O Allopurinol
HN
N
NHN
C4H4N4O 136.114H-Pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-4-one,
1,5-dihydro-1,5-Dyhidro-4-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-4-one.1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-4-ol
[315-30-0]>> Allopurinol mengandung tidak kurang dari 98.0
persen dan tidak lebih dari 102.0 persen C5H4N4O, dihitung
berdasarkan kering. Kemasan dan penyimpanan-Pertahankan dalam wadah
tertutup baik. Simpan pada suhu kamar. USP Reference standar -USP
Allopurinol RS. USP Allopurinol terkait Senyawa A RS. USP
Allopurinol terkait senyawa B RS. USP Allopurinol Compound Terkait
C RS. USP Allopurinol Compound Terkait D RS. USP Allopurinol
terkait Compound E RS. USP Allopurinol Compound Terkait F RS.
Identifikasi, Penyerapan Inframerah Rugi pengeringan -Dry dalam
vakum pada 1050 selama 5 jam: itu kehilangan tidak lebih dari 0,5%
dari berat. Ubah membaca: Terkait compounds- [CATATAN-Store dan
menyuntikkan solusi standar dan solusi Test pada 80, menggunakan
autosampler didinginkan.]Solusi-Larutkan 1,25 g kalium fosfat
monobasa 1000 ml air, filter, dan degas. Solusi B-Gunakan mentol.
Ponsel fase-Gunakan campuran variabel Solusi dan Solusi B seperti
yang diarahkan untuk sistem kromatografi. Melakukan penyesuaian
jika diperlukan (lihat Sistem Kesesuaian bawah Kromatografi ).
Dilluent-Siapkan campuran Solusi dan Solusi-secara tepat berat
sekitar 5 mg Senyawa USP Allopurinol terkait F RS labu cocok.
Tambahkan 2.0 mL 0,1 N natrium hydroxie, segera sonicate dengan
berputar-putar selama 1 sampai 3 menit untuk membubarkan, tambahkan
80 ml Pengencer, dan sonicate untuk tambahan 5 minutes.USP32 Solusi
akurat saham Standard berat sekitar 5 mg setiap USP Allopurinol RS,
USP Allopurinol Retated Senyawa A RS, USP Allopurinol terkait
Senyawa B RS, USP Allopurinol Compound Terkait C RS, USP
Allopurinol terkait Compound D RS, dan USP 32 USP Allopurinol
Compound terkait E RS, USP 32 dan transfer ke dalam labu ukur 100
mL. Tambahkan 2.0 mL 0,1 N natrium hidroksida, segera sonicate
dengan berputar-putar selama tidak lebih dari 1 menit untuk
membubarkan, menambahkan seluruh volume Compound Allopurine Terkait
solusi F ke tabung, bilas labu yang Allopurinol senyawa yang
berhubungan dengan f solusi disiapkan dengan amounth kecil
Dilluent, dan menambahkan ringsings ke solution.USP32 sonicate
untuk tambahan 5 menit. Diluete dengan Pengencer untuk volume.
