EXTRACTION, ISOLEMENT ET IDENTIFICATION DES PRINCIPES ... EXTRACTION, ISOLEMENT ET IDENTIFICATION

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  • UNIVERSITE DANTANANARIVO

    FACULTE DES SCIENCES

    DEPARTEMENT DE CHIMIE ORGANIQUE Laboratoire de Chimie des Substances Naturelles et de Chimie Organique Biologie (LCSN-COB)

    PROJET G/DHD

    RAPPORT DE STAGE

    en vue de lobtention du diplme Master 2

    EXTRACTION, ISOLEMENT ET

    IDENTIFICATION DES PRINCIPES

    ACTIFS DE Vernonia trinervis

    Juin 2014 Octobre 2014

    Prsent par :

    RAMANANTSOA Nambinina Joseph Patricia

    Encadrante : Dr Lovasoa RABESIAKA

    Directeur de laboratoire : Dr Herilala La RASOANAIVO

  • REMERCIEMENTS

    Je tiens exprimer mes sincres remerciements aux organismes et personnes, sans qui ce

    stage naurait jamais abouti.

    Au PNUD (Programme des Nations Unies pour le Developpement), qui, par le biais du

    projet G/DHD (Gouvernance/ Dveloppement Humain Durable), a contribu lappui

    financier de ce stage. Votre soutien a permis de mener bien toutes les activits durant

    laccomplissement de ce stage.

    A lUNESCO (United Nations Educational, Scientific and Cultural Organization),

    pour avoir galement contribu lappui financier de ce stage via le projet G/DHD. Votre

    aide a t trs bnfique dans nos travaux de recherche.

    Au Comit Scientifique du projet G/DHD pour avoir accord loctroi de lappui

    financier par le biais du projet G/DHD, pour les conseils et directives quil a mis tout au long

    de laccomplissement de ce stage.

    A lUniversit dAntananarivo, notamment lEquipe G/DHD dirige par Monsieur le

    VPFR pour lappui et limportance quelle a accord notre travail de recherche.

    A Madame Herilala La RASOANAIVO, Matre de confrences au sein de la Facult

    des Sciences et Directeur du Laboratoire de Chimie des Substances Naturelles et de Chimie

    Organique biologie (LCSN-COB), pour mavoir accueilli comme stagiaire dans son

    laboratoire et pour mavoir conseill pendant le stage.

    A Madame Lovasoa RABESIAKA, Matre de confrences au sein de la Facult des

    Sciences, mon encadrante et matre de stage, pour mavoir guid, conseill et aid tout au

    long de ce stage.

    A Monsieur Rivoarison RANDRIANASOLO, Matre de confrences au sein de la

    Facult des Sciences, pour son aide et son dvouement lors des manipulations.

    A Madame Amlie RAHARISOLOLALAO, Professeur mrite au sein de la Facult des

    Sciences, pour avoir fait preuve de bienveillance mon gard. Votre aide et votre appui ont

    t essentiels laccomplissement de ce stage.

    Je tiens galement remercier tous ceux qui, de prs ou de loin, ont contribu

    laccomplissement de ce stage.

  • Sommaire

    I. PRESENTATION DU LABORATOIRE ........................................................................... 2

    II. STAGE G/DHD.............................................................................................................. 4

    II.1. Objectifs du stage ............................................................................................. 4

    II.2 Mthodologie et rsultats attendus ....................................................................... 5

    Enqute ethnobotanique et rcolte .................................................................... 5

    Extraction de la matire vgtale...................................................................... 7

    Criblage phytochimique.................................................................................... 9

    Sparation, isolement et purification ................................................................ 9

    Test dactivit antioxydante ............................................................................ 12

    Dtermination structurale ............................................................................... 11

    Test dactivit antipaludique ........................................................................... 12

    II.3. Bilan du stage : rsultats obtenus et perspectives ................................................. 13

  • LISTE DES FIGURES

    Figure 1 : Vernonia trinervis

    Figure 2 : Photographie dun vaporateur rotatif du LCSN-COB

    Figure 3 : Photographie dun vaporateur rotatif du LCO-SM

    Figure 4 : Traitement de lextrait brut par lhexane

    Figure 5 : Profil CCM de lextrait actate dthyle

    Figure 6 : Chromatographie sur colonne de lextrait actate dthyle

  • LISTE DES TABLEAUX

    Tableau 1 : Liste des produits et ractifs

    Tableau 2 : Matriels usuels et verreries courantes

    Tableau 3 : Rsultats du criblage phytochimique

  • 1

    INTRODUCTION

    La phytothrapie est un des moyens les plus utiliss par les Malgaches pour se soigner ou

    prvenir une maladie [w1]. Toutefois, les plantes locales sont encore mal exploites et leur

    valorisation reste un dfi majeur pour les scientifiques. Cest dans ce cadre que nous avons

    choisi de mener une tude chimique approfondie sur Vernonia trinervis qui est une plante

    endmique de la Grande Ile et utilise traditionnellement dans le traitement du paludisme, des

    fivres et du diabte.

