Biokimia 1 PROTEIN

8/17/2019 Biokimia 1 PROTEIN

1/27

HALAMAN PENGESAHAN

Laporan Lengkap Praktikum Biokimia Dasar dengan Judul “ Uji

Penentuan Konsentasi Protein Cara Biuret, Reaksi Pengendapan, dan Reaksi

Peruba an !arna ” yang disusun oleh:

Nama : Maulyda Awwaliyah.P

N M : !"!"!"#$$%

&elas : B

&elompok : ' (Lima)

telah diperiksa dan dikoreksi oleh Asisten dan* &oordinator Asisten dan

dinyatakan diterima.

Makassar+ Desem,er #$!-&oordinator Asisten Asisten

"ju#arir#anto , S$Pd AdrianiN%M$ &'&(&(&))*

Mengetahui+Dosen Penanggung Jawa, Praktikum

Pro+$"r$%r$ Hj$ us#ina Ha-a, MSN%P . &/0&&'&' &/*0)& ' ))'


2/27

BAB %PEN"AHULUAN

A$ Latar Be-akang

Perkem,angan ilmu diawali dari rasa ingin tahu+ kemudian

meningkatnya rasa ingin tahu+ yang mendorong sesorang untuk ,er ikir dan

ingin men/ari tahu+ maka dari itu pada praktikum kali ini ,er0udul asam

amino+ peptida+ dan protein+ dimana protein sangat penting dalam kehidupan+

dan terdapat pada semua sel hidup+ yang ,er ungsi se,agai pem,angun

struktur+ ,iokatalis+ hormon+ sum,er energi+ dan ,ahkan pem,awa si at dari

generasi1kegenerasi.

Protein adalah senyawa organik kompleks ,er,o,ot molekul tinggi

yang merupakan polimer dari monomer1monomer asam amino yang

dihu,ungkan satu sama lain dengan ikatan peptida. Molekul protein

mengandung kar,on+ hidrogen+ oksigen+ nitrogen dan kadang kala sul ur serta

os or. 2uatu molekul protein disusun oleh se0umlah asam amino tertentu

dengan susunan yang sudah tertentu pula dan ,ersi at turunan (3irindra+!45%).

2truktur protein dapat dikelompokkan men0adi empat kelas+ yaitu

struktur primer+ sekunder+ tersier dan kwartener. &eempat struktur terse,ut

pada dasarnya di,edakan atas 0enis dan 0umlah ikatan*interaksi kimia. 6ntuk

mengidenti ikasi protein ,erdasarkan ikatan peptidanya dilakukan ,e,erapa

u0i. 60i 7u0i yang dilakukan adalah 60i Penentuan &onsentasi Protein 8ara

Biuret+ 9eaksi Pengendapan+ dan 9eaksi Peru,ahan arna yang meliputi 60iBiuret+ ;antoprotein+ Millon+ Ninhidrin+ dan 2ul ur (


3/27

78? dan 7N@ dari rantai peptida dalam suasana ,asa. 2erta u0i >antroproteat

,ereaksi positi untuk asam amino yang mengandung inti ,en ena.

?leh karena itu+ untuk mem,uktikan teori1teori yang ada tentang

protein maka kami melakukan ,e,erapa per/o,aan. Diantaranya+ 60i

penentuan konsentrasi /ara ,iuret dilakukan untuk mengetahi per,edaan

konsentrasi terhadap suatu larutan sedangkan reaksi peru,ahan warna

dilakukan untuk melihat protein yang dikandung pada setiap per/o,aan

dengan mengamati peru,ahan warna yang ter0adi pada setiap per/o,aan.

B$ 1ujuan

Adapun tu0uan dari praktikum ini adalah :

a. Mengetahui konsentrasi protein total yang terdapat pada sampel.

,. Mempela0ari ,e,erapa reaksi u0i terhadap asam amino dan protein.

/. Mem,uktikan kandungan yang ada pada asam amino+ peptide dan protein

melalui u0i ,iuret+ u0i >antoprotein+ u0i molis/h+ u0i ninhidrin+ dan u0i sul ur+

dan u0i sakagu/hi.

