Bacilos Gram- Fermentadores(Enterobacteriaceae)PDF(1)

7/24/2019 Bacilos Gram- Fermentadores(Enterobacteriaceae)PDF(1)

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UNIVERSIDAD DE ORIENTENCLEO DE SUCRE

DEPARTAMENTO DE BIOANLISISCUMAN

BACTERIOLOGA CLNICA

NCLEO TEMTICO 4

BACILOS GRAM NEGATIVOS

FERMENTADORES

ENTERO CTERI CE E

)


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Escher ichia, Klebsiel la, Enterobacter,Citrobactery Serratia
http://agaudi.files.wordpress.com/2008/02/03_e_coli.jpg


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Taxonona y Clasificacin

Dominio: Bacteria

Phylum: Proteobacteria

Clase: -Proteobacteria

Orden: Enterobacteriales

Familia:Enterobacteriaceae

*Tribu:

*Gneros:


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Clasificacin de los gneros descritosen la familia Enterobacteriaceae

*Escherichia Klebs ielleae Klebs ielleae Citrob actereae Klebs ielleae

Escher ichia Klebsiel la Enterobacter Citrobacter Serrat ia

E. coli K. pneum oniae E. aerogenes C. amalonaticu s S. marcescens

E. blattae subesp. ozaenae E. clo acae C. freun dii S. proteamaculansE. fergusonii K. pneum oniae E. gergov iae C. kos ri (C. diversu s) subesp. proteamaculans

E. hermannii subesp. pneum oniae E. sakazakii C.braaki S. proteamaculans

E. vurneris K. pneum oniae E. amnig enus C. farmeri Subesp. quinovora

subesp. rhinoscleromatis E. cancerog enus C.rodentium S. rubidaea

K. oxytoca E. asburiae C. sedlakii S. entomophilaK. ornithinolytica E. dissolvens C. werkmanii S. ficaria

K. planticola E. hormaechei C. youngae S. fonticola

K.terrigena E. intermedius S. grimesii

E. kobei S. odorifera

E. nimipressuralis S. plymuthica

E. pyrinus

5 especies 7 13 9 10


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Clasificacin de los gneros descritosen la familia Enterobacteriaceae

Segn la fermentacin de la lactosa:

-Fermentadores rpido:E. coli,Klebsiella y Enterobacter

-Fermentadores lento: Serratia y Citrobacter

Escher ichia col i Enterobactersp.


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Clasificacin de los patogrupos de E.col i diarreognicasdescritas

Escher ichia col i:

Productora de toxina shiga (ECEH)

Enteroinvasiva (ECEI)

Enteropatgena (ECEP)

Enterotoxignica (ECET)

Difusa adherente (ECDA)

Enteroagregativa (ECEAg)

Kaper et al., 2004. Nat. Rev. microbiol


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Habitat

Ampliamente distribuidos en la naturaleza

Forman parte de la flora normal aerobia del intestino

Escherichia

Forma la mayor

parte de la flora

comensal aerobia

facultativa del

tracto intestinal

Klebsiel la

portadores de la

orofaringe (1-6%).

Pacientes

hospitalizados (20%)

Enterobacter

Flora intestin al,

Citrobacter

Contaminante de

alimentos

Serratia

Se ha encontrado

contaminando

ambientes y

soluciones


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Caractersticasmorfolgicas y tintoriales

Bacilos Gram negativos rectos (3 - 5m de largo)

Disposicin en grupos, pares, aislados y/o cadenas cortas

No forman esporas

Escherich ia Klebsiel la Enterobacter Citrobacter Serrat ia

Cpsula variable Cpsula - Cpsula (Vi) -

Mviles* Inmviles mviles mviles mviles

*Se han descrito variantes inmviles deE. coli


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Caractersticas de cultivo

-Aerobio y anaerobios facultativos

-Temperatura de crecimiento: hasta 45C, T. ptima: 35-37 C

-pH: 7,27,4-Medios de cultivos:

Bsicos: Agar Tripticasa de soya, Infusin cerebro corazn

Enriquecidos: Agar Sangre

Selectivos difrenciales: Agar Mac Conkey,

Agar Eosina azul de metileno


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Morfologa de las coloniasAgar Bsico (ATS, ABHI, AN):

Colonias grande (2-4mm), redondas, lisas, elevadas o aplanadas,de consistencia blanda, color blanquecinas, en caso de Serratiase

puede observar produccin de pigmento. En caso deKlebsiella, las

colonias son mucoides

Agar Mac Conkey:

Colonias grande (2-4mm), redondas, lisas, elevadas o aplanadas, de

consistencia blanda, color de fucsia a rosado (Lactosa positiva). En caso

deKlebsiella, las colonias son mucoides

Agar sangre:

colonias grande (3-5mm), redondas, lisas, elevadas o aplanadas, de

consistencia blanda, color grisceo. En caso deKlebsiella, las

colonias son mucoides


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Morfologa de las coloniasEscherich ia Klebsiel la Enterobacter Citrobacter Serratia

