CONTINUING THE LEGACY OF HPLC COLUMN PERFORMANCE · 2015. 6. 25. · CORTECS® 2.7µm Solid-Core 입자 컬럼은 모든 LC 분리기술에 서최고의분리능과피크용량으로

CONTINUING THE LEGACY OF

[ HPLC CoLumns ]

HPLC COLUMN PERFORMANCE

뛰어난 크로마토그래피 창조

Waters는 크로마토그래피로 명성을 얻었지만 직접

크로마토그래피를 만들지는 않습니다. 그 주인공은 바로

고객입니다. 고객의 실험실에서 혁신적인 사고를 통해

비즈니스 성장 동력이 될 크로마토그래피 분석이 탄생합니다.

고객의 성공 지표는 고객이 만드는 메서드와 결과에 의해

모니터링되며, 고객이 지금 선택하는 HPLC 컬럼은 미래의

성공을 뒷받침해야 합니다. Waters의 모든 최첨단 역상 및 HILIC

HPLC 컬럼은 성능과 혁신이 서로 연관되며 궁극적으로 성패를

결정짓는다는 사실을 잘 아는 과학자들로부터 각광받고

있습니다.

HPLC 컬럼

2

CORTECS

XBridge

XSelect

Atlantis

SunFire

Symmetry

XTerra

Waters Spherisorb

Nova-Pak

Resolve

Delta-Pak

µBondaPak/BondaPak

µPorasil/Porasil

3

CORTECS® 2.7µm Solid-Core 입자 컬럼은 모든 LC 분리기술에

서 최고의 분리능과 피크 용량으로 HPLC 기기 성능의 확장

을 지원하도록 최적화되었습니다. CORTECS 컬럼의 혁신적인

solid-core 기술과 본딩 케미스트리로 다음과 같은 효과를 거

둘 수 있습니다.

■■ 낮은 시스템 압력: 효율성 저하 없이 backpressure를 낮춥니다.

■■ 감도 향상: LC-MS 애플리케이션에서 더 우수한 S/N(signal-

to-noise) 성능을 실현합니다.

■■ 분석법 전환 간소화: 다양한 크로마토그래피 시스템과 함께 사용할 수 있습니다.

역상 및 HILIC상에서 CORTECS 2.7µm 컬럼을 사용하면 유연성

을 발휘하면서 다양한 화합물 유형을 신속히 분리할 수 있습

니다. 더 우수한 효율성을 자랑하는 CORTECS 2.7µm Solid-Core 컬럼은 전체 다공성 기질을 사용하는 컬럼보다 뾰족하고 좁

은 피크를 제공하며, 더욱 빨라진 유속으로 더 많은 양의 샘

플을 처리할 수 있습니다.

Backpressure 감소 CORTECS 컬럼은 시스템 압력을 낮추므로 효율이나 분리능의 손실 없이 일반적인 LC 기기를 사용하는 분석법을 사용할 수 있습니다. 뿐만 아니라 복잡한 샘플 혼합물에서 더 긴 컬럼을 사용하여 co-eluting 되는 피크의 분리능을 높일 수 있습니다.

유속 (mL/분)

2.1 x 50mm 0.17 0.35 0.52 0.69 0.87 1.043.0 x 50mm 0.35 0.71 1.06 1.41 1.77 2.124.6 x 50mm 0.83 1.66 2.49 3.32 4.15 4.99

유속 (mL/분)

2.1 x 50mm 0.17 0.35 0.52 0.69 0.87 1.043.0 x 50mm 0.35 0.71 1.06 1.41 1.77 2.124.6 x 50mm 0.83 1.66 2.49 3.32 4.15 4.99

CORTECS 2.7µm 컬럼의 효율 측면에서의 잇점

CORTECS 2.7µm 컬럼의 압력 측면에서의 잇점

(US

P)

최상급 효율성

CORTECS C18+, 2.7μm

C18, 2.5μm

A Solid-Core C18, 2.6μm

B Solid-Core C18, 2.7μm

(cm/ )

유속 (mL/분)

2.1 x 50mm 0.17 0.35 0.52 0.69 0.87 1.043.0 x 50mm 0.35 0.71 1.06 1.41 1.77 2.124.6 x 50mm 0.83 1.66 2.49 3.32 4.15 4.99

(psi

)

경쟁사의 2.6µm solid-core 입자 컬럼보다 25% 적은 배압

C18+, 2.7μmC18, 2.5μm

A Solid-Core C18, 2.6μm B Solid-Core C18, 2.7μm

(cm/ )

유속 (mL/분)

2.1 x 50mm 0.17 0.35 0.52 0.69 0.87 1.043.0 x 50mm 0.35 0.71 1.06 1.41 1.77 2.124.6 x 50mm 0.83 1.66 2.49 3.32 4.15 4.99

CORTECS 2.7µm 컬럼은 비슷한 크기의 전체 다공성 컬럼 및 solid-core 입자 컬럼보다 뛰어난 효율성을 자랑합니다. 데이터 조건—컬럼: 2.1 x 50mm, 이동상: 물/아세토니트릴(25/75, v/v), 컬럼 온도: 30˚C, 검출: UV@254nm, 주입 부피: 0.5µL, 화합물: acenaphthene (200µg/mL), Octanophenone (100µg/mL).

CORTECS 2.7µm 컬럼은 효율 저하 없이 운영 시스템 압력을 25% 줄입니다. 데이터 조건—컬럼: 2.1 x 50mm, 이동상: 물/아세토니트릴(25/75, v/v), 컬럼 온도: 30˚C, 검출: UV@254nm, 주입 부피: 0.5µL, 화합물: acenaphthene (200µg/mL), Octanophenone (100µg/mL).

모든 애플리케이션에서 이러한 상대적 분리가 가능한 것은 아닙니다.


OSi

O

OO

SiO

O

CORTECS C18+ C18 HILIC

리간드 유형 Trifunctional C18 Trifunctional C18없음

리간드 밀도 2.4µmol/m2 2.6µmol/m2 해당 없음

Carbon Load 5.7% 6.6% Unbonded

Endcap Style 전용 없음

USP Classification L1 L1 L3

pH 범위 2–8 2–8 1–5

낮은 pH에서 온도 제한 45˚C 45˚C 45˚C

높은 pH에서 온도 제한 45˚C 45˚C 45˚C

Pore Diameter 90Å 90Å 90Å

4

감도 향상 전하 표면 기술로 formic acid와 같은 낮은 이온 세기의 이동상을 사용할 경우 우수한 피크 모양과 우수한 화합물 로딩을 실현

합니다. C18+ 본딩 프로세스에서 영구적인 low level 표면 전하 기술을 사용하므로 LC-MS 애플리케이션에 불리하게 작용하는 이온 쌍 시약과 첨가제가 필요 없이 S/N 성능이 향상됩니다.

저농도의 불순물 분석에서 더 우수한 피크 모양

낮은 이온성의 염기성 항울제 imipramine 에 대한 HPLC-UV/MS 분석에서 낮은 레벨의 불순물이 확인됩니다. 낮은 이온 세기의 산성 이동상을 위해 제작된 CORTECS C18+, 2.7µm 컬럼을 사용하면 더 뾰족한 피크와 우수한 S/N을 얻을 수 있습니다.


LC 조건컬럼: 3.0 x 50mm이동상 A: 0.1% formic acid in water이동상 B: 0.1% formic acid in acetonitrileGradient: 25 ~ 35%B, 4.6분유속: 0.8mL/min컬럼 온도: 30 ℃검출: UV@254nm, ESI+ MS주입 부피: 10μL

화합물 Imipramine (0.5mg/mL) Impurity at 0.1% spike (0.5μg/mL)

%

0

100

1: 1 ES+ SIRTIC(0.1% )

3.68e7

1: 1 ES+ SIRTIC(0.1% )

3.68e7

0.4 0.6 0.8 1.0 1.2 1.4 1.6

(1) PDA Ch1 [email protected]: 1

0.1% PW13.4%: 0.089

S/N : 113S/N : 113

0.4 0.6 0.8 1.0 1.2 1.4 1.6

0.4 0.6 0.8 1.0 1.2 1.4 1.6 0.4 0.6 0.8 1.0 1.2 1.4 1.6

AU

0.0

5.0e-3

1.0e-2

1.5e-2

2.0e-2

2.5e-2

3.0e-2

3.5e-2

4.0e-2

(1) PDA Ch1 [email protected]: 8e-1

0.1% PW13.4%: 0.132

Solid-Core C18, 2.6μm : 3250psi

CORTECS C18+, 2.7μm : 2750psi

S/N 비율 60율% 증가

피크 넓이 35% 감소Imipramine Imipramine

5

www.waters.com/cortecs

간단한 분석법 전환 3가지 상을 선택함으로써 다양한 화합물 유형을 분리할 수 있습니다. CORTECS C18 및

C18+ 역상 흡착제가 크로마토그래피 사용자에게 산성, 염기성, 중성 화합물의 균형 잡힌 머무름 프로파일을 제공한다면, 본딩되지 않은 또 다른 선택성의 CORTECS HILIC상은 극성 분석 물질에서 더 우수한 머무름을 제공합니다. HPLC, UPLC®, UHPLC 플랫폼

에서 사용 가능한 입자 크기이므로, 어떤 분석법을 개발 하든 입자 크기, 컬럼 구성 또는 기기 제조업체의 제한 없이 간편하고 완벽하게 분석법을 전송할 수 있습니다.

