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Facultad de Ciencias Veterinarias
-UNCPBA-
Consideraciones para la certificación de la
paratuberculosis bovina
Juan Martin Cisneros; Gustavo Casaro; Maria Julia Traversa.
Tandil, 2020.
Consideraciones para la certificación de la paratuberculosis bovina. Tesina de la Orientación Producción Bovinos de Carne y Leche, presentada como parte de los requisitos para optar al grado de Veterinario del estudiante: Cisneros Masari Juan Martin. Tutor: M. V. Gustavo Casaro Directora: Dra. Traversa María Julia
Evaluadora: M.V. Rita Olmos
Tandil,2020.
Agradecimientos
A María Julia Traversa y Gustavo Casaro.
A mi familia y amigos.
Dedicatoria
A mi Familia que siempre estuvo para sostenerme y acompañarme en los
momentos de incertidumbre.
A mis amigos, a LCB la otra familia que me acompaño con la alegría y el cariño
necesario para recorrer el camino universitario.
Resumen
La paratuberculosis bovina es una enfermedad infectocontagiosa crónica que afecta
a los bovinos y a otras especies animales domésticas y de vida silvestre. Es de gran
importancia económica por las pérdidas productivas que ocasiona y está causada
por Mycobacterium avium subespecie paratuberculosis (Map). Es importante
destacar que en la conferencia del consenso acerca de Map de 2017 se publicaron
evidencias fuertes que acreditan el nexo entre Map y la enfermedad de Crohn en
humanos. Debido a las dificultades para realizar el diagnóstico de la
paratuberculosis, dado que cursa con cuatro estadios diferentes en dos de los
cuales Map es indetectable, y la necesidad de certificación sanitaria para la
enfermedad se realizó una actualización bibliográfica con el objetivo de analizar la
posibilidad de certificar los rodeos bovinos respecto de la presencia o ausencia de
ésta. De las diferentes bibliografías, se revisó el código zoosanitario y luego de
utilizar el scopus y los índices para jerarquizar la búsqueda se presentaron las más
relevantes en orden cronológico en una matriz de datos. A partir de la revisión y
siendo tomado el concepto de certificación del código zoosanitario, se reconocieron
la existencia de pruebas de diagnóstico que permitirían la certificación sanitaria
siempre y cuando no estén transitando el estado uno o silente de la enfermedad,
siendo necesaria también la implementación de estrategias de manejo para evitar
la transmisión y diseminación de la enfermedad.
(Paratuberculosis, Crohn, certificación, diagnóstico, manejo)
Índice
1. Introducción ......................................................................................................... 1
2. Metodología ......................................................................................................... 8
3. Resultados ........................................................................................................ 10
3.2. Recomendaciones para los Programas de Control ..................................... 14
4. Conclusión ......................................................................................................... 16
5. Referencias ....................................................................................................... 17
5.1 Referencia general ....................................................................................... 17
5.2 Referencia de resultado. ........................................................................ 20
1
1. Introducción
La paratuberculosis o enfermedad de Johne’s es una enfermedad crónica de los
rumiantes producida por el Mycobacterium avium subespecie paratuberculosis
(Map), caracterizada por ocasionar enteritis granulomatosa difusa con compromiso
de los ganglios y vasos linfáticos asociados al colon y al íleon (Thorel et al., 1990).
Presenta distribución mundial y el Map está asociado a la enfermedad de Crohn en
los humanos, siendo considerada una zoonosis por algunos autores (Kuenstner et
al., 2017). Esta enfermedad se transmite por el ingreso de Map mediante la ruta
fecal-oral, por leche o calostro contaminados, y puede transmitirse verticalmente al
feto (Whittington, 2001). El ingreso del agente ocurre en los primeros meses de vida
y suele manifestar su presencia dos-cinco años post-infección, luego de un episodio
de estrés, como puede ser el parto en las vaquillonas. Los signos clínicos son la
emaciación, la diarrea progresiva, la disminución de la producción de leche y el
edema submandibular.
La enfermedad presenta cuatro estadios. El primer estadio o infección silente no
presenta signos clínicos, diseminación bacteriana ni anticuerpos circulantes
detectables. Se presenta con mayor frecuencia en terneros y bovinos de hasta dos
años de edad. El agente puede eliminarse por vía fecal, pero en cantidades por
debajo del umbral de detección, por lo tanto la detección se realiza en los tejidos
por cultivo o examen histopatológico.
