การใชงาน Chromera

หนาท� 1. การเปดเคร�องและโปรแกรม Chromera 2 2. การเร�มตนการใชงานเคร�อง 4

2.1. การ Purge Pump 4 2.2. การเร�มตนการทางานของ Pump 5 2.3. การกาหนดชนดของ Mobile Phase ลงบน Software 6 2.4. การ Flush AutoSampler 6

3. การสรางและการใชงาน Method 7 3.1. การสราง Method ใหม 8 3.2. การแกไข Method เดม 12 3.3. การตAงคา Integration ขอมล 13 3.4. การสราง Calibration Curve 16

4. การใชงานหนา Run Time 24 4.1. การใชโหมด Manual Control 24 4.2. การใชโหมด Single Run 26 4.3. การใชโหมด Sequence 27

5. การสรางและการใชงาน Sequence 29 5.1. การสราง Sequence ใหม 29 5.2. การใชงาน Sequence Wizard 32 5.3. การแกไข Sequence 33

6. การดผลการวเคราะหท�ได (Post Run) 36 6.1. การอานคาผลการวเคราะห 36 6.2. การปรAนท Report 41

7. การประมวลผลขอมลใหม (Reprocess) 46 8. การสรางและแกไข Report 50

2

1. การเปดเคร�องและโปรแกรม Chromera

1. เปดสวทชสดาท�อยทางดานหลงของตวเคร�อง AutoSampler, Detector, Column Oven และ Pump.

2. เปดสวทชสเงนดานหนาตวเคร�อง AutoSampler, Detector, Column Oven และ Pump โดยกดคางไวประมาณ

2 วนาท จนสงเกตเหนไฟสเขยวออนปรากฏขAน

3. เปดอปกรณคอมพวเตอรท�ใชควบคมการทางานของเคร�อง HPLC

4. เปดโปรแกรม Chromera โดยคลbกท�ไอคอน Chromera

5. โปรแกรมจะเร�มทาการ Connect กบตวเคร�อง HPLC

เม�อหนาหลกของโปรแกรมปรากฏขAน หนาตางแสดงสถานะการเช�อมตอปรากฏขAน

เม�อ Chromera ทาการเช�อมตอกบอปกรณไดแลวจะปรากฏคาวา Disconnect ดงภาพ แตหากChromera

ทาการเช�อมตอไมสาเรจจะปรากฏคาวา Connect จากนAนใหทาการ คลbกท� Connect อกรอบเพ�อพยายาม

เช�อมตออกครA ง หรอปฏบตตามคาแนะนาในหนาตางท�ปรากฏขAน

3

6. โปรแกรมจะอยในหนา Run Time เพ�อใหผใชงานไดเร�มทาการใชงานท�ถกตองในหนานA โดยหวขอหลก

Runtime จะ Active ท�มมลางซายของหนาตาง และไอคอน แสดงท� Manual Control ท�มมบนซาย

ในหนานAสามารถส�งการทางานเบAองตนของ Pump, Column Oven และ Detector ได และสามารถส�งให

อปกรณทางานไดทนทโดยกด Apply

4

2.การเร�มตนการใชงานเคร�อง

2.1 การ Purge Pump

1. คลายวาลวสดาดานหนาตวเคร�อง ดงภาพโดยหมนทวนเขมนาฬกา

2. ใส Syringe ไปท�วาลวดานหนาดงภาพ

3. เร�มทาการ Purge Pump ดวย Mobile phase จากขวดท�ตองการใช โดยกดท�ปมดานหนา ตามชนดของ Mobile

phase ท�ตองใช จะเหนไฟสเขยวปรากฏขAน

หมายเหต Pump บางชนดอาจมลกษณะตางไปจากภาพแสดงดงในขอ 1-3 แตทAงนAหลกการของการ Purge

Pump และ Softwareไมแตกตางกนแตอยางใด

4. ระบบจะทาการ Purge ดวย Mobile Phase ท�ตองการจานวน 10 mL จงหยดทาการ Purge ดวยตวเอง และไฟ

สเขยวจะดบลง

5

หมายเหต หากมการเร�มตนการทางานของปbมจาก Software แลว จะไมสามารถ Purge แบบ Manual ตามขอ

3. ได หรอหากตองการควรส�งหยดการทางานของปbมจาก Software กอน

5. ในกรณท�ตองการส�ง Purge จาก Software สามารถส�งไดจากหนาตาง Chromera โดยจะตองทาการ Start

Pump กอน (ดหวขอการ เร�มตนการทางานของ Pump)

6. การส�ง Purge Pump จาก Software ทาไดโดยเลอก Mobile Phase ท�ตองการ Purge และกาหนดคา Flow rate

ท�ตองการ Purge แลวกด Apply (ในตวอยาง Purge Pump A ดวย Flow rate 1.00 mL/min)

7. หากตองการหยดการ Purge Pump ใหเปล�ยน Flow rate เปน 0 ml/min แลวกด Apply หรอกด Stop LC Pump

ในหนา Control Panel ท�มมบนขวา

8. เม�อทาการหยดการทางาน Pump แลว หมนปดวาลวสดาดานหนาตว Pump โดยหมนตามเขมนาฬกา แลวจง

