Resumen

Las biomoleculas son la que conforman gran parte de un organismo vivo, el oxigeno, hidrogeno, carbono y nitrgenos son los que forman el 99% de la masa de una clula.Para conocer estas molculas realizamos una serie de metodologas, las cuales nos permiten percibir si se produce una reaccin y posterior reconocimiento de estas biomoleculas. Los mtodos corresponden al test de Molich, Lugol, Sudan y Biuret. Los cuales a la larga arrojaron molculas de carbohidratos, protenas, lpidos y cidos nucleicos para las determinadas muestras. Dejando a entrever su reaccin positiva (+) o negativa (-) de acuerdo a lo que se esperaba y su correcta reaccin.

Introduccin

A lo largo de la historia y con el surgimiento de nuevas herramientas para la investigacin, se ah logrado un estudio a cabalidad de elementos, organismo, bacterias, clulas, etc. Con el transcurso de los aos, tanto como cientficos y bilogos se han planteado miles de preguntas con respecto a nuestra conformacin y quienes somos los seres vivos. En respuesta a algunas incgnitas se descubrieron las biomoleculas, que son molculas que conforman gran parte de los constituyentes de los seres vivos, como por ejemplo podemos mencionar el carbono, hidrogeno, oxigeno y nitrgeno como los bioelementos mas abundantes. Por otra parte podemos mencionar que la clula mediante sus procesos metablicos fabrica molculas orgnicas que conforman su estructura, estas biomoleculas se diferencian en Carbohidratos, Lpidos, Protenas y cidos nucleicos.Para el conocimiento propio de nosotros de esta esencial molcula, realizaremos una serie de procedimientos los cuales nos permitirn reconocer el comportamiento de estas biomoleculas al entrar en contacto con sustancias especificas requeridas para una observacin completa a base de diferentes mtodos. Entre los cuales podemos mencionar: Test de Lugol Test de Molich Test de Sudan Test de biuretEn otros aspecto pero no menos relevante, conoceremos la desnaturalizacin de protenas mediante sus factores determinantes, como los son la temperatura Y PH. Finalizando con la realizacin de procedimientos para conocer la Especificidad de enzimas caractersticas.

Marco tericoA continuacin se definirn los materiales usados en ste Prctico:Tubos de ensayo: Eltubo de ensayoes uninstrumento de laboratorioque se utiliza principalmente como contenedor de lquidos y slidosa las cuales se les va a someter a reacciones qumicas u otras pruebas. Laforma del tubo de ensayoes de forma cilndrica alargada generalmente de vidrio, su base tiene forma de U redondeada. Tienen en su mayora una boca acampanada para ayudar a verter los lquidos.Sudan: La coloracin de Sudan se utiliza para destacar sustancias "sudanoflicas", por lo comn, lpidos. Tambin se utiliza para determinar los niveles de grasa en materia fecal para diagnosticar esteatorrea.Lugol: El yodo es componente de la coloracin de Gram utilizada en microbiologa. La solucin de Lugol o Lugol yoduro (IKI) es una solucin de color marrn que se torna negra en presencia de almidones y puede ser utilizada para colorear clulas, haciendo ms visible el ncleo. En la coloracin de Gram el yoduro se utiliza como mordiente, aumentando la capacidad del colorante para entrar en las clulas a travs de los poros presentes en la membrana o pared celular.Biuret: Detecta la presencia de protenas, pptidos cortos y otros compuestos con dos o ms enlaces peptdicos en sustancias de composicin desconocida.Hidrxido de Sodio: El hidrxido de sodio proviene del carbonato de sodio, es una de las sustancias qumicas ms utilizadas en laboratorio y en mbito industrial, para la fabricacin de pasta de papel y productos qumicos variados: plsticos, textiles de sntesis, productos de limpieza de uso domstico o industrial, produccin de gasolina y de biodiesel, de jabones o tambin para el tratamiento del aluminio.Agua destilada: Es aquella que como todo tipo de agua est compuesta por dos tomos de Hidrgeno y uno de Oxgeno, cuya molcula se representa qumicamente por la frmula H2O y que mediante el proceso de destilacin se le han eliminado las impurezas e iones.La Albmina: Es la protena ms abundante en el plasma, siendo la principal protena de la sangre. Est constituida por 585 aminocidos con 17 puentes dislfuro entrecruzados en su molcula, y tiene un peso molecular de 67.000 Dalton.Almidn: Es un polisacrido de reserva alimenticia predominante en las plantas, constituido por amilasa y amilo pectina. Proporciona el 70-80% de las caloras consumidas por los humanos de todo el mundo. Tanto el almidn como los productos de la hidrlisis del almidn constituyen la mayor parte de los carbohidratos digestibles de la dieta habitual.La Glucosa: Es un carbohidrato, y es el azcar simple ms importante en el metabolismo humano. La glucosa se llama un azcar simple o unos monosacridos, porque es una de las unidades ms pequeas que tiene las caractersticas de esta clase de hidratos de carbono. La glucosa es una de las principales molculas que sirven como fuentes de energa para las plantas y los animales. Se encuentra en la savia de las plantas y en el torrente sanguneo humano, donde se conoce como "azcar en la sangre".El cido Sulfrico: Es un compuesto qumico extremadamente corrosivo cuya frmula es H2SO4. Es el compuesto qumico que ms se produce en el mundo, por eso se utiliza como uno de los tantos medidores de la capacidad industrial de los pases. Una gran parte se emplea en la obtencin de fertilizantes. Tambin se usa para la sntesis de otros cidos y sulfatos y en la industria petroqumica. Generalmente se obtiene a partir de dixido de azufre, por oxidacin con xidos de nitrgeno en disolucin acuosa.El cido Ntrico: Es el oxcido ms importante del nitrgeno y probablemente el segundo (tras el sulfrico) ms importante de todos los cidos inorgnicos. Es un lquido aceitoso, incoloro, que por accin de la luz toma una coloracin marrn, ms o menos intensa, debido a su parcial descomposicin en NO2 (sus disoluciones se deben guardar en botellas oscuras) El cido ntrico reacciona con las protenas formando productos nitrados color amarillo.

