Refractometria

INSTRUMENTOS DE ANALISIS APLICADOS A LA EVALUACION DE CALIDAD DE ALIMENTOS

Berrio Ramos OsnaiderColon Mora DaniloGonzales Herrera Horemy

Analisis instrumentalESPECTROSCOPIA DE ABSORCION ATOMICA

Diagramas de niveles de energaPrincipio bsicoEl tomo consiste de un ncleo y de un nmero determinado de electrones que llenan ciertos niveles cunticos. La configuracin electrnica ms estable de un tomo corresponde a la de menor contenido energtico conocido como estado fundamental.

Si un tomo que se encuentra en un estado fundamental absorbe una determinada energa, ste experimenta una transicin hacia un estado particular de mayor energa. Como este estado es inestable, el tomo regresa a su configuracin inicial, emitiendo una radiacin de una determinada frecuencia.

4Principio bsicoLa frecuencia de la energa radiante emitida corresponde a la diferencia de energa entre el estado excitado (E1) y el estado fundamental (Eo) como se encuentra descrito en la ecuacin de Planck:

h=constante de Planck=frecuenciac=velocidad de luz=longitud de onda

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1) SISTEMA DE INTRODUCCION DE LA MUESTRA Y ATOMIZACION Se utilizan atomizadores con y sin llama para producir tomos libres del metal en el haz de la radiacin. Estn compuesto de un nebulizador y un quemador. Generalmente, la eleccin depender de la temperatura requerida para la disociacin de los compuestos y de las caractersticas qumicas del elemento a determinar. El Horno de grafito el vapor atmico se genera en un tubo de grafito calentado elctricamente, en cuyo interior se ubica la muestra

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COMPONENTES DE UN EQUIPO TIPICO DE AA

7CARACTERSTICAS DE DIFERENTES FUENTES DE FLAMASmezclaMxima velocidad de flama (cm/s)Mxima Temp. (C)Aire Gas natural551840Aire - Propano821925Aire Hidrogeno3202050Aire 50% oxy-acetileno1602300Oxigeno nitrogeno- acetileno6402815Oxido nitroso - Acetileno1802955Dioxido de nitrogeno - hidrogeno1502660Oxigeno - Cianogeno1404640Generalmente, la eleccin depender de la temperatura requerida para la disociacin de los compuestos y de las caractersticas qumicas del elemento a determinar.

9La precisin, exactitud y lmites de deteccin de los mtodos atmicos dependen deforma crtica de las etapas de atomizacin y del mtodo de introduccin de muestra.

2)LMPARA DE CTODO

Consiste en un nodo de tungsteno y un ctodo cilndrico, sellado en un tubo de gas lleno de nen o argn a una presin de 1 a 5 torr.La configuracin cilndrica del ctodo tiende a concentrar la radiacin en una regin limitada del tubo. Este diseo aumenta tambin la probabilidad de que vuelva a depositarse en el ctodo, en vez de en las paredes de vidrio.

123) MONOCROMADOR

134)TUBOS FOTO MULTIPLICADORES

145)DETECTOR DE MICRO CANAL

15ELEMENTOS DETECTABLES POR ABSORCIN ATMICA

16Se utilizan dos trminos para caracterizar a los mtodos de absorcin atmica. La sensibilidad: se define como la concentracin de un elemento en g/mL (o ppm) que produce una seal de transmitancia de 0.99 o la correspondiente absorbancia de 0.0044. lmite de deteccin: se define como la concentracin de elementos que produce una seal analtica igual al doble de la desviacin estndar de la seal de fondo. Se observan lmites de deteccin que van de aproximadamente 3 x 10-4 ppm a 20 ppm para los diferentes elementos metlicos, cuando se utiliza la absorcin atmica con atomizacin en llama. La atomizacin sin llama aumenta a menudo este lmite por un factor de 10 a 1 000.