El segundo estadio o infección subclínica, se caracteriza por la ausencia de signos
clínicos, puede diseminar escaso número de bacterias e inmunológicamente se
puede detectar mediante las pruebas de inmunidad celular y/o humoral.
En el tercer estadio o enfermedad clínica incipiente los animales manifiestan
pérdida de peso en forma gradual, incrementan el consumo de líquidos y tienen
diarrea acuosa e intermitente al principio. Durante este estadio se detectan las
bacterias y los anticuerpos circulantes. Si los animales en este estadio no se
eliminan del rodeo cursan mayoritariamente al cuarto estadio.
2
El cuarto estadio o enfermedad clínica avanzada se caracteriza por presencia de
diarrea acuosa, emaciación y edema submandibular. Los animales eliminan
abundante cantidad de Map al medio ambiente y generalmente tienen una elevada
cantidad de anticuerpos y escasa o nula respuesta inmune celular (Harris & Barleta,
2001).
Map pertenece al género Mycobaterium (Euzéby’s, 1998). Los requisitos mínimos
necesarios para la inclusión de una especie dentro de este género son la ácido-
alcohol resistencia y la presencia de ácidos micólicos en la estructura de la pared
microbiana (Lévy-Frébault & Portaels, 1992). Otra característica a considerar en la
clasificación es el tiempo requerido para la formación de colonias visibles en medio
sólido. Por esto, los miembros del género se clasifican comúnmente en dos grandes
grupos: micobacterias de “crecimiento rápido” y de “crecimiento lento”. En el caso
de las de rápido crecimiento la aparición de colonias visibles se produce en un
periodo aproximado de una semana y en las de crecimiento lento presentan
desarrollo posterior a una semana de cultivo. Otra manera de agrupar a las
micobacterias es en complejos de acuerdo a la capacidad que poseen para producir
tuberculosis. Los complejos de mayor interés para la especie bovina son el complejo
M. tuberculosis que incluye a M. tuberculosis y a M. bovis y el complejo M. avium
integrado por Map entre otras micobacterias.
Map es un patógeno intracelular facultativo, se diferencia por depender de la
micobactina, un agente sideróforoquelante del hierro para su desarrollo in vitro. La
temperatura óptima de desarrollo es 37° con un tiempo de generación mayor a 20
horas, es una bacteria de crecimiento lento que requiere varias semanas de
incubación antes de que sus colonias sean detectables en los medios de cultivo
(Chiodini et al., 1984; Chacón et al., 2004) y se suele esperar seis meses para
considerar a un cultivo como negativo.
Se puede cultivar en los medios Löwenstein-Jensen y Herrold con el agregado de
micobactina (Snow, 1970; Bernardelli, 2000). La identificación se basa: en el
crecimiento lento, la presencia de acúmulos de bacilos positivos a la coloración de
Ziehl-Neelsen (ZN), la dependencia de la micobactina y la detección de la secuencia
3
de inserción específicas mediante la reacción en cadena de la polimerasa (PCR)
(Bernardelli, 2000; Englund et al., 1999: Stabel,1997).
La supervivencia de Map en el medio ambiente es variable y depende de diversos
factores; está favorecida por: el pH ácido, la presencia de hierro y de materia
orgánica en el suelo. Bajo las condiciones descritas y al abrigo de los rayos solares
puede llegar a subsistir por un año o más en las heces, en el agua de los canales,
en las pasturas y en los silos. Map también posee la capacidad de entrar en estadio
de dormancia (Whittington et al., 2004; Fecteau et al., 2013).
Dado que Map puede resistir la pasteurización comercial, hasta la ultra
pasteurización a alta temperatura, es de importancia también su presencia en los
subproductos de origen animal, como la leche y sus derivados. Estudios realizados
en el Reino Unido confirmaron una detección de Map viable en 1,7% de leche
pasteurizada y 6,7% en leche cruda, en Estados Unidos fue detectado en 2,8% en
leche pasteurizada, en Argentina se realizó el aislamiento a partir de 70 muestras
donde el 2,86% fue positivo al aislamiento y a la tinción de ZN (Paolicchi y Cirone,
2012).