นา Syringe ออกแลวนาสารละลายไปทAงในขวด Waste ท�จดเตรยมไว

2.2 การเร�มตนการทางานของ Pump

1. ตAงคา % ของ Mobile Phase ชนดตาง ๆ และ Flow rate ท�ตองการใชงาน แลวกด Apply

ควรทาการ Condition Column ดวย Mobile phase ท�ตองการกอนทาการใชงานอยางนอย 15 นาท

2. หรอกดท� Start Pump ท� Control Panel มมบนซาย โดยคา % ของ Mobile Phase ชนดตาง ๆ จะเปนไปตามคา

เร�มตนท�เคร�องกาหนดขAน

6

หมายเหต หากตองการ Purge Pump โดย Software เม�อเร�มการทางานของปbมแลว ควรลด Flow Rate ใหเปน

0 กอนแลวจงคลายวาลว ท�ดานหนาปbมกอนทาการ Purge Pump ดวย Soft ware

2.3 การกาหนดชนดของ Mobile Phase ลงบน Software

1. ไปท� Tools เมน แลวเลอก Preference

2. กาหนดชนดของ Mobile Phase ท�ตองการ

3. กด Save เพ�อทาการบนทกคา

หมายเหต นอกเหนอจากนAแลว ในหนา Preference นA สามารถกาหนด Parameter ของอปกรณตาง ๆ เพ�อใชในการ

สราง Method การใชงานในเบAองตนได

2.4 การ Flush AutoSampler

1. กาหนดปรมาตรของ Solvent และ จานวนครA งของการ Flush ตามท�ตองการ แลวกด Apply

2. ควรรอใหกระบวนการ Flush เสรจสAนลงกอนทาการส�งฉดสารตวอยาง

3. สามารถทาการ Flush AutoSampler ไดในขณะท�ทาการ Condition Column

7

3. การสราง Method ในการใชงาน

Method จะประกอบไปดวยพารามเตอรหลก ๆ ท�ใชในการควบคมอปกรณในระหวางการตรวจวเคราะห การ

ทา Calibration การทา Quantitation และการดผลการวเคราะห (post run)

การใชงาน Method ทาไดโดยการคลbกท� Method ในหนา Navigation Pan

หนา Method identification page จะปรากฏขAน

ภายใตแผนภาพ Channels สามารถตAงคาการเกบขอมลท�ตองการตรวจ

วเคราะหของ Detector

ช�อ Method

ใชในการตAงคา Identification และ Integration ของโครมาโทรแกรมท�ได

ใชในการตAงคาการทา Calibration curve เพ�อใชในการวเคราะหเชงปรมาณ

ภายใตแผนภาพ Instruments แสดงถงอปกรณทกชนดท�เช�อมตอ และถกควบคมโดย Chromera ณ ขณะนAน ตามลาดบการ Configure

ใชในการกาหนดรปแบบของ Report

8

3.1 การสราง Method ใหม

ในกรณท�ตองการสราง Method ใหมเพ�อใชในการวเคราะหตวอยาง ไปท�เมน File แลวเลอก New Method

1. ใสช�อ Method ท�ตองการในชอง Method Name และใสช�อกรปของ Method ท�ชอง Group

Group Name ทาหนาท�เหมอนเปน Folder ท�ใชเกบ Method ตาง ๆ เอาไวเปนหวดหมตามท�ผใชงานกาหนด

ซ� งในการสราง Method ใหมนAนจาเปนตองใสทAง Method Name และ Group Name

หากตองการวาง Method ท�สรางใหมไวในกรปท�มอยใหเลอก Group Name จาก Dropdown list โดยคลbก

ท� จากนAน Group Name ท�เคยสรางไวจะปรากฏขAน จากนAนเลอก Group Name ท�ตองการ

ในสวนของ Description และ Notes ใชเม�อตองการใสคาอธบาย Method หากตองการ

9

ทนทท�ใสช�อ Method และ Group Name ช�อของ Method จะปรากฏขAน

ใน Method pan ทางดานซายมอ ซ� งแสดงใหเหนวาMethod ไดถกสรางขAน และพรอมท�จะถกตAงคาการใชงาน โดย

สามารถเขาถงอปกรณแตละโมดล หรอเขาถงอปกรณทกชนดท�เช�อมตออยไดในครA งเดยว

2. คลbกท� Instruments ในหนา Method pane

พารามเตอรตาง ๆ ในการวเคราะหจะปรากฏขAนดงนA

10

3. ตAงคาการใชงาน LC Oven โดยตbก ท�ชอง In Use เม�อหากตองการใชงานสวนนA

• ใสคาอณหภมของ Column Oven ท�ตองการท�ชอง Temperature

• ใสคาความเบ�ยงเบนของอณหภมท�ยอมรบไดในชอง Tolerance

• ใสคา Equilibrium time ท�ชอง Equil Time หากตองการ Column อยในสมดลอณหภมกอนทาการ

วเคราะหตามเวลาท�กาหนด

4. ตAงคาการใชงาน AutoSampler โดยตbก ท�ชอง In Use เม�อตองการใชงานในสวนนA

• กาหนดปรมาณสารท�ตองการนาเขาสระบบวเคราะหท�ชอง Injection Volume

• กาหนดคาอณหภมของ AutoSampler ท�ชอง Tray Temperature พรอมทAงกาหนดคาความเบ�ยงเบนของ

