14
/ () - () (STY

¥ƒž‚™ ,fiHfl“ŁLp”B L OB ‘’d$ )‚+L fghœžFœ^šišY VW9 fiJHò OB6„9»B L OB &ˆJHflˆŁ ‘‹p› L¡− „öŁ ºŒ9 öxŠ$,˜3 ò> Ÿ )‚+Lx,ö> ‘’

  • Upload
    others

  • View
    6

  • Download
    0

Embed Size (px)

Citation preview

���������� ������������������

�������/��� � ��!���� ��"#$%&"'( ��)*�+��,-./0123&45

6789:;9<=>���?���@A9<BCDEF��� ��4GHI(JK$&3"#$%&"'(LMNOB�PQRKS"TU0V�W�XYZ[[\]^_]^`aW

�b�c@defg������hi�!��������

�jkl�mnopqrsnopq�pqtsuvqw

�-./�!��xdeyzt{st{ �|}-./�~��H�B�T���"(RK���������V�&0�������PQRKS"TU0V�W

������,�H��� (�)����,�

�D���E�� ¡¢ £¤¥

¥¦�����,�H���

§¨�©ª«¬p­�®T¯°RKS±2��²³´

���������µ�¶·ªx¸RKS±2H¹º9»`�

�¼½m{t{¾¿ÀÁ�ÂøÄ�ÅÆÇ�ÈÉ

§ÊË��ÌÍÁ���ÎÏ´�ÐÑ-./de�,���¶Ò!�� ��ÓÔ�I(JK$&3"#$%&"'(PÕ¶Ö�×%ØT��ÙÚÛ�Ë�Ü®T¯°ÝRÞ¯ßÝ&����Làáâã¶x¸Ä��Pä3�&�x

�å¥æRKS®K("T°&�x �-ç?è8«±�1&±Té�êë���ì�íbîïHðC�

�Êñ®T¯°ò óôLâõ�ö>÷÷Y_ø\�ù_úø\XY]ú[ú^ûü�¶ý�â

¬p­snopþsz�����������¬p­����x�µ�+�ò������

��µ�+�ò��¤||��� ���¤���

�� �� ��¤�Á��zl¤H�B����|��� ������µ�P������ï�±�S�&�H�B����P������±�1&±T����� ï�íb<«�¸RKS±2L!"OB��Ð����òbL#$��9%&'(W

)*����

¸��L!"OB�+�ò¬p­+����&!

, ¨�©ª«¬p­�-./pl0nw,Ò1�2�ë�3

4ø�+�ò 5678Ç��à 9:;Ã<á

=>��?@�A��Bô�üCHDE

F�

������,�H��� (�)����,� F�

�����G� �� ,� �,�

�b�c@defg��

���deÇ�HIJ-./�!�� �KL��M� NO3�yzt{st{z �|}H�=�x+�uvPw�QRHSTB��Ð�U�#ïVW��òbL�,OB�

��Ð�U�#ïVW��òbL�,XÁYZq�ò¥¦[ï�Á.z\�ò�¦Eï]w,^_Á½q`Yabc �¦dï

�,

��������� ���

¬p­+����ò%e�+H���Pfgh�^�i�YVWxje�+H���PfghF¦�^�i�YVWåklÄ3��KmnUÄH���P(&ÃH o`STY��ïVW��òLp�6�H�«x¬p­+����&ÃqÃrsLÈtOB�

Vu��+Hvö���L�,`wcæ�qmÁ?�xyz�{¦{^�i�Y`fcæDæP��æ¥æ]|�}0~? �¦�^�i�Y��¿q� ������¥ï�)*�AX¿k?� �FF^�i¦�Y�)*º��+ �¦¥�^�i�Y