C$ Man+aat Praktiku#

Adapun man aat dari paktikum ini adalah dapat mem,eri wawasan yang

le,ih luas dan keterampilan yang le,ih ,aik kepada Mahasiswa khususnya

mengetahui ke,enaran dari teori1teori tentang kandungan unsur1unsur yang

ada pada protein. Pem,uktikan ke,enaran dari teori1teori tentang kandungan

yang ada pada asam amino+ peptide dan protein melalui u0i ,iuret+ u0i

>antoprotein+ u0i molis/h+ u0i ninhidrin+ dan u0i sul ur+ dan u0i sakagu/hi.


4/27

BAB %%1%N2AUAN PUS1AKA

2e,agian ,esar ilmu kimia organisme hidup menyangkut - golongan senyawa

utama+ yaitu: kar,ohidrat+ lipida+ mineral+ asam nukleat dan protein. Protein

menentukan ke,anyakan si at1si at yang ditemukan dalam kehidupan. Menurut

(Ngili+ #$!$) Protein memiliki ,er,agai ungsi ,iologis yang ,er,eda1,eda yaitu+

&atalis en im+


5/27

!. Asam amino esensial ( yang tidak dapat di,entuk dalam tu,uh). Asam amino

yang termasuk dalam kelompok esensial adalah isoleusin+ leusin+ lisin+

metionin+ enilalanin+ treonin+ tripto an dan Calin.

#. Asam amino nonesensial (yang dapat di,entuk dalam tu,uh dan harus

diperoleh dari makanan sum,er protein). Asam amino yang termasuk dalam

kelompok nonesensial adalah arginin+ histidin+ asam glutamate+ asama

aspartat+ glutamine+ prolin+ asparagin+ alamin+ glisin+ serin dan sistein.

Proses kimia dalam tu,uh dapat ,erlangsung dengan ,aik karena adanya

en im+ suatu protein yang ,er ungsi se,agai ,iokatalis. Di samping itu

hemoglo,in dalam ,utir darah merah (eritrosit) yang ,er ungsi mengangkut

oksigen dari paru1paru ke seluruh 0aringan tu,uh adalah salah satu 0enis protein.

Protein (asal kata protos dari ,ahasa Eunani yang ,erarti Fyang paling utamaF)

adalah senyawa organik kompleks ,er,o,ot molekul tinggi yang merupakan

polimer dari monomer 1monomer asam amino yang dihu,ungkan satu sama lain

dengan ikatan peptida . &e,anyakan protein merupakan en im atau su,unit en im

( essenden. !45%).

Protein adalah molekul penyusun tu,uh kita yang ter,esar setelah air. @al

ini mengindikasikan pentingnya protein dalam menopang seluruh proses

kehidupan dalam tu,uh. Dalam kenyataannya+ memang kode genetik yang

tersimpan dalam rantaian DNA digunakan untuk mem,uat protein+ kapan+ dimana

dan se,erapa ,anyak. Protein ,er ungsi se,agai penyimpan dan pengantar seperti

hemoglo,in yang mem,erikan warna merah pada sel darah merah kita+ ,ertugas

mengikat oksigen dan mem,awanya ke ,agian tu,uh yang memerlukan. 2elain itu

0uga men0adi penyusun tu,uh+ Fdari u0ung ram,ut sampai u0ung kakiF+ misalnya

keratin di ram,ut yang ,anyak mengandung asam amino 8ysteine sehingga

menye,a,kan ,au yang khas ,ila ram,ut ter,akar karena ,anyaknya kandungan

atom sul ur di dalamnya+ sampai kepada protein1protein penyusun otot kita seperti

