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MANEJO DE LÍQUIDOS CORPORALES DESDE EL LABORATORIO DE HEMATOLOGÍA COMO APOYO DIAGNÓSTICO, DESDE EL PUNTO DE
VISTA MORFOLÓGICO.
Myriam Beatriz Amaya Bernal
Bacterióloga y laboratorista clínico
Licenciada en Ciencias Naturales
Docente posgrado hematooncología
Facultad de medicina
Universidad Militar Nueva Granada
Directora programa de Hematología Morfología Proasecal
Grupo de clasificación Importancia patológica
1. No inflamatorio Trastornos articulares degenerativos, artrosis.
2. Inflamatorio Trastornos inmunitarios, artritis reumatoide, lupus eritematoso, esclerodermia, polimiositis, espondilitis anquilosante, fiebre reumática y artritis de Lyme.
3. Séptico Infección microbiana
4. Hemorrágico Lesión traumática, tumores, hemofilia, otros trastornos de la coagulación.Dosis excesivas de anticoagulante.
Clasificación e importancia patológica de los trastornos articulares
Grupo de clasificación Hallazgos del laboratorio
1. No inflamatorio Líquido claro y amarilloBuena viscocidadLeucocitos < 1000/uLNeutrófilos < 30%
2. Inflamatorio Líquido turbio y amarilloEscasa viscocidadLeucocitos 2000-75000/uLNeutrofilos > 50%
(origen: inducido por cristales)
Liquido turbio o lechosoViscocidad bajaLeucocitos hasta 100 000/uLNeutrofilos < 70%Presencia de cristales
Hallazgos de laboratorio en los trastornos articulares
3. Septico Liquido turbio, amarillo verdosoViscosidad variableLeucocitos 50 000-100 000/uLNeutrofilos > 75%Tinción de Gram y cultivo positivos.
4. Hemorrágico Liquido turbio, rojoViscosidad bajaLeucocitos iguales a los de sangreNeutrófilos iguales a los de sangre
IMPORTANCIA CLÍNICA EN LA INTERPRETACIÓN MORFOLÓGICA DE LOS LIQUIDOS CORPORALES,
DESDE EL PUNTO DE VISTA HEMATOLÓGICO.
El estudio de los líquidos corporales representa ciertos desafíos para el laboratorio: Involucra varias especialidades y requiere conocimiento especializado de cada liquido corporal.
La hematología se ocupa de analizar las células, su aspecto y cristales encontrados y si fuera necesario identificar células anormales correlacionándolas con los hallazgos de patología.
Brindan al médico información crítica para obtener un diagnostico presuntivo.
Líquidos corporales
Líquido Cefalorraquídeo
(LCR)
Serosos Sinoviales (articulaciones)
Se clasifican en
Pleural Pericárdico Peritoneal
Analizar:
– Color– Aspecto– Recuento Celular– Fórmula Diferencial
Recuentos celulares en líquidos corporales
1 Tubo. Pruebas químicas y serológicas. T. ambiente
2 Tubo. Pruebas microbiológicas. T. ambiente
3 Tubo. Recuento celular con EDTA. Refrigerar.
4 Tubo. Citometría de flujo, con el aditivo.
PROCESAR INMEDIATAMENTE.
Muestras
• Estabilizan los leucocitos y los antígenos leucocitarios durante un máximo de 10 días en muestra de sangre.
• Las muestras de liquido requieren ser analizadas en un plazo de 24-48 horas por la degradación natural
Ventajas:
• Más tiempo para llevar a cabo las pruebas, más flexibilidad en el laboratorio.
• Tiempo para transportar las muestras desde/hasta lugares lejanos.
• Reducción de la necesidad de muestreos repetidos.
Transfix
Procedimiento debe ser rápida no más de 30 minutos (leucocitos y globulos rojos se lisan).
• Si el líquido es limpido el recuento se realiza sin diluir• Si es turbio o sanguinolento se realiza dilución.• Su diluyente es solución salina isotónica.• Para recuento de glóbulos blancos solución de Turk.
Con excepción del liquido sinovial.
Procedimiento
Recolección de la muestra
En el caso del líquido sinovial, el procedimiento se conoce como artrocentesis.
Para el análisis hematológico se debe emplear tubo con anticoagulante EDTA y heparinizados, estériles
y al vacío para análisis microbiológico.Mundt LA, Shanahan K. Graff Analisis de orina y de los líquidos corporales. 2ª edición. México: Medica Panamericana; 2011. p 221
Requiere muestra relativamente pequeña. Rápida. No requiere mucha destreza. Brinda buena recuperación celular, sin
destrucción. Recomendación: Agregar una gota de
albúmina del 20 % al 30 %, produce mayor rendimiento celular y menos distorsión, las distorsiones comprenden vacuolas citoplasmáticas, hendiduras nucleares, nucléolos prominentes y agrupaciones celulares que se asemejan a procesos malignos.
