BAKTERIJSKI UZROČNICI BAKTERIJSKI UZROČNICI MASTITISA KRAVAMASTITISA KRAVA

Prof. dr. sc. Branka ŠeolProf. dr. sc. Branka ŠeolZAVOD ZA MIKROBIOLOGIJU I ZAVOD ZA MIKROBIOLOGIJU I ZARAZNE BOLESTI S KLINIKOMZARAZNE BOLESTI S KLINIKOMVETERINARSKOG FAKULTETAVETERINARSKOG FAKULTETASVEUČILIŠTA U ZAGREBUSVEUČILIŠTA U ZAGREBUTel./faks: 01 2390 208Tel./faks: 01 2390 208Mob: 091/89 38 101Mob: 091/89 38 101

OSIJEK, 18. ožujka OSIJEK, 18. ožujka 2010.2010.

Mastitis je upala mliječne žlijezde uzrokovana brojnim

mikroorganizmima najčešće bakterijama rjeđe kvascima i

plijesnima

prema kliničkom očitovanju razlikujemo

akutnisubakutnisubkliničkikronični mastitis

oprema za mužnju

ČIMBENICI KOJI POGODUJUNASTANKU MASTITISA

Mikrobi- današnje predavanje

genetske osobinekrave

okolišpostupci mužnje

MEĐUODNOS BAKTERIJA – DOMAĆIN - OKOLIŠ KOJI REZULTIRAJU MASTITISOM

čimbenik - mikrobčimbenik - mikrob čimbenik - domaćinčimbenik - domaćin čimbenik - okoliščimbenik - okoliš

sposobnost sposobnost preživljavanja u preživljavanja u neposrednom okolišu neposrednom okolišu životinje životinje ((E. coli, E. coli, Pseudomonas aeruginosa, Pseudomonas aeruginosa, Fusobacterium Fusobacterium necrophorumnecrophorum))

genetska predispozicija za genetska predispozicija za mastitis: oblik sise, tonus mastitis: oblik sise, tonus sfinktera, anatomija sisnog sfinktera, anatomija sisnog kanalića, sposobnost kanalića, sposobnost slabljenja suspenzornog slabljenja suspenzornog ligamentaligamenta

prisutnost velikog broja prisutnost velikog broja potencijalno patogenih potencijalno patogenih mikroba u neposrednom mikroba u neposrednom okolišu što upućuje na okolišu što upućuje na loše zoohigijenske uvjeteloše zoohigijenske uvjete

sposobnost naseljavanja sposobnost naseljavanja mliječnog kanalića (mliječnog kanalića (S. S. aureus, S. agalactiaeaureus, S. agalactiae))

dob:dob:

starije krave - nakon četvrte starije krave - nakon četvrte laktacije sklonije mastitisulaktacije sklonije mastitisu

opći pristup opći pristup životinji(njama);životinji(njama);

koli-mastitis u pravilu se koli-mastitis u pravilu se javlja u farmskom-javlja u farmskom-masovnom držanjumasovnom držanju

sposobnost čvrstog sposobnost čvrstog prijanjanja na epitel m. prijanjanja na epitel m. žlijezdežlijezde ((S. aureus, S. S. aureus, S. agalactiaeagalactiae))

stupanj laktacije: stupanj laktacije:

osjetljivije nakon telenja te osjetljivije nakon telenja te slijedeća dva mjesecaslijedeća dva mjeseca

oštećenoštećenii ili neprikladn ili neprikladnii strojevistrojevi za mužnju za mužnju

stupanj invazivnosti – pr. stupanj invazivnosti – pr. streptokoki uzrokuje streptokoki uzrokuje neznatne patološke neznatne patološke promjene a stafilokoki promjene a stafilokoki potiču degenerativne potiču degenerativne promjenepromjene

oštećenja sisaoštećenja sisa::

nepravilna strojna mužnja nepravilna strojna mužnja pogoduje oštećenju sisa ili pogoduje oštećenju sisa ili su ulazna vrata bakterijamasu ulazna vrata bakterijama

proljevanje proljevanje suvišnog- suvišnog-nevaljalog nevaljalog mlijeka u okoliš mlijeka u okoliš upućuje na neprikladnu upućuje na neprikladnu mužnju i higijenumužnju i higijenu

sposobnost izbjegavanja sposobnost izbjegavanja fagocitoze i fagocitoze i protubakterijskih lijekova protubakterijskih lijekova te antimikrobna te antimikrobna rezistencijarezistencija

imunološki čimbenici: imunološki čimbenici:

titar IgA, IgG1, laktoferina i titar IgA, IgG1, laktoferina i fagocita u mliječnoj žlijezdifagocita u mliječnoj žlijezdi

oštećenje kože koje oštećenje kože koje nastaje zbog sisanja nastaje zbog sisanja (ovce)(ovce)

MASTITIS U KRAVA: najčešći etiološki uzročnici svrstani po važnosti, prirodnom staništu i obliku mastitisa

uzročnikuzročnik prirodno staništeprirodno stanište oblik mastitisaoblik mastitisa

Staphylococcus aureusStaphylococcus aureus oštećeno vime, koža, sluzniceoštećeno vime, koža, sluznicesubklinički-često veliki broj subklinički-često veliki broj krava subklinički inficirano,krava subklinički inficirano,

kronični, akutni i perakutni kronični, akutni i perakutni (gangrenozni)(gangrenozni)

Streptococcus agalactiaeStreptococcus agalactiae intramamarno, mliječni kanalintramamarno, mliječni kanal akutni ili kronični, rekurentni akutni ili kronični, rekurentni oblikoblik

