6. Células Madre 2011-2012.ppt [Modo de compatibilidad]asociaciones.uca.es/genetica-sociedad-actual/Archivos_presentaci... · Universidad de CádizUniversidad de Cádiz Aula de Mayores

Universidad de CádizUniversidad de Cádiz Aula de MayoresAula de Mayores

P T ó i11..-- LaLa herenciaherencia dede loslos seresseres vivosvivos.. BaseBase genéticagenética dede lala herenciaherencia.. DogmaDogma

Programa Teórico

centralcentral dede lala BiologíaBiología MolecularMolecular.. HerenciaHerencia dede loslos caracterescaracteres:: MendelismoMendelismo..22..-- GenéticaGenética yy evoluciónevolución.. EvoluciónEvolución dede laslas especiesespecies:: DarwinismoDarwinismo.. DiversidadDiversidad

dede laslas especiesespecies yy poblacionespoblaciones ConservaciónConservación dede loslos recursosrecursos genéticosgenéticosdede laslas especiesespecies yy poblacionespoblaciones.. ConservaciónConservación dede loslos recursosrecursos genéticosgenéticos..33..-- GenesGenes yy conductaconducta.. ¿Heredado¿Heredado oo adquirido?adquirido? InteracciónInteracción genotipogenotipo--

ambienteambiente.. GenéticaGenética deldel comportamientocomportamiento..44..-- GenéticaGenética yy saludsalud.. EnfermedadesEnfermedades concon basebase genéticagenética.. TerapiaTerapia génicagénica yy

FarmacogenéticaFarmacogenética..55 -- CélulasCélulas madremadre TiposTipos obtenciónobtención yy aplicacionesaplicaciones dede laslas célulascélulas madremadre55.. CélulasCélulas madremadre.. Tipos,Tipos, obtenciónobtención yy aplicacionesaplicaciones dede laslas célulascélulas madremadre..

CélulasCélulas madremadre yy cáncercáncer.. TrasplantesTrasplantes.. CriopreservaciónCriopreservación..66..-- IngenieríaIngeniería genéticagenética yy biotecnologíabiotecnología.. TécnicasTécnicas dede ingenieríaingeniería genéticagenética..

ProyectoProyecto genomagenoma humanohumano.. BiotecnologíaBiotecnología yy mediomedio ambienteambiente..77..-- IngenieríaIngeniería genéticagenética:: OrganismosOrganismos transgénicostransgénicos.. MetodologíaMetodología..

AplicacionesAplicaciones AlimentosAlimentos transgénicostransgénicos PolémicaPolémicaAplicacionesAplicaciones.. AlimentosAlimentos transgénicostransgénicos.. PolémicaPolémica..


DefiniciónDefiniciónLlamamos células madre a un tipo especial de CÉLULASINDIFERENCIADAS que tienen la capacidad de DIVIDIRSEINDEFINIDAMENTE sin perder sus propiedades y llegar a producir:

- Células especializadas comopcélulas de la sangre y del sistemainmunológico.

- Células de diferentes tejidos yórganos como células del sistemanervioso, del páncreas, hígado,corazón, vasos sanguíneos,hueso, cartílago, tejido adiposo yotros tipos celulares.


Características

Características de las Células Madre

Características

Características de las Células Madre


Tipos de Células MadrepTotipotentes: puede crecer y formar unORGANISMO COMPLETO, tanto loscomponentes embrionarios (capasembrionarias, linaje germinal y saco vitelino),como los extraembrionarios (placenta). Esd i d f t d l ti l ldecir, pueden formar todo los tipos celulares.

Pluripotentes: no puede formar un organismocompleto pero puede formar cualquier OTROcompleto, pero puede formar cualquier OTROTIPO DE CÉLULA proveniente de los treslinajes embrionarios (endodermo, ectodermo ymesodermo) así como el germinal y el sacomesodermo), así como el germinal y el sacovitelino. Pueden, por tanto, formar linajescelulares.


Tipos de Células MadreMultipotentes: son aquellas que sólo pueden generarCÉLULAS DE SU PROPIA CAPA O LINAJE

b i i d i ( j l él l d

p

embrionario de origen (por ejemplo: una célula madremesenquimal de médula ósea, al tener naturalezamesodérmica, dará origen a células de esa capa comomiocitos adipocitos u osteocitos entre otras)miocitos, adipocitos u osteocitos, entre otras).

