寻找：天然的基因工程 农杆菌是一种生活在土壤中的微生物能侵

染双子叶和裸子植物 , 农杆菌体内有 Ti 质粒 , 当植物受伤时 , 农杆菌会被植物分泌的酚类化合物所吸引而来 , 把自己的 Ti 质粒转移并整合到植物的 DNA 上去 , 并有8 个左右的基因在植物细胞内表达 . 因此，农杆菌是一种天然的植物遗传转化体系，被誉为“自然界最小的遗传工程师”

质粒农杆菌

含重组质粒的农杆菌

胚状体

目的基因 重组

质粒

离体的植物细胞

愈伤组织转基因植物

导入

工具？

工具酶？

筛选

GP

AP

AP

TP

AP

TP

TP

CP

AP

GP

TP

CP

1限制酶切割的是哪个部位的

键 ?

2 3

什么是质粒 存在于细菌以及酵母菌等生物

中 细胞染色体外能自主复制的双

链环状 DNA 分子 具有多个限制酶切点，以便与

目的基因连接。 常有抗生素抗性基因 , 使细菌

具有抗药性（可作标记基因）

质粒（最常用的载体）质粒（最常用的载体）

GATCCG

CTAGAT

GATCTA

BamHI

XbaI

BglII

CCTAGGGGATCC

TCTAGAAGATCT

AGATCTTCTAGA

GATCCG

GCCTAG

CTAGAT

TAGATC

GATCTA

ATCTAG

5’

5’

3’

3’

GAATTCCTTAAG

GAATTCCTTAAG

目的基因AATTC

GGCTTAA

目的基因

GAATTCCTTAAG

AATTC

G

G

CTTAA

质粒

限制酶切割

限制酶切割

下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点，图 l 、图 2 中箭头表示相关限制酶的酶切位点。请选择有关的酶进行切割。

讨论：基因工程失败的原因