а токсический

фактор равен 0,04±0,05. Появление в мазках стельных коров, большого

количества клеток тела матки и появление большого количества клеточных

розеток свидетельствует о произошедшей гибели эмбриона на ранних

стадиях своего развития, Тк. И. равен 3,05±2,29, а Т.Ф. равен 1,43±0,81. Если

в мазках коров появляется большое количество клеток из определенного

отдела половых органов и это сопровождается присутствием высокого

процента гнойных телец, то данный процесс свидетельствует о начале

воспалительного процесса в этом отделе. У физиологически здоровых не

стельных коров в мазках могут преобладать соматические клетки. Но

количество клеток белой крови меняется в зависимости от стадии полового

цикла. Так, в стадию возбуждения количество клеток белой крови

увеличивается, а в стадию уравновешивания полового цикла – уменьшается.

У здоровых коров вокруг эпителиальных клеток скапливаются нейтрофилы,

образуя клеточные розетки.

Цитологический метод является более точным и экономически

оправданным, так как мазок, приготовленный в течении пяти минут может

дать полную информацию не только о наличии стельности, но и о

клиническом состоянии органов размножения данной коровы.

Взаимосвязь уровня прогестерона и цитологической картины мазка

маточной слизи при диагностике стельности

Прогестерон является главным представителем гестагенов. Продукция

прогестерона стимулируется ЛГ и ЛТГ на образование и функцию желтого

118

тела. В норме продукция прогестерона составляет 3-5 мг в сутки, тогда как в

конце беременности его количество достигает 30-50 мг в сутки. Желтое тело

вырабатывает прогестерон в течение всего периода стельности. Его

концентрация с 5-7-го дня после осеменения увеличивается и достигает пика

на 12-17-й день, и если беременность не наступает, то за 1-3 дня до

очередного полового цикла содержание прогестерона резко падает с 4,9

нг/мл и больше до 1,7 нг/мл и меньше. В настоящее время выпускаются

приборы для цветной реакции, с помощью которых можно визуально прямо

на ферме за 2-3 минуты определить уровень прогестерона в молоке и, таким

образом, достоверно установить наличие или отсутствие стельности, а также

тесты для определения беременности по изменению цвета тест-полоски,

смоченной мочой коровы.

В результате проведенных нами исследований молока на уровень

прогестерона, мы определили что в опытной группе 70 % коров являются

стельными, картина мазка маточной слизи показывает что количество

стельных коров составляет 80 %, так как в их мазках отсутствуют клетки

эндометрия и высокие проценты влагалищных клеток. У 10 % коров судя по

уровню прогестерона стельность сомнительна, 10 % коров являются не

стельными, по картине мазков можно судить что действительно у 10 % коров

низкий процент влагалищных клеток и высокий процент гнойных телец, и у

10 % коров присутствуют клетки эндометрия, что подтверждает отсутствие

стельности.

В контрольной группе судя по прогестерону 50 % коров являются

стельными, у 30 % коров стельность сомнительна, 20 % коров не стельные.

Изучив мазки данных коров можно утверждать, что стельными в

контрольной группе можно считать лишь 20 % коров, у 30 % - стельность

сомнительна, а 50 % коров не являются стельными. То, что у коров уровень

прогестерона превышает 7 нг/мл, но у них в мазках присутствуют клетки

тела и рогов матки можно объяснить тем что при персистентном желтом теле

119

прогестерон не перестает выделяться и концентрация его может достигать 7

нг/мл и более.

120

4. ВЫВОДЫ

1. При изучении мазков, приготовленных из влагалищной слизи, взятой в

переднем отделе влагалища у стельных коров, ярко выражен высокий

процент эпителиальных клеток влагалища. Установлено, что во влагалищной

слизи стельных коров отсутствуют эпителиальные клетки других отделов

органов размножения, в первый месяц стельности могут присутствовать

клетки белой крови в небольшом количестве. Тканевой индекс у стельных

коров равен 14,6±9,4, а токсический фактор равен 0,04±0,05.

2. Цитоморфологический контроль стельности показал, что в подопытной

группе 80,0 % коров являются стельными. В мазках стельных животных

обнаруживаются только эпителиальные клетки влагалища, а у не стельных

коров - эпителиальные клетки всех отделов половых органов.

Иммуноферментным методом стельность подтвердилась у 70,0 % коров. По

точности диагностики стельности цитоморфологический метод совпадает с

ректальным в 100,0 %, а с методом ИФА – в 60,0 % случаев.

3. Применение экспресс-диагностики акушерской ложкой Панкова Б.Г. и

схемы фармакопрофилактики послеродовых осложнений, внутриматочным

введением суспензии ФЛЭКС-2 в сочетании с инъекциями маточного

средства «Гетеротон», позволяет снизить заболеваемость коров:

субинволюцией матки с 90 % до 20 %, клиническим эндометритом – с 80 %

до 10 %, скрытым эндометритом – с 60 % до 20 %.

4. Цитоморфологическим методом, по мазкам из маточных выделений,

установлено завершение инволюции матки в опытной группе к 24-му дню

новотельности у 80,0%, а в контрольной – у 10,0% коров.

5. У коров больных клиническим эндометритом, тканевой индекс

максимально снижался на фоне высоких показателей токсического фактора.

При скрытом эндометрите тканевой индекс равен 1,2±0,24, токсический

фактор составляет 0,63±0,26; при эмбриональной гибели плода, который мы

устанавливали по выявлению в мазках, приготовленных из влагалищной

слизи ранее стельных коров, эпителиальных клеток матки, а также

121

нейтрофилов, тканевой индекс равен 2,9±2,08, а токсический фактор -

1,25±0,63.

6. В результате проведенных бактериологических исследований

экссудата из маточной слизи, взятой у коров больных эндометритом было

установлено, что маточные выделения были контаминированы ассоциацией

микроорганизмов: Staphylococcus - 13,7 %, Citrobacter – 19 %, β-

гемолитические E. Coli - 67,3 %.

7. Проведенные нами бактериологические исследования показывают, что

суспензия ФЛЭКС-2 проявила высокую бактерицидную активность в

отношении таких штаммов микроорганизмов, как: E. coli, Salm. enteritidis, Ps.

aeruginosa, Staph. aureus, Bac. сereus. Поэтому данная суспензия может быть

рекомендована для внутриматочного введения при фармакопрофилактике и

лечении эндометритов у коров.

5. СВЕДЕНИЯ О ПРАКТИЧЕСКОМ ИСПОЛЬЗОВАНИИ

РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЙ

1. Цитологическая диагностика беременности, по наличию в мазке

влагалищной слизи только эпителиальных клеток влагалища и отсутствия

эпителиальных клеток матки, высоко достоверна, по сравнению с другими

методами. Данный метод можно рекомендовать для ранней диагностики

стельности коров в производственных условиях;

2. На современных молочных комплексах, где эмбриональная смертность

достигает 70 %, следует диагностировать ее цитологическим методом после

установления стельности. Эмбриональная смертность устанавливается, если

при повторных исследованиях через 19…21 сутки в мазке появляются

эпителиальные клетки матки и нейтрофилы;

3. Внедрение фармакопрофилактики, экспресс-диагностики послеродовых

заболеваний, цитологической диагностики нормы-патологии, беременности,

эмбриональной смертности позволяет повысить процент плодотворных

122

осеменений в молочных стадах на 60 % (в 4 раза), если осеменять коров в

первые две половые охоты.