Streptococcus Streptococcus disgalactiaedisgalactiae

usna šupljina, vaginalna usna šupljina, vaginalna sluznicasluznica

akutniakutni

Streptococcus uberisStreptococcus uberis koža, tonzile, vaginalna koža, tonzile, vaginalna sluznica, izmetsluznica, izmet

akutni-suhostajakutni-suhostaj

E. coli, Klebsiella E. coli, Klebsiella pneumoniaepneumoniae

izmet, prašina, stelja - bolest izmet, prašina, stelja - bolest intenzivnog-stajskog uzgojaintenzivnog-stajskog uzgoja

““koli”-mastitis, perakutni koli”-mastitis, perakutni (sepsa), neposredno po (sepsa), neposredno po telenju u krava s malim telenju u krava s malim brojem SSbrojem SS

Arcanobacterium Arcanobacterium pyogenespyogenes (prije (prije Actinomyces pyogenesActinomyces pyogenes) )

koža, sluznicekoža, sluzniceperakutni, gnoji mastitis, perakutni, gnoji mastitis, suhostaj ili prvotelkinje prije suhostaj ili prvotelkinje prije telenjatelenja

Arcanobacterium Arcanobacterium pyogenes pyogenes i neki anaerobi i neki anaerobi (ne dijagnosticiraju se (ne dijagnosticiraju se rutinski)rutinski)

fiziološka mikroflora (muhe fiziološka mikroflora (muhe pasivni prijenos )pasivni prijenos )

ljetni mastitis u zasušenih ljetni mastitis u zasušenih krava i junicakrava i junica

MASTITIS U KRAVA: rijeđe zastupljeni uzročnici svrstani po važosti, prirodnom staništu i obliku mastitisa

uzročnikuzročnik prirodno staništeprirodno stanište oblik mastitisaoblik mastitisa

Streptococcus Streptococcus pyogenespyogenes

čovjekčovjek akutni mastitisakutni mastitis

Streptococcus Streptococcus pneumoniaepneumoniae

čovjekčovjek perakutni, groznicaperakutni, groznica

Streptococcus equi Streptococcus equi subsp.subsp. zooepidemicus zooepidemicus

sluznicesluznice ssubakutni ili kroničniubakutni ili kronični

Enterococcus faecalisEnterococcus faecalis koža, izmetkoža, izmet akutni mastitisakutni mastitis

Pseudomonas Pseudomonas aeruginosaaeruginosa

zemlja, voda, izmetzemlja, voda, izmet perakutni (sepsa), perakutni (sepsa), kronicitet, perzistirajućikronicitet, perzistirajući

Nocardia asteroidesNocardia asteroides zemljazemlja sporadički se javlja prvo sporadički se javlja prvo kao akutni mastitiskao akutni mastitis,, a a zatimzatim postaje kroničan postaje kroničan (granulomatozne (granulomatozne promjene u vimenu)promjene u vimenu)

Serratia marcescensSerratia marcescens zemlja, izmetzemlja, izmet perakutni (sepsa), perakutni (sepsa), kronicitet, perzistirajućikronicitet, perzistirajući

MASTITIS U KRAVA: rijeđe zastupljeni uzročnici svrstani po važosti, prirodnom staništu i obliku mastitisa

uzročnikuzročnik prirodno prirodno staništestanište

oblik mastitisaoblik mastitisa

Pasteurella multocida;Pasteurella multocida;

Mannheimia Mannheimia haemolyticahaemolytica

sluznice nosa, ustasluznice nosa, usta akutni akutni ili ili perakutni perakutni mastitismastitis

Mycobacterium bovisMycobacterium bovis metastaze iz primarnog metastaze iz primarnog žarištažarišta

induracija i hipertrofija induracija i hipertrofija vimenavimena

Fusobacterium Fusobacterium necrophorumnecrophorum

fiziološka anaerobna fiziološka anaerobna mikrofloramikroflora crijeva, okoliš crijeva, okoliš

akutni mastitisakutni mastitis

Bacillus cereusBacillus cereus hranjenjem “otpatcima” hranjenjem “otpatcima” iz pivovare, iz pivovare,

intramamarnointramamarno

perakutni ili akutniperakutni ili akutni

Leptospira interrogans Leptospira interrogans serovarserovar hardjo hardjo genotip genotip Hardjo-BovisHardjo-Bovis ili ili pomonapomona

voda, vlažno tlo, voda, vlažno tlo, mokraća ili subklinički mokraća ili subklinički

inficirane životinjeinficirane životinje

agalakcijaagalakcija

Candida albicans Candida albicans (kvasac)(kvasac)

koža, sluznice, okoliškoža, sluznice, okoliš akutniakutni

Aspergillus fumigatus Aspergillus fumigatus (plijesan)(plijesan)

Najčešće bude Najčešće bude mehanički unesen u mehanički unesen u

mliječni kanalmliječni kanal

akutni (apscesi) ili akutni (apscesi) ili kroničnikronični

StaphylococcusStaphylococcus spp.spp. Gram-pozitivni aerobni koki Gram-pozitivni aerobni koki

Porodica Micrococcaceae (rodovi Porodica Micrococcaceae (rodovi MicrococcusMicrococcus, , StaphylococcusStaphylococcus i i RothiaRothia ( (StomatococcusStomatococcus) su katalaza-pozitivni) su katalaza-pozitivni

Stafilokoki su najčešći izolati u veterinarskoj medicini Stafilokoki su najčešći izolati u veterinarskoj medicini a a pripadpripadajuaju porodic porodici i MicrococcaceaeMicrococcaceae

