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Rev. Med. Hosp. Na!. Niños Costa Rica 20 (2): 165-174, 1985
ACCION DE AL.GUNOS ANTIHELMINTICOS SOBREAngiostrongylus costaricensis~
Dr. Pedro Morera** e lIeana Bontempo*
INTRODUCCION
La Angiostrongiliasis Abdominal (AA) causada por Angiostrongylus costari·censis Morera y Céspedes, 1971, (13) (=Morerastrongylus costaricensisChabaud, 1972) (6) se observa con creciente frecuencia en los hospitalesy centros de salud de Costa Rica (19). Además, la enfermedad se ha encontrado desde México hasta el sur de Brasil (1,2,3,4,8,25,26,29,30,31,32), Yen algunos países donde no se han encontrado casos humanos, se hapodido demostrar la presencia del parásito en sus huéspedes naturales(10,18,22,27,28).
Los primeros casos fueron diagnosticados en piezas quirúrgicas(14,16,23). Sin embargo, conforme se ha incrementado la experiencia delos médicos y se ha introducido un método de diagnóstico serológico, elnúmero de casos clínicos que no necesitan cirugía ha superado al de aquellosen que se hace indispensable el tratamiento quirúrgico. Se ha planteadoentonces la posibilidad de usar en estos pacientes un tratamiento médico,a base de antihelmínticos. La droga que se ha usado con más frecuenciaes el tiabendazol (9). A pesar de que se ha descrito una mejoría de lossíl1tomas después del tratamiento, la evaluación de la acción de la drogasobre el parásito no se puede hacer en seres humanos. Por este motivohemos creído importante hacer un estudio para observar in vivo e in vitrolos efectos de varios antihelmínticos sobre el parásito y las consecuenciasdel tratamiento en el huésped.
MATERIAL Y METOOOS
Ratas algodoneras (Sigmodon hispidus) que cvnstituyen el principal huéspeddefinitivo del parásito (11), fueron criadas en la laboratorio. Grupos de estasratas de aproximadamente dos meses de edad, fueron infectadas mediante
• El presente es parte del Trabajo de Graduación de la Srita. lIeana Bontempo. estudiantede la Facultad de Farmacia, Universidad de Costa Rica
** Institulo de Investigaciones en Salud (INISA). Universidad de Costa Rica
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sonda gástrica con 50 larvas de tercer estadio (L3) de A. costaricensis. Estaslarvas provienen de una cepa mantenida en el laboratorio desde 1970 (cepaLG). Las larvas fueron obtenidas de babosas (Vaginulus p/ebeius) que constituyen el principal huésped intermediario (12).
Debido a que el período prepatente de A. costaricensis es de 24 días(15), todas las ratas fueron sometidas a tratamiento 40 días después de lainoculación, para así poder garantizar que todos los parásitos habían alcanzado la madurez somática.
Los antihelmínticos utilizados fueron tiabendazol, levamisol y dietilcarbamazina. Estas drogas se escogieron debido a que pueden ser absorbidas anivel intestinal y llegar al aparato circulatorio, habitat normal de los parásitos.
El tratamiento de las ratas se hizo siguiendo los esquemas del Cuadro 1.
CUADRO 1Tiabendazol
100 mgikg de peso vía oral
Grupo N°de ratas N°dedosis
1T 10 2 (1 c/24 horas)2T 10 3 (1 c/24 horas)3T 8 3 (1 c/48 horas)4T 13 15 (1 c/24 horas)
Levamisol10 mg/kg de peso vía oral
Grupo
1L2L3l
N°de ratas
1087
N°dedosis
2 (1 c/24 horas)3 (1 c/24 horas)3 (1 c/48 horas)
Dietilcarbamazina10 mg/kg de peso vía oral
Grupo N°de ratas N°dedosis---
1D 5 3 (1 c/24 horas)101 2 3 (1 c/24 horas)*102 2 4 (1 c/24 horas)**
20 5 6 (1 c/24 horas)20, 2 3 (1 c/24 horas)*
10,. 102 Y 20, corresponden a los grupos 10 Y 20, pero se repitió el tratamiento.* 30 mg/kg de peso
** 300 mg/kg de peso
Morera P. & 1. Bontempo: ANTIHELMINTlCOS EN A. COSTARRICENSES
RESULTADOS
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El uso de las tres drogas por medio de los esquemas de tratamiento mencionados en el capítulo anterior tuvo un resultado general común, a saber: enningún caso se logró la muerte de los parásitos adultos. A continuación sedescriben los cambios observados con cada droga y con cada esquema detratamiento.