6. РЕКОМЕНДАЦИИ ПО ИСПОЛЬЗОВАНИЮ НАУЧНЫХ И

ПРАКТИЧЕСКИХ ВЫВОДОВ

1. Применение цитоморфологической диагностики нормы-патологии в

половых органах, стельности и эмбриональной смертности по мазкам из проб

маточных выделений позволит своевременно провести экономически

эффективные лечебно-профилактические мероприятия по борьбе с

бесплодием коров;

2. Для интенсификации воспроизводительной способности коров, снижения

послеродовых осложнений, эмбриональной смертности необходимо шире

внедрять схему ранней акушерской диспансеризации;

3. Ранняя акушерская диспансеризация по Панкову Б.Г. базируется на

фармакопрофилактике внутриматочным введением суспензии ФЛЭКС-2,

экспресс-диагностике послеродовых заболеваний акушерской ложкой

Панкова Б.Г., позволяющей значительно снизить частоту субинволюции

матки, заболеваний клиническими и скрытыми эндометритами.

4. Материалы диссертационной работы используются при чтении курса

лекций по акушерству, гинекологии и биотехнике репродукции студентам

очного и заочного отделений факультета ветеринарной медицины и

слушателям ФПК МГАВМ и Б. им. К.И. Скрябина.

123

7. СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННОЙ ЛИТЕРАТУРЫ

1. Абрамов И.И. Внешние признаки нарушения обмена веществ./ И.И.

Абрамов, И.Д. Жуцкий, А.А. Пырцу // Краткий справочник

ветеринарного работника. - 1987. - С. 100-108.

2. Авдеенко В.С. Новые препараты для лечения и профилактики

эндометритов коров/ В.С. Авдеенко, В.Г. Гавриш / Состояние и

перспективы научных исследований по профилактике и лечению

болезней с.-х. животных и птиц/ Материалы научной конференции,

посвященной 50-летию Краснодарского НИВС. Краснодар. - 1996. - С. 3

– 4.

3. Акатов В.А. Гинекологическая диспансеризация крупного рогатого

скота в колхозах и совхозах./ В.А. Акатов // Кн. Воронеж. – 1973. - С.

112.

4. Акопов А.А. Профилактика нарушений обмена веществ у коров с

помощью микроэлементов./ А.А. Акопов //Ж. Ветеринария. - № 6. - 1985.

С. 54-56.

5. Алексеев Н.Г. Способы быстрой окраски мазков крови, пунктатов и

препаратов-отпечатков./ Н.Г. Алексеев // Лабораторное дело. - 1956. - №

1. - С. 31.

6. Амагырова Т.О. Интенсификация воспроизводства коров

биотехнологическими методами./ Т.О. Амагырова // Актуальные

проблемы болезней молодняка в современных условиях. Материалы

международной науч.-практ. конф. 23-25 сент. - Воронеж. - 2002. С. 69.

7. Андреев Г.М. Применение метроцида в послеродовой период у коров /

Г.М. Андреев / Профилактика незаразных болезней и терапия с.-х.

животных и пушных зверей. - Л. - 1990. вып. 180. - С. 134 – 137.

8. Андросова Е.Н. Взятие мазков из влагалища для определения степени

чистоты, а также выявление гонококков и трихомонад./ Е.Н. Андросова

// Уч. пособие. Акушерство и гинекология (методич. рекоменд. по

выполнению манипуляций. М. «АНМИ». – 1995. С. 11.

124

9. Аничков Н.М. Патоморфология эндометрия при гормональных

воздействиях./ Н.М. Аничков // Архив патологии, 2001, т. 63, № 6, С. 3 –

7.

10. Антонюк В.С. Биотехнические способы повышения эффективности

оплодотворения сельскохозяйственных животных. / В.С. Антонюк // -

Минск: - Ураджай. - 1988. - 198 с.

11. Анфиногенова Л.В. Цитологическая диагностика по аспирационному

материалу из матки. / Л.В. Анфиногенова // Материалы трудов 4-го

съезда акушеров-гинекологов. – Челябинск. - 1957. - С. 171 – 176.

12. Багманов М.А. Микрофлора матки коров после нормальных и

патологических родов / М.А. Багманов / Актуальные проблемы

достижения в области репродукции и биотехнологии размножения

животных. Сб. науч тр. Ставропольская ГСХА. Ставрополь. - 1998, - 326

с.

13. Багманов М.А. Морфологические изменения в гениталиях коров в

послеродовой период / М.А. Багманов, Р.Н. Мухаметгалиев / Материалы

научно-производственной конференции по актуальным вопросам

ветеринарии и зоотехнии. Казань, 2001, - С. 10 – 11.

14. Бадальянц П.П., Авдеева Н.К. С помощью цитологии мазка. / П.П.

Бадальянц, Н.К. Авдеева // Земля сиб., дальневост. - 1983. № 9. - С. 35.

15. Бадальянц П.П. Особенности ранней диагностики аномалий гинеталий

по мазкам-отпечаткам цервикальной слизи. / П.П. Бадальянц // Научн.

Техн. Бюл., Васхнил. - 1983. вып. 42. - С. 35 – 36.

16. Баймишев Х.Б. Влияние дозы движения на морфогенез маточных труб

телок. / Х.Б. Баймишев // М.: «Вет. с.-х. жив.» 7. - 2006. Ж. - С. 45 – 46.

17. Баймишев Х.Б. Морфогенез половых органов и воспроизводительная

способность телок в зависимости от степени локомоции. / Х.Б.

Баймишев // Актуальные проблемы болезней молодняка в современных

условиях. Материалы международной науч.-практ. конф. 23-25 сент.

Воронеж. - 2002. - С. 18.

125

18. Баландин А.Д., Несмеянова Н.П. О комплексном микроскопическом

исследовании влагалищных мазков. / А.Д. Баландин, Н.П. Несмеянова //

Акушерство и гинекология. – 1955. № 4. С. 73 – 76.

19. Баландин А.Д., Юдаев К.В., Ягафаров Л.М. Цитологическая картина

влагалищного мазка в разные сроки беременности, при родах и

послеродовом периоде. / А.Д. Баландин, К.В. Юдаев, Л.М. Ягафаров //

Акушерство и гинекология. - 1953. № 1. - С. 42 – 44.

20. Батраков А.Я. Проблемы воспроизводства крупного рогатого скота в

стадах с высокой молочной продуктивностью. / А.Я. Батраков //

Материалы всероссийской научной и методической конференции по

акушерству, гинекологии и биотехнике размножения животных. –

Воронеж. - 1994. С. 32.

21. Батраков А.Я. Применение ихтиола при задержании последа у коров /

А.Я. Батраков, В.Ф. Орисюк // Ветеринария. - 1999. № 9. - С. 42.

22. Бахитов К.И. Совершенствование способа регуляции

воспроизводительной функции у коров после отела. / К.И. Бахитов //

Актуальные проблемы биологии в животноводстве. - Боровск. - 2000. -

С. 269-230.

23. Бахмут Л.Н., Вагенлейтнер А.В., Кононов Г.А. и др. Диагностика и

профилактика эмбриональной смертности у коров. / Л.Н. Бахмут, А.В.

Вагенлейтнер, Г.А. Кононов и др. // С.-х. биология. Сер. Биология

животных. - 1994. № 4. С. 83 – 87.

24. Безбородин В.В. Бактериальная контаминация матки коров и ее

влияние на воспроизводительную функцию после родов. / В.В.

Безбородин // Автореф. канд. ветер. наук. - М. - 1982. - 26 с.

25. Безбородин В.В. Организация воспроизводства крупного рогатого

скота и акушерско-гинекологических мероприятий в новых условиях

хозяйствования / В.В. Безбородин // Монография. Волгоград. - 1997. -

220 с.

126

26. Белкин Б.Л., Бигманов Б.Л., Юсупов Х.Л. Характеристика условно-

патогенной микрофлоры родовых путей у здоровых и больных коров./

Б.Л. Белкин, Б.Л. Бигманов, Х.Л. Юсупов // Кн. совершенствование мер

борьбы с болезнями сельскохозяйственных животных в Таджикистане. -

1988. - С. 24-33.

27. Белобороденко А.М. Влияние гиподинамии на половой аппарат коров

и их репродуктивную активность. / А.М. Белобороденко, П.В. Дунаев,

Т.А. Белобороденко // Морфология. 1996. № 2. - С. 34.