Unipotentes: pueden formar únicamente UN TIPO DEUnipotentes: pueden formar únicamente UN TIPO DECÉLULA particular.


Células Madre embrionarias y germinalesCélulas Madre embrionarias y germinales


Células Madre embrionarias y germinales

Células madre pluripotenciales en el embrión temprano


Células madre pluripotenciales en el embrión temprano


Células Madre embrionarias y germinales• En 1994 se aisló por primera vez células madre

humanas pero no fue hasta 1998 que dos grupos


humanas, pero no fue hasta 1998 que dos gruposinformaran de la obtención de un cultivo de célulasmadre humanas, reproduciendo lo que ya se habíalogrado en ratones:logrado en ratones:

• Universidad de Wisconsin: aislamiento ycultivo de células madre embrionarias (ES) acultivo de células madre embrionarias (ES) apartir de blastocistos sobrantes procedentesde programas de FIV.Universidad Johns Hopkins: a partir de• Universidad Johns Hopkins: a partir defetos abortados.

• En la actualidad se utilizan como modelo paraestudiar el desarrollo embrionario y para entendercuáles son los mecanismos y las señales que

it él l l i t t ll fpermiten a una célula pluripotente llegar a formarcualquier célula plenamente diferenciada delorganismo.


Células Madre adultas

• En un individuo adulto hay tejidos en losque algunas de sus células se dividenacti amente pero en otros noactivamente, pero en otros no.

• Entre los que se dividen están la médulaósea y la piel en ellos encontramos célulasósea y la piel, en ellos encontramos célulasmadre de la médula ósea y de la piel.

• En otros tejidos se han encontrado• En otros tejidos se han encontradotambién células madre especializadas,capaces de reproducirse y de generartejidos especializados y sólo esos tejidos.j p y j

• En un principio se pensó que las célulasmadre adultas sólo podían generar célulasp gespecializadas del mismo tipo. Sin embargose ha observado que estas células puedenllegar a generar células con unaespecialización diferente de la originalespecialización diferente de la original.


Células Madre adultas

Células madre en el cuerpo adulto


Biología básica de las Células Madre adultasBiología básica de las Células Madre adultas

En animales modelos como la mosca del vinagre o el ratón, se han podidoa a es ode os co o a osca de ag e o e ató , se a pod doencontrar en las células madre adultas patrones de diferenciación(moléculas en la superficie).

La investigación se está centrando en las señales externas e internas quereciben las células madre.

¿Qué moléculas se envían unas células a otras?, y cómo estos “mensajesdesde el exterior” ponen en marcha una serie de factores para activargenes cuyos productos ejercen una serie de efectos: reorganizar losgenes, cuyos productos ejercen una serie de efectos: reorganizar losorgánulos celulares, la división celular, diferenciación funcional, etc.Internamente también existe regulación (“relojes internos”).


Plasticidad de las Células Madre adultas

En los últimos años se está demostrando que las células madre de un linaje

Plasticidad de las Células Madre adultas (Transdiferenciación)

En los últimos años se está demostrando que las células madre de un linajepuedan dar origen a células de otros linajes. Esto supone que el potencial dedesarrollo de las células madre de un tejido no estaba restringido a las célulasdiferenciadas del tejido en el que residen Por ejemplo:diferenciadas del tejido en el que residen. Por ejemplo:

• Células madre de médula ósea como origen de células hepáticas.

• Células madre cerebrales que dan línea sanguínea.


Aplicaciones de las Células MadreAplicaciones de las Células Madre

Células Madre embrionarias en cultivo

• Nos permitirán conocer los mecanismos de especialización celulares.• Qué mecanismos hacen que un gen sea activo y cuales inhiben la

ió d El á j l dexpresión de ese gen. El cáncer, por ejemplo, es un caso deespecialización celular anormal.

• Pueden servir para probar nuevos medicamentos en todo tipo de tejidosantes de hacer las pruebas reales en animales o en humanos.p

• Las células madre tendrán aplicaciones en terapias celulares, medicinaregenerativa o ingeniería tisular. Por ejemplo, las células madrepluripotentes estimuladas a desarrollarse como células especializadasofrecen frecuentemente la posibilidad de reemplazar células y tejidosofrecen frecuentemente la posibilidad de reemplazar células y tejidosdañados.

