ANATI QUANTI: S OFTWARE ANÁLISES QUANTITATIVAS ......o comprimento e diâmetro de tricomas secre-tores foram utilizados para diferenciar nectá-rios florais e extraflorais em Triumfetta

Planta Daninha, Viçosa-MG, v. 25, n. 4, p. 649-659, 2007

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ANATI QUANTI: SOFTWARE DE ANÁLISES QUANTITATIVAS PARAESTUDOS EM ANATOMIA VEGETAL1

ANATI QUANTI: Quantitative Analysis Software for Plant Anatomy Studies

AGUIAR, T.V.2, SANT’ANNA-SANTOS, B.F.3, AZEVEDO, A.A.4 e FERREIRA, R.S.5

RESUMO - Em diversos estudos interdisciplinares em que a Anatomia Vegetal é utilizada,análises quantitativas complementares são necessárias. Geralmente, a avaliaçãomicromorfométrica é feita manualmente e/ou utilizando programas computacionais deanálise de imagens não específicos. Este trabalho teve como objetivo desenvolver umprograma específico para Anatomia Vegetal quantitativa e testar sua eficiência e aceitaçãopor usuários. A solução foi elaborada na linguagem Java, visando maior mobilidade emrelação ao sistema operacional a ser usado. O software desenvolvido foi denominado ANATIQUANTI e testado pelos alunos, pesquisadores e professores do Laboratório de AnatomiaVegetal da Universidade Federal de Viçosa (UFV). Todos os entrevistados receberam fotospara efetuarem medições no ANATI QUANTI e comparar com os resultados obtidos utilizandoo software disponível. Os voluntários, através de questionários previamente formulados,destacaram as principais vantagens e desvantagens do programa desenvolvido em relaçãoao software disponível. Além de ser mais específico, simples e ágil do que o softwaredisponível, o ANATI QUANTI é confiável, atendendo à expectativa dos entrevistados.Entretanto, há necessidade de acrescentar recursos adicionais, como a inserção de novasescalas, o que aumentaria a gama de usuários. O ANATI QUANTI já está em uso naspesquisas desenvolvidas por usuários na UFV. Por ser um software livre e de código aberto,será disponibilizado na internet gratuitamente.

Palavras-chave: análise micromorfométrica, Java, densidade estomática, índice estomático.

ABSTRACT - Complementary quantitative analyses are necessary for several interdisciplinarystudies using Plant Anatomy. Generally, micromorphometric evaluation is performed manually and/or using non-specific software for image analyses. This work aimed to develop specific quantitativeanalysis software for Plant Anatomy and test its efficiency and acceptance by users. The solutionwas elaborated in the JAVA language, which has a greater mobility in relation to the operatingsystem to be used. The software developed was called ANATI QUANTI and tested by students,researchers and professors of the Plant Anatomy Laboratory of the Universidade Federal de Viçosa(UFV). All the interviewees received photos to measure in ANATI QUANTI and compare with theresults obtained using the available software. Through previously formulated questionnaires, thevolunteers pointed out the main advantages and disadvantages of the developed software in relationto the currently available software. Besides being more specific, simpler and faster than thecurrently available software, ANATI QUANTI is reliable, matching the interviewees expectations.However, additional resources need to be added as well as new scales to increase users range.ANATI QUANTI is already being applied in research developed by UFV users. It is a free softwareand as an open source, it it will be available for free over the internet.

Keywords: micromorphometric analysis, Java, stomatal density, stomatal index.

1 Recebido para publicação em 21.3.2007 e na forma revisada em 25.10.2007.2 Graduando em Ciências da Computação pela Universidade Federal de Viçosa – UFV, Bolsista PIBIC/CNPq pelo Departamentode Biologia Vegetal – DBV, 36570-000 Viçosa-MG. 3Doutorando em Botânica pela UFV, Bolsista CAPES,. 4Professor Associado I do DBV/UFV; 5Professor Adjunto do Departamento de Informática – DPI/UFV.

AGUIAR, T.V. et al.


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INTRODUÇÃO

O estudo comparativo de células, tecidose órgãos vegetais, denominado de AnatomiaVegetal, é uma disciplina da Botânica comlonga tradição. Os anatomistas aplicam obser-vações críticas e extensivas, resultando nacompilação, codificação e análise de dados des-critivos, utilizando métodos das ciências expe-rimentais (Dickison, 2000).

