41 1 04-43-58 胡弘道等3人#646ntur.lib.ntu.edu.tw/bitstream/246246/177433/1/08.pdf · －44－溫度及pH 對臺灣塊菌與印度塊菌菌落在洋菜培養基上生長之效應

中華林學季刊 (Quarterly Journal of Chinese Forestry) 41(1):43－58（2008）－43－

溫度及pH對臺灣塊菌與印度塊菌菌落在

洋菜培養基上生長之效應

胡弘道1 王亞男2 劉啟福3

（收件日期：民國 96 年 12 月 17 日、接受日期：民國 97 年 2 月 24 日）

【摘要】臺灣塊菌（Tuber formosanum）是臺灣原生塊菌與青剛櫟（Cyclobalanopsis glauca）

共生之菌種，印度塊菌（Tuber indicum）是中國雲南、四川地區廣泛分佈之菌種，2 種

塊菌子囊果（ascocarps）在外部形態及產孢組織（gleba）頗相似。本研究為了解其在洋

菜培養基最適菌落（colonization）生長之溫度及 pH，以 6 種溫度及 3 種 pH 值處理，採

完全逢機複因子試驗設計，於 YpSs 洋菜培養基中確定其對菌落生長之效應。結果顯示：

不同溫度對臺灣塊菌與印度塊菌之菌落生長皆呈極顯著差異，且最佳溫度皆為 25℃，最

差者皆為 33℃；不同 pH 值對臺灣塊菌菌落之生長呈顯著或不顯著差異，以 pH 6 生長最佳，pH 7 最差；不同 pH 值對印度塊菌在相同溫度下之菌落生長則不呈顯著差異；溫度及 pH 值對臺灣塊菌及印度塊菌菌落生長之交感效應皆不呈顯著差異。兩菌種於不同

溫度及 pH 值之菌落生長，菌種間互呈極顯著差異；菌種間各溫度在所有 pH 值之平均

菌落生長皆呈極顯著差異，而各 pH 值在所有溫度之平均菌落生長呈顯著差異；菌種間

與溫度之交感效應呈極顯著差異，印度塊菌除了於 10℃及 33℃時，菌落生長較臺灣塊

菌差以外，其他溫度之生長皆優於臺灣塊菌。

臺灣塊菌與印度塊菌在洋菜培養基中，最適宜之生長溫度為 20~25℃，pH 值為 6 左

右，如此之條件應適合於臺灣海拔 800~1500 公尺區域之石灰質土壤生育地生長。

【關鍵詞】臺灣塊菌、印度塊菌、青剛櫟、溫度、pH、菌落生長、外生菌根、塊菌

EFFECTS OF TEMPERATURE AND PH ON THE COLONY GROWTH OF TUBER FORMOSANUM HU AND TUBER

INDICUM COOK & MASSEE IN AGAR MEDIUM

Hung-Tao Hu1 Ya-Nan Wang2 Chii-Fuw Liou3

（Received: December 17, 2007; Accepted: February 24, 2008）

1 國立臺灣大學生物資源暨農學院森林環境暨資源學系教授。 Professor, Department of Forestry and Resource Conservation, College of Bioresource and Agriculture, National Taiwan University. No. 1, Sec. 4, Roosevelt Road, 10617 Taipei, Taiwan, R.O.C.

2 國立臺灣大學生物資源暨農學院森林環境暨資源學系教授兼實驗林管理處處長。 Professor and Director , The Experimental Forest, College of Bioresource and Agriculture, National Taiwan University. No.12, Sec. 1, Chien-Shan Road, Chu-Shan, 55743 Nan-Tou Hsien, Taiwan, R.O.C.

3 國立臺灣大學生物資源暨農學院實驗林管理處技士暨森林環境暨資源學系博士研究生，通訊作者。 Specialist and Ph.D. Candidate , The Experimental Forest, College of Bioresource and Agriculture, National Taiwan University. No.12, Sec. 1, Chien-Shan Road, Chu-Shan, 55743 Nan-Tou Hsien, Taiwan, R.O.C. Corresponding Author, [email protected].