Najveće značenje imaju koagulaza-pozitivni stafilokoki (Najveće značenje imaju koagulaza-pozitivni stafilokoki (S. S. aureus, S. pseudintermedius, S. hyicusaureus, S. pseudintermedius, S. hyicus) ali i koagulaza-) ali i koagulaza-negativni staf. sve češće sudjeluju u etiologiji mastitisanegativni staf. sve češće sudjeluju u etiologiji mastitisa

Staphylococcus aureus

Stafilokoki mogu biti prolazni kontaminanti, Stafilokoki mogu biti prolazni kontaminanti, kratkotrajni ”stanovnici” ili trajni kratkotrajni ”stanovnici” ili trajni kolonizatori kože sisavacakolonizatori kože sisavaca

Stafilokoki uzrokuju:Stafilokoki uzrokuju:

- - infekcije rana u svih životinja infekcije rana u svih životinja

- - mastitismastitis

- - kožne infekcijekožne infekcije

- - infekcije zglobova (pilići!)infekcije zglobova (pilići!)

EPIDEMIOLOGIJA STAFILOKOKNOG MASTITISA EPIDEMIOLOGIJA STAFILOKOKNOG MASTITISA NA FARMAMA MLIJEČNIH KRAVANA FARMAMA MLIJEČNIH KRAVA

intramamarni izvori zarazeintramamarni izvori zaraze

Prvi i najvažniji rezervoar bakterije Prvi i najvažniji rezervoar bakterije S. aureusS. aureus je je

zaraženo VIMEzaraženo VIME

NAJVAŽNIJI NAČIN PRIJENOSA SA ZARAŽENOG NA NAJVAŽNIJI NAČIN PRIJENOSA SA ZARAŽENOG NA

NEZARAŽENO VIME SU RAZLIČITI PREDMETI - NEZARAŽENO VIME SU RAZLIČITI PREDMETI - STROJEVI ZA STROJEVI ZA

MUŽNJU, KRPE KOJIM SE BRIŠE VIMEMUŽNJU, KRPE KOJIM SE BRIŠE VIME ili ili RUKE MUZAČARUKE MUZAČA

AKO ZADNJA KRAVA U NIZU MUŽNJE IMA MASTITIS TADA AKO ZADNJA KRAVA U NIZU MUŽNJE IMA MASTITIS TADA

ĆE PRVA SLIJEDEĆA KRAVA BITI IZRAVNO IZLOŽENA ĆE PRVA SLIJEDEĆA KRAVA BITI IZRAVNO IZLOŽENA

INFEKCIJIINFEKCIJI

ekstramamarni izvori zarazeekstramamarni izvori zaraze

S. aureusS. aureus se nalazi na tijelu (koža, sluznice) većine se nalazi na tijelu (koža, sluznice) većine

sisavaca!!!sisavaca!!!

izdvojen je s kože sisa i vimena, nosa, grudnog izdvojen je s kože sisa i vimena, nosa, grudnog

koša, sakruma, kaudanih nabora i trbuha, sluznice koša, sakruma, kaudanih nabora i trbuha, sluznice

usana, očiju, vagine, rektuma kravausana, očiju, vagine, rektuma krava

S. aureusS. aureus koji se nalazi na koži sisa često se NE koji se nalazi na koži sisa često se NE

izlučuje mlijekom – istraživači se ne mogu složiti izlučuje mlijekom – istraživači se ne mogu složiti

jesu li stafilokoki na koži sisa krava izvor zaraze za jesu li stafilokoki na koži sisa krava izvor zaraze za

ostale krave ali treba smatrati da JESUostale krave ali treba smatrati da JESU

EPIDEMIOLOGIJA STAFILOKOKNOG MASTITISA EPIDEMIOLOGIJA STAFILOKOKNOG MASTITISA NA FARMAMA MLIJEČNIH KRAVANA FARMAMA MLIJEČNIH KRAVA

Preživljavanje u okolišuPreživljavanje u okolišu

- OKOLIŠOKOLIŠ se NE smatra važnim izvorom zaraze se NE smatra važnim izvorom zaraze bakterijom bakterijom S. aureusS. aureus iakoiako se ovu bakteriju praktički se ovu bakteriju praktički može izdvojiti odasvudmože izdvojiti odasvud

- ZRAKZRAK - aerogeno širenje, bakterija - aerogeno širenje, bakterija S. aureusS. aureus dokazana je u zrakudokazana je u zraku u bolnicama, peradnjacima i u bolnicama, peradnjacima i izmuzištimaizmuzištima

- STELJASTELJA – bakterija – bakterija S. aureusS. aureus nije izdvojena iz nije izdvojena iz stelje ili samo vrlo rijetko s podloge na kojima stelje ili samo vrlo rijetko s podloge na kojima obitavaju krave, te se ne smatra izvorom zaraze obitavaju krave, te se ne smatra izvorom zaraze za kraveza krave

- 10 – 40% 10 – 40% LJUDILJUDI “nosi” bakteriju “nosi” bakteriju S. aureusS. aureus na na sluznici ždrijela i nosa, a RUKE MUZAČA smatraju sluznici ždrijela i nosa, a RUKE MUZAČA smatraju se glavnim izvorom ove bakterijese glavnim izvorom ove bakterije

MUHEMUHE Znanstvenici su pokusima dokazali da su Znanstvenici su pokusima dokazali da su

muhe (muhe (Musca domestica)Musca domestica) vektori odnosno vektori odnosno da su izravno odgovorne za širenje bakterije da su izravno odgovorne za širenje bakterije S. aureusS. aureus. .