Além da avaliação qualitativa, há tambémo emprego da análise quantitativa (micromor-fométrica) em diversos estudos interdiscipli-nares em que a anatomia é utilizada. Eminvestigações anatômicas, vários são os exem-plos de utilização de parâmetros quantitativospara confirmar a interpretação dos resultados:o comprimento e diâmetro de tricomas secre-tores foram utilizados para diferenciar nectá-rios florais e extraflorais em Triumfetta semitriloba(Leitão et al., 2005); as características dedigestibilidade de espécies forrageiras podemser mais bem compreendidas quando comple-mentadas com estudos de anatomia quantita-tiva em Brachiaria brizantha e B. humidicola(Alves de Brito et al., 2004); a contagem de estô-matos e os cálculos de densidade e índice esto-mático são bastante utilizados na descriçãoanatômica de espécies, como em Chamaecristatrichopoda (Francino et al., 2006), e na análiseda influência da intensidade luminosa na es-trutura anatômica, como em Tradescantiapallida (Paiva et al., 2003), entre outras.

As análises micromorfométricas tambémcontribuem para a caracterização das altera-ções na estrutura dos órgãos vegetais de plan-tas provocadas por agentes externos. Caracte-rísticas da superfície foliar de espécies deeucalipto, como o número de células epidérmi-cas, podem ser relacionadas com a tolerânciaao glyphosate (Tuffi Santos et al., 2005). Al-guns caracteres anatômicos observados nocultivar RB855113 de cana-de-açúcar, como amaior densidade de estômatos e a maior pro-porção de células buliformes, podem explicara maior penetração do trifloxysulfuron-sodium+ ametryn e, conseqüentemente, a maior sen-sibilidade do cultivar a essa mistura de herbi-cidas (Ferreira et al., 2007).

Burrows et al. (1992) documentaram asalterações provocadas pelo paclobutrazol na

estrutura foliar de Chrysanthemum por meiodas dimensões de várias estruturas anatômi-cas. Análises quantitativas, detalhando a pro-porção entre os diferentes tecidos da folha e aquantidade de estruturas na epiderme, auxi-liam na identificação de diferenças na sensibi-lidade de espécies aos efeitos negativos da po-luição atmosférica (Soukupova et al., 2001;Maranho et al., 2006) e de herbicidas (Ferreiraet al., 2003; Tuffi Santos et al., 2004, 2005,2006).

A análise quantitativa de fotomicrografiasrequer a avaliação detalhada de grande quanti-dade de material foliar (Feder & O’Brien, 1968),o que torna a utilização de softwares de análisede imagens importante. Os primeiros compu-tadores foram utilizados para efetuar cálculosmatemáticos, possibilitando a obtenção de re-sultados rápidos e confiáveis de dados numéri-cos. Posteriormente, com a redução dos custosde memória (disco e memória principal), asaplicações de banco de dados e processamentode texto se popularizaram. O computador vemservindo de ferramenta de apoio para cálculoe organização da informação em diversas áreasdas ciências biológicas (Veropoulos et al.,1998). O estudo de imagens, que é uma áreada ciência da computação bem consolidada, po-de ser usado para contagens, medidas de área,detecção de formas, entre outras (Falcão,2006).

A Universidade Federal de Viçosa (UFV)destaca-se pela elevada demanda para aplica-ções da informática na biologia, principal-mente no que se refere ao processamento e àanálise de imagens. A análise quantitativa decaracteres anatômicos tem se constituído emuma ferramenta útil na interpretação de pes-quisas desenvolvidas com herbicidas (TuffiSantos et al., 2004, 2005, 2006; Ferreira et al.,2003, 2007), poluentes atmosféricos (Sant’Anna-Santos et al., 2007), dejetos de suinocul-tura (Barros, 2005) e caracterização anatômica(Leitão et al., 2005; Francino et al., 2006).