�,

¬p­snopþsz��

�Q��nw¬p­��H���x¡�����F�H���9[F��Lp�B��L��OB���d$�)��+Lfgh��F�^�i�YVW9��JH�òOB6��9»B��L��OB�&ÃJH�Ã��`¬p­��L¡��ö��ë�9öx�$,Ä3�ò�>��)��+Lx�,ö>���ë�9�òOB¬p­+���A�L���üCOB�

� ��Ã�H�«xs�Zq�456L�{F�9DFFR����L�,�

fgh�F^�i�YLVu��+9�,Ùæç? �F^�i�VWiæX.Zq �F¦¥^�i�Y}0swzÁ �F^�i�YVW¬sq �F^�i�YVW

�,

¥¦������G������,� 

� ¡¢ £¤¥ �E���E�

�����G� �����ÌÍÁ���ÎÏ Q+�uvPw�¡¢b

�b�c@defg��

£�,jklH�Bc@defg���¶p¤7��B�

¥ÊñHS��¦�§�0�tl¬p­�uz+�uvPw¨ùZfû©ù_úª���¶Î���B�

«+�uvPw�QRPx]w,^_Á½qx]w¬­w.q�nvsq���òbP×ÌÍÁ

£-./��~��H�Bjkl0q+Á�HIJ-./�!�� �KL®yzt{st{ �ÏW9§¯@A��°L��B6�L�±ö>²«éWPQ+�uvPw³´9<B�

¥µ�PQ+�uvPw�,�Lì�¶·¸¹`ºp=��B�Õ»¶w¼+.qþz

«!½9Pxo¾�¿H�B³´`�ò0�tl9¡¢`�òbL?Àx��Ð�UHÁÂ

��������� ���

£4 Ã�Äb���LÃ�>¬p­5Å+����)*J��¶ÊËxpq|xâÖ`º9p¤7��B�

¥? Æm� L �45OBX+�zÇP<B¶xQ+�uvPw���HÈ/.��L��>�ÁǼqÉzÊqw�����LËÌöxÐqL&ÍOB��P`��

«� ��ÓÔ�¼¼qÎÏz�0¿ÏÌz0ÐqPÕ¶Ö�×ÌÍÁ

Ñ�)*�º��+�¸+���H�B�òPx�ÒÔ9Ó�¶ÔªxgÕ¼�w¶���

£������9 �¶�!OB�A��LüCö¬p­+���L��OB���Ö×P9öªx»`;�Ãb����+5ÅH�Ã���`B4 Ã�Äb§LìÒö��B�

¥���5Å�H�B��¿q��?AgÕPØ4��9<«xQ� -./.pÙ.sz®Úµ�PszZq��9³´���L4ö��B�

«6789:;9<=>���9�?���@A9<BCDEF��� ��4GH¼qÎÏz�0¿ÏÌz0ÐqLMNOB�PQ+�uvPw³´

ÑÛܧH�B�)*�ZÝÞßò�����òH,àöxáµ�`=��B��,� �)+HIb4G����9P��Lsz|

¬p­snopþsz��

£ËÖÙÚÛ¶¬p­snopþsz����Làáâx��¸ÄPâ�kzÁx�å¥æ+�-qu­zÁxç?`º

ÙÚÛãä9x�Á�z��¬p­å�gÕ�>���z-z�Á.z\L��

¥æ�Ã��sXP�zH�B�æç?��9�ç,èPéêë7��`��

£� �� ��¨ìÒ�Á��zlªH�B�����P���9xÕ¶Ö³´��

|��� �¬p­+���PxÕ¶Ö�íî¼sÊd§�H4�Þß����L�Ãö>³´��

¥æ�Ã��sXP�zH�B�æç?��9x����R�x�òµ�xï¸ð��@��ñ9��Ð�ÌÍÁ�,èL�,

¥¦¥+�uvPw�����òó¡¢b

������,�H��� (2),��ôÌ F�

�d��E�

���q� ü��,��õo`ã�°

ö÷`�°���

�öø`ù/��ú

4û` ���ú

oü�ý��

@jklþ��é-./ ��é

Ðqë7>����ò¯�òb-./

t:�-./��

�-./Km

Minimum genome factory�MGF�

��$��¶ø��R���ò�ÀZ�l¶ø���ö�Ëù/� ���zÁ¶à�9»B

�÷`�°�}âÊÁYzNO�

t:�jkl-./����

10��Lpª����

DGF,RGF,I�F

���b�c@defg�����

� ¡¢ £¤�D

F�

����E�

���LíÃö>��gÕ)�����+�uvPw

����b�c@defg�����

ó��� :�t�§ Designed Genome� Factory

� � ܦ�§ Refined Genome�Factory

� �/ Üo¾�¿ Intelligent Genome Factory

gÄ�n��)� ü������ �!�q-P+ü!�"#J+�t­zlü!�

� ¡¢ £¤�D

F�

�{��E�

���b�c@defg�����

�ÖÖ�-.¸��$ %& '( )* ¨t�§ �je-./� �ü!ª

�+G�,-¸��t¸.t¸ Ñ/¡ 01 )*¨t�§23AmÒ¯�w.q�Ps+wzlü!ª¨t�§�!���¼ÌP0Ðqª

�+G�,-¸��t¸.t¸ Ñ/¡ 01 )*¨¦�§HSTBHIJ-./�!����ª

�42t¸t¸. â5 67 )* ¨¦�§de�I$�q-P+�ò �ª

�8ñt¸ v1 9: )* ¨¦�§deyzt{st{z �|}��ª

�;ñt¸�< =>t¸� ?> @ )*¨o¾�¿�deyzt{st{z �|}��ª

A×&Í����²³

� ¡¢ £¤�D

F�

�[��E�

�FF

�F

ÚÙddF]�

0

20

40

0 10 20 30 40Time (hr)

��b�c@defg t�§ Ù\©_^]\B�a\]ú�\�CZXøúDû

23Aѯ�g

� E�¯23AL¥E���

� �je-./�¥¦��P

��ö� F� �üøÇ

� GgCNO�°¶tHHÏW

XÁYZq ¥¦�[�^�i�YL�,I

XÁYZq`^�ic

XÁYZq�òJ

��J

� ûK^G,DúBL� M§üÕ�N,HvL

O� 23Aѯ9�ò�-./L�!ë

êx�J��H�P�ÇÏzZq�OB

6�9xë�J`�+�ò�LüC�

� &Ã�� HÏT/ôB9QR���

STJ`.p�q�XUw®A×��H�«

V`BÙ.¼0ÏX¼+LWË�� yhhK,panZ

-qwtq?�,�íbù/

�je-./ �ü!

���Î�+�½z�z

� ¡¢ £¤�D

F�

¥F��E�

MGB874

mRNA

1.5Mbp

� ¡¢ £¤�d

F�

¥���E�

¥���E�

o¾�¿�b�c@defg�� X]ø\[[_^\]øa\]ú�\CZXøúDû �XaC�

;;ñt¸

��/¯YôB

I$�q-P+�òë�¶#ïHÏW

23At:���¯ZdE�¦¥[\]L^,

v����áý

���_é`��!0�tl�ayZ¼w×RgK�_obé`���

#�óc���dM�!0�tl�|�� eJ+�½z�z_YX²f�

g�oh�òbÏW�����ó�ù/�Ãohi|t�

î�jüÕÐÑ�����]w�j)QüÕüCkl�

m noQe�Þß5Îü!