Obadi također prenose bakteriju Obadi također prenose bakteriju S. aureusS. aureus a a šugarci koji oštećuju kožu vimena doprinose šugarci koji oštećuju kožu vimena doprinose lakšem prodoru ove bakterije u vimelakšem prodoru ove bakterije u vime

Bakterija S. aureus izdvojena je s opreme, instrumenata, objekata, vode, hrane i ostalih vrsta životinja

Staphylococcus aureusStaphylococcus aureus BOLEST I PATOGENEZABOLEST I PATOGENEZA

Infekcije nastaju uglavnom kada su Infekcije nastaju uglavnom kada su

sluznice i/ili koža oštećene na bilo sluznice i/ili koža oštećene na bilo

koji način a infekciju potpomaže koji način a infekciju potpomaže

strano tijelo ili strano tijelo ili odumrlo tkivoodumrlo tkivo

BakterijaBakterija Staphylococcus aureusStaphylococcus aureus

tvori brojne čimbenike virulencije kojtvori brojne čimbenike virulencije kojii

joj omogućuju prodor i zadržavanje u joj omogućuju prodor i zadržavanje u

životinjiživotinji

čimbenik virulenciječimbenik virulencije učinakučinak

KapsulaKapsula PeptidoglikanPeptidoglikan Teihonska Teihonska

kiselinakiselina Protein AProtein A ToksiniToksini Eksfolijacijski Eksfolijacijski

toksintoksin EnterotoksiniEnterotoksini Toksin koji Toksin koji

uzrokuje toksični uzrokuje toksični šokšok

KoagulazaKoagulaza HijaluronidazaHijaluronidaza LipazaLipaza NukleazaNukleaza

Inhibira fagocitozuInhibira fagocitozu Privlači leukocite i inaktivira komplementni Privlači leukocite i inaktivira komplementni

sustavsustav Vezuje fibronektinVezuje fibronektin Vezuju imunoglobulineVezuju imunoglobuline SprečavaSprečavajuju fagocitozu, citotoksičnost fagocitozu, citotoksičnost Djeluje proteolitički u Djeluje proteolitički u stratum granulosumstratum granulosum

epidermisaepidermisa Superantigenost (aktivacija T-limfocita-Superantigenost (aktivacija T-limfocita-

povećana citotoksičnost), uzrokuje povećana citotoksičnost), uzrokuje povraćanje i proljevpovraćanje i proljev

Superantigenost, oštećenje endotelSuperantigenost, oštećenje endotel Pretvara fibrinogen u fibrin-zgrušavanje Pretvara fibrinogen u fibrin-zgrušavanje

plazmeplazme Rastvara vezivno tkivo - olakšava širenje Rastvara vezivno tkivo - olakšava širenje

uzročnikauzročnika Razgrađuje masnoćeRazgrađuje masnoće Razgrađuje DNA Razgrađuje DNA

Stafilokokni mastitisStafilokokni mastitis

Bakterija Bakterija Staphylococcus aureusStaphylococcus aureus najčešći je najčešći je

uzročnik kroničnog i subakutnog mastitisa uzročnik kroničnog i subakutnog mastitisa

krava iako tijek infekcije može biti i akutan krava iako tijek infekcije može biti i akutan a a

mastitismastitis gangren gangrenozanozan

S. aureusS. aureus se n se najčešćajčešćee prenos prenosii oprem opremomom za mužnju za mužnju

i kroz oštećenja i kroz oštećenja kože kože vimena vimena (oprema, ugrizi muha, (oprema, ugrizi muha,

šugaraca) šugaraca) odnosno mlijodnosno mlijeečnog kanalačnog kanala

Vrlo važan trenutak za nastanak mastitisa jest Vrlo važan trenutak za nastanak mastitisa jest

vezivanje vezivanje bakterije bakterije S. aureusS. aureus za epitel duktusa i za epitel duktusa i

alveola a zatim se uzročnik širi sisnim kanalomalveola a zatim se uzročnik širi sisnim kanalom

Nažalost ova faza ovisi o do sada nerazjašnjenim Nažalost ova faza ovisi o do sada nerazjašnjenim

čimbenicima koji se odnose na:čimbenicima koji se odnose na:

- umnažanje stafilokoka, - umnažanje stafilokoka,

- imunost prema alfa toksinu kojeg tvori bakterija - imunost prema alfa toksinu kojeg tvori bakterija S. aureusS. aureus, ,

- brzini urođene imunosne reakcije, odnosno dotoka - brzini urođene imunosne reakcije, odnosno dotoka

polimorfonuklearnih neutrofilnih leukocita (neutrofili) na polimorfonuklearnih neutrofilnih leukocita (neutrofili) na

mjesto infekcijemjesto infekcije,,

- učestalosti mužnje (evakuacija uzročnika)- učestalosti mužnje (evakuacija uzročnika) i i

- sposobnosti soja da tvori hemolizine i koagulazu- sposobnosti soja da tvori hemolizine i koagulazu ..

