Enzyme - Bioneer · 2017-12-27 · AccuPower® PCR PreMix 동결 건조된 Type의 Global Standard PCR 제품설명 AccuPower® PCR PreMix 는 바이오니아의 특허 기술 (등록

● Enzyme

● DNA Ampli�cation

AccuPower® PCR PreMix 동결 건조된 Type의 Global Standard PCR

제품설명

AccuPower® PCR PreMix 는 바이오니아의 특허 기술 (등록 10-

016227, KOR)인 DNA polymerase, dNTPs 및 Reaction buffer 등

PCR 수행에 필요한 구성성분을 혼합하여 1회 분량씩 동결 건조

시킨 제품입니다. 실험시에 Template DNA, Primers와 DW만

첨가하면 PCR 반응을 수행할 수 있습니다. 또한 안정화 물질이

첨가되어 있어 상온(25°C) 보관 할 경우에는 한달 동안 활성이

안정적으로 유지되며 냉동 보관 할 경우에는 2년 동안 활성이

안정적으로 유지되는 획기적인 제품 입니다.

Features and Benefits

Stability : AccuPower® PCR PreMix 는 PCR 반응 혼합액에

안정화제를 첨가하여 건조시켜 제조하여, 장기간 보관하더라도

활성을 안정적으로 유지합니다. 타사의 Solution type 제품인

Master Mix는 열에 약한 반면, Dry type 제품인 당사의

AccuPower® PCR PreMix는 95°C, 90 min 열 처리 후에도 활성이

안정적으로 유지됩니다. 이에 따라 실험 안정성이 확보되고 증폭

효율이 높습니다.

Simplicity : 각각의 PCR tube에 DNA Polymerase 및 PCR

반응에 필요한 모든 구성 성분이 포함 되어 있어 Template DNA 및

Primer Set와 DW만 넣어 바로 PCR 반응을 수행할 수 있습니다.

전기영동 시에 필요한 Tracking dye와 침강제가 포함되어 있어

별도로 Sample loading buffer를 첨가할 때 발생되는 Aerosol

에 의한 Carry-over contamination이 없습니다.

Reproducibility : ISO 9001 품질 시스템 하에서 대량 생산된

AccuPower® PCR PreMix는 모든 Reaction tube가 동일한

증폭 효율을 가지고 있습니다.

Sensitivity : Lambda DNA (100ng~100pg) 및 Human

genomic DNA (100ng~100pg)의 Template DNA을 사용하여

Sensitivity를 확인한 결과, 타사 제품에 비해 높은 Sensitivity를

보였습니다.

Long kb PCR : Lambda DNA를 Template DNA로 사용

하였을 때 10kb 이상의 증폭을 확인하였으며, Human genomic

DNA를 Template DNA로 사용하여 타사와 비교 하였을 때 보다

우월한 증폭 효율을 나타냅니다.

Application

Conventional PCR

Primer extension

TA cloning

Gene sequencing

Specifications

5’-> 3’exonuclease activity : No


3’- A Overhang : Yes

Fragment Size : ~ 10kb

Experimental Data

4

Figure 1. Comparison of heat-stability of AccuPower® PCR PreMix and other companies.

A: AccuPower® PCR PreMix (Batch-1) B: AccuPower® PCR PreMix (Batch-2) C: T company’s Taq DNA polymerase Lane 1 : 90 minsLane 2 : 60 minsLane 3 : 40 minsLane 4 : 30 minsM : 100 bp plus DNA ladder(Bioneer Cat. no: D-1035)

A B C M 1 2 3 4 1 2 3 4 1 2 3 4

AccuPower® PCR PreMix (with UDG)증폭된 PCR 산물로 인한 위양성의 해결책

제품설명

AccuPower® PCR PreMix(with UDG) 는 임상 진단실험 시,

PCR 반응에 있어 심각한 문제를 야기할 수 있는 Cross-over

contamination이나 Carry-over contamination을 최소화 할 수

있는 제품 입니다. PCR은 민감하고 신속한 검사법 중 하나이지만

이러한 민감성 때문에 위양성의 문제가 흔히 생길 수 있습니다.

이러한 위양성의 원인으로는 이전에 증폭된 PCR 증폭산물의

오염에 의해 흔히 발생하게 됩니다. 이러한 문제점을 해결하기

위해서는 Uracil DNA Glycosylase system을 사용해야만 합니다. 본

제품은 Uracil DNA Glycosylase system 뿐만 아니라 PCR 반응에

필요한 모든 시약 들이 동결 건조되어 있어 안정적이기 때문에

편리하게 사용하실 수 있습니다.


Prevention of carryover contamination : 임상 진단 이나 실험

시, PCR 반응에 있어 심각한 문제를 야기할 수 있는 Cross-over

contamination이나 Carry-over contamination을 최소화 할 수

있습니다. Uracil DNA Glycosylase는 DNA 가닥 내 N-glycosylic

결합을 가수분해 함으로써 Uracil을 제거하는 기능을 갖고

있으므로 dUTP를 이용하여 PCR을 수행하여야 합니다. PCR

cycling 전에 37℃에서 2분 동안 Uracil DNA glycosylase를

Activation 시키면 PCR cycling 도중 Uracil DNA glycosylase가

불활성화 되는 원리를 이용합니다.

Ease-of-use : Uracil DNA Glycosylase와 dUTP외

Thermostable DNA polymerase, dNTPs를 포함하여 PCR

수행에 필요한 모든 reaction chemicals이 동결 건조 형태의

PreMix 제품으로 개별 포장되어 있습니다. 실험자는 Template

DNA, Primers 및 DW만 첨가함으로써 PCR 반응을 수행할 수

있습니다. 또한 전기 영동의 목적으로 요구되는 Tracking dye와

침강제가 포함 되어 있어 Sample loading buffer를 추가로 넣을

필요가 없습니다.

