Upload
others
View
1
Download
0
Embed Size (px)
Citation preview
Diagnos(c biologique de la leptospirose
Musso D, Ins(tut Louis Malardé, Papeete, Tahi(, Polynésie Française
Directeur du LABM et du Pôle de recherche et de veille sur les Maladies Infec8euses Emergentes
Forma8on médicale con8nue, Papeete, 30 mars 2 2015
Diagnos8c biologique
Ø Examens biologiques d’orienta8on Ø Diagnos8c biologique direct
Ø Examen direct Ø Mise en évidence de l’agent pathogène (culture) Ø Mise en évidence d’an8gènes (streptocoque, dengue …) Ø Mise en évidence du génome (PCR)
Ø Diagnos8c biologique indirect Ø Mise en évidence de la réponse immunitaire : sérologie
Forma8on médicale con8nue, Papeete, 30 mars 2 2015
Diagnos8c biologique de cer8tude Ø Examens biologiques d’orienta8on Ø Diagnos8c biologique direct
Ø Examen direct Ø Mise en évidence de l’agent pathogène (culture) Ø Mise en évidence d’an8gènes (streptocoque, dengue …) Ø Mise en évidence du génome (PCR)
Ø Diagnos8c biologique indirect Ø Mise en évidence de la réponse immunitaire : sérologie
Forma8on médicale con8nue, Papeete, 30 mars 2 2015
Leptospires
Ø A savoir Ø Non colorés par les colora8ons usuelles (gram, Ziehl …) Ø Ne pousse pas sur milieu de culture usuel
Ø Donc: si pas de demande spécifique, le diagnos8c biologique specifique ne sera jamais fait
Forma8on médicale con8nue, Papeete, 30 mars 2 2015
Leptospirose: examens biologiques d’orienta8on
Ø Numéra8on formule sanguine Ø Hyperleucocytose à polynucléaires Ø Thrombopénie
Ø Augmenta8on Ø Transaminases (< 200), phosphatases alcalines, bilirubine, amylase Ø Urée créa8nine Ø CRP
Ø Si LCR Ø Aspect de méningite asep8que (pas de germes au Gram, culture
néga8ve) Ø < 500 leucocytes / mm3, prédominance lymphocytes +++ Ø Glycorrachie habituellement normales Ø Proteinorrachie entre 50 et 10 mg/ml
Forma8on médicale con8nue, Papeete, 30 mars 2 2015
Leptospirose: examen direct
Ø Diagnos8c biologique direct: recherche de leptospires en microscopie à fond noir Ø Très peu sensible +++ Ø Très peu spécifique (nombreux faux posi8fs) +++ Ø Ne pas prescrire et ne pas faire (intérêt du fond noir uniquement pour la culture de leptospire)
Forma8on médicale con8nue, Papeete, 30 mars 2 2015
Leptospirose: diagnos8c direct par culture
Ø Sur milieux spécifiques +++ Ø A par8r de sang, urines, LCR Ø Prélèvement avant ATB Ø Très long: jusqu’à 4 mois +++ Ø Pas adapté au diagnos8c urgent Ø Intérêt épidémiologique (si typage)
Forma8on médicale con8nue, Papeete, 30 mars 2 2015
Leptospirose: diagnos8c direct par recherche an8génique
Ø Pas de test disponible
Forma8on médicale con8nue, Papeete, 30 mars 2 2015
Leptospirose: diagnos8c direct par PCR
Ø Recherche de l’ADN bactérien Ø Nombreux protocoles publiés Ø Posi8f dans le sang jusqu’à J 10 en moyenne Ø Technique de choix en phase aigue +++ Ø Possibles dans urines et LCR plus tardivement Ø Pas pris en charge par le CPS
Forma8on médicale con8nue, Papeete, 30 mars 2 2015
Leptospirose: diagnos8c direct par PCR
Ø A savoir : la bactériémie est faible dans la leptospirose (souvent < 104/ml) donc:
Ø Une PCR néga8ve en phase aigue n’élimine pas le diagnos8c +++
Forma8on médicale con8nue, Papeete, 30 mars 2 2015
Leptospirose: diagnos8c indirect par sérologie
Ø 3 types de techniques Ø Microagglu8na8on (MAT) « gold standard » Ø ELISA IgM Ø Tests rapides IgM
Forma8on médicale con8nue, Papeete, 30 mars 2 2015
Leptospirose: diagnos8c indirect par sérologie
