Upload
nguyenmien
View
231
Download
0
Embed Size (px)
Citation preview
ChemiDoc™ MP
Imaging
Confidence in every step of your imaging workflow.
システム
ChemiDoc™ MPシステム進化を遂げたゲル・Western Blotting 画像撮影解析システム
20年以上にわたりバイオ・ラッドのMolecular Imagerシステムは、高品質な
画像撮影解析装置として世界中の研究者の方々に利用いただいております。
これまでにバイオ・ラッドの装置を用いた画像や解析結果は、多くの学術誌
論文に掲載されています。
ChemiDoc MPシステムは、従来のChemiDoc XRS Plusシステムをご利用いただいて
いる研究者の方々からのご要望を色濃く反映し、進化したゲル・Western Blotting
用画像撮影解析システムです。
進化したChemiDoc MPシステムは、さらなる使い易さを追求し、高感度ケミルミ
検出、様々な蛍光検出に対応し、アプリケーションの幅を広げます。またバイオ・ラッド
独自のStain-Freeゲルを用いたWestern Blottingの新しい定量ノーマライゼーショ
ン V3 ワークフローにベストマッチします。
ChemiDoc MPシステムの特長★高感度検出従来のChemiDoc XRS Plusシステムを改良し、さらなる高感度な化学発光検出を実現します。
★蛍光Western Blottingに対応赤・緑・青の落射LEDの搭載により、様々な蛍光検出に対応し、蛍光アプリケーションの幅を広げます。さらに、専用撮影・解析ソフトウェアImage Labにより、複数のターゲットタンパク質を同時検出するマルチ蛍光Western Blottingを強力にサポートします。
★Western Blottingの新しい定量ノーマライゼーション V3 ワークフローにベストマッチV3 ワークフローはバイオ・ラッド独自のStain Free TGXゲルによる精度の高い、簡便な定量ノーマライゼーションを実現します。ハウスキーピングタンパク質や総タンパク質を用いた相対定量は、V3 ワークフローにより革新されます。
www.bio-rad.com
30 20 15 10 7.5 5.0 3.8 2.5 1.9 1.3 0.63 0.31 0.15 0.08
170
30
131
29
121
28
114
28
95
27
93
27
85
26
60
24
58
23
48
26
47
22
34
19
32
19 17 14
180.0
160.0
140.0
120.0
100.0
80
60
40
20
0
Sample load, ng
SN比
優れた検出感度ChemiDoc MPシステムを用いた化学発光検出は、従来のX線フィルムを用いた検出に比べ、定量性高く、再現性良く検出することができます。さらにX線フィルムや現像液などのランニングコストを無くし、廃液や暗室スペースの問題から開放されます。また、ChemiDoc MPシステムはこれまでの撮影ノウハウを活かし総合的な改良を加えることで、高感度な化学発光検出を実現し、Western Blottingを強力にサポートします。
ChemiDoc MPシステムおよびX線フィルムを用いた検出比較例
ChemiDoc MPシステム X線フィルム
Fig. 1ChemiDoc MPシステムおよびX線フィルムを用いた検出比較例サンプル:トランスフェリン露光時間:10秒
Fig. 1A ChemiDoc MPおよびX線フィルムにおける定量比較例
Film
ChemiDoc MP imaging system
Sample load, ng
Fig. 1B ChemiDoc MP およびX線フィルムにおける検出画像例
Bio-Rad Laboratories, Inc.
SUPERIOR SENSITIVITY
様々な化学発光検出装置を用いた検出比較例(5分露光例)
ChemiDoc MPシステム
Fig. 2A 様々な化学発光撮影装置による定量比較例
Competitor 1 Competitor 2 Competitor 3
LED well 2 4
22.1 21.6 20.3 20.2
6.2 6.6 7.5
1.9 2.0 3.6 4.1
0.7 0.9
5.9
90.7 89.8
SN比
100
90
80
70
60
50
40
30
20
10
0
Fig. 2様々な化学発光撮影装置を用いた検出例サンプル:化学発光ターゲットプレート露光時間: 5分
1 3
Competitor 2
Competitor 1 Competitor 3
ChemiDoc MPシステム
1 2 3 4 1 2 3 4
Fig. 2B 様々な化学発光撮影装置による検出画像
ChemiDoc MP Imaging System
www.bio-rad.com
優れた検出画像ChemiDoc MPは特許技術のフォーカスキャリブレーションテクノロジーにより、あらゆるズームレベルにおけるピント調整が自動でされ、個人差のない再現性高い画像撮影を実現します。また、メンブレンやゲルの薄いバンドから濃いバンドを幅広いダイナミックレンジで撮影することが可能です。さらに、搭載された検出フィルターは搭載のLEDに最適化され、クロストークを最小限にすることで、定量性の高い画像撮影が可能です。
Fig. 3 1-D CBB染色ゲル検出画像
Fig. 5 DyLight 488, 549, 649ラベル抗体を用いて検出された蛍光マルチWestern Blotting検出例
Fig. 4 化学発光ELISAアレイ検出画像96ウェルプレートの1ウェル内に固相化された16種類のターゲットに対する抗体を用いて検出した例
Bio-Rad Laboratories, Inc.