En la Argentina no existen planes de control contra la paratuberculosis, por lo que
no se encuentran datos oficiales sobre su prevalencia. Aun así, se estima que la
seroprevalencia en bovinos varía entre 7,2% y 19,6% en rodeos de cría en la
Cuenca del Salado, mientras que en Sampacho, se halla en 0,3% en animales y
5,3% en establecimientos (Gilardoni y Mundo S.L, 2008). En el resto del mundo la
prevalencia de la paratuberculosis varía dependiendo la región y el país. En Austria
la prevalencia aparente es del 19%, en Bélgica 0,87%, en Francia 3.3%, en
Alemania varía entre 1,35% y 24%, en Italia 2,4%-5,6%, en Holanda 2,5%, en
Noruega 7,7% y en Brasil entre 32% y 41% (EFSA, 2017).
4
Figura 1. Distribución mundial de paratuberculosis bovina para el primer semestre
del año 2019. Fuente: OIE, 2019 http://www.oie.int/es/
La paratuberculosis tiene consecuencias negativas en los infectados subclínicos y
especialmente en los animales clínicos, disminuyendo su vida productiva,
reduciendo la producción de leche (Lombard, 2011), produciendo pérdida de peso
y reduciendo los valores de faena (Hutchinson, 1996). Además, los bovinos
infectados con Map poseen el sistema inmune deprimido estando predispuestos a
la infección por otros agentes patógenos. La disminución de la producción de leche
ronda el 5,9% (McAloon et al., 2016 y la disminución de peso en faena es de un 5 a
un 15% dependiendo del estadio de infección. Animales con anticuerpos contra
Map y Map detectado en heces tienen una reducción del 17% en su valor de faena.
Si además presentan enteritis y edema la disminución puede llegar al 31% (Nielsen
et al., 2009).
La OIE, estableció que las pérdidas económicas por la paratuberculosis en Estados
Unidos son de 250 millones de dólares por año (Losinger, 2005). En Argentina se
realizó un trabajo en 1992 donde se estimaron pérdidas económicas relacionadas
con la paratuberculosis por un valor aproximado de 22 millones de dólares para la
zona de cría de la Cuenca del Salado y de 6,3 millones para las cuencas lecheras
5
de la provincia de Buenos Aires. En el trabajo se consideraron las pérdidas que
afectan a los productores, la industria y a los involucrados en la comercialización
(Paolicchi y Romano, 2010).
Cabe destacar la implicancia de la enfermedad en la salud pública ya que
publicaciones recientes concluyeron que existe relación causal entre la presencia
de Map con la Enfermedad de Crohn’s (EC). Map fue detectado en pacientes con
EC y también en personas con síndromes intestinales inflamatorios crónicos. El 78%
de la Temple University Map Conference concluyó que la acumulación de
información apoya la teoría de que el Map es una zoonosis en seres humanos
genéticamente predispuestos (Kuenstner, et al., 2017).
Para el diagnóstico de la paratuberculosis existen pruebas que detectan la
inmunidad humoral y celular.
Entre las pruebas que detectan la inmunidad humoral se destacan el enzimoinmuno
análisis (ELISA). La sensibilidad y especificidad del ELISA son variables y oscilan
entre 7% y 94% y 40% y 100%, respectivamente (Nielsen &Toft, 2008). Esta técnica
tiene como virtudes permitir el análisis de un mayor número de muestras a bajo
costo favoreciendo la automatización (Manning & Collins, 2001). Se utilizan 2 a 3
mL de sangre, se extrae el suero y la cantidad de Ac encontrados se compara con
controles (+) y (-), permitiendo la detección de los enfermos en el tercer y cuarto
estadio. Otras pruebas de inmunidad humoral son: la inmunodifusión en gel de agar
(AGID), la cual detecta complejos Ag-Ac precipitados (Morilla y Bautista, 1986) y la
prueba de fijación del complemento que se caracteriza por su capacidad para
detectar animales altamente infectados sin embargo no detecta todos los positivos
(Whitlock et al., 2000).
Dentro de las pruebas que detectan la inmunidad celular se encuentra la prueba de
hipersensibilidad de tipo retardada (HR). La prueba de HR detecta la respuesta
inmune celular que es previa a la inmunidad humoral por eso permite detectar
precozmente a los posibles positivos. La prueba de HR consiste en aplicar
intradérmicamente derivado proteico purificado (PPD) aviar o Johnina (la cual no se
produce en Argentina actualmente) y luego de las 72 h realizar la lectura del tamaño
del sitio inoculado. La OIE considera positivos a los incrementos de 2 mm en el
6
grosor de la piel del sitio de inyección; en cambio el SENASA sugiere que un
incremento mayor a los 3 mm puede ser considerado positivo (Bernardelli, 2000).