Neutrofili koji se nalaze u perifernoNeutrofili koji se nalaze u perifernojj krvi vrlo djelotvorno krvi vrlo djelotvorno

ubijaju stanice vrste ubijaju stanice vrste S.S. aureus in vitroaureus in vitro,, aliali u vimenu-( u vimenu-(in in

vivovivo) ) djelovanje im je djelovanje im je znatno slabije što je najvjerojatnije znatno slabije što je najvjerojatnije

posljedica inhibitornog djelovanja mliječne masti i posljedica inhibitornog djelovanja mliječne masti i

kazeinakazeina

SAŽETAKSAŽETAK

1.1. PRIMARNI IZVOR ZARAZE BAKTERIJOM PRIMARNI IZVOR ZARAZE BAKTERIJOM S. AUREUSS. AUREUS JE JE

INFICIRANA MLIJEČNA ŽLIJEZDAINFICIRANA MLIJEČNA ŽLIJEZDA

2.2. INFICIRANA MLIJEČNA ŽLIJEZDA INFICIRANA MLIJEČNA ŽLIJEZDA NIJENIJE JEDINI JEDINI

IZVOR/REZERVOAR BAKTERIJE IZVOR/REZERVOAR BAKTERIJE S. AUREUSS. AUREUS

3.3. JUNICE MOGU ZADRŽAVATI BAKTERIJU JUNICE MOGU ZADRŽAVATI BAKTERIJU S. AUREUSS. AUREUS

(intramamarna infekcija) a KRAVE OBOLJEVAJU U SUHOSTAJU(intramamarna infekcija) a KRAVE OBOLJEVAJU U SUHOSTAJU

4.4. MJERE ZA NADZIRANJE I KONTROLU KONTAGIOZNOG MJERE ZA NADZIRANJE I KONTROLU KONTAGIOZNOG

MASTITISA TREBA PROVODITI I ONDA KADA JE BROJ MASTITISA TREBA PROVODITI I ONDA KADA JE BROJ

ZARAŽENIH KRAVA MALEN ILI IH UOPĆE NEMAZARAŽENIH KRAVA MALEN ILI IH UOPĆE NEMA

Streptococcus Streptococcus spp.spp.

Streptokoki su gram-pozitivne, fakultativno anaerobne, katalaza-Streptokoki su gram-pozitivne, fakultativno anaerobne, katalaza-negativne, nesporogene i nepokretne bakterije kugličasta oblika negativne, nesporogene i nepokretne bakterije kugličasta oblika poredanih u nizovimaporedanih u nizovima

Prema polisaharidnom antigenu stanične stijenke streptokoki su Prema polisaharidnom antigenu stanične stijenke streptokoki su podijeljeni u skupine koje se označavaju velikim slovima abecede: podijeljeni u skupine koje se označavaju velikim slovima abecede: A, B, C, D, E, G, L i V, no A, B, C, D, E, G, L i V, no S. uberisS. uberis, , S. parauberisS. parauberis i i S. pneumoniaeS. pneumoniae ne ne pripadaju niti jednoj skupinipripadaju niti jednoj skupini

beta- hemolitični streptokok tipična morfologija streptokoka poredani u nizu

11. . Streptococcus agalactiaeStreptococcus agalactiae (skupina B prema (skupina B prema Lanefieldovoj)Lanefieldovoj)

- uobičajen uzročnik kontagioznog mastitisa krava, uobičajen uzročnik kontagioznog mastitisa krava, kroničnog, subkliničkog ili akutnog tijeka, a zahvaćene kroničnog, subkliničkog ili akutnog tijeka, a zahvaćene su najčešće više od jedne četvrtisu najčešće više od jedne četvrti

- subklinički oblik očituje se povećanim brojem subklinički oblik očituje se povećanim brojem somatskih stanica bez vidljivih promjena u izgledu somatskih stanica bez vidljivih promjena u izgledu mlijeka mlijeka

- čimbenici virulencije bakterije čimbenici virulencije bakterije SS.. agalactiae agalactiae proučavani su na ljudima i BALB/c miševima sa svrhom proučavani su na ljudima i BALB/c miševima sa svrhom da se ustanovi populacija leukocita i tvorba citokina u da se ustanovi populacija leukocita i tvorba citokina u mliječnoj žlijezdi inficiranoj ovim streptokokommliječnoj žlijezdi inficiranoj ovim streptokokom

Već nakon 24 sata bakterija S. agalactiae se umnožila u mliječnoj

žlijezdi a njezin broj ustostručio, a već nakon šest sati bakterija je

dokazana i u ostalim organima

Istovremeno broj neutrofila se znatno povećao kao i tvorba upalnih Istovremeno broj neutrofila se znatno povećao kao i tvorba upalnih

citokina: interleukin (IL)-1citokina: interleukin (IL)-1ββ, IL-6 kao i “tumor necrosis factor alfa” , IL-6 kao i “tumor necrosis factor alfa”

(TNF-(TNF-αα) što je jasan znak UPALE) što je jasan znak UPALE

Upalni citokini pojačano su se izlučivali 72 sata nakon infekcije, a u Upalni citokini pojačano su se izlučivali 72 sata nakon infekcije, a u

područnim limfnim čvorovima porastao je broj makrofaga ali i T područnim limfnim čvorovima porastao je broj makrofaga ali i T

limfocita limfocita

10 dana nakon infekcije ustanovljen je porast titra protutijela za 10 dana nakon infekcije ustanovljen je porast titra protutijela za

bakteriju bakteriju S. agalactiaeS. agalactiae

Sve navedeno upućuje na to da infekcija vimena provocira Sve navedeno upućuje na to da infekcija vimena provocira

mehanizme urođene imunosti (UPALA – kao prvi mehanizam mehanizme urođene imunosti (UPALA – kao prvi mehanizam

obrane od infekcije) kao i humoralnu imunost, odnosno tvorbu obrane od infekcije) kao i humoralnu imunost, odnosno tvorbu

specifičnih protutijelaspecifičnih protutijela

LIJEČENJELIJEČENJE

Bakterija Bakterija SS.. agalactiae agalactiae obitava SAMO u vimenu obitava SAMO u vimenu

krava a većina (88-95%) zaraženih krava moguće je krava a većina (88-95%) zaraženih krava moguće je

izlječiti primjenom penicilinskih antibiotika; krave koje izlječiti primjenom penicilinskih antibiotika; krave koje