5µm 전체 다공성 컬럼으로 개발된 분석법은 스케일하여 더 짧은 2.7µm 컬럼으로 전환할 수 있습니다. 2µm 미만의 UPLC 컬럼을 사용하여 효율성과 생산성을 더욱 높일 수 있습니다. 그러면 조직 내 또는 계약 파트너의 실험실로 이동할 때 분석법의 일관성 측면에서 더 유연성을 발휘할 수 있게 됩니다.

1

2

34

5

AU

0.00

0.01

0.02

AU

0.00

0.01

0.02

AU

0.00

0.01

0.02

12.0 14.0 16.0 18.0 20.0 22.0 24.0 26.0 28.0 30.0 분

3.5 4.0 4.5 5.0 5.5 6.0 6.5 7.0 7.5 8.0 분

AU

0.00

0.01

0.02

3.5 4.0 4.5 5.0 5.5 6.0 6.5 7.0 7.5 8.0 분

1.8 2.0 2.2 2.4 2.6 2.8 3.0 3.2 3.4 3.6 분

C18, 5μm, 4.6 x 150mm: 1.00mL/min : 8μL

: Alliance® HPLC

CORTECS C18, 2.7μm, 4.6 x 75mm: 1.85mL/min : 4μL

: Alliance® HPLC

CORTECS C18, 2.7μm, 4.6 x 75mm: 1.85mL/min : 4μL

: ACQUITY UPLC® H-Class

CORTECS UPLC C18,1.6μm, 2.1 x 50mm: 0.65mL/min : 0.6μL

: ACQUITY UPLC H-Class

원본 Method

4배 더 빨리,1/2의 용매로 2.7μm에

분석법

HPLC, UHPLC및 UPLC 시스템과

호환

9배 더 빨리,1/12의 용매로 1.6μm에

분석법

시간과 용매가 포함된 Abacavir USP 분석법 전환

화합물 1. Descycleopropylabacavir 2. Abacavir 3. 1R,4R trans-Abacavir 4. o-(4-Chloro-2,5-diaminopyimidnyl)-abacavir 5. o-t-Butyl-abacavir


LC 조건이동상 A: 0.1% trifluoroacetic acid in water이동상 B: 85% methanol in water컬럼 A: 전체 다공성 C18, 5μm, 4.6 x 150mm컬럼 B: CORTECS C18, 2.7μm, 4.6 x 75mm컬럼 C: CORTECS C18, 1.6μm, 2.1 x 50mm기하학적 스케일의 기울기(기울기 단계당 컬럼 부피가 동일함)컬럼 A: 5 ~ 30%B (23.6분), 30 ~ 90%B (14.8분)컬럼 B: 5 ~ 30%B (6.4분), 30 ~ 90%B (4.0분)컬럼 C: 5 ~ 30%B (2.5분), 30 ~ 90%B (1.6분)이동상 A: 0.1% trifluoroacetic acid in water이동상 B: 85% methanol in water

6

[FOLIO INSIDE HEADER]

7

* 예상치 또는 근사치입니다.

XBridge® HPLC 컬럼은 오로지 사용자의 생산성 극대화를 염두에 두고 설계되었습니다. 품질 관리 방법을 마련하거나 첨단 LC-MS 분석법을 개발하려는 어떤 경우에도 XBridge 컬럼은 다음과 같은 이점을 제공합니다.

■■ pH 안정성 향상: 컬럼 수명 증가

■■ 컬럼의 신뢰성 향상: 분석법의 완건성

■■ 입자 효율성 극대화: 탁월한 피크 모양과 피크 용량

10가지의 범용 흡착제와 애플리케이션 전용 흡착제 중에서 선택 가능하고 가장 다양한 입자 크기가 지원됩니다. 다른 어떤 HPLC 컬럼 제품군도 이와 같이 가장 까다로운 크로마토그래피 과제까지 능히 해결할 만한 도구를 제공하지 못합니다. 견고한 HPLC 분석법, 원활한 UPLC® 전환 능력 또는 제품 정제를 위한 분취용 스케일링이 필요한 어떤 경우에도 다재다능한 XBridge 컬럼이 진가를 발휘합니다.

XBridge C18 C8 Shield RP18 Phenyl HILIC Amide Peptide BEH C18, 130Å Peptide BEH BEH C18, 300Å Protein BEH C4, 300Å Oligo BEH C18

리간드 유형 Trifunctional C18 Trifunctional C8

Nomofunctional Embedded Polar

Trifunctional Phenyl-Hexyl

Unbonded BEH 입자 Amide Trifunctional C18 Trifunctional C18 Monofunctional C4 Trifunctional C18

리간드 밀도* 3.1µmol/m2 3.2µmol/m2 3.3µmol/m2 3.0µmol/m2 해당 없음 7.5µmol/m2 3.1µmol/m2 3.1µmol/m2 2.4µmol/m2 3.1µmol/m2

Carbon Load* 18% 13% 17% 15% Unbonded 12% 18% 12% 8% 18%

Endcap Style 전용 전용 TMS 전용 해당 없음 없음 전용 전용 없음 전용

USP Classification L1 L7 L1 L11 L3 - L1 L1 L26 L1

pH 범위 1–12 1–12 2–11 1–12 1–9 2–1 1–12 1–12 1–10 1–12

낮은 pH에서 온도 제한 80°C 60°C 50°C 80°C 45°C 90°C 80°C 80°C 80°C 80°C

높은 pH에서 온도 제한 60°C 60°C 45°C 60°C 45°C 90°C 60°C 60°C 50°C 60°C

Pore Diameter* 130Å 130Å 130Å 130Å 130Å 130Å 130Å 300Å 300Å 130Å

표면적* 185m2/g 185m2/g 185m2/g 185m2/g 185m2/g 185m2/g 185m2/g 90m2/g 90m2/g 185m2/g

입자 크기 2.5, 3.5, 5, 10µm 2.5, 3.5, 5, 10µm 2.5, 3.5, 5, 10µm 2.5, 3.5, 5µm 2.5, 3.5, 5µm 2.5, 3.5µm 3.5, 5, 10µm 3.5, 5, 10µm 3.5µm 2.5µm

OSi

O

O

OSiO

O

OSiO

O

OSi

CH Polar Group

3

CH3

OSi

O

O

OSiO

O

OSiO

O

OSi

CH Polar Group

3

CH3

OSi

O

O

OSiO

O

OSiO

O

OSi

CH Polar Group

3

CH3

OSi

O

O

OSiO

O

OSiO

O

OSi

CH Polar Group

3

CH3

경쟁사 컬럼 대비 높은 pH에서의 안정성 테스트

0 50 100 150 200 50mM TEA, pH 10, 50 °C

:

30

50

70

90

110

%

N5s

XBridge C18

XTerra® MS C18

Gemini™ C18

Luna® C18(2)

YMC™ Pro C18

Zorbax® Extend C18

높은 pH에서의 수명 연구에서 일정한 간격으로 크로마토그램을 실행하면, XBridge 컬럼은 pH 10 및 고온에서 300시간을 경과한 후에도 원래 효율성의 86%가 유지되고 피크 모양 또는 머무름 시간도 거의 변동이 없습니다.

pH 안정성 XBridge 컬럼은 화학적 안정성이 가장 우수한 크로마토그래피 흡착제를 사용하여 넓은 범위의

pH(1–12) 이동상의 모든 이점을 누릴 수 있도록 특별히 설계되었습니다. 합성 프로세스에서 특히 극한의 pH를 위한 화학적 안정성이 입자에 구현되었으며, 이는 일반 실리카 기반 본딩 프로세스에서 재현 불가한 수준입니다.

XBridge 컬럼의 화학적 안정성은 타의 추종을 불허합니다.

8

컬럼의 신뢰성 크로마토그래피 분석법 개발 비용의 상당 부분은 최종 메서

드의 엄격한 테스트 및 밸리데이션 때문에 발생합니다. Waters는 메서드의 재 밸리데이션이 어렵다는 사실을 잘 알고 있으

므로 흡착제 및 최종 컬럼 제품의 각각의 배치를 철저히 테스

트하여 컬럼의 재현성을 극대화하는 데 주력합니다. XBridge 컬럼을 선택한 고객은 지금 개발하는 분석법이 어세이의 전

체 기간 동안 반복 실현 가능함을 확신할 수 있습니다.

입자 효율성 BEH(Ethylene-Bridged Hybrid) 입자는 매우 정밀하게 실라놀 활성도를 제어할 수 있는 등 여러 면에서 일반적인 실리카 기반 입자보다 뛰어납니다. 실라놀 활성도를 제어함으로

써 불필요한 실라놀 상호 작용을 제어하고 줄여 피크 테일

링 현상을 개선시킬 수 있습니다.