Reproducibility : Batch가 엄격한 QC 공정 하에 생산됩니다.

바이오니아의 Batch processing system은 보다 정확하고

재현성있는 End-products를 생산하고 있습니다.

Application

Conventional PCR

Primer extension

TA cloning

Gene sequencing

Molecular Diagnosis

Specifications



Terminal transferase activity : Yes

Fragment Size : Up to 10kb

Experimental Data

5

Figure 1. Efficiency of uracil DNA glycosylase using PCR products. (including uracil base).

Efficiency test of uracil DNA glycosylase was operated using serially diluted PCR products including uracil base. AccuPower® PCR PreMix was also tested for negative control. Reaction mixture was incubated at 37°C for 2 min, followed by 95°C for 5 min, 30 cycles of 20 sec at 95°C, 20 sec at 55°C, 30 sec at 72°C.AccuPower® PCR PreMix(with UDG) contains dUTP besides dATP, dGTP, dCTP and dTTP. The copy number of PCR products used to test is represented below.Lane 1 : 1011 copy Lane 2 : 1010 copy Lane 3 : 109 copy Lane 4 : 108 copy Lane 5 : 107 copy Lane 6 : 106 copy Lane 7 : 105 copy Lane 8 : 104 copy Lane 9 : 103 copy Lane 10 : 102 copy Lane N : No template controlM : 100 bp DNA ladder(Bioneer Cat. no : D-1030-1)

PCR PreMix M 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 N

PCR PreMix(with WDG) 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 N

AccuPower® Taq PCR PreMix 국내 최초 모든 시약이 동결 건조된 Global Standard PCR

제품설명

AccuPower® Taq PCR PreMix 는 바이오니아의 특허기술(

등록 10-016227, KOR)인 동결건조 방식으로 DNA polymerase,

dNTPs 및 Reaction buffer등 PCR 수행에 필요한 구성성분을

1회 분량씩 혼합한 제품입니다. 실험자는 Template DNA,

Primers와 DW만 첨가하여 PCR 반응을 수행할 수 있습니다.

또한 안정화 물질이 첨가되어있어 냉동 보관 할 경우에는 2년

동안 활성이 안정적으로 유지되는 획기적인 제품 입니다.


Stability : AccuPower® Taq PCR PreMix 는 PCR 반응 혼합액에

안정화제를 첨가 후 건조시켜 제조하여, 장기간 보관하더라도

활성이 안정적으로 유지됩니다. 타사의 Solution type 제품인

Master Mix는 열에 약한 반면, Dry type 제품인 당사의

AccuPower® Taq PCR PreMix는 안정화제에 의해 Polymerase

의 Activity가 계속 유지되어 실험의 안정성이 확보되며, 장기간

보관 시에도 품질저하가 발생하지 않습니다.

Simplicity : Human genomic DNA(10ng~10pg)의 template

DNA을 사용하여 Sensitivity를 확인한 결과, 타사 제품에 비해

높은 Sensitivity를 보였습니다.

Ease-of-use : 각각의 PCR tube에 Taq DNA polymerase,

dNTP 및 Reaction buffer등 PCR 반응에 필요한 모든

구성성분이 포함되어 있어 Template DNA 및 Primer set와 DW

만 넣으면 바로 PCR을 수행할 수 있습니다. 전기영동 시 필요한

Tracking dye 침강제가 포함되어 있어 별도로 Sample loading

buffer를 가할 필요가 없으며 Aerosol 발생에 의한 Carry-over

contamination을 최소화시킬 수 있습니다.

Reproducibility : ISO 9001 품질 시스템 하에서 One-batch

system으로 제품을 대량 생산하고 각 Batch에 대한 철저한 QC

를 거치기 때문에 대량의 시료를 반복적으로 처리할 때 각 Tube

마다 발생하는 Well간 편차 문제를 해결하여 최상의 실험 결과 및

완벽한 재현성을 갖습니다.

Application

Conventional PCR

Primer extension

TA cloning

Gene sequencing

Specifications

Source : thermus aquatics

5’-> 3’exonuclease activity : Yes


3’- A overhang : Yes

Experimental Data

6

Figure 1. Comparison of PCR amplification efficiency between AccuPower® Taq PCR PreMix from Bioneer and other suppliers’ PCR Master Mix.

Lane M : 100 bp DNA Ladder(Bioneer, Cat. no. D-1030) Lane 1 : 10 ng human genomic DNA Lane 2 : 1 ng human genomic DNALane 3 : 100 pg human genomic DNA Lane 4 : 10 pg human genomic DNA

BIONEER I Company Q Company S Company T Company

M 1 2 3 4 1 2 3 4 1 2 3 4 1 2 3 4 1 2 3 4

AccuPower® ProFi Taq PCR PremixHigh efficiency 및 Long range PCR에 최적화된 Kit

제품설명

AccuPower® ProFi Taq PCR PreMix는 Bioneer에서 독자적으로

개발한 ProFi Taq DNA polymerase와 PCR 반응혼합물이 동결

건조된 제품으로 Template DNA와 Primers의 첨가만으로

정확하고 깨끗한 PCR 산물을 얻을 수 있는 제품입니다. 본

제품에 사용되는 ProFi Taq DNA polymerase는 높은 정확성과

뛰어난 증폭효율을 나타내며, Human genomic DNA의 경우

21kb의 DNA fragment 증폭이 가능하며 Lambda DNA의 경우

30kb의 DNA fragment 증폭이 가능합니다. AccuPower® ProFi

Taq PCR PreMix는 High efficiency 및 Long-range PCR에 매우

적합한 제품이며 그 외에도 다양한 PCR 증폭반응에 사용하실

수 있습니다.