PARA TENER EN CUENTA

VALIDACIN DE LA METODOLOGA DE CUANTIFICACIN DEL MAGNESIO POR ESPECTROSCOPIA DE ABSORCIN ATMICA DE LLAMA EN LA CANASTA BSICA DE COSTA RICA

Objetivo:Validar la metodologa analtica para la determinacin de magnesio en alimentos por espectroscopia de absorcin atmica de llama.Materiales y Mtodos:Los alimentos que se consumen cocidos, se cocieron a la manera usual de consumo del costarricense y se les determin la humedad. La digestin de las muestras se realiz en horno de microondas y se cuantific el contenido de magnesio por espectroscopa de absorcin atmica de llama. La validacin de la metodologa se realiz con disoluciones patrn de magnesio trazables a la NIST y con materiales de referencia certificados trazables.

Resultados:El mbito de linealidad ptimo que se obtuvo fue de (0,021-0,65) mg/L con un coeficiente de correlacin de 0,992. Los lmites de deteccin y cuantificacin reportados fueron de 0,021 mg/L y 0,037 mg/L, respectivamente. La sensibilidad de calibracin fue de 0,688 ALmg-1 y la sensibilidad analtica fue de 215 Lmg-1. La precisin se evalu en condiciones de repetibilidad, se obtuvo un valor para RDSr igual a 1,1 %. La veracidad se determin utilizando tres patrones certificados de la NIST, SRM 1846 Infant Formula con un valor reportado para magnesio de (53829) mg/kg, SRM 1846 Bovine Muscle Powder con un valor reportado para magnesio de (96095) mg/kg, y SRM 8415 Whole Egg Powder con un valor reportado para magnesio de (30527) mg/kg en masa, en los tres casos se obtuvieron sesgos de -0,0014 mg/L en promedio.Discusin:Se analizaron 46 alimentos seleccionados de la canasta bsica alimentaria del costarricense, frescos o cocinados a la manera habitual de consumo, sin adicionarles aditivos. Los alimentos con contenido de magnesio cuantificable fueron: leguminosas (garbanzos, lentejas, frijol negro y rojo), granos y cereales (arroz blanco y precosido), productos lcteos (leche entera en polvo, queso mozzarella, queso fresco), verduras y hortalizas (camote, ajos, pltano maduro), granos (frijoles, lentejas, garbanzos), carnes (tilapia, pechuga de pollo, lomo e hgado de re), frutas (banano criollo y de exportacin), productos industrializados (pan a base de harina de trigo y tortillas de maz).ESPECTROMETRIA DE MASAS

Elespectrmetro de masases un instrumento que permite analizar con gran precisin la composicin de diferentes elementos qumicos eistoposatmicos, separando los ncleos atmicos en funcin de su relacinmasa-carga(m/z)

Los espectros de masas se obtienen de la conversin de los componente de una muestra en iones gaseosos que se mueven rpidamente y se separan segn la relacin masa/carga

24Se obtiene dividiendo la masa atmica de un ion entre el numero de cargas que tiene el ion Ejemplo:

m/z=16.095/1=16.095

m/z = 17.035/2= 8.518

RELACIN MASA/CARGA

Sistema de entrada Fuente de iones Analizador de masasdetectorProcesador de seal Dispositivo de lectura muestraSistema al vacio Fuente de iones Ionizacin de la muestra generalmente en forma de catin Analizador de masasSeparacin de los iones de acuerdo a su relacin masa carga detectorDeteccin y cuantificacin de iones Sistema discreto de entrada( clsico simple)

Entrada por sonda directa

Sistema de entrada cromatogrficos

ENTRADAS PARA LAS DIFERENTES MUESTRAS El sistema clsico (y el ms simple) es el discreto, en el cual la muestra se volatiliza externamente y se introduce en la regin de ionizacin que esta a baja presin.SISTEMA DISCRETO DE ENTRADA CLSICO SIMPLE

FUENTE DE IONIZACIONLa fuente de iones es la encargada de la fragmentacin de las molculas de la muestra, lo cual es muy relevante en el proceso, ya que de ello depende la informacin que se observa en los espectros

