Aeromonas, Vibrio y

PlesiomonasDr Carlos A. Vay

- Profesor Regular Adjunto. Dpto. de Bioquímica Clínica. Area Bacteriología.

- Facultad de Farmacia y Bioquímica. UBA.

- Jefe Asistencial. Laboratorio Bacteriología. Hospital de Clínicas. UBA.

- Director Carrera de Especialización en Bacteriología Clínica. UBA.

- Jefe Laboratorio de Microbiología. Sanatorio Mater Dei.

Bacilos gram-negativos aerobios (BGN)Bacilos gram-negativos aerobios (BGN)

Sin cambio (Alcalino / Neutro)

BGNNF

Sin cambio (Alcalino / Neutro)

BGNNF

Fermentación de glucosa (TSI)Fermentación de glucosa (TSI)

Acido / Acido ó Alcalino / Acido

- Enterobacteriaceae- Vibrionaceae / Aeromonadaceae- Pasteurellaceae

Requerimientos nutricionales complejos (exigentes)

Acido / Acido ó Alcalino / Acido

- Enterobacteriaceae- Vibrionaceae / Aeromonadaceae- Pasteurellaceae

Requerimientos nutricionales complejos (exigentes)

+Pasteurellaceae

(inmóviles)

+Pasteurellaceae

(inmóviles)

-

Oxidasa

-

Oxidasa

+Vibrionaceae / Aeromonadaceae/Plesiomonas

(móviles)

+Vibrionaceae / Aeromonadaceae/Plesiomonas

(móviles)

-Enterobacteriaceae*

-Enterobacteriaceae*

Bacilos gram-negativos no fermentadoresBacilos gram-negativos no fermentadores

Bacilos gram-negativos

TSI

Bacilos gram-negativos

TSI

Pico alcalino / fondo neutro

Bacilo Gram Negativo

No Fermentador

Pico alcalino / fondo neutro

Bacilo Gram Negativo

No Fermentador

Fondo ácido

- Enterobacteriaceae- Aeromonadaceae- Vibrionaceae- Otros bacilos gram negativos fermentadores

Fondo ácido

- Enterobacteriaceae- Aeromonadaceae- Vibrionaceae- Otros bacilos gram negativos fermentadores

Enterobacteriaceae

75%

Otros1%

Haemophilus9%

BNFG15%

Distribución de bacilos gram negativosDistribución de bacilos gram negativos

aerobios en materiales clínicosaerobios en materiales clínicos

Vibrio, Aeromonas, Plesiomonas

• Bacilos gram-negativos pleomórficos

• Fermentadores de Glucosa

• Móviles

• Oxidasa Positiva ( sólo una excepción)

• Flagelación polar

• No crecen en EMB de Levine

• A menudo Beta-hemolícos ( No Plesiomonas)

Vibrionaceae-AeromonadaceaeVibrionaceae-AeromonadaceaeDiferenciación con otros Bacilos gam-negativos Diferenciación con otros Bacilos gam-negativos

Fermentadores.Fermentadores.

Vibrio-AeromonasVibrio-Aeromonas EnterobacteriaceaeEnterobacteriaceae

OxidasaOxidasa +*+* -*-*

FlagelosFlagelos PolarPolar PerítricosPerítricos

EMB LevineEMB Levine -- ++

TaxonomíaManual de Bergey, 2006

• Aeromonadaceae: Aeromonas ( 1986, Colwell et al, IJSB )

• Vibrionaceae: Vibrio, Photobacterium, Salinivibrio

• Enterobacteriaceae: Plesiomonas

Características fenotípicas diferenciales deCaracterísticas fenotípicas diferenciales de Vibrio, Vibrio,

Photobacterium, Aeromonas, Plaesiomonas.Photobacterium, Aeromonas, Plaesiomonas.