a/tin+ myosin+ titin+ ds,. &ita dapat mem,a/a teks ini 0uga antara lain ,erkat

protein yang ,ernama rhodopsin+ yaitu protein di dalam sel retina mata kita yang

meru,ah photon /ahaya men0adi sinyal kimia untuk diteruskan ke otak. Masih

http://id.wikipedia.org/wiki/Bahasa_Yunanihttp://id.wikipedia.org/wiki/Senyawa_organikhttp://id.wikipedia.org/wiki/Senyawa_organikhttp://id.wikipedia.org/wiki/Polimerhttp://id.wikipedia.org/wiki/Monomerhttp://id.wikipedia.org/wiki/Monomerhttp://id.wikipedia.org/wiki/Asam_aminohttp://id.wikipedia.org/wiki/Ikatan_peptidahttp://id.wikipedia.org/wiki/Enzimhttp://id.wikipedia.org/wiki/Senyawa_organikhttp://id.wikipedia.org/wiki/Polimerhttp://id.wikipedia.org/wiki/Monomerhttp://id.wikipedia.org/wiki/Monomerhttp://id.wikipedia.org/wiki/Asam_aminohttp://id.wikipedia.org/wiki/Ikatan_peptidahttp://id.wikipedia.org/wiki/Enzimhttp://id.wikipedia.org/wiki/Bahasa_Yunani


6/27

,anyak lagi ungsiprotein seperti hormon+ anti,odi dalam sistem keke,alan tu,uh+

dll ( itarto+ #$$!).

Menurut Poed0ia0i+ #$$ pemeriksaan protein umumnya ,erdasarkan reaksi

warna. 9eaksi ini adalah reaksi1reaksi khas protein yang ,erdasarkan ikatan

peptide maupun adanya si at1si at tertentu dari asam amino yang dikandungnya.

Be,erapa reaksi1reaksi khusus protein yaitu:

!. 60i >antoprotein+ reaksi yang ter0adi adalah nitrasi pada inti ,en ene yang

terdapat pada molekul protein. 9eaksi positi ditandai dengan tim,ulnya

warna kuning dan negatiCe selain warna kuning.

#. 60i ,iuret+ reaksi ini umumnya untuk peptide dan protein+ termasuk

diantaranya hasil hidrolisis protein seperti metaprotein+ protease+ pepton+

polipeptida+ ke/uali asam amino. 9eaksi positi ter0adi dengan adanya warna

ungu atau merah muda aki,at ter0adinya senyawa antara 8u dan N dari air.

Bila ikatan peptide pan0ang warnanya ungu se,aliknya ,ila pendek warnanya

merah muda.

=. 60i millon+ reaksi millon adalah larutan merkuro atau merkuri nitrat dalam

asam nitrat. pada dasarnya reaksi ini positi untuk enol1 enol+ karena te,entuk

senyawa merkuri dengan gugus hidriksi enil yang ,erwarna (merah terang).

Protein yang mengandung tyrosin akan mem,erikan hasil positi . Pereaksi

Millon adalah larutan merkuro dan merkuri nitrat dalam asam nitrat. Apa,ila

pereaksi ini ditam,ahkan pada larutan protein+ akan menghasilkan endapan

putih yang dapat ,eru,ah merah oleh pemanasan. Pada dasarnya reaksi ini

positi untuk enol1 enol+ karena ter,entuknya senyawa merkuri dengan gugus

hidroksi enil yang ,erwarna. Protein yang mengandung tirosin akan

mem,erikan hasil positi .

". 60i sul ur+ untuk mengu0i sul ur yng terkandung dalam asam amino. 9eaksi

positi ditandai dengan warna /oklat dan hitam.

-. 60i ninhidrin+ untuk mengtahui dekar,oksilasi oksidati dan G1amino.

Ninhidrin adalah suatu oksidator yang menye,a,kan dekar,oksilasi oksidati

dari G1amino yang menghasikan 8? #+ N@=+ dan aldehid dengan kehilangan !


7/27

atom kar,on.warna ,iru ter0adi ,erhu,ungan reaksi ninhidrin menghasilkan

aldehid yang rendah dan melepaskan 8? # dan amoniak.

BAB %%%ME13"E PRAK1%KUM

A$ !aktu dan 1e#pat

@ari*tanggal : JumHat dan 2a,tu* " dan - NoCem,er #$!-

aktu : Pukul $4.!$1!!.$$ dan Pukul !".$$1!%.$$


8/27

. 3elas ukur

/) 9eaksi Peru,ahan arna

!. 9ak


9/27

-. NaN? =

%. A uades

. P, asetat

5. Bahan u0i yang terdiri atas pepton+ putih telur+ ekstrak tempe+

dan ekstrak tauge.

