93

Organism Mycobacterium tuberculosis complex

BstEII pattern 240 / 120 / 85

HaeIII pattern 150 / 130 / 70 / 0

DNA -

ORIGIN clinical specimen

Medline reference

8381805

16S rRNA sequence

X52917

65 hsp sequence

M15467

CommentsM. bovis, BCG, M. africanum, M. microti, all have the same restriction enzyme pattern.

PRA de amostra clínica indicando tratar-se de isolado pertencente ao Complexo Mycobacterium tuberculosis. Fonte: www.hospvd.ch:8005/ .

600 bp

100 bp

50 bp

350 bp

800 bp

439 bp439 bp

H20 05 04 06 07 08 10 09 12 16

Resultado de PCR realizado com os primers Tb11 e Tb12 (TELENTI et al, 1993) em nove isolados de bovinos do estado de São Paulo.

350 bp

200 bp

100 bp

50 bp

H20 05 04 06 07

240 pb

120 bp

85 bp

Eletroforese em gel mostrando fragmentos gerados pela digestão do amplificado de 439 bp, específico do gênero Mycobacterium, pela enzima de restrição BsteII, para nove isolados de bovnos do estado de São Paulo.

H20 05 04 06 07

350 bp

200 bp

100 bp

50 bp

150 bp

130 bp

70 bp

Eletroforese em gel mostrando fragmentos gerados pela digestão do amplificado de 439 bp, específico do gênero Mycobacterium, pela enzima de restrição HaeIII, para nove isolados de bovnos do estado de São Paulo.

Qual a utilidade?

diagnóstico individual

x

apoio ao programa

x

estudos epidemiológicos

diagnóstico indireto da diagnóstico indireto da tuberculose bovinatuberculose bovina

teste da tuberculinateste da tuberculinagama-interferongama-interferon

elisaelisa

Villemin (1865) - Natureza infecciosa da doença;Villemin (1865) - Natureza infecciosa da doença;

Robert Koch (1882) - Isolamento do agente em lesão em Robert Koch (1882) - Isolamento do agente em lesão em humanos; humanos;

(1890) - (1890) - Tuberculina O.TTuberculina O.T.;.;

Dorset (1934) - Meio sintético;Dorset (1934) - Meio sintético;

Seibert (1934) - PPD;Seibert (1934) - PPD;

Inglaterra (1940) – Teste Cervical Comparativo;Inglaterra (1940) – Teste Cervical Comparativo;

Início da produção de PPD no Brasil (1970);Início da produção de PPD no Brasil (1970);

PNCEBT 2001PNCEBT 2001

Tuberculina - históriaTuberculina - história

TuberculinaTuberculina

Composição:Composição:- tubérculo-proteína oriunda do cultivo de tubérculo-proteína oriunda do cultivo de M. bovisM. bovis AN AN55 ou ou M. aviumM. avium D D44;;

Concentração:Concentração:- PPD bovina: 1,0 mg/mL;PPD bovina: 1,0 mg/mL;- PPD aviária: 0,5 mg/mL;PPD aviária: 0,5 mg/mL;

Apresentação:Apresentação:- PPD bovina: líquido incolor;PPD bovina: líquido incolor;- PPD aviária: líquido avermelhado;PPD aviária: líquido avermelhado;

Conservação:Conservação:– manter sob temperatura de 2 a 8manter sob temperatura de 2 a 8ooC.C.– Não congelar;Não congelar;– Validade: 1 ano;Validade: 1 ano;

mecanismo de açãomecanismo de ação

0,1 ml Ag ID

Ma Li T

Ma

Li

f q mf r mfim

f rinflamação

fatores de reação da pele

teste da tuberculinateste da tuberculina

Diagnóstico alérgico:Diagnóstico alérgico: vantagens:vantagens:

- Alta eficiência dos testes padronizados;Alta eficiência dos testes padronizados;- Capacidade de detectar infecções recentes;Capacidade de detectar infecções recentes;- Simplicidade de execução dos testes;Simplicidade de execução dos testes;

desvantagens:desvantagens:- Possibilidade de reações inespecíficas;Possibilidade de reações inespecíficas;- Ocorrência de animais anérgicos;Ocorrência de animais anérgicos;- Exigência de intervalo mínimo entre testes;Exigência de intervalo mínimo entre testes;- Exigência de duas visitas à propriedadeExigência de duas visitas à propriedade..

resultados falsosresultados falsos

falso negativosfalso negativosinfecção recenteinfecção recente

parto e puerpérioparto e puerpério

anergiaanergia

falso positivosfalso positivosMACMAC

MOTTMOTT

Nocardia spNocardia sp

EquipamentoEquipamentoSeringas multidose automáticas próprias Seringas multidose automáticas próprias para tuberculinização de 0,1 mLpara tuberculinização de 0,1 mL

Agulhas própriasAgulhas próprias(Limpas, secas e sem resíduos de desinfetantes)(Limpas, secas e sem resíduos de desinfetantes)