อณหภมท�ยอมรบไดในชอง Tolerance

• ในกรณท�ไมตองการควบคมอณหภมของ AutoSampler ใหเลอก Off ท�ชอง Tray Temperature โดยเลอก

จาก Dropdown list

• สามารถกาหนดรายละเอยดของ AutoSampler เพ�มเตมไดโดยตbก ท�ชอง Advance พารามเตอรตาง ๆ

ท�ใชควบคม AutoSampler จะปรากฏขAน

5. ตAงคาการใชงานปbม โดยตbก ท�ชอง In Use เม�อตองการใชงานในสวนนA

• คลbกท�เคร�องหมาย หนา Pump เพ�อแสดงชองทางการกาหนดคาการควบคมการทางานของปbม

เพ�มเตม

• กาหนดโหมดในการวเคราะห (Isocratic หรอ Gradient) โดยเลอกจาก Dropdown list ท�ชอง Transition

• กาหนดคา Equilibrium Time ท�ชอง Initial Equil Time หากตองการใหระบบอยในสมดลของ Mobile

Phase กอนทาการวเคราะหตามเวลาท�กาหนด

11

• ท� Step 0 ใหเลอก Equil ท�ชอง Step Type โดยเลอกจาก Dropdown List จากนAนกาหนด Flow rate

และ อตราสวนของ Mobile Phase ตามท�ตองการใชงาน แลวจงกาหนดเวลาท�ตองการใหระบบอยใน

สมดลของ Mobile Phase กอนทาการวเคราะหตวอยางท�ชอง Step Time

• ท� Step 1 ใหเลอก Run ท�ชอง Step Type และกาหนดคาตาง ๆ เชนเดยวกบใน Step 0 โดยเวลาท� Step

time คอเวลาท�ใชในการวเคราะหตวอยาง

• หากตองการตAงคาการใชงานปbมเพ�มเตมใหตbก ท�ชอง Advance พารามเตอรตาง ๆ ท�ใชควบคมปbมจะ

ปรากฏขAน

6. ตAงคาการใชงาน Detector โดยตbก ท�ชอง In Use เม�อตองการใชงานในสวนนA

• คลbกท�เคร�องหมาย หนา UV-VIS เพ�อแสดงชองทางการกาหนดคาการควบคมการทางานของปbม

เพ�มเตม

• กาหนดคา Wavelength ท�ตองการตรวจวเคราะห

• กาหนดคาความละเอยดในการเกบขอมลของ Detector โดยเลอกท� Dropdown List ท�ชอง

Sampling Rate

• กาหนดคาเวลาในการเกบสญญาณขอมลของ Detector ท�ชอง End Time (ไมควรมคาเกนกวาเวลาท�

กาหนดใน Run Time ของปbม)

• กาหนดคาความยาวคล�นท�ตองการท�ชอง Wavelength

• ตbกท� ท�ชอง Autozero หากตองการให Chromera ทาการตAงคา BaseLine เปน 0 เม�อเร�มตนการ

วเคราะหในแตละครA ง

7. บนทก Method โดยไปท�เมน File แลวเลอก Save Method เพ�อบนทกคาท�กาหนด

12

3.2 การแกไข Method เดม

1. ไปท�หนา Method

2. เปด Method ท�ตองการแกไข โดยไปท� File Menu แลวเลอก Open Method

3. เลอก Method ท�ตองการแกไข โดยตbก ท�ดานหนาของ Method นAน แลวคลbก

4. พารามเตอรตาง ๆ จะปรากฏขAนในหนา Method เชนเดยวกบขอ 2. ในหวขอ 3.1.การสราง Method ใหม

5. ทาการแกไขพารามเตอรตาง ๆ ตามตองการ

6. บนทกขอมลตาง ๆ ท�ไดทาการแกไขไป โดยไปท� File เมน แลวเลอก Save Method

13

7. ในกรณท�ตองการบนทก Method ในช�อใหม ใหเลอก Save Method As จากนAนใสช�อ Method ใหมตามท�

ตองการ

8. สามารถนา Method ท�สรางขAนไปใชในการ Run ตวอยางท�ตองการได

3.4. การตEงคา Integration ขอมล

1. ไปท�หนา Method

2. เปด Method ท�ตองการตAงคา Integrate และ Identification

3. คลbกท� Peak ภายใตแผนภาพทางดานซาย

4. เลอกโครมาโทแกรมท�เหมาะสมเพ�อเปนตวแทนในการ Integrate และ Identify ขอมล โดยไปท� Action เมน

แลวเลอก Edit Method Graphically

14

5. เลอก Chromatogram ท�เหมาะสมมา 1 Chromatogram โดยตbก ท� หนา Chromatogram นAน แลวกด Open

6. ตAงคาการ Integrate ขอมลของแตละ Chanel เชน Bunching Factor, Area Threshold, Noise Threshold