La prueba tiene valor limitado ya que su utilización en un rodeo indica la
sensibilización de los animales a Map o al complejo M. avium.Por ello se propone
que debería ser utilizada solamente en los comienzos de un programa de control de
la paratuberculosis basado en el diagnóstico y sacrificio de los reaccionantes
(Bernardelli, 2000).
Otros métodos de diagnóstico utilizados son:
Los basados en los hallazgos macroscópicos durante la inspección en una
necropsia. Durante la misma pueden registrarse plegamientos y engrosamientos de
la mucosa intestinal, si las lesiones son tempranas se observa el engrosamiento y
encadenamiento de vasos linfáticos y ganglios linfáticos prominentes y edematosos.
Este material de las lesiones se recoge y las muestras se fijan en formol al 10%
para realizar el examen histológico microscópico donde se observa la infiltración
con células epiteloides y células multinucleadas gigantes de la mucosa y
submucosa intestinal, de las placas de Peyer y del córtex de los ganglios linfáticos
mesentéricos. En estas estructuras mediante la coloración de ZN se encuentran
habitualmente, pero no invariablemente, bacilos ácido-resistentes en agregados o
en forma aislada (OIE, 2014).
En la bacterioscopía se examinan al microscopio frotis fecales o de mucosa
intestinal teñidos según el método de ZN. Aunque no permite la diferenciación con
otras especies de micobacterias, se puede diagnosticar la paratuberculosis de modo
preliminar si se encuentran agregados (tres o más microogranismos) de bacilos
ácido-resistentes.
El cultivo es considerado como la prueba de oro para el diagnóstico de
paratuberculosis, aun así no puede utilizarse como único método de diagnóstico, ya
que hay que confirmar por medio de PCR la identidad de la bacteria aislada (OIE,
2016). Detecta la mayoría de los animales en estadios avanzados y sólo a unos
pocos en estadios iniciales (Nielsen & Toft, 2008). La principal desventaja que
presenta este método es el desarrollo lento característico de Map. Tardao por lo
menos una o dos semanas en dar positivo, pero puede tardar más de 2 meses hasta
7
que el laboratorio confirme la ausencia de Map. Los medios de cultivo más utilizados
son el Herrold con yema de huevo y el Löwestein-Jensen, ambos con micobactina
J agregada (OIE, 2016). Se puede realizar un pool de muestras (cinco individuos
por pool) para reducir los costos del test (Collins & Manning, 2018). En cuanto a la
determinación de Map por PCR, la más usada está basada en la amplificación de la
secuencia de inserción IS900, aunque se determinó que hay micobacterias que
contienen una secuencia parecida y por lo tanto pueden obtenerse reacciones falsas
positivas (Englund y col. 2002). La identificación de nuevas secuencias de ADN que
se consideran exclusivas de Map (secuencias ISMav2, f57 y ISMap02) ofrece
ventajas para la identificación rápida de este microorganismo (Stabel & Bannantine,
2005). Esta técnica es empleada para el diagnóstico y control de la paratuberculosis.
Es oportuno mencionar que se ha demostrado que la sensibilidad de la prueba en
muestras de tejido es mayor que a partir de heces, dado que los tejidos presentan
menos inhibidores de la reacción (Garrido y col. 2000), y que es necesario aplicar
un método de extracción de ADN que proporcione una muestra de ADN de calidad
y pureza (Parka et al., 2014).
Dado que la paratuberculosis bovina es una enfermedad compleja en cuanto a la
presentación, diagnóstico y saneamiento es que la presente tesina tiene como
objetivo realizar una actualización bibliográfica acerca de la posibilidad de certificar
a los rodeos bovinos respecto de la presencia o ausencia de la misma.
8
2. Metodología
La actualización que relaciona a la enfermedad paratuberculosis y a los procesos
de certificación comenzó con la lectura de dos capítulos del Manual Terrestre de la
Organización Mundial de Sanidad Animal (OIE), el capítulo 3.1.15 Paratuberculosis
(OIE, 2014) y el capítulo 3.4.6 Tuberculosis (OIE, 2018a. También se realizó la
lectura de dos capítulos del Código Sanitario para los Animales Terrestres (OIE,
2018b), el capítulo 5.1 sobre Obligaciones Generales en Materia de Certificación y
el capítulo 8.11 que aborda la Infección por el complejo Mycobacterium tuberculosis
(OIE, 2018c). Este último capítulo fue útil como modelo ya que la tuberculosis bovina
posee similitudes con la paratuberculosis.
