基金项目：国家自然科学基金项目（２１５６５００５）；甘肃省自然科学基金

项目（１５０６ＲＪＺＡ０３３）；兰州市科技计划基金（２０１６－３－３６）

作者简介：宋爱英（１９７７－），男，博士，副教授，主要从事药品、毒

品和毒物的分析研究。

·论　著·

中空纤维液相微萃取 －气相色谱法检测感冒药中的咖啡因

宋爱英１，魏琳琳２，王健康３，曾俊菱１，石恩林１

１．甘肃政法学院公安技术学院，甘肃 兰州 ７３００７０；２．甘肃省疾病预防控制中心，甘肃 兰州 ７３００２０；３．中科院兰州化学物理研究所，甘肃 兰州 ７３００００

摘要：目的　以中空纤维液相微萃取（ＨＦ－ＬＰＭＥ）为前处理技术，结合气相色谱（ＧＣ）建立感冒药中咖啡因的分析方法。方法　取适量经仔细研磨的样品在超声和磁力搅拌下溶解于１００ｍｌ去离子水，再用浸渍过甲苯的ＡｃｃｕｒｅｌＱ３／２聚丙烯中空纤维作为保护装置，以三氯甲烷为萃取溶剂，对样品溶液中的咖啡因进行萃取和富集，萃取物直接上ＧＣ进行色谱分析。结果　实验优化的样品萃取条件：ｐＨ≈７，萃取时间为 １０ｍｉｎ，盐度（以ＮａＣｌ为无机盐）为３０％，萃取温度为２５℃，搅拌速率为６００ｒ／ｍｉｎ，萃取溶剂为３μｌ，萃取后取２μｌ萃取剂进行色谱分析。本方法检出限（ＬＯＤ）为０．３ｍｇ／Ｌ，定量限（ＬＯＱ）为１ｍｇ／Ｌ，加标回收率为９１％～１０８％，相对标准偏差（ＲＳＤ）为４．７％～７．３％（ｎ＝５），线性范围为１ｍｇ／Ｌ～１００ｍｇ／Ｌ，相关系数为０．９９８。结论　本方成本低廉、快速、准确，可用于对感冒药品中咖啡因的分析测定。关键词：液相微萃取；中空纤维；咖啡因；气相色谱；感冒药

中图分类号：Ｏ６５７．７＋１　　　文献标识码：Ａ　　　文章编号：１００４－８６８５（２０１７）１３－１８３４－０４

Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｃａｆｆｅｉｎｅｉｎｃｏｌｄｍｅｄｉｃｉｎｅｕｓｉｎｇｈｏｌｌｏｗｆｉｂｅｒｌｉｑｕｉｄ－ｐｈａｓｅｍｉｃｒｏｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｃｏｍｂｉｎｅｄｗｉｔｈｇａｓｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ

ＳＯＮＧＡｉ－ｙｉｎｇ，ＷＥＩＬｉｎ－ｌｉｎ，ＷＡＮＧＪｉａｎ－ｋａｎｇ，ＺＥＮＧＪｕｎ－ｌｉｎｇ，ＳＨＩＥｎ－ｌｉｎＳｃｈｏｏｌｏｆＰｕｂｌｉｃＳｅｃｕｒｉｔｙａｎｄＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，ＧａｎｓｕＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＰｏｌｉｔｉｃａｌＳｃｉｅｎｃｅａｎｄＬａｗ，Ｌａｎｚｈｏｕ，Ｇａｎｓｕ７３００７０，Ｃｈｉｎａ

Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ　Ｔｏｄｅｖｅｌｏｐａｎｅｆｆｉｃｉｅｎｔｍｅｔｈｏｄｆｏｒｔｈｅｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｃａｆｆｅｉｎｅｉｎｃｏｌｄｍｅｄｉｃｉｎｅｂｙｃｏｍｂｉｎｉｎｇｈｏｌｌｏｗｆｉｂｅｒ－ｂａｓｅｄｌｉｑｕｉｄ－ｐｈａｓｅｍｉｃｒｏｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ（ＨＦ－ＬＰＭＥ）ｗｉｔｈｇａｓｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙ（ＧＣ）．Ｍｅｔｈｏｄｓ　Ｔｈｅｃｒｕｓｈｅｄｓａｍｐｌｅｗａｓｆｉｒｓｔｄｉｓｓｏｌｖｅｄｉｎｔｏ１００ｍｌｄｅｉｏｎｉｚｅｄｗａｔｅｒｕｎｄｅｒｕｌｔｒａｓｏｎｉｃａｎｄｓｔｉｒｒｉｎｇｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ．Ｔｈｅａｎａｌｙｔｅｃａｆｆｅｉｎｅｗａｓｔｈｅｎｅｘｔｒａｃｔｅｄｆｒｏｍｔｈｅａｓ－ｐｒｅｐａｒｅｄｓａｍｐｌｅｓｏｌｕｔｉｏｎｂｙｈｏｌｌｏｗｆｉｂｅｒ－ｐｒｏｔｅｃｔｅｄｌｉｑｕｉｄ－ｐｈａｓｅｍｉｃｒｏｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｕｓｉｎｇｃｈｌｏｒｏｆｏｒｍａｎｄＡｃｃｕｒｅｌＱ３／２ｐｏｌｙｐｒｏｐｙｌｅｎｅａｓｏｒｇａｎｉｃｓｏｌｖｅｎｔａｎｄｆｉｂｅｒ，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．Ｔｈｅｃａｆｆｅｉｎｅｏｆｓｏｌｕｔｉｏｎｓａｍｐｌｅｓｗａｓｃｏｎｄｕｃｔｅｄｆｏｒｅｘｔｒａｃｔｉｏｎａｎｄｅｎｒｉｃｈｍｅｎｔ，ａｎｄｔｈｅｅｘｔｒａｃｔａｎｔｗａｓｄｉｒｅｃｔｌｙｃｏｎｄｕｃｔｅｄｆｏｒｔｈｅＧＣｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｉｃａｎａｌｙｓｉｓ．Ｒｅｓｕｌｔｓ　Ｔｈｅｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓｗｅｒｅｏｐｔｉｍｉｚｅｄ，ａｎｄｔｈｅｏｐｔｉｍｕｍｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓｗｅｒｅｏｂｔａｉｎｅｄａｓｆｏｌｌｏｗｓ：ｐＨｖａｌｕｅｗａｓｎｅａｒ７，ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｔｉｍｅｗａｓ１０ｍｉｎ，ｓａｌｉｎｉｔｙｗａｓ３０％，ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅｗａｓ２５℃，ｓｔｉｒｒｉｎｇｓｐｅｅｄｗａｓ６００ｒ／ｍｉｎ．Ａｆｔｅｒｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ，２μｌｏｒｇａｎｉｃｓｏｌｖｅｎｔｗａｓｉｎｔｒｏｄｕｃｅｄｔｏＧＣｆｏｒａｎａｌｙｓｉｓ．Ｕｎｄｅｒｔｈｅｏｐｔｉｍｉｚｅｄｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ，ｔｈｅｌｉｍｉｔｏｆｄｅｔｅｃｔｉｏｎａｎｄｑｕａｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎｗｅｒｅ０．３ｍｇ／Ｌａｎｄ１ｍｇ／Ｌ，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．Ｔｈｅｒｅｃｏｖｅｒｙｏｆｓｔａｎｄａｒｄａｄｄｉｔｉｏｎｗａｓｗｉｔｈｉｎ９１％－１０８％，ｗｉｔｈｐｒｅｃｉｓｉｏｎｏｆ４．７％－７．３％（ｎ＝５）．Ｔｈｅｌｉｎｅａｒｒａｎｇｅｗａｓ１ｍｇ／Ｌ－１００ｍｇ／Ｌ，ｗｉｔｈｒｅｌｅｖａｎｔｃｏｅｆｆｉｃｉｅｎｔ（ｒ）＝０．９９８．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ　Ｔｈｅｍｅｔｈｏｄｈａｓａｄｖａｎｔａｇｅｓｏｆｌｏｗｃｏｓｔ，ｑｕｉｃｋｎｅｓｓ，ｇｏｏｄａｃｃｕｒａｃｙａｎｄｃａｎｂｅａｐｐｌｉｅｄｆｏｒｔｈｅｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｃａｆｆｅｉｎｅｉｎｃｏｌｄｍｅｄｉｃｉｎｅ．ＫｅｙＷｏｒｄｓ：Ｌｉｑｕｉｄ－ｐｈａｓｅｍｉｃｒｏｅｘｔｒａｃｉｏｎ；Ｈｏｌｌｏｗｆｉｂｅｒ；Ｃａｆｆｅｉｎｅ；Ｇａｓｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ；Ｃｏｌｄｍｅｄｉｃｉｎｅ