[Catatan-ini solusi stabil selama 45 jam bila disimpan pada
80.]Solusi-kuantitatif encer standar yang akurat mengukur volume
larutan stok standar dengan Pengencer untuk mendapatkan solusi
memiliki konsentrasi diketahui sekitar 0,5 ug allopurinol dan
sekitar 0,5 mg setiap senyawa allopurinol terkait A, B, C, D, E,
dan F per mL. Uji solusi-Transfer sekitar 25 mg allopurinol, akurat
ditimbang, ke labu ukur 100 mL, tambahkan 5.0 mL 0,1 N natrium
hidroksida untuk membubarkan, segera sonicstate dengan
berputar-putar selama tidak lebih dari 1 menit, tambahkan 80 ml
Pengencer, dan sonicate untuk tambahan 5 menit. Diencerkan dengan
pengencer untuk volume. Sistem Chromatography (lihat kromatografi )
- The kromatografi cair dilengkapi dengan detektor 220 nm dan 4,6
mm x 25 cm-kolom yang berisi 5-um kemasan L 1 Suhu kolom dijaga
pada 300 Laju aliran adalah sekitar 1,0 mL per menit. Chromatograph
diprogram sebagai pengikut.Timw (minutes)Solution A (%)Solution
BElution
0 3090 7010 30Linear gradient
30 357030Isocratic
35 3670 9030 10Linear gradient
36 469010Re-equilibration
Kromatografi larutan standar, mengidentifikasi puncak (lihat
tabel 1), dan merekam respon puncak seperti yang diarahkan untuk
prosedur, resolusi, R, antara senyawa allopurinol terkait C dan B
tidak kurang dari 0,8; dan faktor tailing untuk puncak allopurinol
tidak lebih dari 1,5. Prosedur-Secara terpisah menyuntikkan volume
yang sama (sekitar 40 uL) dari larutan standar dan solusi dalam
kromatografi, catat kromatogram, dan mengidentifikasi puncak
allopurinol dan puncak karena kotoran yang tercantum dalam tabel
1.
tabel 1Table 1NameRelative retention timeLimit (%)
Allopurinol related compound A10.620.2
Allopurinol related compound C20.790.2
Allopurinol related compound B30.810.2
Allopurinol1.0-
Allopurinol related compound D44.40.2
13-Amino-1H-pyrazole-4-carboxamide.25-(4H-1,2,4-Triazol-4-yl)-1H-pyrazole-4-carboxamide.35-(Formylamino)-1H-pyrazole-4-carboxamide.4Ethyl-5-amino-1H-pyrazole-4carboxylate.5Ethyl-5-(formylamino)-1H-pyrazole-4-carboxylate.6Ethyl-(E/Z)-3-(2-carbethoxy-2-cyanoethenyl)amino-1H-pyrazole-4-carboxylate.
Table 1(continued)NameRelative retention timeLimit (%)
Allopurinol related compound E54.80.2
Allopurinol related compound F66.50.2
13-Amino-1H-pyrazole-4-carboxamide.25-(4H-1,2,4-Triazol-4-yl)-1H-pyrazole-4-carboxamide.35-(Formylamino)-1H-pyrazole-4-carboxamide.4Ethyl-5-amino-1H-pyrazole-4carboxylate.5Ethyl-5-(formylamino)-1H-pyrazole-4-carboxylate.6Ethyl-(E/Z)-3-(2-carbethoxy-2-cyanoethenyl)amino-1H-pyrazole-4-carboxylate.
Hitung persentase masing-masing pengotor dalam porsi Allopurinol
diambil dengan rumus: 10 (C / W) (ri / rs) Di mana C adalah
konsentrasi, di ug per mL, masing-masing individu pengotor dalam
larutan standar; W adalah berat, di mg, dari Allopurinol diambil
untuk mempersiapkan larutan uji; dan ri Dan rs tersebut merupakan
respon puncak untuk setiap pengotor individu diperoleh dari larutan