Se forma una monocapa y el líquido se absorbe por el papel de filtro secante y produce un área concentrada de células.
Citocentrifugación
Mundt LA, Shanahan K. Graff Analisis de orina y de los líquidos corporales. 2ª edición. México: Medica Panamericana; 2011. p 223
Citospin
Rodríguez S,Villamarín S Líquido Cefalorraquídeo Ed Cont Lab Clín 2006;9:49-56
Si no se dispone de citocentrifuga, se centrífuga en lámina plana, el líquido corporal a 2.500 rpm durante 5 minutos en una centrífuga normal. Se tiñe con colorante de Wright.
Citospin casero
Beatriz amaya
Citospin casero
ASPECTO MACROSCÓPICO
PRUEBA Cristalino Opalescente Sanguinolento Turbio Xantocromic
Leucocitos
Diluciòn para el recuento células
0-200/mm3
Ninguna
200+/mm3
1:2 en solución de Turk
Elevados
1:2 en solución de Turk
Elevados
1:2 en solución de Turk
Desconocido
1:2 en solución de Turk
No. de cuadrados a contar en el hemocitómetro
9 9 9 9 o 4 9 o 4
Pautas para el recuento de líquidos
Eritrocitos
Dil. recuento celular
0-400/mm3
Ninguna
400+/mm3
Ninguno
Desconocido
Ninguno
Desconocido
Ninguno
6000+/mm3
1:200 con s.s. fisiolog.
No. de cuadrados de la camara
9 9 9 4 5
Pautas para el recuento de líquidos
ASPECTO MACROSCÓPICO
PRUEBA Cristalino Sanguinolento
Opalescente Turbio Xantocrómico
Células contadas x factor de
profundidad x factor de dilución
___________________________________ Área contada /mm3
Fórmula para calcular el No. de células
• Leucocitos/mm3: células contadas x factor de dilución x 10
9 cuadrados
• Eritrocitos/mm3: células contadas x factor de dilución x 10
número de cuadrados contados
Fórmula para leucocitos
Mundt LA, Shanahan K. Graff Analisis de orina y de los líquidos corporales. 2ª edición. México: Medica Panamericana; 2011. p 221
LÍQUIDO CEFALORRAQUÍDEO
LÍQUIDO CEFALORRAQUÍDEO
Reconocido por primera vez por Cotugno en 1764.
El LCR circula entre las dos membranas: Aracnoides y Piamadre.
Mundt LA, Shanahan K. Graff Analisis de orina y de los líquidos corporales. 2ª edición. México: Medica Panamericana; 2011. p 230
Cantidad:
Adultos = 90 a 150ml Recién nacidos = 10 a 60 ml
Principales funciones:
Lubrica el cerebro y la médula espinal Actua como amortiguador, como medio nutriente
circulante Canal excretor del SNC Metabolismo del SNC
LCR
Cristalino Incoloro (turbio indica la presencia de leucocitos) Sanguinolento (indica la presencia de eritrocitos
>de 400/mm3. Por punción traumática o hemorragía del SNC)
Nota:
Si el primer tubo es sanguinolento y los demás hay aclaramiento punción traumática.
Si todos los tubos son sanguinolentos es una hemorragia subaracnoidea
Cuando el sobrenadante tiene tinte amarillo se denomina xantocromia.
Examén macroscópico
Mundt LA, Shanahan K. Graff Analisis de orina y de los líquidos corporales. 2ª edición. México: Medica Panamericana; 2011. p 230
Claro
Informar
Opaco, Sanguinolento, Amarillo
Centrifugar e informarAspecto del sobrenadante
(claro,hemolizado,xantocrómico)
LCRASPECTO MACROSCÓPICO
RECUENTOS CELULARESClaro
Rto sin diluirOpaco o sanguinolento
Diluir
Solución de Turk(1:2) o UnopettePara leucocitos (1:20)
Unopette para eritrocitos (1:200)
Informar leucocitos Informar eritrocitosInformar frescos y
crenadosPORTAOBJETO CITOCENTRIFUGADO
Análisis de los líquidos corporales
Importancia clínica del aspecto en el L.C.R.
