Upload
vuongquynh
View
230
Download
0
Embed Size (px)
Citation preview
DUA SENYAWA MANGOSTIN DARI EKSTRAK N-HEKSANA KAYU AKAR MANGGIS (Garcinia mangostana, Linn.) ASAL KAB.
NGANJUK, JAWA TIMUR
Oleh : Dosen Pembimbing :PRIMA AGUSTI LUKIS PROF. DR . TASLIM ERSAM1407 100 030
Seminar Hasil
LATAR BELAKANG
Metabolit Primer
Metabolit Sekunder
Benzofenon, Flavonoid, Kumarin, Santon, dll.
(gartanin)
O
O OH
OH O
MeO
(3-isomangostin)
(Chaverry, 2008)O
O OH
OH O
MeO
PERMASALAHAN
TUJUANMENGEKSPLORASI SENYAWA MANGOSTIN YANG DAPATDIPISAHKAN PADA EKSTRAK N-HEKSANA DARI KAYU AKARMANGGIS (G.mangostana,Linn.)MEMBERIKAN INFORMASI BAHWA PADA KAYU AKARMANGGIS MENGANDUNG SENYAWA YANG BERBEDADENGAN SENYAWA MANGOSTIN PADA KULIT BUAHMANGGIS
APAKAH TERDAPAT PERBEDAAN ANTARA SENYAWAMANGOSTIN YANG DAPAT DIPISAHKAN PADA KAYU AKARDENGAN SENYAWA YANG DITEMUKAN PADA KULIT BUAHMANGGIS ?
METODOLOGI
1. ALAT :- Seperangkat alat gelas seperti Erlenmeyer, beaker glass, gelas
ukur, pengaduk, penyaring vakum, peralatan kolomkromatografi (KCV).
- Ekstraktor, Eyela Rotary Evaporator N-1001, lampu ultraviolet(UV) dengan λ 254 dan 366 nm, Melting Point ApparatusFisher – Johns, Spektrofotometer UV-VIS 1700 PharmastecShimadzu, Spektrofotometer IR BUCK Scientific 500 danSpektrometri 1H dan 13C-NMR Jeol JMN ECA 500 MHz.
METODOLOGI
2. BAHAN- Kayu akar tanpa kulit G.mangostana dalam bentuk
serbuk kering, pelarut organic seperti n-heksana,metilen klorida, kloroform, etil asetat, aseton danmetanol.
- TLC aluminium sheets 20x20 cm Silica gel 60 F254untuk KLT, Silica gel 60 untuk impregnasi, Silica gel60 G untuk kromatografi cair vakum, penampaknoda serium sulfat (Ce(SO4)2) 1,5% dalam H2SO4 2N.
METODOLOGI3. PROSEDUR KERJA3.1 Persiapan Bahan Tumbuhan
± 2 gram
Didiamkan selama1x24 jam
Kloroform : MeOH (9,8 : 0,2)
dioven Disemprot serium sulfat
Disinari dengan lampu UV
sampel ditotolkanpada plat KLT
Ekstrak kayu manggis
N-heksana (1), Diklorometana (2), Aseton (3),Etil Asetat (4), MeOH (5)
METODOLOGI3.2 Isolasi Senyawa3.2.1 Maserasi
3 kg
Dimaserasi dengan n-heksana(2x24 jam)
Diuapkan dengan Rotary evaporator
Ekstrak padat (3,4565 gram)
Kromatogram KLT maserasi 1 dan 2, eluen kloroform : MeOH (9,8 : 0,2)
1 2
METODOLOGI3.2.2 Fraksinasi ekstrak n-heksana
Ekstrak padat (3,4565 gram)
pelarut
silika
ke pompavakum
kaca masir
corong vakum
Ekstrak padat
KCV dengan eluen n-heksan : CHCl 2 yang ditingkatkan kepolarannya
dimonitoring KLT dengan eluen
klorofrom : MeOH(9,9 : 0,1)
Penggabungan fraksi berdasarkankemiripan Rf4 Fraksi (A, B, C, dan D)Fraksi A, dan D
Pemurnian
METODOLOGI3.3 Pemurnian Senyawa Hasil Isolasi3.3.1 Rekristalisasi
Padatan A dan D
-Dipisahkan dari pelarutnya dengan disaring vakum-Direkristalisasi dengan n-heksana : aseton-Didinginkan selama 1x 24jam
Kristal kuning
-Disaring vakum-Dicuci dengan campuran n-heksana : CHCl2 dingin-Dimonitoring KLT
Hasil
METODOLOGI3.3.2 Uji Titik Leleh dan Kelarutan
Kristal kuningmurni
-Diambil sesedikit mungkin-Diletakkan pada apparatus -Diukur titik leleh
Hasil Kristal kuningmurni
-Diambil sesedikit mungkin-Dilarutkan dalam berbagai pelarut (n-heksana , CHCl2, kloroform, etil asetat, aseton dan metanol)-Diamati kelarutannya
Hasil
HASIL DAN PEMBAHASAN1. Pembahasan1.1 Uji Pendahuluan
Ekstrak kayu manggis 1. n-heksana2. diklorometana3. aseton4. etil asetat5. metanol
Kromatogram KLT hasil ujipendahuluan dengan eluenkloroform : metanol (9,8 ; 0,2)
HASIL DAN PEMBAHASAN1.2 Isolasi Senyawa
Kromatogram KLT maserasi 1 dan 2, eluen kloroform : MeOH (9,8 : 0,2)
1 2Ekstrak padat (3,4565 gram)
pelarut
silika
ke pompavakum
kacamasir
corong vakum
Ekstrakpadat
KCV dengan eluen n-heksan : CHCl 2 yang ditingkatkan kepolarannya
Kromatogram KLT fraksigabungan hasil KCV menggunakan eluen kloroform : metanol (9,9 : 0,1).
