Ampliamente distribuidos en medio ambiente Sobreviven en ambiente hospitalario Patgenos oportunistas Especies psicrfilas. Bancos de sangre Especies multiresistentes Pacientes hospitalizados tratados con ATB: Colonizacin Baja Virulencia- Significacin clnica

Pseudomonas aeruginosa Elizabethkingia meningoseptica Burkholderia pseudomallei

Pseudomonas spp (10 especies) Burkholderia (13 especies) Ralstonia (6 especies) Acidovorax Delftia Comamonas Brevundimonas Shewanella Sphingomonas

Stenotrophomonas maltophilia Acinetobacter Achromobacter xylosoxidans Complejo Burkholderia cepacia

Alcaligenes Achromobacter Massilia Chryseobacterium Bordetella Myroides Ochrobactrum Sphingobacterium Moraxella Oligella Rhizobium Herbaspirillum Grupos CDC Psychrobacter Alishewanella Halomonas Inquilinus Cupriavidus

CUANDO llevar a cabo la caracterizacin e identificacin de un BNF?

Cultivo puro a partir de sitio estrilIdentificacin Pruebas de sensibilidad

COMO? Oxidasa

MovilidadGlucosa

BACILOS GRAM NEGATIVOS NO FERMENTADORES (BGNNF)

Pseudomonas

BurkholderiaAcinetobacter Stenotrophomonas

MoraxellaAlcaligenes Achromobacter Flavobacterium

MICROBIOLOGA CLNICA

Pseudomona aeruginosa Peudomonas aeruginosaBGN mvil,oxidasa +, aerobio de vida libre en ambientes hmedos. Puede producir patologa en plantas, animales y humanos. Produce pigmentos: Piocianina Pioverdina Piorubina Puede crecer en colirios, Desinfectantes y soluciones salinasPioverdina

MICROBIOLOGA CLNICA

Pseudomona aeruginosa

P. aeruginosa: PATOGENIA 1. Factores microbianos Lipopolisacrido Cpsula Pili Bacteriocinas o piocinas Exotoxina A Otras enzimas y toxinas: hemolisinas, enterotoxinas, enzimas proteolticos (colagenasa, elastasas..)

Pseudomona aeruginosa

P. aeruginosa: PATOGENIA

2. Factores del huspedTratamientos antimicrobianos previos Defectos del sistema inmune Enfermedades subyacentes (F qustica, diabetes..) Instrumentacin (sondas, catteres, respiradores..) Grandes quemados y politraumatizados

MICROBIOLOGA CLNICA

Pseudomona aeruginosaP. aeruginosa: CLNICA ITU

SepticemiaEndocarditis Inf del tracto respiratorio

Inf ocularesInf ORL: otitis asociada a piscinas Inf cutneas (heridas y quemaduras) Osteomielitis Inf SNC

MICROBIOLOGA CLNICA

Pseudomona aeruginosaP. aeuruginosa: EPIDEMIOLOGA Patgeno nosocomial Fuente: Agua, vegetacin y suelo. Tb flora transitoria Reservorios hospitalarios

DesinfectantesSoluciones estriles de dilisis, irrigacin, colirios...

Equipos de anestesia y respiradores

MICROBIOLOGA CLNICA

Pseudomona aeruginosaP. aeuruginosa: EPIDEMIOLOGA Transmisin: Persona-persona. Contacto con lquido contaminado Poblacin susceptible: patgeno oportunista Profilaxis:

Fuente: Aislar a los enfermos.Asepsia rigurosa Comprobar la esterilidad de soluciones Transmisin: lavado de manos Receptores: aislamiento preventivo y vacunas

UA

SONDAS

INFECCIOM CUTANEA

QUEMADURA

1- BETALACTAMICOS CEFTAXIDINA CEFEPIME, PIPERACILINA, CARBAPENEMASAS. 2- FLUOROQUILONOMAS: CIPROFLOXACINA. 3- AMINOGLUCOSIDOS: AMIKACINA, GENTAMINA, TOBRAMICINA 4- POLIMIXINA: COLISTINA

Pseudomonas aeruginosaElevada resistencia intrnseca a varios antibiticos, con enormecapacidad para adquirir nuevos mecanismos de resistencia.

