A cell-surface molecule involved in organ-specific homing of

lymphocytes

Nature , 7. July 1983 Vol.304, 30-34

Laboratory of Experimental Oncology, Department of Pathology, Stanford University School of Medicine, Stanford, California, USA

Gliederung

Was war bekannt? Was wurde entdeckt?

Aufbau des Lymphknoten

Schlüsselexperimente• Monoklonaler Antikörper MEL-14• MEL-14 blockiert Adhäsion• MEL-14 bindet an 1 Molekülklasse

Forschungsstand heute

Zusammenfassung

Vorgeschichte

- reife Lymphozyten mobile Zellen

- Einwanderung in sekundäre lymphatische Organe selektiv

- aus Blut in Lymphgewebe über post-kapillare Venolen

-> spezifische Affinität zwischen Lymphozyten

und Endothelzellen - Mechanismus der spezifischen Zelladhäsion

Der Lymphknoten

high endothelia venules = HEV

Monoklonaler Antikörper• Immunisierung von Ratten mit B-Lymphomzellen

38C-13

• 38C-13 spezifisch an HEV des peripheren Knoten

• Hybride getestet auf AK gegen verschiedene Zelllinien

• Subklonierung von 38C-13 Zellen und normalen Lymphozyten

->Hybride mit ähnlicher Reaktivität wie Zellen von

peripheren Knoten ->Antikörper MEL-14

Monoklonaler Antikörper

=> MEL-14 bindet spezifisch an peripheren Lymphknoten

Mel-14 blockiert Adhäsion• Strukturen notwendig zur Einwanderung von

lymphoiden Zellen in vivo

• gekennzeichnete Lymphozyten intravenös in Empfänger

->MEL-14 inhibiert deutlich

=>Strukturen die MEL-14 blockiert sind zur Einwanderung notwendig

30G12 Zellen in Lymphknoten und Payers Patches

Bindung an Molekülklasse

Untersuchung von Lymphozyten die MEL-14 binden

a) Normale Lymphozyten

b) MEL-14

c) 38C-13 Zellen mit MEL-14

d) Zelllinie 11B-1

Größenunterschied durch unterschiedliche

Gylkosylierung

Forschungsstand heute

Take home message

• Einwanderung aus Blut in Lymphgewebe über HEV

• MEL-14 durch Subklonierung entdeckt

• MEL-14 bindet spezifisch an HEV von peripheren Lymphknoten

• MEL-14 blockierte wichtige Bindungsstruktur L-Selektin

Vielen Dank für die Aufmerksamkeit

Quellen:-Immunologie auf einen Blick, David Male-Janeway´s Immunobiology, 7 Edition

Erklärungen

• Monoklonaler Antikörper AK die von einem einzigen B-Lymphzyten produziert werden und gegen ein einzelnes Epitop gerichtet sind • Hybridome Verschmelzung von AK-produzierenden B-Zellen mit

Zellen einer Myelom-Zelllinie -> hybride Zellen die AK mit

einer best. Spezifität produzieren http://de.wikipedia.org/wiki/Monoklonaler_Antik%C3%B6rper

• Subklonierung wiederholte Klonierung von Zellen zur Überprüfung von einheitlichen Klonen http://www.imedo.de/medizinlexikon/subklonierung