• Se podrán emplear para casos de Parkinson y Alzheimer, lesionesmedulares, quemaduras, lesiones de corazón o cerebrales, diabetes,

t i t iti t idosteoporosis y artritis reumatoide.

Aplicaciones de las Células Madre



DAÑOS DE MÉDULA ESPINALDAÑOS DE MÉDULA ESPINAL

TIPOS DE ANEMIASTIPOS DE ANEMIASPARKINSONPARKINSON

LESIONES MEDULARESLESIONES MEDULARESDAÑOS DE MÉDULA ESPINALDAÑOS DE MÉDULA ESPINAL

ARTRITIS REUMATOIDEARTRITIS REUMATOIDE LESIONES DE CORAZÓNLESIONES DE CORAZÓN

LESIONES MEDULARESLESIONES MEDULARES

DIABETESDIABETES LEUCEMIAS AGUDASLEUCEMIAS AGUDAS

DÉFICIT INMUNOLÓGICOS AGUDOSDÉFICIT INMUNOLÓGICOS AGUDOS

ESCLEROSIS MÚLTIPLEESCLEROSIS MÚLTIPLE

ALZHEIMERALZHEIMER

OSTEOPOROSISOSTEOPOROSISESCLEROSIS MÚLTIPLEESCLEROSIS MÚLTIPLE

QUEMADURASQUEMADURASLESIONES CEREBRALESLESIONES CEREBRALES

OSTEOPOROSISOSTEOPOROSIS





Terapias con Células MadreTerapias con Células Madre

El retrato robot de una buena célula madre para terapias celulares ytrasplantes en humanos sería como sigue:

D b í f ti t l i t t id l t di– Debería ser efectivamente pluripotente, idealmente que se pudieragenerar cualquier tipo buscado de célula.

– Debería ser inmortal, es decir, tener la capacidad de proliferar(autorrenovarse) indefinidamente.

– Debería carecer de potencial tumorigénico.– Debería ser susceptible de manipulación genética, para permitirp p g , p p

modificaciones genómicas precisas, incluyendo la introducción degenes terapéuticos.


Información de interés

C ti t l ti i b l él l d

Información de interés

• Continuamente salen nuevas noticias sobre avances con las células madrey dentro de la Ingeniería Celular podemos encontrar artículos taninteresantes como éstos:

– Un estudio revela que la grasa humana es una fuente de células madre– El trasplante de células madre de la médula ósea permite regenerar el

corazón después de un infarto– Células madre adultas contra las lesiones de la médula espinal– Crean retinas a partir de células madre

T bié d t b d él l d t• También podemos encontrar bancos de células madre que nos prometenpoder acceder a células madre recolectadas del cordón umbilical de nuestrorecién nacido para usarlas en el tratamiento de posibles enfermedades:

– http://www.cells4life.es– http://www.bioteca.es/– http://www.bancostemcell.com/p


Obtención de Células MadreCÉLULAS MADRES ADULTAS

Obtención de Células Madre

Técnica de transferencia nuclear (CLONACIÓN TERAPÉUTICA)



Obtención de Células MadreCÉLULAS MADRES EMBRIONARIAS

• Embriones obtenidos por fertilización in vitro• Tejidos fetales humanos





Almacenamiento de la Sangre de Cordón


Almacenamiento de la Sangre de CordónUmbilical:

– Sólo puede colectarse en el momentopdel nacimiento.

– Colectada a través de un circuitocerrado (estéril), en una bolsa. Elprocedimiento no dura más de 15procedimiento no dura más de 15minutos.

– La unidad de sangre es transportada alLaboratorio de Procesamiento en dónde

i d b j t i tes criopreservada bajo estrictas normasde calidad y almacenada a -196º C.

– Indoloro y seguro para la madre y elbebé, y no interfiere con el protocolobebé, y no interfiere con el protocoloestablecido para el parto.



¿Cuáles son las principales


¿Cuáles son las principalescaracterísticas de las células de la sangrede Cordón Umbilical?

– Fuente rica de Células Madre. Suscélulas tienen cualidades biológicasúnicas.

– Son inmunológicamente inmaduras yson jóvenes.

– Las Unidades de Sangre de Cordóngse almacenan criopreservadas enBancos de Sangre de CordónUmbilical autólogos o no.


AplicacionesEJEMPLO: Corazón infartado curado por células madre

Aplicaciones

• Por primera vez en España en la ClínicaUniversitaria de Navarra se ha curado uncorazón infartado implantando célulaspmadre del propio paciente.