Haz de electrones

Placas aceleradorasde iones

nodo

Ctodo incandescente

Placa de repulsin

Placa de enfoque

IONIZACION POR IMPACTO ELECTRONICO

IONIZACION POR IMPACTO ELECTRONICO

IONIZACION POR IMPACTO ELECTRONICO

ENFOQUE:Cuando los iones salen de la cmara de ionizacin y son acelerados hacia el analizador llevan una energa cintica similar pero una direccin divergente, lo que hace necesario orientarlos de una manera adecuada para ingresar el analizador. esto se consigue con la placa de enfoque la cual genera un campo electrosttico que atrae a los iones convergiendo de manera adecuada su direccin de entrada al anlisis de masas .

IONIZACION POR IMPACTO ELECTRONICO

en analizador de masas se hace la separacin de iones segn la relacin masa/carga existen varios tipos de analizadores segn se realice este proceso , en ellos encontramos

del sector magntico (de enfoque simple , de doble enfoque)

trampa de iones

cuadrupolo

de tiempo de vuelo

ANALIZADOR DE MASASANALIZADOR DEL SECTOR MAGNETICO

bajo el fundamento de la ley de lorentz , los iones pasan por un campo magntico uniforme generado por un electroimn, describen una deflexin en su trayectoria en funcin de su relacin masa carga , como por lo general los iones tienen como carga (z=1). la separacin se hace en funcin de su masa , los cuales describirn diferentes radios ANALIZADORES DE MASA DEL SECTOR MAGNETICO

41ANALIZADORES DEL SECTOR MAGNETICO

Si b y u se hacen constantes, m/z es directamente proporcional a rm :este mtodo permite detectar los iones empleando distintos colectores individuales para cada m/z m (z=1) o placas fotosensibles donde los impactos de los iones producirn manchas de distinta intensidad.ANALIZADODRES DEL SECTOR MAGNETICO

La copa de faraday es barata y simple mecnica y elctricamente; su principal desventaja es que se necesita un amplificador de alta impedancia, el cual limita la velocidad a la cual debe ser barrido el espectro.El detector de copa faraday es tambin menos sensible que los multiplicadores de electrones ya que no proporciona amplificacin interna.LA COPA FARADAYMULTIPLICADOR DE ELECTRONES

MULTIPLICADOR DE ELECTRONES

Como consecuencia del bombardeo electrnico en la cmara de ionizacin, las molculas se rompen en una serie de fragmentos, siempre que una misma molcula se rompa en las mismas condiciones nos dar el mismo tipo y nmero de fragmentos y constituyen lafragmentacin patrn.Gracias a esto se pueden determinar que es la muestra por comparacin y por otra parte, la intensidad relativa de los distintos picos, permite deducir la proporcin en que cada componente se encuentra en la muestra.OBTENCIN Y ANLISIS DE UN ESPECTROGRAMA DE MASAS.EMPLEO DE LA ESPECTROMETRA DE MASAS COMO HERRAMIENTA PARA LA DETERMINACIN DE TXICOS EN ALIMENTOS: HACIA LA SEGURIDAD ALIMENTARIAEn los alimentos se pueden encontrar un gran nmero de sustancias txicas, tales como plaguicidas, antibiticos y toxinas, presentando distintos orgenes (naturales o sintticos) y niveles de toxicidad para la salud humana. Este tipo de compuestos se encuentran generalmente a muy bajas concentraciones en matrices muy complejas, por lo que es necesario la utilizacin de metodologas lo ms fiables posibles. En este sentido, el empleo de las tcnicas cromatografas (de gases y de lquidos) acopladas a detectores de espectrometra de masas ha permitido la deteccin adecuada de este tipo de sustancias en los alimentos a concentraciones extremadamente bajas. Por ello, y en funcin de las caractersticas del contaminante, se debe elegir la tcnica cromatografa que posibilite una mejor separacin del contaminante de los interferentes presentes en la matriz, as como de los contaminantes entre s. Esta metodologa proporciona datos de gran valor que mejoran nuestro conocimiento de la Salud Pblica a travs de la Seguridad Alimentaria.