Ø Microagglu8na8on (MAT) Ø « gold standard » ? Ø Seuls les laboratoires de référence la font Ø Très complexe et très long Ø Dépiste IgG et IgM Ø Réponse anamnes8que à d’anciennes infec8ons Ø Ciné8que des an8corps variables suivant les cas Ø Problème du cut-‐off en zone endémique « de 1/100 à 1/800 Ø Intérêt épidémiologique mais pas diagnos8que
Ø MAT posi8f = infec8on ac8ve, récente ou ancienne +++
Forma8on médicale con8nue, Papeete, 30 mars 2 2015
Leptospirose: diagnos8c indirect par sérologie
Ø ELISA Ø Facile à réaliser en rou8ne Ø Dépiste spécifique des IgM Ø Ciné8que des an8corps variables suivant les cas +++ Ø Problème du cut-‐off en zone endémique Ø Pas d’intérêt épidémiologique
Ø Tests rapides Ø Même problème que l’ELISA et moins performant
Forma8on médicale con8nue, Papeete, 30 mars 2 2015
Leptospirose: compara8f des techniques
Forma8on médicale con8nue, Papeete, 30 mars 2 2015
Musso D, Lascola B: Diagnos8c biologique de la leptospirose. RFL 2013
Leptospirose: quel test prescrire
Forma8on médicale con8nue, Papeete, 30 mars 2 2015
Haute autorité de santé, recommandations 2011
Leptospirose: prescrire le bon test au bon moment
Ø Sérologie les 5 premiers jours: on va détecter des Ac faux posi8fs ou des Ac dus à une infec8on antérieure +++
Ø PCR dans le sang après J 10: sera quasiment toujours néga8ve
Ø Capital: prescrire le bon test en fonc8on du début présumé des signes cliniques +++
Forma8on médicale con8nue, Papeete, 30 mars 2 2015
Problème de la sérologie
Ø Tahi8 = zone d’endémie Ø Les cut-‐off n’ont pas été calculés Ø Valeur prédic8ve néga8ve d’une sérologie néga8ve très faible
Ø Valeur prédic8ve posi8ve d’une sérologie posi8ve très faible
Ø Exemples courants de sérum Ø PCR lepto posi8ve + IgM dengue posi8fs Ø PCR dengue posi8ve + IgM lepto posi8fs
Forma8on médicale con8nue, Papeete, 30 maris 2 2015
Problème du diagnos8c différen8el en Pf, principalement dengue
Ø Diagnos8c biologique différen8el possible en phase aigue: Ø Prescrire PCR dengue + PCR leptospirose Ø PCR leptospirose néga8ve n’élimine pas le diagnos8c
Ø Diagnos8c biologique différen8el en phase tardive: très difficile : Ø IgM dengue très fréquent dans la popula8on, réac8on croisée dengue/Zika, les IgM peuvent persister longtemps
Forma8on médicale con8nue, Papeete, 30 maris 2 2015
Autre problème d’interpréta8on de la sérologie: chikungunya
Ø A priori peu de réac8ons croisées avec dengue et Zika mais
Ø En début d’épidémie peut de pa8ents on des Ac Ø En fin d’épidémie: si 30% de la popula8on a été infectée, 30% ont des Ac Ø Sérologie posi8ve Chikungunya peut être due à
Ø Chikungunya fait en début d’épidémie Ø Leptospirose actuelle avec IgM chikungunya
Ø La valeur prédic8ve du test va changer au fur et à mesure de l’épidémie (raison pour laquelle l’ILM a arrêté de rendre des sérologies Zika en fin d’épidémie)
Forma8on médicale con8nue, Papeete, 30 maris 2 2015
Interpréta8on de la sérologie de la sérologie leptospirose
Ø Exemple: MAT au 1/200 ou IgM lepto ELISA posi8f: Ø employé de banque en région Parisienne qui revient d’un trekking
pluvieux au Brésil, VPP élevée Ø Propriétaire d’un fa’apu à Raiatea, VPP ? Ø Propriétaire d’un fa’apu à Futuna, VPP nulle
Forma8on médicale con8nue, Papeete, 30 maris 2 2015
Défini8on biologiques des cas de leptospirose
Forma8on médicale con8nue, Papeete, 30 maris 2 2015
Musso D, Lascola B: Laboratory diagnosis of leptospirosis: A challange: JMII 2013