• El paciente tenía una parte del músculocardíaco muerto a causa de varios infartoscardíaco muerto a causa de varios infartos.Se le extrajeron células del muslo, seseleccionaron y purificaron las célulasmadre. Después de cultivarlas durante tres

i t l ú lsemanas se inyectaron en el músculoinfartado.

• La recuperación fue prodigiosaLa recuperación fue prodigiosa.



Aplicaciones

Proceso:



Aplicaciones



Aplicaciones

Noticia actualNoticia actual

Noticia actual 2


Clonación terapéutica

• En el año 2001 el gobierno inglés permitió la investigación conembriones humanos para obtener células madre.

• Unos años más tarde (2007), se uniría España como noveno país delmundo en aprobar la clonación terapéutica, con la Ley deInvestigación Biomédica.

Fines de la clonación

Reproductivos Terapéuticos

No hay logros en este campo

Se obtienen células pluripotenciales

Alta carga ética Grandes avances



Proceso de clonación:

Se le extrae el material nuclear a un óvuloSe le extrae el material nuclear a un óvulo.

Se extrae el núcleo de una célula adulta del individuo a clonar y setransfiere el núcleo extraído de la célula adulta al óvulotransfiere el núcleo extraído de la célula adulta al óvulo.

A partir de aquí tenemos un cigoto artificial que podrá, tras sudesarrollo embrionario crecer hasta convertirse en un individuo clónicodesarrollo embrionario, crecer hasta convertirse en un individuo clónico,genéticamente idéntico al individuo del que se extrajo la célula adulta.



C ó


Células Madre y Cáncer• Tumor: Cualquier alteración de los tejidos que produzca un aumento de

volumen. Es un agrandamiento anormal de una parte del cuerpo, queaparece, por tanto, hinchada o distendida. En sentido restringido, un tumores cualquier bulto que se deba a un aumento en el número de célulasq qque lo componen, independientemente de que sean de carácterbenigno o maligno. Cuando un tumor es maligno, tiene capacidad deinvasión o infiltración y de metástasis a lugares distantes del tumorprimario, y entonces es un cáncer.p , y

• Cáncer: Conjunto de enfermedades en las cuales el organismo produceun exceso de células malignas (conocidas como cancerígenas ocancerosas) con crecimiento y división más allá de los límitescancerosas), con crecimiento y división más allá de los límitesnormales (invasión del tejido circundante y, a veces, metástasis).

• Metástasis: Propagación de un foco canceroso a un órgano distinto deMetástasis: Propagación de un foco canceroso a un órgano distinto deaquel en que se inició. Ocurre generalmente por vía sanguínea olinfática.

Las células cancerosas surgen a partir de células madre genéticamente defectuosas


Controversia sobre las Células Madre• Es el debate ético sobre las investigaciones de la creación, uso y

destrucción de las células madres embrionarias. La oposición a las

Controversia sobre las Células Madre

pinvestigaciones dice que esta práctica puede llevar a la clonación yfundamentalmente a la desvalorización de la vida humana.

Contrariamente las investigaciones médicas opinan que es necesario• Contrariamente, las investigaciones médicas opinan que es necesarioproceder con las investigaciones de las células madre embrionarias porquelas tecnologías resultantes podrían tener un gran potencial médico, y queel exceso embrionario creado por la fertilización in vitro puede ser donado

l i ti ipara las investigaciones.

• El constante debate ha hecho que autoridades de todo el mundo busquenregularidad en los trabajos y marquen el hecho de que las investigacionesregularidad en los trabajos y marquen el hecho de que las investigacionesde las células madre embrionarias representan un desafío ético y social.


La Genética en los trasplantesLa Genética en los trasplantes


La Genética en los trasplantesLa Genética en los trasplantesIntroducción

Un trasplante o injerto es la transferencia de células vivas, órganos otejidos de una parte del organismo a otra o de un individuo a otro.

En España:

• Hay 34 4 donantes por cada 1 000 habitantes• Hay 34,4 donantes por cada 1.000 habitantes.• Se realizaron 4218 intervenciones en 2011, principalmente de riñón.• Hay 4500 españoles a la espera de un trasplante renal.• Se estima que como mínimo se tardan dos años en encontrar un órganoSe estima que como mínimo se tardan dos años en encontrar un órganocompatible.• Uno de cada diez pacientes fallecen en la lista de espera de trasplantesde corazón.de corazón.• Tendencia en Europa a bajar el número de donaciones.• Se pretenden salvar 15.000 vida más al año en Europa con planes parafomentar la donación.