En funcin de la naturaleza del txico a determinar se aplica la combinacin de tcnicas ms adecuada. De esta manera, para el anlisis de compuestos de baja-media polaridad, la tcnica ms apropiada es la cromatografa de gases acoplada a espectrometra de masas (GC-MS). De hecho, en la dcada anterior, la GC-MS ha sido la tcnica ms ampliamente usada para la deteccin de la mayora de los contaminantes orgnicos, puesto que se trata de una tcnica reproducible entre distintos laboratorios47. Finalmente se puede indicar el reciente problema aparecido en el sector hortcola espaol con la presencia de isofenfos metil (plaguicida no registrado) en pimientos. El empleo de la espectrometra de masas ha permitido una rpida y correcta identificacin de dicho producto en vegetales, como se puede observar en lafigura 3, donde se muestra el pico cromatogrfico del isofenfos metil (separado mediante un cromatgrafo de gases) junto a los iones caractersticos de dicho compuesto al ser fragmentado y que ha permitido su rpida deteccin en pimientos contaminados por dicho plaguicida.

RefractometraFundamentos y aplicacin en industria

RefractometriaTcnica analtica que consiste en la medida del ndice de refraccin de un lquido con objeto de investigar su composicin si se trata de una disolucin o de su pureza si es un compuesto nico.

RefractometriaRefractmetrosAplicaciones En la industria Alimenticia. En general la instalacin de refractmetros en lnea proporciona anlisis rpidos y precisos en multitud de procesos industriales.Angulo LimiteAngulo CriticoDesplazamiento de ImagenInmersinEn estos aparatos se observa el campo del ocular dividido en una zona obscura y otra clara (Rayo Limite).En prisma simple va montado en un telescopio que contiene el compensador y el ocular.En estos aparatos se mide el desplazamiento del rayo refractado en relacin al rayo incidenteMiden el ndice de refraccin de lquidos en la interface con aire o corrientemente, un prisma de vidrio.RefractometriaUtilidad

Confirmar identidad de compuestos

Medir pureza (compuesto nico)

Medir concentraciones (solucin)

RefractometraReflexin= la luz rebota,mismo plano

Refraccin= De un planoa otro, cambio de velocidadde propagacin de onda

Cada medio posee un ndice de refraccin (IR), es igual a vel. Luz En el vaco sobre vel. Luz en el medio

Este depende de: Temperatura Presin, etc..

Se basa en:Refractometria

Cuando el segundo medio es ms denso que el primero, el el rayo se aproxima a la perpendicular trazada sobre la superficie divisoria en el punto de incidencia. La causa fundamental de este cambio en la direccin se debe al cambio en la velocidad de la luz que se hace ms lenta cuanto ms denso sea el medio por el que pasa el haz.

RefractometriaEl ndice de refraccin, n, es la razn entre las velocidades de la luz en ambos medios. La Ley de Snell representa a este ndice como la razn de los senos de los ngulos de; incidencia y refraccin

Angulo CrticoEl ngulo crtico es el ngulo formado por la perpendicular a la cual el haz cambia desde luz transmitida en el lquido a luz totalmente reflejada en la superficie del lquido. El ngulo crtico no depende slo de la composicin de la disolucin sino del material del prisma. El ndice de refraccin se puede calcular as: ic = arcsen(ng/nl)

ic : ngulo crtico en radianes en el vidrio.ng ndice de refraccin del vidrio.nl el ndice de refraccin del lquido. RefractometriaRefractmetros de ngulo LmiteEn estos aparatos se observa el campo del ocular dividido en una zona obscura y otra clara y esta separacin entre ambas se llama Rayo Limite.

Refractometria

Ningn rayo puede formar un ngulo superior al crtico.