EXCEPTIONAL IMAGE QUALITY
Cross-talk Cross-talkCorrect Correct
Cross-talk Cross-talkCorrect Correct
FAM A488 Cy3 A546 FAM A488 Cy3 A546
CCroossss-ttaalk CCoorreecctt
FAFF M A488 Cy3 A546
CCroossss-ttaalkCCoorreecctt
FAFF M A488 Cy3 A546
CC
32.5%
FAM
21.3%
A488
100%
Cy3
100%
A546
12.4%
FAM
7.6%
A488
100%
Cy3
100%
A546
CCroossss-ttaalk CCoorreecctt
2.3
FAM
1.1%
A488
100%
Cy3
100%
A546
100%
FAM
100%
A488
9.7%
Cy3
6.1%
A546
100%
FAM
100%
A488
0.2%
Cy3
0.0%
A546
CCroossss-ttaalkCCoorreecctt
100%
FAM
100%
A488
0.1%
Cy3
0.0%
A546
32.5% 21.3% 100% 100% 100% 100% 9.7% 6.1%
12.4% 7.6% 100% 100% 100% 100% 0.2% 0.0%
2.3 1.1% 100% 100% 100% 100% 0.1% 0.0%
蛍光間のクロストーク例
緑色検出例 青色検出例
ChemiDoc MPシステム
Competitor 2
Competitor 1
Fig. 6A 検出数値例
Fig. 6様々な撮影装置における青色・緑色LEDを用いた蛍光ラベルサンプルの検出例サンプル:FAM, Alexa Fluor 488, Cy3, Alexa Fluor 546ラベルタンパク質
Fig. 6B ゲル検出画像
ChemiDoc MP Imaging System
www.bio-rad.com
優れた拡張性ChemiDoc MPシステムは、様々なアプリケーションや検出方法に対応することができる、マルチなイメージングシステムです。タンパク質・DNA電気泳動ゲルに用いられる様々な染色剤の検出から、Western Blottingの様々な検出法までフレキシブルに対応可能です。さらにImageLabソフトウェアにより、多色で検出された複数枚のイメージを1つのファイルに統合し、解析・保存することが可能です。
Fig. 7ImageLabソフトウェアによるマルチ蛍光Western Blottingにおけるメンブレン撮影例サンプル:Alexa Fluor 488, Alexa Fluor 555, Aleza Fluor 647ラベルサンプル
Bio-Rad Laboratories, Inc.
UNMATCHED APPLICATION VERSATILITY
Fig.8ChemiDoc MPシステムを用いた様々な検出画像例
DIGE ゲル EtBr 染色ゲル GelRed 染色ゲル
銀染色ゲル
Flamingo 染色ゲル Stain Free 染色ゲル SYBR Green 染色ゲル
SYPRO Ruby 染色ゲルCBB 染色ゲル
ChemiDoc MP Imaging System
www.bio-rad.com
追究された使い易さChemiDoc MPシステムは、特別なトレーニングなく、どなたでも簡単にハイクオリティーな画像のイメージングから解析を可能にします。本システムは面倒なカメラ調整(ピント調整・ズーム調整・絞り調整)やサンプルの高さ調整、検出フィルターの設定を必要とせず、サンプルをセットしてから瞬時に撮影を開始することができます。また、専用ソフトウェアImage Labにより機器のコントロールから、解析、レポーティング、印刷までを自動的に行うことができ、ルーティンワークを強力にサポートします。
Fig. 9A 使用するアプリケーションや染色剤や蛍光色素をソフトウェアで選択すると自動的に光源、フィルターが最適な設定に切り替わります。
Fig. 9B ChemiDoc MPシステムは使用するズームレベルで自動的にピント調整され、カメラレンズの調整をマニュアルで行う必要がありません。
Bio-Rad Laboratories, Inc.