C$ Prosedur Kerja

a. 60i Penentuan &onsentrasi 8ara Biuret

Menam,ahkan

Mengo/ok

sampai

Mendiamkan

Mem,a/a

,. 60i Pengendapan

!. 60i Pengendapan Alkohol Pekat

Menyiapkan ta,ung reaksi yang ,ersih

Mengisi

! ml larutan protein dengan konsentrasi $I+#-I+-$I+ -I+; !dan ; #

" ml reagen ,iuret pada setiap ta,ung reaksi

@omogenDengan Corteks

Pada suhu kamar selama =$ menit

A,sor,ansi masing1masing /ampuran pada pan0ang gelom,ang--$


10/27

Memasukkan

Memasukkan

Menetesi

#. 60i Pengendapan on Logam

Memasukkan

Memasukkan

Menetesi

Mengam,il " ta,ung reaksi

=ml protein pada setiap ta,ung reaksi

Masing1masing larutan yaitu asam trikloroasetat+ asam os otungtat+ asam os o moli,dat+ dan alkohol 4-I sampai ter,entuk

Larutan yaitu asam trikloroasetat+ asam os o tungtat+ asam os o

moli,dat+ dan alkohol 4-I sampai endapan itu hilang.

Mengam,il " ta,ung reaksi

=ml protein pada setiap ta,ung

reaksi

Masing1masing larutan yaitu perak nitrat #I+ tem,aga sul at #I+ dan

ersiklorida #I sampai ter,entuk endapan.

Larutan yaitu perak nitrat #I+ tem,aga sul at #I+ dan ersiklorida #I

sampai endapan itu hilang.


11/27

=. 60i Pengendapan Amonium 2ul at (N@ ")# 2? "

Memasukkan

Memasukkan

Menetesi

/. 9eaksi Peru,ahan arna

!. 60i Biuret

Menam,ahkan

Menam,ahkan

Mengam,il se,uah ta,ung reaksi

-ml protein pada setiap ta,ung reaksi

Larutan ammonia sul at sampai ter,entuk endapan

Larutan yaitu ammonia sul at sampai endapan itu hilang.

Menyiapkan " ta,ung reaksi dan mengisinya # ml larutan protein yang

,er,eda1,eda (Kkstrak


12/27

#. 60i ;anthoprotein

menam,ahkan

memanaskan

mendinginkan

menam,ahkan

=. 60i Molis/h

menam,ahkan

mengamati

Mengamati dan men/atat hasilnya

Menyiapkan " ta,ung reaksi dan mengisinya # ml larutan protein yang



13/27

". 60i Ninhidrin

menam,ahkan

memanaskan

mendiamkan

-. 60i sul ur

menam,ahkan

memanaskan

menam,ahkan

Menyiapkan " ta,ung reaksi dan mengisinya = ml larutan protein yang



14/27

%. 60i 2akagu/hi

menam,ahkan

menam,ahkan

menam,ahkan

Menyiapkan " ta,ung reaksi dan mengisinya = ml larutan protein yang



15/27

BAB %5HAS%L "AN PEMBAHASAN

A$ Hasi- penga#atan

60i &onsentrasi dan 60i Pengendapan Protein

!. Penentuan konsentrasi protein /ara ,iuret

N

?

&?N2KN


16/27

# e8l = !-$H

!-$H

!$!-$

H5

!-$H

% $H

". 60i Pengendapan Amonium 2ul at

No.

9eagen $I #-I -$I -I< @ < @ < @ < @

! Amonium2ul at

!5!

!5!H

#$ 5%H ! H!-$

H!#H

!%"H

-. 9eaksi Peru,ahan arna

%. 3ra ik Penentuan &onsentrasi 8ara Biuret

B$ Ana-isis data

!. Mengu,ah


17/27

# 7 ($+=4)

!+%!