Agar sangre Grises con

hemlisis

variable

Grises, grandes y

coalescentes

Grises y de tamao

mediano

Posibleproduccin depigmento

Agar Mac

Conkey

Lactosa (+),

color fucsia,

secas,

chicloides

Lactosa (+), color

fucsia a rosa

plido, mucoides

y grandes

Lactosa (+), color

rosa plido o

amarillentas,

pueden ser

mucoides

Lactosa (+), color

fucsia , secas,

chicloides, color

rosa plido o

amarillentas,

pueden ser

mucoides

Lactosa (+), color

rosa plido o

amarillentas (en

colonias no

pigmentadas),

pueden producir

pigmentos

Agar EMB Brillo metlico Brillo metlico Posibleproduccinpigmentos

Escher ichia col i Enterobacter cloacae Klebsiel la pneum oniae Escher ichia col i

Agar Eosina Azul de MetilenoAgar Mac Conkey

Serratia marcescens


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Caractersticas de BioqumicasEscherich ia Klebsiel la Enterobacter Citrobacter Serratia

Lactosa + + + + +

Glucosa + + + + +

H2S *, + *(3)

Gas + + + + V

Citrato + + + +

Urea + * V

Indol + + *, *(0) + *, *(4)

Motilidad V + + +

Rojo de metilo + + V

Ornitina V + V +

Lisina + + *, + *(1) +

Arginina V + *, *(2) V

*K.pneumoniae: +,V: variable (+entre el 50-90%), (0):K. pneumoniae: ,K. oxytoca: +; (1):E. aerogenes: +,E.cloacae: ;(2):E. aerogenes:

,E.cloacae: +; (3): C. freundii: +; C. koseri: ; (4): C. freundii: ; C. koseri: +


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EnzimasEscherich ia Klebsiel la Enterobacter Citrobacter Serratia

Urea *(1) V

Triptofanasa + V V -

Ornitinadescarboxilasa

v - + V +

Lisinadeacarboxilasa

+ + V +

Argininadescarboxilasa

V V V

Lipasa - - - - +

Gelatinas - - - - +

ADNasa - - - - +

-lactamasas + + + + +

*(1):K. pneumoniae produce ureasa


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Toxinas

Escherich ia Klebsiel la Enterobacter Citrobacter Serratia

Endotoxinas + + + + +

Enterotoxinas TL, TS,

VT o SLT

Bacteriocinas Colicinas Klebocinas Marcesinas


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Estructura antignica


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Estructura Antignica

C. freundii: algunas cepas se asemejan a Salmonella desde el punto de vista bioqumico y

aglutinan con el antisuero polivalente O contra Salmonella; puede ser identificada

incorrectamente como especies de Salmonella

Estructura Escherich ia Klebsiel la Enterobacter Citrobacter Serratia

Antgeno O Clasificacin en

grupos . MAS DE

176 ANTIGENOS

SOMATICOS

Clasificacin en

grupos (11)

Antgeno H Clasificacin en

tipos

Antgeno K Clasificacin en

tipos (K1)

Clasificacin en

tipos (80)

- Vi

Antigeno F Pili manosa sensible

(MS)

Pili manosa

resistente (MR)*

*Las cepas de E. coliMR que afectan al hombre se denominan CFAI, CFAII, E8775; En cepas uropatgenas se denominan

fimbrias P:


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+ -

+ -
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Determinantes de PatogenicidadEscherich ia Klebsiel la Enterobacter Citrobacter Serratia

Lipopolisacarido Lpido A

(Endotoxina)

Propiedad

antifagocitaria,

alteraciones

vasculares,

accin pirgena

Lpido A

(Endotoxina)

Propiedad

antifagocitaria,

alteraciones

vasculares, accin

pirgena

Lpido A

(Endotoxina)

Propiedad

antifagocitaria,

alteraciones

vasculares, accin

pirgena

Lpido A

(Endotoxina)

Propiedad

antifagocitaria,

alteraciones

vasculares, accin

pirgena

Lpido A

(Endotoxina)

Propiedad

antifagocitaria,

alteraciones

vasculares, accin

pirgena

Antgeno K Propiedadantifagocitaria

Propiedadantifagocitaria

Antgeno H Dseminacin

Antgeno F Adherencia (MS

y MR)

Bacteriocinas Colicinas

(colonizacin)

Klebocinas

(colonizacin)

Marscecinas

(colonizacin)

Enterotoxinas TL, TS,

VT o SLT

MS: Pili manosa sensible; MR: Pili manosa resistente;TL: Toxina termolbil; TS: Toxina termoestable;

VT: Verotoxina o SLT: Toxia tipo shiga.