La Genética en los trasplantes



A t t l t l i j t l d t t l

Tipos de trasplantes

• Autotrasplante: aquel injerto en el que donante y receptor son elmismo individuo, por lo que no hay rechazo. Son muy comunes entransplantes de tejidos, como: porciones de piel u órganos, huesosmedula ósea vasos sanguíneos entre otrosmedula ósea, vasos sanguíneos, entre otros.

• Singénico: es aquel que se realiza entre dos individuos que songenéticamente idénticos (gemelos univitelinos o animales degenéticamente idénticos (gemelos univitelinos o animales deexperimentación seleccionados). Por ello no hay rechazos.

• Alotrasplante: es el que se realiza entre dos individuos diferentesAlotrasplante: es el que se realiza entre dos individuos diferentespertenecientes a la misma especie. Es el más común dentro de lostrasplantes.

• Xenotrasplante: el efectuado entre dos individuos de especiesdistintas.


La Genética en los trasplantesLa Genética en los trasplantesTipos de trasplantes


La Genética en los trasplantesLa Genética en los trasplantes¿Por qué se produce un rechazo?

Incompatibilidad genética entre donante y receptor

Complejo Mayor de Histocompatibilidad (MHC)Complejo Mayor de Histocompatibilidad (MHC)Es un grupo de genes que conforman el sistema de Antígenos LeucocitariosHumanos (HLA), que son una serie de proteínas presentes en la superficie de( ), q p p plas células, que sirven como “señales de reconocimiento” para las células delsistema inmune. Por lo tanto, determinan en gran medida el grado decompatibilidad o incompatibilidad en el trasplante de órganos.


La Genética en los trasplantesLa Genética en los trasplantes¿Por qué se produce un rechazo?

HLA igual entre receptor y donante Transplante compatibleHLA igual entre receptor y donante Transplante compatible

Más frecuente en individuos emparentados

HLA distinto entre receptor y donante Rechazo del transplante

Más frecuente en individuos no emparentados



R h hi d d ól h i l i t

La Genética en los trasplantesTipos de rechazos

• Rechazo hiperagudo: que se produce sólo horas o incluso minutosdespués de realizado el injerto.

• Rechazo acelerado: que se manifiesta durante los primeros díaspostrasplante. Se produce por una presencia de anticuerpos preexistentes en elsuero del receptor frente a las moléculas HLA del donantesuero del receptor frente a las moléculas HLA del donante.

• Rechazo agudo: es aquel que se produce en el primer mes postrasplante NoRechazo agudo: es aquel que se produce en el primer mes postrasplante. Nose conoce el mecanismo exacto por el que se produce un rechazo agudo. Secree debida a una inmunidad específica (humoral y celular), así como otrosmecanismos no específicos (respuesta inflamatoria con estimulación demecanismos no específicos (respuesta inflamatoria con estimulación depolimorfonucleares, plaquetas y macrófagos, etc.).

• Rechazo crónico: se produce meses o años después del trasplante y suetiología no se conoce con exactitud.


La Genética en los trasplantesLa Genética en los trasplantes¿Cómo se evitan los rechazos?

Terapia inmunosupresora (lo más usado): Medicamentos que inhiben laTerapia inmunosupresora (lo más usado): Medicamentos que inhiben laactividad del sistema inmune. Contraindicaciones: Bajada de la actividad delsistema inmunológico en general. Enfermedades autoinmunes como hipertensión,hiperglucemia daños al hígado o al riñónhiperglucemia, daños al hígado o al riñón.

• Los estudios genéticos de HLA han demostrado ser los más eficacesLos estudios genéticos de HLA han demostrado ser los más eficacesmanteniendo al receptor vivo tras el trasplante, más que con potentes drogasinmunosupresoras como la ciclosporina.

Existen otras técnicas para evitar rechazos pero las dos anteriores son las más• Existen otras técnicas para evitar rechazos pero las dos anteriores son las máseficaces ya que otras aun están siendo estudiadas.



Xenotrasplantes: Se están estudiando como una posible solución. Se han

La Genética en los trasplantesBioética

p prealizado algunos intentos esperanzadores logrando la supervivencia dealgunos días de seres humanos transplantados con órganos procedentesde animales.

