Verde Brillante Bilis 2% Caldo.Tipo Simple

Preparación Suspender 40 g del polvo deshidratado por litro de agua destilada. Disolver y distribuir 10 ml por tubo con campana Durham. Preparar además, el medio a doble concentración. Esterilizar en autoclave a 121°C durante 15 minutos.

Siembra Para el análisis de coliformes totales en muestras fluidas, sembrar por triplicado: 10 ml en caldo doble concentración y 1ml y 0,1 ml en caldo simple concentración.

Resultados -Positivo: presencia de gas.Con el número de tubos positivos, calcular el número más probable. El resultado se expresa por gramos ó 100 ml de producto-Negativo: ausencia de gas.La reacción es positiva cuando se produce desprendimiento de gas en la campana Durham, por lo menos en 1/10 parte de su volumen, como consecuencia de la fermentación de la lactosa con formación de ácido y gas en presencia de sales biliares a la temperatura indicada.Se pueden encontrar bacterias cuando es positivo.

Control biológico si lo tuviera Microorganimos Crecimiento Producción de gas

Escherichia coli Satisfactorio +Salmonella typhimurium Satisfactorio -Staphylococcus aureus Inhibido -enterococcus faecalis Inhibido -

Agar Mac Conkey

Tipo Especifico – Gram Negativos

Preparación Suspender 50 g del polvo en 1 litro de agua purificada. Reposar 5 minutos. Calentar con agitación frecuente y llevar a ebullición 1 a 2 minutos hasta disolver completamente. Distribuir en recipientes apropiados y esterilizar en autoclave a 121°C durante 15 minutos.

Siembra Inocular una alícuota de la muestra directa o de su dilución. Verter un volumen del medio de cultivo fundido y enfriado a 45°C. Homogeneizar mediante movimientos de vaivén y rotación. Dejar solidificar.Incubar a 35°C por 48 horas.

Resultados Microorganismos fermentadores de lactosa: colonias rosadas. Puede observarse halo de precipitación biliar.

Microorganismos no fermentadores de lactosa: colonias del color del beige o incoloras.

Control biológico Microorganismos

Desarrollo Color de la colonia

Enterobacter aerogenesEcherichia coli

Bueno Rosa

Proteus vulgarisSalmonella enteritidisShigella dysenteriae

Bueno IncoloraBeige

staphylococcus aureus

Inhibido -

PCATipo Simple

Preparación Suspender 20.5 g del polvo en 1 litro de agua purificada. Reposar 5 minutos. Calentar con agitación frecuente y llevar a ebullición 1 a 2 minutos hasta disolver completamente. Distribuir en recipientes apropiados y esterilizar en autoclave a 121°C durante 15 minutos.

Siembra Inocular una alícuota de la muestra directa o de su dilución. Verter un volumen del medio de cultivo fundido y enfriado a 45°C. Homogeneizar mediante movimientos de vaivén y rotación. Dejar solidificar.Incubar a 35°C por 48 horas.

Resultados Después de la incubación contar todas las colonias (usar placas para el recuento de levaduras entre 30 y 300 colonias) y después dejar para que los factores de dilución el cálculo del número de colonias que forman unidades (UFC) por cada ml de muestra original.

Control biológico si lo tuviera Crecen microrganismos heterótrofos.