Softwares proprietários, aqueles cuja có-pia, redistribuição ou modificação são em algu-ma medida proibidos pelo seu criador ou distri-buidor (Wikipédia, 2007), em geral apresentamalto custo, o que restringe sua utilização, limi-tando a quantidade de computadores com esserecurso. Outra desvantagem é que softwarespara processamento de imagens de uso geral,



apesar de terem os recursos para resolver de-terminado problema, demandam grande perío-do de tempo para o aprendizado, por incluir di-versos tipos de ferramentas muitas vezes nãoutilizadas pelo usuário. Além disso, podemocorrer limitações na exportação dos resulta-dos para outros softwares, gerando dificuldadesde compatibilização com outros programas.

Em contrapartida, softwares livres, alémde não terem restrições de uso, podem ser adap-tados e modificados para resolver determina-dos problemas, simplificando a interface como usuário, automatizando tarefas específicase sendo personalizado para exportar os dadosda forma desejada, reduzindo desse modo otempo de aprendizado e de uso.

Diante do exposto, objetivou-se desenvolverum software específico para análise quantita-tiva em Anatomia Vegetal e testar sua eficiên-cia e aceitação pelos usuários.

MATERIAL E MÉTODOS

Para programação do software de mediçõesem Anatomia Vegetal, utilizou-se a linguagemde programação Java. Para elaboração doprograma, foram estudados assuntos comopropriedades dos pixels, formatos de imagens,realce de imagens e identificação de bordas.Os algoritmos foram baseados em diferencia-ção de cor.

O formato das imagens a serem trabalha-das é o JPEG, uma compressão do BMP, já queas imagens ficam menos carregadas e não per-dem informações relevantes às análises a se-rem realizadas.

Detecção de imagens

O primeiro passo na análise de imagens éa separação ou a segmentação dos objetos den-tro da imagem. Algoritmos de segmentação per-mitem achar diferenças entre dois ou maisobjetos. A separação é baseada em dois concei-tos: similaridade e descontinuidade(Albuquerque, 2005).

Na segmentação, procura-se distinguir aspartículas umas das outras e do fundo. Essadistinção permitirá ao programa interpretarpixels contíguos e agrupá-los em regiões. Não

existe um modelo formal para a segmentação– o processo é essencialmente empírico; logo,esta etapa é a mais difícil do processo e tam-bém a mais delicada, pois todas as medidasserão realizadas sobre as regiões identificadasnesta etapa (Seara, 2007).

Para detecção de borda, foi utilizado o algo-ritmo do operador de Sobel (Gonzalez & Woods,2002), definido a seguir, para encontrar o gra-diente da borda, que nada mais é que a razãosegundo a qual sua coloração varia, baseadono método da vizinhança. Foi utilizada a 4-vi-zinhança, explicada em seguida, com o objeti-vo de exigir menos do computador do usuário,uma vez que é interessante que o programafuncione em qualquer computador.

Detecção de borda

A borda, ou contorno, é uma mudança brus-ca do nível de coloração entre duas regiões re-lativamente homogêneas. Ela pode aparecercomo uma seqüência de pontos, uma linha,um segmento ou uma curva. Sua detecção éimportante para que haja diferenciação entreduas regiões numa imagem, para posterioranálise (Facon, 2005).

Vizinhança de um pixel

Há duas maneiras possíveis de se definira vizinha de um pixel: 4-vizinhança e 8-vizi-nhança. A 4-vizinhança ou vizinhança simplesde um pixel qualquer é definida como o conjun-to dos pixels que ficam ao redor deste ponto,desconsiderando os pontos localizados nas dia-gonais. A 8-vizinhança de um dado pixel é de-finida como o conjunto de todos os pixels queficam ao redor deste, incluindo, assim, as dia-gonais que passam por ele (Facon, 2005).

Operador de Sobel

O operador de Sobel é um detector de bordasutilizado para obter descontinuidades na colo-ração da imagem, ou seja, ele permite a deter-minação de seus contornos. Esse operadorutiliza duas matrizes, ou máscaras, com valo-res que representam a possível variação dacoloração para detectar se o ponto faz parte ounão de algum contorno. Essas máscaras são

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definidas como gradiente vertical e horizontal(Filho, 2007).

Teste do software e pesquisa de opiniãocom usuários

Para avaliar a eficiência do software de-senvolvido, foram realizadas medições de áreaem 50 imagens de cortes transversais da folhade Spondias dulcis cedidas pelo Laboratório deAnatomia Vegetal (UFV), no software proprietá-rio e no ANATI QUANTI.