Cutímetro com mola para uso veterinárioCutímetro com mola para uso veterinário

Aparelho para tricotomiaAparelho para tricotomia

Equipamento

PNCEBT - BrasilPNCEBT - Brasilteste da prega caudal (TPC)teste da prega caudal (TPC)

teste simples cervical (TSC)teste simples cervical (TSC)

teste cervical comparativo (TCC) teste cervical comparativo (TCC)

Teste da Prega Caudal – (TPC)Teste da Prega Caudal – (TPC)Teste de triagem permitido apenas em estabelecimento de Teste de triagem permitido apenas em estabelecimento de

pecuária de corte;pecuária de corte;

Local de inoculação:Local de inoculação:

– na prega da cauda, 6 a 10 cm base da cauda na junção na prega da cauda, 6 a 10 cm base da cauda na junção

das peles pilosa e glabra;das peles pilosa e glabra;

Dosagem : 0,1 mL de PPD Bovino, via I.D.;Dosagem : 0,1 mL de PPD Bovino, via I.D.;

Leitura: 72 horas Leitura: 72 horas 6 horas; 6 horas;

Interpretação: avaliação visual e palpação;Interpretação: avaliação visual e palpação;

– Animal reagente: qualquer aumento na prega inoculada.Animal reagente: qualquer aumento na prega inoculada.

– Não reagente: ausência de qualquer reação no local da Não reagente: ausência de qualquer reação no local da

aplicação.aplicação.

Teste da Prega Caudal – (TPC)Teste da Prega Caudal – (TPC)

Reação tuberculínica positiva em bovino.

Teste Cervical Simples – (TCS)Teste Cervical Simples – (TCS)para estabelecimento de pecuária de leite ou para estabelecimento de pecuária de leite ou

corte;corte;

Local de inoculação:Local de inoculação:– No terço médio da tábua do pescoço;No terço médio da tábua do pescoço;– Na região da espinha da escápula;Na região da espinha da escápula;

Dosagem : 0,1 mL de PPD Bovino, via I.D.;Dosagem : 0,1 mL de PPD Bovino, via I.D.;

Leitura: antes da aplicação e 72 horas Leitura: antes da aplicação e 72 horas 6 6

horas após;horas após;

Interpretação:Interpretação:– 0 a 1,9 mm = negativo0 a 1,9 mm = negativo

– 2,0 a 3,9 mm = inconclusivo2,0 a 3,9 mm = inconclusivo

– maior de 4,0 mm = reagentemaior de 4,0 mm = reagente

7 8 13 14

19 201615109

22211812 1711

1 2

43

56

23

CE ES CO QT CL

S

M

I

781314

1920 16 15 10 9

22 21 18 1217 11

12

4 3

56

23

CE ES COQTCL

DireitoEsquerdo

CL = caudaQT = Quarto traseiroCO = CostalES = EscapularCE = Cervical

I = InferiorM = MédioS= Superior

MOTA, 2003

MÉDIA DAS REAÇÕES ALÉRGICAS À TUBERCULINA PPD BOVINAINOCULADA DIFERENTES REGIÕES ANATÔMICAS DE BOVINOSSENSIBILIZADOS

RegiõesAltura da Inoculação Cervical (mm) Escapular (mm) Costal (mm)

Alta 5,49Ab 5,44Aa 5,33AaMédia 6,40Aa 5,77Ba 4,75cbBaixa 5,78Ab 4,94Bb 4,76Bb

Letras maiúsculas e minúsculas indicam diferenças significativas entre colunase linhas respectivamente

Teste Cervical SimplesTeste Cervical Simples

Interpretação.Interpretação.

Características da reaçãoB (mm)sensibilidadeconsistênciaoutras alterações

Interpretação

0 a 1.9 - - - negativo2.0 a 3.9 pouca dor endurecida delimitada inconclusivo2.0 a 3.9 muita dor macia exudato necrose positivo 4.0 - - - positivo

PNCEBT

Teste Cervical Comparativo – (TCC)Teste Cervical Comparativo – (TCC)

Teste confirmatório permitido em estabelecimento Teste confirmatório permitido em estabelecimento

de pecuária de leite ou corte;de pecuária de leite ou corte;

Teste diagnóstico para rebanhos com ocorrência Teste diagnóstico para rebanhos com ocorrência

de reações inespecíficas;de reações inespecíficas;

Local de inoculação:Local de inoculação:– No terço médio da tábua do pescoço;No terço médio da tábua do pescoço;– Na região da espinha da escápula;Na região da espinha da escápula;

Dosagem :Dosagem :– 0,1 mL de PPD Bovino e 0,1 mL de PPD Aviário , via I.D.;0,1 mL de PPD Bovino e 0,1 mL de PPD Aviário , via I.D.;

Teste Cervical Comparativo – (TCC)Teste Cervical Comparativo – (TCC)

Leitura: antes da aplicação e 72 horas Leitura: antes da aplicação e 72 horas 6 horas 6 horas

após;após;

Interpretação:Interpretação:

Diferença entre as reações ao PPD Bovino e o Diferença entre as reações ao PPD Bovino e o