Sensitivity : Lambda DNA(100ng ~ 10fg) 와 Human

genomic DNA (100ng~10pg)를 Template로 한 Sensitivity

를 확인한 결과, 타사 제품에 비해 민감도 및 증폭률이 더 좋게

나타났습니다.

Long PCR : Lambda DNA의 경우 30kb, Human genomic

DNA의 경우 21 kb의 PCR 산물을 효과적으로 증폭시킬 수

있습니다.

Ease-of-use : 각각의 PCR tube에 DNA Polymerase 및 PCR

반응에 필요한 모든 구성 성분이 포함되어 있어 Template

DNA 및 Primer set와 DW만 넣어 바로 PCR 반응을 수행할 수

있습니다.

Stability : AccuPower® ProFi Taq PCR PreMix는 PCR 반응

혼합물에 안정화제를 첨가하여 제조하였기 때문에 장기간

보관하더라도 활성을 안정적으로 유지할 수 있습니다.

Reproducibility : 재현성 있는 결과를 위해 바이오니아의 전

제품은 엄격한 ISO 품질 시스템하에서 생산 됩니다.

Application

Primer extension

long-range amplification from genomic DNA

High amplification efficiency

Excellent performance on difficult templates

Amplification of low-copy targets

High yield and high sensitivity PCR

Specifications



3’- A overhang : Yes

PCR product size : ~ 30kb

Experimental Data

7

Figure 1. Comparison of PCR amplification of long targets between AccuPower® ProFi Taq PCR PreMix from Bioneer and other suppliers’ PCR Master Mix.

Lane M1 : Lambda/Hind III marker (Bioneer, Cat. no. D-1050) Lane M2 : 1 kb DNA Ladder (Bioneer, Cat. no. D-1040) Lane 1 : 11 kb fragment Lane 2 : 13.5 kb fragment Lane 3 : 17.6 kb fragment Lane 4 : 21.4 kb fragment

M1 M2 1 2 3 4 1 2 3 4 1 2 3 4 1 2 3 4 M2 M1

BIONEER Supplier I Supplier S Supplier T

AccuPower® Pfu PCR PreMixGene Cloning등 High fidelity를 요구하는 실험에 최적화된 Amplification Kit

제품설명

AccuPower® Pfu PCR PreMix는 Proof-reading 기능을 갖는

Pfu DNA polymerase를 사용하여 매우 정확한 PCR product

을 얻을 수 있는 제품입니다. 바이오니아만의 독자적인

기술인 PreMix type으로 매우 간편하게 실험 할 수 있습니다.

증폭하고자 하는 Template DNA와 Primer와 DW만의 첨가로

High fidelity를 갖는 PCR Product를 쉽게 얻을 수 있습니다.

기본적으로 High fidelity activity 뿐만 아니라 PreMix type

의 안정성까지 더하여 오랫동안 정확한 결과만을 얻을 수 있는

획기적인 제품입니다.


High Fidelity : AccuPower® Pfu PCR PreMix는 높은 정확성

(error rate= 1.9X10-6)을 가지고 있어 DNA 증폭 시 발생하는

mutation을 최소화 하였습니다.

Simplicity : Lambda DNA는 100ng~10pg, Human genomic

DNA는 100ng~100pg 까지 detection 할 수 있는 우수한

성능을 가지고 있습니다.

Long PCR : Human genomic DNA의 경우 15 kb 이상의 PCR

를 효과적으로 증폭시킬 수 있습니다.

Stability : 제품의 장기보관 시 안정성을 증가시키기 위해 PCR

반응 혼합액을 안정화 물질과 함께 동결건조 시켰습니다. 안정화

물질이 DNA Polymerase의 안정성을 증가시켜 주어 -20°C에서

2년 동안 장기 보관이 가능합니다.

Ease-of-use : Thermostable DNA polymerase, dNTPs를

포함한 PCR 수행에 필요한 모든 구성물질을 포함하고 있어

증폭하고자 하는 DNA, Primer와 DW만 넣으면 바로 PCR 반응을

수행할 수 있습니다. 또한, 전기 영동에 요구되는 Tracking dye와

침강제가 포함되어 있어 Sample loading buffer를 추가로 넣을




Application

Gene synthesis

Gene cloning

Conventional PCR

Primer extension

Site-directed mutagenesis

High fidelity 가 요구 되는 실험

Specifications

5’-> 3’exonuclease : No

3’-> 5’exonuclease : Yes

3’- A Overhang : No

Fragment Size : ~10kb

Experimental Data

8

Figure 1. Amplification of genomic DNA of 1kb to 10kb with AccuPower® Pfu PCR PreMix.