/.) A(; =I) log I <

Log I 1 Log <

# 7 Log $+-

# 7 (1$+=$)

#+=$

#. Data yang digunakan adalah data konsentrasi # dan =

Misalkan ; ! #- y ! $.%

; # -$ y # $."#

Jadi+ 6ntuk persamaan Pertama dan persamaan kedua :

y ! a> ! , y # a># ,

$.% #-a ,$."# -$a ,

Kliminasi Persamaan Pertama dan &edua :

$.% -$a ,

$."# #-a ,

$.#- #-a

a 0.2525

a $.$!

6ntuk nilai ,:

Nilai a didistri,usikan masuk ke persamaan &edua+ 0adi:

$."# -$a ,

$."# -$ ($.$!) ,

$."# $.- ,

$."# 1 $.- ,

, $.$5

6ntuk nilai konsentrasi ; ! dan ; #+ nilai a dan , di distri,usikan masuk kedalam

persamaan y a> ,

6ntuk konsentrasi ; !


18/27

y a> ,

!+4# $+$! (; ! ) $+$5

!+4#7$+$5 $+$! ; !

!+5" $+$! ; !

; !1,840,01

; ! !5" ppm

6ntuk konsentrasi ; #

y a> ,

#+- $+$! ; # $+$5

#+- 1 $+$5 $+$!; #

#+"# $+$! ; #

; #2,420,01

; # #"# ppm

6ntuk konsentrasi ; =

y a> ,

#+=$ $+$! ; = $+$5

#+=$ 1 $+$5 $+$!; =

#+## $+$! ; =

; = 2,220,01

; = ### ppm

C$ Pe#ba asan

!. 60i Penentuan &onsentrasi 8ara Biuret

Pada penentuan konsentrasi protein /ara ,iuret dengan menggunakan alat

spektro otometer. 2pektro otometer merupakan alat yang digunakan untuk

mengukur a,sor,ansi dengan /ara melewatkan /ahaya dengan pan0ang

gelom,ang tertentu pada suatu o,0ek ka/a atau kuarsa yang dise,ut /uCet.

Adapun prinsip ker0a dari spektro otometer adalah ,ila /ahaya

(monokromatik maupun /ampuran) 0atuh pada suatu medium homogen+


19/27

se,agian dari sinar yang masuk akan dipantulkan dan se,agian diserap

dalam medium itu. Dan sisanya diteruskan. Nilai yang keluar dari /ahaya

yang diteruskan dinyatakan dalam nilai a,sor,ansi karena memiliki

hu,ungan dengan konsentrasi sampel.

Nilai a,sor,ansi suatu larutan dapat ditentukan ,erdasarkan konsentrasi

protein. Pada se,uah sampel ; ! dan ; # ,antuan kurCa standar dengan

menggunakan rumus persamaan garis lurus yaitu y a> ,. Pengukuran

konsentrasi dengan spektro otometer didasarkan pada hukum Lam,ert1Beer+

yang menyatakan ,ahwa pengukuran intensitas /ahaya yang masuk

di,andingkan dengan ,anyaknya atom1atom dan pan0ang medium serapan.

@asil pengamatan yang telah kami lakukan yaitu menggunakan protein

dengan konsentrasi yang ,er,eda1,eda yaitu dengan konsentrasi $I+ #-I+

-$I+ -I+ yang kemudian di tam,ahkan dengan " ml reagen ,iuret di

dapatka hasil ,erturut1turut $+==" nm+ $+# 5 nm+ $+=55 nm+ $+""$ nm+ dan

$+"5$ nm+ namun pada u0i pertama dan ke dua hasilnya kurang ,enar karna

seperti yang kita lihat ,ahwa konsentrasi yang le,ih rendah namun

a,sor,ansinya le,ih tinggi tetapi pada konsentrasi $ ter0adi peningkatan

di,anding konsentrasi lainnya dan ter0adi penurunan pada konsentrasi ; #.

@al ini tidak sesuai dengan @ukum Beer menyatakan a,sor,ansi /ahaya

,er,anding lurus dengan dengan konsentrasi dan kete,alan ,ahan*medium

(dalam Miller J.N #$$$). Adanya per,edaan konsentrasi dan a,sor,ansi

antara hasil per/o,aan dengan teori dise,a,kan adanya kesalahan prakikan

yaitu dalam mengukur ,anyaknya sampel protein dengan reagen ,iuret+

men/ampurkan larutan dan waktu yang di,utuhkan untuk mendiamkannya

tidak /ukup atau le,ih dari =$ menit+ pada saat pem,a/aan nilai a,sor,ansi

pada spektro otometer.