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Patotipos de E. co li diarreognicasdescritas

Escher ichia col i:

Productora de toxina shiga (ECEH)

Enteroinvasiva (ECEI)

Enteropatgena (ECEP)

Enterotoxignica (ECET)

Difusa adherente (ECDA)

Enteroagregativa (ECEAg)


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patotipos de E. co li diarreognicasdescritas


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patotipos de E. co li diarreognicasdescritasAbreviatura Serogrupos implicados patognicidad Infeccin(Signos y sntomas)

ECET O6,O8,O15,O20,O25,O27,O63,O78,O80,O85,O92,O115,O128

ac,

O139,O148,O153,O159,O167

Elaboracin de toxinas

secretorias (TL*,TS) que nodaan el epitelio mucoso (efecto

citotnico)

Diarrea del viajero. Diarrea profusa yacuosa, clicos leves. Deshidratacin y

vmito

ECEP O55,O86,O111,O119,O126,O127,O128ab,O142

Se adhiere a las clulas

epiteliales en microcolonias.

Efecto adherencia y efusin

(A/E). Factor EAF

Gastroenteritis.Fiebre de bajo grado,malestar, vmitos y diarrea,con cantidad

predominante de moco, pero no

generalmente no hay sangre

ECEIO28ac,

O29,O11ac,O124,O136,O143,

O144,O152,O164

Invaden clulas epitelialesElaboracin citotoxinas Disentera.

Fiebre y colitis, sntomas deurgencia y tenesmo, sangre, moco y muchos

leucocitos en materia fecal

ECTS O157:H7,O26:H11,O48:H21,O103:H2,O1

11:NM,O145

Elaboracin de toxinas

Toxina shiga (STX1, STX2)

(VT)

Diarrea sanginolentacon leucocitos, amenudo sin fiebre. Es comn el dolor

abdominal. Puede desarrollar sndrome

urmico hemoltico

ECEA 044:H18 Se adhieren en la totalidad de lasuperficie de las clulas

epiteliales. No se define an el

factor de virulencia

Causan diarrea liquida verde con moco sin

sangre, persistente

ECDA 0126:H27 Se adhiere a las clulasepiteliales localizadamente, en

un patrn que semeja una pila de

ladrillos. Tampoco se ha definido

an el factor de virulencia

Diarrea acuosa, vmitos deshidratacin ycon menor frecuencia dolor abdominal

*Semejante a la toxina de V. cholerae


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Aumento

AMPC

K+Na+


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Infecciones

Escherich ia Klebsiel la* Enterobacter Citrobacter Serratia

Diarreas + + +(Patgenas)

+ + - + -

Infecciones

peritoneales

+ + + + + + +

Infecciones

urinarias

+ + + + + + + + +

Infecciones deheridas

+ + + +

Bacteriemia + + + + +

Sepsis + + + + + + + +*

Meningitis + + + + + + + +

Neumona - + + + + +*

* K. pneumoniae subesp. pneumoniae: neumona; subesp. ozaenae: Rinitis ftida; subesp. Rhinoscleromatis: Rinoscleroma ;*S. marcescens: pacientes con cncer que reciben quimioterapia


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Infecciones

Neumona: necrosis extensa y hemorragia, el esputo puede ser grueso, mucoide decolor rojo ladrillo o delgado y con apariencia de jalea de grosella. Pleuritis (80%)

Infecciones urinarias

Bacteriemia y septicemia

Enteritis y Meningitis en lactantes

K. pneumoniae subesp.pneumoniae

K. pneumoniae subesp.Rhinoscleromatis: Rinoscleroma

K. pneumoniae subesp. Ozaenae: Rinitis atrfica (ocena)


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Diagnstico de LaboratorioMuestra

Ex. farngeo, orina *, L.C.R.,

Sec. Heridas, Sangre *, etc.

Ex. Directo (Gram):

Bacilos gramnegativos,

PMN, clulas epiteliales

Morfologa de las coloniasAS, AMC

Incubacin: microaerobiosis (AS),

aerobiosis (AMC) a 35-37C, 18-24 h.

Cultivo: AS, AMC

Coloracin de Gram.

Bacilos gramnegativos

PruebasBioqumicas

Pruebas inmunolgicas

y/o serolgicas

Pruebas desusceptibilidad

antimicrobiana

Incubacin: aerobiosis

a 35-37C, 18-24 h.

Subcultivo en medio bsico

para purificar colonia a valorar

Muestra de procedencia

extraintestinal

*Para Orina (Urocultivo) y sangre (Hemocultivo)


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CUADROS DIARREICOS

Datos epidemiolgicos: Edad (nios),Posibilidades de contagio, antecedentes

Datos clnicos: Fiebre, tipo de la diarrea,tiempo con la diarrea, complicaciones(deshidratacin, diabetes, entre otros)


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Escherichia coli

ECEA

ECEI

ECEP

ECET

ECTS

Shigellasp.