• Convencional
Cámara de Neubauer
• Contadores celulares electrónicos
• Citometría de flujo
Métodos para recuentos celulares
Recuento normal:
• Leucocitos de 0 a 5/mm3
• Eritrocitos 0/mm3
• Si es sanguinolento se determina un leucocito
por 500 a 900 eritrocitos.
Todos los recuentos deben realizarsen de
inmediato, máximo en una hora, debido a que en
este tiempo se produce la lisis celular, a las dos
horas hay 40 % de leucocitos lisados.
De no procesar las muestras de inmediato se
recomienda refrigerar las muestras para
conservarlas.
Recuentos celulares
Strasinger SK, Di Lorenzo MS. Analisis de orina y de los líquidos corporales. 5ª edición. Buenos aires: Medica Panamericana; 2010. p 183
Cálculo de células/uL
Conteo de leucocitos
Para realizar corrección por contaminación de sangre, se
debe tener en cuenta que por cada 500 a 900 eritrocitos hay
1 leucocito.
Strasinger SK, Di Lorenzo MS. Analisis de orina y de los líquidos corporales. 5ª edición. Buenos aires: Medica Panamericana; 2010. p 183 184
PMN
MONOCITOS
LINFOCITOS
Recuento absoluto (cel/uL) por citometría de flujo en LCR
Cortesia Dr. Alejandro
Se realiza coloración de Wright rápida: 40 segundos colorante de Wright
1 min buffer
Para observar:
Incremento número de leucocitos: Pleocitosis con mayor porcentaje de neutrófilos en caso de meningitis bacteriana.
Se pueden ver bacterias intracelular o extracelular (con una semana de antibiótico, el diferencial vuelve a ser normal: linfocitos y monocitos)
Los linfocitos en meningitis viral, están aumentados pueden ser reactivos, se debe diferenciar de las fases leucémicas.
Las fases más tardías de las meningitis virales se observa más monocitos y macrófagos que linfocitos.
Se puede observar eritrofagocitosis.
LCR anormales
Strasinger SK, Di Lorenzo MS. Analisis de orina y de los líquidos corporales. 5ª edición. Buenos aires: Medica Panamericana; 2010. p 186
Células predominantes en el líquido cefalorraquídeo
Tipo de célula Importancia clínica principal Hallazgos microscópicos
Linfocitos NormalMeningitis viral, tuberculosa y micótica.Esclerosis múltiple
Pueden encontrarse todos los estadios de desarrollo
Neutrófilos Meningitis bacterianaCasos tempranos de meningitis viral, tuberculosa y micótica.Hemorragia cerebral
Los gránulos pueden ser menos prominentes que en sangreLas células se desintegran con rapidez
Monocitos NormalMeningitis viral, tuberculosa y micótica.Esclerosis múltiple
Se encuentran mezclados con linfocitos
Macrófagos Eritrocitos en el liquido espinalMedios de contraste
Pueden contener eritrocitos fagocitados que aparecen como vacuolas vacías o células fantasma, granulos de hemosiderina y cristales de hematoidina
Formas blásticas Leucemia aguda Linfoblastos, mieloblastos o monoblastos
Células de linfoma Linfomas diseminados Se asemejan a linfocitos con núcleos hendidos
Plasmocitos Esclerosis múltipleReacciones linfocíticas
Se observan formas tradicionales y clásicas
Células de epéndimo y fusiformes Procedimientos diagnósticos Se observan en grupos con núcleos y paredes celulares bien diferenciadas
Células malignas Carcinomas metástasicosCarcinoma primario del sistema nervioso central.
Se observan en grupos con fusión de los bordes celulares y los núcleos
• Células normales:
- Linfocitos y monocitos (en los adultos la célula predominante son linfocitos (70% linfocitos, 30% monocitos), en niños se invierte.
• Células anormales:
-Los neutrófilos no son normales en LCR-Los recuentos aumentados de neutrófilos indican bacterias.-Recuentos aumentados de linfocitos: Meningitis viral-Eosinófilos y basófilos como reacción contra cuerpos extraños (valvulas) o reacción alérgica.-Cuando se observan normoblastos punción inadecuada, contaminación con médula ósea.
Recuento diferencial
What can I expect?
• More than 5 cells/mm3 (90-100% of the cases);
• Presence of neutrophils (0-100% of the cases). Neutrophils are seen in CSF when Koch bacillus antigens reach the CSF space, after release from a tuberculous granuloma or abscess. Immediately after this migration to the CSF, neutrophils percentage in the cytological profile may reach almost 100%. Thereafter, the immune system rapidly implements.