    Les travaux de recherche menes sur Vernonia trinervis ont t effectus lors dun stage

    intitul : Extraction, isolement et identification des principes actifs de Vernonia trinervis,

    en vue de lobtention du Diplme Master. Ce stage sest droul du mois de Juin au mois

    dOctobre 2014, au Laboratoire de Chimie des Substances Naturelles et de Chimie Organique

    Biologie (LCSN-COB). Lobjectif principal de ce stage a t de nous initier aux travaux de

    laboratoire, notamment aux techniques et matriels utiliss dans les laboratoires de chimie

    organique. Pour cela, notre mission tait disoler un ou plusieurs constituant(s) chimiques de

    la plante, les identifier et ventuellement de dterminer une activit biologique des produits

    obtenus.

    Ainsi, afin de mieux comprendre le droulement de ce stage, le prsent rapport sera divis en

    deux grandes parties :

    Une premire partie traite sur la prsentation du laboratoire, son secteur dactivit ainsi

    que ses objectifs.

    La seconde partie sera consacre au descriptif du stage, aux mthodes utilises et

    rsultats attendus, les problmes rencontrs ainsi que les solutions apportes, et le bilan du

    stage notamment les rsultats obtenus et les perspectives.

  • 2

    I. PRESENTATION DU LABORATOIRE et du stage

    LUniversit dAntananarivo est la plus grande universit publique Madagascar. Elle

    comprend trois Grandes Ecoles et quatre Facults dont la Facult des Sciences. Cette dernire

    est compose de douze Dpartements parmi lesquels le Dpartement de Chimie Organique

    qui est compos son tour par sept laboratoires de recherche. Parmi ces laboratoires figure le

    Laboratoire de Chimie des Substances Naturelles et de Chimie Organique Biologie ou LCSN-

    COB. Le diagramme la page suivante permet de situer le laboratoire au sein de la hirarchie

    [w2].

    Compte tenu de la richesse de la biodiversit de la Grande Ile et de ses nombreuses

    utilisations traditionnelles, le laboratoire sest fix comme objectif de valoriser la faune et la

    flore malgache du point de vue chimique en isolant leurs constituants, et de valoriser par la

    suite les produits isols par leurs activits biologiques. Les recherches au sein du laboratoire

    sont donc axes sur ltude chimique des animaux ou plantes malgaches, notamment

    lextraction, lisolement et lidentification des molcules organiques quils contiennent.

    Toutefois, ltude des animaux reste trs limite cause de leur raret ou du problme

    dextinction despce.

    Le laboratoire est actuellement dirig par le Docteur Herilala La RASOANAIVO, Matre de

    confrences au sein de la Facult des Sciences. Lquipe de recherche permanente est

    compose dun Professeur mrite et de trois Matres de confrences qui sont galement

    membres de lquipe pdagogique de la mention Chimie au sein de la Facult. Cependant,

    des stagiaires de tous niveaux sajoutent ce nombre : actuellement, deux stagiaires en

    Doctorat et quatre stagiaires en Master, dont je fais partie, dans le parcours Chimie des

    Substances Naturelles y font leurs stages. LCSN-COB peut galement accueillir des

    stagiaires de niveau Licence, BTS ou des stagiaires qui dsirent uniquement approfondir leurs

    connaissances.

    Jai choisi dintgrer cette quipe pour faire mon stage pour lobtention du Diplme Master.

  • 3

    UNIVERSITE

    D

    ANTANANARIVO

    Facult de

    Droit, de

    Gestion et

    de

    Sociologie

    Facult des

    Lettres et

    des

    Sciences

    Humaines

    Facult

    de

    Mdecine

    Facult

    des

    Sciences

    Ecole

    Normale

    Suprieure

    Ecole

    Suprieure

    Polytechnique

    Ecole

    Suprieure des

    sciences Agronomiques

    Dpartement de Biochimie

    Fondamentale et

    Applique

    (DBFA)

    Dpartement de Biologie

    Animale

    (DBA)

    Dpartement de Biologie

    et Ecologie Vgtale

    (DBEV)

    Dpartement de Chimie

    Minrale et Chimie

    Physique

    (DCMCP)

    Dpartement de Chimie

    Organique

    (DCO)

    Dpartement

    dEntomologie

    (Dent)

    Dpartement de

    Mathmatique et

    Informatique

    (DMI)

    Dpartement de

    Palontologie et

    Anthropologie Biologique

    (DPAB)

    Dpartement de

    Physiologie Animale et

    Pharmacologie

    (DPAP)

    Dpartement de Physique

    (DPhy)

    Dpartement des Sciences

    de la Terre

    (