XBridge 제품군의 USP Tailing Factors

1

2

3

C8 Zorbax®

SB-C18

Despramine

Amitriptyline

pH 3 pH 7

Nortriptyline

Amitriptyline

(T

f)

RP18 C18

XBridge C18 C8 Shield RP18 Phenyl HILIC Amide Peptide BEH C18, 130Å Peptide BEH BEH C18, 300Å Protein BEH C4, 300Å Oligo BEH C18

리간드 유형 Trifunctional C18 Trifunctional C8

Nomofunctional Embedded Polar

Trifunctional Phenyl-Hexyl

Unbonded BEH 입자 Amide Trifunctional C18 Trifunctional C18 Monofunctional C4 Trifunctional C18

리간드 밀도* 3.1µmol/m2 3.2µmol/m2 3.3µmol/m2 3.0µmol/m2 해당 없음 7.5µmol/m2 3.1µmol/m2 3.1µmol/m2 2.4µmol/m2 3.1µmol/m2

Carbon Load* 18% 13% 17% 15% Unbonded 12% 18% 12% 8% 18%

Endcap Style 전용 전용 TMS 전용 해당 없음 없음 전용 전용 없음 전용

USP Classification L1 L7 L1 L11 L3 - L1 L1 L26 L1

pH 범위 1–12 1–12 2–11 1–12 1–9 2–1 1–12 1–12 1–10 1–12

낮은 pH에서 온도 제한 80°C 60°C 50°C 80°C 45°C 90°C 80°C 80°C 80°C 80°C

높은 pH에서 온도 제한 60°C 60°C 45°C 60°C 45°C 90°C 60°C 60°C 50°C 60°C

Pore Diameter* 130Å 130Å 130Å 130Å 130Å 130Å 130Å 300Å 300Å 130Å

표면적* 185m2/g 185m2/g 185m2/g 185m2/g 185m2/g 185m2/g 185m2/g 90m2/g 90m2/g 185m2/g

입자 크기 2.5, 3.5, 5, 10µm 2.5, 3.5, 5, 10µm 2.5, 3.5, 5, 10µm 2.5, 3.5, 5µm 2.5, 3.5, 5µm 2.5, 3.5µm 3.5, 5, 10µm 3.5, 5, 10µm 3.5µm 2.5µm

O Si O

O

O

NH 2Link

er

OSi

O

O

OSiO

O

OSiO

O

OSi

CH Polar Group

3

CH3

OSi

O

O

OSiO

O

OSiO

O

OSi

CH Polar Group

3

CH3

OSi

O

O

OSiO

O

OSiO

O

OSi

CH Polar Group

3

CH3

OSi

CH 3

CH3

OSi

CH 3

C4

C4

H 9

H 9

CH3

뛰어난 입자 및 리간드 안정성과 우수한 크로마토그래피 효율성을 겸비한 XBridge 컬럼은 낮은 pH 및 중간 pH 조건에서 더없이 좋은 선택입니다.


9

www.waters.com/xbridge

LC 조건 시스템: ACQUITY UPLC와 TUV 검출기 컬럼: XBridge C18, 5μm, 2.1 x 150mm XBridge C18, 3.5μm, 2.1 x 100mm XBridge C18, 2.5μm, 2.1 x 75mm ACQUITY UPLC BEH C18, 1.7μm, 2.1 x 50mm 이동상 A: 0.1% formic acid in water이동상 B: 0.1% formic acid in acetonitrile유속: 위 크로마토그램 참조 주입 부피: 위 크로마토그램 참조

Isocratic: 95% A:5% B샘플 희석제: 3% acetonitrile in water (formic acid 0.1%)샘플 농도: 25µg/mL컬럼 온도: 38°C검출: UV @ 280nmSampling rate: 40 pts/sec Time constant: 0.05

0.0 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0

0.0 2.0 4.0 6.0 8.0 10.0

0.0 0.5 1.0 1.5 2.0 2.5 3.0 3.5 4.0

0.0 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0 1.2 1.4 1.6 1.8 2.0

1.1

1.7µm – 50mm주입: 1.7µL

유속: 0.6mL/min

5µm – 150mm 주입: 5.0µL

유속: 0.2mL/min

2.5µm – 75mm주입: 2.5µL

유속: 0.5mL/min

3.5µm – 100mm주입: 3.3µL

유속: 0.3mL/min

2.5µm 컬럼을 사용한 분석법 전환 모든 XBridge 및 XSelect® HPLC 컬럼은 확장된 성능[XP]의 2.5µm 컬럼 포맷으로

도 제공되므로 HPLC 기기에서 UPLC 기기로의 분석법 전환이 용이합니다. XP

2.5µm 컬럼은 기존 HPLC 기기의 성능을 향상시켜, 2µm 미만의 ACQUITY UPLC 기술을 사용하는 최고의 분리 효율로 한발짝 더 다가갈 수 있습니다.

효과적으로 분석 시간을 단축하고 분리능을 유지하기 위해 다양한 길이와 입자 크기의 컬럼을 사용했습니다.

확장 가능한 분리

10


11

OSi

FF

F

FF

O

OO

SiO

OO

SiO

OO

SiO

OO

SiO

OO

SiO

OO

Si

FF

F

FF

O

OO

SiCN


기본 입자 또는 기질이 분석 물질의 선택성을 크게 좌우합니다. 본딩된 리간드는 부차적인 영향을 미칩니다. 각각을 따로 사용할 경우 선택성의 변화가 두드러지지 않습니다. 그러나 기질과 리간드를 연계하면 분석 물질의 선택성을 높이는 최고의 도구가 됩니다. 이런 이유로

XSelect 컬럼 제품군은 HSS(High Strength Silica) 기술과

CSH™(Charged Surface Hybrid) 기술을 모두 갖추고 본딩된 리간드의 특별한 최적화를 지원합니다. 이를 통해 재현성과 우수한 선택성이 보장됩니다.

XSelect HPLC 컬럼은 가장 까다로운 분석 물질의

co-elution 되는 피크를 쉽게 분리할 수 있도록 가장 다양한 흡착제 선택 범위를 요구하는 분석법 개발자를 염두에 두고 설계되었습니다. XSelect 컬럼의 특징은 다음과 같습니다.

■■ 다양한 선택성: 분리가 어려운 피크를 더 효과적으로 분리

■■ 분리 및 정제를 위한 제품: 최고 수준의 분석 물질

mass 로딩

■■ 빠른 분석법 개발에 이상적: 분석법 개발에 드는 시간과 비용 절약

XSelect CSH C18

CSH Phenyl-Hexyl

CSH Fluoro-Phenyl

HSS T3 HSS C18 HSS C18 SB HSS PFP HSS CN

리간드 유형 Trifunctional C18

Trifunctional C6 phenyl

Trifunctional Propylflu-orophenyl

Trifunctional C18

Trifunctional C18

Trifunctional C18

Trifunctional Pentafluoro-

phenyl

Monofunctional Cyano-propyl

리간드 밀도* 2.3µmol/m2 2.3µmol/m2 2.3µmol/m2 1.6µmol/m2 3.2µmol/m2 1.6µmol/m2 3.2µmol/m2 2.0µmol/m2

Carbon Load* 15% 14% 10% 11% 15% 8% 7% 5%

Endcap Style 전용 전용 없음 전용 전용 없음 없음 없음

USP Classification L1 L11 L43 L1 L1 L1 L43 L10

pH 범위 1–11 1–11 1–8 2–8 1–8 2–8 2–8 2–8

낮은 pH에서 온도 제한 80˚C 80˚C 60˚C 45˚C 45˚C 45˚C 45˚C 45˚C

높은 pH에서 온도 제한 45˚C 45˚C 45˚C 45˚C 45˚C 45˚C 45˚C 45˚C

Pore Diameter* 130Å 130Å 130Å 100Å 100Å 100Å 100Å 100Å

표면적* 185m2/g 185m2/g 185m2/g 230m2/g 230m2/g 230m2/g 230m2/g 230m2/g

입자 크기 2.5, 3.5, 5, 10µm 2.5, 3.5, 5µm 2.5, 3.5, 5µm 2.5, 3.5, 5µm 2.5, 3.5, 5µm 2.5, 3.5, 5µm 2.5, 3.5, 5µm 2.5, 3.5, 5µm

12

XSelect CSH C18

CSH Phenyl-Hexyl

CSH Fluoro-Phenyl

HSS T3 HSS C18 HSS C18 SB HSS PFP HSS CN

리간드 유형 Trifunctional C18

Trifunctional C6 phenyl

Trifunctional Propylflu-orophenyl

Trifunctional C18

Trifunctional C18

Trifunctional C18

Trifunctional Pentafluoro-

phenyl

Monofunctional Cyano-propyl

리간드 밀도* 2.3µmol/m2 2.3µmol/m2 2.3µmol/m2 1.6µmol/m2 3.2µmol/m2 1.6µmol/m2 3.2µmol/m2 2.0µmol/m2