Resistencia a lactmicos:

lactamasas cromosmicas (amp c ). Des reprimidasde tic, pip, azt, caz y fep.

elevan CMI

lactamasas plasmdicas menos frecuentesenzimas TEM, OXA, PER, con

que Enterobacterias diferentes fenotipos de resistencia.

(SISTEMAS EXPERTOS AUTOMATIZADOS).

Resistencia a lactmicos: (cont)

Carbapenemasas hidrolizan ureidopenicilinas,

carboxipenicilinas, cza, cme y carbapenem no Aztreonam. Las metaloenzimas se inhiben por EDTA.

Impermeabilidad de la membrana externa, tamao y nmero de porinas. Perdida de OPRD resistencia a carbapenemicos Sistemas de e flujo o bombas de expulsin.

FOTO

FAMILIA: MORAXELLA GRAM: COCOBACILO GRAM NEG. OXIDASA: NEGATIVA. INMOVILES. AMPLIAMENTE DISTRIBUIDO EN LA NATURALEZA. PATOGENO NOSOCOMIAL OPORTUNISTA

MICROBIOLOGA CLNICA

Acinetobacter

GENERO AcinetobacterCocobacilos gram negativos, aerobios estrictos, oxidasa -

Especie: A. baumanniiAmplia distribucin: suelo, agua, leche, saprofito de piel, intestino, aparato genital y tracto respiratorio. Patgeno oportunista, productor de infeccin nosocomial Microorganismo muy resistente

33 Genoespecies. Complejo Acinetobacter calcoaceticus baumannii, formado por 4 genoespecies. Genotpicamente diferentes pero fenotpicamente casi idnticas. Muy complejo realizar diagnstico hasta especie de cada Acinetobacter aislado.

Habitat: Ampliamente distribuido en naturaleza y ambiente hospitalario. Piel sana humanos y animales Sobreviven ambientes hmedos y resisten desecacin Patogenia: Infecciones nosocomiales: Sitios implicados: TR, TU, Heridas Septicemia. CAPD-peritonitis, endocarditis, osteomielitis

Generalmente multi resistente o pan resistente. Membrana externa 7 veces ms impermeable que Pseudomonas aeruginosa A Lactmicos. Escaso nmero de porinas y de menor tamao. Varios sistemas de expulsin activa. Presencia de varias lactamasas cromosmicas y plasmdicas, incluidas carbapenemasas.

Ausencia de una o varias PBP (proteinas fijadoras de penicilinas). Enzimas modificantes de aminoglucsidos. Mutaciones de las topoisomerasas. Mutacin de un gen (gir a) se comporta con resistencia a a. Nalixco y Cipro. las mutaciones combinadas de gir a y par c, dan resistencia a todas las quinolonas con CMI elevadas.

Importante patgeno nosocomial Puede colonizar ciertas poblaciones. IS y FQ Bacteriemia, meningitis, IU, mastoiditis, conjuntivitis, peritonitis-CAPD, endoftalmitis Pneumonia infrecuente. Aislamiento TR_ colonizacin

Stenotrophomonas maltophiliaPermeabilidad de la membrana externa disminuida, varios sistemas de expulsin activas y dos lactamasas plasmdicas son responsables de su resistencia intrnseca. Ticarcilina/ac clavulnico ms activa que sulbactn. tazobactn y

Resistencia a quinolonas relacionado con sistemas de expulsin, no con mutaciones de gir A ni par C.

Cotrimoxazol y quinolonas ms activas in vitro. Necesario combinar con Ticarcilina / ac. clavulnico o Tigeciclina. Ciprofloxacina ms efectiva si CMI es < de 32 mcg/ml. Resistencia natural a CARBAPENEM.