Bacteriana Viral Tuberculosa Micótica
Recuento de leucocitos
Elevado Elevado Elevado Elevado
Neutrófilos presentes
Linfocitos presentes
Linfocitos y monocitos presentes
Linfocitos y monocitos presentes
Pruebas adicionales
Coloración de Gram y pruebas de antígenos bacterianos positivas
Prueba de tinta china positiva con Cryptococcus neoformansPrueba inmunológica positiva para C. neoformans
Principales resultados de laboratorio para el diagnóstico diferencial de meningitis
Linfocitos y monocitos (100x) Linfocitos (100x)
Células normales en LCR
Células normales en LCR con distorsión por
la citocentrifugación
Neutrófilos vacuolados (100x)Neutrófilos con núcleos
picnóticos (100x)
Células normales en LCR con distorsión por la citocentrifugación
Eosinófilos LCR con distorsión por la citocentrifugación
• Células del epéndimo y plexo coroideo normales. Deben diferenciarse de células malignas.
• Pueden verse siderofagos.• En pacientes con LLA o LMA monocítica pueden infiltrar SNC.• Pacientes con mieloma múltiple se puede encontrar plasmocitos.• Células metastásicas de otros tumores sólidos como cánceres de
mama, pulmón, tracto gastrointestinal y melanoma.
Análisis diferencial
Células de plexo coroideo. Bordes bien delimitados (100x)
Células del epéndimo(100x)
Células normales en LCR de recubrimiento de tejido
• LCR sanguinolento• Dímero D positivo• Observar: Macrófagos, eritrofagocitosis , gránulos de
hemosiderina.
Cuándo sospechar de una hemorragia intracraneal
Macrófagos aumentados (100x) Macrófagos con eritrofagocitosis(100x)
Macrófagos con pigmento de hemosiderina (100x)
Células anormales en LCR
Aumento de linfocitos y monocitos (100x)
Contaminación con M.O. Normoblastos (100x)
Células anormales hematopoyéticas en LCR
Incidencia en niños:• LMA 5- 30% m4 y M5• LLA 3 a 5%
-Principalmente son los de células T y los B maduros.
-Recientes estudios reportan papel importante de la IL15 para células precursores B
Infiltración a SNC:
Presencia de blastos
>5 %
>10%Williams, Mark T.S. et al. (2014) Interleukin-15 enhances cellular proliferation and up-regulates CNS homing molecules in pre-B acute lymphoblastic leukemia. Blood , 123 (20). pp. 3116-3127. ISSN 0006-4971 (doi:10.1182/blood-2013-05-499970 )
Compromiso del SNC por leucemias
Linfoblastos (100x)
Monoblastos (100x)Mieloblastos (100x)
Linfoblastos en recaida (100x)
Células malignas de origen hemático
Células de Burkitt (100x) Células de linfoma (100x)
Células malignas de origen hemático
Glioblastomas
Células tumorales metastásicas (100x)
Células tumorales (100x)
Células malignas de origen no hemático
LÍQUIDOS SEROSOS
Actúan como lubricante entre las membranas del órgano y la bolsa en que se aloja (están en pequeñas cantidades).
Líquidos serosos
Pleural Pericárdico Peritoneal
Se clasifican en
• Es un ultrafiltrado del plasma.• La producción y la reabsorción están sujetas a
las presiones coloidales e hidrostáticas.• Se reabsorbe por los capilares linfáticos.
Formación del líquido seroso
Tubos para análisis citobioquímico de líquidos serosos
La acumulación de una cantidad grande de líquido en una cavidad se denomina derrame.
Se subdividen en trasudados y exudados• Los trasudados indican desarrollo morbido (ICC).• Los exudados indican trastornos con infecciones
bacterianas, virales, procesos malignos, embolia pulmonar y LES sistémico.
Trasudado y Exudado
Strasinger SK, Di Lorenzo MS. Analisis de orina y de los líquidos corporales. 5ª edición. Buenos aires: Medica Panamericana; 2010. p 228
1. Aumento de la presión hidrostática capilar
Insuficiencia cardiaca congestiva
Retención de sal y de liquido.
2. Disminución de la presión oncótica
Sindromé nefrótico
Cirrosis hepática
Desnutrición
Enteropatía perdedora de proteínas
3. Aumento de la permeabilidad capilar
Infecciones microbianas
Inflamaciones de las membranas
Procesos malignos
4. Obstrucción linfática
Tumores malignos, linfomas
Infección en inflamación
Lesión del conducto torácico
Causas patológicas de derrames
• El recuento celular debe hacerse preferiblemente en cámara de Neubauer, debido a que los equipos pueden sufrir daños por los detritos celulares.