� ¡¢ £¤¥¥

F�

���� �®���`ºHSTB�����������x-./453H�B� �� ������Lp�x%H¬p­+���H�«�ò9»B6�¶e�7��B�+H���Pfgh�f]ZX\�g_�\�h_\[BÜ��pq�R�<>«��òi��^�i�YVWx¬p­+���H�=��ò9»B6�¶e�7��`��+H���Pr���o��VW�klÄ3��KmnUÄH���P&ÃH o`fgh��ïVW���òLp�6�H�«x¬p­+����&ÃqÃrsLÈtOB�

#���������� ������

� ¡¢ £¤[[

F�

¥¥��E�

� ¡¢ £¤[[

F�

¥D���E�

##���������� ������

�stt¸t¸. uv ¹7 w)* ¨����A��Ç�� ?�KLªª�xyt¸ z¡ '{ w)* ¨� �Ã�����������ª�|}t¸ ^~ � )* ¨� �q-P+�4 Ã�Äb ü���b��5Å� ª�ò ������$ �� ��� �Áz+^

¨��jkl��H�B�����0�tlm�pq��ª�����t¸t¸. �1 �� )*

¨4 Ã�Äb� 34Ã� �hg����üÕ¸J��ª

�ò ������$ �5 �� �Áz+sz/z ¨? Æm� ���üÕü!��ª�t�t¸t¸. t? �� )* ¨�Yú[\�X\[[�XZøZ[û©ø�HSTB� ����ü!�����ª���t¸t¸. m� ð: )* ¨�ÁǼqÉzÊqw?� �������)���ª

�t�t¸ �5 ï� )*¨i�Âv����GfæÙCg��H�B�� ��0¿ÏÌz0Ðq�8���ª

�ò ������$ �z  ¡ @¢��£¨� ��0¿ÏÌz0Ðq�>��´¤âÊÁYz¥¦��ªª

�xyt¸t¸. �§ ¨ï )* ¨.�qoï�H�B�� ��0¿ÏÌz0Ðq�n��ª

�t©t¸t¸. Ñ> 9 )* ¨��� �������)���ª

�stt¸t¸. tz ª� )* ¨ÛܧH�B��)*�«ÝÞßò���,���ª

A×&Í����²³

� ¡¢ £¤[[

F�

¥E���E�

��Ü!½�¬p­+���Px����9Ã��7B¨�¶¬�­º9<«x¸Ò HS���Ãë7B��b��L¡�OB�òÇ��ÃP:;9<B�r69x�$4 Ã�â9deüÕL®¯OB6��9»B���Lc@�OBÍP�z�L��öx������9�Ã��`¬p­+���L��OB6�L���OB�

4 Ã�Äb§

+.�¿|

�������+�ò

N+°Å����

w.q�ɱq

�23AéW`Ww.q�ɱqx+.�¿|ÍP�zLÃ��N+°Å����

��!ÍP�z�üC

�ó�� -./��!

��!i�|mL�±O4G

MCS

c@Ãori

E. coliÃori

�zÀz-./

�z¿Êz�z

}°`+�½z�z

4Ã-./

�4 Ã���«²����HSTB��³´x���Ðq�¸Ä�+�ò�QR�t�§��µ¶9¡¢b�&'�

w·G ���^�i`fgh� {¦{^�i�Yc

Û�bù ¥EE�^�i`fgh �¦�^�i�Yc

O

O

ClOH

OH

COOH

,�

&Ã�ì¸öÜ4 Ã�Äb¹¦�DY_º]Y_[Z Ù���F�H�$���L��OB� -./LMNOB6�H�=�

4 Ã����9;�Ãb��L¡�Hö>klÄâ�A3�¸Ä�òLg»a�e�&ÃL�±ö�xQRö�pª�

,�Ü

� ¡¢ £¤[[

F�

¥d���E�

55ŧC¦ Z¼øúøDú]Y_XZ

5Å� ½BY

E73E73

T70T70

E384E384 M138M138

M152M152V156V156

D219D219E216E216

T70

E384 M138

M152V156

D219E216E73

� �459íb20ï¾��1/6H

jklmz�L�Ãö>���<áù/�¿À

���3ïVW��òbÏWL�,I

� �45S��üÕü!