7. Identify Component โดย พมพช�อ Component ท�ตองการจะ Identify ท�ชอง Component หรอคลbกท� Drop

Down List แลวเลอก Component ท�ตองการในกรณท�ไดเคย Identify Component นAนไปแลว

15

8. ระบ Retention time ของ peak ท�ตองการจะ Identify โดยคลbกท�ชอง Retention Time จากนAนกด Ctrl คางไว

แลวคลbกท� Peak ท�ตองการจะ Identify บนโครมาโทแกรม Retention time จะปรากฏในชอง พรอมคา Search

Window

9. ระบคา Retention time ของ Peak ท�ตองการจะ Identify จนครบ

10. สามารถตAงคา Event ตาง ๆ เพ�องายตอการ Integrate ท�ชอง Event

16

11. บนทกคาการ Integrate ตาง ๆ ตามท�กาหนด โดยไปท� File เมน แลวเลอก Save Method หรอ Save Method

As ในกรณท�ตองการบนทกในช�อใหม

12. หากตองการแกไขคาการ Integrate ท�ไดทาไปแลว .ใหเปด Method ท�ตองการแกไขขAนมาแลว แกไขคาการ

Integrate เชนเดยวกบการตAงคาใหมตามท�กลาวมาแลว จากนAนจงบนทกคาท�ไดทาการแกไขลงไปใน Method

ในลกษณะเดยวกน

3.5. การสราง Calibration Curve

Chromera จะสราง Calibration Curve เพ�อใชงานลงบน Method ท�ถกสรางขAน โดย

1. เปด Method ท�ตองการสราง Calibration Curve โดยไปท� File เมน แลวเลอก Open Method

2. เลอก Method ท�ตองการโดยตbกเคร�องหมาย หนา Method ท�ตองการ แลวเลอก

17

3. เลอก Calibration ท�แผนภาพทางดานซายมอ

4. เลอก Component ท�ตองการจะสราง Calibration Curve ในหนา Detail

5. จากนAนจงกาหนดคา Calibration type, Origin Treatment และอ�น ๆ ตามตองการในแตละ Component ท�

ตองการจะสราง Calibration Curve

6. กาหนดคาความเขมขนในแตละจดของแตละ Component ท� Calibration โดยไปท�หนา Set up Standard ใน

หนานA Component ตาง ๆ ท�ถกเลอกไวในหนา Detail ตามขอ 5. จะปรากฏขAน

18

7. เลอกหนวยของความเขมขนท�ตองการสรางใน Calibration Curve

8. กาหนดคาความเขมขนในแตละระดบใน Calibration curve ของแตละ Component โดยคลbกขวาท�คอลมน

แลวเลอก Add a Standard

9. ใสช�อระดบความเขมขน เพ�อใชระบคาความเขมขนตอไป (หรออาจเลอกจาก Drop Down List ในกรณท�เคย

มการระบคาไวแลว)

19

10. ระดบความเขมขนท�ระบไวจะปรากฏขAนดงนA

11. ระบคาความเขมขนท�แทจรงลงในแตละระดบความเขมขน ตามหนวยท�เลอกจนครบ

12. บนทกคาท�กาหนดลงบน Method โดยไปท� File เมน แลวเลอก Save Method หรอ Save Method As ในกรณ

ท�ตองการบนทกในช�อใหม

13. การสราง Calibration Curve ทาไดสองชองทางหลก ๆ คอ ตAงคาความเขมขนลงบน Method ตามขอ 1-12

กอนแลวจงนา Method ท�ไดนAไปใชในการรนสารมาตรฐานตามความเขมขนตาง ๆ ท�ระบ หรอทาการรนสาร

มาตรฐานในแตละความเขมขนในลกษณะเชนเดยวกบ Sample type กอน แลวจงนาผลท�ไดไปทาการ

ประมวลผลใหม (Reprocess)

การสราง Calibration Curve ไปพรอมกบการรนสารมาตรฐาน

1. กาหนดคาความเขมขนลงบน Method ตามท�ไดกลาวไปแลวในหวขอ การสราง Calibration Curve

2. ทาการรนสารมาตรฐานโดยไปท�หนา Run Time แลวไปท� Sequence

3. ตAงช�อ Batch ของขอมล พรอมทAงระบกลมของ Batch ท�จะสราง

20

4. ท�ชอง Sample Type ใหเลอก Calib. Replace เพ�อให Software นาคาพAนท�ใตพคท�ไดตามคาการ Integrate

ท�ตAงไวไปคานวณและสรางเปน Calibration Curve ตอไป

5. กาหนดช�อ Sample และ Vial ใหตรงกบสารมาตรฐานท�ตองการจะรน พรอมทAงเลอก Method ท�ถกตอง ท�

ชอง Standard ใหเลอกระดบความเขมขนของสารท�สรางไวกอนหนานA ใหตรงกบความเขมขนของสาร

มาตรฐานท�ตองการจะวเคราะห

6. ในกรณท�ตองการสราง Curve จากคาเฉล�ย ท�เกดจากพAนท�ใตพค ท�ความเขมขนเดยวกนในหลาย ๆ ครA งให

เลอก Calib. Average ท�ชอง Sample Type

21

7. กาหนดคาตาง ๆ ตามท�กลาวมาจนครบ แลวส�งรนสารมตรฐาน โดยคลbกท� Chromera จะทาการสราง