TIAfJENDAZOL
GRUP01T
Cuatro días después de administrada la última dosis se examinó la materiafecal de todas las ratas; este procedimiento se repitió durante los tres díassubsiguientes con resultado negativo. Al noveno día después de la inoculación comenzaron a aparecer nuevamente L1 en las materias fecales.
Una semana después se sacrificaron nueve ratas observándose las lesiones típicas de la AA murina y los parásitos vivos en el interior de las arteriasde la región í1eocecal. Una de las ratas de este grupo murió espontáneamentey la necropsia mostró una zona de infarto del intestino delgado debida a lapresencia de parásitos adultos dentro de las arterias de la región afectada.
GRUPO 2T
El examen de las heces se hizo ígual que en el grupo anterior obteniéndoseresultados idénticos.
En este grupo no se observó ninguna muerte expontánea, de modo quelas diez ratas se sacrificaron para el examen necrÓptico. En todos los casoslos parásitos estaban ocupando su habitat normal.
GRUPO 31'
la materia fecal de las ratas tratadas se examinó igual que en los dos gruposanteriores, pero las L1 empezaron a aparecer hasta el décimotercer díadespués de administrada la última dosis.
Las ocho ratas fueron sacrificadas y al igual que en los grupos anterioresse encontraron los parásitos vivos.
GRUP04T
La primera revisión de las heces de las ratas de este grupo se hizo el díaque se administró la décimotercera dosis, y en ningún caso se encontraronlarvas. La revisión de la materia fecal se reinició tres días después de administrada la décimoquinta y última dosis, continuándose la revisión diaria por
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siete días, momento en que aparecieron nuevamente L1 vivas.En la etapa post-tratamiento se presentaron tres muertes expontáneas en
este grupo. En dos de estas ratas se observó dilatación y aspecto necróticode una porción importante del intestino delgado. En las arterias de la zonalesionada se encontraron parásitos vivos.
En la tercera rata muerta expontáneamente se encontró una esplenomegalia muy importante y el hígado tenía un aspecto de "cirrosis micronodular".La mayor parte de los parásitos, vivos, se encontraron obstruyendo ramasde la arteria hepática.
El resto de las ratas se sacrificó y en la necropsia se observó las lesionestípicas de la AA murina. En todas las ratas los parásitos adultos estaban vivos.
LEVAMISOl
GRUPO 1l
Las materias fecales de las ratas de este grupo fueron examinadas a los 4,7, 14,20 Y25 días después de la última dosis. En todos los casos se observóL1 vivas.En la etapa post- tratamiento se murieron tres ratas durante un fin de semanapor lo que el avanzado estado de putrefacción no permitió el examen necróptico.
Las otras siete ratas fueron sacrificadas encontrándose los parás¡tos vivosy las lesiones características de la AA murina. En una rata además seobservó una dilatación de la mayor parte del intestino delgado, encontrándosealgunos parásitos en las arterias que irrigan esta zona.
GRUPO 2l
El examen de las heces se hizo a los 6,13 Y18 días después de administradala última dosis, encontrándose L1 vivas en todos los casos.
Las ocho ratas fueron sacrificadas y se encontraron los parásitos vivosen su habitat normal, además de las lesiones características de la AA murina.En una rata se encontró en la unión ciegocólica una zona endurecida parcialmente calcificada de la cual se extrajo un parásito vivo.
GRUPO 3l
Las hece~, se examinaron 7 y 13 días después de la última dosis observándose L1 vivas.
En los primeros días de la etapa post-tratamiento murieron dos ratas, elexamen de las cuales mostró una extensa zona de infarto intestinal conparásitos vivos en las arterias de la misma.
Morera ? & 1. Bontempo: ANTIHELMIN1ICOS EN A. COSTARRICENSES 169
Las otras cinco ratas se sacrificaron y se extrajeron los parásitos vivos delas arterias de la región íleocecal.