Luego de esta lectura se dio relevancia a dos citas bibliográficas de estos capítulos
de los autores Stabel J.R y Collins M.T. dado que ambos fueron incorporados al
buscador Scopus de donde se extrajo el índice H de cada autor siendo de 38 y 53,
respectivamente.
Además de Scopus se utilizaron dos buscadores, RIDAA de la Biblioteca Central de
la UNCPBA y Google Académico, y la página web Johnes.org.
Las palabras clave de búsqueda fueron ‘paratuberculosis’, ‘diagnóstico’ y
‘certificación’.
Los criterios para la selección de artículos estuvieron basados en:
• Idioma: se seleccionaron aquellos artículos en español e inglés.
• Fuente: se seleccionaron aquellos artículos procedentes de universidades,
instituciones gubernamentales, conferencias académicas y revistas
académicas.
• Lectura de título, autor, relevancia de éste dada por el índice H, así como del
artículo, tipo de página web y su origen.
Para la realización de la matriz de información se utilizó el criterio de cantidad de
cruces para relacionar las pruebas diagnósticas relevantes con las posibles
medidas de certificación. Por esto surgieron 3 categorías: recomendado (+++), de
posible utilización (++) e inadecuado (-). Determinadas pruebas fueron marcadas
con un asterisco (++*) ya que es posible su utilización pero presentan aplicación
9
limitada. Esta limitación está dada por: el costo, la confiabilidad, la lectura e
interpretación y la metodología de trabajo.
10
3. Resultados
De lo leído del Código Sanitario para los Animales Terrestres (OIE, 2018b y 2018c)
y del Manual Terrestre (OIE, 2014) se tomaron tres conceptos que se citan a
continuación:
1. La seguridad del comercio internacional de animales y productos de origen
animal depende, desde el punto de vista sanitario, de un conjunto de factores
que es preciso reunir para asegurar su fluidez, sin que ello implique riesgos
inaceptables para la salud pública y la sanidad animal (OIE, 2018).
2. La certificación de que un animal está libre de enfermedades, basada
exclusivamente en la ausencia de síntomas clínicos y en los antecedentes del
rebaño, es de limitado valor. Esto vale también para aquellas enfermedades
para las que no existe prueba específica de diagnóstico o si el valor de dicha
prueba es discutible (OIE, 2018).
3. las inspecciones “ante-mortem” y “post-mortem” de los animales son las bases
de los programas de vigilancia epidemiológica de la tuberculosis porque
permiten comprobar ausencia de enfermedad e infección (OIE, 2018).
Los datos relativos a las pruebas de diagnóstico y certificación de la
paratuberculosis, se presentan ordenados cronológicamente en la siguiente matriz
de información de la bibliografía consultada (Tabla 1).
11
Tabla 1. Matriz de información elaborada a partir de la lectura de las publicaciones
discriminadas en la sección denominada 5.2 Referencia de resultados.
Referencia Prueba
diagnóstica
descriptas
Certificación
libre del
rodeo
Certificación en
el
desplazamiento
de animales
Utilidad
como
herramienta
en un
programa de
control
Determinar
el estado
inmunitario
en animales
o
poblaciones
tras la
vacunación
Rossiter
C.A.,
Hansen D.,
Hutchinson
L.J. y
Withlock
R.H. (1998)
ELISA ++* ++ ++ +++
Cultivo de
materia
fecal
+++ +++ ++* -
Caldow G. y
Gunn
G.J.(2002)
ELISA ++* ++ ++ +++
E.F.S.A
Scientific
Panel on
Animal
Health and
Welfare.
(2004)
ELISA ++* ++ ++ +++
Cultivo de materia fecal.
+++ +++ ++* -
Collins et al.
(2005)
ELISA en
leche
++* ++ +++ ++
Gilardoni y
Mundo S.L.
(2008)
PCR ++ ++ ++ -
Morcella y
Paolicchi.
(2008)
PCR ++ ++ ++ -
ELISA ++* ++ ++ +++
12
Referencia Prueba
diagnóstica
descriptas
Certificació
n libre del
rodeo
Certificación
en el
desplazamient
o de animales
Utilidad
como
herramient
a en un
programa
de control
Determinar
el estado
inmunitario
en
animales o
poblacione
s tras la
vacunación
U.S
Departamen
t of
Agriculture.