Curve ใหโดยอตโนมต

8. สามารถเปดด Calibration Curve ท�สรางขAนนAได หลงจากท� Chromera ทาการรนสารมารตรฐานตามคาส�งจน

ครบ โดยไปท�หนา Method แลวเลอก Method ท�ใชสราง Calibration Curve ขAนมา แลวไปท�หนา Calibration

โดยสามารถด Calibration Curve พรอมทAงคา R-Squared ไดในหนา Summary

การสราง Calibration Curve จากกระบวนการ Reprocess

1. ทาการกาหนดคาความเขมขนของสารมาตรฐานในแตละระดบลงใน Method ตามท�ไดกลาวไปแลวในหวขอ

การทา Calibration Curve

2. ไปท�หนา Reprocess

3. เลอกชดขอมลท�ตองการจะ Reprocess ซ� งในท�นA คอ ขอมลท�ไดจากกการรนสารมาตรฐานในความเขมขนตาง

ๆ โดยไปท� File เมน แลวเลอก Open Data

22

4. เลอกชดขอมลท�ตองการแลว Open

5. ท� Sample Type เลอก Calib. Replace เม�อทาการ Calibrate เปนครA งแรก หรอ ใหการทา Calibration โดย

กระบวนการ Reprocess นAไปแทนท�คาเดมท�มอย

6. ในกรณท�ตองการใชคาเฉล�ยท�ความเขมขนนAน ๆ เลอก Calib. Average จะใชเม�อมการรนสารมาตรฐานท�ม

ความเขมขนเดยวกนหลายครA ง

7. เลอก Method ท�ตองการจะสราง Calibration Curve พรอมทAงระบคาความเขมขนใหตรงกบท�กาหนดไวใน

Method นAน ๆ ท�ชอง Standard

23

8. เร�มตนการ Reprocess โดยคลbกท� Chromera จะทาการสรางหรอ Updated Calibration Curve ให

อตโนมต

9. สามารถเขาไปด Calibration Curve ท�ถกสรางขAนนAไดในหนา Method เชนเดยวกบ การสราง Calibration

Curve ไปพรอมกบการรนสารมาตรฐาน ในขอท� 8

หมายเหต Calibration Curve ท�ถกสรางขAนนAจะถกบนทกไวใน Method นAน ๆ โดยอตโนมต ซ� งผใชงานสามารถนา

Method ดงกลาวนAไปในการหาปรมาณของสารตวอยางท�ตองการจะวเคราะหไดภายหลง โดย Chromera

จะคานวณหาปรมาณของสารตวอยางท�วเคราะหไดโดยอางองจาก Calibration Curve ท�ไดนAน�นเอง

24

4. การใชงานหนา Run Time

ในหนานA จะเปนการส�งการเคร�อง HPLC ใหทางานทAงในแงการเร�มตนการใชงาน (Manual Control) และรวมถง

การรนตวอยางตามท�ตองการทAงในแบบ การรนตวอยางเพยงรนเดยว (single Run) หรอการรนตวอยางแบบตอเน�อง

(Sequence) ซ� งการส�งงานทAงสามแบบนAนสามารถเขาถงได โดยไปท�หนา Run Time

4.1 การใชงานโหมด Manual Control

1. เลอกท� Manual Control

2. กาหนดคา Parameter ตาง ๆ ท�ตองการจะควบคมแลวกด Apply เพ�อส�งการ

25

3. สามารถสงเกตการทางานของเคร�อง ณ ขณะนAนไดจาก Status Panel

4. ผใชงานสามารถส�งให ปด/เปด ปbมและแหลงกาเนดแสงไดโดยตรงท� Control Panel

26

4.2 การใชโหมด Single Run

1. เลอกท� Single Run

2. เปด Method ท�ตองการจะใชงาน โดยไปท� File เมน แลวเลอก Open Method

3. เลอก Method ท�ตองการใชงาน แลวกด Open

4. Method ท�ตองการจะถกเปดขAน จากนAนคลbกท� Apply จากนAน Method จะแสดงเปน Active

27

5. คลbกท� Show the run parameter จากนAนตAงคา Batch Name, Sample Name, Vial Number และ Injection

Volumn

6. ส�ง Run โดยคลbกท� Chromera จะทาการรนสารตวอยางตามคาท�กาหนดไว

4.3 การใชโหมด Sequence

1. เลอกท� Sequence

2. เปด Sequence ท�ตองการใชงาน โดยไปท� File เมน แลวเลอก Open Sequence

กรณท�ยงไมมการสราง Sequence ใหดท�หวขอ 5. การสรางและการใชงาน Sequence

3. ตbกเพ�อเลอก Sequence ท�ตองการใชงานแลวกด Open

28

4. Sequence ท�เลอกไวจะถกเปดขAน และผใชงานสามารถแกไขคาตาง ๆ ใน Sequence จากหนานAได กอนทาการ

รนสารตวอยางตามตองการ

5. บนทกหนา Sequence ท�สรางไว โดยไปท� File เมน แลวเลอก Save Sequence

6. ส�งรน Sequence โดยคลbกท�

7. สารตวอยางจะถกนาเขาสระบบการวเคราะหตามลาดบดวย Method ท�กาหนดไว

29

5. การสรางและการใชงาน Sequence

5.1. การสราง Sequence ใหม

ผใชงานสามารถสราง Sequence เพ�อใชงานได 2 ชองทาง คอ

1. การสราง Sequence ในหนา Sequence หลก

1.1. ไปท�หนา Sequence

1.2. เลอก Sample List

1.3. ไปท� File เมน เลอกเลอก New Sequence

1.4. ใสช�อ Sequence Name และระบกลมท�อยของ Sequence

30

1.5. เลอกชนดของ Sample ท�ของ Sample Type พรอมทAงระบช�อท� Sample Name จากนAนเลอก Method ท�

ตองการจะใชงาน และกาหนดจานวนครA งท�จะรนท�ชอง Injections

1.6. ในกรณท�เลอก Sample Type เปน Calib. Replace หรอ Calib. Average เพ�อใชในการสราง Calibration

Curve ควรเลอกระดบความเขมขนของสารตามท�กาหนดไวใน Method ท�ชอง Standard (รายละเอยดใน

หวขอการสราง Calibration Curve)

1.7. บนทก Sequence โดยไปท� File เมน แลวเลอก Save Sequence

2. การสราง Sequence กอนรนตวอยางในหนา Run Time

2.1. ไปท�หนา Run Time

31

2.2. เลอก Sequence

2.3. ไปท� File เมน แลวเลอก New Sequence

2.4. กาหนดคาตาง ๆ เชนเดยวกบการสราง Sequence ในหวขอการสราง Sequence ในหนา Sequence หลก

2.5. บนทก Sequence ท�สรางขAน โดยไปท� File เมน แลวเลอก Save Sequence

32

2.6. สามารถส�งรนสารตวอยางตาม Sequence ท�สรางขAนไดโดยคลbกท� Start Sequence

5.2. การใชงาน Sequence Wizard

1. ไปท� Tools เมน แลวเลอก Sequence Wizard

2. ใสช�อ Sequence ท�ชอง Sequence name

3. ใสคาอธบายหรอรายละเอยด (หากม) ของ Sequence นA ท�ชอง Description

4. คลbกท� (Drop down list) เพ�อเลอกกลมท�ตองการให Sequence นA เขาไปอย กรณท�เคยสรางกลมไวแลว

5. กรณท�ตองการสรางกลมใหมใหพมพช�อกลมให Sequence นA ท�ชอง Group

6. คลbกท� เพ�อเลอก Method ท�ตองการใชในการวเคราะหตวอยางดวย Sequence นA

7. คลbก เพ�อดาเนนการตอ

8. เลอกชนดของถาดวางตวอยาง (Tray type) เปน 100-Position Tray

9. ระบหมายเลขเร�มตนของถาดวางตวอยางเปน 1 (2 mL)

10. คลbก เพ�อดาเนนการตอ

33

5.3. การแกไข Sequence

การแกไข Sequence สามารถทาไดโดยผาน 2 ชองทางเชนเดยวกบการสราง Sequence

1. แกไข Sequcence ในหนา Sequence หลก

1.1. ไปท�หนา Sequence

1.2. ไปท� File เมน แลวเลอก Open Sequence

1.3. ตbกเลอก Sequence ท�ตองการแกไขแลว กด Open

1.4. หนา Sequence ท�เลอกจะถกเปกขAน ผใชงานสามารถแกไข Sequence ตามท�ตองการได

34

1.5. บนทกการตAงคาตาง ๆ ท�ไดแกไขลงใน Sequence โดยไปท� File เมน แลวเลอก Save Sequence หรอ Save

Sequence As ในกรณท�ตองการบนทก Sequence ท�แกไขในช�อใหม

2. แกไข Sequence กอนรนสารตวอยาง ในหนา Run Time

2.1. ไปท�หนา Run Time

2.2. เลอกท� Sequence

2.3. ไปท� File เมน แลวเลอก Open Sequence

2.4. ตbกเลอก Sequence ท�ตองการจะแกไข แลวกด Open

35

2.5. หนา Sequence ท�เลอกจะถกเปดขAน ผใชงานสามารถแกไข Sequence ไดในหนานA

2.6. บนทก Sequence โดยไปท� File เมน แลวเลอก Save Sequence

2.7. ส�งรนสารตวอยาง ไดโดยกดท� Start Sequence

2.8. สารตวอยางจะถกรนเปนลาดบตาม Sequence ท�ถกกาหนดไว

36

6. การดผลการวเคราะหท�ได (Post Run)

6.1 การอานคาผลการวเคราะห

1. เลอกท� Post Run เมน

2. ไปท�เมน File แลวเลอก Open Data

3. หนาตาง Data Selector จะปรากฎขAนดงภาพ

4. ผใชงานสามารถเลอกเปดไฟลขอมลได ซ� งโดยปกตแลวชดขอมลในหนา Data Selector จะเรยงตาม Batch

Name ซ� งผใชงานสามารถเลอกเฉพาะบางชดขอมลภายในแตละ Batch ได โดยคลbกท� เคร�องหมาย เพ�อด