��¿q�g ÀÁ0ws­zÁ�ÁÂöÃ�Ä7Ål�

Æ�4ÃÇîa�� 5Å�H¨�Ãý�

�ÁǼqÉzÊqwÐq

r��c@4G

Z

À 0 ­

? Æm� �� ��������

4Ã�?���kl�¸Ä����ÈÉgÕ

��¿q��?AgÕ

-./.pÙ.sz

� ���� ü�8ü

A×&Í vò ������$xt�t¸x��t¸

�Á0Êq¯YôB

�JÜ ���?¬p­+������

� ¡¢ £¤�FD ¥����E�

F�

��ë�� Ë¥�>��� ��0¿ÏÌz0Ðq����QÈÌ�¯��

� ¡¢ £¤��D

F�

¥{���E�

������� ��ò Ã�� �ÀÊÀxt©t¸�

��î� ?ÍÎ��� �H�B�A�)*X¿k?�Ïn�ò+���L��ö>���� ^�ix�Ó�x�ð��

#�î� ?ÍÎ��� �H�B}.Áu­zÁ��Ïn�ò+���L��ö>� ���� ^�ix�Ó�x�ð��

g�î� ?ÍÎ��� �H�B�öÐ}.ÁXÁ¼zÁ��ò+���L��ö>��a� ^�ix�Ó�x�ð��

î�X¿k)°Ñ�?ÍÎ��� �H�B}.ÁX¿q���ò+���L��ö>� �a� ^�ix�Ó�x�ð��

a�GgCò��Ò æÒ ����� H�Bsq?���ò+���LüCö>��a� ^�ix�Ó�x�ð��

Ó�Ò æÒ ���X¿k)°Ñ��� �H�B]|�0}X¿k?���ò+���L��ö>� �g� �·x�ð��

Ô�u­}0jþz\��� �LÃ�B]|�0}X¿k?���ò+���L��ö>��Ô� ^�ix�Ó�x�ð��

Õ�Ib��� �LÃ�BAÖ×Ø?���ò+���L��ö>� �a� �^��ix�Ó�x�ð��

Ù������ �LÃ�B}.Á�?×Ø?���ò+���L��ö>� �#a ^�ix�Ó�x�ð��

���z-z­}0|m{�l�z\¶0wP�lCDEF�?� �ÏË��íbHÚLOB6�L�ö>�

#��$����«ÝÞßò�®�,��Hx.¼Àz\�m{âz�zíbL�ìö>�

g�XÁ¼zÁÛ� � �M� � bL45OB��L��ö>�

î�ÀÁÜZÁÍÎ� x­Ìn{qÍÎ� xX¿k)°Ñ� xÒ æÒ ��N,� x.¼Àz\xCDEF½k­}0jþz\x

×Ø?AÖ� ��Ý�xöÝ�xIb�`º�9>` �L¨�� L�ìöx67�LÃ�B� J�ò+����

)�LC�>�

Þß�Ã�ò�HPQ+JÞ� ü,� ��Ðqß�H�B� ��� ¬p­+����H��&Ã

X]ø\^DZø\Bæù_úæCZXøúDû�XùC���� � /`� `º�Lß�ö>�X]ø\^DZø\B���Ò�

�ù_úæCZXøúDûc

&ÃÌÍÁ��ò+�����

��� �íÃ�>��)�����

� ¡¢ £¤�¥¥

F�

¥[���E�

Ûܧ�íÃH�B9:«ÝÞßò�����ø7gà¯YôB�stt¸�

�)*�º��+á��òbÏW

ââ50ï��òbÏWL�

,

�òµ��Ðk��L¬ã�,

�)*�º��+á���äå

� ¡¢ £¤�D¥