DIETILCARBAMAZINA
GRUPO 1D
El examen de las heces se inició 8 días después de administrada la últimadosis y se observaron gran cantidad de L1 vivas y muertas. Posteriormentese sacrificaron las ratas y al examen necróptico se observaron los parásitosvivos ubicados en su habitat natural. Se observó además una ligera hepatoesplenomegalia y pequeños puntos blanquecinos en la superficie del hígado;el examen a fresco de este material permitió observar huevecillos embrionados y L1 vivas.
GRUPO 20
Los resultados obtenidos en este grupo son iguaies a los observados en elanterior.
En todos los casos se comenzó a recoger muestras de materias fecales,después de administrada la última dosis. Estas muestras fueron estudiadasmediante la técnica de concentración de Baermann y microscopio de disección.
En aquellos casos en que se produjo la muerte de las ratas, después deltratamiento, éstas fueron estudiadas para investigar la causa de muerte.
Todas las ratas que sobrevivieron fueron sacrificadas y examinadas treintadías después de administrada la última dosis.
El estudio in vitro se realizó utilizando grupos de parásitos vivos obtenidosde ratas con dos meses de infección. Los parásitos fueron extraídos cuidadosamente para no dañarlos. De inmediato fueron colocados en soluciónTymde modificada a 37°C.
Las drogas fueron agregadas al medio de mantenimiento calculando quela concentración final fuera similar a aquella lograda en la sangre de lasratas al administrar las dosis indicadas en el estudio in vitro.
los controles se hicieron colocando grupos de parásitos en solución Tyrodea 37°C sin agregar ninguna otra sustancia.
Las observaciones se prolongaron hasta por 48 horas según el caso.
ACCION in vitro
El presente estudio se planeó después de haber obtenido resultados negativos con las tres drogas en estudio.
En el caso del tiabendazol se observó que el contacto con la droga produceun fenómeno de excitación que se pone de manifiesto por un aumento de
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la actividad de los parásitos con respecto a los del grupo control. Tambiénse observó que en el medio conteniendo la droga, los vermes inician movimientos de traslación y permanecen vivos por más de 24 horas.
En el caso del levamisol y la dietilcarbamazina, los parásitos tambiénpermanecen vivos varias horas en contacto directo con la droga. Sin embargo,en estos casos no se observa aumento de la actividad; por el contrario, alprimer contacto con el levamisol los parásitos disminuyen sus movimientos,pero al cabo de 20-30 minutos los recuperan presentando una actividadsimilar a los de los grupos control.
DISCUSION
La experiencia acumulada durante varios años, en el tratamiento de lashelmintiasis intestinales con drogas como el tiabendazol y el levamisol, demuestran la eficacia de las mismas.
Menos experiencia se tiene en el tratamiento de las infecciones causadaspor metastrongilídeos.
Guilhon el al. (7) encontraron que el levamisol a dosis de 10 mg/kg depeso vía subcutánea, durante dos días seguidos, lisan los parásitos enperros infectados con Angiostrongylus vasorum.Un efecto menos satisfactorio se observó cuando se usó tiabendazol a dosis de 120 mg/kg de peso,vía oral por dos días.Cuckler et al. (5) y Nishimura (20) demostraron que el tiabelldazol tiene unbuen efecto sobre las formas juveniles de Angiostrongylus cantonensis durante su migración por el cerebro de la rata, previniendo la infección pulmonar.En cambio, la droga no fue efectiva contra los parásitos adultos. Nishimura(20) además no encontró ninguna acción del bitionol, dietilcarbamazina yfuadin sobre los juveniles o adultos del mismo parásito.
El uso de estas drogas en una parasitosis como la AA cuyo agente etiológico se localiza dentro las arterias, nos ha planteado desde hace muchotiempo la pregunta: ¿en el supuesto de que la droga tenga acción sobre elparásito, qué sucede con los vermes muertos dentro de las arterias? (16).