Carbon Load* 15% 14% 10% 11% 15% 8% 7% 5%

Endcap Style 전용 전용 없음 전용 전용 없음 없음 없음

USP Classification L1 L11 L43 L1 L1 L1 L43 L10

pH 범위 1–11 1–11 1–8 2–8 1–8 2–8 2–8 2–8

낮은 pH에서 온도 제한 80˚C 80˚C 60˚C 45˚C 45˚C 45˚C 45˚C 45˚C

높은 pH에서 온도 제한 45˚C 45˚C 45˚C 45˚C 45˚C 45˚C 45˚C 45˚C

Pore Diameter* 130Å 130Å 130Å 100Å 100Å 100Å 100Å 100Å

표면적* 185m2/g 185m2/g 185m2/g 230m2/g 230m2/g 230m2/g 230m2/g 230m2/g

입자 크기 2.5, 3.5, 5, 10µm 2.5, 3.5, 5µm 2.5, 3.5, 5µm 2.5, 3.5, 5µm 2.5, 3.5, 5µm 2.5, 3.5, 5µm 2.5, 3.5, 5µm 2.5, 3.5, 5µm


0.0 0.5 1.0 1.5 2.0 2.5 3.0 3.5

1

2

3 45,6 7

34

34 56 7

12

34 5

6 7

12

34

56

7

5,6

12

3 4

5,67

CSH C18

CSH Phenyl-Hexyl

CSH Fluoro-Phenyl

HSS CN

HSS PFP

HSS T3

HSS C18

HSS C18 SB

LC 조건 시스템: ACQUITY UPLC와 ACQUITY UPLC PDA 검출기컬럼: 2.1 x 50mm 이동상 A: 10mM ammonium formate, pH 3.0이동상 B: Methanol 유속: 0.4mL/min 주입 부피: 1μL샘플 희석제: Water컬럼 온도: 30°C

Gradient: 시간

(분)%A %B

0.00 70 303.00 15 853.50 15 853.51 70 304.50 70 30

검출: UV @ 260nmSampling rate: 20pts/sec Filter response: Normal

향상된 선택성 선택성과 머무름 특성은 분석법 개발자가 크로마토그래피적 현상을 조정하는 데 가장 효과적으로 사용할 수 있는 수단입니다. XSelect 제품군은 범용 분리를 위한 다양한 역상 C18 컬럼(예: CSH C18, HSS C18, HSS C18 SB)과 분석법 개발을 위한 극성 화합물의 우수한 머무름(T3)과 선택성 옵션

(phenyl-hexyl, fluoro-phenyl, cyano)을 제공하는 컬럼으로 구성되었습니다.

다양한 분석 물질 선택성을 제공하는 XSelect 컬럼

AU

0.00

0.02

0.04

0.06

0.08

(Im

ipra

min

e)(I

mip

ram

ine)

2.0%

1.0%

0.5% 0.1%

2.0% 1.0%

0.5% 0.1%

0.5mg/mL

0.0 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0 1.2 1.4 1.6 1.8 2.0

0.0 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0 1.2 1.4 1.6 1.8 2.0

ACQUITY UPLC CSH C18

AU

0.00

0.02

0.04

0.06

0.08

Kinetex® C18

LC 조건시스템: ACQUITY UPLC H-Class와 ACQUITY UPLC PDA 검출기컬럼: 2.1 x 50mm이동상 A: Water이동상 B: Acetonitrile 이동상 C: 2% formic acid in waterGradient: 시간

(분)유속

(mL/분) %A %B %C Curve

Initial 0.6 70 25 5 초기2.0 0.6 60 35 5 63.0 0.6 0 95 5 63.1 0.6 70 25 5 65.0 0.6 70 25 5 6

주입 부피: 5μL샘플 희석제: 물샘플 조건: Imipramine: 0.5mg/mL, amitryptyline: 표시된 대로(% of imipriamine)컬럼 온도: 40°C검출: UV @ 254nm세척 용매: 50/50 acetonitrile / water 퍼지 용매: 50/50 acetonitrile / water

분리 및 정제 화합물의 정제, 불순물 프로파일링, 용출 테스트와 같이 높은 질량 로딩을 요구하는 애플리케이션은 우수한 컬럼 성능을 필요로 합니다. 이러한 유형의 애플리케이션에서는 대칭성 피크 모양을 유지하지 못하면 컬럼 로딩이 제약을 받습니다. 그러면 주 화합물의 피크가 심각하게 넓어져 정제 과정에서 미량의 불순물을 제거하는 데 어려움을 겪곤 합니다. XSelect CSH 컬럼은 높은 로딩 조건에서 일관성 있게 뾰족한 피크를 제공하므로 크로마토그래피 사용자가 미량의 불순물 또는 대사산물을 분리할 수 있습니다. 즉 더 적은 시간과 흡착제로 더 우수한 로딩 용량을 얻습니다.

높은 질량 로딩에서 피크 모양 유지

염기 분석 물질의 혼합물에서 선택성의 차이를 확인했습니다. 화합물: [1] aminopyrazine, [2] pindolol, [3] quinine, [4] labetalol, [5] verapamil, [6] dilitazem, [7] amitriptyline.

XSelect 컬럼은 더 향상된 질량 로딩으로 가까운 피크의 불순물 또는 분해산물의 분리, 식별, 정량을 지원합니다.

13

분석법 개발 및 전환 숙련된 크로마토그래피 사용자는 분석법을 개발할 때 특별하게 선택적인 컬럼으로 개발한 분석법은 사용된 LC 시스템 플랫폼과 상관없이 다른 실험실로의 전환이 용이해야 한다는 사실을 잘 알고 있습니다. XSelect 컬럼은 분석법 개발을 염두에 두고 만들어진 제품으로 모든 최신 검출 모드를 완벽하게 지원합니다.

LC 조건시스템: ACQUITY UPLC와 ACQUITY UPLC PDA 검출기 컬럼: 2.1 x 50mm유속: 0.5mL/min 이동상: 15.4mM ammonium formate, pH 3.0이동상 B: acetonitrileGradient: 5 ~ 90% B linear, 5분주입 부피: 5μL샘플 희석제: 물컬럼 온도: 30°C검출: UV @ 254nmSampling rate: 20 pts/sec Filter response: Noraml

재현 및 확장 가능한 분리

3.5 0.0 0.5 1.0 1.5 2.0 2.5 3.0 4.0

1 2

3 4

5 6

7

8

9

10 XSelect CSH Fluoro-Phenyl, 5μm

XSelect CSH Fluoro-Phenyl, 3.5μm

ACQUITY UPLC CSH Fluoro-Phenyl, 1.7μm

3가지(1.7, 3.5, 5µm) 입자 크기의 9가지 서로 다른 CSH fluoro-phenyl 2.1 x 50mm 컬럼에서 기울기 분리의 재현성과 확장성

화합물 1. Thiourea2. Resorcinol3. Metoprolol4. 3-nitrophenol 5. 2-chlorobenzoic acid6. Amitriptyline7. Diethylphthalate8. Fenoprofen9. Diproplyphthalate10. Pyrenesulfocin acid

www.waters.com/xselect 14


15


Atlantis T3 dC18 HILIC 실리카

리간드 밀도* 1.6µmol/g 1.6µmol/g 해당 없음

Carbon Load* 14% 12% 해당 없음

Endcap Style 전용 전용 해당 없음


pH 범위 2–8 3–7 1-5



Pore Diameter* 100Å 100Å 100Å

표면적* 330m2/g 330m2/g 330m2/g

입자 크기 3, 5, 10µm 3, 5, 10µm 3, 5, 10µm

OSiO

O

Atlantis® HPLC 컬럼은 탁월한 성능, 다기능성, 극성 화합물에서 머무름을 제공할 뿐 아니라 다양한 분석 물질 혼합물에서 균형 잡힌 머무름을 실현합니다. 100% 수용성 이동상 지원 역상 분석법에서 극성 화합물의 머무름을 극대화하기 위해 정지상의 pore dewetting 및 hydrophobic collapse 에 대한 걱정 없이 높은 비율의 고수용성 이동상과 버퍼에서

Atlantis 역상 HPLC 컬럼을 사용할 수 있습니다.

낮은 pH 이동상을 사용할 때 컬럼 수명 연장 Atlantis 컬럼은 강한 산성 이동상을 사용할 경우 리간드의 가수분해를 방지함으로써 분석법의 효율성, 화합물의 머무름, 주요 분석 물질의 선택성을 보장합니다.

0

10

20

30

40

50

60

70

80

90

0.5% TFA(60°C)에 20시간 노출

Atlantis

T3

SunFire C 18

Pheno

menex

® Syn

ergi™

Hyd

ro-RP

Shis

eido C

apce

ll PAK

® AQ

Pheno

menex

® Synerg

i™ P

olar-R

P

Agilen

t Zorb

ax E

clips

e® Plus

Atlantis

dC 18

Pheno

menex

® Aqu

a

YMC Hyd

rosph

ere™

C18

GL Scie

nces

Inert

sil® O

DS-SP

YMC-Pac

k™ O

DS AQ™

이 테스트에서는 낮은 pH 및 높은 pH 온도 조건에 컬럼을 노출시켜 가수분해로 인한 리간드 손실 영향을 확인했습니다. Atantis T3 본딩은 극한의 이동상 조건에서 리간드 가수분해를 막아 분석 물질의 머무름을 유지합니다.