F�

DF���E�

D����E�

��!�q-P+ü!H�B��� ��Ã�>����)������

�b�c@de DGF4 Ã�Äb§�R. opacus B4��K. rhizophila DC2201�

"#J+�t­zlü!����&Í

ËiJ+�t­zlü!����&Í

�0мwæq+�t­zl�ç+Ç|��npqæz+sqw��ÝÎP��w�.n�â|�qoü

�ߥJËi��«ÝÎÈÌèÎï¸Ëi�æ�q-P+QÒ

� �b¯

E�¯x �éê¯

µ¶

DGF×Ë�q-P+�Ü1382R. opacus B4�×Ë�q-P+�Ü3159K. rhizophila DC2201�×Ë�q-P+�Ü1446

R S x�9:¬p­+���HSTB§A� ��Þß�ëmz��ìN�NBRCH�B? �ìN

9:¬p­+����&!

ò �Ã

Þß5x�b� ��ü!

+�t­zlü!��

+�t­zlü!Lkl�Ðk��L�,�

� ¡¢ £¤�E¥

F�

��nw¬p­��������=>��ò ���� ü�wXgÛ��¬p­�âþuz íî,�{»�[��ï

�ðñò íî,�{»�[��ï

�ó�âô��$ íî,�{»�[��ï

¬p­¼q¬zuÐq������=>��ò ���� ü�RITE��sÌ

g�¬p­snopþsz�����

� ¡¢ £¤�d¥

F�

D����E�

gg�¬p­snopþsz�����

íx��� �õÉï�u>��t¸ ö÷ øù )* ¨�z-z�Á.z\�fgª�ÀsnúÁZXt¸mz��û wúû�b¦�Ùú_�)* �î,�{»�[���

¨�Á��zlüÕ��!� �ü!ª��üë��z��$ tu ·� $^

¨��jklJ��H�B¬¬p­snopþsz� ª�ýò·t¸ þ� � )*

¨�¦a[¼øZ�_X¼��HSTBÎÁ�q?}þz\íb5I¯�²f�ü!ª�stÒ t¸ �= ¹ø w)*

¨¼sÊ�d§�¦a[¼øZ�_X¼���dde|� ü�ü!ª

íî,�{»�[��ï�sýt¸ �� �¡ )* ¨������nw¬p­��<78��ª

���t¸ �� �� )*¨�¿H�Bbgf���ë���Á.z\�� �ª

�5t¸t¸. âE �� )*¨��yÇ������ë��9:�PszZq��ª

���t¸ � �ù )*¨�§�éÅ��q-P+�oh�ò��i���HvOB)���ª

A×&Í����²³

� ¡¢ £¤�d¥

F�

D¥���E�

ÒÒ ����� ��A×��

|��� �¬p­+���»¼sÊ�d§�Þß45»

¬p­��¤���

�C6, C5�

C3»C6����ò0�tl�üC

-4 ?�D-ç?�- X¿k?�L-X.Zqx¬sq�-XÁ¼zÁ�}0swzÁ�

�szq¸ÄoE)�÷ �����

¬p­��¡�4ë�Ã-���C6xC5��^@×R�Ã- “���û�+�H¹OBÄb

�9J�òbÏW-Þß ��}-Þß-./�!ÌÍÁ�Ðq

de ��ß�Jüø-²«`W�Þß��ü!--./ʼw�zP�ü!-de|�HvOBü!