Para testar a aceitação do ANATI QUANTIpelos usuários que utilizam o software proprie-tário com freqüência, foi realizada uma pales-tra de exposição do programa no DBV/UFV.Após a palestra, onde os usuários receberaminformações acerca da utilização do ANATIQUANTI, foram distribuídos questionários deopinião sobre o programa a 12 voluntários. Noquestionário, todos os entrevistados fornece-ram nome completo, condição dentro da UFV(docente, pós-graduando ou graduando), depar-tamento e e-mail para contato. Os seguintesquestionamentos foram feitos aos entrevista-dos acerca do ANATI QUANTI:

a) Em sua opinião, quais as principais van-tagens do software ANATI QUANTI sobre osoftware disponível? Enumere, de 1 a 9, emordem crescente de importância.

( ) As escalas já estão inseridas, não sendonecessário calibrar o software.

( ) A abertura das imagens é fácil, bastaselecionar a pasta que as imagens vão abrindoem ordem seqüencial.

( ) Caso seja desejável, as imagens jáabrem com contraste invertido, o que reduz otempo de trabalho na edição das imagens emoutros softwares.

( ) A exportação dos dados é direta; nas pla-nilhas geradas, todas as medições já aparecemcom o nome da figura ao lado, não sendo neces-sário perder tempo formatando as planilhas doExcel®.

( ) A contagem de células é prática, ha-vendo opções de botões diferenciados para es-tômatos e células epidérmicas propriamenteditas. Dessa forma, os dados já são exportadosdiretamente para o Excel®, não havendo

necessidade de calcular densidade e índice es-tomático; os valores já são inseridos automati-camente, tornando o trabalho mais rápido eprático.

( ) O software é gratuito, o que evita a pira-taria de softwares pagos e facilita o acesso.

( ) O software roda nas plataformas Linuxe Windows®.

( ) O fato de o software ser em portuguêsauxilia na compreensão das suas funções.

( ) O software é simples e específico parao que quero utilizar, com poucos botões e fun-ções, o que facilita a memorização e utilizaçãodos recursos disponíveis.

b) Dos itens listados abaixo, quais você jul-ga mais importantes a serem acrescentadosnuma segunda versão do ANATI QUANTI? Enu-mere, de 1 a 4, em ordem crescente de impor-tância.

( ) Inserção de novas escalas. As escalasinseridas são específicas para o microscópioOlympus AX70TRF, havendo necessidade decalibrar o software para imagens provenientesde outros microscópios.

( ) Falta a ferramenta sobre medições deárea e espessura manuais.

( ) Demo de utilização. Não consigo utilizaro software sozinho (a); seria ideal haver umslide show em que haja uma demonstração decomo utilizar.

( ) Disponibilização na internet, no site daUFV, para que as versões mais atuais estejamsempre disponíveis e fáceis de acessar.

c) Pretende utilizar o software ANATI QUANTIem suas pesquisas?

( ) Sim ( ) Não

Após o preenchimento do questionário, to-dos os voluntários assinaram um “Termo deconsentimento livre e esclarecido”, em que de-clararam que entenderam os objetivos da pes-quisa. A porcentagem de relevância das vanta-gens e desvantagens do ANATI QUANTI sobreo software disponível foi calculada de acordocom a média aritmética da pontuação dada pe-los voluntários a cada um dos itens propostosno questionário. O resultado da média aritmé-tica foi dividido pela maior ordem de importân-cia dos itens.



Adicionalmente, durante as atividadespráticas da disciplina Métodos em AnatomiaVegetal do Programa de Pós-Graduação em Bo-tânica, nove alunos receberam quatro ima-gens para serem mensuradas nos dois softwarese gentilmente forneceram comentários e su-gestões orais, utilizados na discussão dos re-sultados.