메틸

파라벤

% 머

무름

손실


16

이온 쌍 시약 없이 극성 화합물의 머무름 이온 쌍 시약을 사용하지 않으므로 검출 한도, 분석법의 재현성 및 견고성이 향상되는 반면 극한의 이동상 환경으로 인한 기기 유지 보수의 부담이 줄어듭니다.

LC 조건 컬럼: 4.6 x 150mm이동상: 10mM ammonium formate, pH 3.0유속: 3µm 에서 1.3mL/min주입 부피: 2.0µL컬럼 온도: 30°C검출: 254nmSampling rate: 10 pts/sec 시스템: Alliance 2695와 2487 듀얼 파장 흡광 검출기화합물

1. Thiourea2. 5-fluorocystine 3. Adenine4. Guanosine-5’-monophosphate5. Thymine

극성 화합물 머무름

Atlantis T3 컬럼과 경쟁사 브랜드 제품의 고극성 분석 물질 분리 비교. 과학자에게는 오로지 Atlantis 컬럼에서만 제공하는 일관성 있는 피크 모양과 머무름이 필수적입니다.

1 2 3 4

5

12

43,5

1

2

3,4

5

1 2

4

3

5

1 23

45

0 1 2 3 4 5 6 7 8

Atlantis T3

Agilent Zorbax® SB-AQ

Thermo Hypersil Gold AQ™

Phenomenex® Synergi™ Hydro-RP

Shiseido Capcell PAK® C18 AQ


www.waters.com/atlantis 17


SunFire C8 C18 Silica

리간드 밀도* 3.5µmol/g 3.5µmol/g 해당 없음

Carbon Load* 12% 16% 해당 없음

Endcap Style 전용 전용 해당 없음


pH 범위 2–8 2–8 2–8



Pore Diameter* 100Å 100Å 100Å

표면적* 340 m2/g 340 m2/g 340 m2/g

입자 크기 2.5, 3.5, 5, 10µm 2.5, 3.5, 10µm 2.5, 3.5, 10µm

OSiO

CH 3O

SiO

CH 3

Isocratic 분리이동상 A: 35% 20mM dipotassium phosphate/ 20mM monopotassium phosphate pH 7.0 이동상 B: 65% methanol파장: 254nm유속: 1.0mL/min주입 부피: 14µL컬럼 온도: 23˚C시스템: Alliance 2695와 2487 듀얼 파장 흡광 검출기화합물

1. Uracil 2. Propranolol 3. Butylparaben 4. Naphthalene

0

12

3

4

5 6

5 10 15 20 25 30 35 40

TUSP – 1.26

TUSP – 1.35

TUSP – 1.79

SunFire C18 4.6 x 150mm, 5µm

Phenomenex® Luna® C18(2) 4.6 x 150mm, 5µm

ACT® Ace® C18 4.6 x 150mm, 5µm


SunFire™ 컬럼은 최첨단 본딩 C18 및 C8 실리카 HPLC 컬럼의 기준을 제시합니다. 오랜 연구 및 제품 개발 경험의 산물인 SunFire 컬럼은 최상의 입자 및 본딩 전문성이 구현된 제품으로 업계 최고 수준의 크로마토그래피 성능을 제공합니다.

뛰어난 낮은 pH 안정성 SunFire 컬럼은 낮은 pH 이동상 조건에서 많은 실리카 기반

HPLC 컬럼 브랜드를 뛰어넘는 컬럼 수명을 자랑합니다. 높은 효율성 우수한 효율성을 얻기 위해서는 입자 합성, 패킹 기술, 하드웨어 엔지니어링의 삼박자가 갖춰져야 합니다.

SunFire Intelligent Speed™(IS™) 및 Optimum Bed Density(OBD™) 컬럼은 이 사실을 염두에 두고 개발되었습니다. 우수한 피크 모양 SunFire 컬럼은 오래 전부터 낮은 pH 및 중간 pH 범위(2-8)에서 산성, 중성, 염기성 화합물에 대한 우수한 분리능을 실현하기 위해 대칭 피크를 제공해 왔습니다.

SunFire 컬럼의 피크 모양 비교

18

www.waters.com/sunfire

0 5 10 15 20 25 30 35 40

112(2005)

118(2007)

130(2007)

134(2008)

SunFire 컬럼의 배치 간 재현성

이 뛰어난 재현성은 HPLC 컬럼 업계에서 가장 까다로운 사양을 유지하기 위해 최선을 다한 결과입니다. SunFire 컬럼은 고순도 원자재를 사용하여 통제된 제조 공정 및 컬럼 패킹 절차에 따라 생산하므로, 현재 과학자들은 가장 뛰어나고 재현성 우수한 HPLC 컬럼을 사용할 수 있습니다.

배치 간 재현성 Waters는 HPLC 업계에서 가장 엄격한 사양을 고수합니다. 통제된 제조 공정과 컬럼 패킹 절차를 통해 가장 뛰어나고 재현성 우수한 HPLC 컬럼을 공급합니다.

19

Symmetry Symmetry

C18

Symmetry C8

SymmetryPrep™ C18

SymmetryPrep C8

SymmetryShield RP18

SymmetryShield RP18

Symmetry300 C18

Symmetry300 C4

입자 크기 3.5, 5µm 3.5, 5µm 7µm 7µm 3.5µm 5µm 3.5µm 5µm

입자 모양 구형 구형 구형 구형 구형 구형 구형 구형

Pore Size 100Å 100Å 100Å 100Å 100Å 100Å 300Å 300Å

Carbon Load 12% 12% 19% 12% 15% 17% 8.5% 2.8%

End-capped Yes Yes Yes Yes Yes Yes Yes Yes

OSiO

CH 3O

SiO

CH 3O

Si

CH 3

CH 3

OSiO

CH 3

OSiO

CH 3OSiO

CH 3

Si

CH 3

Polar Group

CH 3

OSi

CH 3

Polar Group

CH 3

O

Symmetry® 컬럼은 고순도 실리카를 사

용하고 고도로 통제된 제조 공정을 거

쳐 HPLC 컬럼 성능의 표준을 능가하는 컬럼으로 탄생합니다. 다른 어떤 실리

카 기반 LC 컬럼도 Symmetry 제품군과 같은 컬럼 간 및 배치 간 재현성을 제공

할 수 없습니다. Symmetry 컬럼은 컬럼, 카트리지, 가드 포맷으로 공급됩니다.

■■ Symmetry C18 및 C8 컬럼: 재현성 극대화

■■ SymmetryShield™ RP18 및 RP8 컬럼: 우수한 피크 모양 제공

■■ Symmetry300™ C18 및 C4 컬럼: 우수한 펩타이드 및 단백질 회수율

0.0

1 2

3

4

1.50 3.0 4.5 6.00 7.5 9.0 10.5 12.0

배치 136(1998)

배치 142(1998)

배치 149(1999)

배치 151(2000)

배치 156(2001)

13.5 15.0 분

최고의 전년 대비 재현성

Symmetry 컬럼의 배치 간 재현성

LC 조건컬럼: Symmetry C18, 5µm, 4.6 x 150mm 이동상 A: Water이동상 B: Acetonitrile이동상 C: pH 3.75, 100mM ammonium formate in water 유속: 1.4mL/minIsocratic: 30% A, 60% B, 10% C

머무름 시간 RSD1. Terbinafile HCI 0.7% 2. Ibuprofen 0.8%3. Lovastatin 0.6%4. Simvastatin 0.7%

Symmetry 컬럼의 재현성 Symmetry HPLC 컬럼은 안정적이고 재현 가능한 성능을 보장

합니다. 극히 한정된 컬럼 사양 범위 덕분에 편차가 최소화되

므로 지금 사용하는 분석법이 향후에도 계속 사용될 것임을 확신할 수 있습니다.

주입 부피: 5.0µL온도: 30°C검출: UV @ 233nm

20

Symmetry Symmetry

C18

Symmetry C8

SymmetryPrep™ C18

SymmetryPrep C8

SymmetryShield RP18

SymmetryShield RP18

Symmetry300 C18

Symmetry300 C4

입자 크기 3.5, 5µm 3.5, 5µm 7µm 7µm 3.5µm 5µm 3.5µm 5µm

입자 모양 구형 구형 구형 구형 구형 구형 구형 구형

Pore Size 100Å 100Å 100Å 100Å 100Å 100Å 300Å 300Å

Carbon Load 12% 12% 19% 12% 15% 17% 8.5% 2.8%

End-capped Yes Yes Yes Yes Yes Yes Yes Yes

우수한 피크 모양을 제공하는 Symmetry 컬럼 SymmetryShield 컬럼은 Waters의 내장된 극성기(Embedded Polar

Group) 특허 기술을 사용하여 강염기성 분석 물질로부터 실

리카의 잔류 실라놀을 보호하면서 전반적으로 우수한 피크 모양을 제공합니다. 또한 내장된 극성기를 실리카 표면 근처

에 배치함으로써 표면 실라놀의 활성도를 더욱 낮춥니다. 이

를 통해 Symmetry C18 리간드와 다른 선택성과 머무름이 실현

됩니다.