EASE OF USE
Autofocus
Autoexposure
Autoanalysis
Autoreports
Autooverlay
Autosetup
Autoprint
ChemiDoc MP Imaging System
www.bio-rad.com
Visualize
Stain-Free gel
Verify
Stain-Free blot
Validate
Total protein quantification
Protein of interest probed with Alexa Fluor 649
Stain-in-FFrree ee g t
Proteein n in of o intnteerestttt p prob ith AAlexa FlFluor 649beed wd id
TTootal pTTTT roteotein quantification
P t i f ii t ttt b ith AAl Fl 649b dd id
Western Blottingの新しい定量ノーマライゼーション V3 ワークフローStain-Freeテクノロジーは、バイオ・ラッド独自の従来の染色操作を行わず、タンパク質を可視化する新しい技術です。
V3 ワークフローは、3つのステップVisualize(電気泳動の確認)/ Verify (転写操作の確認)/ Validate (総タンパク質の定量) から成ります。本ワークフローは、Western Blottingにより検出される目的タンパク質を、総タンパク質量により定量ノーマライゼーションする、簡便・かつ正確な相対定量を実現します。
転写前のStain-Freeゲル中のタンパク質を
迅速に可視化し、電気泳動の状態を確認し
ます。
ブロッティング検出前のメンブレン上に転写
されたタンパク質およびゲル中に残ったタン
パク質を検出し、実験の確実性を高めます。
専用のImageLabソフトウェアを用い、メンブレン上
の総タンパク質の定量、および目的タンパク質
の定量を行い、サンプル間のノーマライゼー
ションを行い、相対定量を行います。
Bio-Rad Laboratories, Inc.
STAIN-FREE ENABLED
40 20 10 5 2.5
Protein load, µg
40 20 10 5 2.5
Protein load, µg
1.0 x 107
8 x 106
6 x 106
4 x 106
2 x 106
0
Tota
l pro
tein
sig
nal inte
nsi
ty
R2 = 0.9867
40 20 10 5 2.5
Protein load, µg
ein load ein load
6.0 x 107
5.0 x 107
4.0 x 107
3.0 x 107
2.0 x 107
1.0 x 107
0
Tub
ulin
sig
nal inte
nsi
ty
R2 = 0.9901
40 20 10 5 2.5
Protein load, µg
40 20 10 5 2 540 20 10 5 2 5
Tubulin
サンプル:HEK293 Lysate
検出抗体:Alexa Fluor 649ラベル抗Tubulin抗体
Stain-Free total protein
サンプル:HEK293 Lysate
検 出:ChemiDoc MPによるStain-Free検出
■■
■■
Stain-Freeによる総タンパク質定量ノーマライゼーション:ハウスキーピングタンパク質との比較
総タンパク質ノーマライゼーション法の利点これまでWestern Blott ingの定量ノーマライゼーションは、
β―Tubu l inのようなハウスキーピングタンパク質(HKP)を
用いて行われてきました。このプロセスは、たいていの場合
目的のタンパク質を抗体で検出した後、反応抗体を剥がし取る
ストリッピング処理を行った後、HKPを再度抗体により検出
することで行われています。このストリッピングを用いた手
法は時間的な問題や、処理法の最適化など、いくつかの問題
をかかえています。
Stain Freeゲルテクノロジーを用いたV3定量ノーマライゼー
ションはこれらの問題を解決し、簡便な定量性高いウェスタン
ブロッティングを実現します。
信頼性高い結果が得られます
HKPを用いたノーマライゼーションは、サンプル種や実験条件に
よって発現量の変動があり、結果に影響を与えることがあります。
一方総タンパク質量は変動が少なく一定したノーマライズを実現
します。
時間を節約します
Stain-Freeゲルを用いた総タンパク質定量はわずか数分で行うこと
ができます。
シグナル強度とタンパク質アプライ量の相関 Stain-Freeゲルを用いた総タンパク質の定量性は、Tubulinを用いたHKPによる定量結果に対し同等以上の結果が得られます。
Tubulin Stain-Free total protein
ChemiDoc MP Imaging System
www.bio-rad.com
機器の概要個々の蛍光検出に対し、励起・検出用フィルターが最適化され、使用アプリケーションに合わせ最適条件が自動選択されます。
Red
Cy5, Cy5.5, Alexa Fluor 647,
Alexa Fluor 680,
DyLight 649, DyLight 680, IRDye 680.
Green
Cy3, Flamingo, Krypton,
Pro-Q Diamond, Alexa Fluor 546,
DyLight 549, Rhodamine.