　　咖啡因（Ｃａｆｆｅｉｎｅ）学名１，３，７－三甲基黄嘌呤，是中枢神经系统的兴奋药物，可兴奋大脑皮层、延髓和

脊髓［１］，刺激肾上腺髓质释放肾上腺素［２］，并可使脑

血管收缩，具有缓解脑血管扩张引起的头痛［３］等作用

与功效，是某些感冒药的主要成分。

　　国家药典标准方法以结晶紫和高氯酸分别作为

指示剂和标准液滴定液，采用滴定法对药品中的咖啡

因进行测定［４］，该方法不仅灵敏度低、步骤繁琐，并且

使用大量乙酸酐和冰乙酸，对环境和操作人员健康具

有潜在危害。因此，有必要建立一种简便、准确、高

效、绿色的对药品中咖啡因的分析方法。由 Ｒｅｚａｅｅ等发明的液相微萃取技术集采样、萃取和浓缩于一

体，并且可与气相色谱（ＧＣ）、高效液相色谱（ＨＰＬＣ）等多种分析仪器兼容，具有快速简便、成本低廉、灵敏

度高和对环境友好等优点［５］。目前，该技术已被成功

应用于对食品、生物检材和环境等样品中多种无机和

有机目标物的分析测定［６－１３］。

·４３８１· 中国卫生检验杂志　２０１７年７月第２７卷第１３期　ＣｈｉｎＪＨｅａｌｔｈＬａｂＴｅｃ，Ｊｕｌ．２０１７，Ｖｏｌ．２７，Ｎｏ．１３

　　在常见有机溶剂中，三氯甲烷对咖啡因具有很好的溶解性，Ｓｈｒｉｖａｓ等曾以三氯甲烷为萃取溶剂，采用静态单滴微萃取 －ＧＣ／ＭＳ法，完成了对多种饮料中咖啡因的分析测定［１４］。但在具体实验过程中发现，

当样品基体较为复杂时（如污水和血清等），三氯甲烷

不仅在萃取过程中有损耗，并且其黏度会明显降低，

从而造成精密度降低和分析结果的不准确。为了有

效提高三氯甲烷在萃取过程中的稳定性，本研究以浸

渍过甲苯的聚丙烯中空纤维作为保护装置，将三氯甲

烷限制在纤维空腔内，从而解决了因三氯甲烷直接与

样品溶液接触而使其稳定性降低的问题，通过进一步

对萃取时间、ｐＨ值、盐度、搅拌速度等实验参数的优化，建立了一种快速、灵敏、可靠的测定感冒药中咖啡

因的分析方法。

１　材料与方法

１．１　仪器与试剂　Ａｇｉｌｅｎｔ６８９０Ａ气相色谱仪（美国Ａｇｉｌｅｎｔ公司）；ＨＰ－５毛细管色谱柱（３０ｍ×０．３２ｍｍ，０．５０μｍ，美国 Ａｇｉｌｅｎｔ公司）；ＷＩＧＧＥＮＳ加热磁力搅拌器［中国桑翌技术（北京）有限公司］；微量进样器

（５μｌ，美国 Ａｇｉｌｅｎｔ公司）；Ｍｉｌｌｉ－ＱＥｌｅｍｅｎｔ纯水机（美国Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ公司）；ＭｅｔｔｌｅｒＴｏｌｅｄｏ电子天平（中国梅特勒托利多上海仪器有限公司）；Ｑ３／２Ａｃｃｕｒｅｌ聚丙烯中空纤维（壁厚 ２００μｍ，内径 ６００μｍ，孔径０．２μｍ）（德国 Ｍｅｍｂｒａｎａ公司）。咖啡因标准品（分析纯，批号：ＳＢ０５－２７２－２０１２）；９９９感冒灵颗粒（批号：Ｚ４４０２１９４０）、小儿氨酚烷胺颗粒（批号：Ｈ６２０２１１４５）和氨咖黄敏片（批号：Ｈ５００２１７８５）均购于当地药店；二氯甲烷（９９．０％，批号：２０１６０３１６）；三氯甲烷（９９．０％，批号：２０１３１００９）；乙酸乙酯（９７．０％，批号：２００５０９２１）；四氯化碳（９８．０％，批号：２０１０１００９）；甲苯（９８．０％，批号：２００５１０２７）；正己烷（９７．０％，批号：２０１４１１０４）；环己烷（９９．５％，批号：２０１３００２７）。１．２　方法１．２．１　样品处理及分析　将中空纤维截成１．５ｃｍ小段，在丙酮中超声清洗１０ｍｉｎ除去所含杂质，再在通风厨自然风干备用。将１袋９９９感冒灵颗粒、小儿氨酚烷胺颗粒和２粒氨咖黄敏片于研钵中分别进行研磨混匀，后称取适量试样于１００ｍｌ去离子水中进行超声、搅拌，待试样充分溶解后，取５ｍｌ上清液于盛有磁子的小瓶中，用微量注射器先吸入３μｌ三氯甲烷，再吸入２μｌ去离子水，后将注射器针尖插入浸渍过甲苯的中空纤维上端，推出注射器中液体后迅速伸入液

面以下，开启搅拌器，以 ６００ｒ／ｍｉｎ转速萃取 １０ｍｉｎ后停止搅拌，抽取２μｌ三氯甲烷直接向 ＧＣ进样，整个实验在室温（～２５℃）条件下进行，ＨＦ－ＬＰＭＥ萃取装置如图１所示。

