Centro Nacional de Transfusión Sanguínea- MSP y BS B BUENAS PRACTICAS EN LA PREPARACION Y CONTROL DE CALIDAD DE HEMOCOMPONENTES Mg Dra. Elsi Vargas de

Centro Nacional de Transfusión Sanguínea- MSP y BS

BBUENAS PRACTICAS EN LA PREPARACION Y CONTROL DE

CALIDAD DE HEMOCOMPONENTES Mg Dra. Elsi Vargas de Salinas

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LA SANGRE Y SUS COMPONENTES

La sangre es un órgano líquido con las siguientes funciones :

Transporte de nutrientesTransporte de gases de la respiracion O2 y CO2

Transporte de substancias a ser excretadasTransporte de hormonasRegulacion de la concentracion de electrolitosSistema imunológico y fagocitosisCoagulación


O sangue e seus componentes

LA SANGRE CONTIENE COMPONENTES SÓLIDOS Y LÍQUIDOS:

Sangre

Células Plasma

Eri

tró

cito

s

Leu

cóci

tos

Tro

mb

ócito

s

Ag

ua

Pro

teín

as

Ele

ctro

lito

s


Plasma Un litro de plasma normalmente contiene:900 ml de água65 a 80 g de proteínas (albumina e globulinas)9 g de eletrólitosAdicionalmente gorduras, carboidratos, vitaminas, hormônios, etc. Funciones del plasma:Transporte de células sanguíneas y nutrientesControl del balance hidro-eletrolíticoSoporte del sistema imunológico (anticuerpos)Suplemento de factores de coagulación necesários para el processo de hemostasia


Propiedades de los eritrócitos - Discos biconcavos, redondeados y sin núcleo - Producidos en la médula ósea - Vida media de 120 días - Coloración roja resultante del contenido de hemoglobina

Funciones -Transporte de oxigeno (y dióxido de carbono). - Controle del nível de pH de la sangre

Hematócrito = volume de eritrócitos en relación al volumen de sangre totalValor médio para hombres 47 % y mujeres 40 %

ERITROCITOS (Glóbulos Rojos)


Leucocitos (glóbulos blancos) Propiedades de los leucocitos Células nucleadas Diferenciación en linfócitos (L)granulócitos (G), monócitos (M) Vida media: algunos dias a varios años Funciones de los leucocitos: Protección contra agentes infecciosos – fagocitosis y producción

de anticuerpos (inmunización) Remoción de las células muertasLos leucocitos son los transportadores del sistema HLAresponsable de la incompatibilidad de la transfusión o transplante.


Trombocitos (plaquetas)

Propiedades de las plaquetas: Células discóides y sin núcleos Producidas en la médula ósea Vida media de 8 a 14 días

Funciones de las plaquetas: Coagulación de la sangre


Factores que influencian en la calidad de los hemocomponentes

1- LA COLECTA Homogenización de la sangre con el anticoagulante Estandarización del volumen y el tiempo de colecta 2- REFRIGERACION DE LA SANGRE

Pre-almacenamiento y antes de la separación de los hemocomponentes

3- PREPARACION Tipo de bolsa – convencional o TAB Separación manual o automatizada Remoçión de los leucocitos por filtración Congelamiento del plasma

4-ALMACENAMIENTO


1- LA COLETA DE SANGRE La colecta de sangre total de un donante debe ser realizada en 12 minutos

A-Tiempo de donación < 12 1/2 minutosIndicada para todos los componentesB-Tiempo de donación > 12 1/2 minutos y < 20 minutosNo es indicada para separación de plaquetas% de FVIII en el plasma es menor que lo normalC-Tiempo de donación > 20 minutosNo es indicada para la separación de componentes


Homegeneización de la sangre durante la colecta Prevenir a la formación de trombina Consumo de factores de la coagulación Activación de plaquetas Tipos de agitación Manual Mecánica *Control del volumen *Control del tiempo y flujo -Tiempo de colecta < 12 minutos Homogeneizar la sangre contenida en el plato de coleta con el

contenido de la bolsa manualmente .

1- LA COLETA DE SANGRE


Tiempo y temperatura de almacenamiento pre-procesamiento

Procedimiento 1: Enfriar la sangre total a 4 °C lo mas rápido posible .