• Para lisar los glóbulos rojos se emplea soluciones de Oxalato de amonio: 1:100 o de ácido acético 1:20
Recuento
Trasudado y Exudado
Se dividen en:
-Exudado: Se producen por situaciones que afectan directamente las membranas de una cavidad particular como las infecciones y los procesos malignos. Se examinan Alteraciones microbiológicas y citológicas.
-Trasudado: Se producen en respuesta al cambio de la presión hidrostática, creada por insufiencia cárdiaca congestiva o la hipoproteinemia asociada con síndrome nefrótico.
Strasinger SK, Di Lorenzo MS. Analisis de orina y de los líquidos corporales. 5ª edición. Buenos aires: Medica Panamericana; 2010. p 229
Diferenciación por el laboratorio de trasudados y exudados
Trasudado Exudado
Aspecto Claro
Recuento de leucocitos
< 1 000/ uL > 1 000/ uL
Coagulación espontánea
No Posible
ASPECTO MACROSCOPICO (COLOR, CLARIDAD)
RECUENTOS CELULARES
PORTAOBJETO CITOCENTRIFUGADO
Leucocitos
Solución de Turk (1:2)O Unopette para leucocitos (1:20)
Eritrocitos
Directo o Unopette paraEritrocitos (1:200)
Realizar coloración de Wrigth a fin de observar claramente la morfología celular.
Leucocitos segmentados
Busqueda de Bacterias
Realizar coloración de Gram enEl portaobjeto citocentrifugado
Informe de los resultados
Tumor
Análisis celular
Normal
Linfocito:Histiocitos y monocitosCélulas mesoteliales
LÍQUIDOS SEROSOS(PLEURAL, PERITONEAL, PERICÁRDICO, ASCÍTICO)
Características Trasudados Exudados
Gravedad específica <1.016 >1.016
Proteínas <3.0g/dL >3.0g/dL
Lactato deshidrogenasa <200Ul >200Ul
Leucocitos <1.000/mm3 (el monocito es la células predominante)
>1.000/mm3
Relación de proteínas del líquido: suero
<0.5 >0.5
Relación de lactato deshidrogenasa del líquido: suero
<0.6 >0.6
Color Claro del color de la paja
Turbio y amarillo, ámbar o macroscopicamente sanguinolento en la observación microscopica.
Volumen Muy grande
Otros marcadores inmunológicos
Se obtiene de la cavidad pleural, ubicada entre la membrana pleural
parietal que reviste la pared del torax y la membrana pleural visceral
que recubre los pulmones. Pueden dar lugar a trasudado o exudado.
El volumen normal del liquido en la cavidad es de 4,0 - 12,7 mL
LÍQUIDO PLEURAL
Strasinger SK, Di Lorenzo MS. Analisis de orina y de los líquidos corporales. 5ª edición. Buenos aires: Medica Panamericana; 2010. p 230
Diferenciación entre derrame pleural quiloso y seudoquiloso
Derrame quiloso Derrame seudoquiloso
Causa ¨Pérdida del conducto torácico Inflamación crónica
Aspecto Lechoso y blanco Lechoso tinte verde
Leucocitos Sobre todo linfocitos Células mixtas
Cristales Ausentes Presentes
Strasinger SK, Di Lorenzo MS. Analisis de orina y de los líquidos corporales. 5ª edición. Buenos aires: Medica Panamericana; 2010. p 234
Proteína y deshidrogenasa láctica (DL) en liquido pleural
Relación líquido: suero de proteínas > 0,5Relación líquido: suero de DL > 0,6DL en líquido > 2/3 del valor superior normal en suero
Cualquier positivono si
Trasudado Exudado
GlucosaADALeucocitos y diferencialAmilasapH
Algoritmo para la composición del líquido pleural
ADA>40U/L Lecucocitos y diferencialLinfocitosis
Tuberculosis
>300/uLGranulocitosis
Infección bacteriana
Aspecto
Sanguinolento Lechoso
Hematocrito Triglicéridos
LÍQUIDO NORMAL:
• Color amarillo claro• Aspecto límpido
LÍQUIDOS ANORMALES:
• Líquido turbio indica proceso infeccioso.• Líquido sanguinolento resultado de un traumatismo o proceso
maligno.• Líquido lechoso indica derrame quiloso en la cavidad toráxica.