28. Бесхлебнов А.В. Яловость крупного рогатого скота и борьба с ней. /

А.В. Бесхлебнов // М.: Сельхозгиз. - 1952. - 191 с. - ил.

29. Боголюбский О.Н. Эмбриология сельскохозяйственных животных. /

О.Н. Боголюбский // М. - 1968. - 255 с.

30. Божко А.П. Разработка гормональных методов снижения

эмбриональной смертности у КРС (применение лютео- и эмбрио-

стабила). / А.П. Божко // Автореф. дисс. канд. биол. наук. Моск. обл., п.

Дубровицы. - 2002. - 22 с.

31. Буданцев А.И. Прогнозирование и фармакопрофилактика болезней

родов и послеродового периода у коров / А.И. Буданцев // Материалы

Всероссийской научной и учебно-метод. Конф. По акушерству,

гинекологии биотехнике размножения животных. - Воронеж. - 1994. - С.

34 - 35.

32. Буш В. Нарушения плодовитости крупного рогатого скота в условиях

промышленного производства и методы их устранения. / В. Буш // В кн.

Теория и практика воспроизведения животных. М. - 1984. - С. 68-105.

33. Быков К.М. Учение И.П. Павлова и современное естествознание. / К.М.

Быков // М.: Медгиз. - 1952. - 36 с.

34. Валюшкин К.Д., Кузьмич Р.Г. Состояние воспроизводства стада в

хозяйствах Республики Беларусь / К.Д. Валюшкин, Р.Г. Кузьмич //

Актуальные проблемы и достижения в области репродукции и

127

биотехнологии размножения животных. Сб. Науч. Трудов. Ставрополь. -

1998. - С. 197 - 200.

35. Валюшкин К.Д., Медведев Г.Ф. Акушерство, гинекология и

биотехника размножения животных: Учебник. / К.Д. Валюшкин, Г.Ф.

Медведев // Минск: Ураджай. - 1997. - 718 с.

36. Валюшкин К.Д. Витамины и микроэлементы в профилактике

бесплодия коров. / К.Д. Валюшкин // 2-е изд., перераб. и доп. Минск:

Ураджай. - 1993. - 111 с. - ил.

37. Варнавский А.Н. Ежегодно получать от коровы теленка – реально! /

А.Н. Варнавский // М.: «Вет. с.-х. жив.» 5. - 2006. Ж. - С. 45 – 47.

38. Васильев Е.А. Кетоз. / Е.А. Васильев // Клиническая биохимия

сельскохозяйственных животных. - 1974. - С. 83.

39. Велиток И.Г. Организация воспроизводства на молочных фермах в

условиях постоянной диспансеризации маточного поголовья. / И.Г.

Велиток // Воспроизводство-ликвидация яловости. М. - 1990. - С. 17.

40. Визнер Э. Кормление и плодовитость сельскохозяйственных животных

/ Э. Визнер // Пер. с нем. М.: Колос. - 1976. - 160 с. - ил.

41. Виноградов М.И. Учение Н.Е. Введенского об основных нервных

процессах. / М.И. Виноградов // М.: Медгиз - 1952. - 248 с.

42. Вишняков С.И. Межклеточный обмен в организме животных. / С.И.

Вишняков // М.: Агропромиздат. - 1988. - 158 с. - ил.

43. Воронин В.В., Косорукова З.Я., Гуров А.С. Причины бесплодия коров

в условиях молочных комплексов. / В.В. Воронин, З.Я. Косорукова, А.С.

Гуров // Ветеринария. - 1980. - С. 48-49.

44. Воскобойник В.Ф. Эффективный метод лечения коров с послеродовым

эндометритом / В.Ф. Воскобойник, Г.П. Козлов // Ветеринария. - 1991. -

№ 5. - С. 45 - 46.

45. Гавриленко Н.С. Повышение воспроизводительной способности коров

/ Н.С. Гавриленко, Г.С. Шарапа // Зоотехния. - 1990. № 1. - С. 77-79.

128

46. Гавриш В.Г. Лечебно-профилактическая эффективность йодопена при

эндометрите / В.Г. Гавриш, А.В. Егунова, С.В. Семенов // Ветеринария. -

2000. - № 5. - С. 35.

47. Галынкин В.А. Питательные среды / В.А. Галынкин, Н.А. Заикина,

В.И. Кочеровец // справочник, Санкт-Петербург. - 2006. - 336 с.

48. Головко Е.Г. Сравнительная оценка методов ранней диагностики

стельности коров с использованием теста определения уровня

прогестерона в молоке. / Е.Г. Головко, Р.И. Кускова // Тезисы докладов

Всесоюзной научно-технической конференции «Использование

гормональных препаратов в животноводстве. Дубровицы (Москва). -

1991. - С. 18-19.

49. Гончаров В.П. Сервис-период может стать короче (этиология скрытых

абортов у коров). / В.П. Гончаров // Животноводство России. - 2004. №

11. С. 28 – 29.

50. Гончаров В.П. Теоретические и практические основы предупреждения

скрытых абортов у коров и кобыл. / В.П. Гончаров // Материалы

международной научно-практической конференции «Роль и значение

метода искусственного осеменения с.-х. животных в прогрессе

животноводства 20 и 21 веков». Дубровицы. - 2004. - С. 262 – 265.

51. Гончаров В.П., Карпов В.А. Профилактика и лечение

гинекологических заболеваний коров / В.П. Гончаров, Карпов В.А. // М.:

Росагропромиздат. 1991. 190 с.

52. Горчаков В.В., Косорукова З.Я. К причинам низких показателей

воспроизводства крупного рогатого скота и сохранности молодняка. /

В.В. Горчаков, З.Я. Косорукова // Актуальные проблемы болезней

молодняка в современных условиях., Материалы международной науч.-

практ. конф. 23-25 сент. - 2002. Воронеж. - С. 198.

53. Горячев В.С., Прокофьев М.И., Плишкина К.И. и др. Влияние

простагландина на воспроизводительную функцию анэстральных коров.

129

/ В.С. Горячев, М.И. Прокофьев, К.И. Плишкина и др. // С.-х. биология. -

1981. № 16. - С. 102-105.

54. Грига Э.Н. Задержавшееся ЖТБ – причина гинекологической

патологии / Э.Н. Грига // Вестник ветеринарии. - 1998. № 9 (3/98). - С.

87-98.

55. Грига Э.Н. Послеродовая диспансеризация коров. Актуальные

проблемы и достижения в области репродукции и биотехнологии

размножения животных / Э.Н. Грига // Сб. Науч. Трудов. - Ставрополь.

- 1998. - С. 130 - 132.

56. Грига Э.Н. Этиология родовых и послеродовых осложнений / Э.Н.

Грига // Вестник ветеринарии. - Ставрополь. - 1997. - № 5. - С. 18 - 19.

57. Григорьева Т.Е., Алексеев И.А. Микрофлора матки у коров в

послеродовой период. / Т.Е. Григорьева, И.А. Алексеев // Тезисы докл.

на науч.-произв. конф. по актуальным вопросам ветеринарии. Горький, -

1983. - С. 39.

58. Григорьева Т.Е. Профилактика алиментарного бесплодия у крупного

рогатого скота в условиях минеральной недостаточности. / Т.Е.

Григорьева // Материалы Всероссийской научн. и уч.-методич. конф. по

акушерству, гинекологии и биотехнике размножения животных.

Воронеж. - 1994. - С. 45.

59. Гурченко А.Н., Кудимова С.П. Профилактика акушерско-

гинекологической патологии коров. / А.Н. Гурченко, С.П. Кудимова //

М.: «Вет. с.-х. жив.» 1. - 2006. Ж. - С. 38 – 40.