La medida de este ngulo permite medir el ndice de refraccin de la muestra.

Refractmetro de InmersinEn un prisma simple va montado en un telescopio que contiene el compensador y el ocular. La superficie inferior del prisma se sumerge en un pequeo vaso que contiene a la muestra, con un espejo debajo para reflejar la luz hacia arriba a travs del lquido.

RefractometriaRefractmetros de Desplazamiento de ImagenEn estos aparatos se mide el desplazamiento del rayo refractado en relacin al rayo incidente.Se construye un prisma con la muestra y el ndice se calcula en base al desplazamiento angular de la luz al pasar por la muestra.Si la muestra es lquida se coloca en un recipiente en forma de prisma.Refractometria

Refractmetros DiferencialesSe emplean primariamente para el anlisis de mezclas lquidas. Se aplican a cualquier mezcla cuyo ndice de refraccin es una funcin simple de la composicin.

RefractometriaEstos instrumentos emplean una sola clula a travs de la cual la luz es transmitida.

RefractometriaEl rayo es difractado un ngulo cuyo valor depende de la diferencia del ndice de refraccin entre la muestra y una muestra estndar que constituye una parte de la clula. El ngulo de refraccin se mide con un dispositivo fotoelctrico.Refractmetros de ngulo crtico en lnea.Miden el ndice de refraccin de lquidos en la interface con aire o, ms corrientemente, un prisma de vidrio.

RefractometriaEn general la instalacin de refractmetros en lnea proporciona anlisis rpidos y precisos en multitud de procesos industriales.

RefractometriaExiste una amplia aplicacin para alimentos lquidos viscosos con cierto contenido en slidos.Aplicaciones de la Refractometra.

Refractmetro de AbbRequiere de 10-15 ml de muestra. En prisma simple va montado en un telescopio que contiene el compensador y el ocular. La superficie inferior del prisma se sumerge en un pequeo vaso que contiene a la muestra, con un espejo debajo para reflejar la luz hacia arriba a travs del lquido.

RefractometriaAnlisis

RefractometriaCromatografa HPLCFundamentos y aplicaciones

HPLCCromatografa HPLC

Elementos que participan en una cromatografa:1. Fase estacionaria2. Fase mvil3. Muestra Cmo interaccionan?En general, una cromatografa se realiza permitiendo que la mezcla de molculas que se desea separar (muestra) interaccione con un medio o matriz de soporte que se denomina fase estacionaria. Un segundo medio (la fase mvil) que es inmiscible con la fase estacionaria se hace fluir a travs de sta para "lavar" (eluir) a las molculas en la muestra.Cromatografa = escribir en colores

HPLCUtiliza bombas que permiten presiones de hasta 6000 psi (414 atm) hacen pasar la fase mvil por el interior de columnas de acero (2-5 mm x 3-25 cm) que contienen la fase estacionaria con flujos de 0,1 10 ml/min.

Las muestras no necesitan ser vaporizadas para su anlisis. Cualquier sustancia puede ser potencialmente analizada por esta tcnica.Una muestra en estado lquido es arrastrada por una corriente lquida llamada eluyente.

Como fase estacionaria acta un slido finamente dividido (dimetro de partcula 3, 5, 10 m), o unapelcula lquida a l adherida.

Dependiendo de la retencin de los componentes de la muestra por la fase estacionaria y de su solubilidad en el eluyente se provocar su migracin diferencial.