　　注：１：微量进样器；２：固定支架；３：中空纤维；４：磁子；５：磁力搅拌器。

图１　基于中空纤维保护的液相微萃取装置１．２．２　仪器条件　 ＨＰ－５毛细管色谱柱，柱温保持２００℃，采样时间为６ｍｉｎ；火焰离子化检测器（ＦＩＤ），氢气和氧气流量分别为４００ｍｌ／ｍｉｎ和５０ｍｌ／ｍｉｎ；进样口和检测器温度均为２５０℃；采用分流进样模式，分流比为３０１；载气为高纯（纯度≥９９．９％）氮气，流速为１．３ｍｌ／ｍｉｎ。１．２．３　标准溶液的配制　准确称取咖啡因１０ｍｇ，用甲醇溶解并定容至１０ｍｌ，配制成１ｍｇ／ｍｌ的标准储备液，４℃避光保存。吸取适量的标准储备液于７个１０ｍｌ容量瓶中，用去离子水定容至刻度，质量浓度分别为 １ｍｇ／Ｌ、５ｍｇ／Ｌ、１０ｍｇ／Ｌ、２０ｍｇ／Ｌ、５０ｍｇ／Ｌ、８０ｍｇ／Ｌ、１００ｍｇ／Ｌ。

２　结　果

２．１　萃取条件的优化２．１．１　萃取溶剂的选择　考察了二氯甲烷、三氯甲烷、四氯化碳、甲苯、乙酸乙酯、正己烷和环己烷７种有机溶剂对咖啡因的萃取效率，结果发现三氯甲烷的

萃取效率最佳，其次是二氯甲烷，其余有机溶剂萃取

效率均不理想。因此，本实验选取三氯甲烷为萃取

溶剂。

２．１．２　三氯甲烷体积　考察了不同萃取溶剂体积（０．５μｌ、１．０μｌ、１．５μｌ、２．０μｌ、２．５μｌ、３．０μｌ）对萃取效率的影响规律。结果表明，随着萃取溶剂体积的

增加，萃取效率不断提高，但当体积超过２μｌ时，溶剂峰面积过大，使得咖啡因与溶剂峰不能很好分离。另

外，考虑到三氯甲烷具有易挥发并微溶于水的缺点，

用浸渍过甲苯的中空纤维作为保护装置，用３μｌ三氯甲烷进行萃取，待萃取完成后吸取２μｌ向 ＧＣ进样，实验结果证明，以上措施可明显提高三氯甲烷在萃取

过程中的稳定性，从而有效改善了方法的精密度和准

·５３８１·中国卫生检验杂志　２０１７年７月第２７卷第１３期　ＣｈｉｎＪＨｅａｌｔｈＬａｂＴｅｃ，Ｊｕｌ．２０１７，Ｖｏｌ．２７，Ｎｏ．１３

确度。

２．１．３　转速　考察了转速为 ０ｒ／ｍｉｎ、２００ｒ／ｍｉｎ、４００ｒ／ｍｉｎ、６００ｒ／ｍｉｎ、８００ｒ／ｍｉｎ、１０００ｒ／ｍｉｎ时对萃取效率的影响规律。随着转速的增加，萃取效率逐渐

提高，但转速过高使得中空纤维表面产生大量气泡，

且萃取溶剂也易于漏出，从而会造成萃取效率和精密

度的降低。因此，本实验选定转速为６００ｒ／ｍｉｎ。２．１．４　萃取时间　考察了 ５ｍｉｎ、１０ｍｉｎ、１５ｍｉｎ、２０ｍｉｎ、２５ｍｉｎ、３０ｍｉｎ萃取时间对萃取效率的影响，结果表明，在１５ｍｉｎ内，随着萃取时间的延长，萃取效率逐渐提高；当萃取时间超过１５ｍｉｎ时，萃取效率反而逐渐下降，可能原因是由于三氯甲烷具有挥发性和

部分水溶性，萃取时间过长会使三氯甲烷从中空纤维

中渗出而造成一定损失所致。考虑到 ＬＰＭＥ属于非完全萃取技术，为了保证较高灵敏度并节省时间，本

实验选定萃取时间为１０ｍｉｎ。２．１．５　ｐＨ值　考察了ｐＨ值为２～１２时对萃取效率的影响，结果表明，ｐＨ值在 ２～１０，萃取效率随 ｐＨ值的增加而逐渐提高，当ｐＨ值从１０增加至１２时，萃取效率基本保持恒定，原因是咖啡因属于弱碱性化合物