－44－溫度及 pH 對臺灣塊菌與印度塊菌菌落在洋菜培養基上生長之效應

【Abstract】Tuber formosanum is an endemic truffle and symbiosed on Cycobalanopsis

glauca of Taiwan. Tuber indicum is a widespread truffle species in Yuannan and Szchuan

province in China. The external morphology and gleba of ascocarps are very similar to T. for-

mosanum and T. indicum. To understand the best colonization growth conditions in agar me-

dium, six different temperatures and three different pH were dealt with completely random

complex factor design in this research. We confirmed that the colony growth effects in the

YpSs argar medium. Different temperature has very significant effect on the colony growth of

T. formosanum and T. indicum, The best temperature was 25°C , while the worst was 33°C.

The best pH for the colony growth of T. formosanum was 6 , while the worst pH was 7.

Different pH treatments at the same temperature showed no significant difference on T. indi-

cum. The interactive effects of temperature and pH on the colony growth showed no signifi-

cant difference for both T. formosanum and T. indicum.

The interspecific colony growth of T. formosanum and T. indicum showed the most sig-

nificant difference in different temperatures and pH treatments. There were very significant

difference on the whole pH average colony growth at different temperatures, but only showed

significant difference on the whole temperature average colony growth in different pH treat-

ments. The interactive effects between truffles and temperatures showed very significant dif-

ference. The colony growth of T. indicum was better than T. formosanum at different tem-

perature treatments except 10°C and 33°C.

The best colony growth conditions of T. formosanum and T. indicum in agar medium was

between 20°C and 25°C and with pH 6. According to this condition, T. formosanum and T.

indicum supposely can grow in a lime-soil habitat between the altitude range from 800m to

1500m in Taiwan.

【Key words】Tuber formosanum, Tuber indicum, Cyclobalanopsis glauca, Temperature, pH,