20/27

a. 60i Pengendapan dengan 9eagen Alkohol Pekat

@asil pengamatan+ ditun0ukkan 0umlah tetes reagen yang

digunakan pada setiap sampel ,er,eda1,eda hingga menim,ulkan

endapan+ hal ini dise,a,kan ,erdasar pada teori ,ahwa penye,a,

pengendapan ter0adi karena kemampuan setiap larutan untuk men/apai

titik isoelektrik dan p@ reagen yang digunakan ,er,eda1,eda+ sehingga

0umlah tetes yang ,er,eda1,eda sampai ter0adi pengendapan.dan pada

per/o,aan ini tidak ada satu pun reagen yang menun0ukkan hilangnya

endapan hal ini dise,a,kan karena ,ahan yang digunakan sudah

kadaluarsa atau sudah tidak layak pakai.

2eharusnya salah satu reagen yang digunakan ter0adi pengen/eran

kem,ali atau hilangnya endapan pada saat p@ larutan ,erada diatas

titik isoelektrik dimana saat itu larutan ,erada dalam keadaan ,asah.

Proses ini dinamakan proses penyusunan kem,ali struktur protein

(3irindra+ !45%).

,. 60i Pengendapan dengan Amonium 2ul at

@asil pengamatan dari ketiga sampel yang digunakan yaitu glisin+

pepton+ dan protein kemudian ditam,ahkan dengan reagen yang telah

disediakan oleh la,oran.3lisin dan protein setelah ditam,ahkan dengan

reagen ter,entuk endapan. ni dise,a,kan karena p@ larutan ,erada

pada titik isoelektrik sehingga kelarutan protein akan ,erkurang+ dan

endapan ter0adi karena kemampuan setiap larutan untuk men/apai titik

isoelektrik (


21/27

senyawa antara 8u dan N dari ikatan peptida dan ? dari air+ Asam

amino mem,erikan reaksi ,iuret negati + se,a, tidak ada ikatan peptida

Per/o,aan ini menggunakan " ,uah ta,ung reaksi yang ,erisi

dengan pepton+ ekstrak tempe+ ekstrak tauge dan putih telur yang

kemudian ditam,ahkan dengan Na?@ "$ I dan #1= 8u2? "

mengalami peru,ahan warna yang mana ekstrak tempe dan putih telur

mengalami peru,ahan warna men0adi ungu yang menandakan ,ahwa

reaksi ini positi mengandung ikatan peptide pan0ang+ menurut

(3irindra+ A. !45%) Biuret adalah senyawa dengan dua ikatan peptida

yang ter,entuk pada pemanasan dua molekul urea. on 8u # dari

pereaksi Biuret dalam suasana ,asa akan ,erekasi dengan polipeptida

atau ikatan1ikatn peptida yang menyusun protein mem,entuk senyawa

kompleks ,erwarna ungu atau Ciolet. arna ungu yang ter,entuk

dalam u0i ,iuret ini ,erasal dari ion 8u # (yang dihasilkan dari

Cu 2 SO4 ) dari pereasksi ,iuret.

Per/o,aan yang kami lakukan+ positi terhadap dua ,ahan yangkami u0ikan yaitu ekstrak tempe dan putih telur.


22/27

/oklat muda+ putih telur menghasilkan warna /oklat keruh+ dan pepton

menghasilkan warna /oklat tua. &eempat ,ahan ini menun0ukkan hasil

yang negatiCe.@al ini mungkin dise,a,kan karena alat1alat yang kami

gunakan kurang ,ersih sehingga mempengaruhi reaksi serta ,ahan

yang kami gunakan sudah tidak layak pakai.

/. 60i ;antoprotein

60i ;antoprotein ,ertu0uan untuk mengu0i ke,eradaan asam amino

yang mangandung inti ,en ena pada gugus sampingnya+ seperti tirosin+

tripto an+ dan enilalanin. Prinsip ini menggunakan prinsip nitrasi inti

,en ene oleh asam nitrat pekat+ sehingga larutan dapat ,erwarna.