（ｐＫｂ＝１０．４）［１５］，酸性条件下，咖啡因主要以离子形

式存在，其在有机相／水相间的分配比较小；而在碱性条件下，咖啡因主要以分子形式存在，有助于提高其

在有机溶剂／水相间的分配比。但考虑到一般样品ｐＨ值呈中性，同时为了简化实验步骤，在实验过程中并未对ｐＨ值进行调控。２．１．６　盐度　以ＮａＣｌ为无机盐，考察了盐度对萃取效率的影响。结果表明，与静态萃取条件下观察到的

实验现象相反，在本实验条件下，盐度对萃取效率具

有明显的促进作用，随着盐度增加，萃取效率不断提

高，当盐度接近饱和（３０％，Ｗ／Ｗ）时，萃取效率达到了最佳。主要原因是在动态萃取模式下，无机盐的加入

提高了咖啡因在有机溶剂／水相间的分配比，并同时降低了有机溶剂在水相中的溶解性。为了获取最佳

萃取效率，本实验选择盐度为３０％。２．２　方法学指标２．２．１　方法的线性范围、检出限及定量限　配制不同浓度的咖啡因标准溶液，在所建立最佳条件下进行

萃取检测。检出限（ＬＯＤ）按信噪比等于３进行计算，定量限（ＬＯＱ）按信噪比等于１０计算，该方法的检出限和定量限分别为０．３ｍｇ／Ｌ和１ｍｇ／Ｌ（表１）；线性范围为１ｍｇ／Ｌ～１００ｍｇ／Ｌ，线性方程：ｙ＝２．９４８ｃ＋６１．２６（ｙ为咖啡因色谱峰面积，ｃ为咖啡因浓度），相关系数（ｒ）为０．９９８，说明该方法灵敏度较高、线性范围宽，相关性良好。

２．２．２　方法的精密度和准确度　在所建立最佳条件下对加标浓度分别为５ｍｇ／Ｌ、１０ｍｇ／Ｌ、５０ｍｇ／Ｌ加标

溶液进行测定，分别以加标回收率和加标回收率的相

对标准偏差（ＲＳＤ）表示方法的准确度和精密度。结果发现，加标回收率为９１％～１０８％，加标回收实验的ＲＳＤ为４．７％～７．３％（ｎ＝５）（表１），说明该方法具有良好的准确度和精密度。

表１　方法的检出限、定量限、回收率和精密度（ｎ＝５）

分析物检出限

（ｍｇ／Ｌ）定量限

（ｍｇ／Ｌ）加标浓度

（ｍｇ／Ｌ）回收率

（％）精密度

（％）

咖啡因 ０．３ １ ５ ９１～１０４ ６．８

１０ ９５～１０８ ７．３

５０ ９２～１０３ ４．７

２．３　实际样品的测定结果　运用本研究方法，在所建立最佳条件下对９９９感冒灵颗粒、小儿氨酚烷胺颗粒和氨咖黄敏片３种感冒药中所含咖啡进行了测定。图２和图３分别为咖啡因标准溶液、样品小儿氨酚烷胺颗粒的典型图谱，可以看出，目标分析物咖啡因在

４．６７ｍｉｎ处即可出峰，萃取溶剂三氯甲烷仅对样品中的咖啡因具有优异的萃取效果，说明该方法快速，并

具有很好的选择性。表２为药品中咖啡因含量的测定结果，可以看出，除９９９感冒灵颗粒未标出咖啡因含量外，其余２种感冒药中咖啡因的测定值与厂家说明书中提供的标称值符合良好，说明该方法完全可用

于对药品中咖啡因的分析测定。

图２　咖啡因标准色谱图

图３　样品小儿氨酚烷胺颗粒色谱图

·６３８１· 中国卫生检验杂志　２０１７年７月第２７卷第１３期　ＣｈｉｎＪＨｅａｌｔｈＬａｂＴｅｃ，Ｊｕｌ．２０１７，Ｖｏｌ．２７，Ｎｏ．１３

表２　感冒药中咖啡因含量测定结果 （ｎ＝３）

药品名称 取样量测定浓度

（ｍｇ／Ｌ）测定值

（ｍｇ）标称值

（ｍｇ）相对标准偏差

９９９感冒灵颗粒 １袋 ６６．３ ６．６３ － ４．３

小儿氨酚烷胺颗粒 １袋 ６１．４ ６．１４ ６ ５．６

氨咖黄敏片 １／２粒 ７１．２ １４．２ １５ ３．８

　　注：－表示无标称值。

３　结　论

　　本研究以浸渍过甲苯的中空纤维作为保护装置，使得三氯甲烷在整个萃取过程中的稳定性显著提高，

从而能够顺利完成对药品溶液中咖啡因的萃取和富

集。本方法具有成本低廉、省时省力、对环境友好，可

与 ＧＣ、ＧＣ／ＭＳ和 ＬＣ／ＭＳ／ＭＳ等分析仪器兼容的优点。

参考文献

［１］　ＨａｒｔｌｅｙＴ，ＬｏｖａｌｌｏＷ，ＷｈｉｔｓｅｔｔＴ．Ｃａｒｄｉｏｖａｓｃｕｌａｒｅｆｆｅｃｔｓｏｆｃａｆｆｅｉｎｅｉｎｍｅｎａｎｄｗｏｍｅｎ［Ｊ］．ＡｍＪＣａｒｄｉｏｌ，２００４，９３（８）：１０２２－１０２６．