Examen macroscópico
Correlación entre el aspecto del líquido pleural y las enfermedades
Strasinger SK, Di Lorenzo MS. Analisis de orina y de los líquidos corporales. 5ª edición. Buenos aires: Medica Panamericana; 2010. p 230
Examen microscópico
Strasinger SK, Di Lorenzo MS. Analisis de orina y de los líquidos corporales. 5ª edición. Buenos aires: Medica Panamericana; 2010. p 231
Recuento celular en derrame pleural
CÉLULAS NORMALES:
• Linfocitos • Monohistiocitos (macrofagos). Pueden ser
siderofagos.• Células mesoteliales (son revestimiento de las
cavidades corporales, aspecto huevo frito o citoplasma basofilo)
CÉLULAS AUMENTADAS (ANORMALES???)
• Se observan Eosinófilos más del 10%• puede asociarse con traumatismo que produce la
presencia de aire o sangre (neumotórax y hemotórax). si están aumentados son por reacciones alérgicas.
• Basófilos
• Los neutrofilos investigar bacterias • De lupus LE• Células malignas• Células mesoteliales
Análisis diferencial
Strasinger SK, Di Lorenzo MS. Analisis de orina y de los líquidos corporales. 5ª edición. Buenos aires: Medica Panamericana; 2010. p 231- 232
Células mesoteliales (100x)
Células LE (100x)
Líquido pleural (100x)
Células normales de líquido pleural
Células mesoteliales (100x)
Células reactivas en proceso infeccioso de líquido pleural
Líquido pleural con células mesoteliales(100x)
Líquido pleural con células mesoteliales(100x)
Plasmocitos en paciente con tuberculosis (100x)
Características de las células malignas1. Aumento de la relación núcleo citoplasma (N:C).Cuanto mayor es la relación, menor es la diferenciación de las células.2. Cromatina nuclear distribuida en forma irregular3. Variación en el tamaño y la forma de los núcleos4. Aumento del número y el tamaño de los nucléolos5. Nucléolos hipercrómicos6. Células gigantes y multinucleadas7. Amoldamiento nuclear8. Amoldamiento citoplasmático (comunidad de bordes)9. Citoplasma vacuolado, producción de mucina10. Agrupación celular, fagocitosis
Líquido pleural con células
tumorales(100x)
Células tumorales en líquido pleural
Líquido pleural con adenocarcinoma (100x)
Líquido pleural con adenocarcinoma (100x)
Células pobremente diferenciadas de adenocarcinoma (100x) Células de carcinoma metastásico(100x)
Proporciona un método para obtención de células e información microbiológica del tracto respiratorio inferior. La infusión de solución fisiológica por el broncoscopio se mezcla con los contenidos bronquiales y se aspira para el examen celular y el cultivo.
Es útil en pacientes inmunocomprometidos en enfermedad pulmonar intersticial y sospecha de hemorragia alveolar.
Se ha constituido como prueba diagnostica para Pneumocystis carinii.
Lavado broncoalveolar
• Color y claridad de la muestra.• Recuento celular y diferencial• Recuento de leucocitos se realiza mediante dilución
unopette.
Examen macroscópico
Células del epitelio bronquial (100x)
Presencia de macrófagos y linfocitos normales (100x)
Células normales de lavado broncoalveolar
Lavado broncoalveolar (100x) Lavado broncoalveolar con eosinófilos (100x)
Lavado broncoalveolar con pigmento (100x)
Lavado broncoalveolar con células mesoteliales (100x)
Células normales de lavado broncoalveolar
Lavado broncoalveolar con Pnemocystis carinii (100x)
Células de infección en lavado broncoalveolar
Recuento diferencialCélulas Significado clínico
Macrófagos (56-80 %) Contiene material fagocitado
Linfocitos (1 al 15 % ) Enfermedad pulmonar intersticialReacciones a fármacos.Linfomas pulmonares.Infecciones no bacterianas.
Neutrófilos: Valor normal menos del 3%
Elevados: Tabaquismo , bronconeumonía, exposición a toxinas y daño alveolar difuso
Eosinófilos 1-2 % Aumentados: asma, enfermedad pulmonar inducida por fármacos, infecciones parasitarias, micobacterianas o micóticas, neumonía eosinofílica
Eritrocitos: Hemorragia alveolar durante las 1ras 24 h si están fagocitados sugieren hemorragia alveolar en 48 h.Macrófagos de hemosiderina incidan hemorragia alveolar en menos de 48 h.
Relación CD4 CD8 normal Tuberculosis.Procesos malignos
Relación CD4 CD8 elevada Sarcoidosis o trastorno del tejido conectivo.
Relación CD4 CD8 baja Neumonitis por hipersensibilidad a la silicosis o fármacos.Infección por HIV
Células cilíndricas ciliadas del epitelio bronquial (4 al 17 %)
Pneumocystis carinii, Toxoplasma gondii, Strongiloides, Histoplasma capsulatum entre otros
Epitelio bronquial Células de epitelio plano
• Sólo una cantidad pequeña de 10- 50 ml de líquido se encuentra en membranas serosas pericárdicas.
