Antibiogram I njegov znaaj

Antibiogram je metoda ispitivanja osetljivosti bakterija prema antibakterijskim lekovimaPre primene nekog antibakterijskog leka u terapiji oboljenja potrebno je in vitro ispitati ponaanje mikroorganizma izolovanog u istoj kulturi, na odreena antibakterijska sredstvaOvo ispitivanje se vri na 2 naina : difuzionim I dilucionim metodama

Difuziona metodaPrincip ove metode je da antibakterijski lek difunduje u hranljivu podlogu I deluje inhibitorno, uveoj ili manjoj meri, na razmnoavanje bakterija prethodno zasejanh na tu podloguDisk metoda ( metoda tablete ) to je najee primenjena metoda. Upotrebljavaju se diskovi ili tablete obloeni tano odreenom koncentracijom antibakterijskog leka, koja je odgovarajua onoj koja se postie u organizmu primenom terapijskih doza tog leka

Difuziona metodaHranljiva podloga se prethodno zaseje suspenzijom odreene gustine iste kulture ispitivanog soja ( inokulum ) a potom se stave diskovi ili tablete iz kojih lek difunduje u podlogu.

Difuziona metodaNakon inkubacije od 18-24 asa na 37 C oitava se prenik zone inhibicije.Ako su svi uslovi standardizovani ( pritisak, temperatura, pH, vreme inkubacije ) onda je prenik zone inhibicije proporcionalan koncentraciji datog antibakterijskog sredstva

Difuziona metoda

Difuziona metodaNaime, ako je zasejana bakterija osetljiva na dejstvo leka, ona nee porasti u zoni njegove aktivnostiirina te zone inhibicije predstavnja stepen osetljivosti bakterije S ( senzitivan osetljiv soj ) I ( intermedijaran srednje osetljiv soj )Ako je bakterija otporna na dejstvo leka zona inhibicije je uska ili uopte ne postoji R ( rezistentan otporan soj )

Difuziona metodaNa irinu zone inhibicije mogu da utiu sledei faktori:Osobine podlogeVeliina inokulumaFaza raazmnoavanja u kojoj se nalazi ispitivana bakterijaStabilnost antibakterijskog sredstva

Difuziona metodaDa bi se otklonio uticaj ovih faktora za izvoenje antibiograma se koristi standardna Mueller Hintonova podloga

Diluciona metodaPomou dilucione metode odreuje se osetljivost izolovanih bakterijskih sojeva prema antimikrobnim lekovima kao I aktivnost tih lekova u telesnim tenostima u toku terapijePostoje 2 vrste dilucionih metoda :Diluciona metoda u epruvetiAgar diluciona metoda

Diluciona metoda u epruvetiMetoda se zasniva na diluciji ( razreenju ) ispitivanog antibakterijskog leka tako da se sve manje koncentracije leka dodaju epruvetama sa odgovarajuom tenom podlogom.Svakoj epruveti se dodaje jednaka koliina tene kulture ispitivanog bakterijskog soja ( isti broj bakterija )Nakon inkubacije 18- 24 asa na 37 C rezultat se oitava na sledei nain:

Diluciona metoda u epruvetiUkoliko je bakterijski soj preiveo koncentraciju antibakterijskog leka u podlozi registruje se zamuenje podloge dok podloge u kojima je dolo do inhibicije razmnoavanja ili smrti ispitivane bakterije ostaju bistreEpruveta sa najmanjom koliinom antibiotika u kojoj nema zamuenja ( porasta bakterija ) najmanja je koncentracija antibakterijskog sredstva prema kome je ispitivana bakterija osetljiva

Diluciona metoda u epruvetiTa koncentracija se oznaava kao minimalna inhibitorna koncentracija ( MIK ) spreava razmnoavanje bakterije tj. deluje bakteriostatskiDa bi se odredila najmanja koncentracija antibakterijskog sredstva koja ubija organizam sadraj iz epruveta u kojima nema zamuenja presejava se na vrste podloge u Petrijevoj olji

Diluciona metoda u epruvetiNakon inkubacije od 18-24 asa na 37 C oitava se rezultat baktericidnog efekta: Ukoliko na podlozi nema porasta bakterijskih kolonija koncentracija antibiotika u epruveti iz koje je izvreno presejavanje je minimalna baktericidna koncentracija ( MBK )

Agar diluciona metodaPrincip ove metode je da se odreen koliine antibakterijskog leka inkorporiraju u vrstu podlogu I zasejavaju inokulumom odreene gustine ispitivanih bakterijaNa ovaj nain se na istoj podlozi testira ak 10-16 razliitih bakterijskih sojevaNaime, samo one bakterijske elije koje su rezistentne na koncentraciju leka koja je inkorporirana u agaru imae vidljiv rast

Difuzione metode su jednostavnije za izvoenje, bre I jeftinije ali su dilucione metode preciznije