• Polémica sobre animales transgénicos para obtener órganos y tejidos.

• Selección genética en bebés para salvar a otro hijo enfermo.

Javier fue el primerbebé seleccionado

éti tgenéticamente enEspaña y así se salvóla vida de suhermano, que padecía

f d duna enfermedadincurable. Andrésrecibió una donación desangre del cordón

bili l d J iumbilical de Javier100% compatible con lade él.



La Genética en los trasplantesCaso de Andrés y Javier


APLICACIONES DE LALA

CRIOPRESERVACIÓN

CRIOPRESERVACIÓN DE CÉLULAS

CRIOPRESERVACIÓN DE CÉLULAS CRIOPRESERVACIÓN

DE INJERTOSCRIOPRESERVACIÓN

DE EMBRIONESSEXUALES MADRES DE INJERTOS DE EMBRIONES

CÉLULAS CÉLULASCÉLULAS FEMENINAS

CÉLULAS MASCULINAS BLASTOCISTOS ZIGOTOS


Criopreservación

PROCEDIMIENTO:

Criopreservación de células sexuales: óvulos

- Se estimula la producción de óvulos (hormona estimuladora del folículo,FSH).- Se extraen los óvulos mediante operación y son cosechados.Se e t ae os ó u os ed a te ope ac ó y so cosec ados- Se someten a nitrógeno líquido (a -196˚C) en la cámara de congelación,aplicando los criopreservantes.- Son almacenados en congeladores especializados, unidades deg palmacenamiento.


Criopreservación

La criopreservación es una alternativa para aquellas mujeres que hayan

Criopreservación de células sexuales: óvulos

p p q j q ypadecido enfermedades que ponen en riesgo la fertilidad como son:

- Las enfermedades oncológicas donde la fertilidad queda afectadadebido a los tratamientos de quimioterapia o de radioterapia.

- Ante enfermedades de fertilidad como son: la endometriosis oimenopausia precoz.


CriopreservaciónCriopreservación de células sexuales: espermatozoides

El propósito de criopreservar semen (bancos de esperma) es asegurarEl propósito de criopreservar semen (bancos de esperma) es aseguraruna posibilidad de concepción de algún momento en el futuro. Existendos tipos de criobancos de semen:

Criobancos de semen a corto plazo.

CCriobancos de semen a largo plazo.



Criobancos de semen a corto plazo:

Almacenamiento de esperma durante menos de un año. Se utiliza enAlmacenamiento de esperma durante menos de un año. Se utiliza en inseminación artificial, fertilización in vitro y otros procedimientos para tratamientos de fertilidad.

El donante NO MANTIENE lazos afectivos con la futura madre



Criobancos de semen a largo plazo:

Se congelan indefinidamente. Y se descongelan según la voluntadespecífica del donante para utilizarlos en un intento de concebir un niño.

El donante SERÁ el futuro padre


CriopreservaciónCriopreservación de células sexuales

La técnica de criopreservación ofrece la posibilidad de conservar el ADNde los donantes de gametos (ovocitos y semen).

Esta también permitirá conocer el código genético del donante con el fin derealizar estudios genéticos que confirmen o descarten las posiblesmutaciones familiares y saber si sus descendientes desarrollarán una

f d d h dit ienfermedad hereditaria.


CriopreservaciónCriopreservación de embriones

E l di i t d d ió i tid l º d b iEn los procedimientos de reproducción asistida el nº de embriones que setransfiere está entre 2 y 4.

Si hubiese más embriones de los deseados para transferir se puedenSi hubiese más embriones de los deseados para transferir, se puedenalmacenar por medio de la técnica de criopreservación.

El procedimiento es muy similar al que se lleva a cabo para laEl procedimiento es muy similar al que se lleva a cabo para lacriopreservación de espermatozoides y óvulos.


CriopreservaciónCriopreservación de embriones

Se puede criopreservar

En estadio de zigoto En estadio deEn estadio de zigoto pronuclear (Día 1)

En estadio de blastocisto (Día 5, 6 ó 7)


CriopreservaciónCriopreservación de injertos

PROCEDIMIENTO:- Obtención de órganos de donantes.- Sometimiento de los órganos a una disolución de cultivo celular yantibióticos.

S ó- Sustitución progresiva del medio anterior por el crioprotector diluido en unmedio de cultivo celular nuevo.- Son sometidos a nitrógeno líquido a -196˚C.

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