［２］　ＬｏｖａｌｌｏＷ．Ｓｔｒｅｓｓ－ｌｉｋｅａｄｅｎｏｃｏｒｔｉｃｏｔｒｏｐｉｎｒｅｓｐｏｎｓｅｓｔｏｃａｆｆｅｉｎｅｉｎｙｏｕｎｇｈｅａｌｔｈｙｍｅｎ［Ｊ］．ＰｈａｒｍａｃｏｌＢｉｏｃｈｅｍＢｅｈａｖ，１９９６，５５（３）：３６５－３６９．

［３］　刘莉，周曙，黄素珍．经皮穴位电刺激及口服咖啡因治疗腰麻后头痛疗效观察［Ｊ］．现代医药卫生，２００９，２５（１４）：２１０８－２１０９．

［４］　国家药典委员会．中华人民共和国药典２０１０版（二部）［Ｍ］．北京：中国科技技术出版社，２０１０：４６１．

［５］　ＲｅｚａｅｅＭ，ＡｓｓａｄｉＹ，ＨｏｓｓｅｉｎｉＭ，ｅｔａｌ．Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｏｒｇａｎｉｃ

ｃｏｍｐｏｕｎｄｓｉｎｗａｔｅｒｕｓｉｎｇｄｉｓｐｅｒｓｉｖｅｌｉｑｕｉｄ－ｌｉｑｕｉｄｍｉｃｒｏｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ［Ｊ］．ＪＣｈｒｏｍａｔｏｇｒＡ，２００６，１１１６（１／２）：１－９．

［６］　赵汝松，徐晓白，刘秀芬．液相微萃取技术的研究进展［Ｊ］．分析化学，２００４，３２（９）：１２４６－１２５１．

［７］　谢洪学，何丽君，伍艳，等．基于离子液体的液相微萃取 －高效液相色谱法测定水中有机磷农药［Ｊ］．分析化学，２００７，３５（２）：１８７－１９０．

［８］　李敏霞，吴京洪，曾玮，等．液相微萃取 －气相色谱法测定水样中邻苯二甲酸酯［Ｊ］．分析化学，２００６，３４（８）：１１７２－１１７４．

［９］　罗明标，刘维，李伯平，等．多孔中空纤维液相微萃取技术的研究进展［Ｊ］．分析化学，２００７，３５（７）：１０７１－１０７７．

［１０］　Ｂｅｌｌｏ－ＬóｐｅｚＭ，Ｒａｍｏｓ－ＰａｙáｎＭ，Ｏｃａａ－ＧｏｎｚáｌｅｚＪ，ｅｔａｌ．Ａｎａｌｙｔｉｃａｌａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓｏｆｈｏｌｌｏｗｆｉｂｅｒｌｉｑｕｉｄｐｈａｓｅｍｉｃｒｏｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ（ＨＦ－ＬＰＭＥ）：ａｒｅｖｉｅｗ［Ｊ］．ＡｎａｌＬｅｔｔ，２０１２，４５（８）：８０４－８３０．

［１１］　张文文，孟品佳，孟梁，等．中空纤维膜液相微萃取 －气相色谱／质谱法检测尿液中的苯丙胺类兴奋剂［Ｊ］．分析试验室，２０１３，３２（１）：４４－４７．

［１２］　曹洁，肖景奇，贾娟，等．中空纤维膜 －液相微萃取结合气相色谱－质谱联用法测定血液中的氯氮平［Ｊ］．中国卫生检验杂志，２０１５，２５（１５）：２４６３－２４６５．

［１３］　朱莉萍，朱涛，马运平，等．中空纤维膜液相微萃取 －气相色谱质谱法快速测定蔬菜汁中１５种邻苯二甲酸酯［Ｊ］．分析化学，２０１３，４１（７）：１０１９－１０２４．

［１４］　ＳｈｒｉｖａｓＫ，ＷｕＨ．Ｒａｐｉｄｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｃａｆｆｅｉｎｅｉｎｏｎｅｄｒｏｐｏｆｂｅｖｅｒａｇｅｓａｎｄｆｏｏｄｓｕｓｉｎｇｄｒｏｐ－ｔｏ－ｄｒｏｐｓｏｌｖｅｎｔｍｉｃｒｏｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｗｉｔｈｇａｓｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ／ｍａｓｓｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙ［Ｊ］．ＪＣｈｒｏｍａｔｏｇｒＡ，２００７，１１７０（１／２）：９－１４．