Na+ requerimientoNa+ requerimiento

O129O129

DNAsaDNAsa

AsociaciónAsociación

Infección humana Infección humana

LipasaLipasa

ManitolManitol

VibrioVibrio

++

S*S*

+/-+/-

++

++

++

PhotobacteriumPhotobacterium

+ +

SS

NDND

--

VV

--

AeromonasAeromonas

--

RR

++

++

++

++

PlesiomonasPlesiomonas

--

SS

--

++

--

--

Vibrio-AeromonasVibrio-AeromonasDiferenciación FenotípicaDiferenciación Fenotípica

ClNa 0%ClNa 0% ClNa 6%ClNa 6% O129(150 ug)O129(150 ug)

Vibrio Vibrio HALOFILICOHALOFILICO -- ++ S*S*

Vibrio Vibrio NO HALOFILICONO HALOFILICO ++ VV S*S*

AeromonasAeromonas ++ -- RR

Vibrio Vibrio No HalofílicoNo Halofílico y Aeromonas y AeromonasDiferenciación FenotípicaDiferenciación Fenotípica

ODCODC Gas GluGas Glu O129(150 ug)O129(150 ug)

Vibrio Vibrio NONO HALOFILICOHALOFILICO ++ -- S*S*

Aeromonas Aeromonas spp spp ( excluida( excluida A veroni A veroni biovarbiovar

veroniiveronii))

-- VV RR

Aeromonas veronii Aeromonas veronii biovar biovar veroniiveronii ++ ++ RR

Género Aeromonas

Complejo Aeromonas hydrophilaComplejo Aeromonas caviaeAeromonas veronii ( bv veronii y bv sobria)Aeromonas jandaeiAeromonas trotaAeromonas schubertiiAeromonas encheleiaAeromonas allosacharophilaAeromonas sobriaAeromonas popoffii

Complejo Aeromonas hydrophila

Aeromonas hydrophila HG1 Aeromonas bestiarum HG2Aeromonas salmonicida HG3 Aeromonas salmonicida ss salmonicida Aeromonas salmonicida ss masoucida Aeromonas salmonicida ss achromogenes Aeromonas salmonicida ss smithia Aeromonas salmonicida ss pectinolytica Aeromonas salmonicida (Humana)FENOTIPO A. hydrophila

Complejo Aeromonas caviae

Aeromonas caviae HG 4

Aeromonas media HG5

Aeromonas eucrenophila HG6

FENOTIPO A. caviae

Aeromonas Aeromonas sppsppDiferenciación de Fenotipos o fenoespeciesDiferenciación de Fenotipos o fenoespecies

Complejo Complejo

A. hydrophilaA. hydrophila

Complejo Complejo

A. caviaeA. caviae

ComplejoComplejo

A. sobriaA. sobria

A.A. veronii veronii

bvbv veronii veronii

Gas GluGas Glu ++ -- ++ ++

ODCODC -- -- -- ++

EsculinaEsculina ++ ++ -- ++

VPVP ++ -- VV ++

LarabinosaLarabinosa ++ ++ -- --

Aeromonas Aeromonas sppspp Fenotipos de Resistencia Fenotipos de Resistencia

Complejo Complejo

A. hydrophilaA. hydrophila

Complejo Complejo

A. caviaeA. caviae

ComplejoComplejo

A. sobriaA. sobria

A.A. veronii veronii

bvbv veronii veronii

CefalotinaCefalotina RR RR S/RS/R SS

Complejo Aeromonas sobriaComplejo Aeromonas sobriaDiferenciación fenotipica de especiesDiferenciación fenotipica de especies

A. jandaeiA. jandaei

A. schubertiiA. schubertiiA. trotaA. trota

A.A. veronii veronii

bvbv sobria sobria

Gas GluGas Glu ++ -- VV ++

IndolIndol ++ -- ++ ++

sacarosasacarosa -- -- VV ++

ManitolManitol ++ -- ++ ++

CefalotinaCefalotina RR SS RR SS

Aeromonas

• Habitat: Agua dulce, agua servida. Agua clorada, incluida la de suministro hospitalario.

Infecciones:

• Gastrointestinales

• Extraintestinales

AeromonasInfecciones intestinales: Pruebas que

respaldan su participación en la enfermedad diarreica

• Mayor porcentaje de portadores en personas sintomáticas que asintomáticas.

• Ausencia de otros patógenos en los individuos portadores de Aeromonas.

• Enterotoxinas• Mejoría de la diarrea con tratamiento ATB activos y

empeoramiento clínico con ATB ineficaces.• Respuesta inmune específica.

Infecciones Intestinales por Aeromonas

• Especie más frecuente A caviae.• Especies varían con el área geográfica. • Recocidas en todo el mundo.• Más común en niños < 2 años• Más común en verano: Mayor cc en agua. • Casos esporádicos.• Creciente de diarrea del viajero• Un caso de SUH (Bognanovic et al, Pedriatr Nephrol, 1991)

• Factores de riesgo en adultos: Enf. GI o hepatobiliar, hipo o acloridria, ATB reciente.

