Aluno: Leandro Ucela Alves Orientador: Profa. Dra. Adriana Madeira Alvares da Silva

AVALIAÇÃO DA EXPRESSÃO DO RECEPTOR DE LEPTINA COMO CANDIDATO A MARCADOR

DE AGRESSIVIDADE TUMORAL EM PACIENTES COM CARCINOMA EPIDEMÓIDE

DE BOCA E OROFARINGE

Aluno: Leandro Ucela AlvesOrientador: Profa. Dra. Adriana Madeira Alvares da SilvaCo-orientador: Profa. Ms. Ana Maria da Cunha Mercante

2009

INTRODUÇÃO

CARCINOMA EPIDERMÓIDE DE BOCA E OROFARINGE

• Representa 90% dos tumores das vias aerodigestivas superiores.

• Considerado o 6º tipo de câncer mais frequente no mundo.

• Com média anual de 540.000 casos e 271.000 mortes.

• Forte relação com o etilismo e tabagismo.

• Atualmente foi descrito relação com o vírus HPV.

INTRODUÇÃO

LEPTINA (Lep) E RECEPTOR DE LEPTINA (Lepr)

• A Leptina (Lep) é produzida predominantemente pelo tecido adiposo branco.

• Sempre atua através de seu receptor (Lepr)

• A ligação entre a proteína e seu receptor no hipotálamo, sinaliza as condições de reserva de gordura corporal.

• Por mecanismos de feedback, essa ligação controla a ingestão de alimentos e o peso corporal, estimulando a saciedade

INTRODUÇÃO

LEPTINA (Lep) E RECEPTOR DE LEPTINA (Lepr)

Estão associados também aos processos de:• Crescimento e mitogênese• Angiogênese• Resposta imunológica e inflamatória• Reprodução• Formação dos tornos musculares• Hematopoiese• Formação dos ossos• Cicatrização

INTRODUÇÃOVIAS DE SINALIZAÇÃO DA LEPTINA

INTRODUÇÃO

LEPTINA E TECIDOS NORMAIS E NEOPLÁSICOS

• Atua no crescimento, ploriferação e migração das células endoteliais.

• Estimula genes responsáveis pela promoção da angeogênese, aumentando a vascularização endotelial.

• Associada a diversas neoplasias como o câncer de mama, colo, fígado e próstota.

OBJETIVOS• Avaliar a expressão do gene LEPR através da técnica de

imunohistoquímica em carcinoma epidermóide de boca e orofaringe.

• Relacionar a expressão do gene LEPR com a agressividade tumoral medida pelo TNM e histologia.

• Relacionar a expressão do gene LEPR com a sobrevida global e livre de doença nos pacientes com carcinoma epidermóide de boca e orofaringe.

LOCAL DE ESTUDO E PACIENTES

• O trabalho foi desenvolvido no Laboratório de Biologia Molecular em parceria com o Serviço de Patologia, ambos do Hospital Heliópolis.

• Foram estudados 85 pacientes com carcinoma epidermóide de boca e orofaringe, sem tratamento prévio, tratados no Serviço de Cirurgia de Cabeça e Pescoço do Hospital Heliópolis.

EPIDEMIOLOGIA

Dados epidemiológicos Casosn %

GêneroMasculino 73 85,9%Feminino 12 14,1%Faixa etária (anos)≤ 55 anos 46 54,1%> 55 anos 39 45,9%TabagismoNão 4 4,7%Sim 81 95,3%EtilismoNão 10 11,8%Sim 75 88,2%

Total 85 100Dados Epidemiológico dos 85 pacientes diagnosticados com carcinoma epidemóide de boca e orofaringe

MATERIAIS E MÉTODOS

HISTOLOGIA

• Pelo método de coloração de hematoxilina-eosina (HE) as lâminas foram analisadas, avaliando suas características histológicas como:• Grau de diferenciação• Desmoplasia• Intensidade de inflamação• Invasão vascular linfática• Invasão vascular sanguínea• Invasão perineural• Necrose

Foto de lâmina em H&E no aumento de 100 x demonstrando um carcinoma bem diferenciado segundo a sua atipia nuclear e queratinização celular.

Foto de lâmina em H&E no aumento de 400 x demonstrando uma desmoplasia leve.

Foto de lâmina em H&E no aumento de 100 x mostrando um infiltrado inflamatório moderado.

Foto de lâmina em H&E no aumento de 100 x mostrando uma invasão vascular linfática

do carcinoma epidermóide.

Foto de lâmina em H&E no aumento de 100 x mostrando uma invasão vascular sanguínea do carcinoma epidermóide.

Foto de lâmina em H&E no aumento de 400 x mostrando uma invasão perineural

MATERIAIS E MÉTODOS

IMUNOHISTOQUÍMICA

• Pelo método de imunohistoquímica (anticorpo anti-Obr) os materiais foram avaliadas segundo a intensidade da marcação, classificadas segundo:• Intensidade de marcação.• Frequência de células tumorais.

• A lâmina com os materiais dos pacientes foi confeccionada pela técnica de tissue microarray

Foto da lâmina da reação do Lepr, contra-corada com hematoxilina no aumento de 100 x, mostrando uma marcação de leve intensidade (marrom).