Aviário:Aviário:

B – A (mm) Interpretação B < 2.0 - negativo B < A < 0 negativo B A 0.0 a 1.9 negativo B > A 2.0 a 3.9 inconclusivo B > A 4.0 positivo

PNCEBT

1o teste rebanho

resultado

A0 A72 A72-A0 B0 B72 B0-B72 B-A

1 9 15

2 8 133 7 164 6 75 6 126 6 77 7 78 7 89 8 810 8 911 9 1012 10 10,713 10 11,414 6 7,315 8 916 9 1517 7 1718 7 819 6 720 6 821 8 9,922 8 923 9 1024 9 925 5 626 5 727 6 928 6 729 7 830 8 9

identificação TSPCTCC (mm)

PPD aviário PPD bovinorebanho B

resultado

A0 A72 A72-A0 B0 B72 B0-B72 B-A

1 n2 n3 n4 p 8 19 9 125 n6 n7 n8 n9 n

10 p 6 7 7 9,211 n12 n13 n14 n15 n16 n17 n18 p 5 7 7 1019 p 8 8 9 1220 p 6 9 7 1121 n22 n23 n24 n25 n26 n

...350 n

identificação TSPCTCC (mm)

PPD aviário PPD bovino

rebanho A

Características das reações Características das reações inespecíficasinespecíficas

Reações para PPD aviária iguais Reações para PPD aviária iguais ou maiores do que a PPD bovina;ou maiores do que a PPD bovina;

Reação circunscrita;Reação circunscrita;

Consistência firme;Consistência firme;

Baixa persistência de Baixa persistência de sensibilidade;sensibilidade;

Diagnóstico da TuberculoseTeste cervical simples

Sacrifício

+

Teste pregacaudal

-I +

Teste cervicalcomparativo

Sacrifício

Teste cervicalcomparativo

I+ -

Sacrifício

I+ -

Sacrifício

Teste detriagem

Testeconfirmatório

Procedimentos em rebanho positivoProcedimentos em rebanho positivo

Esclarecimento sobre a doença;Esclarecimento sobre a doença;

Planejamento do combate;Planejamento do combate;

Destino dos animais reagentes;Destino dos animais reagentes;

Isolamento;Isolamento;

Desinfecção;Desinfecção;

Animais não reagentes;Animais não reagentes;

Intervalo entre tuberculinizações;Intervalo entre tuberculinizações;

Exame de saúde das pessoas Exame de saúde das pessoas envolvidas;envolvidas;

Outros animais da propriedade.Outros animais da propriedade.

CADEIA DE TRANSMISSÃO - CONTROLE

FIFI VTVT SS

veve pepe

animal com tb animal com tb abertaaberta

aerossóisaerossóis

secreções secreções e e

excreçõesexcreções

leite, carnes, leite, carnes, poeiras, poeiras,

alimentos e água alimentos e água contaminadoscontaminados

trato trato respiratórirespiratóri

o e o e digestivodigestivo

pele pele lesadalesada

aniamais aniamais domésticos domésticos e silvestrese silvestres

HOMEMHOMEM

Diagnóstico e Diagnóstico e sacrifício dos sacrifício dos positivospositivos

pasteurização ou pasteurização ou fervura do leitefervura do leite

aproveitamento aproveitamento condicional das condicional das

carnescarnes

desinfecção do desinfecção do ambienteambiente

MEDIDAS INESPECÍFICAS controle da movimentação de animais controle dos reservatórios

Reservatórios de Mycobacterium bovis

Grã BretanhaGrã Bretanha badgerbadger Meles melesMeles meles

Nova ZelândiaNova Zelândia cervídeoscervídeosopossumopossumporco selvagemporco selvagem

CervidaeCervidaeTrichossurus Trichossurus vulpeculavulpeculaSus scrofaSus scrofa

AustráliaAustrália opossumopossumbúfalo búfalo selvagemselvagemporco selvagemporco selvagem

Trichossurus Trichossurus vulpeculavulpeculaBubalus bubalisBubalus bubalisSus scrofaSus scrofa

CanadáCanadá bisãobisão Bubalus bisonBubalus bison

universaluniversal cãescãesgatosgatos

REFERÊNCIAS

ACHA, P. N. & SZYFRES, B. Zoonosis y enfermedades transmisibles comunes al hombre y a los animales. Organización Panamericana de la Salud, 3ª ed., v. 3, 2001. 398p.

BEER, J. Doenças infecciosas em animais domésticos, vol. 2, 1988. 380p.

BRASIL . Manual técnico do Programa Nacional de Controle e Erradicação da Brucelose e Tuberculose Animal – PNCEBT – Versão preliminar, 2003. 125p.

COETZER, J.A.W.; THOMSON, G.R.; TUSTIN, R.C. Infectious diseases of livestock. Oxford: Oxford University Press, 1994. v. 1, 732p.

CORRÊA, M. C.; CORRÊA, C. N. M. Enfermidades Infecciosas dos Mamíferos Domésticos. Editora Médica e Científica Ltda, 1992. 843P.