RESULTADOS E DISCUSSÃO

Características do software

O software desenvolvido foi denominadoANATI QUANTI (ANATI = anatomia vegetal eQUANTI = análise quantitativa). No menu la-teral da esquerda observam-se as principaisferramentas nos botões: Abrir Imagem, Próxi-ma Imagem, o modo com que elas serão apre-sentadas (com ou sem o contraste invertido),Inverter Imagem, Contagem Manual, Área eEspessura, Adicionar Dados e Gerar Planilha.No menu lateral da direita situam-se as

funcionalidades relacionadas à contagemmanual e a tabela de histórico das imagensque foram mensuradas. Na parte inferior datela, o nome da imagem em análise(redimensionada na proporção original) e aescala em uso aparecem na barra de status(Figura 1A). Após comparar os dois softwares,os usuários destacaram que o ANATI QUANTIé fácil de utilizar, já que os recursos disponí-veis estão localizados em poucos comandos,que são específicos para micromorfometria.

O botão “Próxima Imagem” carrega para atela principal a próxima imagem da pasta se-lecionada a ser mensurada (Figura 1A). Umavez que as análises são realizadas utilizando-se muitas imagens, esta ferramenta é de gran-de utilidade, pois garante ao usuário a certezade sempre estar abrindo, na seqüência corre-ta, uma imagem ainda não mensurada. Se-gundo os alunos da disciplina Métodos em Ana-tomia Vegetal, esta ferramenta é muito útil,já que a garantia de estar medindo a imagem

A. menu superior (Ms): seleção da escala a ser trabalhada; menu lateral esquerdo (Me): principais botões de comando; menu lateraldireito (Md): funções da contagem manual e local destinado à tabela de log (Tg); menu inferior (Mi): nome da imagem em análise (Ia),escala utilizada na análise (Es).

Figura 1 - Interface geral do ANATI QUANTI.

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correta facilita o trabalho e diminui a probabi-lidade de erro durante a análise micromorfo-métrica.

Ao abrir as imagens, o usuário ainda tema opção de escolher de que modo elas serãoapresentadas: com (Figura 2A) ou sem o contras-te invertido (Figura 2B). O comando “InverterImagem” inverte as cores da imagem corren-te, o que pode contribuir para um destaque maisaparente dos diferentes tipos celulares emanálise. No software proprietário, a maioriados usuários executa o comando de inversãode contraste toda vez que uma imagem é aber-ta. Já no ANATI QUANTI, a opção de o usuárioabrir as imagens com o contraste já invertidotorna o trabalho mais prático e rápido.

O menu superior possui, como função prin-cipal, a seleção da escala a ser usada durantea análise da imagem. As escalas que são utili-zadas nas análises de imagens provenientesdo microscópio Olympus AX70TRF já estão in-seridas no ANATI QUANTI (Figura 2C), tornan-do o software muito prático. No software pro-prietário, cada vez que o programa é reinstalado,há necessidade de inserir novamente as es-calas. Os usuários que compararam os doissoftwares observaram que a inserção automá-tica de escalas do ANATI QUANTI padroniza asmedições, caso haja necessidade de reinstalaro software novamente ou efetuar medições emcomputadores diferentes. Contudo, a inserçãode novas escalas é um recurso desejável parausuários de outros microscópios, constituindo-

A- Comando utilizado para abrir a imagem com o contraste normal (seta). B- comando para abrir a imagem com o contraste invertido(seta). C- comandos para seleção da escala a ser trabalhada (seta) e exportação dos dados para planilha do Excel® (*).

Figura 2 - Funções do menu lateral direito (A e B) e do menu superior (C) do ANATI QUANTI.



se em uma vantagem do software proprietáriosobre o ANATI QUANTI.

Após o término das medições em uma ima-gem, o usuário clica no botão “Adicionar Dados”e o software acrescenta as informações obtidasna análise, para posterior exportação dos dadospara o Excel®. O botão “Gerar Planilha” cria umaplanilha do Excel® com os dados que foram cole-tados através das análises usando uma forma-tação adequada a uma posterior análise pelousuário (Figura 2C), para contagem manualde estômatos e células epidérmicas propria-mente ditas ou medição automática de área eespessura.

Contagem manual de estômatos e célulasepidérmicas propriamente ditas

A contagem de células epidérmicas pro-priamente ditas e estômatos é amplamenteutilizada em trabalhos de Anatomia Vegetal,principalmente para cálculos de densidade e/ou índice estomático (Paiva et al., 2003; Segattoet al., 2004; Francino et al., 2006; Tuffi Santoset al., 2006; Ferreira et al., 2007), tornandofundamental a presença desta função emsoftwares de análise micromorfométrica.