최고의 전년 대비 재현성

Symmetry 컬럼의 배치 간 재현성

머무름 시간 RSD1. Terbinafile HCI 0.7% 2. Ibuprofen 0.8%3. Lovastatin 0.6%4. Simvastatin 0.7%

Embedded polar 기술로 크로마토그래피 피크 모양과 선택성이 향상됩니다.

특별한 선택성을 제공하는 SymmetryShield 컬럼

USP Tailing Factor = 1.2

SymmetryShield RP18

USP Tailing Factor = 1.9

Symmetry C18

0 5 10 15 20 25

12

3

4

5

7 6

0 5 10 15 20 25

1 2

3

4

56

7

AU

AU

30

30

LC 조건컬럼: SymmetryShield RP18, 5µm, 3.9 x 150mm Symmetry C18, 5µm, 3.9 x 150mm 이동상: 65% methanol, 35% 20mM monopotassium phosphate / dipotassium phosphate (pH 7) 유속: 1.0mL/min검출: UV @ 254nm컬럼 온도: 23°C

화합물 1. Uracil2. Propranolol3. Butylparaben4. Diprophylphthalate5. Naphthalene6. Amitriltyline7. Acenaphthene

주입 부피: 5.0µL온도: 30°C검출: UV @ 233nm

www.waters.com/symmetry 21

XTerra® MS, Shield RP, Phenyl 컬럼은 실리카 및 폴리머 본딩 상의 최고의 특성을 접목시킨 하이브리드 입자 특허 기술을 접목시킨 제품입니다. 하이브리드 입자 기술은 입자 합성 시 실라놀 3개 중 1개를 메틸기로 바꿉니다. 이는 초기 입자 합

성 단계에서만 가능하며, 이와 같이 추가된 메틸기는 기본 입

자의 근간에서 필수적인 역할을 합니다. 그 결과, 높은 pH 분

리에 사용 가능하고 염기성 화합물에서 우수한 로딩 및 피크 모양을 제공하는 기계적 강도를 지닌 입자가 만들어집니다.

실리카의 효율성과 폴리머의 안정성 역상 HPLC 분리의 대부분은 실리카 기반 정지상에서 일어납

니다. 실리카는 오래 전부터 우수한 효율성, 기계적 강도 등

을 자랑해 왔습니다. 그러나 실리카는 염기 및 한정된 pH 범

위에서 피크 모양 불량의 문제가 발생합니다. 크로마토그래

XTerra MS C18 RP18 RP8 Phenyl

입자 크기 2.5, 3.5, 5, 10µm

3.5, 5, 10µm

3.5, 5, 10µm 3.5, 5µm

입자 모양 구형 구형 구형 구형

Pore size 125Å 125Å 125Å 125Å

Carbon Load 15.5% 15.0% 13.5% 12.0%

End-capped Yes Yes Yes Yes

일반적인 실리카 제조 공정 본딩 및 엔드캡 실리카 입자

XTerra 제조 공정 표면 변경 이상의 기술 본딩 및 엔드캡 XTerra 입자

피 사용자들이 이러한 한계를 극복하기 위해 시도한 방법 중 하나는 폴리머 기반 정지상을 사용하는 것입니다. 그러나 폴

리머는 낮은 효율성과 기계적 강도 그리고 폴리머 기반 컬럼

에서 실리카 기반 컬럼으로 분석법을 전송할 때 예측 불가한 피크 용리 순서 때문에 실리카만큼 인기를 누리지 못했습 니다.

하이브리드 입자 기술(Hybrid Particle Technology)은 두 재료의 최고 장점을 취하고 각 재료의 단점을 극복하면서 이러한 제

약을 해결합니다. 그 결과, 우수한 기계적 강도와 효율성을 실현할 뿐 아니라 염기에서 우수한 피크 모양을 제공하고 분

석 크로마토그래피에서 정제 크로마토그래피로 손쉽게 확

장할 수 있는 완건한 재료가 탄생했습니다.

일반 실리카 대 XTerra 제조 공정 비교

Si

CH 3

Polar Group

CH 3

O Si

CH 3

Polar Group

CH 3

O OSi

C H 3

C H 2C H

C H 3O

n■■가장 우수하고 최고의 동질성을 자랑하는 범위

n■1/3 적은 실라놀

n■더 우수한 피크 모양

n■pH 범위 1-12

n 최저 표면 범위

n Poor Peak Shape

n pH 범위 2–8

비본딩XTerra입자

메틸폴리에톡시실란(MPEOS)

테트라에톡시실란(TEOS)

메틸트리에톡시실란(MTEOS)

비본딩 실리카 입자

폴리톡시실란(PEOS)

테트라에톡시실란(TEOS)


OH

SiO O

OO

SiO

OH

OSi

O

OH

OSi

O

OO

Si

OSi

O

OH

SiOH

O

Si

OO

Si

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O

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Si

Si

OH

O

O

SiOO

Si

Si

Si OH

OO

SiO

OSi OH

O

Si

Si

SiSiH3C

H3C CH3

H3C

H3C

H3C

CH3CH3

H3C

CH3

CH3

CH3

H3C

H3C

CH3

CH3

22

폴리머 pH에서의 실리카 분리

0

0.1

0.2

0.3

0.4

0.5

1

3

2

4

6

5

10 20

AU

6

54

3

2

1AU

0

0.4

0.8

1.2

10 20 분 분

LC 조건이동상 A: 20mM NH4OH, pH 10.7 이동상 B: acetonitrile유속: 3mL/min Gradient: 시간 프로파일 (분) %A %B 0.00 70 30 25.00 40 60 28.00 40 60주입 부피: 5µL 온도: 실온 검출: UV @ 220nm 기기: Waters 2690, 996 PDA

화합물 1. Codeine2. Yohimbine 3. Thebaine4. Cocaine5. Resperine6. Methadone

XTerra RP18: 4.6 x 150mm pH 10.7

폴리머 컬럼: 4.1 x 150mm pH 10.7

0

0.1

0.2

0.3

0.4

0.5

1

3

2

4

6

5

10 20

AU

6

54

3

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1AU

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1.2

10 20 분 분

www.waters.com/xterra 23

WATERS SPHERISORB 컬럼 Waters Spherisorb® 컬럼은 과학 문헌에서 가장 널리 참조되는 HPLC 컬럼입니다. Waters Spherisorb 컬럼이 사용된 분석의 초록이 2,000편 이상 발표되어 분석법 개발 프로세스에 도움이 될 매우 광범위한 검증된 분석법과 애플리케이션을 제공합니다.

Waters Spherisorb 컬럼은 다양한 입자 크기(3, 5, 10µm)와 본딩 상으로 제작되어 사용자의 크로마토그래피 요구 사항을 해결합니다. 뿐만 아니라 Waters Spherisorb 컬럼의 고품질 본딩 상으로 여러 다양하고 특별한 분리 선택성을 실현할 수 있

습니다. Waters Spherisorb 분석 컬럼은 업계 표준 Parker형 컬럼 엔드피팅을 갖추었습니다. Waters Spherisorb 카트리지 컬럼

은 재사용 가능한 Parker형 카트리지 엔드피팅이 필요합니다.

Spherisorb

리간드 유형 ODS2(C18) ODS1(C18) ODSB(C18) C8 C6 C1 NH2(Amino)

입자 크기 3, 5, 10μm 3, 5, 10μm 5μm 3, 5, 10μm 3, 5, 10μm 3, 5, 10μm 3, 5, 10μm

표면적 220m2/g 220m2/g 220m2/g 220m2/g 220m2/g 220m2/g 220m2/g

입자 모양 구형 구형 구형 구형 구형 구형 구형

Pore Size 80Å 80Å 80Å 80Å 80Å 80Å 80Å

Carbon Load 11.5% 6.2% 11.5% 7.75% 4.7% 2.15% 1.9%

Ligand Coverage 2.98µmol/m2 1.49µmol/m2 2.98µmol/m2 3.12µmol/m2 3.36µmol/m2 2.97µmol/m2 2.64µmol/m2

End-capped Yes No Yes Yes Yes No No

리간드 유형 Phenyl CN(Nitrile) OD/CN W(Silica) SCX SAX

입자 크기 3, 5, 10μm 3, 5, 10μm 5μm 3, 5, 10μm 5, 10μm 5, 10μm

표면적 220m2/g 220m2/g 220m2/g 220m2/g 220m2/g 220m2/g

입자 모양 구형 구형 구형 구형 구형 구형

Pore Size 80Å 80Å 80Å 80Å 80Å 80Å

Carbon Load 2.5% 3.1% 5% 해당 없음 4% 4%

Ligand Coverage 2.72µmol/m2 3.29µmol/m2 1.15µmol/m2 해당 없음 – –

End-Capped No No Yes 해당 없음 No No

www.waters.com/spherisorb

24

Spherisorb

리간드 유형 ODS2(C18) ODS1(C18) ODSB(C18) C8 C6 C1 NH2(Amino)