M : 1 kb DNA LadderLine 1 : 1 kb fragment Line 6 : 6 kb fragmentLine 2 : 2 kb fragment Line 7 : 7 kb fragment Line 3 : 3 kb fragment Line 8 : 8 kb fragment Line 4 : 4 kb fragment Line 9 : 9 kb fragment Line 5 : 5 kb fragment Line 10 : 10 kb fragment

제품설명

AccuPower® Multiplex PCR PreMix 는 One-tube 내에서

한번 반응으로만 20개의 PCR 산물을 얻을 수 있는 획기적인

제품입니다. 정확히 PCR product만을 증폭시키는 HotStart

Top DNA polymerase와 Reaction buffer, dNTP 등 PCR 수행에

필요한 구성 성분이 혼합되어 1회 분량씩 동결 건조 시킨 Premix

제품 입니다. One-tube에서 Multiplex PCR을 통해 여러

Target gene을 한번에 검출 가능한 제품입니다. 다양한 Gene

을 한번에 증폭이 가능 하기 때문에 경제적이고 편리합니다. 본

제품은 Multiplex PCR 기술을 이용한 일반적인 Assay나 유전자

진단 관련 Genotyping assay에도 적용이 가능합니다. 또한

AccuPower® Multiplex PCR PreMix는 cDNA를 이용한 Semi-

quantitative gene expression 실험에도 적용할 수 있습니다.


Multiplex PCR : Human genomic DNA 주형은 하나의 Tube

내에서 20개의 Multiplex PCR 증폭산물 생성이 가능합니다.



물질이 들어있어 Polymerase는 -20°C에서 2년 동안 장기

보관이 가능합니다.

Ease-of-use : Thermostable DNA polymerase, dNTPs

를 포함한 PCR 수행에 필요한 모든 구성물질을 포함하고 있어

증폭하고자 하는 DNA, primer와 증류수만을 가하여 바로

Multiplex PCR 반응을 수행할 수 있습니다. 또한, 전기 영동의

목적으로 요구되는 Tracking dye와 침강제가 포함되어 있어

Sample loading buffer를 추가로 넣을 필요가 없습니다.



Application

유전자 진단 관련 assay

RADP

DNA and RNA chip

cDNA library

Specifications

5’ -> 3’exonuclease : No

3’ -> 5’exonuclease : No

3’ - A Overhang : Yes

Fragment Size : ~1 kb

Experimental Data

Figure 1. Single PCR and multiplex PCR using AccuPower® Multiplex PCR PreMix.

Each lane from left to right indicates the single and multiplex PCR prod-uct using AccuPower® Multiplex PCR PreMix. a) 10-plex multiplex PCR, b) 20-plex multiplex PCR M: 25/100 bp Mixed DNA Ladder (Bioneer, Cat. no. D-1020)

AccuPower® Multiplex PCR PreMix하나의 Tube 내에서 Multiplex PCR(Target gene 20종까지)이 가능한 Kit

9

AccuPower® Gold Multiplex PCR PreMixEnzyme-mediated HotStart 기술로 한 tube에서 20종의 Target gene의 증폭에 최적화된 Kit

제품설명

AccuPower® Gold Multiplex PCR PreMix는 한 Tube내에서

1~20개의 Target genes까지 증폭할 수 있는 제품 입니다.

AccuPower® Gold Multiplex PCR PreMix는 세계적으로

인정 받은 Bioneer만의 특허기술(등록 10-0292883,KOR)

인 Enzyme-mediated HotStart 방법을 적용 하였기

때문에 정확하고 깨끗한 Multiplex PCR 산물은 얻을 수 있는

제품입니다. Enzyme-mediated HotStart 방법에 사용되는

Pyrophohsphatase 효소는 PCR cycle 마다 발생되는 PCR

Inhibitor(pyrophosphate)를 가수분해(Hydrolysis) 시켜

줌으로써 PCR 반응 효율을 극대화 시켜줍니다. AccuPower® Gold Multiplex PCR PreMix는 일반적으로 Genotyping assay

나 유전자 진단등 다양한 분야에서 경제적인 가격으로 사용이

가능 하며, cDNA를 이용한 Semi-quantitative assay 등에도

사용할 수 있습니다.


Multiplex PCR : Template DNA를 사용하여 한 Tube 내에서

1~20개의 Multiplex PCR 증폭이 가능합니다.

Specificity(HotStart PCR) : 피로포스페이트(Pyrophosphate,

이하“PPi”)는 Mg2+ 이온과 높은 친화력을 가지고 있어서, PCR

반응에 필요한 Mg2+ 이온을 포집하여 DNA 중합효소의 활성을

억제시킬 수 있습니다. 이는 PCR 반응 전(zero cycle)의 비특이

증폭산물의 생성을 줄여주거나 제거 합니다. AccuPower® Gold Multiplex PCR PreMix에 첨가된 피로포스파타제

(Pyrophosphatase, 이하“PPase”)가 70°C 이상에서 PPi를

2Phosphate(2Pi)로 가수분해 (Hydrolysis)하면 Mg2+ 이온이

해리되고, DNA 중합효소는 해리된 Mg2+ 이온을 이용하여

정확한 Target product만을 빠르게 증폭하게 됩니다.

Ease-of-use : Thermostable DNA polymerase, dNTPs등 PCR

수행에 필요한 모든 구성물질을 포함하고 있어 증폭하고자 하는

DNA, Primer 와 DW만 넣으면 바로 Multiplex PCR 반응을 수행할

수 있습니다. 또한, 전기 영동의 목적으로 요구되는 Tracking dye

와 침강제가 포함되어 있어 Sample loading buffer를 추가로 넣을




Application

Specifications




Fragment Size : Up to 1 kb

Experimental Data

Target Application

Human and Animal

STR analysis for determining genetic pro-files in forensic cases

Molecular diagnostic analysis

Genotyping assay

Qualitative and semi-qualitative gene expression assay

Mutant screening

Transgenic organism analysis

Plant

STR analysis

Detection of pathogens/bacterial infection

Transgenic organism analysis

Qualitative and semi-qualitative gene expression assay

10

Figure 1. High specificity of AccuPower® Gold Multiplex PCR PreMix

Each lane from left to right represensts the progressive number of primer sets (1 – 20) included in single AccuPower® Gold Multiplex PCR PreMix reactions. Rxn. Condition : 95°C for 10 min, followed by 30 cycles(a), 35 cycles(b) of 30 sec at 95°C, 30 sec at 57°C, 60 sec at 72°CM; 25/100 bp Mixed DNA Ladder (Cat. no. D-1020)

HotStart PCR 이란?