Kromatogram KLT pemilihaneluen yang sesuai (5%, 20%, 30%, 40% dan 50%)
Kromatogram KLT fraksinasi 1 menggunakan eluenkloroform : metanol (9,9 : 0,1)
A B
C D
HASIL DAN PEMBAHASAN1.3 Pemurnian Senyawa1.3.1 Uji 3 eluen yang berbeda kepolarannya
1 32
Senyawa 1
21 3
Senyawa 2Kromatogram KLT berbagai eluen
Keterangan :1a. Eluen diklorometana : etil asetat (9,5 : 0,5)2a. Eluen kloroform : metanol (9,9 : 0,1)3a. Eluen diklorometana : n-heksana (8 : 2)
1b. Eluen diklorometana : etil asetat (9,5 : 0,5)2b. Eluen kloroform : etil asetat (9 : 1)3b. Eluen kloroform : metanol (9,9 : 0,1)
1.3.2 Uji Titik Leleh dan Kelarutan
Senyawa 1 Senyawa 2Titik leleh 170 – 173 °C 172 – 174 °CKelarutan larut baik dalam kloroform, etil asetat dan
aseton, tidak larut dalam metanol, sedikitlarut dalam n-heksana dandiklorometana.
larut dalam etil asetat, aseton, dan metanol, sedikitlarut dalam n-heksana, diklorometana,dan kloroform.
HASIL DAN PEMBAHASAN1.4 Penentuan Struktur1.4.1 Penentuan Struktur Senyawa 11.4.1.1 Spektrum UV Senyawa 1 + MeOH + NaOH (a) dan Senyawa 1 + AlCl3/HCl (b)
R
O
OH
NaOH R
O
O-
R
O
O
- Na+
+ OH2R
OO
O
OAl
2+
Al+R
O
OH
OHOH AlCl3
R
OOH
OH
OAl
2+
HCl
O
O OH
OH OH
(a)
Abs
nm
n→π*315244
π→π*
356
(b)nm
Abs
315
480
1.4.1.2 Spektrum IR Senyawa 1 dalam pelet KBr
%T
1/cm
OH
C-H C=O
C=CC-O
R = OCH3 / C5O
O OH
OH OH
R R
1.4.1.2 Spektrum 1H-NMR Senyawa 1 dalam Aseton d6
abundance
ppm
Keterangan : ada minimal 28 atom proton1. Kelompok prenil pada δH (ppm) 5,28 dan 5,22 (1H, m)2. Kelompok metoksi pada δH (ppm) 3,80 dan 3,95 (masing – masing 3H, s)3. Kelompok hidroksil terkhelat dengan karbonil pada δH (ppm) 13,61 (1H, s)4. Kelompok proton aromatik singlet pada δH (ppm) 6,47 dan 6,83 (masing – masing 1H, s) 5. Kelompok metilen pada δH (ppm) 4,12 (2H, d, J = 6,5) dan 3,31 (2H, d, J = 7,15)6. Kelompok metil pada δH (ppm) 1,63; 1,65; 1,77 dan 1,82 (masing – masing 3H,s)
1.4.1.2 Spektrum 13C-NMR dan DEPT 135 Senyawa 1 dalam Aseton d6
Keterangan : ada minimal 24 atom karbon, data DEPT 135 memperlihatkan ada 12 atom karbonyaitu :1. Ada 4 gugus metin (C-H) pada δC (ppm) 124,7; 123,4; 102,8 dan 89,92. Ada 2 gugus metilen (CH2) pada δC (ppm) 26,9 dan 21,9 → diprenilasi3. Ada 6 gugus metil pada δC (ppm) 61,4; 56,5; 25,9; 25,9; 18,4 dan 17,9, dua diantaranya adalah
gugus metoksi (O-CH3) pada δC (ppm) 61,4 dan 56,5 → dimetoksi4. 12 atom karbon yang tidak muncul di spektrum DEPT 135, menunjukkan bahwa atom karbon
tersebut merupakan atom C kuartener
abundance
ppm
C-H
CH3
CH2
Nomorkarbon
Senyawa β-mangostin Senyawa 1
δH (ppm) δC (ppm) δH (ppm) δC (ppm)
1 - 160,2 - 160,52 - 111,9 - 111,83 - 163,9 - 164,64 6,39 (s) 89,2 6,47 (s) 89,94a - 156,1 - 157,55 6,86 (s) 101,8 6,83 (s) 102,76 - 154,8 - 156,37 - 143,0 - 144,68 - 137,5 - 138,28a 112,8 - 112,29 - 182,3 - 182,99a - 104,3 - 104,210 - - - -10a - 155,7 - 156,211 3,37(d,J=6,0Hz) 21,8 3,31(d,