입자 크기 3, 5, 10μm 3, 5, 10μm 5μm 3, 5, 10μm 3, 5, 10μm 3, 5, 10μm 3, 5, 10μm

표면적 220m2/g 220m2/g 220m2/g 220m2/g 220m2/g 220m2/g 220m2/g



Carbon Load 11.5% 6.2% 11.5% 7.75% 4.7% 2.15% 1.9%

Ligand Coverage 2.98µmol/m2 1.49µmol/m2 2.98µmol/m2 3.12µmol/m2 3.36µmol/m2 2.97µmol/m2 2.64µmol/m2

End-capped Yes No Yes Yes Yes No No

리간드 유형 Phenyl CN(Nitrile) OD/CN W(Silica) SCX SAX

입자 크기 3, 5, 10μm 3, 5, 10μm 5μm 3, 5, 10μm 5, 10μm 5, 10μm

표면적 220m2/g 220m2/g 220m2/g 220m2/g 220m2/g 220m2/g

입자 모양 구형 구형 구형 구형 구형 구형

Pore Size 80Å 80Å 80Å 80Å 80Å 80Å

Carbon Load 2.5% 3.1% 5% 해당 없음 4% 4%

Ligand Coverage 2.72µmol/m2 3.29µmol/m2 1.15µmol/m2 해당 없음 – –

End-Capped No No Yes 해당 없음 No No

Nova-Pak

Chemistry C18 C8 Phenyl CN Silica Prep HR C18 Prep HR Silica

입자 크기 4µm 4µm 4µm 4µm 4µm 6µm 6µm



Carbon Load 7% 4% 5% 2% 해당 없음 7% 해당 없음

End-Capped Yes Yes Yes Yes 해당 없음 Yes 해당 없음

NOVA-PAK 컬럼 Nova-Pak® 컬럼의 본딩 상은 4µm 및 6µm 입자 크기로 제공되어 우수한 분리능을 제공할 뿐 아니라 더 빠르고 효율적인 크로마토그래피를 지원합니다. 더 작은 입자 크기와 짧은 컬럼 길이 덕분에 복잡한 혼합물에서 분리능을 유지하면서 용매 소비를 줄일 수 있습니다. 4µm 입자 크기 패킹의 분석 컬럼은 75, 150, 300mm 길이의 스틸 컬럼입니다. 재사용 가

능한 엔드 피팅과 함께 사용하는 스틸 카트리지 컬럼은 50, 100, 150, 250mm 길이로 제공됩니다. 분취(Semi-preparative)

Prep Nova-Pak HR 컬럼은 6µm 입자 크기로 패킹되었으며 탁월한 분리 가능 범위를 제공합니다. Prep Nova-Pak HR 컬럼의 고효율 패킹 덕분에 더 적은 양의 용매로 더 빨리 분리를 수행하고 더 농축된 분취물을 얻을 수 있습니다. 따라서 정제 크로마토그래피 비용이 절약됩니다. 모든 Nova-Pak 컬럼은 Waters의 cGMP 제조 시설에서 가장 엄격한 QC 절차에 따라 패

킹되므로 배치 간 재현성이 보장됩니다.

www.waters.com/nova-pak

25

RESOLVE 컬럼 비엔드캡 Resolve™ 패킹은 Waters의 다른 패킹재와 크게 다릅니다. 크로마토그래피 결과는 대개 잔류성이 더 강한 극성 화합물에서 가장 확실하게 드러납니다. 염기 화합물은 이동상 modifier 를 사용하여 크로마토그래피를 처리할 수 있습

니다. 이를테면 과도한 peak tailing을 줄이는 이온 쌍 시약이 있습니다. Resolve C18 및 실리카 컬럼은 고분리능이 필요한 애

플리케이션에 사용할 수 있습니다.

DELTA-PAK 컬럼 Delta-Pak™ 컬럼은 펩타이트, 단백질, 천연물의 분리에 안성맞춤이며, 큰 분자 분리에 최적화된 2가지 pore size로 제공됩

니다. Delta-Pak 컬럼은 일관성 있고 예측 가능한 방식으로 컬럼 포맷 간 확장을 지원하는 것으로 유명합니다. 즉 정제를 목적으로 하는 과학자는 밀리그램 ~ 그램 단위의 타겟 화합물을 분리할 수 있습니다. 고도로 안정된 Delta-Pak 본딩 실리

카는 고효율 5μm 및 15μm 입자 크기로 제공됩니다.

Resolve

리간드 유형 Silica C18 C8 CN

입자 크기 5, 10µm 5, 10µm 10µm 10µm


Pore Size 90Å 90Å 90Å 90Å

Carbon Load 10 % 10% 5% 3%

End-Capped 해당 없음 No No No

Delta-Pak

리간드 유형 C18 C18 C4 C4

입자 크기 5, 15μm 5, 15μm 5, 15μm 5, 15μm



Carbon Load 17% 7% 7% 3%

End-Capped Yes Yes Yes Yes

www.waters.com/delta-pak

www.waters.com/resolve

26

불규칙 입자 기술 최초의 HPLC 패킹재는 구형이 아닌, 불규칙한 형태의 입자로 구성되었습니다. 일반적으로 이러한 컬럼은 구형 입자로 패킹된 컬럼에 비해 기계적 안정성과 효율성이 떨어집니다. 하지만 이러한 한계에도 불구하고 이 흡착제를 사용해야 하

는 분석법이 많습니다. Waters는 대표적인 흡착제 및 본딩 소재 제조업체로서 40년 넘게 일관성과 신뢰성을 지닌 컬럼 성능을 선보여 왔으며, 앞으로도 이 브랜드를 지속적으로 지원할 것입니다.

µBONDAPAK/BONDAPAK 컬럼 분석법에서 μBondapak® 컬럼이 필요할 경우 μBondapak C18 패킹재가 들어 있는 컬럼은 단 하나밖에 없습니다. 많은 업체

가 “μBondapak 수준”의 선택성을 내세우지만, 어느 하나도 Waters의 가장 엄격한 QC 배치 테스트를 통과할 수 없습니

다. μBondapak 또는 BondaPak® 패킹재는 1973년부터 해마다 재현성을 입증해 왔으며, 이에 힘입어 μBondapak 컬럼은 가장 광범위하게 참조되는 HPLC 컬럼 브랜드 중 하나가 되었습니다.

µPORASIL/PORASIL 컬럼 μPorasil™ 및 Porasil™ 입자는 최초로 상용화된 LC 분리용 전체 다공성 패킹재 중 하나였습니다. μBondapak C18

의 역상 분리 기능과 달리 μPorasil 컬럼의 비본딩 실리카 기반 재료는 다양한 샘플 유형에서 순상 분리를 지원하도록 개발되었습니다.

µBondapak/Bondapak

리간드 유형 C18Phenyl CN NH2

입자 크기 10μm 10μm 10μm 10μm

입자 모양 불규칙 불규칙 불규칙 불규칙


Carbon Load 10% 8% 6% 3.5%

End-Capped Yes Yes Yes No

www.waters.com/bondapak

µPorasil/Porasil

리간드 유형 실리카

입자 크기 10, 15-20μm

입자 모양 불규칙

Pore Size 125Å

Carbon Load 해당 없음

End-Capped 해당 없음

www.waters.com/delta-pak

www.waters.com/resolve

www.waters.com/porasil

27

제품 이름 용도 크로마토그래피 모드 Systems 내용

Neutrals QCRM

3가지 중성 probe를 사용하여 이동상 pH와 상관없이 크로마토그래피 성능 정보를 제공합니다.

역상UV 검출기가 있는 모든 UPLC/HPLC 시스템

3가지 성분 혼합물:10μL/mL acetone, 0.25mg/mL naphthalene0.4mg/mL acenaphthene

In a 2mL solution of 50/50 acetonitrile/water. 실온에서 보관.

Reversed-Phase QCRM

Void marker 1개, 중성 probe 3개, 산성 probe 1개, 염기성 probe 2개를 사용하여 이동상 pH를 포함하는 크로마토그래피 성능 정보를 제공합니다.


7가지 성분 혼합물:0.016mg/mL uracil, 0.02mg/mL butylparaben, 0.06mg/mL naphthalene0.4mg/mL propranolol, 0.34mg/mL dipropylphthalate 0.2mg/mL acenaphthene, 0.1mg/mL amitriptyline

In a 2mL solution of 65/35 methanol/20mM K2HPO4 buffer pH 7. 실온에서 보관.

HILIC QCRM

Void marker 1개, 극성 중성 probe 1개, 극성 염기성 probe 1개를 사용하여 HILIC 모드의 이동상 pH를 포함하는 크로마토그래피 성능 정보를 제공합니다.

HILIC

UV 검출기가 있는 모든 UPLC/HPLC 시스템

4가지 성분 혼합물:0.0190mg/mL acenaphthene, 0.0037mg/mL thymine0.0037mg/mL acenine, 0.0077mg/mL cytosine

In a 1mL solution of 20/80 acetonitril/water. 도착 즉시 2–5°C에 냉장 보관.