uji dan larutan standar, masing-masing. [Catatan-untuk kotoran yang
tidak ditentukan, rs adalah respon puncak untuk puncak allopurinol
diperoleh dari larutan standar]. Selain tidak melebihi batas untuk
setiap pengotor dalam tabel 1, tidak lebih dari 0,1% dari setiap
pengotor yang tidak ditentukan individu ditemukan; dan tidak lebih
dari 1,0% dari total kotoran ditemukan. Tambahkan berikut: Batas
hydrazine- [CATATAN-bawah kondisi berikut, setiap hidrazin hadir
dalam sampel akan bereaksi dengan benzaldehida membentuk
benzalazine]. Natrium hidroksida 2N solusi-Larutkan 8,5 g natrium
hidroksida dalam air, dan encerkan dengan pelarut yang sama sampai
100 mL. Atau, larutan natrium hidroksida 2N tersedia secara
komersial dan metanol (1: 1). Pengencer-Siapkan campuran larutan
natrium hidroksida 2N dan metanol (1: 1) Benzaldehida
solusi-siapkan larutan di Pengencer yang mengandung 40 mg per mL
benzaldehida. Siapkan segera sebelum digunakan.Hidrazin solusi
transfer 10,0 mg hidrazin sulfat ke labu ukur 50 mL, larut dalam
Pengencer dengan sonikasi selama sekitar 2 menit, dan encerkan
dengan Pengencer untuk volume. Encerkan solusi ini secara
kuantitatif, dan bertahap jika perlu, dengan Pengencer untuk
mendapatkan solusi yang memiliki konsentrasi yang diketahui dari
sekitar 2,0 mg hidrazin sulfat per mL. Standar solusi transfer 5.0
mL larutan Hydrazine ke flash yang cocok, tambahkan 4 mL
benzaldehida solusi, mencampur dan memungkinkan untuk berdiri
selama 2,5 jam pada suhu kamar. Tambahkan 5.0 mL heksana, dan kocok
selama 1 menit, memungkinkan lapisan untuk memisahkan, dan
menggunakan bagian atas (heksana) lapisan. Uji solusi transfer
sekitar 250.0 mg allopurinol, akurat ditimbang, untuk labu sebagai
cocok, dan larut dalam 5.0 ml pengencer. Tambahkan 4 mL
benzaldehida, Solusi, campuran, dan memungkinkan untuk berdiri
selama 2,5 jam pada suhu kamar. Tambahkan 5.0 mL heksana, dan kocok
selama 1 menit. Biarkan lapisan untuk memisahkan, dan menggunakan
bagian atas (heksana) lapisan. Kosong solusi-mix 5.0 mL Pengencer
dan 4 mL larutan benzaldehida, dan memungkinkan untuk berdiri
selama 2,5 jam pada suhu kamar. Tambahkan 5.0 mL heksana, dan kocok
selama 1 menit. Biarkan lapisan untuk memisahkan, dan menggunakan
bagian atas (heksana) lapisan. Ponsel fase-mempersiapkan campuran
hexsane dan isopropil Alkohol (95: 5)Sistem kromatografi (lihat
kromatografi (621)) - kromatografi cair dilengkapi dengan detektor
310 nm dan 4.0 mm kolom x 25 cm yang berisi 5-um kemasan L10. Suhu
kolom dijaga pada 30 , dan laju aliran abaout 1,5 mL per menit.
Kromatografi solusi Standard, mengidentifikasi komponen berdasarkan
waktu retensi relatif mereka (1.0 untuk benzaldehida dan sekitar
0.8 banzalazine), dan merekam respon puncak seperti yang diarahkan
untuk prosedur; resolusi, R, antara benzaldehida dan benzalazline
tidak kurang dari 2.0 dan standar deviasi relatif untuk injektions
mereplikasi tidak lebih besar dari 15,0% untuk puncak benzalazine.
