“Avaliação citogenética e molecular de neoplasias hematológicas – utilização da classificação proposta pela OMS” Maria Cecília Menks Ribeiro DEPARTAMENTO

Ilíada Rainha de Souza - UFSC

Secretaria de Estado da SaúdeSecretaria de Estado do Desenvolvimento Econômico

Sustentável

“Avaliação citogenética e molecular de neoplasias hematológicas – utilização da classificação proposta pela

OMS”

Maria Cecília Menks Ribeiro DEPARTAMENTO DE BIOLOGIA CELULAR,

EMBRIOLOGIA E GENÉTICA

CENTRO DE CIÊNCIAS BIOLÓGICAS

UNIVERSIDADE FEDERAL DE SANTA CATARINA



Sustentável

Metodologia Aplicada

Cultura de células leucêmicas de curta duração

Análise citogenética clássica (bandas G)

Citogenética molecular (FISH)

Extração de DNA genômico

Extração de RNA

RT-PCR



Sustentável

Resultados e Comentários93 amostras coletadas:

56 pacientes com Leucemia Aguda, Linfomas e LMC

38 pacientes com SMD e outras hemopatias.

52 amostras sucesso na análise citogenética clássica : 66% leucemias/linfoma 39% outras hemopatias.desenhadas e analizadas individualmente 781 metáfases em banda G.



Sustentável

AVALIAÇÃO CITOGENÉTICA POSSIBILIDADE DE UTILIZAÇÃO DA CLASSIFICAÇÃO PROPOSTA PELA OMS:

BOM PROGNÓSTICOLMA t(8;21) (LMA-M2); LPA t(15;17) (LMA-M3); LMA inv(16) (LMA-M4)Alterações adicionais: podem influenciar o prognóstico

PROGNÓSTICO INTERMEDIÁRIO: normal, trissomia 8

PROGNÓSTICO DESFAVORÁVEL: 3, -5/del 5q, -7/del7q, cariótipo complexo

Além das alterações recorrentes, outras nuances das alterações cariotípicas foram detectadas

e seu significado foi sendo interpretado em função da evolução do pacientes.



Sustentável

TAMBÉM AVALIADOS PACIENTES COM:

LLA- t(8;14)

LMC- t (9;22)

SMD- presença de alterações cromossômicas x cariótipo normal



Sustentável

Padronização da técnica de FISH para detecção de rearranjos em células metafásicas e núcleos interfásicos.

15

17

17q-

15q+

15

17

transl

transl

A BFigura 1Figura 1: A - análise com FISH, metáfase e núcleo interfásico com t(15;17) da amostra 3507; B - Metáfase em bandas G, amostra 3207, com t(15; 17).



Sustentável

Padronização dos procedimentos para extração de RNA e transcrição reversa (cDNA) para detecção dos genes quiméricos.

Opção para diagnóstico em culturas sem crescimento

Acompanhamento do tratamento/ Detecção de doença residual



Sustentável

Impactos do ProjetoA avaliação citogenética para diagnóstico de neoplasias hematológicas possibilita a adequação necessária para a utilização da proposta da OMS para classificação destas neoplasias. Através desta proposta foi possível sua utilização sistemática ( em caráter experimental) de forma pioneira no Hospital Universitário da UFSC, o que permitiu caracterizar a natureza da demanda para esta avaliação na população atendida, estabelecer as alterações mais recorrentes, e também acompanhar a evolução dos pacientes avaliados.



Sustentável

ADEQUAÇÃO DA INFRA-ESTRUTURA

-sistema de microscopia de fluorescência e fotodocumentação

- Micro-centrífuga refrigerada (extração RNA)

AQUISIÇÃO DE INSUMOS DE ALTO CUSTOMaterial descartávelMeios de cultura específicosReagentes para FISHReagentes para RT-PCR



Sustentável

Aplicabilidade para o SUS

Disponibilização de metodologias validadas e recomendadas pela OMS para os pacientes atendidos no HU-UFSC

Opções terapêuticas baseadas nas alterações cromossômicas

Capacitação de profissionais na utilização de metodologias

Caracterização das patologias mais freqüentes na população de Santa Catarina



Sustentável

IMPORTÂNCIA DA UTILIZAÇÃO DA CLASSIFICAÇÃO DA OMS

-diagnóstico

-classificação

-progressão

-escolha terapêutica

-detecção de doença residual mínima

-evolução

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