ne reagiraju na poduzeto liječenje potrebno je odvojiti ne reagiraju na poduzeto liječenje potrebno je odvojiti

od zdravih i izlučiti jer su trajan izvor infekcije za od zdravih i izlučiti jer su trajan izvor infekcije za

ostale zdrave kraveostale zdrave krave

PREVENTIVAPREVENTIVA1.1. Dezinfekcija sisa nakon mužnjeDezinfekcija sisa nakon mužnje2.2. Terapija u suhostaju svih krava i svih četvrtiTerapija u suhostaju svih krava i svih četvrti3.3. Pri svakoj pojavi mastitisa ODMAH poduzeti liječenjePri svakoj pojavi mastitisa ODMAH poduzeti liječenje4.4. Redovito kontrolirati i održavati opremu za mužnjuRedovito kontrolirati i održavati opremu za mužnju5.5. Zasušivati kronično zaražene kraveZasušivati kronično zaražene krave

Streptococcus dysgalactiae

Bakterija Streptococcus dysgalactiaeStreptococcus dysgalactiae uzročnik je tzv. okolišnog mastitisa a izdvaja se iz krava u laktaciji i suhostaju i u uzornim uzgojima u kojima se trajno provodi nadzor

Iako često prisutna kao uzročnik mastitisa ova bakterija i dalje je nepoznanica glede čimbenika virulencije

Poznato je da bakterija S. dysgalactiae može, posredstvom svojih površinskih bjelančevina, reagirati s više plazminih i izvanstaničnih bjelančevina domaćina, primjerice immunoglobulinom G, albuminom, fibronektinom, fibrinogenom, kolagenom, vitronectinom, plazminogenom, i α2-makroglobulinom

S. dysgalactiae također tvori enzime hijaluronidazu i fibrinolizin koji joj pomažu u razgradnji tkiva i širenju po inficiranom tkivu vimena

U pokusnim uvjetima S. dysgalactiae prijanja i prodire u epitelne stanice m. žlijezde a sve je uvjetovano složenim mehanizmima koji se odvijaju između epitelnih stanica i mikroba

Bakterija preživljava U EPITELNIM STANICAMA Bakterija preživljava U EPITELNIM STANICAMA MLIJEČNE ŽLIJEZDE DUGO VREMENA NE MLIJEČNE ŽLIJEZDE DUGO VREMENA NE MIJENJAJUĆI SE NITI UNIŠTAVAJUĆI EPITELNE MIJENJAJUĆI SE NITI UNIŠTAVAJUĆI EPITELNE STANICE (nema klinički vidljivih znakova STANICE (nema klinički vidljivih znakova mastitisa!!!)mastitisa!!!)

Potrebna su nova istraživanja koja će rasvjetliti Potrebna su nova istraživanja koja će rasvjetliti međuodnos bakterije i stanica domaćina u međuodnos bakterije i stanica domaćina u početnoj fazi infekcije i tako poboljšati početnoj fazi infekcije i tako poboljšati poznavanje patogeneze intramamarne infekcije poznavanje patogeneze intramamarne infekcije što bi u konačnici pomoglo razvitku postupaka što bi u konačnici pomoglo razvitku postupaka da se smanje štete uzrokovane infekcijom da se smanje štete uzrokovane infekcijom vimena ovom bakterijomvimena ovom bakterijom

MIKOPLAZMALNI MASTITIS U KRAVA UZROKOVAN VRSTOM Mycoplasma

bovis

Dijagnostika mikoplazama obavlja se u bakteriološkom laboratoriju Zavoda za mikrobiologiju i zarazne bolesti, Heinzelova 55VETERINARSKOG FAKULTETAVETERINARSKOG FAKULTETASVEUČILIŠTA U ZAGREBUSVEUČILIŠTA U ZAGREBUTel./faks: 01 2390 208Tel./faks: 01 2390 208Mob: 091/89 38 101Mob: 091/89 38 101

Mastitis u krava muzara u uvjetima intenzivne stočarske proizvodnje općenito predstavlja gospodarski značajnu bolest, a u novije se doba među uzročnicima upale vimena sve češće spominju infekcije mikoplazmama.

Poznato je više od 100 vrsta mikoplazama

Čak 11 različitih vrsta mikoplazama sudjeluje u etiologiji mastitisa u mliječnih krava

Najveće značenje ima vrsta Mycoplasma bovis (M. bovis) koja je do sada je izdvojena iz mlijeka krava u Europi, Sjevernoj Americi i Australiji.

ETIOLOGIJAETIOLOGIJA

M. bovis jedna je od najpatogenijih

mikoplazama za govedo.

Po učestalosti nalaza i značenju koje ima u

etiologiji zaraznih bolesti u goveda nalazi se na

prvom mjestu među dvadesetak vrsta tih

mikroba izdvojenih iz goveda, posebice u

europskim zemljama i SAD-u.

M. bovis prvi je puta izdvojena iz vimena krava

oboljelih od mastitisa 1962. godine u SAD-u

Vrsta Vrsta M. bovisM. bovis NIJE ubikvitarna, ali je često NIJE ubikvitarna, ali je često

prisutna u goveda u područjima u kojima se prisutna u goveda u područjima u kojima se

infekcija javlja enzootski. infekcija javlja enzootski.

S epizootiološkog stajališta važna je činjenica S epizootiološkog stajališta važna je činjenica

da da M. bovisM. bovis često uzrokuje latentne infekcije često uzrokuje latentne infekcije

vimena što ima važnu ulogu u širenju infekcije vimena što ima važnu ulogu u širenju infekcije

tim uzročnikom, a time mikoplazmoznog tim uzročnikom, a time mikoplazmoznog

mastitisa.mastitisa.