Los resultados del presente trabajo demuestran que ninguna de las tresdrogas estudiadas paralizan o dan muerte al parásito. La primera fase delestudio demostró que después de aplicar varios esquemas de tratamiento,en los que variaron el tamaño y el número de dosis, continuó apareciendolarvas de primer estadio en las materias fecales de las ratas. Si se toma encuenta que se necesitan 4 a 5 días para la transformación del huevecillo enL1 (15) las larvas quee aparecieron después de este tiempo tenían queproceder de adultos vivos. El otro fenómeno que nos llamó la atención fuela muerte de algunas ratas después del tratamiento. La experiencia nos hademostrado que una rata inoculada con 50 L3 puede llegar a morir por laedad, a pesar de que la infección es importante como lo demuestra el hechode la aparición de un promedio de 12.000 L1/g de heces/día. De hecho, la
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necropsia de las ratas tratadas demostró que la muerte expontánea se debióa localizaciones erráticas del parásito, posteriores al tTatamiento.
En vista de estos hallazgos se hizo el estudio in vitro en el que se demostróno solamente que estas drogas no paralizan o matan el parásito, sino quepor el contrario lo excitan, iniciando movimientos de traslación (tiabendazol)que no se observaron en los controles. No podemos explicar el hecho deque los parásitos sobrevivieron por períodos de tiempo más largos en elmedio, conteniendo droga que en los grupos control.
Naturalmente que no se pueden extrapolar los resultados de este estudioexperimental. Sin embargo queremos enfatizar dos hechos que nos parecenmuy importantes: el parásito en contacto directo con la droga no sólo no separaliza o se muere, sino que se excita y puede vivir en estas condicionespor períodos de tiempo más largos que en el medio de mantenimiento puro.En segundo lugar, es importante destacar el hecho de que también en algunasratas la droga tiene un efecto negativo, al inducir, aparentemente, migraciones erráticas.
No existe ninguna evidencia de que el efecto de la droga pueda ser diferentecuando el parásito está en el hombre. Es un hecho definitivo que este tipode experiencia no se puede hacer en seres humanos, ya que al no pasarlas L1 en las heces, no se puede comprobar los resultados del tratamiento;así, en ausencia de estos resultados experimentales nos atrevemos a pensarque también en el hombre, podrían producirse migraciones erráticas probablemente agravando el cuadro. De hecho, ya se han encontrado varios casosde localizaciones ectópicas en el hígado (17) y en testículo (24).Es por este motivo que pensamos que si en un paciente con esta parasitosisno se justifica el tratamiento quirúrgico, no se debería dar tratamiento conlas drogas estudiadas, dada la posibilidad de producir complicaciones. Yase ha demostrado que pacientes con un cuadro clínico típico de AA y serología positiva, han evolucionado en forma satisfactoria en ausencia de tratamiento médico o quirúrgico (21).
En presencia entonces de pacientes con helmintiasis intestinales importantes, en los que se sospecha que además pueden tener AA, debería pensarseen aplicar tratamientos a base de drogas que no se absorban.
RESUMEN
Ratas algodoneras (Sigmodon hispidus) infectadas con SOL3 de Angiostrongylus costaricensis fueron tratadas 40 días después de la infección" contiabendazol, levamisol y dietilcarbamazina. Se usaron varios esquemas detratamiento, variando el número y el tamaño de la dosis.
En todos los casos se observó la aparición de L1 en las heces de las ratas5-6 días después del tratamiento. Algunas ratas murieron expontáneamente,observándose los parásitos localizados ectópicamente. Todas las otras ratasfueron sacrificadas, encontrándose los parásitos vivos.
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Las pruebas in vitro demostraron que los adultos de A. costaricensis permanecen vivos después de varias horas de estar en un medio conteniendola droga. En el caso del tiabendazol, se observó aumento de la actividad ymovimientos de traslación que no se observaron en los grupos control.
SUMMARV
Cotton rats (Sigmodon hispidus) infectad with SOL3 01 Angiostrongylus costaricensis were treated with thiabendazole, levamisole and diethylcarbamazine; the administration of the drugs was started 40 days afier theinfection. Several trials were carried out, varying the dose and the durationof the treatment.
In all of the cases, first stage larvae appeared 5-6 afiar treatment. In sornerats that died expontaneously, ectopically localizad living parasites were observed. Al! of the rats were sacrificed and the adult parasites were found alive.In vitro tríals demonstrated that the adults of A. costaricensis remain aliveafier several hours in direct contact with the drugs. An increase 01 the activityand transiation movements were observed in the worms in contact withfhiabendazole.
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