Objetivos del prctico

Que el alumno aprenda algunas caractersticas qumicas y fsicas de las biomolculas. Que el alumno reconozca algunas molculas del tipo carbohidratos y lpidos Que el alumno reconozco e identifique algunas molculas de tipo proteico Que el alumno aprenda algunas caractersticas qumicas y fsicas de las protenas Que el alumno aprenda algunas caractersticas qumicas y fsicas de las enzimas

Materiales Aceite de cocina Solucin de agua de papa Naftol Solucin de Lugol (K) Solucin de Sudan Solucin Biuret Solucin Albumina 1% Solucin de Almidn 1% Solucin de Glucosa 10% Acido Sulfrico (H2SO4 ) Acido Ntrico ( HNO3 ) 3M Hidrxido de Sodio(NaOH) 3M Agua destilada Mecheros Tubos de ensayo Pinzas gradillas Bao de agua a 37C

METODO EXPERIMENTAL

1.- Test de Molish: Reconocimiento de carbohidratos.Primero se rotulan los tubos y despus procedemos a agregar en ellos los siguientes materiales: Tubo 1: agregamos 2ml de solucin de almidn. Tubo 2: agregamos 2ml de solucin de glucosa. Tubo 3: agregamos agua destilada.Luego le agregamos a cada tubo 3 gotitas de solucin alcohlica de naftol al 1% agitamos y dejamos los tubos en las gravillas, escurrimos 1ml de cido sulfrico en las paredes de cada tubo, teniendo cuidado de no agitar la mezcla formada. Observamos y registramos las observaciones.2.- Test de Lugol o Yodo: Reconocimiento de almidnRotulamos los tubos y despus agregamos los siguientes materiales: Tubo 1: dispensamos 2ml de solucin de almidn. Tubo 2: dispensamos 2ml de agua de papas crudas. Tubo 3: dispensamos 2ml de solucin de glucosa. Tubo 4: agregamos 2ml de agua destilada.Agregamos a cada tubo 1 gota de lugol. Observamos y registramos observaciones 3. Test de Sudn: Reconocimiento de LpidosPrimero rotulamos los tubos y luego ponemos 1,5 ml de agua en 3 tubos, agregamos 1 ml de Sudn y agitamos vigorosamente colocando un trozo de parafilm sobre el tubo y tapamos con el dedo pulgar. Los dejamos reposar y luego le agregamos: Tubo 1: 1 ml de aceite de comer. Tubo 2: 1 ml de macerado de semilla (almendras, maravillas)en este caso maravillas Tubo 3: 1ml de agua.Agitamos suavemente y dejamos reposar unos 30 segundos. Observamos y registramos las observaciones.