Colony growth, Ectomycorrhiza, Truffles

I、前言

菌根（mycorrhiza）是真菌與宿主植物

根部形成具有特定形態結構和功能的共生

體（Frank，1885），可促進植物吸收養分

及水分之功能，並能增進植物抗環境逆境

及減少病原菌感染之能力（胡弘道,1990；

Branzanti et al., 1999；Marx and Davey,

1969）。塊菌（truffles）可形成外生菌根

（ectomycorrhiza），其子實體可提供高貴

美食料理食材用，是具高經濟價值之食用

菌根菌（edible mycorrhizal fungus）。菌根

菌之生長皆有其環境條件之限制，如土壤

養分、溫度、pH、濕度及水分等，不同菌

種其自身之忍受性（tolerance）亦影響其菌

落生長，一般熱帶地區之菌種，可耐 45℃

以上之高溫，寒帶地區之菌種，則於 5℃之

環境仍可生長，菌根之質與量以溫度及 pH

影響最大（弓明欽等，1997）。

菌絲的生長隨溫度的改變是非常敏感

（Marx et al., 1970），當溫度下降時，真

菌與植物根部之新陳代謝能力會明顯降

低，影響菌絲發育繼而減低利用養分之效

率（Bowen and Theodorou, 1973）；大部分

的外生菌根菌，其適宜之生長溫度約 8~


27℃左右，但不同溫度之生長速率與生長

曲線模式，可顯示出最佳及不良之菌落生

長溫度（胡弘道，1990）。彩色豆馬勃

（Pisolithus tinctorius）能適應較寬廣溫度

之菌種（Bowen et al., 1973）。松茸洋菜培

養基菌落生長之溫度範圍為 15~25℃，最

適溫度為 20℃，當 30℃時菌落完全無法生

長，但再移至室溫（約 20~25℃）7天後，

菌絲即再恢復活力生長（胡弘道、劉啟福，

1995），其最高致死溫度為 32℃（周綠蘋，

1983）。

pH 影響培養介質中菌根菌之生長

（Theodorous and Bowen, 1970），外生菌

根在偏酸性之環境是較適宜的，一般最適

宜之 pH值為 4~6（胡弘道，1990），大多

數外生菌根之 pH 忍受度最低為 pH 3

（Dennis,1985），不同培養介質及與宿主

共生與否，亦影響菌根菌對 pH 之忍受性

（Erland and Söderström, 1990）。pH會影

響菌根感染速率，青剛櫟接種義大利白塊

菌（Tuber magnatum）後，其菌根平均感

染率以 pH 6.5最佳，且在較高 pH值（6.5、

7.0、7.5）時，可較早達到良好之感染率（陳

怡君，2004）。

臺灣塊菌是臺灣本土菌種，由臺大胡

弘道教授於臺灣中部海拔1300公尺之東埔

山發現，其天然生僅生長於 pH 7.1之石灰

質土壤（calcareous soils）與青剛櫟共生，

子實體具芳香味且富含胺基酸成份，極具

經濟潛力。以人工撒佈石灰（lime）方式可

提高林地土壤 pH 值由 4.5 至 7.0，並使經

接種之青剛櫟苗木於栽植 8 年後開始產生

子實體（Hu et al., 2005）。Hu and Huang

（2007）以 rDNA-ITS 序列分析認為：依

系統發生來源，臺灣塊菌與中國地區之印

度塊菌基因親源幾乎相近，但因臺灣海峽

之隔已逐漸演化成臺灣本土菌種。

印度塊菌是中國雲南與四川地區產量

較多之菌種，Wang 等人（2006b）認為歐

亞所有黑塊菌皆具相同起源之種源，原分

布於歐洲與亞洲間（可能是印度），後法

國黑孢塊菌及冬塊菌（Tuber brumale）向

北路徑朝歐洲遷移，另印度塊菌及擬外孔

塊菌（Tuber pseudoexcavatum）則朝中國

遷移，因而造成不同區域菌種，但在外觀

形態法國黑孢塊菌仍與印度塊菌類似且不

易區別。

臺灣塊菌與印度塊菌 2 者在外觀形態

極為相似，本研究目的為：(1)確定臺灣塊

菌與印度塊菌在不同溫度及 pH 值之洋菜

培養基中，其菌落生長之差異；(2)分析在

不同溫度及 pH 值洋菜培養基中之菌落生

長與形態特性。

II、材料與方法

本研究以臺灣塊菌及印度塊菌等 2 種

菌種，確定其在不同溫度（10℃、15℃、

20℃、25℃、30℃、33℃）與不同 pH值（5.0、

6.0、7.0）於酵母抽出物與水溶性澱粉洋菜

基質（YpSs）之菌落生長。

( I ) 菌種之準備

上述 2 種菌種取自臺大森林環境暨資

源學系菌根研究室，由胡弘道教授分離出

之菌種，編號分別為 T. formosanum 001及

T. indicum 001，各菌種接種於經高溫高壓

殺菌（121℃及 1.5 lb/cm2，30 mim）之 YpSs