• Los derrames son el resultado de cambios en la permeabilidad debido a una infección (pericarditis), procesos malignos y traumatismos productores de exudado.
• Los resultados del trasudado pueden ser producto de trastornos metabólicos como uremia, hipotiridismo y autoinmunitarios.
LÍQUIDO PERICÁRDICO
Los derrames macroscópicos sanguinolentos se asocian con perforación cardiaca accidental y uso incorrecto de anticoagulantes.
Examen macroscópico
Strasinger SK, Di Lorenzo MS. Analisis de orina y de los líquidos corporales. 5ª edición. Buenos aires: Medica Panamericana; 2010. p 235
Derrame pericárdico maligno (100x)
Biochemical analysis of pericardial effusions.LD – lactate dehydrogenase; SEAG – serum effusion albumin gradient; ADA - adenosine deaminase.
Liquido pericárdico con infección (100x)
Líquido pericárdico con infección
• La acumulación de líquido entre las membranas del peritoneo, se conoce como ascitis.
• Suele denominarse como liquido ascítico en lugar de liquido peritoneal.
• Los trastornos hepáticos como la cirrosis son causa frecuente de trasudados, mientras la peritonitis y las enfermedades malignas son más frecuentes de líquidos exudativos.
• El lavado peritoneal es una prueba sensible para la detección de hemorragia intrabdominal en caso de traumatismo cerrados.
LÍQUIDO PERITONEAL
Examen macroscópico
Strasinger SK, Di Lorenzo MS. Analisis de orina y de los líquidos corporales. 5ª edición. Buenos aires: Medica Panamericana; 2010. p 236
• Es importante tener en cuenta que recuentos de eritrocitos mayores a 100.000 /ul , son indicativos de traumatismo cerrado.
• Los recuentos de leucocitos normales son menores de 350 cel/ul y aumenta en peritonitis bacteriana y cirrosis.
• Si son más de 250 celulas y más del 50 % son neutrofilos: infección bacteriana; linfocitos: tuberculosis.
Examen microscópico
Células de origen infeccioso
Células de levadura (100x) Liquido peritoneal con bacterias en neutrófilos(100x)
Liquido peritoneal con células vacuoladas (100x)
Liquido peritoneal con macrófago (100x)
Células de origen infeccioso
Células malignas líquido peritoneal
Células de carcinoma (100x)Adenocarcinoma de próstata
(100x)
Células de carcinoma(100x) Liquido peritoneal infiltración linfoide(100x)
Liquido peritoneal con hemorragía
Diagnostic peritoneal lavage (DPL) is a highly accurate test for evaluating intraperitonealhemorrhage or a ruptured hollow viscus.
InterpretationA positive DPL in an adult classically requires one of thefollowing results: 10 ml gross blood on initial aspiration,> 500/mm3 white blood cells (WBC), > 100,000/mm3 redblood cells (RBC), or the presence of enteric/vegetable
LÍQUIDO SINOVIAL
• El líquido de las articulaciones se denomina liquido sinovial, es una sustancia viscosa, muscinosa, que lubrica la mayoría de las articulaciones.
• Cuando se halla en grandes cantidades es un proceso morbido de la articulación.
Líquido sinovial
ARTICULACIÓN NORMAL (ADAPTED FROM KOGAN 2010)
Articulación sinovial
1. Tubo heparinizado estéril para la tinción de gram y los cultivos.
2. Tubo con heparina o EDTA para recuento celular. Sino se procesa se debe refrigerar.
3. Tubo sin anticoagulante para otras pruebas.
4. Tubo con fluoruro de Na para el analisis de la glucosa.
Si la muestra es muy viscosa agregar 0.05mL de ac. hialurónico a 0.5 mL de liq. e incubarlo a 37°C durante 5 minutos.
Muestras
• Color: Amarillo claro
• Aspecto: Límpido
• Viscocidad: Semejante a la clara de huevo. Contiene polímeros de ácido. hialurónico.
Examen macroscópico
Strasinger SK, Di Lorenzo MS. Analisis de orina y de los líquidos corporales. 5ª edición. Buenos aires: Medica Panamericana; 2010. p 218
Valores normales del líquido sinovial
Volumen < 3,5 mL
Color Incoloro a amarillo pálido
Claridad Claro
Viscocidad Capaz de formar un filamento de 4-6 cm de largo
Recuento de leucocitos
<200 celulas/uL
Neutrófilos < 25% del diferencial
Cristales Ausentes
Al liquido sivovial se le agrega solución de ácido acético al 2-5% formandose un coágulo sólido rodeado por líquido claro cuando es normal.