Antibitico

Ensayar e informar

MinociclinaCotrimoxazol Levofloxacina/ Ciprofloxacina

XX X

Resistencia intrnseca a mltiples antibiticos: aminopenicilinas cefalosporinas de primera y segunda generacin carbapenems aminoglucsidos.

Problemas metodolgicos antibiograma. Disco-placa: mala reproducibilidad CLSI: microdilucin, dilucin en agar E test

ANTES PERTENECIA AL GENERO PSEUDOMONA. (Ps cepacea) DISTRIBUIDA EN AGUA Y SUELOS B. CEPACEA: ES EL PATOGENO NOSOCOMIALB. PSEUDOMALLEI: PRODUCE MELLOIDOSIS. B. MALLEI: PRODUCE MUERMO.

Importante patgeno nosocomial Infeccin asociada a equipamiento o soluciones contaminadas Bacteriemia, IU, artritis sptica,, peritonitis, IR Patgeno importante en FQ

1-G: MORAXELLA 2-G: ALCALIGENES 3-G: FLAVOBACTERIUM

Clnica: P.gingivalis asociada a periodontitis crnicas. Abcesos periapicales. Habitat: surco gingival (condiciones anaerobias), forman parte de la placa subgingival. P. endodontalis es menos patgena por poseer menos factores de virulencia. P. assacharolytica se aisla en heces y est en un bajo nmero en la cavidad oral. Cultivo: agar sangre con suplementos (vitamina K y hemina) incubando en anaerobiosis. Crecimiento muy lento (7-15 das). Importante: colonias pigmentadas (marrn a negro, brillantes).

Morfologa: Bacilos Gram negativos.

Movilidad: Inmviles.Respiracin: anaerobios estrictos.

Factores de virulencia:

Proteasas que degradan inmunoglobulinas. Fimbrias que participan en la agregacin y coagregacin bacterianas. Metabolitos txicos-> muerte de clulas del hospedador por contacto.

Clnica: periodontitis, gingivitis, abscesos periodontales y periapicales. Gingivitis en embarazadas:degradan hormonas sintetizadas en el embarazo. Ejemplo de disbiosis de un ecosistema oral: las hormonas del embarazo inducen el crecimiento excesivo de una/s especies del ecosistema del surco gingival. La accin nociva de esas bacterias induce, a su vez, una respuesta inflamatoria (gingivitis de la embarazada) reversible cuando desaparece la causa (las hormonas del embarazo).

Habitat: surco gingival, forma parte de la placa subgingival (anaerobiosis).

Medios de cultivo: aislarla del surco gingival, donde no hay O2. Agar-sangre con vitamina K y hemina como suplementos. La mayoria de las Prevotella aisladas en humanos son pigmentadas. Al exponer colonias crecidas (aprox 10 das) a luz ultravioleta (UV) se observan que poseen un color rojizo. Permite diferenciarlas de las colonias de Porphyromonas gingivalis que tambin son pigmentadas (negras) pero que no fluorescen bajo luz UV. Especies del gnero Prevotella:Sin pigmento: P. bivia, P. buccae y P. buccalis. Pigmento variable: P. denticola. Con pigmento: P. intermedia (importante), P.melaningenica , P. corporis , P. nigrescens , P. loescheii.

Morfologa: bacilos gram negativos pleomrficos. Movilidad: mvil Habitat: abundante en heces. 53% personas sanas. B. forsythis->surco gingival. Respiracin:anaerobios estricto. Factores de virulencia: proteasas inespecficas y neuroamidasas ( Bacteroides forsythus ) Clnica: periodontitis refractarias ( B. forsythus ) Especies: Especie de referencia es Bacteroides fragilis (coloniza intestino, no existe en cavidad oral). Cavidad oral: B. forsythus, B. gracillis, B. ureolyticus.

Movilidad: inmviles.