รายละเอยดของขอมลใน Batch จากนAนจงตbก เม�อตองการเลอกเฉพาะขอมลนAน ๆ แลวกด

หรอไปท� Actions แลวเลอก Open หรอกด Ctrl+O

37

5. ผใชงานสามารถลบขอมลท�ไมตองการออกจาก Chromera โดย กด หรอ ไปท� Actions แลวเลอก

Delete

6. ผใชงานสามารถด โครมาโทแกรมคราว ๆ ของขอมลท�ตองการไดโดยคลbกท�แถวของขอมลนAน ๆ

7. เม�อกด Open แลว ขอมลท�ถกเลอกจะถกเปดขAน

38

8. ผใชงานสามารถเลอกเปดดสญญาณท�เกดจาก Oven, Pump หรอ Detector ไดโดยคลbกท�แผนภาพทางดาน

ซาย ภายใตช�อของตวอยางท�ตองการจะดขอมลนAน ๆ สญญาณตาง ๆ จะปรากฏขAนบนพAนท�ของ โครมาโทร

แกรมทางดานขวามอ

9. ผใชงานสามารถดผลขอมลการ Integrate ของ Peak ณ Retention Time ตาง ๆ ท�ไดในตวอยางนAน ๆ ในหนา

Standard Post Run Display

โดยคาท�ไดจะแสดงในตารางในสวนของ Results

10. ในกรณท�มรนสารตวอยางโดยใช Method ท�มการ Identify และผานการสราง Calibration Curve แลว

Chormera จะคานวณความเขมขนของสารตวอยางให โดยจะแสดงผลทนทในหนานA ท�ชอง Final Amount

39

11. ผใชงานสามารถแกไขพารามเตอรการ Integrate และการ Identify ไดโดยไปท�หนา Peak Identification

Review

จะปรากฏพารามเตอรตาง ๆ ใหแกไขการ Identify และ Integrate ท�สวนของ Results

12. ทาการบนทกคาการ Integrate และ Identification ของโครมาโทแกรมท�แกไขโดยไปท� Action แลวเลอก

Reprocess Current Chromatogram หรอคลbกท� Icon

13. ผใชงานสามารถเปดขอมลเพ�มเตมได โดยไปท� File เมน แลวเลอก Add Data

14. จากนAนจงเลอกขอมลท�ตองการแลวกด Open เชนเดยวกบขAนตอนการเปดขอมลกอนหนานA

15. ขอมลจะถกเปดขAนเพ�มเตมและสามารถเลอกดขอมลท�เปดขAนใหมไดโดยคลbกท�ขอมลท�ตองการจะดผล ท�

แผนภาพทางดานซาย

40

16. ผใชงานสามารถเปดดโครมมาโทแกรมขAนมาพรอมกนไดมากกวา 1 ตวอยาง ได 3 ลกษณะโดยไปท� View

แลวเลอก Stacked Plot หรอ Matrix หรอ Overlay ดงนA

Stacked Plot :

Matrix :

41

Overlay :

6.2 การปรEนท Report

1. คลbกเลอกเฉพาะขอมลท�ตองการจะปรAนทผลท�แผนภาพดานซาย

2. ไปท� File เมน แลวเลอก Print Preview Report

42

3. ผใชงานสามารถเลอก Printer ไดโดยกดปม ท�ชอง Printer จากนAนคลbกท�ไอคอน ท�ชอง Sample

Report template เพ�อเลอก Report Template

4. เลอก Report Template ตามท�ตองการแลวกด OK

โดยจะเลอก Multi Channel ในกรณท�ผใชงาน ใช Method ท�มมากกวา 1 ชองทางของสญญาณตรวจวเคราะห

และตองการใหผลการวเคราะหถกแสดงในทกชองทางการวเคราะห เชนตรวจวดท� 254 nm และ 260 nm ซ� ง

Report ท�ไดจะแสดงผลท�เกดจากการตรวจวดของทAงสองชองทาง

43

5. จากนAน Report จะปรากฏดงนA

6. ภายหลงจากการตรวจสอบ Report เพ�อความถกตอง ผใชสามารถบนทกหนา Report ดงกลาวไดในหลาย

รปแบบของการจดเกบใน Microsoft Office กลาวคอ ผใชงานสามารถเลอกท�จะบนทก Report ไดทAงในรป

Excel หรอ PDF หรอ Word File โดยไปท�ไอคอน Export แลวเลอกตามลกษณะไฟลท�ตองการจะบนทก

7. ผใชงานสามารถส�งปรAนท Report ไดท�หนานA โดยไปท� ไอคอน คาส�ง Print

44

8. ในกรณท�ผใชงานตองการ Report ท�แสดงขอมลครA งหลาย ๆ ตวอยางโดยสรป ผใชงานสามารถส�งการไดโดย

คลbกท� Batch Name ท�แผนภาพทางดานซาย

9. ไปท� File เมน แลวเลอก Print Preview Report

10. เลอก Printer ไดโดยกดปม ท�ชอง Printer vจากนAนคลbกท�ไอคอน ท�ชอง Sample Report template

เพ�อเลอก Report Template

45

11. เลอกรปแบบของ Report แลวกด OK

จะเหนวา Report Template ท�ปรากฏมาใหเลอกนAนจะเปน Report ประเภท Summary Report

12. จากนAน Report จะปรากฏดงนA

13. ผใชงานสามารถส�งปรAนท Report จากหนานAได ตามท�ไดกลาวไปแลวในขอ 6. และ 7.