60. Дашукаева К.Г. Гормональные показатели крови коров при

фетоплацентарной недостаточности. / Дашукаева К.Г. // Материалы

Всероссийской научн. и уч.-методич. конф. по акушерству, гинекологии

и биотехнике размножения животных. Воронеж. - 1994. - С. 57-58.

61. Дегтярев В.П., Леонов К.В., Гулянский А.К. Коррекция

репродуктивной функции коров при различном состоянии естественной

130

резистентности. / В.П. Дегтярев, К.В. Леонов, А.К. Гулянский // Доклады

РАСХН. - 2006. № 3. - С. 52-53.

62. Дериглазова Н.А. Морфология и углеводные компоненты эпителия

половых органов самок крупного рогатого скота. / Н.А. Дериглазова //

Сб. Бурятск. отд. Всес. научн. о-ва анатомов, гистологов и эмбриологов.

- 1972. Вып. 3. - С. 90-94.

63. Дерябин Д.Г., Минаков А.А., Борисов С.Д. Спектр микрофлоры,

изолируемой из различных отделов репродуктивного тракта женщин. /

Д.Г. Дерябин, А.А. Минаков, С.Д. Борисов // Журнал микробиологии,

эпидемиологии, иммунобиологии. - 2001. № 4. - С. 84 – 86.

64. Дозорцева Г.Л. Функциональная диагностика в акушерстве и

гинекологии на основе цитологических исследований. / Г.Л. Дозорцева //

Минск. - 1952. - С. 158.

65. Долженков В.М. Влияние различных гормональных обработок на

воспроизводительную способность и гормональный статус коров с

гипофункцией яичников. Нейроэндокринная регуляция воспроизводства

и продуктивности сельскохозяйственных животных. / В.М. Долженков //

(Сборник научных трудов ВНИИФБиП) Боровск. - 1983. том XXVII. - С.

44-53.

66. Дюльгер Г.П., Ёлкин П.А. Ультразвуковая диагностика объемных

структур яичников и беременности у коров. / Г.П. Дюльгер, П.А. Ёлкин

// М.: «Вет. с.-х. жив.» 9. - 2006. Ж. - С. 50 – 54.

67. Егунова А.В. Эффективность йодосодержащих препаратов при

акушерско-гинекологической патологии / А.В. Егунова // Ветеринария. -

2002. - № 8. - С. 33.

68. Ельчанинов В.В. Проблемы физиологии и патологии репродуктивной

функции коров. Часть 2. Этиопатогенез нарушений репродуктивной

функции у коров и телок и методы их коррекции. / В.В. Ельчанинов,

А.М. Чомаев, Ш.Н. Насибов // Дубровицы. - 2003. - 182 с.

131

69. Еремин С.П. Методы ранней диагностики патологии органов

размножения у коров. / С.П. Еремин // М.: «Ветеринария» 4. - 2004. Ж. -

С. 38 – 41.

70. Жаров А.В. Морфофункциональные изменения в органах размножения

у высокопродуктивных коров при патологии обмена веществ. / А.В.

Жаров // Материалы Всероссийской научной и учебно-методич. конф. по

акушерству, гинекологии и биотехнике размножения животных.

Воронеж. - 1994. - С. 157-159.

71. Жаров А.В. Патогенез нарушения обмена веществ у животных при

промышленном животноводстве. Профилактика незаразных болезней у

коров. / А.В. Жаров // Тезисы докладов науч.-практич. конфер. Тарту. -

1988. - С. 18-21.

72. Железнов Б.И. Цитологический метод исследования в гинекологии и

акушерстве. / Б.И. Железнов // Советская медицина. - 1959. № 9. - С. 70 –

77.

73. Животягина Е.В., Семенов О.В. Цитологический состав влагалищной

слизи коров при нормальном течении послеродового периода. / Е.В.

Животягина, О.В. Семенов // М.: «Ветеринария» 7. - 2005. Ж. - С. 34 –

36.

74. Завадовский М.М. Теория и практика гормонального метода

стимуляции многоплодия сельскохозяйственных животных. / М.М.

Завадовский // М.: Сельхозиздат. - 1963. - 671 с.

75. Заянчковский И.Ф. Задержание последа и послеродовые заболевания у

коров. / Заянчковский И.Ф. // М.: Колос. - 1964. - 384 с.

76. Заянчковский И.Ф. Профилактика и лечение акушерско-

гинекологических заболеваний у коров / И.Ф. Заянчковский // Уфа.

Башк. кн. изд-во. - 1982. - 232 с.

77. Зверева Г.В. Акушерская и гинекологическая диспансеризация в

системе профилактики болезней крупного рогатого скота / Г.В. Зверева

// Теорет. и практ. вопр. ветеринарии. - Тарту. - 1993. - Т. 1. - С. 7 - 12.

132

78. Зверева Г.В. Достижения науки и практики в профилактике бесплодия

с.-х. животных. / Г.В. Зверева // Материалы конф.: «Профил. бесплодия

с.-х. животных на Северном Кавказе». Новочеркасск. - 1974. - С. 9 – 13.

79. Зудилин В.А., Чистяков И.Я. О роли синегнойной бактерии в

нарушении воспроизводительной функции у животных. / В.А. Зудилин,

И.Я. Чистяков // Ак-во, гинек., иск. осем. и болезни молоч. железы с.-х.

животных. Л. - 1976. - С. 73-74.

80. Зухрабов М.Г., Преображенский О.Н. Стрессы - главная причина

бесплодия животных / М.Г. Зухрабов, О.Н. Преображенский //

Ветеринарный врач. № 2. - 2002. - С. 50 - 54.

81. Зюбин И.Н., Зюбина М.Ф., Лупсанова Д.Б. Активизация

функциональной системы мать-плод-приплод-молозиво у коров. / И.Н.

Зюбин, М.Ф. Зюбина, Д.Б. Лупсанова // Материалы Всероссийской

научной и учебно-методич. конф. по акушерству, гинекологии и

биотехнике размножения животных. Воронеж. - 1994. - С. 61.

82. Зюбин И.Н. К проблеме терапии и фармакопрофилактики

гинекологической патологии у коров / И.Н. Зюбин, М.Ф. Зюбина, В.Г.

Черных // Науч.-тех. Бюл. Ин-та. Эксперем. Вет. Сиб. И Д.В. - 1991. - №

1. - С. 19 - 22.

83. Ибрагимов М.Э. Клинико-морфологические характеристики шейки

матки у коров в норме и при эктропионе / М.Э. Ибрагимов // Автореф.

дис. … канд. вет. наук. Воронеж. - 1985. - 24 с.

84. Иванов И.И. Избранные труды. / И.И. Иванов // М.: Колос, 1970. 320 с.

85. Иванов И.Ф., Ковальский П.А. Гистология с основами эмбриологии

домашних животных. / И.Ф. Иванов, П.А. Ковальский // М.:

Сельхозиздат. - 1962. - 679 с. - ил.

86. Калиновский Г.Н. Непосредственные причины возникновения родов и

задержания последа у коров. / Г.Н. Калиновский // Материалы

Всероссийской научной и учебно-методич. конф. по акушерству,

гинекологии и биотехнике размножения животных, Воронеж, 1994, с. 70.

133

87. Калюжный И.И. Ацидоз рубца. / И.И. Калюжный // Ветеринария. -

1998. № 7. - С. 42-47.

88. Карлсон Б. Основы эмбриологии по Пэттену. / Б. Карлсон // Пер. с

англ. М.: Мир. - 1983. Т. 1. - 360 с. - ил.

89. Карпов В.А. Акушерство и гинекология мелких домашних животных. /

В.А. Карпов // М.: «Росагропромиздат». - 1990. - 288 с.

90. Кассирский И.А. Цитологическая диагностика во внутренней клинике.

/ И.А. Кассирский // Клиническая медицина. т. 24. № 3. - 1946. С. 19 – 26.