(2010)
ELISA ++* ++ ++ +++
Cultivo de
materia fecal
+++ +++ ++* -
PCR ++ ++ ++ -
Ramírez
N.V.,
Rodríguez
B. y
Fernández
J.
(2011)
PCR ++ ++ ++ -
Cultivo de
materia fecal
+++ +++ ++* -
Hipersensibilida
d retardada (que
utiliza el DPP de
Johnina)
++* ++* ++ ++
Gupta et al.
(2012)
ELISA en leche ++* ++ +++ ++
Prieto.
(2013)
ELISA ++* ++ ++ +++
PCR ++ ++ ++ -
O.I.E.
(2014)
Cultivo de
materia fecal.
+++
+++
++*
-
ELISA ++* ++ ++ +++
Mon.
(2015)
ELISA ++* ++ ++ +++
Cultivo de
materia fecal
+++ +++ ++* -
PCR ++ ++ ++ -
Alvarado
Pinedo.
(2015)
Hipersensibilida
d retardada (que
utiliza el DPP
aviar)
++* ++* ++ +++
13
Desde 1998 a 2018, dentro de la bibliografía seleccionada con los criterios descritos
en la sección 2. Metodología, seis autores sostuvieron que el cultivo de materia
fecal es la prueba diagnóstica recomendada para realizar la certificación de rodeo
libre y la certificación para el desplazamiento de animales; también destacaron que
posee utilidad en los planes de control. Como desventajas plantearon que carece
de utilidad para determinar el estado inmunitario en animales y en poblaciones
posteriormente a la vacunación. La caracterización de cepas actuantes mediante
PCR es recomendada en 10 artículos con el mismo propósito y posee las mismas
limitantes que el cultivo.
Referencia Prueba
diagnóstica
descriptas
Certificació
n libre del
rodeo
Certificación
en el
desplazamient
o de animales
Utilidad
como
herramient
a en un
programa
de control
Determinar
el estado
inmunitario
en animales
o
poblacione
s tras la
vacunación
Eamens G.J.,
Marsh I.M., Plain K.M., Whittingto
n R.J. (2015)
ELISA ++* ++ ++ +++
Cultivo de
materia fecal
+++ +++ ++* -
PCR ++ ++ ++ -
Kennedy D.J. et al.
(2017)
ELISA ++* ++ ++ +++
Cultivo de
materia fecal
+++ +++ ++* -
PCR ++ ++ ++ -
Moyano. (2017)
ELISA ++* ++ ++ +++
PCR ++ ++ ++ -
EFSA Panel on Animal Health and
Welfare. (2017)
ELISA ++* ++ ++ +++
Hipersensibilida
d retardada (que
utiliza el DPP
aviar)
++* ++* ++ +++
Cultivo de
materia fecal
+++ +++ ++* -
PCR ++ ++ ++ -
14
La prueba de ELISA es recomendada para determinar el estado inmunitario en
animales o poblaciones tras la vacunación, es de posible utilización en la
certificación en el desplazamiento de animales y de utilidad en un plan de control,
en cambio presenta una aplicación limitada en la certificación de libre del rodeo
siendo así postulada por 12 autores.
Dos autores recomiendan al ELISA en leche con las mismas valoraciones que el
ELISA en suero con la diferencia que es recomendada como herramienta para la
vigilancia epidemiológica y de posible utilización para determinar el estado
inmunitario en animales o poblaciones tras la vacunación.
En contraparte la prueba de hipersensibilidad de tipo retardada es indicada por tres
autores como de posible utilización en un plan de control: para determinar el estado
inmunitario en animales o poblaciones tras la vacunación, de limitada aplicación
para la certificación de rodeos libres y para la certificación en el desplazamiento de
animales.
3.2. Recomendaciones para los Programas de Control
Conectando la información revisada previamente surgen algunas recomendaciones
si se están elaborando programas de control para la paratuberculosis.
La seguridad del comercio internacional de animales respecto de paratuberculosis
podría garantizarse dado que puede utilizarse para la certificación sanitaria la
combinación de pruebas de diagnóstico que permitan establecer el estado
inmunitario de los bovinos y la ausencia de Map. Para esta certificación es necesario
que las pruebas de diagnóstico se realicen en laboratorios acreditados y que los
programas de control establezcan medidas de bioseguridad acompañadas de
procedimientos de auditoría (Rossiter et al., 1998).