Aeromonas Aeromonas

Infecciones GastrointestinalesInfecciones GastrointestinalesTipo de DiarreaTipo de Diarrea CaracterísticasCaracterísticas FrecuenciaFrecuencia ComentariosComentarios

SecretoraSecretora Acuosa, vómitosAcuosa, vómitos Muy comúnMuy común > 40ºC, dolor epigastrio, > 40ºC, dolor epigastrio,

vómitos (niños)vómitos (niños)

DisenteríaDisentería Sangre,leucocitos, mucus,Sangre,leucocitos, mucus, Muy común,Muy común, a menudo requieren a menudo requieren

hospitalización y ATBhospitalización y ATB

CrónicaCrónica Diarrea > 10 dDiarrea > 10 d ComúnComún Aumento de GB, pérdida Aumento de GB, pérdida

de peso dolor abdominalde peso dolor abdominal

ColéricaColérica Agua de arrozAgua de arroz RaraRara Toxina coléricaToxina colérica

Del ViajeroDel Viajero Distintas Distintas

presentacionespresentaciones

DesconocidoDesconocido

AeromonasInfecciones Extraintestinales

• Heridas: Celulitis, Mionecrosis, Ectima.

• Bacteriemia/sepsis

• I de la vía biliar

• Otras

AeromonasInfecciones Heridas

• Traumatismo y luego contacto con el medio ambiente en particular agua.

• Injurias, accidentes, espinas de pescados, mordedura de reptiles, quemaduras.

• Accidente automovilisticos. Aplastamiento de tejidos.

• Rugby australiano: barro preparado con agua de río.

• Sanguijuelas medicinales: intestino colonizado con Aeromonas. Hoy se

recomienda profilaxis ATB antes de aplicarlas! 7-20 % de los pacientes desarrollan

Inf por Aeromonas.

Aeromonas Aeromonas

Infecciones HeridasInfecciones Heridas

TipoTipo PatologíaPatología FrecuenciaFrecuencia Recuperación del pacienteRecuperación del paciente

CelulitisCelulitis Inflamación de Inflamación de

TCS TCS ~ ~ EEßßHH

ComúnComún A menudo completa.A menudo completa.

MionecrosisMionecrosis Necrosis, hemorragia, Necrosis, hemorragia,

licuefación de tejido, GASlicuefación de tejido, GAS

RaraRara A menudo requieren A menudo requieren

amputación. Alta amputación. Alta

mortalidad cuando el HC+. mortalidad cuando el HC+.

Debridamiento y ATB.Debridamiento y ATB.

Ectima Ectima

gangrenosogangrenoso

Asociado con sepsis, ectima Asociado con sepsis, ectima

con borde eritematoso y con borde eritematoso y

centro necrótico.centro necrótico.

Menos Menos

comúncomún

A menudo fatal.A menudo fatal.

• Paciente Inmunocomprometido:Paciente Inmunocomprometido:

• Cirrosis 50% ( peritonitis espóntánea)Cirrosis 50% ( peritonitis espóntánea)

• Neoplasias ( sólidas y oncohematológicasNeoplasias ( sólidas y oncohematológicas))

• Disfunción hepatobiliar.Disfunción hepatobiliar.

• NormoinmuneNormoinmune

Mayoría Mayoría monomicrobianasmonomicrobianasAeromonas hydrophila:Aeromonas hydrophila:

es la más frecuentees la más frecuente• • 1/3 Nosocomiales1/3 Nosocomiales

Flora endógenaFlora endógena

HeridasHeridas

Vía biliarVía biliar

AeromonasAeromonas: Bacteriemia: Bacteriemia

AeromonasOtras Infecciones Extraintestinales

• Vía biliar.

• Tracto respiratorio

• Ocular

• Osteomielitis

• Otras: epididimitis, endocarditis,etc.

Aeromonas hydrophila Brote Nosocomial

• Cirugía de la vía biliar

• 3 laparoscopía y drenaje percutáneo.

• Endoscopio GI fue la fuente de la infección.

• Problema: incompleta inmersión en glutaraldehido, inadecuado cepillado de los canales internos e inapropiado secado.

Marin et al.1999.SHEA Congress.

AeromonasResistencia a ß lactámicos

Tres ß lactamasas cromosómicas inducibles.