91. Климов А.Ф., Акаевский А.И. Анатомия домашних животных. / А.Ф.

Климов, А.И. Акаевский // М.: Сельхозгиз. - 1951. Т. 2. - 464 с.

92. Клинский Ю.Д., Кононов В.П., Нурахметов Ж.Ж. Определение

оптимального срока осеменения коров. / Ю.Д. Клинский, В.П. Кононов,

Ж.Ж. Нурахметов и др. // Зоотехния. - 1989. № 7. - С. 52-54.

93. Козбагарова Р.Г. Возможности цитологического метода исследования в

оценке патоморфоза при комбинированной терапии рака эндометрия. /

Р.Г. Козбагарова // Клинич. лабораторн. диаг-ка. - 1994. № 3. - С. 11 – 12.

94. Козлов Г.Г. Повышение оплодотворяемости самок после

искусственного осеменения. / Г.Г. Козлов // Ветеринарная рецептура с

основами терапии и профилактики: Справочник / К.И. Абуладзе, В.М.

Данилевский, Т.М. Веселова и др.; Под ред. И.Е. Мозгова. М. - 1988. - С.

237 – 244.

95. Кондрахин И.П. Алкалоз рубца. / И.П. Кондрахин // Ветеринария. -

1998. № 10. - С. 37 – 39.

96. Кононов Г.А. Биохимия эндометрия и ее значение для

дифференциальной диагностики и терапии бесплодия у коров. / Г.А.

Кононов // Автореф. дис. … д-ра вет. наук. Л. - 1998. - 34 с.

97. Кононов В.П., Дьякевич О.Н. Репродуктивный потенциал коров и

быков в зависимости от сезона года. / В.П. Кононов, О.Н. Дьякевич //

Зоотехния. - 1995. № 8. - С. 22-23.

134

98. Коноплев В.В. Об ошибках, допускаемых при исследовании коров на

беременность. / В.В. Коноплев // Ветеринария. - 1972. № 12. - С. 38 – 40.

99. Копытин В.К., Машаров Ю.В. Безмедикаментозный способ

профилактики задержания последа у коров. / В.К. Копытин, Ю.В.

Машаров // М.: «Ветеринария» 4. - 2003. Ж. - С. 30 – 34.

100. Костенко Т.С., Родионова В.Б., Скородумов Д.И. Практикум по

ветеринарной микробиологии и иммунологии. / Т.С. Костенко, В.Б.

Родионова, Д.И. Скородумов // М. Колос. - 2001. - 344 с.

101. Крылов В.М., Зинченко Л.И., Толстов А.И. Полноценное кормление

коров. / В.М. Крылов, Л.И. Зинченко, А.И. Толстов // Л.: Агропромиздат.

ЛО. - 1987. - 159 с.

102. Кузьмич Р.Г. Влияние сократительной функции матки на послеродовой

эндометрит у коров. / Р.Г. Кузьмич // Ветеринария. - 2000. № 2. - С. 37-

38.

103. Кюбар Х.В. Использование параметров гисто- и цитоструктуры

эндометрия в патогистологической диагностике эндометритов коров. /

Х.В. Кюбар // Методич. рекомендации. Тарту: Эстонская СХА. - 1981. -

19 с.

104. Левкиевский Д.Н. Эпизоотическая роль условно-патогенной

микрофлоры в бесплодии коров. / Д.Н. Левкиевский // Меры борьбы с

болезнями крупного рогатого скота. М. - 1984. - С. 34.

105. Манасян А.О., Манвелян А.М., Григорян А.С. Цитологическая картина

мазков, приготовленных из содержимого мочеполового преддверия

конъюнктивы и боковой стенки носа при стельности и персистентном

желтом теле коров. / А.О. Манасян, А.М. Манвелян, А.С. Григорян // Из

вест. с.-х. наук. - 1970. № 3. - С. 107 – 111.

106. Манасян А.О., Овсепян А.А., Манвелян А.М. и др. Микроструктура

межкарункулярного участка матки коров в различные периоды

стельности. / А.О. Манасян, А.А. Овсепян, А.М. Манвелян и др. //

Ветеринария. - 1988. № 6. - С. 38 – 39.

135

107. Мартыненко Н.А. Эмбриональная смертность с.-х. животных и ее

предупреждение. / Н.А. Мартыненко // Киев: Урожай. - 1971. - 229 с. -ил.

108. Медведев Г.Ф., Голубева Е.Д., Жукова Т.Я. Изучение гистоструктуры и

бактериальной обсемененности эндометрия у коров после отела. / Г.Ф.

Медведев, Е.Д. Голубева, Т.Я. Жукова // Сб. научн. тр. БелСХА. - 1976.

Вып. 24. - С. 132 – 139.

109. Милованов В.К., Соколовская И.И. Пути устранения потерь в процессе

воспроизведения молочного скота. / В.К. Милованов, И.И. Соколовская

// В кн. Теория и практика воспроизведения животных. М. - 1984. - С. 47-

68.

110. Милованов В.К. Потери в воспроизводстве молочного скота и подходы

к их устранению. / В.К. Милованов // Вопросы воспроизводства с.-х.

Животных. - 1984. - С. 8-17.

111. Михайленко Е.В. Специфические и неспецифические

иммуномодуляторы в повышении эмбриональной выживаемости КРС

(иммунизация коров спермиями быков-производителей, аллогенными

лейкоцитами и однократная обработка иммуномодулятором

левализолом). / Е.В. Михайленко // Автореф. дисс. канд. биол. наук.,

Моск. обл., п. Дубровицы. - 2000. - 26 с.

112. Михайлов Н.Н., Зудилин В.А. Этиология и профилактика бесплодия

крупного рогатого скота. / Н.Н. Михайлов, В.А. Зудилин //

Профилактика болезней в промышленном животноводстве. М.: «Колос».

- 1977. - С. 27.

113. Михайлов Н.Н., Чистяков И.Я. Условно патогенная микрофлора и

воспроизводительная функция самок. / Н.Н. Михайлов, И.Я. Чистяков //

Ветеринария. - 1970. № 12. - С. 74-75.

114. Михалев В.И., Мисайлов В.Д., Сулейманов С.М. и др. Инволюция и

субинволюция матки у коров. / В.И. Михалев, В.Д. Мисайлов, С.М.

Сулейманов, А.Г. Шахов, М.Н. Кочура, Ю.В. Сергеев // М.:

«Ветеринария» 11. - 2007. Ж. - С. 29 – 32.

136

115. Мороз Т.А. Изучение клеточной популяции шеечно-влагалищного

содержимого у высокопродуктивных коров с учетом их

физиологического состояния. / Т.А. Мороз // М. - 1983. - С. 46 – 48.

116. Мороз Т.А. Оплодотворяющая способность спермы быков и ее влияние

на величину эмбриональной смертности у коров. / Т.А. Мороз //

Селекция с.-х. жив. по технологическим признакам. М. - 1987. - С. 95 –

97.

117. Мороз Т.А. Причины эмбриональной смертности у коров и методы ее

предупреждения. / Т.А. Мороз // Пути повышения резистентности с.-х.

жив. - 1985. - С. 62 – 66.

118. Мюйрсепп И.Я. Зависимость результатов осеменения и процента

пренатальной смертности от состояния эндометрия коров. / И.Я.

Мюйрсепп // Животноводство. - 1971. № 11. - С. 83 – 85.

119. Мюйрсепп И.Я. Субклиническая патология эндометрия в послеродовой

период и при бесплодии коров. / И.Я. Мюйрсепп // Автореф. дис. … д-ра

вет. наук. Л. - 1973. - 31 с.

120. Нежданов А.Г. Научные достижения и проблемы в области

репродукции животных. / А.Г. Нежданов // Материалы координац.

совещ. Воронеж. - 1995. - С. 34.

121. Нетеча В.И., Агалакова Т.В., Щепина Ю.Н. Влияние биологически

активных веществ на эмбриональную смертность. / В.И. Нетеча, Т.В.