– Crioprecipitación de Factor VIII y sedimentación con los hematíes– Activación de las plaquetas

Procedimiento 2: Enfriar la sangre total a 20-24 °C después de la colecta

– Enfriamiento con agua fría o butano-1,4-diol (2 horas)

Tiempo de almacenamiento– Procesamiento inmediato: activación de las plaquetas y baja

estabilidad de los hemocomponentes. Problema logístico para unidades externas

– 4 a 6 horas: no afecta el almacenamiento de los hematíes (nivel de 2,3-DPG). Leucócitos presentes actúan como agentes bactericidas en este periodo (reducción de la contaminación bacteriana)

– > 8 horas: deplección de 2,3-DPG y Factor VIII


Sistemas de bolsas de sangre ((T&T) Bolsa simplesColecta de sangre total con agente preservante (CPDA-1).

Bolsa doblesSeparación de plasma y hematíes (contiene buffy coat).

Bolsas triplesPreparación de plasma, hematíes y plaquetas de plasma rico en

plaquetas ( PRP).

Bolsas cuadruplesPreparación de plasma,hematíes y plaquetas de buffy coat


Sistemas Top and Bottom (T&B) Diferente a los sistemas convencionales (T&T),los sistemas T&B

contienen tubos de salida en la parte superior e inferior de la bolsa principal.

Despúes de la centrifugación , el plasma es extraído por el tubo superior y los hematíes son trasferidos para una bolsa satélite por el tubo inferior.

El buffy coat permanece en la bolsa. Consecuentemente el número de leucocitos en el concentrado de hematíes es menor que del sistema T&T.

E

LT

P


Soluciones artificiales para conservación de células

Tipos de Soluciones SAGM (Salina, Adenina, Glucosa y Manitol) PAGGSM (Fosfato, Adenina, Glucosa, Glutamina, Sorbitol y Manitol)(SAG-M)Ventagas Prolonga el tiempo de almacenamiento a 42 días. Reduce la viscosidad mejor fluidez durante la transfusión. Disminuye la contaminación del CGR por plasma disminuyendo asi la

incidencia de reacciones alergicas. Permite mayor libertad en la selección de GRC para la transfusión,

evitando los problemas de transmisión de anticuerpos anti-A y anti-B a receptores que poseen los respectivos antígenos en sus hematíes.

Aumenta el rendimiento del plasma, sin contaminación con nutrientes para hematíes .


INFLUENCIA DE LA PERMEABILIDAD DEL PLÁSTICO SOBRE LAS PLAQUETAS

GLUCOSA

DIOXIDO DE CARBONO

CO2

CO2

CO2

CO2

O2O2

BOLSA PERMEABLE: ADECUADO FORTALECIMIENTO DE OXIGENO

BOLSA PERMEABLE: ADECUADO FORTALECIMIENTO DE OXIGENO

MANTENIMIENTO DE LA CONC. DELBICARBONATO Y DEL PH

MANTENIMIENTO DE LA CONC. DELBICARBONATO Y DEL PH


Desafios da Sorologia

GLUCOSA

ACÍDO LÁCTICO

BOLSA IMPERMEABLE EL NUMERO EXCESIVODE CÉLULAS: DISPONIBILIDAD DE OXIGENO

BOLSA IMPERMEABLE EL NUMERO EXCESIVODE CÉLULAS: DISPONIBILIDAD DE OXIGENO

CONSUMO DE BICARBONATO Y REDUCCIÓN DEL pH

CONSUMO DE BICARBONATO Y REDUCCIÓN DEL pH


¿Porqué la sangre se centrifuga? Es posible transfundir la sangre a los pacientes como sangre total .

Pero hay muchas buenas razones para transfundir solamente hemocomponentes

Los componentes son transfundidos de acuerdo a la necesidad de los pacientes.

Se evita la transferencia de sustancias innecesarias y perjudiciales reducción de riesgo de reacciones transfusionales

El almacenamiento de componentes individuales puede ser optimizada

Hematiés: 2 a 6°C, Plaquetas: 20 a 24°C,Factores da coagulación y proteínas plasmáticas: 18°C

La separación de la sangre nos da la posibilidad de usar una única donación para atender diversos pacientes


Centrifugación -principio VSEDIMENTACIÓN ~ r2 (dcélula -dplasma)

n

r = radio de la célula, n= viscosidad del medio y d =densidad

PLAQUETA HEMATÍE GRANULOCITO

VELOCIDAD DE SEDIMENTACION

FUERZA DE SEPARACIÓN DEL PLASMA


El proceso de centrifugación Los componentes de la sangre pueden ser separados

porque ellos difieren en tamaño y densidad.

P T

L E

x gP

T

L

E

x g

E

LT

P

Buffycoat

P = plasma; T = trombócitos; L = leucocitos; E = eritrócitos


CentrifugaciónLos problemas con las bolsas de sangre en las centrífugas

resultan de su flexibilidad, del volumen y del manoseo de las bolsas satélites.