��òb

§A

�Ó

���¡��

�Ì���|��è�

�i�§A

�ò�

Þß0nwH�B�Ã�a�X¼+:�ðVW �?¯

=>��ò ���� üRITE

� ¡¢ £¤�d¥

F�

DD���E�

� ¡¢ £¤�FE

F�

DE���E�

�����G� Ö � óÖ � Ç � �

£�b�c@de

fg��

�4�+g�

�ҠJ4���

�I$�q-P+�gÕ�

�d§�ç ���

�ҠJ4���

45���

�I$�q-P+�gÕ�

�ç?gÕ�

¥��������� ���

�9:�!ÍP�z

��?� 4G

�o/0¿ÏÌz0Ðq

+��.l

�9:Û� �

�?ÍÎ� 5IA

�o/0¿ÏÌz0Ðq

+��.l

�9:Û� �

��)*�º��+gÕ��

«¬p­snopþsz��

�4 ��g��

�d§N+°ÅA

�����H�B¸ÄgÕ��

�d§N+°ÅA

�����H�B¸ÄgÕ��

� ¡¢ ÆKã�E

������,�H��� (3)eJ!ò"3�²f F�

D¦� @`H#

Dd���E�

�����G�H#

���

H#

�óÖ�

H#

����

�%&K�

óc�'3

£�b�c@de

fg��g� # Ô Óî Ùg

¥������� �� ��� �î F Ô �î� #ÕÔ

«¬p­snopþsz�� ÓÓ �g �# ��Õ g#�

� ¥ ��� �a #Ó g�# Ô��

� ¡¢ ÆKã��F

������,�H��� (3)eJ!ò"3�²fx(4),��(� F�

D¦� H#x$¡x¸ô�'�+Ì��'�&è

D����E�

��&Ã�� �ì¸öH��� (1),��&Ã��b F�

D{���E�� ¡¢ )¤�

D¦¥ &Ã�� �ì¸öH������

����b�c@defg�����

�}sq

�t�§ÙaC23Aѯ9�+�ò

�ócÇ.p�q�XUw

�XÀm¿X��Áz+Ç�oLL¥*

��

�¦�§waC� �bc@de9�Á.z\++�tXz\`º�ò Ã� ®I$�q-P+�Ò �ò

�ócÇ.p�q�XUw

��/

�o¾�¿XaC9I$�q-P+�òÈÉ�uÊ�

�ócÇ.p�q�XUw

�FJ���§¯o, vLíÃö�c@®-..pÙ.szL/�JH?0�o,

� ¡¢ )¤¥

//p�Á¸�4 Ã�ÄbÙ���F�H�$� -./LMNöx4 Ã����9;�Ãb��L¡�Hö>klÄâ�A3��òL¥»E�eH&Ã

�Á0Êq��?��¿q�dMA�gÕ�³´H?4OBCDEF�?� -./.pÙ.szLíÃöx�$4Ã�?���ÈÉgÕÇý�

���

�ºAx� xX+��zL�Ãö>¬p­�q1z���â���2�Ç�Ã

�gl� ®¸v�� HÏT>ü!1z��®¼q1Át{q�� Lý�

ÀÊÀ��)*X¿k?�ò+���`º&ÃÌÍÁH�ö>+���L+�uvPwkle��V�HÒ :�9&Ã

ø7gà��)*�º��+����òH���xhg+�����exg�eV3H�ò&Ã

F�

D¦D¦ &Ã�� �ì¸öH����#�#���������� ������

D[���E�

��&Ã�� �ì¸öH��� (1),��&Ã��b

� ¡¢ )¤E

F�

D¦E &Ã�� �ì¸öH����g�

g�¬p­snopþsz�����

wXgÛ�Ö�� �x|��� �¬p­+���H�B�$¸Ä�å��Ò ��L&Íâ���V�H&ÃWË�

sÌ�æ�Ã��hg0�tlL4 ?VóǨ�Ã��`ÂÃb������ò0�tl�ö��ý�LQR

�45J`�¾zÁX¼+&'Lp�x&Ã�� Ç

EF���E�

��&Ã�� �ì¸öH��� (1),��&Ã��b

F�

¬p­+�����òbÏW�qÃrsÈt

uã6� Bô���Û7

;ÃÈt

�����

A�ò 0�tl�üC

Õ¶Ö¶.ßJH}WL¯�

���� ��

�¬p­������ë�5Å��

���������� � ���

�HIJ-./�����yzt{st{z �|}

D¦d 2�ë�H���

� ¡¢ 8¤� E���E�

��&Ã�� �ì¸öH��� (2)2�ë