Upload
caldwell-norman
View
134
Download
2
Embed Size (px)
DESCRIPTION
Comparable between Rapid One Step Immunochromatographic Assay and ELISA in the Detection of Prostate Specific Antigen in Vaginal Specimens of Raped Women Vichan Peonim MD*, J Med Assoc Thai 2007; 90 (12): 2624-9. วัตถุประสงค์ ( objective). เพื่อพิสูจน์เปรียบเทียบคุณภาพความแม่นยำ - PowerPoint PPT Presentation
Citation preview
1
Comparable between Rapid One Step
Immunochromatographic Assay and ELISA
in the Detection of Prostate Specific Antigen
in Vaginal Specimens of Raped Women
• *Vichan Peonim MD ,• 2007 90 12J Med Assoc Thai ; ( ):
-26249
2
3
เพื่��อพื่�สูจน์ เปรี�ยบเที�ยบคุ�ณภาพื่คุวามแม�น์ย�า- rapid one step test kit
- ELISA
สูรี�ปสู��งที��เป�น์ปรีะโยชน์ ของว�ธี�การีตรีวจเพื่��อที��ให้)เห้มาะสูมใน์การี น์�ามาใช)อย�างกว)างขวางใน์งาน์บรี�การีปรีะจ�า
4
คุวามสู�าคุ*ญ ขาดปรีะจ*กษ์ พื่ยาน์ที��พื่บเห้.น์ผู้)กรีะที�าผู้�ด
การีพื่�สูจน์ ห้ลั*กฐาน์ทีางช�วว�ทียาใน์ทีางน์�ต�ว�ทียาศาสูตรี
ใช)สู�บห้าผู้)กรีะที�าคุวามผู้�ด
5
• ใน์ช�องคุลัอดของผู้)เสู�ยห้าย (V VVVVVV VVVVVV VVV VV V VVVV V VV VV)
• ต*วอสู�จ� (sperm) จากกลั)องจ�ลัทีรีรีศน์
• น์�4าอสู�จ� (semen) – สูารีช�วเคุม�ที��เป�น์สู�วน์ปรีะกอบใน์ semen
การีพื่�สูจน์ ห้ลั*กฐาน์ทีางช�วว�ทียาใน์ทีางน์�ต�ว�ทียาศาสูตรี
6
ป5ญห้าแลัะที��มา• การีตรีวจห้าเอน์ไซม Acid phosphatase test
• ทีดสูอบย�น์ย*น์ผู้ลัด)วยว�ธี�การีตรีวจห้า PSA (prostate specific antigen)
• การีว�เคุรีาะห้ PSA เป�น์แบบ quantitative ด)วยว�ธี�การีว�เคุรีาะห้ ของ ELISA
• Rapid one step test kit (semi-quantitative) ย*งไม�น์�ยมใช)ใน์งาน์ปรีะจ�า
7
ข)อด� ข)อเสู�ยELISA -
Quantitative
-Cut off ต��า
-แพื่ง-ย��งยาก
-ใช)ผู้)เช��ยวชาญ
Rapid test kit
-ถูก-ใช)งาน์ง�าย
-ไม�ใช)ผู้)เช��ยวชาญ
Semi-quantitati
ve
เปรี�ยบเที�ยบการีใช)งาน์
8
9
•E1 , P30
•สูารีจ�าพื่วก glycoprotein ที��ผู้ลั�ตจากต�อม prostatic
•ย�น์ของ PSA อย�บน์ chromosome 19
•โดยปกต�น์*4น์ PSA ใช)เป�น์ต*วบ�งช�4มะเรี.งต�อมลักห้มาก
10
ภาพื่แสูดงอว*ยวะเพื่ศชาย
11
•โคุรีงสูรี)างห้ลั*ก ได)แก� สู�วน์ห้*วแลัะสู�วน์ห้าง
•จากน์*4น์ก.แบ�งต*วแบบ meiosis
12
ต*วอสู�จ�(ดสูด) ภายใต)กลั)องจ�ลัทีรีรีศน์
ต*วอสู�จ�(ย)อมสู�) ภายใต)กลั)องจ�ลัทีรีรีศน์
13
ต*วอสู�จ�ที��ผู้�ดปกต�
14
ส่�วนที่��เป็นเซลล คื�อ ตั�วอส่�จิ� (spermatozoa) ส่�วนที่��เป็นของเหลว คื�อ พลาส่มา (seminal
plasma)
15
• ใน์ 1 ลักบาศก เซน์ต�เมตรี ม�ต*วอสู�จ�ปรีะมาณ 20-200 ลั)าน์ต*ว
• ปรี�มาณของน์�4าอสู�จ�ที��ห้ลั*�งแต�ลัะคุรี*4งปรีะมาณ 3-5 ลักบาศก เซน์ต�เมตรี
• Seminal vasicle ปรีะมาณ 70%
• Prostate gland ปรีะมาณ 13-33%
16
แอน์ต�เจน์ห้รี�อแอน์ต�บอด�เกาะอย�บน์ solid phase