J=7,15Hz)25,9
12 5,29 (m) 122,7 5,28 (t) 123,413 - 132,5 - 131,514 1,69 (s) 26,2 1,65(s) 25,915 1,69 (s) 26,2 1,63(s) 18,316 4,13 (d, J=6,6 Hz) 27,0 4,12 (d, J= 6,5
Hz)21,9
17 5,29 (m) 123,6 5,22 (t) 124,718 - 132,1 - 131,519 1,85 (s) 18,6 1,82(s) 17,920 1,83 (s) 18,2 1,77(s) 26,9
1-OH 13,44(s) 13.61(s)3-OMe 3,93 (s) 62,5 3,95 (s) 61,47-OMe 3,83 (s) 56,2 3,80 (s) 56,5
Tabel 1. Data Perbandingan 1H-NMR, dan 13C-NMR, Senyawa 1 dengan Senyawa β-mangostindalam Aseton d6
O
O OH
OH
MeO
OMe
H H
(β-mangostin)
1.4.1.2 Spektrum 2D-HMBC
OHH
HHH
MeO
OHO
OH
OMe
H H1
2
35
6
7
4
8 911
10a 4a
16
posisi prenil pada C-2 dan C-8
O
O
H
OH
H
MeO
OH OMe
posisi metoksi pada C-3 dan C-7, posisiproton aromatic pada C-4 dan C-5, serta posisi OH khelat pada C-1
O
O
H
OH
H
MeO
OH OMe
(1)
Nomorkarbon
δH (ppm) δC
(ppm)HMBC
1 - 160,62 - 111,83 - 164,64 6,47 (s) 89,9 C-3, C-4a, C-
9a, C-94a - 156,35 6,83 (s) 102,7 C-7,C-8a,C-96 - 157,67 - 144,68 - 138,28a - 112,29 - 182,99a - 104,210 - -10a - 156,211 3,31(d,J=7,15
Hz)21,9 C-1, C-2, C-3,
C-12, C-13, C-15
12 5,22 (t) 123,4 C-1413 - 131,514 1,77 (s) 25,9 C-12,C-13,15 1,82 (s) 25,916 4,12(d, J= 6,5
Hz)26,9 C-8, C-8a, C-7,
C-17, C-1817 5,28 (t) 124,7 C-1918 - 131,519 1,63 (s) 17,9 C-20,C-17,C-
1820 1,65 (s) 18,3
1-OH 13.61 (s) C-1, C-2, C-9a,C-8a
3-OMe 3,95 (s) 61,4 C-37-OMe 3,80 (s) 56,5 C-7
HASIL DAN PEMBAHASAN1.4.2 Penentuan Struktur Senyawa 21.4.2.1 Spektrum UV Senyawa 2 + MeOH + NaOH dan Senyawa 2 + AlCl3/HCl
R
O
OH
NaOH R
O
O-
R
O
O
- Na+
+ OH2 R
OO
O
OAl
2+
Al+R
O
OH
OHOH AlCl3
R
OOH
OH
OAl
2+
HCl
O
O OH
OH OH
Abs
nm(b)
316
480
Abs
nm(a)
316 369 243
n→π*π→π*
1.4.2.3 Spektrum UV dan IR Senyawa α-mangostin dalam pelet KBr
%T
1/cm
OH
C-H
C=O C-O
(2)O
O OH
OHH H
MeO
OH
Abs
nm(a)
316 369 243
n→π*π→π*
KESIMPULAN DAN SARAN
-Dihasilkan dua senyawa mangostin dari ekstrak n-heksana kayu akar G.mangostana yaituβ-mangostin (1) dan α-mangotin (2).- Senyawa β-mangostin berupa kristal jarum berwarna kuning sebanyak 0,2714 gramdengan titik leleh 170 – 173 °C, sedangkan senyawa α-mangostin berupa padatankuning sebanyak 0.0458 gram dengan titik leleh 172 – 174 °C.- Penentuan struktur kedua senyawa tersebut dilakukan dengan menggunakan dataspektroskopi UV, IR, 1H-NMR, 13C-NMR, DEPT 135, HMBC dan dilakukan perbandingandata senyawa yang sama dengan yang telah dilaporkan oleh peneliti sebelumnya.
1. Kesimpulan
2. Saran
Penelitian ini masih berpotensi untuk dilakukan penelitian lebih lanjut karena masih banyakfraksi – fraksi lain yang belum diperlakukan, sehingga dapat berpeluang untukmendapatkan senyawa mangostin atau senyawa turunan fenolat lainnya dan diuji sebagaibioaktifitasnya.