No ANATI QUANTI, o botão “Contagem Ma-nual” permite ao usuário fazer o apuramentomanual de células epidérmicas e estômatos.Após selecionar o comando, o software dispo-nibiliza, no menu inferior, o recurso que estásendo utilizado. Os botões de controle situadosà direita permitem distinguir os tipos celularese cancelar uma ou todas as contagens efetua-das (Figura 3A). Com a contagem estabelecida,o software transfere os dados para um arquivodo Excel® (nomeado pelo usuário), pré-formata-do com o intuito de facilitar uma posterior aná-lise, onde constam as seguintes informações:nome da imagem, quantidade de células epi-dérmicas e estômatos, cálculos de índice esto-mático de acordo com Cutter (1978) (ÍndiceEstomático (%) = C2 X100/ (C1 + C2)) e densida-de estomática (Densidade Estomática (mm2)= C2 / área total), em que C1 = células epidérmi-cas e C2 = estômatos (Figura 3B). Entretanto,caso seja desejável contar outras estruturas,como tricomas, escamas ou glândulas, bastao usuário substituir o nome do tipo celular (cé-lulas epidérmicas e estômatos) na planilha doExcel® gerada (Figura 3B). Segundo os usuários

que utilizaram os dois softwares, a aquisiçãoautomática dos dados de densidade e índiceestomáticos pelo ANATI QUANTI permite eco-nomia de tempo na análise das imagens e podediminuir substancialmente a chance de errosdurante os cálculos.

Medição automática de área e espessura

As medições usadas para definir a espes-sura ou o calibre de células, tecidos ou órgãosvegetais também são amplamente utilizadasem trabalhos com anatomia quantitativa (Paivaet al., 2003; Tuffi Santos et al., 2005; Ferreiraet al., 2007). Em softwares mais gerais, o cál-culo automático da espessura ou área ocupadapelo tecido não é disponibilizado de forma sim-ples e direta, o que dificulta o acesso a usuá-rios eventuais e/ou inexperientes, fazendocom que optem por utilizar recursos manuais,prática demorada e cansativa.

No ANATI QUANTI, após selecionar o botão“Área e Espessura”, o usuário clica no fundoda imagem e o software determina a área ge-ral e espessura média de seis retas eqüidis-tantes traçadas na imagem em análise (Figura4A, B). A área apresentada pela secção trans-versal da folha é dada a partir da distinção en-tre as cores do fundo da fotomicrografia e dasecção transversal da folha, sendo os dadosdisponibilizados em porcentagem e µm2. A es-pessura é dada pela média de seis retas verti-cais eqüidistantes, automaticamente traçadasquando o fundo da imagem é selecionado(Figura 4B). Em seguida, os dados são exibidosnuma tabela à direita da tela. Após adicionaros dados, a planilha gerada possui as seguin-tes informações: nome da imagem, área foliar(µm2) em secção transversal, percentual queo corte da folha está ocupando em relação àimagem como um todo e espessura média cal-culada (µm) (Figura 4C). De acordo com osusuários do software proprietário, essa ferra-menta do ANATI QUANTI diminui o tempo du-rante o processamento das planilhas geradas,pois exclui a necessidade de efetuar cálculosmatemáticos no Excel®. Adicionalmente, todosos dados são dispostos em ordem seqüencial,sem ônus de tempo de formatação, reduzindo,substancialmente, a margem de erro duranteo processamento dos dados. Segundo comentá-rios dos estudantes que utilizaram os dois

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softwares, a adição de uma ferramenta manualde medição em espessura numa futura versãodo ANATI QUANTI será fundamental para tra-balhos mais minuciosos.

Teste de eficiência do software e pesquisade opinião com usuários

Os valores numéricos obtidos no ANATIQUANTI diferiram, em média, cerca de 0,5%dos observados no software disponível. Contudo,observou-se diferença expressiva no tempo deutilização. As imagens utilizadas no teste deeficiência foram mensuradas em 120 minutosno software proprietário e em apenas se-te minutos no ANATI QUANTI. Os usuários quecompararam os dois softwares também consta-taram maior economia de tempo no trabalhoao utilizar o ANATI QUANTI.

