Patogeni oportunisti E. coli

Klebsiella Proteus Yersinia enterocolitica

Patogeni Salmonella Shigella Yersinia pestis Tulpini patogene de E. coli: EAEC, ETEC, EHEC

Fam. Enterobacteriaceae

Familia Enterobacteriaceae

Caractere generale:

enterobacterium = bacterie intestinal

habitat: tractul intestinal om/animale, piele, orofaringe, apa

Caractere morfo-tinctoriale

Bacili Gram-negativ

Mobili/imobili

Unii au capsul: Klebsiella pneumoniae

Nu formeaz endospori

Caractere de cultur

Facultativ anaerobe Tulbur uniform mediul de cultur lichid Au necesiti nutriionale reduse se

dezvolt i pe geloz nutritiv Colonii tip S Uneori colonii mucoase: Klebsiella pneumoniae Medii selective, majoritatea au lactoz:

Drigalski, Levin, Leifson, Istrate-Meitert, MacConkey

Mediul Levine

Categoria: Mediu selectiv i diferenial

Componente: geloz simpl + eozin + lactoz + albastru de metilen

Utilizare: cultivarea enterobacteriilor (E.coli)

ADCL (Leifson)

Categoria: Mediu selectiv i diferenial

Componente: geloz simpl + sruri biliare + lactoz + rou neutru

Utilizare: cultivarea shigelelor i salmonelelor

Caractere biochimice

~ ncadrarea n familie pe baza a trei teste biochimice: Fermentez glucoza cu producere de acid i gaz Testul oxidazei negativ Reduc nitraii la nitrii

~ Pe baza testelor biochimice i a caracterelor antigenice genuri specii variante serologice

OXIDAZA

Scop: evidentierea citocromoxidazei

Substrat: benzi indicatoare (alfanaftol- clorhidrat de dimetilparafenilendiamina)

Tehnica:- se umecteaza banda

indicatoare cu apa distilata - se descaraca o colonie

bacteriana cu ajutorul ansei pe banda indicatoare

Interpretare: test+coloratie albastra

Reducerea nitratilor la nitriti

Substrat: apa peptonata + KNO3

Incubare: 24h la 37 C

Substanta indicatoare: ac sulfanilic/acid acetic, alfanaftilamina/ac acetic

Interpretare: test + viraj spre rosu al indicatorului (Enterobacteriaceae)

Enterobacterii oportuniste

Escherichia Klebsiella Enterobacter Hafnia

Serratia Proteus Providencia MorganellaArizona Edwarsiella Citrobacter

Enterobacterii oportuniste

Escherichia coli~ 80% flora normal a colonului~ bacili Gram-negativi~ lactozo-pozitivi ~ luciu metalic mediul Levin

Escherichia coli

Tipuri de mbolnviri:

~ boli diareice

~ infecii urinare

~ Meningita neonatala

~ infecii ale plgilor

~ septicemii

Escherichia coli

Tulpini care produc boli diareice:

~ ETEC (E.coli enterotoxigen)

~ EIEC (E.coli enteroinvaziv)

~ EPEC (E.coli enteropatogen)

~ EHEC (E.coli enterohemoragic)

~ VTEC (E.coli produce toxin Shiga-like) O157:H7

GENUL ESCHERICHIAE. coliE. coli

Cultura puraCultura pura

E. coliE. coli

LEVINELEVINEDRIGALSCHIDRIGALSCHI

E. coliE. coli

MEDIU CROMOGENMEDIU CROMOGEN

COLONII ROZCOLONII ROZ

Escherichia coliIdentificare biochimic

IMViC~ Testul indol~ Testul rou metil~ Reacia Voges-Proskauer~ Testul citrat

OXIDATIE-FERMENTATIE

DEGRADARE MIXTADEGRADARE MIXTA

MEDIU NEDAGRADATMEDIU NEDAGRADAT

Teste rezultate din tipurile de fermentatie

TESTUL ROSU-METIL

TESTUL VOGES-PROSKAUER

TESTUL ROSU-METIL

Scop: fermentarea substratului si scaderea pH-ului sub 5 Tehnica:

tulpina bacteriana testata se insamanteaza in apa peptonata glucozata.

Incubare 18h la 37 C. Developare cu solutie rosu fenol

Interpretare: Test + culoare rosie (pH5): Klebsiella

TESTUL VOGES-PROSKAUER

Scop: evidentierea fermentatiei acetoinice

Tehnica: tulpina bacteriana se insamanteaza in apa peptonata glucozata. incubare 18h la 37 C. Se alcalinizeaza. Developare cu alfanaftol.

Interpretare: test + inel rosu-violaceu la interfata de contact: Klebsiella Test - : E.coli

TESTUL VOGES-PROSKAUER

TESTUL INDOL

Scop: evidentiaza prezenta triptofanazei Tehnica:

cultura bacteriana de 24h in apa peptonata benzi indicatoare cu reactiv indol.

Interpretare: test + culoare rosu-violaceu (E.coli)

TESTUL INDOL

Grupul Klebsiella Enterobacter Hafnia Serratia

Klebsiella pneumoniaeKlebsiella rhinoscleromatisEnterobacter cloacaeEnterobacter aerogenesHafnia alveiSerratia marcescens

Grupul KEHSTipuri de mbolnviri:

~ Dobndite n spital~ Infecii cu localizri E.coli~ Cauze imp. de bacteriemii~ Klebsiella pneumoniae inf. pulmonar~ Majoritatea tulpini cu rezisten multipl la

antibiotice

Klebsiella pneumoniae

~ cantiti moderate n intestinul omului /animalelor

~ infecii respiratorii, urinare, otite~ bacili Gram-negativi~ capsul polizaharidic ~ colonii mari mucoase , fenomen de

cameleonaj

KLEBSIELLAKLEBSIELLA

Frotiu coloratia tu de China

KLEBSIELLAKLEBSIELLA

Colonii mucoaseColonii mucoase

KLEBSIELLA

Proprietati biochimiceProprietati biochimice

Proteus vulgaris, P.mirabilis

~ saprofii (materie organic n descompunere)

~ flora intestinal normal~ infecii urinare, alte tipuri de infecii~ bacili Gram-negativi, mobili~ lactozo-negativi~ invadeaz suprafaa mediilor gelozate

GENUL PROTEUS

Proteus Proteus vulgarisvulgaris

FlageliFlageli

GENUL PROTEUS GENUL PROTEUS -- migrare

PRODUCEREA DE H2S

TESTUL UREAZEI

Scop : evidentierea ureazei, enzima ce scindeaza ureea cu formare de amoniac

Substrat: mediu de cultura ce contine uree si indicator colorimetric (de Ph).

Tehnica: tulpina bacteriana testata se inoculeaza in mediu. Se incubeaza 18h la 37 C.

Interpretare: test+ viraj corespunzator al zonei bazice: Proteus

Proteus spp.

Ureaza +

H2S

TESTUL FENILALANINDEZAMINAZEI

Scop: evidentierea prezentei FAD

Substrat: agar inclinat ce contine fenil-alanina

Tehnica: tulpina bacteriana se insamanteaza pe panta agarului. Developarea reactiei cu FeCl3

Interpretare: test+ aparitia culorii verzi (Proteus)

TESTUL FENILALANINDEZAMINAZEI

Yersinia pestis

~ ciuma (pesta)

~ bacili Gram-negativ

~ capsul proteic

Yersinia enterocolitica~ Sdr. Diareic febril

Yersiniapseudotuberculosis~ Inf. la psri, roztore,

rar om~ Lez. tipic: noduli

asemntori celor tbc n intestin, org. parenchimatoase