HotStart PCR은 일반적으로 깨끗한 PCR product를 얻기 위한 방법입니다. Taq DNA Polymerase는 실온에서도 활성을 갖고 있기에

PCR의 첫번째 Step에서 Mis-annealing이 발생하여 비특이적 산물이 생성될 가능성이 있습니다. 이것을 막기 위해 고온에서만 Taq

DNA Polymerase가 활성화 되도록 하는 것이 HotStart PCR 기술이며, 이러한 HotStart PCR에는 Antibody를 이용한 방법과 Enzyme

을 이용한 방법이 있습니다.

바이오니아의 HotStart 기술은 Taq Antibody를 사용하는 다른 회사와 달리 enzyme을 이용한 방법입니다. 이는 PPi와 PPase, Mg2+

를 이용하는 기술로 Antibody를 이용한 HotStart PCR시 발생하는 PPi를 제거할 수 있어 활성이 더 뛰어나고, PCR cycle의 지속성이

오래갑니다.

(a) 피로포스페이트(Pyrophosphate, 이하“PPi”)는 Mg2+ 이온과 높은 친화력을 가지고 있어 PCR 반응에 필요한 Mg2+ 이온과 결합하여

DNA 중합효소의 활성을 억제시켜 줍니다. (b) 그렇기 때문에 PCR 반응 전(zero cycle)의 인위적인 산물 생성을 줄여주거나 제거시켜

줍니다. 또한, 70°C 이상의 온도에서 첨가된 피로포스파타제(Pyrophosphatase, 이하“PPase”)는 PPi와 Mg2+ 이온간의 결합을 해리시켜

(c) 그 후 해리된 Mg2+ 이온은 DNA 중합효소와 반응하여 보다 빠르고 간편하게 PCR 반응을 진행하게 됩니다.

이처럼 바이오니아만의 특허기술(Enzyme-mediated HotStart 방법)을 적용한 PyroHotStart 방법은 PCR Inhibitor로 매 Cycle 마다

생성되는 PPi를 Pi로 가수분해함으로써 PCR반응효율을 증가시키는 효과를 가지고 있습니다. 이는 여러 서열 프라이머를 사용하는 PCR

반응 및 비 특이적인 반응으로 인한 정확한 결과 분석의 어려움을 해소 시켜 줄 수 있습니다.

Bioneer의 PyroHotStart?

11

AccuPower® HotStart PCR PreMix세계적인 바이오니아 특허기술로 DNA Amplification에 최적화된 Hotstart PCR 제품

제품설명

AccuPower® HotStart PCR PreMix는 PCR 반응 혼합물이

동결건조된 제품으로 Template DNA와 Primer의 첨가만으로

정확하고 깨끗한 PCR 산물을 얻을 수 있는 제품입니다. 일반적인

PCR 반응결과에서 확인되는 낮은 PCR 증폭효율과 높은

비특이반응 생성물은 Mis-priming과 Primer-dimer 형성 등의

원인으로 인해 발생하게 됩니다. 본 제품은 이러한 문제점들을

해결하기 위하여 바이오니아만의 세계적인 특허기술인

Enzyme-mediated HotStart방법(등록 10-0292883, KOR)을

적용하였습니다. 반응특이성과 PCR 증폭효율을 높인 장점을

가지고 있으며, Complex genomic DNA 또는 cDNA templates,

Low-copy targets과 Multiple primer pairs등 다양한 PCR 증폭

반응에 사용하실 수 있습니다.


Stability : 바이오니아만의 특허기술(Enzyme-mediated

HotStart 방법)을 적용한 AccuPower® HotStart PCR PreMix

는 PCR Inhibitor로 매 Cycle 마다 생성되는 PPi를 Pi로

가수분해함으로써 PCR반응효율을 증가시키는 효과를 가지고

있습니다. 이는 낮은 사본의 DNA에 효과적이며 비특이적

증폭산물 생성을 억제하게 됩니다.

Simplicity : 제품의 장기보관 시 안정성을 증가시키기 위해 PCR


물질이 Polymerase의 안정성을 증가시켜 주어 -20°C에서 2년

동안 장기 보관이 가능합니다.

Ease-of-use : Thermostable DNA polymerase, dNTPs

를 포함한 PCR 수행에 필요한 모든 구성물질을 포함하고

있습니다. 증폭하고자 하는 Template DNA, Primer와

증류수만을 가하여 누구나 손쉽게 PCR 반응을 수행할 수

있습니다. 또한, 전기 영동의 목적으로 요구되는 Tracking dye

및 침강제가 포함되어 있어 추가적인 Step 없이 Agarose gel

에서 확인할 수 있습니다.