Una serie de combinaciones de factores que influencian la centrifugación torna imposible contar con reglas generales.

El tipo de centrífuga y sus accesorios Parámetros de centrifugación Tipo de bolsa de sangre Volumen de sangre Técnica de empaque en llos vasos de la centrifuga Balanceamiento


Arranjos na caçapa

Diferentes radios en bolsas acomodadas en un vaso doble, a baja velocidad de centrifugación.

Bolsas quedan acomodadas en el medio y las bolsas satélites en la parte externa.

Alta velocidad Baja velocidad


Balanceamiento de los vasos Una centrifugación suave depende del balanceamiento de peso

en los vasos localizados en posición opuesta. Cuanto mayor es la diferencia, mayor es la vibración.

La diferencia de peso no debe pasar más de 5 a 6 g.

Número ímpar de bolsas usar bolsas llenas de agua para contra-balancear.

Es útil la pre-selección de bolsasde sangre en grupos de pesos similares.

Usar laminados de bolsas que no fueron utilizadas como pesos.


Consejos para el empaquetado

Las etiquetas deben ser colocadas contra las paredes del vaso. Los sellos de las bolsas no deben ser doblados hacia abajo,

evitando así la apertura de la misma. Los sellos no deben estar situado en la parte inferior del vaso. Los tubos no deben exceder el límite del vaso, ya que se

pueden romper. No se debe envolver los tubos alrededor de las bolsas debido

a posibles derramamientos , se los debe posicionar entre las bolsas.


Empaquetamiento – sistema de bolsa triple (1)


Empaquetamiento – sistema de bolsa triple (2)


Centrifugaçión pesadaCentrifugaçión pesada para la preparación de plasma,

buffy coat y hematíes:

Aceleración: média Desaceleración: baja – media RCF: 2900 – 4000 xg Tiempo: 10 – 15 min Temperatura: + 22 °C

1a. Etapa en la preparación de plaquetas de buffy coat.


Centrifugación leveCentrifugación leve para a preparación de plasma rico

en plaquetas (PRP)

Aceleración: media Desaceleración: baja RCF: 380 - 450 x g Tiempo: 5 - 10 min Temperatura: + 22 °C

2a. Etapa en la preparación de plaquetas de buffy coat.


Recomendaciones La centrifugación es un stress para todas las células.

Por lo tanto, si es posible...

...es mejor tiempos de centrifugación más largos y menos fuerza de centrifugación.

...deje las plaquetas en reposo como mínimo una hora después de cada centrifugación.

Cuanto más estable es el posicionamiento de las blosas en el vaso , mejor el resultado de sedimentación.

Cuando el empaquetamiento es muy apretado puede causar turbulencias en la capa sedimentada al retirar las bolsas del vaso.


Sistemas para la preparación de hemocomponentes

SANGRE TOTALPARA METODO PRP

CENTRIFUGACION LEVE

PRP CH

CENTRIFUGACION PESADA

PPPCP

POOL DE 4 - 6 CPs

CH-BC

BC INDIVIDUAL

TAB CUADRUPLEa


BC PPP

CENTRIFUGACION LEVE

CP BC residual

SANGRE TOTALPARA METODO BC


TAB TRIPLE

CH-BC BC PPP

Pool 4 - 5 BC

CENTRIFUGACION LEVE

CP BC residual

POOL BC

PRP = plasma rico em plaquetas; CH = concentrado de hematies; CH-BC = conc. de hematies depletado de buffy-coat; BC = buffy-coat; CP = concentrado de plaquetas


Procesos de fraccionamiento

Colecta Almacenamiento

Acomodacion

SeparacionCentrifugacion


CALIDAD DE LOS C. PLAQUETAS

Método Plasma extra (ml)

Recuperação plaquetas

(%)

Plaquetas / unidade

Leucócitos / quantidade de plaqueta

PRP 0 60-75 > 5,5 x 1010 em 100%

1-2/1000

CP single BC

30 40-60 > 5,5 x 1010 em 75%

1-2/10.000

CP pool BC 75 60-75 > 2,5 x 1011 <1-2/100.000


CALIDAD DE LOS HEMATIESMétodo Volume (ml) Hematócrito

(%)Leucócitos / unidade (%

da contagem inicial)

Validade

PRP (tripla CPDA-1)

280 50 65 – 75 > 90% 35 dias

Buffy-coat (tripla ou quádrupla TAB)

280 50 50 – 70 < 30% 42 dias


Los bancos de sangre de todo el mundo estan cada vez más empeñados en mejorar su eficiencia y calidad con la automatización total de sus procesos de producción y flujo de información.


Muchas gracias !

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