แต�ลัะข*4น์ตอน์จะต)องม�การีแยกเอาสูารีสู�วน์เก�น์ที��ไม�ได)ที�าปฏิ�ก�รี�ยาออกไป
ว�ธี�ที��ม�คุวามไวแลัะคุวามจ�าเพื่าะสูง
17
เอน์ไซม ที��น์�ยมใช)ใน์ว�ธี�การี ELISA คุ�อ •Horseradish peroxidase (substate ที��น์�ยม คุ�อ O-phenylene diamine ให้)สู�น์�4าตาลั)
•alkaline phosphatase (substrate ที��น์�ยมคุ�อ p-nitrophenyl phosphate ให้)สู�เห้ลั�อง )
Cut off 0.5 ng/ml
18
19
•ต*วกลัางย:ดเกาะ (solid phase)
•กรีะดาษ์ชน์�ด nitrocellulose ห้รี�อ nylon
• เม��อที�าปฏิ�ก�รี�ยา ตกตะกอน์ลังมาเกาะบน์ผู้�วกรีะดาษ์ ปรีากฏิสู�สู�าห้รี*บการีอ�าน์ผู้ลั
•ที�าให้)เก�ดสู� เช�น์ ผู้งทีอง (colloidal gold)
20
การีว�เคุรีาะห้ PSA ของ rapid one step test kit
•test (mouse anti-human PSA Mc antibody)
• Antibody colloidal gold conjugate
•สู��งสู�งตรีวจพื่บ PSA (specific antibody- PSA-color conjugate)
•การีตรีวจว�เคุรีาะห้ แบบน์�4ใช)สูารีต*วอย�าง 100 µl (3 ห้ยด)
•cut off ของ PSA คุ�อ 4 ng/ml
21
22
ข*4น์ตอน์การีตรีวจ•การีตรีวจรี�างกายผู้)เสู�ยห้าย•การีตรีวจรี�างกายผู้)ต)องห้า•การีตรีวจทีางห้)องปฏิ�บ*ต�การี
ว*ตถู�พื่ยาน์ที��พื่บการีตรีวจห้าเอน์ไซม Acid phosphatase การีดคุรีาบอสู�จ�ด)วยเคุรี��องก�าเน์�ดแสูง การีตรีวจ PSA (prostate specific antigen) การีตรีวจย�น์ย*น์ด)วยกลั)องจ�ลัทีรีรีศน์
23
24
25
• พื่ยาธี�ว�ทียา คุณะแพื่ทีย ศาสูตรี โรีงพื่ยาบาลัรีามาธี�บด� มห้าว�ทีาลั*ยมห้�ดลั
•สู��งสู�งตรีวจจ�าน์วน์ 100 ต*วอย�าง ได)จากสูตรี
• N = ที��รีะด*บคุวามเช��อม*�น์ 96%
; = 0.05 หรื�อ 1-α/2 (alpha error two-tailed) Z = Z0.975 = 1.96
2
2
dP)P(1Z
26
• N = 59 ที��รีะด*บคุวามเช��อม*�น์ 96% • จิากงานว�จิ�ยอ��นตัรืวจิพบ = 675. %• ตั!องม�ตั�วอย�าง อย�างน!อย = 87 ตั�วอย�าง
27
- Cotton swab
- กรีะดาษ์กรีองที��ม�พื่�4น์ที�� 03. x 03. cm
- ใสู�ใน์ห้ลัอดทีดลัองที��ม�น์�4ากลั*�น์ (DW) 2 ml ป5� น์เห้ว��ยง 3 น์าที�
- น์�าไปทีดสูอบด)วย rapid one step test kit แลัะ ELISA
28
•ที*4ง 2 ห้ลั*กการี•ตรีวจสูอบห้าต*วอสู�จ�โดยการีดภายใต)กลั)องจ�ลัทีรีรีศน์ (gold standard)
•เปรี�ยบเที�ยบ sensitivity, accuracy,specificity, positive predictive value, negative predictive value
29
30
TP FP
FN TN
31
32
33
•ใน์ปรีะเทีศที��พื่*ฒน์าแลั)วใช)ว�ธี�การีทีดสูอบแบบ rapid one step test kit เพื่��อการีตรีวจแยกใน์ seminal fluid
•ผู้ลัการีทีดลัองของว�ธี�ที*4งสูองน์*4น์เม��อเปรี�ยบเที�ยบแลั)วไม�ม�คุวามแตกต�างก*น์ยกเว)น์
• sensitivity
• negative predictive value
•คุ�าจากการีคุ�าน์วณของ rapid kit ด�กว�า ELISA
34
35
สูรี�ป
•rapid one step test kit น์�ามาใช)การีตรีวจ PSA ใน์ช�องคุลัอดใน์คุด�ข�มข�น์กรีะที�าช�าเรีาที��ที�าใน์งาน์ปรีะจ�าได)อย�างเห้มาะสูม
36
อาจารีย ที��ปรี:กษ์า อ.ธีงช*ย เตโช
ว�ศาลั