Blue
Cy2, Coomassie Fluor Orange,
Alexa Fluor 488, DyLight 488,
Pro-Q Emerald 488, Qdot 523, Qdot 605,
Qdot 625, Qdot 705.
Bio-Rad Laboratories, Inc.
INSTRUMENT TOUR
Go to www.bio-rad.com/chemidocmp
to see the complete ChemiDoc MP video.
冷却CCDカメラズームレベルに合わせ自動ピント調整され、カメラの調節を必要としません。高感度な検出・高いイメージングを実現します。
タッチパッドマニュアルで落射白色やトランスイルミネーターの光源のON/OFFが可能です。ゲルの切り出しやサンプルセッティングに使用します。
マルチプレックス蛍光イメージングLEDはウェスタンブロッティングに最適化され、アプリケーションや蛍光物質に合わせて自動で最適な光源による検出を行います。
サンプルトレイゲルおよびメンブレンの検出条件に合わせフレキシブルにトランスイルミネーションの光源をUV、白色、青色へ変更可能です。
自動フィルター切り替えホイール使用アプリケーションや蛍光物質に合わせ最適なフィルターに自動切換えされます。
ChemiDoc MP Imaging System
バイオ・ラッド ラボラトリーズ株式会社
http://discover.bio-rad.co.jp東京都品川区東品川2-2-24 TEL 03-6361-7000 FAX 03-5463-8480
大阪市淀川区新北野1-14-11 TEL 06-6308-6568 FAX 06-6308-3064 福岡市博多区博多駅東2-5-28 TEL 092-475-4856 FAX 092-475-4858*学術的お問い合わせは TEL 03-6404-0331 FAX 03-6404-0334
※価格、仕様などは予告無く変更することがありますので、ご了承ください。※価格は2011年12月現在のもので、メーカー希望小売価格(税別)です。※本カタログに記載している会社名、商品名は各社の商標または登録商標です。
取扱店
ライフサイエンス事業部
本 社大阪営業所福岡営業所
〒140-0002〒532-0025〒812-0013
仕 様本体カメラ 冷却 CCDカメラ冷却方式 ペルチェ冷却冷却温度 -30℃ダイナミックレンジ 4.0 Orderピクセルサイズ 6.45 μ m x 6.45 μ m階調数 16 bit(65,535 gray level)ビニング機能 1x1, 2x2, 3x3, 4x4レンズ ズームレンズレンズ制御 リモート制御ピント調節 自動
光源
透過UV(標準:302nm, オプション:254/365nm)落射白色光源(標準)透過白色光源(オプション 白色コンバージョンスクリーン)透過青色光源(オプション XcitaBlue コンバージョンスクリーン)落射赤色光源(オプション epi-red LED)落射緑色光源(オプション epi-green LED)落射青色光源(オプション epi-blue LED)
撮影光源切り替え 自動透過光源モジュール 引き出し式透過UVフィルター装着数 6 枚(5枚 : フィルター装備用、1枚 : ケミルミ用)撮影フィルター切り替え 自動検出フィルター 標準 EtBr 用(オプション 5 種)取り込み画像の均一性 CV =< 5%(Flat Fielding 使用時)最大撮影サイズ 26 x 35 cm(トランスイルミネーター適応範囲:25 x 26cm)本体サイズ 60.0(W) x 36.0(D) x 110.0(H)cm本体重量 37.0kg消費電力 キャビネット:315W、カメラ:150Wソフトウェアコントロール・解析用ソフトウェア Image Lab ソフトウェア(Windows/Macintosh 対応)撮影モード Multi Channel 撮影モード、Single Channel 撮影モード解析モード 自動解析モード、マニュアル解析モード、多重染色解析モードプロテクションキー なし
Ordering Infomationカタログ番号 製 品 名 価 格170-8280J1 ChemiDoc MP ImageLab PCシステム ¥5,250,000
構成品:本体、コンピューター(デスクトップ : Windows)、モニター、電源装置、ImageLabソフトウェア170-8283 epi-red LED/フィルターセット ¥550,000
構成品:epi-red LED(2)、専用フィルター(1)170-8284 epi-green LED/フィルターセット ¥550,000
構成品:epi-green LED(2)、専用フィルター(1)170-8285 epi-blue LED/フィルターセット ¥550,000
構成品:epi-blue LED(2)、専用フィルター(1)170-8182 XcitaBlueコンバージョンスクリーン ¥120,000170-8184 ゲルアライメントテンプレート ¥30,000170-8001 白色コンバージョンスクリーン ¥100,000
C10404 1112A