Агалакова, Ю.Н. Щепина // Состояние и перспективы развития научного

обеспечения с.-х. производства на Севере. - 2007. - С. 229 – 234.

122. Нетеча В.И., Агалакова Т.В., Щепина Ю.Н. Применение антиоксиданта

колицин Е2 и гормонального препарата ХГЧ для предупреждения

ранней эмбриональной смертности у коров. / В.И. Нетеча, Т.В.

Агалакова, Ю.Н. Щепина // Сев.-Вост. науч.-метод. центр РАСХН.

Киров. - 2006. - С. 108 – 110.

123. Нетеча В.И., Агалакова Т.В., Щепина Ю.Н. Ранняя эмбриональная

смертность у коров. / В.И. Нетеча, Т.В. Агалакова, Ю.Н. Щепина // Зон.

137

науч. исслед. ин-т. сел. хоз-ва. Северо – Востока. Киров. - 2005. т. 2. - С.

331 – 336.

124. Никитин В.Я., Коринова А.И., Ефремкина В.К. Когда же лучше

осеменять коров? / В.Я. Никитин, А.И. Коринова, В.К. Ефремкина, Г.П.

Нежданов // Ветеринария. - 1969. № 2. - С. 73-74.

125. Никитин В.Я., Миролюбов М.Г., Гончаров В.П. и др. Практикум по

акушерству, гинекологии и биотехнике размножения животных. / В.Я.

Никитин, М.Г. Миролюбов, В.П. Гончаров и др. // М. - 2003. - С. 158 –

169.

126. Ондар А.А. Экстрагенетическая информация как одна из причин

эмбриональной смертности у свиней. / А.А. Ондар // Автореф. дис. канд.

биол. наук. Моск. обл.: п. Дубровицы. - 2002. - 24 с.

127. Павлов В.А. Приемы повышения оплодотворяемости в мясном и

молочном скотоводстве. / В.А. Павлов // М.: ВНИИТЭИ сельхоз МСХ

СССР. - 1972. - 101 с.

128. Павлов В.А. Физиология воспроизводства крупного рогатого скота. /

В.А. Павлов // М.: Россельхозиздат. - 1976. - 255 с. - ил.

129. Павлов И.П. Лекции по физиологии 1912-1913 гг. / И.П. Павлов // Зап.

И сист. П.С. Купановым; Под общ. ред. И.П. Разенкова. М.: Изд-во

АМН. - 1952. - 331 с.

130. Падучева А.Л., Комарова З.Б., Шейкин В.Н. и др. Применение

йодсодержащих препаратов для нормализации воспроизводительных

процессов у коров. / А.Л. Падучева, З.Б. Комарова, В.Н. Шейкин, Н.А.

Бойко // Гормоны в животноводстве. Дубровицы. - 1981. - С. 29-33.

131. Панков Б.Г., Жаров А.В. Профилактика, фармакопрофилактика, ранняя

диагностика, лечение клинических и скрытых форм эндометритов у

коров. / Б.Г. Панков, А.В. Жаров // М.: уч. п. - 2008. - 104 с.

132. Панков Б.Г., Жаров А.В. Фармакопрофилактика и лечение клинических

и скрытых эндометритов у коров по способу ФЛЭКС. / Б.Г. Панков, А.В.

138

Жаров // Методические рекомендации одобрены РАСХН (протокол № 8

– от 30 мая 2001 г.).

133. Панков Б.Г., Соколова Н.А. Микробная контаминация гениталий у

новотельных и бесплодных коров. / Б.Г. Панков, Н.А. Соколова // Тезисы

докл. Всесоюзной научн. конф. «Проблемы диагностики терапии и

профилактики незаразных болезней с.-х. животных в промышленном

животноводстве». Воронеж. - 1986. - С. 44.

134. Панков Б.Г. Цитограммы маточной слизи коров при послеродовых и

гинекологических заболеваниях. / Б.Г. Панков // Новое в диагностике,

лечении и профилактике болезней животных. М. - 1996. - С. 99 – 104.

135. Панферова О.В., Джупина С.И. Новые методы повышения

эффективности профилактики и лечения заболеваний репродуктивных

органов коров. / О.В. Панферова, С.И. Джупина // Вестник Российского

университета дружбы народов, серия: сельскохозяйственные науки,

животноводство. - 2003. № 10. - С. 104-108.

136. Петров А.М., Мирзахметов Ш.Р. Разработка эффективного метода

лечения коров при эндометрите. / А.М. Петров, Ш.Р. Мирзахметов // М.:

«Ветеринария» 5. - 2006. Ж. - С. 37 – 40.

137. Петров А.М. Формирование колострального иммунитета у животных. /

А.М. Петров // М.: «Ветеринария» 8. - 2006. Ж. - С. 35 – 41.

138. Плишкина Л.И. Исследование функциональной активности яичников у

коров по уровню прогестерона в молоке. / Л.И. Плишкина //

Нейроэндокринная регуляция воспроизводства и продуктивности

сельскохозяйственных животных. (Сборник научных трудов

ВНИИФБиП) Боровск. - 1983. том XXVII. - С. 59-68.

139. Поликар А. Элементы физиологии клетки. / А. Поликар // Пер. с фр. Л.:

Наука. ЛО. - 1976. - 389 с.

140. Полищук В.П. Физические, цитологические и некоторые

биохимические изменения шеечно-влагалищной слизи у коров в норме и

патологии. / В.П. Полищук // Автореф. Киев. - 1966. - 20 с.

139

141. Полянцев Н.И., Лисичникова Л.Н. Гипоплазия желтого тела у коров

как причина бесплодия и эмбриональных потерь. / Н.И. Полянцев, Л.Н.

Лисичникова // Проблемы оптимизации воспроизводства стада и

повышения сохранности приплода. Персиановка. - 1993. - С. 3-8.

142. Порфирьев И.А., Петров А.М. Акушерство и биотехника репродукции

животных. / И.А. Порфирьев, А.М. Петров // уч. п. СПб.: Издательство

«Лань». - 2009. - 352 с.

143. Порфирьев И.А. Бесплодие высокопродуктивных молочных коров. /

И.А. Порфирьев // М.: «Ветеринария» 10. - 2006. Ж. - С. 39 – 41.

144. Порфирьев И.А. Лечение высокопродуктивных молочных коров,

больных функциональным нарушением половых органов и

профилактика алиментарного бесплодия. / И.А. Порфирьев // Вестник

Российского университета дружбы народов, серия:

сельскохозяйственные науки, животноводство. - 2003. № 10. - С. 109-

121.

145. Преображенский О.Н. Этиология и патогенез абортов. / О.Н.

Преображенский // М.: «Вет. с.-х. жив.» 2. - 2005. Ж. - С. 14 – 15.

146. Радченков В.П. Разработка методов раннего определения беременности

и повышения эмбриональной выживаемости у с.-х. животных. / В.П.

Радченков // Автореф. дис. Канд. биол. Наук, Дубровицы. Моск. Обл. -

1984. - 19 с.

147. Рассадников С.А. Влияние гонадолиберина и простагландина Ф2Альфа

на эндокринную регуляцию репродуктивной функции у коров и телок

(профилактика и лечение субклинического эндометрита и

эмбриональной смертности). / С.А. Рассадников // Автореф. дисс. канд.

вет. наук. Моск. вет. акад. им. К.И. Скрябина. М. - 1985. - 22 с.

148. Родин И.И. Совершенствование методов и техники искусственного

осеменения сельскохозяйственных животных. / И.И. Родин //

Сельскохозяйственная биология. - 1970. Т. 5. № 4. - С. 495 – 500.

140

149. Середин В.А. Биотехнология воспроизводства в скотоводстве. / В.А.

Середин // Нальчик. уч.п. - 2004. - 471 с.