• Cefalosporinasa de clase C

• Penicilinasa de clase D

• Metalo ß lactamasa de clase B ( sólo detectada por CIM con inóculo

elevado): A hydrophila, A veronii bv sobria, A veronii bv veronii y A

jandaei)

AeromonasATMs

• Ciprofloxacina ( 2-3 % de R en Asia; mutaciones en gen gyrAR a ác. nalidíxico)

• Cef 3ª Generación: sensible, pero Hiper producción o BLEE.

• Aminoglucósidos.

• TMS

• Tetraciclinas

• Cloranfenicol

Vibrio

• Habitat: Agua salada y dulce, superficie de moluscos bivalvos.

Infecciones:

• Gastrointestinales

• Extraintestinales

Vibrios Gastrointestinales

• V cholerae O1 y No O1

• V parahaemolyticus, V fluvialis, V furnisii, V mimicus, G hollisae.

Vibrios Extraintestinales

• V cholerae No O1

• V vulnificus

• V alginolyticus

• P damsela

Esquema diferencial de los seis grupos de Vibrios que infectan Esquema diferencial de los seis grupos de Vibrios que infectan al hombre.al hombre.

PruebaPrueba Grupo 1Grupo 1

V cholerae/V cholerae/

V mimicusV mimicus

Grupo 2Grupo 2

V V metschnikoviimetschnikovii

Grupo 3Grupo 3

V V cincinatcincinatiencisiencis

Grupo 4Grupo 4

V V hollisaehollisae

Grupo 5Grupo 5

V V damsela/ damsela/ V fluvialisV fluvialis

Grupo 6Grupo 6

V alginolyticus/ V V alginolyticus/ V parahaemolyticus/parahaemolyticus/V vulnificusV vulnificus

ClNa 0%ClNa 0% ++ -- -- -- -- --

OxidasaOxidasa ++ -- ++ ++ ++ ++

NitratoNitrato ++ -- ++ ++ ++ ++

InositolInositol -- VV ++ -- -- --

ADHADH -- -- -- ++ --

LDCLDC ++ -- -- ++

ODCODC ++ -- --

Vibrio Identificación

• No confundir con aeromonas• Vibrio fluvialis~Aeromonas caviae: Error

frecuente, inclusive de sistemas automatizados o miniaturizados de identificación.

• V cholerae~Aeromonas veronii bv veronii• V metschnikovii OXIDASA NEGATIVA• Agregar 1% más de ClNa a las pruebas!

Cólera

• “Flujo de bilis”

• 7 pandemias.

• Seis primeras: 1817-1923 (Biotipo Clásico) origen Asia –

India-• 7ma pandemia: El Tor. Islas Célebes(Indonesia) en 1961.• La última expansión 1991 América Latina.• Esta pandemia continúa: 58 naciones 184.311 casos en

2001 OMS.• Octubre 1992: Mandrás, India, luego Golfo de Bengala.

Vibrio O139 (octava pandemia) Ahora ha quedado confinada a Bangladesh e India.

• Hoy coexisten ambos

Cólera Epidemiología• Vive en el agua: Reservorio natural

• O1 y No O1 coexisten y predominan en este ambiente las cepas

no toxigénicas.

• En el ambiente natural vive unido a un tipo particular de algas,

adherido a la superficie de crustáceos y a copépodos en forma

simbiótica. • Temperatura, salinidad, y disponibilidad de nutrientes permiten

que se multiplique sin intervención del ser humano.• Si las condiciones no son adecuadas pasa a estado latente y no

se puede cultivar.• A partir del medio acuático se introduce en seres humanos.• El ciclo de cierra cuando los seres humanos infectados liberan la

bacteria al ambiente y contaminan suministros de agua y los alimentos.

Vibrio choleraeVibrio cholerae

Período de incubación:Período de incubación: 12 a 72 horas 12 a 72 horas

Transmisión:Transmisión: a través de productos marinos (ostras, almejas, a través de productos marinos (ostras, almejas,

cangrejos, camarones) o agua contaminada o alimentos cangrejos, camarones) o agua contaminada o alimentos

contaminados por las deposiciones de los enfermoscontaminados por las deposiciones de los enfermos

Hábitat:Hábitat: mar, estuarios, ríos de agua dulce con o sin materia mar, estuarios, ríos de agua dulce con o sin materia

orgánica. Es endémico en áreas de Asia y en América en la orgánica. Es endémico en áreas de Asia y en América en la

zona de la cuenca del amazonas y en Brasil. Atención con zona de la cuenca del amazonas y en Brasil. Atención con

pacientes que refieren viajes a áreas endémicaspacientes que refieren viajes a áreas endémicas

Dosis infectante:Dosis infectante: 10 1088 UFC/ml UFC/ml

Vibrio choleraeVibrio cholerae

Mecanismo patogénico:Mecanismo patogénico: enterotoxina citotónica enterotoxina citotónica secreción secreción

de agua y electrolitos sin daño de la mucosa de agua y electrolitos sin daño de la mucosa diarrea diarrea

secretorasecretora

Infección sistémica:Infección sistémica: V. choleraeV. cholerae O1 O1 circunscripto al circunscripto al

intestino. intestino.