QDa QCRM

최적의 농도에서 ESI(+-)의 광범위한 m/z를 수용하기 위해 8가지 성분 혼합물을 사용하여 크로마토그래피 및 quadrupole 질량 분석기 정보를 제공합니다. 이 용액은 크로마토그래피 성능 측정을 위해 1개의 중요한 쌍을 포함합니다.

역상 ACQUITY® QDa® 검출기가 있는 모든 UPLC/HPLC 시스템

9가지 성분 혼합물:100.0μg/mL acetaminophene, 45.0μg/mL caffeine 50.0μg/mL sulfaguanidine, 10.0μg/mL sulfadimethoxine 25.0μg/mL val-tyr-val, 6.0μg/mL verapamil, 6.0μg/mL terfenadin,25.0μg/mL leucine=enkephalin, 19.0μg/mL reserpine

In a 1mLsolution of 23.5% LC-MS acetonitrile, 76.5% LC-MS water 0.007% formic acid. 2–5°C에 냉장 보관.

Quad LCMS QCRM

최적의 농도에서 9가지 성분 혼합물을 사용하여 크로마토그래피 및 고성능 질량 분석기 정보를 제공합니다. 이 용액은 크로마토그래피 성능 측정을 위해 2개의 중요한 쌍을 포함합니다.

역상Quadropole MS가 있는 모든 UPLC/HPLC 시스템

8가지 성분 혼합물:100µg/mL acetaminophen, 50µg/mL sulfaguanidine10µg/mL sulfadimethoxine, 25µg/mL val,-tyr,-val6µg/mL verapamil, 6µg/mL terfenadine25μg/mL leucine-enkephalin, 8μg/mL reserpine

19/81 acetonitrile/water 0.008% formic acid. 도착 즉시 2–5°C에 냉장 보관.

LCMS QCRM


역상 고성능 MS가 있는 모든 UPLC/HPLC 시스템

9가지 성분 혼합물:10.0µg/mL acetaminophen, 1.5µg/mL caffeine5.0µg/mL sulfaguanidine, 1.0µg/mL sulfamethoxine,2.5µg/mL val-tyr-val, 0.2µg/mL verapamil0.2µg/mL terfenadine, 2.5µg/mL leucine-enkephalin0.6μg/mL reserpine

In a 500μLsolution of 5.7% acetonitrile/94.3% water. 도착 즉시 2–5°C에 냉장 보관.

QCRM(Quality Control Reference Material)은 어떤 크로마토그래피 시스템에서도 쉽고 확실하게 그 성능

을 모니터링할 수 있도록 엄선된 표준품의 혼합 물질로 구성되었습니다. QCRM을 사용하여 샘플 분석이 가능한 상태로 컬럼과 시스템을 준비할 수 있습니다. 또한 정기적으로 QCRM을 사용함

으로써 크로마토그래피 시스템의 벤치마킹을 수행하고 시간의 경과에 따른 성능 추이를 분석하여 더 수월하게 문제점을 미리 파악하고 신속하게 해결할 수 있습니다.

크로마토그래피 분석은 복잡하고 이동상 조성, 컬럼 유형, 검출 방법 등 여러 변수의 영향을 받으므로 Waters는 이러한 차이점을 염두에 두고 시스템 테스트용 QCRM 혼합 물질의 포뮬레이션을 마련했습니다.

기기와 검출기의 보정, 검증, 튜닝 관련 표준품에 대한 추가 정보와 이용 가능한 표준품 및 시약의 전체 목록은 asr.waters.com 에서 확인하십시오.

크로마토그래피 시스템이 올바르게 작동하고 있는지 어떻게 확인합니까?

28

http://asr.waters.com

제품 이름 용도 크로마토그래피 모드 Systems 내용

Neutrals QCRM

3가지 중성 probe를 사용하여 이동상 pH와 상관없이 크로마토그래피 성능 정보를 제공합니다.


3가지 성분 혼합물:10μL/mL acetone, 0.25mg/mL naphthalene0.4mg/mL acenaphthene

In a 2mL solution of 50/50 acetonitrile/water. 실온에서 보관.

Reversed-Phase QCRM

Void marker 1개, 중성 probe 3개, 산성 probe 1개, 염기성 probe 2개를 사용하여 이동상 pH를 포함하는 크로마토그래피 성능 정보를 제공합니다.


7가지 성분 혼합물:0.016mg/mL uracil, 0.02mg/mL butylparaben, 0.06mg/mL naphthalene0.4mg/mL propranolol, 0.34mg/mL dipropylphthalate 0.2mg/mL acenaphthene, 0.1mg/mL amitriptyline

In a 2mL solution of 65/35 methanol/20mM K2HPO4 buffer pH 7. 실온에서 보관.

HILIC QCRM

Void marker 1개, 극성 중성 probe 1개, 극성 염기성 probe 1개를 사용하여 HILIC 모드의 이동상 pH를 포함하는 크로마토그래피 성능 정보를 제공합니다.

HILIC

UV 검출기가 있는 모든 UPLC/HPLC 시스템

4가지 성분 혼합물:0.0190mg/mL acenaphthene, 0.0037mg/mL thymine0.0037mg/mL acenine, 0.0077mg/mL cytosine

In a 1mL solution of 20/80 acetonitril/water. 도착 즉시 2–5°C에 냉장 보관.

QDa QCRM

최적의 농도에서 ESI(+-)의 광범위한 m/z를 수용하기 위해 8가지 성분 혼합물을 사용하여 크로마토그래피 및 quadrupole 질량 분석기 정보를 제공합니다. 이 용액은 크로마토그래피 성능 측정을 위해 1개의 중요한 쌍을 포함합니다.

역상 ACQUITY® QDa® 검출기가 있는 모든 UPLC/HPLC 시스템

9가지 성분 혼합물:100.0μg/mL acetaminophene, 45.0μg/mL caffeine 50.0μg/mL sulfaguanidine, 10.0μg/mL sulfadimethoxine 25.0μg/mL val-tyr-val, 6.0μg/mL verapamil, 6.0μg/mL terfenadin,25.0μg/mL leucine=enkephalin, 19.0μg/mL reserpine

In a 1mLsolution of 23.5% LC-MS acetonitrile, 76.5% LC-MS water 0.007% formic acid. 2–5°C에 냉장 보관.

Quad LCMS QCRM


역상Quadropole MS가 있는 모든 UPLC/HPLC 시스템

8가지 성분 혼합물:100µg/mL acetaminophen, 50µg/mL sulfaguanidine10µg/mL sulfadimethoxine, 25µg/mL val,-tyr,-val6µg/mL verapamil, 6µg/mL terfenadine25μg/mL leucine-enkephalin, 8μg/mL reserpine

19/81 acetonitrile/water 0.008% formic acid. 도착 즉시 2–5°C에 냉장 보관.

LCMS QCRM


역상 고성능 MS가 있는 모든 UPLC/HPLC 시스템

9가지 성분 혼합물:10.0µg/mL acetaminophen, 1.5µg/mL caffeine5.0µg/mL sulfaguanidine, 1.0µg/mL sulfamethoxine,2.5µg/mL val-tyr-val, 0.2µg/mL verapamil0.2µg/mL terfenadine, 2.5µg/mL leucine-enkephalin0.6μg/mL reserpine

In a 500μLsolution of 5.7% acetonitrile/94.3% water. 도착 즉시 2–5°C에 냉장 보관.

온라인 도구

Waters 역상 컬럼 선택 차트

www.waters.com/selectivitychart

iPad®용 Waters 부품 선택기 및 선택성 차트

www.waters.com/apps

Waters 컬럼 어드바이저

www.waters.com/columnadvisor

이 브로셔에 소개된 모든 컬럼의 파트 넘버 목록은 waters.com/findmycolumn에서 확인하십시오.

추가 자료 설명 문헌 코드

QCRM(Quality Control Reference Material)과 기기 성능 벤치마킹 백서 720004535EN

Waters 중성 QCRM(Quality Control Reference Material)을 사용하여 일반적인 시스템 문제 해결 애플리케이션 노트 720004635EN

Waters 컬럼 및 분석 표준물/시약 선택 가이드 720002241EN

29

www.waters.com/hplccolumns

Waters, The Science of What’s Possible, CORTECS, UPLC, Alliance, ACQUITY UPLC, XBridge, XSelect, Atlantis, Symmetry, XTerra, Waters Spherisorb, Nova-Pak, BondaPak, µBondaPak, QDa, ACQUITY는 Waters Corporation의 등록 상표입니다. BEH Technology, CSH, SunFire, Intellignet Speed, IS, OBD, SymmetryShield, Symmetry300, µPorasil, Porasil, Resolve, Delta-Pak, SymmetryPrep은 Waters Corporation의 상표입니다. 기타 모든 상표는 해당 소유권자의 자산입니다.

©2014 Waters Corporation. Printed in the U.S.A.November 2014 720003995KO

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CONTINUING THE LEGACY OF HPLC COLUMN PERFORMANCE · 2015. 6. 25. · CORTECS® 2.7µm Solid-Core 입자 컬럼은 모든 LC 분리기술에 서최고의분리능과피크용량으로