Morfologa: pleomrficas, forma de huso con extremos puntiagudos. Respiracin: anaerobios estrictos.Metabolismo: no fermentativas, no utilizan azcares.

Factores de virulencia:Compuestos voltiles txicos para las clulas, por ejemplo c butlico, NH3, y los que producen halitosis: SH2, metilmercaptano y el indol. Protenas de superficie (adhesinas). Tienen fimbrias para la coagracin bacteriana. Libera lipopolisacridos-> inhiben quimiotaxis de neutrfilos. Leucotoxina-> - potente que A. actinomycetemicotans. Metabolitos txicos-> cidos grasos de cadena corta.

Gnero MobiluncusBacilos gram ( - ) o ( + ), curvados Mviles por mltiples flagelos polares Aislados de vagina humana Relacionados con vaginitis inespecfica No se han aislado de cavidad bucal

Movilidad: inmvil Respiracin: condiciones anaerobiosis o parcial.

Metabolismo: -Fermentadora de azcares, glucosa,galactosa, no sacarosa. Patrones de azcares y 8 biotipos.

Clinica: -No contacta con diente->no caries. -Periodontitis juveniles en molares. Habitat: cavidad oral, surco gingival, placa subgingival y placa visible. Medio de cultivo: agar chocolate. Medio selectivo TSBV( Tripticasa Soja Bactericina Vancomicina) Especie: A. actinomycetemicomitans

Movilidad: mvil

Respiracin: anaerobio facultativoMorfologia: erizo de mar con estructuras fibrilares que le proporcionan movimiento gliding.

Metabolismo: solo utiliza aminoacidos, no carbohidratos.

Clnica: infecciones oportunistas extraorales (abscesos, cerebrales, meningitis, osteomielitis). Periodontitis y lesiones periodontales. Habitat: surco gingival e intestino.

Medio de cultivo: corroe el agar , medios selectivos con antibioticos, Clindamicina. Se aisla con mayor frecuencia en mordeduras humanas. Especie: E. corrodens

Movilidad: mvil. Morfologia: muy pequea, forma de huso funsiforme. Respiracion: anaerobio, crecen mejor en CO2. Metabolismo: sacarolticos. Habitat: en la cavidad oral, en el surco gingival. Especies: C. sputigeno (+frec. en orales,+ patgenos), C. gingivalis y C. ochracea .

Factores virulencia y resistencia:Cpsula. Forman blebs, burbujas, para que los anticuerpos se entretengan y asi evitar a las defensas inmunes.

Clnica: Patgenos oportunistas, endocarditis, osteomielitis, abcesos, septicemitis. En la cavidad oral: periodontitis y algunos tipos de gingivitis.

Capnocytophaga ochraceaGram-negative rods from a culture showing characteristic fusiform morphology (Gram stain).

Bacilos gram ( - ) inmviles No fermentan H de C Requieren medios lquidos muy suplementados Tracto genitourinario de animales: Zoonosis Supervivencia intracelular Infeccin crnica en el humano

Mdicos Veterinarios Laboratoristas Empleados de frigorficos expuestos. Empleados de establecimientos. lecheros (infectados). Empleados de establecimientos de la industria de la carne

Especies

7 especies conocidas, solo 4 producen brucelosis humana: B. melitensis B. abortus B. suis B. canis B. ovis B. neotomae B. maris

SpeciesB. abortusB.melitensis B. suis

Biovar/ Serovar1-6, 91-3 1, 3 2 4 5

Natural Hostcattlegoats, sheep swine hares reindeer, caribou rodents dogs, other canids sheep Desert wood rat

Human Pathogenyesyes yes yes yes yes yes no no

B. canis B. ovis B. neotomae B. maris (?)

none none none

marine mammals ?Center for Food Security and Public Health, Iowa State University, 2008

FISIOLOGIA Aerobio estricto Algunas cepas necesitan CO2 adicional No fermentadoras Crecimiento lento Aislamientos de humanos son: Catalasa + Oxidasa + Utilizan el nitrato Actividad ureasa variable Prefieren el eritrol que la glucosa