Prosedur-terpisah menyuntikkan volume yang sama (sekitar 20L) dari
solusi Kosong, solusi standar, dan larutan uji ke dalam
kromatografi sebuah, catatan kromatografi untuk setidaknya dua kali
waktu retensi dari puncak benzaldehida, mengidentifikasi komponen,
dan mengukur tanggapan puncak karena benzalazine. Hitung jumlah,
dalam ppm, hidrazin dalam porsi allopurinol diambil dengan rumus:
1000 (32,5 / 130,12) (Cs / Cr) (ru / rs) di mana 32,05 dan 130,12
adalah molecularweights hidrazin dan hidrazin sulfat,
masing-masing; 1000 adalah coefficicn konversi dari ug per mL untuk
ppm; Cs adalah konsentrasi, di ug per mL, hidrazin sulfat dalam
larutan hidrazin; Cr adalah konsentrasi, dalam mg per mL,
allopurinol dalam Solusi Allopurinol; dan ru dan rs tersebut
merupakan respon puncak untuk puncak benzalazine diperoleh dari
larutan uji dan larutan standar, masing-masing: tidak lebih dari 10
ppm hidrazin adalah found.USP 32ASSAY- [Catatan-Store dan
menyuntikkan larutan kesesuaian, persiapan standar, dan persiapan
uji pada 80, menggunakan auto sampler didinginkan.] ponsel
fase-Larutkan 1,25 g kalium fosfat monobasa di 1000mL air, filter,
dan degas. Syistem kesesuaian solusi transfer accurelity ditimbang
kuantitas USP Allopurinol RS, USP Allopurinol terkait Senyawa B RS,
dan USP Allopurinol Compound Terkait C RS, masing-masing ke labu
ukur yang sesuai, larut dalam volume kecil 0,1 N natrium
hidroksida, dan segera dan kuantitatif encerkan dengan fase gerak
untuk mendapatkan solusi memiliki konsentrasi yang diketahui
sekitar 0,05 mg per ml. Mentransfer 1,0 mL dari masing-masing tiga
solusi ini ke labu ukur 100 mL, encerkan dengan fase gerak untuk
volume dan campuran. Standard persiapan-larut dan accuralitely
ditimbang kuantitas USP Allopurinol RS dalam volume kecil dari 0,1
N natrium hyidroxide, dan segera dan kuantitatif encerkan dengan
fase gerak untuk mendapatkan solusi yang memiliki dikenal
concentrationof sekitar 0,5 mg per mL. Secara kuantitatif encer dan
diukur secara akurat volume larutan ini dengan fase gerak untuk
mendapatkan solusi memiliki konsentrasi diketahui sekitar 0,08 mg
allopurinol per Ml. Assay persiapan-Transfer sekitar 50 mg
allopurinol, akurat ditimbang, ke labu ukur 100 mL, larut dalam 5.0
ml 0,1 N sodiun hidroksida, segera encerkan dengan fase gerak untuk
volume, dan campuran. Secara kuantitatif encer volume akurat diukur
dari solusi ini dengan fase gerak untuk mendapatkan solusi memiliki
konsentrasi diketahui sekitar 0,08 mg per mL allopurinol.Sistem
Chromatography (lihat kromatografi [621]) - kromatograf cair
dilengkapi dengan detektor 230 nm dan 4,6 mm kolom x 25 cm yang
berisi kemasan L1. Laju aliran adalah sekitar 1,8 mL per menit.
Kromatografi solusi kesesuaian sistem, dan merekam respon puncak
seperti yang diarahkan untuk prosedur: resolusi, R, Antara
allopurinol senyawa yang berhubungan dengan B dan allopurinol nol
coumpound terkait C tidak kurang dari 1,1, dan bahwa antara
allopurinol senyawa yang berhubungan dengan C dan allopurinol tidak
kurang dari 6.0. [Catatan-untuk tujuan identifikasi, waktu retensi
relatif sekitar 0,7 untuk allopurinol senyawa yang berhubungan
dengan B, 0.8 allopurinol senyawa yang berhubungan dengan C, dan
1.0 untuk allopurinol.] Kromatografi persiapan Standar, dan merekam
respon puncak seperti yang diarahkan untuk prosedur: standar
deviasi relatif untuk injeksi pengulangan tidak lebih dari 2,0%
Prosedur-Secara terpisah menyuntikkan volume yang sama (sekitar 20
uL) dari persiapan standar dan persiapan Assay ke kromatografi,
catat kromatogram, dan mengukur respon untuk puncak utama. Hitung
persentase C5H4N4O dalam porsi Allopurinol diambil dengan rumus:
100 (Cs / Cu) (ru / rs) Di mana Cu dan Cs adalah konsentrasi, dalam
mg per mL, allopurinol dalam penyusunan Assay dan persiapan Standar
masing-masing; dan ru dan rs adalah respon puncak yang diperoleh
dari persiapan Assay dan persiapan standar, masing-masing.