洋菜培養基，旋置於 25℃培養箱繼代培


養，培養 3 星期後供為後續不同溫度及 pH

菌落生長試驗之菌種來源。

( II ) 培養基質之製備及菌種培養

調配 YpSs培養基（許碧如，1987），

先以加熱器加熱溶解後，於 60℃溫度下，

以 0.5 N HCl及 1 N NaOH分別調配培養基

質之 pH為 5、6、7，並以高溫高壓殺菌釜

殺菌後倒入直徑 9 cm之無菌培養皿。前述

培養之菌種，於無菌操作台以經高溫高壓

殺菌之直徑 5 mm 取樣器取洋菜菌絲塊分

別接種於上述不同 pH值之 YpSs洋菜培養

基，並分別置於 10℃、15℃、20℃、25℃、

30℃及、33℃之無光照生長箱中培養（胡

弘道、劉啟福，1995）。

(III) 試驗設計

本試驗採完全逢機複因子設計，使用

上述之 2 種菌種 6 種溫度及 3 種 pH 值處

理，5 重複，總計樣本數 180 個。

(IV) 統計分析

各菌種於各不同溫度及 pH 值組合處

理各取 5 個重複樣本，每 3 天以十字徑向

（取 X,Y 軸平均值）調查其表面菌落生長

量，調查期間計 51天，最後並拍照紀錄之。

各菌種各處理之菌落生長資料，以變

異數分析（analysis of variance，ANOVA）

進行各處理間與交感效應差異之顯著性分

析（P≦0.05），並以 Duncan 氏多變域檢定

法作同質性檢定（test of homogeneity）。另

以菌落生長最佳、平均及最差之溫度及 pH

值進行二次曲線迴歸，求出生長曲線模式

比較之。

臺灣塊菌及印度塊菌 2 菌種間之菌落

生長效應比較，以變異數分析進行各處理

間與交感效應差異之顯著性分析（P≦

0.05），並以 Duncan 氏多變域檢定法作同

質性檢定。

III、結果

( I ) 臺灣塊菌（Tf）之菌落生長效應

1. 各溫度在所有 pH值及各 pH值在所有溫

度之菌落總平均生長效應

當菌落生長第 51天時，其變異數分析

結果：各溫度間：菌落直徑平均生長量之

變異呈極顯著差異（P＜0.001），各溫度間

皆互呈顯著差異（P＜0.05），其間皆以 25

℃菌落生長最大，其次分別為 20℃、30℃、

15℃及10℃，而以33℃之菌落生長最小（見

表 1）。各 pH值間：菌落直徑平均生長量

之變異呈顯著差異（P＜0.05），以 pH 6菌

落生長最大，而 pH 5及 pH 7菌落生長較

差且互不呈顯著差異（P＞0.05）。各溫度

及 pH值間：菌落直徑平均生長量之交感效

應變異不呈顯著差異（P＞0.05）。

2. 各溫度在不同pH值時對菌落生長之效應

由表 1及圖 1 比較得知：於 10℃生長

時，各 pH值間菌落直徑生長之變異呈顯著

差異（P＜0.05），其間以 pH 5菌落生長最

大，而 pH 7 菌落生長最小。於 15℃、20

℃、25℃及 30℃生長時，各溫度之 pH 值

間菌落直徑生長皆不呈顯著差異。於 33℃

生長時，各 pH值間菌落直徑生長之變異呈

顯著差異（P＜0.05），其間以 pH 6菌落生

長最大，其次分別為 pH 7及 pH 5。

3. 各pH值在不同溫度時對菌落生長之效應


表 1 臺灣塊菌各不同溫度及不同 pH 值菌落直徑生長 Table 1 The colony growth diameter of T. formosanum in different temperatures and pH treat-

ments

菌落直徑平均生長量±SD(mm)

pH 值溫度

5.0 6.0 7.0 平均

10℃ E24.80±0.57a D23.90±0.42ab E22.70±1.68b E23.80±1.32 15℃ D49.30±2.02a C50.40±5.20a D48.60±5.39a D49.43±4.22 20℃ B65.70±5.56a A70.20±1.89a B67.60±5.39a B67.83±4.67 25℃ A72.50±2.89a A71.20±5.08a A69.20±4.58a A70.97±4.21 30℃ C57.30±3.35a B60.70±1.72a C57.80±2.52a C58.60±2.87 33℃ F10.10±5.57b E16.30±1.48a F13.00±1.32ab F13.13±4.11

平均 46.62±22.87b 48.78±22.09a 46.48±22.18b 47.29±22.15

圖 1 臺灣塊菌於不同 pH 值下，各溫度之菌落生長直徑比較

Fig. 1 A comparison of the colony growth diameter of T. formosanum among different tempera-