4. Test de Biuret: Reconocimiento de ProtenasRotulamos los tubos y les agregamos: Tubo 1: Agregamos 2 ml de solucin de almidn Tubo 2. Agregamos 2 ml de solucin de albmina Tubo 3. Agregamos 2 ml de agua destiladaLuego, agregamos 2 ml de reactivo Biuret. Observamos y registramos las observacionesDesnaturalizacin de Protenas5. Efecto de la temperatura. Rotulamos los tubos y luego agregamos: Tubo 1: dispensamos 2 ml de solucin de almidn Tubo 2: dispensamos 2 ml de solucin de albminaCalentamos suavemente flameando en el mechero. Observamos y registramos las observaciones6. Efecto del pHRotulamos los tubos y colocamos 2 ml de albmina en 2 tubos y luego deje escurrir por las paredes: Tubo 1: cido ntrico (HNO3) Tubo 2: Hidrxido de sodio (NaOH). Observamos y registramos las observaciones. Especificidad de las enzimas por su sustrato11. Especificidad de sustrato de las enzimas de la saliva Rotulamos los tubos y colocamos 5ml de saliva en un vaso precipitado Agregamos igual cantidad de agua destilada (dilucin al 50%) y agitamos Dispensamos a los tubos (1), (3) y (5) 2ml de solucin de saliva Agregamos a los tubos (1) y (2) 1ml de aceite Agregamos a los tubos (3) y (4) 1ml de albmina Agregamos a los tubos (5) y (6) 1 ml de almidn

Llevamos cada uno de los tubos a la estufa que se encuentra a 37C durante 5 minutos.

Tubos (1) y (2) Identificamos lpidos mediante test de Sudan: AGREGAMOS

1,5 ml de agua 1 ml de Sudn Agitamos suavemente y dejamos reposar unos 30 segundos. Observamos.

Tubos (3) y (4) Dentivanos protenas mediante test de Biuret: AGREGAMOS

1,5 ml de agua 1 ml de Biuret Agitamos suavemente y dejamos reposar unos 30 segundos. Observamos.

Tubos (5) y (6) Identificamos almidn mediante test de Lugol: AGREGAMOS

1,5 ml de agua 1 ml de Lugol Agitamos suavemente y dejamos reposar unos 30 segundos. Observamos.

Resultados I) Reconocimiento de carbohidratos

1) Test de Molish: (carbohidratos)

Tubo n 1 almidn, tubo n 2 glucosa, tubo 3 agua destilada, luego agregar 3 gotas de solucin alcohlica de -naftol y 1ml de H2SO4 (acido sulfrico).

Tubo (1) 2ml almidn: control ( + ) Tubo (2) 2ml solucin de glucosa: control ( + ) Tubo (3) 2ml agua destilada: control ( - )

Los tubos 1 y 2 presentan control positivo donde el acido sulfrico se deposita en el fondo del tubo y forma un anillo violceo. En el tubo 3 presento control negativo debido no hay reaccin al contacto con el agua destilada.

2) Test del lugol:(Almidn)

Tubo 1 solucin de almidn, tubo 2 agua de papas, tubo 3 solucin de glucosa, tubo 4 agua destilada, luego agregar gotas de lugol.

Tubo (1) 2ml de solucin de almidn: control ( + ) Tubo (2) 2ml de agua de papas: control ( + ) Tubo (3) 2ml solucin de glucosa: control ( - ) Tubo (4) 2ml agua destilada: control ( - )

Tubos 1 y 2 presentan control positivo donde el lugol al tener contacto con almidn reaccionan denotando una coloracin oscura ( negro) Tubo 3 presentan control negativo se observa notoriamente la formacin de un anillo de lugol en la superficie de la solucin de glucosa mezclndose casi en forma homognea la solucin Tubo 4 presenta control negativo el lugol se deposita en el fondo del tubo.