HPLCPreparacin de la muestraLa mayora de las muestras de alimentos que se analizan por mtodos instrumentales de separacin son demasiado complejas, estn demasiado diluidas o son incompatibles con el sistema cromatogrfico, lo que impide su introduccin directa

Mtodos:FILTRACINEXTRACCIN LQUIDO-LQUIDOCROMATOGRAFA DE CAPA FINAPRECIPITACIN SELECTIVACROMATOGRAFA DE PERMEACIN SOBRE GELESEXTRACCIN EN FASE SLIDACENTRIFUGACINPRECOLUMNASUTILIZACIN DE MEMBRANASREDUCIR LA CANTIDAD DE MUESTRA QUE SE INYECTA A LA COLUMNA

ELIMINAR LAS INTERFERENCIAS

CONCENTRAR LOS COMPONENTES DE INTERES; MEJORAR LA SENSIBILIDAD

PREPARAR LA MUESTRA EN EL DISOLVENTE MS ADECUADO PARA EL ANLISIS FINAL

ELIMINAR PARTCULAS EN SUSPENSINPROTEGER LA COLUMNA

MEJORAR LA SEPARACIN CROMATOGRFICA DE LOS PICOS

PROPORCIONAR RECUPERACIONES CUANTITATIVAS Y REPRODUCIBLES

MOTIVOHPLCPor su polaridad se clasifica en:

Fase Directa:fase estacionaria polarfase mvil de baja polaridad

Fase Reversa:fase estacionaria de polaridad bajafase mvil de polaridad altaPrincipales mecanismos de interaccin encromatografa lquida: Adsorcin superficial Particin Intercambio inico Exclusin molecularHPLCComponentes HPLCFase mvil Alta pureza (calidad HPLC). Inactividad frente a la fase estacionaria. Baja viscosidad. Compatibles con la muestra. Facilitar la recuperacin de la muestra. Compatibilidad con el sistema de deteccin. Disolventes previamente desgasificadosBombas Presin estable hasta 5000 psi (400 atm) 1 atm = 14,696 psi Flujo libre de pulsaciones Amplio rango de flujos (0,1 a10 mL/min) Control, exactitud y reproducibilidad del flujo Componentes qumicamenteinertes y resistentes a la corrosinInyectores Se emplean vlvulas inyectoras de volumen (loop) constante Pueden ser manuales o automticas Para variar el volumen de inyeccin se debe cambiar elloop correspondiente Se debe evitar la entrada de burbujas en el sistema deinyeccinPrecolumnas Se trata de una pequea columna (0,5 3 cm) colocadaentre el inyector y la columna Ayuda a prevenir la entrada de suciedad, procedente de lamuestra o del eluyente, en la columna analtica Va a permitir alargar la duracin de las columnas Debe ser del mismo relleno que el de la columna analticaHPLCComponentes HPLCRellenos de columnasFase Normal Slica Almina Amino (-NH2) Ciano (-CN) Diol (glicidoxi-etilmetoxisilano)Fase Reversa C-2 o RP-2 (-SiCH2CH3) C-8 o RP-8 (-Si-(CH2)7-CH3) C-18 o RP-18 (Si-(CH2)17-CH3)COLUMNAS

Ventajas de la High Speed HPLC con columnas cortas Tiempo de anlisis reducido Menor consumo de disolventes Menor dispersin de los solutos a analizar Ahorro de costes Mayor sensibilidadLong. columna vs. Resolucin de picosHPLCCromatograma

HPLC

HPLCExclusin molecularExclusin molecular Como fase estacionaria se emplea un material poroso inerte (gel) que permite la discriminacin entre los solutos segn su tamao. Los analitos de mayor tamao no pueden penetrar en los poros de la fase estacionaria y son excluidos, viajandocon la fase mvil en el frente de la misma. Se muestra especialmente til para determinar el rango molecular de polmeros, protenas, etc.La separacin se basa en el tamao molecular. Comofase estacionaria se emplean sustancias de tamaode poro determinado. Tambin se denominacromatografa de permeabilidad por gel (GPC).

HPLCIntercambio inicoTanto fase estacionaria como fase mvil son de naturaleza inica. La iones de la fase estacionaria son de carga opuesta a los del eluyente.