tures in different pH treatments

由表 1 及圖 1 比較得知：於各 pH 之

YpSs培養基生長時，各溫度間菌落直徑生

長之變異皆呈極顯著差異（P＜0.001），當

pH 6時，20℃與 25℃菌落生長最大且互不

呈顯著差異，其次分別為 30℃、15℃及 10

℃，而以 33℃菌落生長最小；當 pH 5 及

pH 7時，皆以 25℃之菌落直徑生長最大，

其次分別為 20℃、30℃、15℃及 10℃，而

以 33℃之菌落直徑生長最小。

4. 溫度及 pH對菌落生長形態之影響

臺灣塊菌於不同溫度間菌落之生長形

態，由外觀觀察呈現不同之形態差異，但

在不同 pH 值間菌落之生長形態則無明顯

差異。由圖 2 比較結果如下：(1) 10℃菌落

生長，表面菌絲因初期凝結水珠後形成小

孔狀塌陷（圖 2a）。(2) 於 10℃、15℃之菌

落生長，表面菌絲生長厚而密實，正面菌

絲呈白色絨狀，背面代謝物沉澱呈乳黃

色，菌落之生長速率緩慢但呈穩定生長（圖

2b-c）。(3) 於 20℃、25℃之菌落生長，表

面菌絲依不同生長階段，呈 2~3 種不同性

狀之生長環，初期生長階段菌絲厚而密

實，中期生長階段菌絲變薄或隆突，後期

生長階段菌絲又呈厚實狀，部分並有氣生

菌絲形成。正面菌絲通常呈白色，背面代

謝物沉澱呈乳黃色及淡橘紅色，惟於 25℃

pH 5 pH 6 pH 7


圖 2 臺灣塊菌於各溫度之菌落生長形態

Fig. 2 The colony growth morphological characteristics of T. formosanum at different tempera-

tures

生長之菌絲，初期生長常有呈淡橘紅色之

代謝物沉澱，20℃者亦有部分呈淡橘紅色

之代謝物沉澱。於 25℃，pH 5生長者，至

第 51天生長期時，已有外圍菌絲崩解之現

象（圖 2d-g）。(4) 於 30℃之菌落生長，初

期生長菌塊皺縮，中後期生長表面菌絲生

長密實且具放射狀溝裂及點狀塌陷。正面

菌絲呈白色，背面代謝物沉澱則呈乳黃色

及淡橘紅色（圖 2h-i）。(5) 於 33℃之菌落

生長，表面菌絲生長緩慢且不規則生長，

呈皺縮狀菌塊。正面菌絲塊呈淡粉紅色，

背面代謝物沉澱呈乳黃色及淡粉紅色（圖

2j-l）。

5. 臺灣塊菌菌落生長曲線模式

由前述統計分析結果得知：臺灣塊菌

於 YpSs 培養基之最佳菌落生長環境為 25

℃、pH值則無顯著差異，最差之菌落生長

環境為 33℃、pH值則以 pH 5最差，以最

佳、最差溫度（取 pH 6值）及平均菌落生

長資料，進行二次曲線迴歸分析，分別求

得菌落生長曲線模式為（見圖 3）：

最佳菌落生長

y(25℃， pH 6.0) = 4.210 + 6.457x − 0.146x2

R2 = 0.999

最差菌落生長

y(33℃， pH 6.0) = 4.648 + 0.610x + 0.003x2

R2 = 0.991

平均菌落生長

y(pH 6.0) = 4.073 + 3.670x − 0.061x2

R2 = 0.999

y＝菌落生長直徑（mm）

x＝時間（天） R2 = 相關係數

a b c d

e g h f

i j k l


圖 3 臺灣塊菌最佳、最差及平均菌落生長曲線圖

Fig. 3 A diagram of the best, worst and average colony growth curves of T. formosanum

(II) 印度塊菌（Ti）之菌落生長效應

1. 各溫度在所有 pH值及各 pH值在所有溫

度之菌落總平均生長效應

當菌落生長第 51天時，其變異數分析

結果：各溫度間：菌落直徑平均生長量之

變異呈極顯著差異（P＜0.001），其間以

25℃菌落生長最大，其次分別為 20℃、30

℃、15℃及 10℃，而以 33℃之菌落生長最

小（見表 2）。各 pH值間：菌落直徑平均

生長量之變異無顯著差異。各溫度及 pH值

間：菌落直徑平均生長量之交感效應無顯

著差異。

2. 各溫度在不同 pH 值時對菌落生長之效

應

由表 2及圖 4 比較得知：(1)於 10℃、

15℃、20℃、25℃、30℃生長時，各 pH值

間菌落直徑生長之變異皆不呈顯著差異。

(2)於 33℃生長時，各 pH值間菌落直徑生

長之變異呈非常顯著差異（P＜0.01），其

間 pH 6 與 pH 7 菌落生長最佳且互不呈顯

表 2 印度塊菌各不同溫度及不同 pH 值菌落生長 Table 2 The colony growth diameter of T. indicum in different temperatures and pH treatments