II) Reconocimiento de lpidos

1) Test de sudan(lpidos)

Tubo 1 aceite de comer, tobo 2 macerado de semillas (almendras, maravillas), tubo 3 agua, luego 1,5 ml de agua en los tres tubos, 1ml de sudan, colocar un trozo de parafilm sobre el tubo.

Tubo ( 1) 1 ml de aceite de comer: control ( + ) Tubo(2) 1ml de macerado de semilla (almendra): control ( + ) Tubo (3) 1 ml de agua: control ( - )

Tubo 1 presenta control positivo se observan burbujitas ( micelas) Tubo 2 presenta control positivo Tubo 3 presenta control negativo Finalmente se denota la presencias de grasas debido a su color rojo final

III) Reconocimiento de protenas

1) Test de Biuret(protenas)

Tubo 1 almidon, tubo 2 albumina, tobo 3 agua destilada, 2ml de reactivo de biuret. Tubo (1) 2 ml solucin de almidn: control ( - ) Tubo (2) 2 ml solucin de albumina: control ( + ) Tubo (3) 2ml agua destilada: control ( - )

Tubo 1 presenta control negativo con una tonalidad de celeste claro debido que el almidn es un carbohidrato Tubo 2 presenta control positivo donde la concentracin de protenas es notoria con una coloracin violeta ms intensa Tubo 3 presenta control negativo con una tonalidad de celeste claro

IV) Desnaturalizacin de protenas

1) Efecto de la temperatura

Tubo 1 almidn, tubo 2 albumina, calentar suavemente flameando en el mechero

Tubo (1) 2ml de solucin de almidn: control ( - ) Tubo (2) 2ml de solucin de albumina: control ( + )

Tubo 1 presenta control negativo debido que el almidn no presenta cambio al ser sometida a la temperatura Tubo 2 presenta control positivo se observa que la protena se comienza a cocer y se ve como clara de huevo cocida al ser sometida a temperatura.

2) Efecto del pH

Tubo 1 acido ntrico, tubo 2 hidrxido de sodio, cada tubo con albmina

Tubo (1) albmina + Acido ntrico: control ( + ) Tubo (2) albumina + Hidrxido de sodio: control ( - )

Tubo 1 presenta control positivo ya que la albumina (protena) se desnaturaliza por completo (irreversible) Tubo 2 presenta control negativo ya que no hay desnaturalizacin.

V) Especificidad de las enzimas por su sustrato

1) Especificidad se sustrato de las enzimas de la saliva

Tubo 1 Tubo 2 Tubo 3 Tubo 4 Tubo 5 Tubo 6

Aceite 1ml 1ml - - -

Albmina - - 1ml 1ml - -

Almidn - - - - 1ml 1ml

Saliva 2ml - 2ml - 2ml -

Cada tubo sometido a la estufa a 37C por 5 minutos

a. Identificar lpidos mediante Test de sudan ( lpidos)Tubo 1 aceite y saliva, tubo 2 saliva Tubo (1) 1ml aceite,2ml saliva,1,5ml agua destilada ,1ml sudan: : control ( + ) Tubo (2) 1 ml aceite ,1,5 agua destilada,1ml sudan: control ( + )

Tubo 1 presenta control positivo para el test de Sudan, se observa de color burdeos caf intenso , presenta control negativo para la encima salival ( Amilasa salival) Tubo 2 presenta control positivo para el test de Sudan, se observa el tubo de color burdeos caf intenso.

b. Identificar protenas mediante test de Biuret ( protenas)

Tubo 3 albumina y saliva, tubo 4 albumina

Tubo (3) 1ml albumina,2ml saliva,1,5ml agua destilada,1ml biuret: control ( + ) Tubo (4) 1ml albumina,1,5ml agua destilada,1ml biuret: : control ( + )

Tubo 3 presenta control positivo para el test de Biuret, ya que la albumina es una protena se observa la solucin del tubo de color transparente, pero presenta control negativo para la encima salival (Amilasa salival). Tubo 4 presenta control positivo para test de Biuter, se observa el tubo con una coloracin violeta ya que la albumina es una protena.

c. Identificar almidn mediante test de lugol( almidn)

Tubo 5 almidn y saliva, tubo 6 almidn Tubo (5) 1ml almidon,2ml saliva,1,5ml agua destilada,1ml lugol: : control ( + ) Tubo (6) 1ml almidon,1,5 agua destilada,1ml lugol: : control ( + )

Tubo 5 presenta control positivo para el test de Lugol, presenta coloracin burdeos intenso donde el almidn se queda en la superficie del tubo y presenta control positivo para la encima salival (Amilasa salival) ya que esta degrada el almidn.