Application

Genome template’s PCR

Low - copy target’s PCR

Multiple primer pair’s PCR

cDNA templates PCR

Specifications

5’ -> 3’exonuclease activity : No




Experimental Data

12

Figure 1. Specificity TestLane 1 : Primer set P75/P73Lane 2 : Primer set P55/P53Lane 3 : Primer set P75/P83Lane 4 : Primer set P55/P73Lane 5 : Primer set P65/P83

BIONEER Supplier Q Supplier I Supplier S

1 2 3 4 5 1 2 3 4 5 1 2 3 4 5 1 2 3 4 5

AccuPower® HotStart PCR PreMix(with UDG)반복적인 실험에서 오는 Carry / Crossover contamination문제를 제거하는데최적화된 키트

제품설명

AccuPower® HotStart PCR PreMix(with UDG)는 기존의

HotStart PCR PreMix의 성능은 그대로 유지하면서 Uracil DNA

glycosylase system을 적용하여 Carry-over Contamination이나

Cross-over contamination 문제를 해결한 제품입니다. 본 제품은

PCR 반응의 특이성을 증가시킴과 동시에 Uracil DNA glycosylase

를 도입하였기 때문에 Carry-over contamination이나 Cross-

over contamination을 방지할 수 있습니다. 본 제품은 Primer-

dimer 형성을 최소화하여 반응 특이성과 PCR 증폭효율을 높인

특성과 장점을 가지고 있습니다. 또한, Complex genomic, DNA

templates, Low-copy targets과 Multiple primer pairs등 다양한

PCR 증폭반응에 사용하실 수 있습니다.


Prevention of carryover contamination : 임상 진단 실험 시,

PCR 반응에 있어 심각한 문제를 야기할 수 있는 Cross-over

contamination이나 Carry-over contamination을 방지 및

최소화 할 수 있습니다. Uracil DNA glycosylase는 DNA 가닥 내

N-glycosylic 결합을 가수분해 함으로써 Uracil을 제거하는 기능을

갖고 있으므로 dUTP를 이용하여 PCR을 수행하여야 합니다.

PCR cycling전에 37°C에서 2분 동안 Uracil DNA glycosylase를

Activation 시킨 후 PCR cycling 도중 Uracil DNA glycosylase가

불활성화 됩니다.

Specificity : 바이오니아만의 PPi와 PPase가 포함된 화학적

HotStart 제품인 HotStart PCR PreMix는 DNA 중합반응의

부산물인 PPi를 Pi로 분해함으로써 반응을 증가시키는 효과를

가지고 있어서 비특이적 증폭산물 생성을 억제하는 한편, 특이적

증폭산물을 효과적으로 생성하여 적은 사본의 Target DNA에

대한 증폭반응이나 여러 서열 Primer를 사용한 증폭반응, 그리고

PCR 반응 시 발생하는 비특이적 증폭산물 억제에 매우 유용하게

사용하실 수 있습니다.

Ease-of-use : PCR 수행에 필요한 모든 Reaction chemicals

이 동결 건조 형태의 PreMix 제품으로 개별 포장되어 있습니다.

Template DNA, Primers 및 DW만 넣으면 PCR 반응을 수행할 수

있습니다. 또한 전기 영동의 목적으로 요구되는 Tracking dye 및

침강제가 포함 되어 있어 Sample loading buffer를 추가로 넣을


Stability : 각 Batch 가 엄격한 QC 공정 하에 생산됩니다.

바이오니아의 현행 Batch processing system은 보다 정확하고

재현성있는 End - products 생산을 가능하게 합니다.

Application

Genome template’s PCR

Low-copy target’s PCR

Multiple primer pair’s PCR

cDNA templates PCR

(Molecular Diagnosis)

Specifications





Experimental Data

13

Figure 1. Efficiency of uracil DNA glycosylase using PCR product (including uracil base).

Lane 1 : 1011 copy Lane 2 : 1010 copyLane 3 : 109 copy Lane 4 : 108 copy Lane 5 : 107 copyLane 6 : 106 copyLane 7 : 105 copyLane 8 : 104 copy Lane N : No template control M : 100 bp plus DNA ladder(Bioneer Cat. no: D-1030-1)

HotStart PCR PreMix HotStart PCR PreMix(with UDG)

M 1 2 3 4 5 6 7 8 N 1 2 3 4 5 6 7 8 N

AccuPower® PyroHotStart Taq PCR PreMix바이오니아만의 특허기술을 적용한 High Specificity용 DNA Amplification제품

제품설명

일반적인 PCR 반응결과에서 확인되는 낮은 PCR 증폭효율과

높은 비특이 반응 생성물은 PCR Machine이 작용하기

전인 실온에서 Mis-priming과 Primer-dimer 형성 등의

원인으로 인해 발생하게 됩니다. 바이오니아는 이러한 Mis-

priming 발생과 Primer-dimer 현상들을 억제하기 위하여

Enzyme-mediated HotStart 방법을 이용한 AccuPower® PyroHotStart Taq PCR Premix를 개발하였습니다. 본 제품은

비특이적 증폭산물과 Primer-dimer 형성을 최소화하여

반응 특이성과 PCR 증폭효율을 높인 장점을 가지고 있으며,

Complex genomic DNA, Low-copy targets 또는 Multiple

primer pairs등 다양한 PCR 증폭반응에 사용하실 수 있습니다.


Specificity : 바이오니아만의 특허기술(Enzyme-mediated

HotStart 방법)을 적용한 AccuPower® PyroHotStart Taq PCR

Premix는 PCR Inhibitor로 매 Cycle 마다 생성되는 PPi를 Pi로

가수분해함으로써 PCR 반응효율을 증가시키는 효과를 가지고

있습니다. 이는 Low-copy target DNA에 효과적이며 비특이적

증폭산물 생성을 억제하게 됩니다.



물질이 Polymerase의 안정성을 증가시켜 주어 -20°C에서 2년

동안 장기 보관이 가능합니다.

Ease-of-use : Taq DNA polymerase, dNTPs, Reaction

buffer 등 PCR 수행에 필요한 모든 구성물질을 포함하고

있습니다. 증폭하고자 하는 Template DNA, Primers와 DW

만을 가하여 누구나 손쉽게 PCR 반응을 수행할 수 있습니다.