150. Середин В.А. Интенсификация воспроизведения в молочном

скотоводстве при субклинической патологии гениталий и контаминации

условно-патогенной микрофлорой. / В.А. Середин // Отчет НИР

(промежут.) КБАМИ ТР № 01870000219, инв. № 0288.0015407. Нальчик.

- 1987. - 85 с.

151. Середин В.А. Клиническая фармакология для акушеров, гинекологов:

регуляция половой функции и продуктивности. / В.А. Середин // уч. п.,

Нальчик: ФГОУ ВПО КБГСХА им. В.М. Кокова. - 2009. - 212 с.

152. Середин В.А. Эмбриональная смертность и ее предупреждение. / В.А.

Середин // Рекомендации по повышению продуктивности

животноводства в условиях КБАССР. Нальчик: КБАМИ. - 1981. - С. 56 –

58.

153. Скородумов Д.И., Родионова В.Б., Костенко Т.С. Практикум по

ветеринарной микробиологии и иммунологии. / Д.И. Скородумов, В.Б.

Родионова, Т.С. Костенко // М. - 2008. - 224 с.

154. Скрипицын Ю.А. Цитологическая характеристика смывов с

эндометрия у коров, больных скрытым эндометритом. / Ю.А.

Скрипицын // Сб. научн. тр. Воронеж: Воронежский СХИ. - 1981. - С. 65

– 73.

155. Соколовская И.И., Милованов В.К. Иммунология воспроизведения

животных. / И.И. Соколовская, В.К. Милованов // М. - 1981. - 263 с.

156. Соколовская И.И. Проблемы оплодотворения сельскохозяйственных

животных. / И.И. Соколовская // М.: Сов. наука. - 1957. - 314 с.

157. Студенцов А.П., Шипилов В.С., Никитин В.Я. и др. Акушерство,

гинекология и биотехника размножения животных. / А.П. Студенцов,

В.С. Шипилов, В.Я. Никитин, М.Г. Миролюбов, Л.Г. Субботина, О.Н.

Преображенский, В.В. Храмцов, В.П. Гончаров // М.: уч. издание.

«КолосС». - 2005. - 512 с.

141

158. Студенцов А.П., Шипилов В.С., Никитин В.Я. и др. Ветеринарное

акушерство, гинекология и биотехника размножения. / Под ред. В.Я.

Никитина и М.Г. Миролюбова // 7-е изд., перераб. и доп. М.: Колос. -

2000. - 495 с. - ил.

159. Студенцов А.П., Шипилов В.С., Субботина Л.Г. Ветеринарное

акушерство и гинекология. / А.П. Студенцов, В.С. Шипилов, Л.Г.

Субботина, О.Н. Преображенский // М. - 1980. - 446 с.

160. Судаков Г.И., Шамаров А.В., Бенемецкий Ю.С. Гормональный статус

при эмбриональной смертности у коров и методы его нормализации. /

Г.И. Судаков, А.В. Шамаров, Ю.С. Бенемецкий, А.С. Афонин // Науч.-

техн. бюл. Сиб. НИИ проект.-технол. ин-т. жив-ва. - 1990. т. 4. - С. 14 –

16.

161. Тельцов Л.П. Характеристика критических фаз развития крупного

рогатого скота в эмбриогенезе. / Л.П. Тельцов // Вестник ветеринарии. -

1998. № 9 (3/98). - С. 45 – 52.

162. Токин Б.П. Общая эмбриология. / Б.П. Токин // Учебник для биол.

спец. ун-тов. 4-е изд. перераб. и доп. М.: Высшая школа. - 1987. - 480 с. -

ил.

163. Хватов Б.П., Федоров Р.М. Загадки эмбриона. / Б.П. Хватов, Р.М.

Федоров // М.: Знание. - 1967. - 48 с.

164. Храброва Л.А. Цитологическая картина влагалищной слизи кобыл в

период жеребости. / Л.А. Храброва // Биол. Основы повышения

эффективности коневодства. Дивово. - 1996. - С. 11 – 16.

165. Цагикян Н.А. К вопросу о цитологической диагностике туберкулезного

эндометрита. / Н.А. Цагикян // Советская медицина. - 1959. № 6. - С. 67 –

71.

166. Черемисинов Г.А., Мисайлов В.Д., Нежданов А.Г. Лечение и

профилактика гинекологических заболеваний у коров. / Г.А.

Черемисинов, В.Д. Мисайлов, А.Г. Нежданов, В.А. Карамышев, В.Н.

Карымов, А.С. Лободин, С.А. Власов // М. - 1988. - 7 с.

142

167. Чомаев А.М., Колодиев Ч.Б. Эмбриональные потери у коров. / А.М.

Чомаев, Ч.Б. Колодиев // М.: «Ветеринария» 5. - 2003. Ж. - С. 15 – 17.

168. Шарабрин И.Г. Профилактика нарушений обмена веществ у крупного

рогатого скота. / И.Г. Шарабрин // М.: Колос. - 1975. - 304 с. - ил.

169. Шипилов В.С. Значение активного моциона в профилактике бесплодия

коров в зимний период. / В.С. Шипилов // Ж. «Ветеринария». №1. - 1966.

- С. 73-76.

170. Эрнст Л.К., Прокофьев М.И. Биотехнология сельскохозяйственных

животных. / Л.К. Эрнст, М.И. Прокофьев // М. - 1995. - 190 с.

171. Юрина Н.А., Тидостина А.И. Практикум по гистологии, цитологии и

эмбриологии. / Н.А. Юрина, А.И. Тидостина // Учебное пособие. М.:

Изд-во УДН. - 1989. - 253 с. - ил.

172. Al Dahash S.Y.A. The incidence of ovarian activity pregnancy and bovine

genital abnormalities shown by an abattoir survey /S.Y.A. Al Dahash, J.S.

David // Veterinary Record. - 1977. vol. 101. I. 16. - Р. 320-324.

173. Ayalon N. Fertility losses in normal cows and repeat breeders /N. Ayalon //

Proceeding 7th International Congres on Animal Reproduction and Artificial

Insemination. Minich. - 1972. vol. 1. - Р. 741-744.

174. Ball P.J.H. The fertility of the dairy cows inseminated on the basis of milk

progesterone measurements /P.J.H. Ball, N.W. Jakson // British Veterinary

Journal. - 1979. vol. 135. n. 11. - Р. 537-540.

175. Ball P.J.H. Reproduction in cattle /P.J.H. Ball, A.R. Peters // Blackwell

Publishing. - 2004. - 242 p.

176. Baranski W. Incidence of reproduction disorders and fertility parameter in

dairy herds under the herd health program /W. Baranski; T. Janowski; M. Ras

at al. // Med. weter. - 2008. Vol. 64. № 6. - P. 807 – 811.

177. Bastan A. Use of early conception factor test for determining pregnancy and

embryonic mortality status of dairy cows / A. Bastan, E. Ozenc, H.C. Macun

and al.// Med. veter. - 2007. T. 63. № 6. - P. 670 – 673.

143

178. Beam S.W. Energy balance and ovarian follicle development prior to the

first ovulation postpartum in dairy cows receiving three levels of dietary fat

/S.W.Beam, W.R. Butler // Biol. Reprod. Vol. 56. N 1. - Р. 133-142.

179. Benjaminsson B.H. Perinatal death in Icelandic cattle from perinatal death in

domestic animals / B.H. Benjaminsson // The 20th Symposium of the Nordic

Committee for Veterinary Scientific Cooperation (NKVet). Reykjavik,

Iceland, 26-27 April, 2007. Acta Vet. Scand., 2007, vol. 49, (Suppl. 1) - S16.

180. Berain J.-P. La mоrtаlitе еmbryonnаirе /J.-P. Berain // Bull. Tесhn. Insem.

Аrtif. – 1984. T. 32.- Р. 15-17.