［１５］　ＹａｎＨ，ＪｉｎＬ，ＲｏｗＫ．Ｓｐｅｃｉａｌｓｅｌｅｃｔｉｖｉｔｙｏｆｍｏｌｅｃｕｌａｒｌｙｉｍｐｒｉｎｔｅｄｍｏｎｏｌｉｔｈｉｃｓｔａｔｉｏｎａｒｙｐｈａｓｅ［Ｊ］．ＪＬｉｑＣｈｒｏｍａｔｏｇｒＲＴ，２００５，２８（２０）：３１４７－３１５５．

收稿日期：２０１６－１２－２６

（上接第１８３３页）［５］　彭文星，徐晓宇，石秀棉，等．ＰＣＩ术后患者 ＣＹＰ２Ｃ１９基因多

态性与氯吡格雷抵抗关联性研究 ［Ｊ］．中国药物应用与监测，２０１５，１２（６）：３３４－３３８．

［６］　ＫｕｒｏｓｅＫ，ＳｕｇｉｙａｍａＥ，ＳａｉｔｏＹ．Ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓｉｎｍａｊｏｒｆｕｎｃｔｉｏｎａｌｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍｓｏｆｐｈａｒｍａｃｏｋｉｎｅｔｉｃｓ／ｐｈａｒｍａｃｏｄｙｎａｍｉｃｓ－ｒｅｌａｔｅｄｇｅｎｅｓｉｎＥａｓｔｅｒｎＡｓｉａｎｓａｎｄＥｕｒｏｐｅａｎｓ：ｉｍｐｌｉｃａｔｉｏｎｓｉｎｔｈｅｃｌｉｎｉｃａｌｔｒｉａｌｓｆｏｒｎｏｖｅｌｄｒｕｇｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ［Ｊ］．ＤｒｕｇＭｅｔａｂＰｈａｒｍａｃｏｋｉｎｅｔ，２０１２，２７（１）：９－５４．

［７］　黄小慧，彭隆，许颖君，等．ＣＹＰ２Ｃ１９基因多态性对氯吡格雷抗血小板作用的影响［Ｊ］．中国卫生检验杂志，２０１６，２６（１５）：２１２９－２１３１．

［８］　ＴａｎｇＸＦ，ＷａｎｇＪ，ＺｈａｎｇＪＨ，ｅｔａｌ．ＥｆｆｅｃｔｏｆｔｈｅＣＹＰ２Ｃ１９ ２ａｎｄ３ｇｅｎｏｔｙｐｅｓ，ＡＢＣＢ１Ｃ３４３５ＴａｎｄＰＯＮ１Ｑ１９２ＲａｌｌｅｌｅｓｏｎｔｈｅｐｈａｒｍａｃｏｄｙｎａｍｉｃｓａｎｄａｄｖｅｒｓｅｃｌｉｎｉｃａｌｅｖｅｎｔｓｏｆｃｌｏｐｉｄｏｇｒｅｌｉｎＣｈｉｎｅｓｅｐｅｏｐｌｅａｆｔｅｒｐｅｒｃｕｔａｎｅｏｕｓｃｏｒｏｎａｒｙｉｎｔｅｒｖｅｎｔｉｏｎ［Ｊ］．ＥｕｒＪＣｌｉｎＰｈａｒｍａｃｏｌ，２０１３，６９（５）：１１０３－１１１２．

［９］　ＺｈａｎｇＬ，ＣｈｅｎＹ，ＪｉｎＹ，ｅｔａｌ．Ｇｅｎｅｔｉｃｄｅｔｅｒｍｉｎａｎｔｓｏｆｈｉｇｈｏｎ－ｔｒｅａｔｍｅｎｔｐｌａｔｅｌｅｔｒｅａｃｔｉｖｉｔｙｉｎｃｌｏｐｉｄｏｇｒｅｌｔｒｅａｔｅｄＣｈｉｎｅｓｅｐａｔｉｅｎｔｓ［Ｊ］．ＴｈｒｏｍｂＲｅｓ，２０１３，１３２（１）：８１－８７．

［１０］　王谦，杜亚梅，张国军，等．焦磷酸测序法与 Ｓａｎｇｅｒ测序法检测ＣＹＰ２Ｃ１９１７基因多态性方法学对比研究 ［Ｊ］．中国医药生物技术，２０１４，９（３）：２２２－２２４．

