ANÁLISIS MICROBIOLÓGICO DEL AGUA – PARTE 2 Real Decreto 140/2003
, de 7 de febrero
DETECCIÓN Y RECUENTO DE ENTEROCOCOS INTESTINALES
(ESTREPTOMETRÍA) – METODO DE LOS TUBOS MULTIPLES NÚMERO MÁS
PROBABLE (N.M.P.) UNE EN ISO 7899-1:1999
0.1 mL / tubo AGUA PROBLEMA
PIPETEAR Y VERTER
1 mL AGUA PROBLEMA
10 mL AGUA PROBLEMA
10 mL / tubo CALDO ROTHE O
CALDO KAA
10 mL / tubo CALDO ROTHE O
CALDO KAA
10 mL / tubo Doble concentrado
CALDO ROTHE O CALDO KAA
INCUBAR
SIEMBRA DE TRES ASAS DE LOS “+” EN CALDO LITSKY (CALDO EVA) Y
HOMOGENIZAR
EN CLASE SOLO SEMBRAMOS TRES TUBOS 1.1 / 2.3 / 3.3
37 ºC / 24 h. o hasta 48 h.
PRUEBA CONFIRMATIVA PRUEBA PRESUNTIVA
POSITIVO COLONIAS COLOR ROJO LADRILLO VIOLETA O ROSAS
LAS PLACAS EN POSICIÓN INVERTIDA PUEDEN ESTIMARSE Nº DE COLONIAS
ESTREPTOCOCOS
FECALES EN 100 Ml
FILTRAR 100 mL
AGUA PROBLEMA x PLACA
VERTER 15 mL
MEDIO SLANETZ
TRASPASO DE MEMBRANA A PLACA CON AGAR BILIS
ESCULINA AZIDA
44 ± 0.5 º C / 2 h.
MIGUEL MARTINEZ OSUNA – 1º CFGS ANALISIS Y CONTROL DE
CALIDAD
1.1 1.2 1.3
2.1 2.2 2.3
3.1 3.2 3.3
1.1 1.2 1.3
2.1 2.2 2.3
3.1 3.2 3.3
+ +
+ + +
+ + +
+
1.1 1.2 1.3
2.1 2.2 2.3
3.1 3.2 3.3
+ +
+ + +
+ + +
+
37 ºC / 48 h.
TODOS “+” PRESENCIA DE ENTURBIAMIENTO
Y/O SEDIMENTO
+ + +
LOS “+” AQUELLOS CON ENTURBIAMIENTO Y/O SEDIMENTO
EN CALDO LITSKY (CALDO EVA) Y COLONIAS TRANSLUCIDAS CON
HALO NEGRO EN CALDO KAA CUANDO LA PRUEBA PRESUNTIVA
HA SIDO EN CALDO KAA
INTERPRETACION RESULTADOS SEGÚN TABLA (NMP)
EN LA PRACTICA EN CLASE NO SE PUDO INTERPRETAR NMP POR NO
HABER SUFICIENTES TUBOS
DETECCIÓN Y RECUENTO DE ENTEROCOCOS INTESTINALES
(ESTREPTOMETRÍA) – METODO FILTRADO DE MEMBRANA UNE EN ISO
7899-2:2001
37 ºC / 24 h.
INCUBAR
PRUEBA PRESUNTIVA
INCUBAR
PRUEBA CONFIRMATIVA
POSITIVO HIDROLIZA LA ESCULINA
DANDO COLORACION COLONIAS DE MARRON A NEGRO EN LA PRACTICA
DE CLASE TODA UNA MASA NEGRA
DETECCIÓN Y RECUENTO DE CLOSTRIDIUM PERFRINGES INCLUIDAS ESPORAS
(CLOSTRIDIOMETRÍA) METODO FILTRADO DE MEMBRANA UNE EN ISO
26461-2:1995
FILTRAR 100 mL
AGUA PROBLEMA x PLACA
TRASPASAR A PLACA CON AGAR
m-CP + SUPLEMETO INDICADOR DE Ph FENOLFTALEINA /
CISTEINA Suplemento después de autoclave
44 ºC / 24 h.
INCUBAR EN CONDICIONES ANAEROBICAS EN JARRA DE
ANAEROBIOS
INTERPRETACION La placa se somete a los vapores de hidróxido
amónico al 25% durante 20-30 segundos SE CUENTAN TODAS LAS
COLONIAS QUE SIENDO
AMARILLAS CAMBIAN A ROSA O ROJO En nuestra practica todas
ANÁLISIS MICROBIOLÓGICO DEL AGUA – PARTE 2
