Pembuatan Media PCA

(Plate Count Agar)

I. Tujuan

a. Tujuan Umum :

1. Mahasiswa mampu memahami media pemupuk.

2. Mahasiswa mampu menjelaskan media PCA (Plate Count Agar).

b. Tujuan Khusus :

1. Mahasiswa dapat memahami prosedur pembuatan media PCA (Plate Count Agar).

2. Mahasiswa dapat membuat media PCA (Plate Count Agar).

II. Metode

Serbuk media PCA (Plate Count Agar) ditimbangdilarutkan dengan aquadest

disteril di tuang ke petridisk steril.

III. Prinsip

Penimbangan pelarutan sterilisasi.

IV. Alat dan Bahan

1. Alat

a. Timbangan Analitik

b. Gelas Arloji/Timbang

c. Beaker Glass

d. Batang Pengaduk

e. Gelas Ukur

f. Pemanas Listrik

g. Pipet Pasteur

h. Petridisk Steril

i. Autoclave

2. Bahan

a. Media PCA (Plate Count Agar) (Oxoid-CM0325)

b. Aquadest

c. Kertas pH

d. Kapas Berlemak

e. Aluminium Foil

f. Tissue

V. Formula

1. Tryptone 5,0 g/l

2. Yeast Extract 2,5 g/l

3. Glucose 1,0 g/l

VI. Cara Kerja

1. Digunakan semua APD dengan baik, benar dan lengkap.

2. Disiapkan semua alat-alat dan bahan-bahan yang akan digunakan.

3. Dipastikan semua alat dan bahan dalam keadaan siap digunakan.

4. Ditimbang serbuk media PCA (Plate Count Agar) (Sesuai dengan volume, dengan rumus, )5. Dipindahkan serbuk media ke beaker glass, lalu ditambahkan aquadest sesuai dengan volume kemudian dipindahkan ke erlenmeyer.6. Dihomogenkan larutan dengan bantuan pemanasan dan pengadukan.7. Pelarutan tidak boleh sampai mendidih (pelarutan harus sempurna, sehingga tidak ada kristal yang bersisa).8. Dicek pH larutan sesua petunjuk media (pH = 7,3 0,2) pada suhu 250C.9. Diperhatikan pengecekan suhu larutan saat pengecekan pH media.10. Ditambahkan NaOh 0,01 Njika pH media asamdan ditambahkan HCl 0,01 N jika ph media basa.11. Disterilisasi 1210C (1 atm) 15 menit.12. Dikeluarkan larutan dari autoclave saat suhu sudah rendah ( 200C) dan tekanan telah turun.13. Dituangka media kedalam petridisk steril yang telah disiapkan.14. Dibiarkan media dalam petridisk membeki dengan sempurna.15. Dilakukan uji kualitas media serta uji kontrol positif dan negatif.16. Disimpan pada suhu 40C-80C untuk menyimpan media.