Se emplea para el anlisis de todo tipo de iones (inorgnicos y orgnicos). Las molculas intercambiadoras se ligan a soportes especficos. El material intercambiador de la fase estacionaria es de dimetro de partcula pequeo (1-10 m)

HPLCParticinLa separacin se basa en el reparto o distribucin de los solutos entre una fase mvil lquida y otra estacionaria inmiscible, soportada sobre un slido inerte. La discriminacin se produce por diferencias de solubilidad.Las especies ms retenidas sern las que presenten mayor afinidad (solubilidad) por la fase estacionaria que por la fase mvil (eluyente).

La separacin de los solutos se basa en las diferencias en esta solubilidad relativa.

Son ms comunes los mtodos cromatogrficos en fase reversa dada la naturaleza hidroflica delas muestras de mayor inters (clnico, contaminacin, alimentos).

Segn empleemos fase directa o fase reversa se nos va a alterar el orden de elucin de bandas y el tiempo de anlisis.HPLC

Soportes en directa y reversaHPLCAdsorcinLa fase estacionaria es slida. La separacin se logra por las diferencias en solubilidad (en fase mvil) y de retencin por adsorcin (en fase estacionaria) de la mezcla de solutos. Slica (90%) y almina (10%) son las fases estacionarias ms comunes. Tanto las molculas de solutos como de disolvente son atradas hacia los lugares activos polares de la faseestacionaria. Unos solutos sern ms atrados que otros por la fase estacionaria y as se lograr su migracin diferencial. Se usan mezclas de disolventes para conseguir el poder de elucin y la selectividad adecuadas. Normalmente un disolvente apolar (n-hexano) unido a otro ms activo(acetona, cloruro de metilo, etc.).HPLCDetectoresLos detectores ms utillizados en HPLC son:Detector UV. Hay bsicamente tres tipos:Detector de Longitud de Onda FijaDetector de Longitud de Onda VariableDetector de Arreglo de Diodos

Detector de Indice de Refraccin. Existen muchos diseos de estos detectores, pero solamente existen ahora dos tipos:Tipo DeflexinTipo FresnelDetector de Fluorescencia. Este detector solamente puede detectar compuestos que tengan fluorescencia nativa o inducida por derivatizacin .Detector de Fluorescencia Inducida por Laser. Segn la Fuente de Excitancin Segn el sistema pticoDetectores Electroqumicos. Pueden ser clasificados en tres tipos:Detector AmperomtricoDetector ConductimtricoDetector Potenciomtrico

El tipo de muestra o tipo de analisis condiciona el detector a escogerDetectores basados en una propiedad de la fase mvil. Ejemplo: Detector de Indice de Refraccin

Detectores basados en una propiedad de la sustancia a separar. Ejemplo: Detector de Fluorescencia, Detector UltravioletaHPLCInvestigacin U. de AlcalDeterminacin del pptido bioactivo Soymetide en productos comerciales de soja por HPLC Capilar

Se ha desarrollado un mtodo por HPLC Capilar para la determinacin de soymetide, pptido con actividad inmunoestimuladora procedente de la hidrlisis enzimtica con tripsina de la soja.

HPLCSe han establecido por primera vez las cantidades de soymetide presentes en los cultivos de soja, as como en sus productos comerciales (bebidas de soja y formulas infantiles).

Los resultados han permitido establecer que en dichos productos el soymetide se encuentra en cantidades suficientes para llevar a cabo su actividad bioactiva tras su ingesta.

Se ha evaluado el efecto del procesado del alimento en la cantidad de soymetide, revelando una menor relacin soymetide/protena en los productos procesados

HPLCESPECTROSCOPA INFRARROJAMODOS NORMALES DE VIBRACIONEL ANCHO DE LOS PICOSExisten don tipos de espectrmetros infrarrojos, los dispersivos y los de transformada de Fourier.Un espectro por transformada de Fourier consta de tres elementos bsicos: una fuente luminosa, un interfermetro y un detector.