PATOGENESIS Zoonosis Coloniza rganos ricos en eritrol (senos, tero, epiddimo) Diversas puertas de entrada al organismo

SINDROMES CLINICOS Humano Puede permanecer subclnica Brucelosis Cualquier rgano o sistema (clnica variada) Perodo de incubacin es de 1-8 semanas Abcesos localizados en el punto de inoculacin. Fiebre intermitente (fiebre ondulante) Sudoracin, polimialgias, poliartralgias, cefaleas. Adenopatas (10-20%) y esplenomegalia (20-50%) 1 solo rgano Brucelosis focal Granulomas (biopsias o necropsias)

SINDROMES CLINICOS Animales Afecta ganado vacuno, ovinos, porcinos y caninos. Puede ser asintomtico o presesentarse *Orquiepidimitis * Mastitis *Abortos espontneos

DIAGNOSTICO DE LABORATORIO Microscopa Difcil por su localizacin intracelular y su tamao Cultivo Incubar con CO2 Ccto lento Hemocultivos incubar 2 semanas antes de dar un (-) Agar sangre enriquecido con tripticasa soya Agar McConkey Ideal cultivo bifsico de Ruiz Castaeda

IDENTIFICACIN Morfologa de la colonia Morfologa microscpica Oxidasa + Catalasa + Actividad ureasa variable segn la especie Pruebas serolgicas. Titulos de acpos mayores de 1:80

Tto, prevencin y control Tratamiento Doxiciclina + rifampicina (evitar recidivas) adultos Trimetroprim-sulfa + rifampicina : Nios y mujeres embarazadas. 6 semanas Prevenci

Tto, prevencin y control Tratamiento Doxiciclina + rifampicina (evitar recidivas) adultos Trimetroprim-sulfa + rifampicina : Nios y mujeres embarazadas. 6 semanas Prevencin y Control Control de la enfermedad en el ganado (Vacunacin o sacrificio de reses infectadas) Evitar lcteos no pasteurizados Vacunas (solo para animales) B. abortus y B. melitensis

Vacunas a Grmenes Vivos Atenuados Naturalmente Cepa 19 de B.abortus para bovinos (SC) Cepa RB51 de B.abortus para bovinos (SC) Cepa REV 1 de B.melitensis para caprinos y ovinos (SC, IC) Cepa B. suis (S2) para porcinos,bovinos, (SC, oral,

Originada de una B. abortus biovar 1 virulenta en US, atenuada naturalmente.(Buck J, 1930). Empleada para prevenir brucelosis en bovinos. Se aplica por va SC Fue la vacuna mas extensamente usada en el mundo para prevenir la brucelosis bovina. Hoy, algunos tiene restricciones en algunos pases.

RB51 es una cepa mutante rifampicinresistente originada a partir de la B.abortus 2308 biovar 1

(Schurig G, 1991).

Se usa para prevenir la brucelosis bovina. NO tiene cadena O en su LPS por lo tanto NO induce anticuerpos detectables por tecnicas de diagnostico convencionales. Es una vacuna estable ante numeros pasajes in

vivo and in vitro

USA (RB51, 100%) Mxico (RB51 90% S19 (10%) Costa Rica (RB51 100% ) Venezuela (RB51 50% S19 50%) Colombia (RB51 40% S19 60%) Uruguay (RB51 100%)

Ecuador (S 19 60% RB51 40%) Per (S 19 70% RB51 30%) Brasil (S 19 100% RB51 VA) Chile (RB51 100%) Argentina (S 19 100% RB51 VA) Paraguay (S 19 60% RB51 40%)

Prueba del rosa de Bengala como screening. Seroaglutinacin Wright en caso de positividad o Huddleson Prueba de Coombs en caso de ttulos bajos o negativos de sta ltima. ELISA para el estudio de Ig especficas.