Salmonellasp.

Yersiniasp.

Plesiomonas shigelloides

Aeromonas sp.

Vibriosp.

Campylobactersp.termotolerantes

Qu bacterias debemos

buscar en un coprocultivo?

< 2 aos


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Muestra oportuna Preferiblemente tomada al inicio de la enfermedad y previo al suministro

de antimicrobianos

Hisopado rectal Heces recin emitidas

Macroscpico Microscpico

Carry Blair

Consistencia

Color

OlorPresencia de sangre

Presencia de moco

Presencia de

fragmentos de tejido

Residuos alimentarios

Parsitos

Examen en fresco: sol

fisiolgica y lugol

Frotis coloreado con

Kinyoun

Frotis teido con azul

de metileno

1 2 gr en SSF


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Incubar a 37C x 18horas en aerobiosis

Incubar de 8 a 12h enaerobiosis

AMC, SS, XLD

Hisopado rectal

Sembrar

Incubar a 37C x 18horas enaerobiosis

Evaluacin morfolgica de las colonias:

Sub-cultivo en mediobsico

pruebasbioqumicas

Pruebas serolgicas:Serogrupos y SerotiposAntibiograma

Heces recin emitidas

Caldo selenitoAMC, SS, XLD

Siembra

Frotis


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Pruebas bioqumicas

Identificacin de gnero y especie

Bioqumica primaria:

Kligler y/o TSI, Indol, Motilidad, Rojo de metilo, Citrato

Prueba de oxidasa:

Negativa

Miembro de la

familia

Enterobacteriaceae

Bioqumica complementaria:Fenilalanina, urea, malonato, arginina, reduccin de

nitratos, ONPG, fermentacin de carbohidratos

Incubacin: aerobiosis

a 37C, 24 h.

Lectura de los resultados


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Antibiograma paraEnterobacteriaceas

Ampicilina

Cefalotina

Amoxicilina/Clavulnico

Ceftazidima, Ceftriaxona,Cefotaxima

Cefepime

Ampicilina/Sulbactan

Imipenem o Meropenem

Ciprofloxacina u Ofloxacina

Gentamicina

Amikacina

La serratia es resistente a la colistina y cefalotina naturalmente

Norfloxacina, Ciprofloxacina u Ofloxacina

Trimetoprin/Sulfa

Nitrofurantona

Aislamientos ambientales, Hospitalarios, Urinarios


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AMC

CTX

CAZ

EDTAMER

APB

IMP

FOX

Disposicin de discos para observar mecanismos de

resistencia en enterobacterias. INH 2014

BLEE

KPC

MBL


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CIP AKN

CNT

FOX

AMP

SXT

GEN

Antibiograma paraEnterobacteriaceas


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Epidemiologa de la Diarrea deviajero

Agente causalE. coli enterotoignica

Reservorio:Portador o enfermo

Hospedero:Hombre susceptible

Puerta de salida:Recto (Heces)

Puerta de entrada:Boca

Transmisin:indirecta (ingestin de

alimentos contamnados)

M did P ti
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Medidas PreventivasEstricto control en la preparacin y distribucin de los alimentos,

incluye:

Higiene personalLavado de manos antes de preparar cada comida y despus de ir al bao.

Evitar las moscas y roedores

En Hospitales:

Todo personal mdico debe Lavarse las manos antes de examinar a cada

paciente

Esterilizacin de equipos y material mdico-quirrgico

Evitar los tratamiento intravenosos, sonda, etc.

Evitar el uso indiscriminado de agentes antimicrobianos

Hacer vigilancia epidemiolgica, principalmente en hospitales, para

conocer las bacterias circulantes

INTERRUMPIR el ciclo de transmisin
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Bibliografa Recomendada

1. Aguado, J. y Lumbrera, C. 1998. Infecciones por Enterobacterias. Medicine. 7(78):3622-3628.

2. Cimolat, N. 2001. Laboratory Diagnosis of Bacterial Infections.

3. Jawest, E., Melnick, J., y Odeleberg. 1999. Manual de Microbiologa Mdica. Editorial Manual

Moderno. Mxico.

4. Joklik, W, K., y Amos, B. 1996. Microbiologa. Editorial Mdica Panamericana.

5. Koneman, E., Allen, S., Janda, W., y Winn, W. 1999. Diagnstico Microbiolgico. Texto Atlas color. 5

edicin.Editorial Panamericana.

6. Murray, P., Kobayashi, G., Pfaller, M. y Rosenthal, K. 1997. Microbiologa Mdica. Editorial Hartcourt.

2 Edicin.

7. Madigan, M., Martinko, M., y Parker, J. Brock. 2000. Biologa de los Microorganismos. 9 edicin.

Editorial Prentice Hall.

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