Per/o,aan yang kami lakukan menggunakan " ,uah ta,ung reaksi

yang ,erisi dengan pepton+ ekstrak tempe+ ektrak tauge dan putih telur

yang kemudian ditam,ahkan dengan @N? = Pekat dan dipanaskan

selama kurang le,ih ! menit dan ditam,ahkan dengan #1= larutan

8u2? " se/ara perlahan menghasilkan peru,ahan warna pada pepton

,erwarna kuning ,ening++ ekstrak tempe ,erwarna kuning keruh dan

ekstrak tauge ,erwarna kuning tua (9eaksi Positi ). Menurut (@ala+

#$!!) reaksi warna ini untuk asam amino yang mengandung /in/in

enil atau inti ,en ene+ /ontoh triosin+ enilalanin+ dan tripto an.

2ehingga reaksi positi ditandai dengan pepton ,erwarna kuning

,ening++ ekstrak tempe ,erwarna kuning keruh dan ekstrak tauge

,erwarna kuning tua yang menandakan ,ahwa reaksi ini positi

mengandung /in/in enil atau inti ,en ene.

Larutan protein reagen molis/h Kndapan putih

d. 60i Ninhidrin

Nindhidrin adalah suatu oksidator yang menye,a,kan

dekar,oksilasi oksidati dari G1amino yang menghasilkan 8? #+ N@= dan


23/27

aldehid dengan kehilangan satu atom kar,on. ninhidrin ,eraksi dengan

asam amino ,e,as dan protein menghasilkan warna ,iru ter0adi

,erhu,ung reaksi ninhidrin menghasilkan aldehid yang rendah dan

melepaskan 8? # dan amoniak. 9eaksi ini termasuk yang paling umum

dilakukan untuk analisis kualitati protein dan produk hasil

hidrolisisnya.

60i Ninhidrin yang kami menggunakan " ,uah ta,ung reaksi yang

,erisi dengan pepton+ ekstrak tempe+ ekstrak tauge dan putih telur yang

kemudian ditam,ahkan dengan %1!$ tetes Ninhidrin dan kemudian di

panaskan dan menghasilkan warna ,iru tua untuk ekstrak tempe+

ekstrak tauge dan putih telur dan pepton yang ,erwarna ungu pekat.

@al ini menandakan ,ahwa reaksi positi menghasilkan aldehid yang

rendah karna menurut (@awa,. #$$") 2emua asam amino+ atau peptida

yang mengandung asam1G amino ,e,as akan ,ereaksi dengan ninhidrin

mem,entuk senyawa kompleks ,erwarna ,iru1ungu.

e. 60i 2ul ur

60i sul ur ,ertu0uan untuk mengu0i adanya sul ur yang terkandung

dalam asam amino. 2istein dan Metionin merupakan asam amino yang

mengandung atom 2 pada molekulnya. 9eaksi positi ditu0ukkan


24/27

dengan peru,ahan warna /okelat atau kuning karena ter,entuk P,s

(@ala+ #$!!).

Per/o,aan ini menggunakan - ,uah ta,ung reaksi yang ,erisi

dengan protein+ asam amino+ al,umin+ e>trak tempe dan putih telur

yang kemudian ditam,ahkan dengan Na?@ "$I dan di panaskan

selama kurang le,ih ! menit setelah itu di tam,ahkan dengan P, asetat

dan ter0adi peru,ahan warna yaitu putih telur ,ewarna kuning tua yang

menandakan reaksi positi mem,entuk P,2. &arena pada reaksi ini

sampel yang di gunakan akan ,erikatan dengan P, yang mana

kemudian mem,entuk P,2.

2edangkan ekstrak tempe ,erwarna ,ening dan mem,entuk

endapan+ ekstrak tauge ,erwarna kuning dan mem,entuk endapan dan

pepton ,erwarna ,ening yang menandakan ,ahwa reaksi negatiCe+ hal

ini ter0adi mungkin karna alat1alat yang kami gunakan kurang ,ersih

sehingga mempengaruhi reaksi serta ,ahan yang kami gunakan sudah

tidak layak pakai.