Tubo 6 presenta control positivo para el test de Lugol, con una coloracin rojiza donde el almidn se posa en fondo del tubo, presenta control positivo para la encima salival (Amilasa salival) ya que esta degrada el almidn.

DISCUCION

CONCLUSION

Todo ser vivo esta compuesto por diferentes elementos esenciales que le permiten un correcto desempeo a lo largo de su proceso.En nuestro practico pudimos conocer la presencia de diversas biomoleculas presentes en cada compartimiento o tubo, mediante pruebas o distintas metodologas como lo fueron el test de sudan, molich, biuret y lugol. Cada tubo que utilizamos posea distintas sustancias que a la larga determinaron la presencia de determinados componentes.A base de estas diferentes metodologas pudimos en grupo reconocer algunas molculas de tipo proteico como tambin molculas de tipo carbohidratos y lpidos. Posteriormente conocimos la especificad de una enzima que se manifestaba positiva o negativamente de acuerdo a su manifestacin final.

Anexos

Fotos

CUESTIONARIO

1 En el test de Molish porque el tubo con almidn reacciona positivamente?Por que el test de molish detecta cualquier carbohidrato presente, en este caso inmediatamente aparece un anillo color violeta, que separa el acido sulfrico ,debajo del anillo.

2 En el test de Lugol, cual (es) tobo(s) no se debe dar una reaccin positiva?No debe dar reaccin positiva en el caso de los tubos numero (3) ya que contiene glucosa y el tubo numero (4) contiene agua destilada, estas dos muestras carecen de almidn, donde no se genera reaccin positiva.

3 que parte del almidn es reconocida por el test de lugol?El test de Lugol reconoce el almidn cuando se encuentra de forma liquida, esto quedo demostrado al hacer la muestra de liquido de papa, nosotros tenamos en el tubo numero 2 una porcin de papa ralla y liquido de esta, al observarla solo el Lugol reacciono positivamente en el liquido.

4 Que estructuras forman los lpidos al entrar en contacto con un medio acuoso? explique por qu.Los lpidos al entran en un medio acuoso, se agrupan dependiendo de la cantidad de lpidos presentes.Monocapas: se forma una mono capa justo entre el agua y la atmosfera, ocupando el mximo de superficie disponible, donde la cabeza ( hidrofilica) hacia el contacto con el agua y las colas (hidrofobicas) salen hacia la atmosfera.Micelas: son estructuras donde la cabeza ( hidrobilica) es relativamente mas voluminosa que las colas (hidrofobicas) formando esferas salvaguardando las colas en su interior. Bicapas: cuando las colas (hidrofobicas) son mas voluminosas que las cabezas (hidrofilicas) no se pueden esconder, entonces forman una bicapa donde las cabezas estn en contacto con el medio acuso y las colas en su interior.

5 En el test de Biuret que ocurre entre el reactivo y las protenas?

El test de biuret presenta control positivo con los enlaces del pptido donde la concentracin de protenas es notoria generando una coloracin violeta ms intensa.

6 Que diferencias hay entre la desnaturalizacin e hidrlisis de una protena?

La Desnaturalizacin es la perdida de estructura en una protena por lo tanto la perdida de su funcin ( al ser sometidas a un a temperatura elevada pierden su estructura 3 y 4)

La Hidrlisis es tambin una perdida de estructura en este caso la perdida de la estructura 1, donde se agrega una molcula de agua

7 Qu ventajas para el organismo representa el cocer los alimentos?

Unas de las ventajas mas importantes para el organismo al cocer los alimentos es la mejora del estado higinico de los alimentos eliminando en gran mayora bacterias, microorganismos, esporas, etc., perjudiciales para la salud.

Practico n3Reconocimiento de Biomolculas 1