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Morfología y estructura celular. Biología 2º Bachillerato. Copyrigth José Reig 2004. Tema 7: LA CÉLULA, CONCEPTO. - PowerPoint PPT Presentation
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Biología 2º Bachillerato Morfología y estructura celular Copyrigth José Reig
2004
En 1665, el inglés Robert Hooke, examinando al microscopio una laminilla de corcho, observó que estaba formada por pequeñas cavidades a las que denominó células, aludiendo con ello al parecido con las celdillas de un panal.
Tema 7: LA CÉLULA, CONCEPTO
Biología 2º Bachillerato Morfología y estructura celular Copyrigth José Reig
2004Tema 7: LA CÉLULA, TEORÍA CELULAR
El verdadero conocimiento de la célula y todo lo que ella representa, ha sido el resultado de una suma de descubrimientos sucesivos debidos a gran número de científicos que merecen ser mencionados
Brown, que en 1833 descubre el núcleo
Purkinje, en 1839, introduce el término de protoplasma
Todos estos descubrimientos son el pie donde descansan las investigaciones posteriores de Schleiden y Schwan (1839) que les llevaron a determinar la teoría celular
SchleidenSchwan
“la célula es la unidad anatómica y fisiológica de los seres vivos”,
Biología 2º Bachillerato Morfología y estructura celular Copyrigth José Reig
2004Tema 7: LA CÉLULA, TEORÍA CELULAR
Wirchow, en 1855, enunció el principio “omnis cellula ex cellula”,
La última aportación a la teoría celular es obra de Cajal, que demuestra que todas las células son independientes, es decir, unidades, incluso las neuronas.
Biología 2º Bachillerato Morfología y estructura celular Copyrigth José Reig
2004Tema 7: LA CÉLULA
La historia de los decubrimientos celulares ha
estado ligada a los avances en microscopía
Microscopio de Hooke
Microscopio de 1880Microscopio actual
Microscopio óptico de investigación
Biología 2º Bachillerato Morfología y estructura celular Copyrigth José Reig
2004
El descubrimiento del microscopio electrónico en 1936, y su posterior perfeccionamiento y comercialización, a partir de los años 50, permite dar un salto cualitativo y cuantitativo muy grande.El microscopio óptico tiene un límite en su poder de resolución, la longitud de onda de la luz visible; distancias menores de esta longitud de onda entre dos puntos no podrán apreciarse y los contornos serían imprecisos.
Curso de los electrones
Condensador
Objetivo
Lugar de la preparación
Bomba de vacío
ProyectorOjo
Lupa binocular
Pantalla fluorescente
Cámara fotográfica
Tema 7: LA CÉLULA
PODER DE RESOLUCIÓN DEL MICROSCOPIO ÓPTICO CON LA LONGITUD DE ONDA DE LA LUZ VISIBLE
Biología 2º Bachillerato Morfología y estructura celular Copyrigth José Reig
2004Tema 7: LA CÉLULA
PODER DE RESOLUCIÓN DEL MICROSCOPIO ELECTRÓNICO CON LA LONGITUD DE ONDA DEL HAZ DE ELECTRONES
Biología 2º Bachillerato Morfología y estructura celular Copyrigth José Reig
2004Tema 7: LA CÉLULA
Biología 2º Bachillerato Morfología y estructura celular Copyrigth José Reig
2004
Los microscopios electrónicos pueden ser de dos tipos:
• De transmisión (el haz de electrones atraviesa los objetos)
• De barrido (El haz de electrones rebota sobre el objeto, que emite un haz secundario, que es el que se ve en pantalla. Sería semejante a las lupas binoculares
MICROSCOPIO DE TRANSMISIÓN Servicio de microscopia Universidad de Valencia
MICROSCOPIO DE BARRIDO Servcio de microscopía de la Universidad de Valencia
Tema 7: LA CÉLULA
Biología 2º Bachillerato Morfología y estructura celular Copyrigth José Reig
2004CÉLULA
Pero no sólo los microscopios han evolucionado de manera sorprendente, también las técnicas para confeccionar las preparaciones y las coloraciones han avanzado considerablemente a lo largo de las últimas décadas. Todo ello nos ha permitido un conocimiento casi definitivo sobre las células.TÉCNICAS PARA
CONFECCIONAR LAS PREPARACIONES MICROSCÓPICAS
Material a estudiar Fijación
Lavado
Microtomo de mano o congelación
Montaje en fresco
Deshidratación
TinciónMontaje en
glicerogelatina
Inclusión en parafina
Deshidratación
Aclarado
Microtomo Minot
Pegado cortes
Desparafinado
Hidratación
Deshidratación
TinciónMontaje en
glicerogelatinaMontaje en Bálsamo de
Canadá
Montaje en Bálsamo de Canadá
TIPOS DE MICROTOMOS
Y
OBTENCIÓN DE CORTES
Biología 2º Bachillerato Morfología y estructura celular Copyrigth José Reig
2004
• Microtomo de manoBiología 2º Bachillerato Morfología y estructura
celular Copyrigth José Reig 2004
• Microtomo de congelación
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• Microtomo tipo Minot, se caracteriza por ser móvil el bloque y fija la cuchilla. Para tejidos blandos
El grosor de los cortes oscila entre 10 y 20 micras
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2004
Inclusión en parafina.-
Las parafinas son mezclas hidrocarburos saturados con punto de fusión entre 54º y 56º C.