［１１］　ＤａｉＺＬ，ＣｈｅｎＨ，ＷｕＸＹ．ＲｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐｂｅｔｗｅｅｎｃｙｔｏｃｈｒｏｍｅＰ４５０２Ｃ１９１７ｇｅｎｏｔｙｐｅｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎ，ｐｌａｔｅｌｅｔａｇｇｒｅｇａｔｉｏｎａｎｄｂｌｅｅｄｉｎｇｒｉｓｋｉｎｐａｔｉｅｎｔｓｗｉｔｈｂｌｏｏｄｓｔａｓｉｓｓｙｎｄｒｏｍｅｏｆｃｏｒｏｎａｒｙａｒｔｅｒｙｄｉｓｅａｓｅｔｒｅａｔｅｄｗｉｔｈｃｌｏｐｉｄｏｇｒｅｌ［Ｊ］．ＪＩｎｔｅｇｒａｔＭｅｄ，２０１２，１０（６）：６４７－６５４．

［１２］　ＳｐｏｋｏｙｎｙＩ，ＢａｒａｚａｎｇｉＮ，ＪａｒａｍｉｌｌｏＶ，ｅｔａｌ．Ｒｅｄｕｃｅｄｃｌｏｐｉｄｏｇｒｅｌｍｅｔａｂｏｌｉｓｍｉｎａｍｕｌｔｉｅｔｈｎｉｃｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ：ｐｒｅｖａｌｅｎｃｅａｎｄｒａｔｅｓｏｆｒｅｃｕｒｒｅｎｔｃｅｒｅｂｒｏｖａｓｃｕｌａｒｅｖｅｎｔｓ［Ｊ］．ＪＳｔｒｏｋｅＣｅｒｅｂｒｏｖａｓｃＤｉｓ，２０１４，２３（４）：６９４－６９８．

［１３］　ＳｉｂｂｉｎｇＤ，ＫｏｃｈＷ，ＧｅｂｈａｒｄＤ，ｅｔａｌ．Ｃｙｔｏｃｈｒｏｍｅ２Ｃ１９１７ａｌｌｅｌｉｃｖａｒｉａｎｔ，ｐｌａｔｅｌｅｔａｇｇｒｅｇａｔｉｏｎ，ｂｌｅｅｄｉｎｇｅｖｅｎｔｓ，ａｎｄｓｔｅｎｔｔｈｒｏｍｂｏｓｉｓｉｎｃｌｏｐｉｄｏｇｒｅｌ－ｔｒｅａｔｅｄｐａｔｉｅｎｔｓｗｉｔｈｃｏｒｏｎａｒｙｓｔｅｎｔｐｌａｃｅｍｅｎｔ［Ｊ］．Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ，２０１０，１２１：５１２－５１８．

［１４］　ＰａｒéＧ，ＭｅｈｔａＳＲ，ＹｕｓｕｆＳ，ｅｔａｌ．ＥｆｆｅｃｔｓｏｆＣＹＰ２Ｃ１９ｇｅｎｏｔｙｐｅｏｎｏｕｔｃｏｍｅｓｏｆｃｌｏｐｉｄｏｇｒｅｌｔｒｅａｔｍｅｎｔ［Ｊ］．ＮＥｎｇｌＪＭｅｄ，２０１０，３６３（１８）：１７０４－１７１４．

［１５］　ＦｒｅｌｉｎｇｅｒＡＬ３ｒｄ，ＢｈａｔｔＤＬ，ＬｅｅＲＤ，ｅｔａｌ．Ｃｌｏｐｉｄｏｇｒｅｌｐｈａｒｍａｃｏｋｉｎｅｔｉｃｓａｎｄｐｈａｒｍａｃｏｄｙｎａｍｉｃｓｖａｒｙｗｉｄｅｌｙｄｅｓｐｉｔｅｅｘｃｌｕｓｉｏｎｏｒｃｏｎｔｒｏｌｏｆｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍｓ（ＣＹＰ２Ｃ１９，ＡＢＣＢ１，ＰＯＮ１），ｎｏｎｃｏｍｐｌｉａｎｃｅ，ｄｉｅｔ，ｓｍｏｋｉｎｇ，ｃｏ－ｍｅｄｉｃａｔｉｏｎｓ（ｉｎｃｌｕｄｉｎｇｐｒｏｔｏｎｐｕｍｐｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ），ａｎｄｐｒｅ－ｅｘｉｓｔｅｎｔｖａｒｉａｂｉｌｉｔｙｉｎｐｌａｔｅｌｅｔｆｕｎｃｔｉｏｎ［Ｊ］．ＪＡｍＣｏｌｌＣａｒｄｉｏｌ，２０１３，６１（８）：８７２－８７９．

收稿日期：２０１７－０２－０４

·７３８１·中国卫生检验杂志　２０１７年７月第２７卷第１３期　ＣｈｉｎＪＨｅａｌｔｈＬａｂＴｅｃ，Ｊｕｌ．２０１７，Ｖｏｌ．２７，Ｎｏ．１３