. 60i 2akagu/hi

60i 2akagu/hi ,ertu0uan untuk mendeteksi adanya kandung asam

amino arginin. Arginin mengandung gugus guanidine diu0ungnya.

3ugus guanidine merupakan atom 8 yang mengikat N 2 dengan

ikatan tunggal dan mengikat N dengan ikatan ganda. 3ugus 3uanidin

akan ,ereaksi dalam u0i sakagu/hi. Dalam kondisi ,asa∝ − naftol

akan ,ereaksi dengan gugus guanidine dalam arginin yang telah

teroksidasi sodium hipoklorit+ menghasilkan senyawa ,erwarna merah.

Per/o,aan ini menggunakan " ,uah ta,ung reaksi yang ,erisi

dengan pepton+ ekstrak tempe+ ekstrak tauge dan putih telur yang

kemudian ditam,ahkan = tetes∝ − naftol dan !1# tetes hipoklorid.

Pada per/o,aan ini putihtelur dan pepton menghasilkn warna merah.

@al ini menandakan ,ahwa reaksi positi mengandung arginin.


25/27

BAB 5PENU1UP

A$ Kesi#pu-an

2etelah kami melakukan per/o,aan reaksi peru,ahan warna+ kami dapat

menympulkan ,ahwa reaksi asam amino+ peptide dan protein sudah ter,ukti

dalam ,e,erapa u0i yaitu pada u0i ,iuret ekstrak tempe dan putih telur

,erwarna ungu yang menandakan ,ahwa reaksi ini positi mengandung ikatan

peptide pan0ang sedangkan ekstrak tauge dan pepton menun0ukkan hasil yang

negati + 60i molis/h yang kami lakukan semuanya menun0ukkan hasil yang

negatiCe+ 60i >antoprotein ekstrak tempe+ ekstrak tauge dan pepton ,ewarna

kuning yang menandakan ,ahwa reaksi ini positi mengandung /in/in enil

atau inti ,en ene sedangkan putih telur menun0ukkan hasil yang negati + 60i

ninhidrin yang kami lakukan semuanya menun0ukkan hasil yang positi

menghasilkan aldehid yang rendah+ 60i sul ur yang kami lakukan pada putih

telur ,ewarna /oklat tua yang menandakan reaksi positi mem,entuk P,2+ 60i

sakagu/hi pada putih telur dan pepton ,erwarna merah yang menandakan

reaksi positi

B$ Saran

!. 6ntuk praktikan

Praktikan diharapkan agar se,elum melakukan praktikum agar dapat

mengetahui apa yang akan dipraktikumkan.

#. 6ntuk la,oratorium


26/27

La,oratorium diharapkan agar le,ih melengkapi asilitas yang

diperlukan dalam praktikum.

=. 6ntuk Asisten

Asisten diharapkan agar dapat mem,im,ing le,ih maksimal.

"A61AR PUS1AKA

essenden. !45%. Kimia Organik Jilid 2 . Jakarta : Krlangga.

3irindra+ Ais0ah. !45%. Biokimia 1 . Jakarta: 3ramedia.

@ala+ Eusmina. #$!!. Penuntun Praktikum Biokimia Umum. Jurusan BiologiM PA 6NM: Makassar.

@ala+ Eusmina. #$!#. Penuntun Praktikum Biokimia Umum. Jurusan BiologiM PA 6NM: Makassar.

@awa,+ @M. #$$". Pengantar Biokimia . Jakarta : Bayu Media Pu,lishing.

Lehninger+ A.L.+ !44 . Dasar-dasar Biokimia Jilid 1 . Jakarta: Krlangga.

Miller+ J.N and Miller+ J.8. #$$$. Statistics and Chemometrics or !nal"ticalChemistr". #thed . Prenti/e @all: @arlow.

Ngili+ Eohanis. #$!$. Biokimia Dasar . 9ekayasa 2ains: Jakarta.

Poed0iadi+ A.+ #$$ . Dasar-dasar Biokimia . Jakarta:6niCersitas ndonesia


27/27

Documents

Biokimia 1 PROTEIN