또한, 전기 영동의 목적으로 요구되는 Tracking dye 및 침강제가

포함되어 있어 추가적인 Step 없이 Agarose gel에서 확인할 수

있습니다.



Application

High specificity PCR

High sensitivity PCR

Low-copy target PCR

Multiple primer pairs PCR

cDNA template PCR

(T-A cloning)

Specifications

5’ -> 3’exonuclease activity : Yes



PCR product size : ~ 5 kb(Human)

Experimental Data

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Figure 1. Comparison of PCR amplification specificity between AccuPower® PyroHotStart Taq PCR PreMix from Bioneer and other suppliers’ HotStart PCR Master Mix. PCR reactions were performed according to each supplier’s protocol. The PrP gene was amplified from human genomic DNA with two different primer sets, separately. This data shows that AccuPower® PyroHotStart Taq PCR PreMix has higher amplificition efficency and specificity than other suppliers’ HotStart PCR Master Mix.

Lane M : 100 bp DNA Ladder(Bioneer, Cat. no.D-1030)Lane 1 : 100 ng DNA, PrP primer set(500 bp)Lane 2 : 10 ng DNA, PrP primer set(500 bp) Lane 3 : 100 ng DNA, PrP primer set(705 bp)Lane 4 : 10 ng DNA, PrP primer set(705 bp)

BIONEER Supplier I Supplier S Supplier T Supplier Q M 1 2 3 4 1 2 3 4 1 2 3 4 1 2 3 4 1 2 3 4

AccuPower® HotStart Pfu PCR PreMixGene Cloning등 High fidelity를 요구하는 실험에 최적화된 Amplification Kit

제품설명

AccuPower® HotStart Pfu PCR PreMix는 세계적으로

인정 받은 Bioneer 특허기술(등록 10-0292883, KOR)인

Enzyme-mediated HotStart 기술이 적용되어 Mis-priming,

Primer-dimer, Non-specific amplification을 근본적으로

제거할 수 있어서 극미량의 타겟 DNA도 정확하게 증폭해 낼

수 있습니다. 포함되어 있는 Pfu polymerase는 Proof-readiing

(3’→ 5’exonuclease) 기능을 가지고 있어서 DNA 증폭 반응시

발생하는 error를 줄일 수 있어 단백질 생산을 위한 Cloning

실험에 가장 좋은 제품입니다. 또한 Gene Cloning, Site-directed

mutagenesis 등 High fidelity가 요구되는 실험에 맞는 최적의

제품입니다.


High fidelity : AccuPower® HotStart Pfu PCR PreMix는

Proof-reading기능과 높은 특이성(specificity)을 가지고 있어

Cloning 에 가장 적합한 제품입니다.

Ease-of-use : 각각의 PCR tube 내에 Pfu DNA polymerase,

dNTPs. PPi, PPase 등 HotStart PCR 수행에 필요한 모든

구성물질을 포함하고 있어 증폭하고자 하는 Template DNA와

Primer를 넣어주고 DW로 최종부피를 20μl 또는 50μl로 맞추면

바로 PCR 반응을 수행할 수 있습니다. 또한, 전기 영동에 필요한

Tracking dye 및 침강제가 포함되어 있어 Sample loading buffer

를 섞는 번거로운 과정 없이 바로 겔에 Loading 할 수 있습니다.

High specificity : AccuPower® HotStart Pfu PCR PreMix는

Pfu DNA polymerase 가 가지고 있는 Proof-reading 기능을

최대한 살리면서 Enzyme-mediated HotStart 의 특장점을

살린 키트로서 Cloning, Mutagenesis 등 정확한 Sequence가

요구되는 실험에서 최고의 PCR product를 얻을 수 있는 최적의

제품입니다.

Reproducibility : 바이오니아의 전 제품은 국제표준의 엄격한

ISO 품질 시스템하에서 생산됩니다.

Application

Gene cloning with blunt ends

Site-directed mutagenesis

High fidelity amplification

High specificity PCR

cDNA amplification

Specifications



3’- A Overhang : No

Fragment Size : ≥5 kb

Experimental Data

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Figure 1. AccuPower® HotStart Pfu PCR PreMix shows enhanced specificity compared to competitors.

Lane 1 : P75/73 primer set (139 bp) Lane 2 : P55/53 primer set (211 bp) Lane 3 : P55/63 primer set (447 bp) Lane 4 : P75/83 primer set (618 bp) Lane 5 : P55/73 primer set (1082 bp) Lane 6 : P65/83 primer set (1296 bp) Lane 7 : P55/83 primer set (1561 bp) Lane M : 100 bp DNA Ladder (Bioneer, D-1030)

Bioneer Supplier T Supplier S M 1 2 3 4 5 6 7 1 2 3 4 5 6 7 1 2 3 4 5 6 7

Top DNA PolymeraseEnzymes for everyday PCR, faster than Taq DNA Polymerase, and TA Cloning compatible


High yields : Taq DNA polymerase보다 향상된 증폭 효율을 갖습니다.

High sensitivity :Taq DNA polymerase보다 향상된 민감도를 갖습니다.

Stable reaction :Top enzyme 에 최적화된 Buffer를 제공하여 안정적 반응을 보증합니다.

Reproducibility :재현성 있는 결과를 위해 바이오니아의 전 제품은 엄격한 ISO 품질 시스템하에서 생산 됩니다.

Taq DNA polymerase Versatile DNA polymerase for everyday routine PCR


High Sensitivity and High Specificity :

높은 증폭 효율과 template에 대한 높은 민감도를 갖습니다.