PROŠIRENOST

Tko koga zaražava?Tko koga zaražava?

“zdravo”tele

vime

bolesno tele

krava

Mlijeko zaražene krave

pneumonijaartiritsmastitispobačaj

U pokusnim je uvjetima dokazano da su sojevi M. bovis izdvojeni s nosne sluznice zdrave ili bolesne teladi patogeni za vime krava u kojih mogu uzrokovati mastitis što upućuje na zaključak da je klinički zdrava, ali mikopazmama inficirana telad važan izvor zaraze za krave

To upućuje na zaključak da je klinički zdrava, ali mikopazmama inficirana telad važan izvor zaraze za krave

M. bovis u pokusnim uvjetima može uzrokovati pobačaj u krava, a nakon intravezikularne aplikacije u bikova uzrokuje vezikulitis, epididimitis i orhitis

PREŽIVLJAVANJE U OKOLIŠUPREŽIVLJAVANJE U OKOLIŠU

Uvriježeno je ali i pogrešno mišljenje da M. bovis ne može dugo preživjeti izvan domaćina u okolišu zbog nedostatka vlage.

Znanstvenici su istražili preživljavanje mikoplazama izdvojenih iz životinja pri različitim temperaturama i u različitim hranjivim podlogama i izvan njih.

vrsta M. bovis pri temperaturi od +40C

preživljava 59-116 dana,

pri +300C 185 dana,

pri +370C 140-180 dana,

pri sobnoj temperaturi 59-185 dana.

M. bovisM. bovis na običnom filtar papiru na običnom filtar papiru

pri temeraturi od +4pri temeraturi od +400C zadrži C zadrži

infektivnost čak 126 dana. infektivnost čak 126 dana.

M. bovisM. bovis, suprotno dosadašnjem , suprotno dosadašnjem

mišljenju, može dovoljno dugo mišljenju, može dovoljno dugo

preživjeti u okolišu da bi se preživjeti u okolišu da bi se

njome inficirala zdrava goveda. njome inficirala zdrava goveda.

KLINIČKI NALAZKLINIČKI NALAZ

M. bovisM. bovis uzrokuje: uzrokuje: akutne do subakutne upalne procese akutne do subakutne upalne procese

u različitim organima: vimenu krava, u različitim organima: vimenu krava,

Mastitis uzrokovan tom Mastitis uzrokovan tom vrstom vrlo je kontagiozanvrstom vrlo je kontagiozan (zarazan, priljepčiv)(zarazan, priljepčiv)

zglobovima teladi i mlađih goveda zglobovima teladi i mlađih goveda

te u dišnom ili spolnom sustavu u te u dišnom ili spolnom sustavu u mladih i odraslih goveda mladih i odraslih goveda

MASTITIS

U zaraženim stadima od mastitisa oboli U zaraženim stadima od mastitisa oboli više od 20% muznih krava bez obzira na više od 20% muznih krava bez obzira na stadij laktacije a oboljevaju i krave u stadij laktacije a oboljevaju i krave u suhostaju.suhostaju.

INKUBACIJA ovisi o dozi uzročnika, a iznosi INKUBACIJA ovisi o dozi uzročnika, a iznosi dva do šest dana.dva do šest dana.

Kada se bolest ukorijeni u stadu Kada se bolest ukorijeni u stadu inkubacijski period može se protegnuti i inkubacijski period može se protegnuti i na nekoliko tjedana, a klinički zdrave na nekoliko tjedana, a klinički zdrave krave često izlučuju uzročnika mlijekom. krave često izlučuju uzročnika mlijekom.

Jedan od najvažnijih znakova mastitisa uzrokovanog

vrstom M. bovis je:

izrazita promjena konzistencije mlijeka,

nagli pad mliječnosti na svega nekoliko mililitara

sekreta u tijeku tri do pet dana nakon početka bolesti,

brzo širenje infekcije s inficiranih na neinficirane

četvrti

neuspjeh u liječenju antibioticima krajnji ishod -

agalakcija.

Lijevo i sredina: mlijekoKrava zaraženih vrstom Mycoplasma bovis

Mlijeko zdrave krave

MLIJEKO KRAVA IZ KOJEG JE IZDVOJENA MYCOPLASMA BOVIS

Spomenuti klinički znakovi mastitisa puno su izraženiji pri prvom pojavku bolesti u nekom uzgoju kao i u krava koje su se neposredno otelile.

Osim što se smanji količina mlijeka, značajno se mijenja konzistencija sekreta vimena, koji je vodenast do gnojni.

Za mikoplazalni mastitis tipičan je nalaz obilnog taloga u epruveti koji čine krpice fibrina i vodenasti sadržaj iznad njega.

LIJEČENJELIJEČENJE

Iako se u liječenju infekcija uzrokovanih

mikoplazmama koriste mnogi antibiotici i

kemoterapeutici, kao što su primjerice oni iz

skupine fluorokinolona (enrofloksacin i

danofloksacin), teraciklinski pripravci,

spektinomicin, gentamicin i spiramicin, važno je

znati da potpunog izliječenja nema.

Jednom zaražena krava većinom ostaje doživotno

inficirana. Iz ove spoznaje proizlazi činjenica da

naglasak u suzbijanju mastitisa uzrokovanog

mikoplazmama treba staviti na profilaksu.

PROGRAM NADZORA

I SUZBIJANJA

MIKOPLAZMALNOG MASTITISA

U MLIJEČNIH KRAVA

U KOJIM SE TIPOVIMA UZGOJA POJAVLJUJE MIKOPLAZMA?