FUNCIONAMIENTOVENTAJAS DEL ESPECTROMETRO DE TRANSFORMADA DE FOURIERESPECRTROSCOPIA INFRARROJA Y SU USO EN EL ANALISIS DE ALIMENTOSUN MTODO RPIDO PARA LA DETERMINACIN DE LA ESTABILIDAD OXIDATIVA DE GRASAS Y ACEITES MEDIANTE ESPECTROSCOPA INFRARROJA CON TRANSFORMADA DE FOURIER. COMPARACIN CON MTODOS CLSICOS.

M. D. Guilln, N. CaboUniversidad del Pas VascoTecnologa de alimentos. Facultad de Farmacia. Paseo de la Universidad, 7. 01006-Vitoria. Telfono: 945-013081. Correo electrnico: knpgulod@vc.ehu.esIntroduccinLa degradacin oxidativa de los lpidos constituye una de las principales y ms frecuentes causas de deterioro de los alimentos debido a que la mayora de ellos estn constituidos por lpidos en diferentes proporciones. Unido al deterioro de las condiciones organolpticas, la oxidacin lipdica puede provocar la reduccin del valor nutricional y la generacin de compuestos nocivos para la salud. Los perxidos lipdicos, los radicales libres, el malonaldehdo y algunos productos de la oxidacin del colesterol son ejemplos especficos de compuestos considerados perjudiciales para la salud y que se generan en la oxidacin. En este sentido algunos autores han relacionado el consumo de productos generados en la oxidacin lipdica con el desarrollo de enfermedades cardiovasculares. Para el control del estado oxidativo de los alimentos y materias primas empleadas en su elaboracin, tradicionalmente, se emplean mtodos clsicos como el ndice de Perxidos o el Valor de Anisidina, basados en la determinacin de compuestos generados en diferentes etapas de la oxidacin. La utilizacin de dichos mtodos presenta los inconvenientes propios de mtodos empricos. En esta comunicacin se informa de un mtodo alternativo para la determinacin rpida y sencilla del grado de oxidacin y estabilidad oxidativa de aceites y grasas mediante espectroscopa infrarroja con transformada de Fourier.ExperimentalSe llev a cabo el seguimiento de la oxidacin inducida en estufa a 70C y aireacin de diferentes aceites vegetales comestibles mediante la adquisicin peridica de los espectros infrarrojos en un espectrofotmetro infrarrojo con transformada de Fourier Bruker Vector 33 siguiendo la metodologa descrita previamente [2, 3]. Paralelamente se determin por duplicado el Indice de Perxidos y el Valor de Anisidina de las muestras siguiendo mtodos estandarizados.

Resultados y Conclusiones Se comprob que los datos del Indice de Perxidos y del Valor de Anisidina de los distintos aceites a lo largo de su proceso de oxidacin estn estrechamente correlacionados con los valores de las frecuencias de determinadas bandas del espectro infrarrojo; es decir, los valores de las frecuencias de ciertas bandas del espectro infrarrojo proporcionan una informacin comparable a la obtenida por los mtodos clsicos, pero con importantes ventajas frente a aquellos, como son la sencillez de la tcnica, ahorro en reactivos y reduccin considerable del tiempo de anlisis.

Referencias[1] P. B. Addis (1986). Food Chem. Toxic., 24:1021-1030.[2] M. D. Guilln, N. Cabo (1999). J. Agric. Food Chem., 47:709-719.[3] M. D. Guilln, N. Cabo (2000). J. Sci. Food Agric., 80:1-9.

AgradecimientosSe agradece a la Direccin General de Investigacin del Ministerio de Ciencia y Tecnologa (Proyecto AGL 2000-1696) y a la Universidad del Pas Vasco (Proyecto UPV 101.123-EB087/99) la financiacin concedida.ESPECTROSCOPIA DE FLUORESCENCIA

INSTRUMENTACIONLos componentes de los instrumentos para medidas de fluorescencia atmica presentan generalmente una disposicin similar a la indicada a continuacin:

el receptculo de la muestra es normalmente una llama, pero tambin puede ser un horno electro trmico o una descarga luminiscente entre otros.VENTAJAS DEL SISTEMA NO DISPERSIVO