• La prueba se informa:
Buena: coágulo sólido
Regular: coágulo blando
Baja: coágulo friable
Mala: sin coágulo
Prueba de Ropes o coágulo de mucina
• El recuento total de leucocitos es el que se realiza con mayor frecuencia. Puede utilizarse contadores celulares automatizados o en cámara.
• Raras veces se solicitan recuentos de eritrocitos si hay que lisarlos se utiliza S.S. hipotónica al (0.3%) o suluc. S.S. con saponina.
• Para prevenir la desintegración celular los recuentos debe realizarse lo más pronto posible o la muestra debe refrigerarse.
• Para disminuir la viscosidad es necesario agregar una pizca de hialuronidasa a 0,5 ml del liquido y se incuba a 37 °C por 5 minutos.
Recuentos celulares
CÉLULAS NORMALES:
• Linfocitos• Monohistiocitos• Células sinoviales (tapizan la cavidad se asemejan a las
mesoteliales en menores cantidades.
CÉLULAS ANORMALES:
• Células LE • Neutrofilos en inflamaciones agudas y busqueda de
bacterias, cel de Reiter, cel RA.
Análisis diferencial
• Menos de 200 cel/ulLse consideran normales.• Los neutrófilos se encuentran en menos del 25 % y los
linfocitos menos de 15%
Strasinger SK, Di Lorenzo MS. Analisis de orina y de los líquidos corporales. 5ª edición. Buenos aires: Medica Panamericana; 2010. p 220
Artritis séptica
Cambio en las articulaciones en paciente con derrames
Causas:
Trastornos metabólicos, disminución de la excrecion renal, degeneración del cartílago o del hueso e inyecciones de medicamentos de corticosteroides en una articulación.
Cristales de los líquidos sinoviales
Strasinger SK, Di Lorenzo MS. Analisis de orina y de los líquidos corporales. 5ª edición. Buenos aires: Medica Panamericana; 2010. p 222
Tipos:
• Urato monosodico (ácido úrico) metabolismo alterado de las purinas. Aparecen en la gota son grandes tienen forma de aguja.
• Pirofosfato de calcio, en seudogota artritis degenerativa (produce calcificación del cartílago y aumento concentraciones de Ca en suero) intracelulares y pequeños (forma de baston).
• Colesterol asociados con inflamación crónica.
Oxalatos de Ca. pacientes sometidos a dialisis renal.
Strasinger SK, Di Lorenzo MS. Analisis de orina y de los líquidos corporales. 5ª edición. Buenos aires: Medica Panamericana; 2010. p 221
Cristales en los líquidos sinoviales
ASPECTO MACROSCOPICO (COLOR, CLARIDAD)
AGREGAR HIALURONIDASA
RECUENTOS CELULARES
PORTAOBJETO CITOCENTRIFUGADO
Eritrocitos
Directo o Unopette paraEritrocitos (1:200)
Leucocitos
Solución de Turk (1:2)O Unopette para leucocitos (1:20)
Si la dilución es necesaria, dilución base sobre RCN. Diluir a 100-200 por mm3
Normal
Linfocito:Histiocitos y monocitos
Células sinoviales
Leucocitos segmentados
Busqueda de Bacterias
Realizar coloración de Gram enEl portaobjeto citocentrifugado
Informe de los resultados
Cristales (observados con luzPolarizada para confirmar)
Busqueda de celulas LE
Informar células LEObservadas en
portaobjetocitocentrifugado
1.Urato monosódico (similar a agujas)2.Pirofosfato de calcio(romboide)3.Colesterol (borde conMuescas)
LÍQUIDOS SINOVIALES (ARTICULARES)
• Se debe evaluar inicialmente el color, aspecto y turbidez de los líquidos corporales. El LCR y el liquido sinovial por lo general son claros. Los líquidos serosos son algo amarillentos.
• Si bien los contadores celulares automáticos continúan mejorando, la mayoría de los recuentos celulares se hacen aún manualmente en la cámara de Neubauer.
• Las pruebas que normalmente se realizan en todos los líquidos serosos incluyen el aspecto y la diferenciación entre exudado y trasudado.
• Los recuentos celulares diferenciales se realizan con coloración de Wright, se deben examinar leucocitos normales y anormales.
• Es importante analizar correctamente la morfología tanto de células normales como anormales mediante la citocentrifugación.
CONCLUSIONES
GRACIAS