U uzgojima mliječnih krava u kojima se NE

provodi nadzor, infekcija se proširi na približno

70% krava a redovito je povezana s

nedostatnom higijenom vimena u najširem

smislu riječi (OPREMA ZA MUŽNJU, ruke,

nesterilni aplikatori, stelja...)

U uzgojima mliječnih krava u kojima se provodi

nadzor infekcija će zahvatiti oko 10% krava

OPTIMALAN BROJ ŽIVOTINJA BIO BI 150

MOŽEMO LI MIKOPLAZMALNI MASTITIS DOKAZATI UOBIČAJENIM BAKTERIOLOŠKIM POSTUPCIMA?

NE, NIKADA, stoga što su za uzgoj mikoplazama

potrebne posebne hranjive podloge i što za njihov

uzgoj (za razliku od ostalih bakterijskih uzročnika

mastitisa) treba 4 do 7 a ponekad i 10 dana-sporo

rastu

Nakon što ih uzgojimo potrebno je odrediti kojoj

vrsti pripadaju (nisu sve mikoplazme patogene):

ELISA, PCR

VAŽNO je znati da je mikoplazme

moguće izdvojiti iz skupnog uzorka

(bazeni) čak iako je samo JEDNA KRAVA

IZVOR ZARAZE

ALI ako se mikoplazme izlučuju samo

povremeno (stado koje je kronično

zaraženo) moguće je da rezultat

pretrage bude negativan-što nije dokaz

da je stado zdravo!!

ŠTO UČINITI KADA SE USTANOVI MIKOPLAZMALNI MASTITIS?

Ustanoviti proširenost mikoplazmalnog mastitisa

(uzgoj mikoplazama)

Mali broj zaraženih životinja(nalaz mikoplazama u bazenima

brojSS nije povećan)

Procijeniti ekonomsku situaciju s obzirom na stupanj zaraženosti

Velik broj zaraženih životinja(nalaz mikoplazama u bazenima

brojSS povećan)

Mali broj zaraženih životinja(nalaz

mikoplazama u bazenimabrojSS nije

povećan)

1. IZLUČITI nekoliko krava

s visokim brojem SS

2. IZLUČITI nekoliko

krava s neizlječivim mastitisom

3.ZAPOČETI S PROGRAMOMPREVENCIJE I NADZORA

4. NAJMANJE JEDNOM

MJESEČNOPREGEDAVATI

SKUPNE UZORKE(BAZENI)

UZGOJ U LAB.

5. ODREDITI BROJ SS

SVAKOJ KRAVI

6. NOVONABAVLJENE

KRAVE:KARANTENA,

UZIMANJE MLIJEKA,UZGOJ MIKOPL.

(LAB)BROJ SS MANJI OD

200 0002X NEG =

SLOBODNO ODMIKOPLAZAMA

7. MLIJEKO SVIH

NETOM OTELJENIH

KRAVA 2-3 DANAPO TELJENJU-

POSLATIU LAB. NA UZGOJ NA

MIKOPLAZME

Velik broj zaraženih životinja

(nalaz mikoplazama u bazenima

brojSS povećan)

Pretražiti mlijeko

svih krava u stadu

(uzgoj u lab.)Identifikacija

M. bovis

IZDVOJITI SVE KRAVE

U KOJIH JE KULTURELNOM

PRETRAGOMDOKAZANA

MIKOPLAZMA

RABITI ILI ZASEBNU OPREMU

ZA MUŽNJUILI MUSTI

PRVO ZDRAVEPOTOM

ZARAŽENE

IZLUČITI SVEINFICIRANE

KRAVE

RABITI STERILNU OPERMU,

INJEKTORE ISLIČNO

ZAPOČETI PROGRAM NADZORA

PREVENTIVNE MJERE KOJE TREBA PODUZETI DA BI SE SPRIJEČILO ŠIRENJE MIKOPLAZMALNOG MASTITISA

ZAPOČETI NADZOR PODRAZUMIJEVA SLIJEDEĆE KORAKE:

USPOSTAVLJANJE SUSTAVA ZA PRIKUPLJANJE UZORAKA MLIJEKA ZA MIKROBIOLOŠKU PRETRAGU MLIJEKA

OBUHVATITI TREBA: SVA NOVA STADA SVE KRAVE KOJE SU SE VRATILE-IZLOŽBE I SLIČNO SVE NOVE JUNICE I KRAVE SVE KLINIČKI VIDLJIVE MASTITISE JEDNOM MJESEČNO, A PO POTREBI I ČEŠĆE,

UZIMATI UZORKE IZ BAZENA (“BULK TANK”)

Poštivanjem predloženog modela postupanja omogućit ćemo otkrivanje zaraženih životinja prije nego li se bolest proširi na veći broj životinja

VAŽNO JE USVOJITI SLIJEDEĆU MISAO:

SVAKU NOVU ŽIVOTINJU TREBA SMATRATI ZARAŽENOM DOK SE

NE DOKAŽE SUPROTNO

SAŽETAK

NOVONABAVLJENE ŽIVOTINJE KARANTENA - 2X NEGATIVNE-SLOBODNE OD MIKOPLAZAMA

1-2X MJESEČNO PREGLED SKUPNIH UZORAKA + KONTROLA BROJA SS

PREGLED-IZDVAJANJE MIKOPL. U LAB- MLIJEKA SVIH KRAVA S MASTITISM

“POZITIVNE” ŽIVOTINJE IZLUČITI I ODVOJITI OD ZDRAVIH

STROGA HIGIJENA PRIBORA ZA MUŽNJU I SVEGA ŠTO DOLAZI U DOTICAJ S VIMENOM

HVALA NA STRPLJENJU