Exames de fezes - conceitos gerais
Arthur GruberBMP0222 Introduo Parasitologia Veterinria
Instituto de Cincias Biomdicas Universidade de So
PauloAG-ICB-USP
Exame direto das fezesPrincpio O exame direto utilizado para
demonstrar a presena de ovos e larvas de helmintos e estgios de
desenvolvimento de protozorios
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Exame direto das fezesMtodo Colocar uma pequena quantidade de
fezes em uma lmina de microscopia. Colocar uma gota de lquido nas
fezes e misturar bem com uma esptula ou basto. Cobrir com uma
lamnula. A suspenso deve ter espessura fina o suficiente para
permitir a passagem da luz. Inspecionar a lmina em movimentos de
ida e volta
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Exame direto das fezesMtodo
Errado!
Certo
Inspecionar toda a rea da lminaAG-ICB-USP
Exame direto das fezesVantagens Rpido de preparar Se utilizado
com soluo salina, no causa distores nos parasitas Permite
visualizar trofozotos de Trichomonas e Giardia (obrigatrio o uso de
soluo salina) til para examinar fezes de pequenas aves e rpteis
(onde trematides so comuns)
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Exame direto das fezesDesvantagens No pode ser usado para
resultados quantitativos O mtodo relativamente insensvel e depende
do nmero de ovos da amostra ser alto A presena de muitos debris
pode tornar difcil a observao e identificao os ovos/cistos Areia,
sementes e outros debris fecais podem dificultar a deposio adequada
da lamnula Pode requerer muito tempo para um exame adequado
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Concentrao por flutuao em salDefinio Teste qualitativo para a
deteco de ovos de nematides e oocistos de protozorios. til para
ensaios preliminares visando identificar que grupos de parasitas
esto presentes em uma amostra
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Concentrao por flutuao em salPrincpio Os ovos e/ou cistos so
separados do material fecal e concentrados por uma soluo de flutuao
em uma gravidade especfica apropriada Ovos leves de helmintos e
oocistos de protozoros, por terem densidade menor do que aquela do
fluido de flutuao, tendem a subir e permanecer no topo da coluna de
lquido
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Concentrao por flutuao em salMtodo Colocar uma certa quantidade
de fezes (geralmente dois gramas) em uma lmina de microscopia.
Adicionar a soluo de flutuao e com o auxlio de uma esptula
homogeneizar.
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Concentrao por flutuao em salMtodo Aps a homogeneizao transferir
a suspenso de fezes para outro frasco coando o material atravs de
uma peneira, coador ou gaze.
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Concentrao por flutuao em salMtodo Transferir a suspenso para um
tubo de ensaio e completar o volume com a soluo de flutuao.
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Concentrao por flutuao em salMtodo Depositar uma lamnula sobre o
menisco do lquido. Aguardar cerca de 15 a 30 minutos para ocorrer a
flutuao
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Concentrao por flutuao em salMtodo Retirar a lamnula com cuidado
e deposit-la sobre uma lmina de microscopia. Observar a lmina ao
microscpio.
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Concentrao por flutuao em salLquidos de flutuao Soluo saturada
de sal (NaCl)
Gravidade especfica: 1,18 - 1,20Uso geral Pode distorcer a
morfologia, especialmente de trofozotos de protozorios
Soluo saturada de acar (sacarose) soluo de Sheater Gravidade
especfica 1,20
Uso geral
No afeta a viabilidade de ovos recomendado para material para
culturaAG-ICB-USP
Concentrao por flutuao em salLquidos de flutuao Soluo de sulfato
de zinco (ZnSO4) Gravidade especfica: 1,18
Melhor soluo para ovos de Fasciola Reagente caro
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Concentrao por flutuao em salGravidade especficaGravidade
especfica de alguns ovos de helmintos, conforme determinada
utilizando-se centrifugao em gradiente de densidade de
sacarose*Espcie Gravidade Especfica Mdia 1,0559 1,0900 1,1005
1,2251 1,2376 1,18 1,20 Faixa 1,0549 1,0573 1,0791 1,0910 1,1004
1,1006 1,2244 1,2257 1,2372 1,2380 -
Ancylostoma caninum Toxocara canis Toxocara cati Taenia spp.
(cestide) Physaloptera spp. (nematide)Soluo de ZnSO4 Soluo saturada
de sal ou acar* David and Lindquist, 1982. J. Parasitology
68:916-919.
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Flutuao em NaCl ou acarVantagens Tcnica flutua os ovos mais
comuns de helmintos e oocistos de coccdias Solues empregadas so
baratas H poucos debris para dificultar a viso dos parasitas
Concentra os parasitas em um volume pequeno Permite trabalhar com
amostras maiores Aumenta a sensibilidade diagnstica
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Flutuao em NaCl ou acarDesvantagens A tcnica no flutua ovos de
trematides e ovos de alguns vermes chatos (ordem Pseudophyllidea
Ex. Diphyllobothrium) Distorce a morfologia de cistos de Giardia
Pode ser demorada se no for feita com centrifugao No aplicvel em
amostras de fezes contendo gordura
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Flutuao em sulfato de zincoVantagens Tcnica recomendada para a
maioria dos exames de fezes Flutua a maior parte dos ovos de
helmintos Melhor mtodo para cistos de protozorios, especialmente
Giardia e para ovos de Trichuris. Na maioria dos caso recupera
larvas de nematides.
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Flutuao em sulfato de zincoDesvantagens No flutua ovos de alguns
trematides e vermes chatos (ordem Pseudophyllidea Ex.
Diphyllobothrium) No aplicvel em amostras de fezes contendo gordura
ZnSO4 caro e um hidrmetro deve ser usado para se fazer a soluo
(gravidade especfica de 1,18)
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Contagem de ovosPrincpio Tcnica quantitativa Utiliza uma cmara
de contagem (McMaster) que permite examinar microscopicamente um
volume conhecido de suspenso fecal Utiliza-se uma soluo de flutuao
para que os ovos ou cistos permaneam aderidos superfcie superior,
facilitando a contagem.
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Material
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Pesar as fezes
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Transferir para um recipiente
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Coletar soluo de flutuao
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Adicionar a soluo de flutuao
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Homogeneizar a suspenso
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Filtrar a suspenso de fezes
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Colher uma amostra
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Colher uma amostra
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Cmara de Mc Master Cmara para contagem de parasitas Possui dois
compartimentos Cada compartimento possui uma retcula de 1,0 cm x
1,0 cm A altura do compartimento de 0,15 cm O volume total de
lquido em cada compartimento sob a retcula de 0,15 cm3 (ml)
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Preencher a cmara de Mc Master
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Aguardar o processo de flutuao
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Examinar ao microscpio
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Calcular o valor de o.p.g.(ovos por grama de fezes)
Contar o nmero de ovos dentro de cada retcula quadrada Ignorar
os ovos presentes nas reas externas Usar 2 gramas de fezes para 28
ml de soluo (total 30 ml) Cada compartimento possui 0,15 ml (total
0,3 ml) Multiplicar o valor total por 50 O nmero resultante o nmero
de ovos por grama (o.p.g.) de fezes
Ex. 12 ovos no compartimento 1 e 15 ovos no 2 = (12 +15) x 50 =
1.350 o.p.g.AG-ICB-USP
Contagem de ovosVantagens No requer nenhum equipamento
especializado. Permite quantificar o nmero de parasitas eliminados
pelo hospedeiro
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Contagem de ovosDesvantagens A contagem pode ser demorada,
especialmente se houver grande quantidade de debris. No aplicvel em
amostras de fezes contendo gordura No flutua alguns tipos de
ovos.
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