BACILOSCOPIA

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BACILOSCOPIABACILOSCOPIA

PESQUISA DE BAARPESQUISA DE BAAR

BACILOS ÁLCOOL-BACILOS ÁLCOOL-ÁCIDO RESISTENTESÁCIDO RESISTENTES

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Método de Ziehl-NielsenMétodo de Ziehl-NielsenBaseia-se no fato de que algumas bactérias, Baseia-se no fato de que algumas bactérias, como os bacilos da tuberculose e da lepra, como os bacilos da tuberculose e da lepra, quando tratada pela fucsina fenicada à quando tratada pela fucsina fenicada à quente, resistem ao descoramento pelo quente, resistem ao descoramento pelo álcool-ácido, daí serem chamados de álcool-ácido, daí serem chamados de BACILOS ÁLCOOL-ÁCIDO-RESISTENTES BACILOS ÁLCOOL-ÁCIDO-RESISTENTES (BAAR). (BAAR).

O mecanismo estar ligado à solubilidade O mecanismo estar ligado à solubilidade maior do complexo carbolfucsina no maior do complexo carbolfucsina no substrato bacteriano quando em sua substrato bacteriano quando em sua constituição existem lipídiosconstituição existem lipídios

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Coloração de bacilos Alcool-Coloração de bacilos Alcool-Ácido-ResistentesÁcido-Resistentes

Devido ao alto conteúdo de lipídios, a Devido ao alto conteúdo de lipídios, a

parede celular das micobactérias possui a parede celular das micobactérias possui a

singular capacidade de fixar o corante singular capacidade de fixar o corante

fucsina de tal modo que não sofre fucsina de tal modo que não sofre

descoloração pelo álcool-ácido.descoloração pelo álcool-ácido.

São necesários 10São necesários 1044 BAAR/mL para que BAAR/mL para que

sejam detectados microscopicamente. sejam detectados microscopicamente.

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Técnica de Ziehl-NielsenTécnica de Ziehl-Nielsen

a propriedade de ácido-álcool resistência é a propriedade de ácido-álcool resistência é

devida à camada cérea que envolve as devida à camada cérea que envolve as

micobactérias;micobactérias;

para que a carbolfucsina aquosa (corante) para que a carbolfucsina aquosa (corante)

penetre através das ceras, a camada deve penetre através das ceras, a camada deve

ser “amaciada” ser “amaciada” calor; calor;

o corante que penetra através da camada o corante que penetra através da camada

amaciada se fixa na parede celular.amaciada se fixa na parede celular.

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EsfregaçosEsfregaços - lâminas limpas para coloração de Ziehl-- lâminas limpas para coloração de Ziehl-

Nielsen ou fluorocrômica, ou ambas;Nielsen ou fluorocrômica, ou ambas;

- bastão esterilizado ou alça microbiológica - bastão esterilizado ou alça microbiológica

(paltina) de 3mm de diâmetro(paltina) de 3mm de diâmetro

- estender uma porção do sedimento por - estender uma porção do sedimento por

cerca de uma superfície de 1 x 2cm.cerca de uma superfície de 1 x 2cm.

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Procedimento:Procedimento:

1) cobrir o esfregaço, seco e fixado pelo calor 1) cobrir o esfregaço, seco e fixado pelo calor

com 5 a 7 gotas do corante carbolfuscina;com 5 a 7 gotas do corante carbolfuscina;

2) aquecer a lâmina até emissão do vapor, 2) aquecer a lâmina até emissão do vapor,

mas sem deixar secar;mas sem deixar secar;

3) lavar a lâmina em água suavemente;3) lavar a lâmina em água suavemente;

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Procedimento:Procedimento:

4) descorar com álcool-ácido até que não 4) descorar com álcool-ácido até que não

apareça mais o corante no lavado (2 min);apareça mais o corante no lavado (2 min);

5) realizar coloração de contraste com azul-de-5) realizar coloração de contraste com azul-de-

metileno (1 a 2 min);metileno (1 a 2 min);

6) enxaguar, escorrer e secar ao ar (1 a 2 min);6) enxaguar, escorrer e secar ao ar (1 a 2 min);

7) obs em objetiva 100x com imersão em óleo.7) obs em objetiva 100x com imersão em óleo.

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Coloração de Ziehl-NielsenColoração de Ziehl-NielsenFix

ação

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Coloração de Ziehl-NielsenColoração de Ziehl-Nielsen

Carbol Fucsina

1010


•Aquece por 5 minutos•Até emissão contínua de vapores•Não ferver!

1111


•Lavar com água

1212


•Descorar com Álcool-ácido•Até descorar totalmente

1313


•Descoloração insuficiente

1414


•Descoloração ideal

1515


•Lavar com água•Secar

1616


•Azul de metileno – 1 minuto

1717


•Lavar com água•Secar

1818


1919


Resultados:Resultados:

BAAR = VERMELHASBAAR = VERMELHAS

BNAAR = AZULBNAAR = AZUL

2020


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