Dentre os pesquisadores que responderamo questionário, 67% eram estudantes de pós-graduação que utilizam o software em pesqui-sas ou durante atividades de disciplinas do Pro-grama de Pós-Graduação em Botânica (UFV),8% de docentes e 25% de graduandos.

Os entrevistados destacaram que a faltada ferramenta manual de medição de área eespessura é a principal desvantagem do ANATIQUANTI em relação ao software atualmenteutilizado (Figura 5). A adição desta ferramentapara uma próxima versão, conforme comentá-rios adicionais de alguns entrevistados, torna-ria o ANATI QUANTI auto-suficiente.

Na opinião dos voluntários que participa-ram da pesquisa, os dois maiores atrativos doANATI QUANTI são a inserção automática dasescalas e a exportação direta dos dados para

A- contagem manual de células epidérmicas (pontos azuis) e estômatos (pontos verdes). B- dados exportados da contagem manual.

Figura 3 - Contagem manual (A) e planilha do Excel® gerada a partir do ANATI QUANTI (B).



planilhas, com todas as informações relevan-tes dispostas de maneira a evitar perda de tem-po e eventuais erros decorrentes da formata-ção de dados (Figura 6).

A nova versão do ANATI QUANTI, que serádisponibilizada no site da UFV (http://www.ufv.br), já se encontra em fase final dedesenvolvimento e será lançada com asferramentas para inserção de novas escalas

(provenientes de outros microscópios), mediçãomanual de espessura e demo de utilização.

Todos os entrevistados declararam que uti-lizarão o ANATI QUANTI em suas pesquisas.Os resultados obtidos no teste de eficiênciapermitem concluir que o software fornece dadosconfiáveis. Atualmente, o software desenvolvi-do vem sendo utilizado de forma experimentalem algumas pesquisas realizadas na UFV.

A- medidas automáticas de área e espessura. B- no cálculo de espessura, retas verticais (Rv) são traçadas e a média fornecida automati-camente. C- dados exportados.

Figura 4 - Medição automática de área e espessura (A-B) do ANATI QUANTI e planilha do Excel® gerada.

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FALCÃO, A. X. Fundamentos de processamento deimagem digital. Disponível em: . Acesso em: março de 2006.

Legenda: a (falta uma ferramenta manual para medições de áreae espessura), b (falta a inserção de novas escalas no ANATIQUANTI, o que permitirá utilizar o software com imagensprovenientes de outros microscópios), c (falta disponibilizarna internet, para que as versões mais atuais estejam sempredisponíveis e fáceis de acessar), d (falta um demo de utilização).

Figura 5 - Porcentagem de relevância das desvantagens doANATI QUANTI, em relação ao software proprietário,destacadas pelos voluntários da pesquisa.

Legenda: a (a exportação dos dados é direta, é nas planilhasgeradas, todas as medições já aparecem com o nome da figuraao lado, o que reduz a perda de tempo formatando as planilhasdo Excel®). b (as escalas já estão inseridas, não sendo necessáriocalibrar o software). c (o software é simples e específico parao que quero utilizar, com poucos botões e funções, o que facilitaa memorização e utilização das suas funções). d (a contagem decélulas é prática, havendo opções de botões diferenciados paraestômatos e células epidérmicas propriamente ditas; dessaforma, os dados são exportados separadamente para o Excel®,além de não haver necessidade de calcular densidade e índiceestomático). e (o software é gratuito, o que evita a pirataria desoftwares pagos e facilita o acesso). f (a abertura das imagens éfácil, basta selecionar a pasta que as imagens vão abrindo emordem seqüencial). g (o software é em português, auxiliando nacompreensão das suas funções). h (a imagem pode ser abertacom contraste invertido, o que reduz o tempo de trabalho naedição das imagens em outros softwares). i (funciona naplataforma Linux e Windows).

Figura 6 - Porcentagem de relevância das vantagens do ANATIQUANTI, em relação ao software proprietário, destaca-das pelos voluntários da pesquisa.

AGRADECIMENTOS

Os autores agradecem a todos os graduan-dos, pós-graduandos e docentes da Universida-de Federal de Viçosa que participaram da pes-quisa.

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ANATI QUANTI: S OFTWARE ANÁLISES QUANTITATIVAS ......o comprimento e diâmetro de tricomas secre-tores foram utilizados para diferenciar nectá-rios florais e extraflorais em Triumfetta