Es conveniente que los laboratorios acreditados consideren la siguiente
categorización de las pruebas:
• pruebas de screening: ELISA, muestra de materia fecal del ambiente y pool
de materia fecal para PCR.
15
• pruebas confirmatorias: cultivo de materia fecal y de tejido, PCR e histología
de tejido.
Disponer de esta batería de pruebas de diagnóstico permite que la certificación de
animales libres de paratuberculosis no sea sobre la base de la ausencia de signos
clínicos y permite auditar los antecedentes sanitarios del rebaño.
Como sucede con la certificación de tuberculosis también es necesario establecer
un programa de vigilancia epidemiológica capaz de reunir información para poder
demostrar la ausencia de la paratuberculosis. A raíz de la matriz elaborada una
herramienta útil para esta actividad es la prueba de ELISA, tanto en suero como en
leche y la prueba de hipersensibilidad de tipo retardada. El ELISA en leche posee
la ventajas operativa que es la fácil obtención de la muestra al momento del ordeñe.
Además la prueba mantiene sus características en cuanto a sensibilidad y
especificidad respecto del ELISA en suero (Sosa, 2018). La prueba de inmunidad
retardada puede utilizarse como método de diagnóstico complementario de la
paratuberculosis demostrando la capacidad de detectar animales enfermos con
infección silente e infección subclínica. Se recomienda de tres a cinco aplicaciones
con un intervalo entre aplicaciones de tres meses (Pinedo, 2015). El monitoreo de
lesiones por medio de la histopatología y el PCR en el frigorífico combinado con la
trazabilidad de los animales también resultaría de utilidad para complementar el
diagnóstico y obtener resultados más precisos.
16
4. Conclusión
Para la certificación de los rodeos bovinos, el desplazamiento y la comercialización
de los subproductos es importante tener en cuenta la patogénesis de la enfermedad
y el uso en conjunto de las pruebas diagnósticas. Siendo además de relevancia las
nuevas investigaciones realizadas que concluyen en la potencialidad zoonótica que
presenta el Map. Esta actualización bibliográfica permite reconocer la existencia de
pruebas de diagnóstico que permitirían la certificación sanitaria de los bovinos
siempre y cuando no estén transitando el estadio uno o silente de la enfermedad.
Para esto es necesario la educación y capacitación de los veterinarios para el uso
e interpretación de las pruebas diagnósticas disponibles, la implementación de las
estrategias de manejo necesarias para evitar la transmisión y diseminación de la
enfermedad y el asesoramiento que deben brindarle al productor.
17
5. Referencias
5.1 Referencia general
- Bernardelli A. Manual de Procedimiento Técnico Diagnóstico de Paratuberculosis.
SENASA 2000; 1-47. [47 pantallas]. Disponible en el URL:
http://www.aavld.org.ar/paratub.pdf. (25 de Octubre, 2018).
- Chacón O; Bermúdez L.E; Barletta R.G. Johne’sdisease, inflammatorybowel
disease, and Mycobacterium paratuberculosis. Annu Rev Microbiol 2004; 58: 329-
363.
-Chiodini R; van Kruiningen H.J; Merkal R.S. Ruminant paratuberculosis (Johne’s
disease) the current status and future prospects. Cornell Vet 1984; 74: 218-262.
-Collins M.T.; Manning E.J. Diagnosis [1 Pantalla]. Disponible en la URL:
https://johnes.org/dairy/diagnosis/ (25 de Octubre, 2018).
-Englund S.; Bölske G.; Johansson K.E., 2002. An IS900-like sequence found in a
Mycobacterium sp. other than M. avium subsp. paratuberculosis.FEMS
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- Euzéby’s J.P. List of procaryotic names with standing in nomenclature, 23 of March
1998; [54 pantallas].Disponible en el URL:
http://www.bacterio.net/mycobacterium.html. (25 de Octubre, 2018).
-Fecteau M.E; Hovingh E; Whitlock R.H; Sweeney R.W. Persistence of M.
avium subsp. Paratuberculosisin soil, crops, and ensiled feed following manure
spreading on infected dairy farms. Can Vet J 2013; 54: 1083-1085.
- Gilardoni y Mundo S.L, 2008. Paratuberculosis bovina. Infovet 13(102).
-Harris, N.B.; Barleta, R.G, 2001. M. avium subsp. paratuberculosis in Veterinary
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