Tratamiento:Tratamiento: reposición de agua y electrolitos. El ATB acorta reposición de agua y electrolitos. El ATB acorta

la duración de la enfermedad, el período de excreción y la duración de la enfermedad, el período de excreción y el el

volumen de las hecesvolumen de las heces

Vibrio choleraeVibrio cholerae

No O1No O1 O1O1

BiotiposBiotipos

SerotiposSerotipos

OGAWAOGAWA INABA INABA HIKOJIMAHIKOJIMA

ToxigénicoToxigénico No ToxigénicoNo Toxigénico

Clásico (Clásico (, VP-, PBS), VP-, PBS) El TOR (El TOR ( o o , VP+, PBR), VP+, PBR)

Vibrio choleraeVibrio cholerae

2) Pruebas Bioquímicas2) Pruebas Bioquímicas

TSITSI Ac/Ac sin Ac/Ac sin

gasgas

CitratoCitrato ++

LDCLDC ++

ODCODC ++

ADHADH --

SIMSIM -/+/+-/+/+

VPVP VV

O129 (150 µg/ml) SensibleO129 (150 µg/ml) Sensible

Cto Caldo 0 % ClNaCto Caldo 0 % ClNa ++

Cto Caldo 6.5 ClNaCto Caldo 6.5 ClNa vv

M-inositolM-inositol Negativo Negativo

Vibrio choleraeVibrio cholerae

1) Siembra en agua peptonada alcalina (pH 9.2)1) Siembra en agua peptonada alcalina (pH 9.2)

6 a 8 horas de incubación6 a 8 horas de incubación

Agar sangreAgar sangre TCBSTCBS

Colonias amarillasColonias amarillas

Colonias ßhemolíticasColonias ßhemolíticas Identificación Identificación

BioquímicaBioquímica

Oxidasa-Serología O1Oxidasa-Serología O1

++ ++

Identificación bioquímicaIdentificación bioquímica

Enviar a laboratorio de Referencia para determinarEnviar a laboratorio de Referencia para determinar

Serotipo y toxina coléricaSerotipo y toxina colérica

Antibiograma Vibrio cholerae (CLSI)

• Difusión

• Agar Mueller-Hinton, 35ºC, 16-18 hs.

• Ampicilina

• Tetraciclina ( no usar doxiciclina: no correlaciona con CIM)

• TMS

• Sufonamidas ( sulfisoxazol)

• Cloranfenicol (usar con precaución por error minor)

Vibrio cholerae en ArgentinaPetroni et al AAC, 2002

• 1947(40% de los aislamientos): 28 asilamientos BLEE+

• CTX-M y PER-2

• Resistencia a otros ATMs:

Todos:Gentamicina-TMS- kanamicina,

Amicacina-estreptomicina: 3

TMS, tetra y Clor: 2

Vibrios extraintestinales

• V vulnificus• Es el más virulentos (cápsula

PS: fagocitosis, estimula αFNT)

• Sepsis+inf de tejido blando• No diarrea• Lesiones metastásicas

cutáneas: 1- ampollas/vesículas hemorrágicas 2-úlcera necrótica

• Mortalidad 50 %• Cirrosis, hepatopatía, Ca, VIH,

sobrecarga de hierro.

• Vibrio chloreae No O1• Bacteriemia• Cirrosis,

oncohematológicos.• A menudo fatales.• Otras: peritonitis

espontánea, infección de heridas.

• V alginolyticus• Otitis• Heridas

Vibrio, Aeromonas, Plesiomonas

• Datos epidemiológicos :

1- Diarrea: tipo de ingesta, agua no potable, viajes.

2- ExtraIntestinal: contacto con medio acuoso.

• Laboratorio:

1- Bacilo gram-negativo ß hemolítico

2- Ausencia o desarrollo pobre en EMB.

3- Oxidasa Positiva/ fermentador.