Robust performance :

Taq enzyme에 최적화된 Buffer를 제공하여 안정적인 PCR 반응을 수행합니다.


Pfu DNA PolymeraseNovel enzyme for high fidelity PCR with DNA proofreading


High fidelity PCR:

3’→ 5’exonuclease(proofreading)에 활성을 갖습니다.

Thermostability :

95°C에서 한시간 후 Thermostable activity를 94-99% 유지합니다.

Terminal Transferase Activity :

Terminal Transeferase 활성이 없어 blunt-ended PCR products를 보장합니다.

Reproducibility : 재현성 있는 결과를 위해 바이오니아의 전 제품은 엄격한 ISO 품질 시스템하에서 생산 됩니다.

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ProFi Taq polymerase ProFi Taq DNA polymerase for high efficiency and amplification of long range PCR


Sensitivity :

Lambda DNA (100 ng~10 fg) 및 Human genomic DNA(100 ng~10 pg)를 Template로 한 Sensitivity를 확인한 결과, 타사 제품에 비해 좋은 증폭효율 및 민감도를 가집니다.

Long PCR : Lambda DNA의 경우 30kb, Human genomic DNA의 경우 21 kb의 PCR 산물을 효과적으로 증폭시킬 수 있습니다.


HotStart DNA polymeraseUnique enzyme-mediated HotStart DNA Polymerase



상온에서의 DNA Polymerase 활성을 완벽하게 억제하였기 때문에 PCR 반응물을 혼합하는 동안 형성될 수 있는 Non-specific band나 Primer-dimer의 생성을 억제할 수 있습니다.

Improve Product yields :

높은 Sensitivity와 Specificity로 인해 특이 Band의 Yield를 향상시킬 수 있습니다.


HotStart Taq polymeraseAn Antibody-based HotStart Taq DNA Polymerase for increased specificity and robust sensitivity



기존의 일반적인 Taq DNA polymerase나 PCR premix보다 우수한 결과를 얻을수 있습니다.

High Sensitivity :

불필요한 부반응이 감소됨으로써 소량의 Template DNA로도 성공적인 PCR 실험이 가능합니다.

Easy Handling :

상온에서 Polymerase가 활성을 띄지 않으므로 PCR 반응물을 섞을 때 비특이적인 Priming을 방지할 수 있어 다루기 편리합니다.

Simplicity : PCR 산물은 3’말단에 A-tail을 가지고 있어 T vector에 바로 cloning이 가능합니다.

Reproducibility : One batch에 의해 대량생산되고 바이오니아의 엄격한 ISO 품질검사를 통해 관리되어 항상 균일한 품질을 보증합니다.

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Ordering Information

PreMix Type

Enzymes

Cat. no Product Name

K-2012 AccuPower® PCR PreMix, 96 tubes, 20 μl reaction

K-2013 AccuPower® PCR PreMix, 96 tubes, 50 μl reaction

K-2012-1 AccuPower® PCR PreMix(with UDG), 96 tubes, 20 μl reaction

K-2016-1 AccuPower® PCR PreMix(with UDG), 480 tubes, 20 μl reaction

K-2601 AccuPower® Taq PCR PreMix, 96 tubes, 20 μl reaction

K-2603 AccuPower® Taq PCR PreMix, 96 tubes, 50 μl reaction

K-2631 AccuPower® ProFi PCR PreMix, 96 tubes, 20 μl reaction

K-2633 AccuPower® ProFi PCR PreMix, 96 tubes, 50 μl reaction

K-2022 AccuPower® Pfu PCR PreMix, 96 tubes, 20 μl reaction

K-2023 AccuPower® Pfu PCR PreMix, 96 tubes, 50 μl reaction

K-2115 AccuPower® Gold Mμltiplex PCR PreMix, 96 tubes, 20 μl reaction

K-2117 AccuPower® Gold Mμltiplex PCR PreMix, 96 tubes, 50 μl reaction

K-2111 AccuPower® Mμltiplex PCR PreMix, 96 tubes, 20 μl reaction

K-2112 AccuPower® Mμltiplex PCR PreMix, 96 tubes, 50 μl reaction

K-5050 AccuPower® HotStart PreMix, 96tubes, 20 μl reaction

K-5052 AccuPower® HotStart PreMix, 96tubes, 50 μl reaction

K-5050-1 AccuPower® HotStart PreMix(with UDG), 480 tubes, 20 μl reaction

K-5051-1 AccuPower® HotStart PreMix(with UDG), 96 tubes, 20 μl reaction

K-2611 AccuPower® PyroHotStart Taq PreMix, 96 tubes, 20 μl reaction

K-2613 AccuPower® PyroHotStart Taq PreMix, 96 tubes, 50 μl reaction

K-2301 AccuPower® HotStart Pfu PreMix, 96 tubes, 20 μl reaction

K-2302 AccuPower® HotStart Pfu PreMix, 96 tubes, 50 μl reaction

Cat. no Product Name

E-3100 Top DNA Polymerase 500 Units

E-2011 Taq DNA Polymerase 500 Units

E-2015 Pfu DNA Polymerase 500 Units

E-2201 ProFi DNA Polymerase 250 Units

E-3150 HotStart DNA polymerase 250 Units

E-2017 HotStart Taq polymerase 250 Units18

www.bioneer.com

Documents

Enzyme - Bioneer · 2017-12-27 · AccuPower® PCR PreMix 동결 건조된 Type의 Global Standard PCR 제품설명 AccuPower® PCR PreMix 는 바이오니아의 특허 기술 (등록