Foto da lâmina de reação do Lepr, contra-corada com hematoxilina no aumento de 100x, mostrando uma marcação de forte intensidade (marrom).

RESULTADOS

Marcação n %Negativo 31 36,47%Positivo 54 63,53%

fraco 20 37,04%forte 34 62,96%

Expressão do anticorpo anti-Lepr (n=85)

RESULTADOSExpressão da Lep-R

Características clínico-patológicasNegativo Positivo p value

n % n %Tamanho do tumor (pT)

0,84pT1 1 3,20% 4 7,40%pT2 11 35,50% 17 31,50%pT3 7 22,60% 14 25,90%pT4 12 38,70% 19 35,20%

pT1+2 12 38,70% 21 38,90%0,586

pT3+4 19 61,30% 33 61,10%Linfonodo acometido

0,156Ausente 9 29,00% 23 42,60%Presente 22 71,00% 31 57,40%

Invasão extracapsular

0,143Ausente 14 45,20% 25 46,30%Presente 8 25,80% 6 11,10%Não avaliável 9 29,00% 23 42,60%

Grau de diferenciação

0,825Bem diferenciado 12 38,70% 25 46,30%Moderadamente 15 48,40% 25 46,30%Pouco diferenciado 3 9,70% 4 7,40%

Não avaliável 1 3,20% 0 0,00%Embolização linfática

0,373Ausente 11 35,50% 16 29,60%Presente 20 64,50% 38 70,40%Não avaliável 0 0,00% 0 0,00%

Categorização do Lep-R: positivo x negativo


Características clínico-patológicasNegativo Positivo p value

n % n %Invasão perineural


Não avaliável 1 3,20% 0 0,00%Infiltrado inflamatório peritumoral

0,37Escasso 11 35,50% 23 42,60%

Moderado 16 51,60% 21 38,90%Intenso 3 9,70% 10 18,50%

Não avaliável 1 3,20% 0 0,00%Necrose


Não avaliável 1 3,20% 0 0,00%

Desmoplasia

0,999Leve 14 45,20% 25 46,30%Moderada 10 32,30% 18 33,30%Intensa 6 19,40% 11 20,40%


Categorização do Lep-R: positivo x negativo


Características clínico-patológicasForte Fraco p value

n % n %Tamanho do tumor (pT)

0,58pT1 2 5,90% 2 5,90%pT2 12 35,30% 5 35,30%

pT3 7 20,60% 7 20,60%pT4 13 38,20% 6 38,20%

pT1+2 14 41,20% 7 35,00%0,438

pT3+4 20 58,80% 13 65,00%Linfonodo acometido


Invasão extracapsular

0,176Ausente 13 72,20% 12 92,30%

Presente 5 27,80% 1 7,70%

Não avaliável 0 0,00% 0 0,00%Grau de diferenciação

0,43Bem diferenciado 14 41,20% 11 55,00%Moderadamente 18 52,90% 7 35,00%

Pouco diferenciado 2 5,90% 2 10,00%

Não avaliável 0 0,00% 0 0,00%Embolização linfática



Categorização do Lep-R: forte x fraco


Características clínico-patológicasForte Fraco p value

n % n %Invasão perineural


Não avaliável 0 0,00% 0 0,00%Infiltrado inflamatório peritumoral

0,902Escasso 14 41,20% 9 45,00%

Moderado 14 41,20% 7 35,00%Intenso 6 17,60% 4 20,00%

Não avaliável 0 0,00% 0 0,00%Necrose



Desmoplasia

0,584Leve 14 41,20% 11 55,00%Moderada 12 35,30% 6 30,00%Intensa 8 23,50% 3 15,00%


Categorização do Lep-R: forte x fraco

Análise da sobrevida global para os pacientes com expressão positiva (verde) e negativa (vermelho) do gene LEP-R, considerando um período de 48 meses (Wilcoxon p = 0,787).

RESULTADOS

Análise da sobrevida global para os pacientes com expressão positiva fraca (verde) e forte (vermelho) do gene LEP-R, considerando um período de 48 meses (Wilcoxon p = 0,406).

RESULTADOS

Análise da sobrevida livre de doença para os pacientes com expressão positiva (verde) e negativa (vermelho) do gene LEP-R, considerando um período de 48 meses (Wilcoxon p = 0,617).

RESULTADOS

Análise da sobrevida livre de doença para os pacientes com expressão positiva forte (verde) e fraca (vermelho) do gene LEP-R, considerando um período de 48 meses (Wilcoxon p = 0,871).

RESULTADOS

CONSIDERAÇÕES FINAIS• Não foi detectado associação entre a expressão do receptor de

Leptina e o carcinoma epidermóide de boca e orofaringe.

• Também não se encontrou associação entre a presença do receptor nas sélulas neoplásicas com a sobrevida global e livre de doença dos pacientes

• Novos resultados podem ser obtidos se estudos posteriores analisar as margem tumoral.

• O número de casos também pode influenciar esses resultados.

AGRADECIMENTOS

Documents

Aluno: Leandro Ucela Alves Orientador: Profa. Dra. Adriana Madeira Alvares da Silva