46

7. การประมวลผลขอมลใหม (Reprocess)

การประมวลผลขอมลใหมสามารถชวยใหผใชงานสามารถนาผลการวเคราะหมาแกไขไดโดยไมตองทาการ

รนสารตวอยางหรอสารมาตรฐานซA า ซ� งจะชวยประหยดเวลาในการวเคราะหไดน�นเอง การประมวลผลขอมลใหม

สามารถทาไดดงนA

1. ไปท�หนา Reprocess

2. เปดชดขอมลท�ตองการจะ Reprocess

3. ตbกท�ชดขอมลท�ตองการจะ Reprocess แลวเลอก Open

4. ผใชงานสามารถเลอกไดวาจะให Chromera ทาการ Reprocess ผลใหโดยเร�มจากกระบวนการใด จาก

กระบวนการทAงหมด ตAงแตเร�มตน คอ blank จนกระท�ง Reporting โดยเล�อนลกศร ไดท�แถบ

Reprocess ดานบน ดงภาพ

47

5. เลอก Version ของ Method ท�ตองการจะนามาทา Reproces หากตองการใช Method เดมท�มากบผลการรน

นAน ๆใหเลอก Use Method Save with Results หรอหากตองการใช Method ท�มการแกไข ใหเลอก Use

Lastest Stored Version of Method.

6. สามารถให Chromera สรางชดขอมลท�ถกทาการ Reprocess นA ขAนมาใหมไดโดยเลอก Make new batch โดย

สามารถเลอกไดวาจะ Copy เฉพาะขอมลท�ถก Reprocess หรอ ขอมลทAง Batch

ในกรณท�ไมตองการสรางชดขอมลใหม ใหเลอก Update current batch-no new copy กระบวนการ Reprocess

ท�เกดขAนจะถกบนทกลงบนชดขอมลเดม

7. สามารถเลอก Reprocess เฉพาะบางชดขอมลใน Batch นAน ๆ ได โดยคลbก เลอกท�หนาขอมลท�ตองการจะ

Reprocess

8. เลอกชนดของขอมลใหตรงตามตองการท�ชอง Sample Type พรอมทAงเลอก Method ท�ตองการจะนามา

Reprocess ขอมล

ในกรณท�ตองการสราง หรอแกไข Calibration Curve ใหกาหนดระดบความเขมขนใหตรงกบความ

เขมขนท�สรางไวใน Method ท�ตองการจะใชกอนหนานA ท�ชอง Standard

48

9. เร�มตนการ Reprocess โดยคลbกท� Start Batch Reprocessing

10. หรอสามารถส�งให Chromera ทาการ Reprocess เฉพาะบางตวอยางได โดยใชเมาทลากไปท�แถบตวอยางใน

แถวท�ตองการ Reprocess แลวเลอก Start the sequence at the selected row

11. ขณะท� Chromera กาลงประมวลผลขอมลใหมอยนAน จะปรากฏแถบสเขยวบนชดขอมลท�กาลงถก Reprocess

อย

ขณะท�กาลง Reprocess ขอมลอยนAน ผใชงานสามารถ หยด หรอยกเลกกระบวนการ Reprocess นAนได

ทนท โดยคลbกท� หรอ เพ�อเปนการหยด หรอยกเลกกระบวนการตามลาดบ

12. หากตองการลบ Sample List ในหนานAออกใหเลอก Clear sequence and sample lists

49

13. ผใชงานสามารถเปดดขอมลท�ผานกระบวนการ Reprocess ไดในหนา Post Run ตามปกต โดยหากขอมลใดท�

ผานการ Reprocess มาแลว วนและเวลาท�ถก Reprocess จะถกระบท�ชอง Reprocessed ในหนา Data Selector

ในกรณท�มการสราง ชดขอมลใหม ผใชงานจะเหนชดขอมลเพ�มขAนโดยมคาวา -Copy พรอมทAงวนและ

เวลาท�ถก Reprocess หอยทายช�อ Batch นAน ๆ

50

8. การสรางและแกไข Report

1. ไปท� Tools เมน แลวเลอก Report Format Wizard

2. เลอก Report Format ท�ตองการจะนามาแกไข หรอเลอก Create a new report format ในกรณท�ตองการสราง

Report Format ใหม แลวกด OK

51

3. หนา Chromera Report Format จะปรากฏขAน

ตAงคาหนากระดาษของท�หนา Page Setup

4. ตAงคาท�หนา Page Header/Footer

52

5. ตAงคาท�หนา Title

6. ตAงคาท�หนา Data Header

53

7. ตAงคาท�หนา Plot Options

8. ตAงคาท�หนา Peak Table

54

9. ตAงคาท�หนา Signature

10. ใสช�อ Report Name พรอมทAงระบ Group Name ซ� งเปนท�อยของ Report Format ท�สรางขAนนA ในหนา Finish

ผใชงานสามารถดตวอยางหนา Report Format ท�สรางขAนไดโดยคลbกท�

เม�อเสรจสAนการสราง Report Format กด Finish