181. Burke C.R. Effects of pasture feeding during the periparturient period on

postpartum anovulation in grazed dairy cows /C.R. Burke, J.R. Roche // J.

Dairy Sci. - 2007. vol. 90. n. 9. - Р. 4304-4312.

182. Bostedt H. Abortutsachen und Abortfolgen beim Rind /H. Bostedt // Prakt.

Tierarzt. - 1984. T. 65. NS.-H.-S. - Р. 59 – 63.

183. Busato A. Interaction of milk-production and fertility problems in the

postpartum period of dairy cows /A. Busato, B. Knutti // 14th International

Congress on Animal Reproduction, Stockholm, (Abstracts). - 2000. vol. 1. - Р.

174.

184. Busch W. Infektions bedingte Fortpflanzungs-storungen beim weiblichen

Rind /W. Busch, S. Willer // Mh. Veter. – Med. - 1986. T. 41, № 1. - S. 27 –

32.

185. Chаffаux S. Trаnspесtаl rеаl - timе ultrаsound sсаnning fоr diаgnosing

prеgnаnсy аnd fоr mоnitоring еmbryоniс mоrtаlity in dаiry саttlе /S.

Chаffаux, G.N.S. Rеddy, F. Vаlоn, M. Thibiеr // Anim. Rеprоd. Sс. – 1986.

T. 10. N3. - Р. 193-200.

186. Chаpmаn H.M. Prеnаtаl lоss /H.M. Chаpmаn // Currеnt Thеrаpy in

Thеriоgеnоlоgy. - 1980. - Р. 896-900.

187. Darenius K. Early pregnancy loss in the mare /K. Darenius // Uppsala. -

1992. - 174 р.

144

188. Diskin M.G. Increasing reproductive efficiency in suckler herds /M.G.

Diskin // Irish Grassland Anim. Product. assn J. - 1993. Vol. 27. - P. 57 – 63.

189. Drost M. The еffесt оf prеgnаnсy diаgnоsis pеr rесtum оn еаrly еmbryоniс

dеаth in the соw /M. Drost, O.J. Frаnсо, V.M. Shillе еt аl.// Prосееdings. Vоl.

1. - 1982. - Р. 623-627.

190. Duсkеr M.J. Imprоving hеrd fеrtility - Prеgnаnсy rаte /M.J. Duсkеr, R.A.

Hаggеtt // Brit. Friesiаn J. - 1985. T. 67. N5. - Р. 452-453.

191. Grohn Y.T. Epidemiology of reproductive performance in dairy cows / Y.T.

Grohn; P.J. Rajala – Schultz // Anim. reprod. sc. - 2000. Vol. 60/61. - P. 605 –

614.

192. Humblоt P. Effect оf соnсеptus rеmоvаl аnd intrаutеrinе аdministrаtiоn of

сoncеptus tissue оn luteаl funсtiоn in the соw / P. Humblоt, M.A. Dаllа Pоrtа

// Rеprod. Nutrit. Develоpреm. - 1984. T. 24. N5A. - Р. 529-541.

193. Hunter R.H.F. Physiology and technology of reproduction in female

domestic animals /R.H.F. Hunter // Academic Press. London – New York –

Toronto – Sydney – San Francicco. - 1980. - 320 p.

194. Marendaz E. Mineraux et fecondite /E. Marendaz // Terre romande. - 1984.

T. 18. N 12. - P. 14 – 15.

195. Medrea N. Heavy metals pollution effects on reproductive parameters of

cattle in the industrial area Copsa Mica /N. Medrea; N. Avram; M. Serdaru; C.

Mehedintu // Studies and researchesin veter. med. Bucharest. - 1996. Vol. 4. -

P. 67 – 72.

196. Oresnic A. Vzroki prodnostnih motenj pri kravan molznicah /A. Oresnic //

Zb. biotehn. fav. univ v ljubljani kmetijstvo” Ljubljana. - 1999. Letn. 74. stev.

1. - S. 65 – 76.

197. Ottobre J.S. Synchronization of pаrturition in bееf саttle using dеlаy аs wеll

аs induсtiоn / J.S. Ottobre, Е.K. Innskeep // Thеriоgеnоlоgy. - 1983. T. 20. N

3. - Р. 267-277.

198. Pursley J.R. Effect of time of artificial insemination on pregnancy rates,

pregnancy loss, and gender ratio after synchronization of ovulation in

145

lactating dairy cows /J.R. Pursley, R.W. Silcox, M.C. Wiltbank // J. Dairy Sci.

- 1998. vol. 81. n. 8. - Р. 2139-2144.

199. Roche J.F. Hormonal and management factors affecting reproduction in

cattle / J.F. Roche // Irish veter news. - 1984. T. to apr. - P. 107.

200. Salisbury G.W. Physiologia of reproduction and artificial insemination of

cattle /G.W. Salisbury, N.L. Vandermark, J.R. Lodge // San Francisco. - 1978.

201. Sartory R. Fertilization and early embryonic development in heifers and

lactating cows in summer and lactating and dry cows in winter /R. Sartory, R.

Sartor-Bergfeld, S.A. Mertens // J. Dairy Sci. - 2002. vol. 85. n. 11. - Р. 2803-

2812.

202. Schams D. The oestrous cycle of the cow: hormonal parameters and time

relationships concerning oestrus, ovulation and electrical resistance of the

vaginal mucus /D. Schams, E. Schallenberger, B. Hoffman // Acta

Endocrinology. - 1977. vol. 86. - Р. 180 – 192.

203. Sepúlveda N., Risopatrón J., Peňa P. Reproductive efficiency of artificial

insemination technique in dairy cows in Southern Chile /N. Sepúlveda, J.

Risopatrón, P. Peňa // 14th International Congress on Animal Reproduction,

Stockholm, (Abstracts). - 2000. vol. 1. - Р. 98.

204. Smith M.C.A. Influence of early post partum ovulation on the

reestablishment of pregnancy in multiparous and primiparous dairy cattle

/M.C.A. Smith, J.M. Wallace // Reprod. Fertil. - 1998. dev. 10. - Р. 207 – 216.

205. Stevenson J.S. Reproductive disorders in the periparturent dairy cow / J.S.

Stevenson, E.P. Call // J. Dairy Science. - 1988. vol. 71. n. 9. - Р. 2572 –

2583.

206. Szenci O. The accuracy of the diagnoses of early pregnancy and late

embryonic mortality in the cow: a review / O. Szenci, J.F. Beckers, J. Varga,

A.C. Bajcsy // Folia veter. Kosice. - 2000. Vol. 44. № 4. - P. 199 – 201.

207. Tallam S.K. Ovarian activity and reproductive performance of dairy cows

fed different amounts of phosphorus / S.K. Tallam, A.D. Ealy, K.A. Bryan //

J. Dairy Sci. - 2005. vol. 88. n. 8. - Р. 3609 – 3618.

146

208. Tеfеrа M. A shоrt nоtе: lасk оf еffесt оf pоst - Al hCG оr GnRH treаtmеnt

оn embryоniс mоrtаlity in dаyry саttlе /M. Tеfеrа, S. Chaffаux, M. Thibiеr, P.

Humblоt // Livеs tо сh. Prоduсt. Sс. - 2001. Vоl. 71. N2/3. - Р. 277-281.

209. Vаnrооsе G. Embryonic mоrtаlity аnd еmbryо-pаthоgеn intеrасtiоns

/G.Vаnrооsе, A. Dе Kruif, A. Vаn Sооm // Anim. Rеprod. Sс. - 2000. Vоl.

60/61. - Р. 131-143.

210. Vassilev N. Incidence of early embryonic death in dairy cows / N. Vassilev,

S. Yotov, E. Dimitrov // Trakia Journal of Sciences - 2005 Vol. 3. № 5. - Р. 62

– 64.

147

8. ПРИЛОЖЕНИЯ

148

149

150

151

152

153

154

155