1. Alcohol etílico 96º 1/2 hora
2. Alcohol etílico 96º 1/2 hora
3. Alcohol etílico absoluto 1/2 hora
4. Alcohol etílico absoluto 1/2 hora
5. Alcohol etílico absoluto 1/2 hora
6. Acetato de isoamilo 1/2 hora
7. Acetato de isoamilo 1/2 hora
8. Acetato de isoamilo 1/2 hora
9. Parafina a 56-58º estufa3/4 hora
10. Confeccionar el bloque
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Confección de las preparaciones
• cortes en baño de María con agua a 36-40º C
• portaobjetos impregnado con albúmina de Mayer
• estufa, a unos 58º C, durante media hora
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Batería
Desparafinación e hidratación
1 .- Xileno 1/2 hora
2 .- Xileno 1/2 hora
3 .- Alcohol etílico absoluto 1/2 hora
4 .- Alcohol etílico absoluto 1/2 hora
5 .- Alcohol etílico de 96º 1/2 hora
6 .- Agua
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Safranina
Xileno
Alcohol etílico
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Tinción y montaje de las preparaciones
Si los colorantes se encuentran en disolución acuosa se realizarán los 6 pasos de la desparafinación..
Si se hallan en disolución alcohólica o en disolventes apolares (esencia de clavo, etc.) se llegará al punto 5.
1.- Tinción
2.- Lavado con agua destilada
3.- Deshidratación mediante goteo de etílico absoluto
4.- Aclarado con creosota, aceite de clavo, xilol, etc.
5.- Montaje con Bálsamo de Canadá, Entellán, Euparal, etc.
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2004
Muestras microtomos de mano-congelación
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Proceso de teñido y montaje de las preparaciones
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2004
CÉLULAMaterial a estudiar Fijación en glutaraldehido
Lavado
Deshidratación
Inclusión en resinas epoxi
Ultramicrotomo
Recogida de cortes en rejillas
Contrastado con citrato de uranilo
Observación
Postfijación en tetróxido de osmio
Confección de cortes para microscopio electrónico
Ultramicrotomo
Cuchilla
Balsa
Recoge cortes
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2004
Confección de cuchillas para el ultramicrotomo y manejo del mismo
Biología 2º Bachillerato Morfología y estructura celular Copyrigth José Reig
2004
Biología 2º Bachillerato Morfología y estructura celular Copyrigth José Reig
2004
Cuchilla de diamante
0’5 cm
Rejillas portaobjetos para microscopía electrónica
MATERIAL PARA MICROSCOPÍA ELECTRÓNICA
Biología 2º Bachillerato Morfología y estructura celular Copyrigth José Reig
2004ALGUNAS IMÁGENES OBTENIDAS CON EL M.E.T.
Bacilos en división Célula de Schwan
Granulocito
Mitocondria
Parénquima de hoja de guisante
Biología 2º Bachillerato Morfología y estructura celular Copyrigth José Reig
2004TRATAMIENTO DE LAS MUESTRAS PARA LAS OBSERVACIONES CON EL MICROSCOPIO ELECTRÓNICO DE BARRIDO
FIJACIÓN LAVADODESHIDRATACIÓN
EN SERIES DE ETANOL
SOMETER A PUNTO CRÍTICO
MONTAR EN PORTA MUESTRAS
DORADO DE LAS MUESTRASOBSERVACIÓN
Biología 2º Bachillerato Morfología y estructura celular Copyrigth José Reig
2004TRATAMIENTO DE LAS MUESTRAS PARA LAS OBSERVACIONES CON EL MICROSCOPIO ELECTRÓNICO DE BARRIDO
Filamento de donde proceden los electrones
Ánodo
Condensador
imagen
Generador de barrido
Cátodo
Especimen Colector
Fotomultiplicador
Objetivo
Control de aumentosHaz
Esquema del microscopio electrónico de barrido
Punto crítico
Equipo de dorado de muestras
Varias muestras ya doradas en los portamuestras
Biología 2º Bachillerato Morfología y estructura celular Copyrigth José Reig
2004IMÁGENES OBTENIDAS CON EL MICROSCOPIO DE BARRIDO
Diatomea
Ojo de mosquito
Radiolario
Biología 2º Bachillerato Morfología y estructura celular Copyrigth José Reig
2004