菌落直徑平均生長量±SD(mm)

pH 值溫度

5.0 6.0 7.0 平均

10℃ D13.30± 1.57a D14.60± 1.08a D13.20±1.68a E13.70± 1.51 15℃ C61.20± 3.75a C61.70± 4.75a C62.10±2.97a D61.67± 3.62 20℃ A82.10± 0.74a A81.20± 0.57a AB80.50±1.97a B81.27± 1.35 25℃ A83.00± 0.87a A83.20± 1.10a A82.20±0.27a A82.80± 0.88 30℃ B78.40± 1.19a B77.70± 2.36a B79.30±0.91a C78.47± 1.64 33℃ E5.40± 0.65b E8.50± 1.46a E7.30±1.26a F7.07± 1.71

平均 53.90± 32.99a 54.48± 31.79a 54.10±32.33a 54.16± 32.01


圖 4 印度塊菌於不同 pH 值，各溫度之菌落生長直徑比較

Fig. 4 A comparison of the colony growth diameter of T. indicum among different temperature in

different pH treatments

著差異，而以 pH 5菌落生長最差，且幾乎

不生長。

3. 各 pH 值在不同溫度時對菌落生長之效

應

由表 2及圖 4 比較得知：於 YpSs培養

基各 pH之生長時，各溫度間菌落直徑生長

之變異皆呈極顯著差異（P＜0.001）；當

pH 5及 pH 6時，20℃與 25℃菌落生長最

大且互不呈顯著差異，其次分別為 30℃、

15℃及 10℃，而以 33℃菌落生長最差。當

pH 7時，以 25℃之菌落直徑生長最大，其

次分別為 20℃、30℃、15℃及 10℃，而以

33℃之菌落直徑生長最小。

4. 溫度及 pH對菌落生長形態之影響

印度塊菌於不同溫度間菌落之生長形

態，由外觀觀察呈現不同之形態差異；但

在不同 pH 值間菌落之生長形態則無明顯

之差異。由圖 5 比較結果如下：(1)於 10℃

之菌落生長，表面菌絲生長厚而密實，但

有乾裂現象，尤以在 pH 7生長者更明顯，

菌落之生長速率緩慢。正面菌絲呈白色絨

狀，背面代謝物沉澱呈乳黃色或淡紅褐色

（圖 5 a-b）。(2)於 15℃之菌落生長，表面

菌絲生長密緻，正面菌絲呈白色，背面代

謝物沉澱呈乳白色或淡乳黃色（圖 5 c）。

(3)於 20℃、25℃之菌落生長，表面菌絲生

長迅速而均勻，20℃菌落生長，中期生長

菌絲環狀隆突，生長至後期時，外圍菌絲

再度有環狀隆突現象，25℃時菌落外圍菌

絲呈分散絲狀生長。正面菌絲呈白色，背

面代謝物沉澱呈乳白色或乳黃色（圖 5

d-f）。(4)於 30℃之菌落生長，表面菌絲生

長較密而厚實且部分有氣生菌絲形成，正

面菌絲呈白色或淡粉紅色，背面代謝物沉

澱呈紅褐色，外圍逐漸呈乳黃色（圖 5

g-j）。(5)於 33℃之菌落生長，表面菌絲生

長緩慢且不規則生長，呈皺縮狀菌塊，部

分菌落生長呈靈芝狀生長。正面菌絲塊呈

褐色或淡紅褐色，背面代謝物沉澱呈褐色

（圖 5 k-l）。

5. 印度塊菌菌落生長曲線模式

由前述統計分析結果得知：印度塊菌

於 YpSs 培養基之最佳菌落生長溫度為 20

℃、25℃，pH值則無顯著差異，最差之菌

落生長溫度為 33℃，pH 5，以最佳、最差

溫度（取 pH 6值）及平均菌落生長資料，

進行二次曲線迴歸分析，分別求得菌落生

長曲線模式為（見圖 6）：

pH 5 pH 6 pH 7


最佳菌落生長

Y(25℃， pH 6.0) = 8.019+8.888x−0.260x2

R2 = 0.997

最差菌落生長

y(33℃， pH 6.0) = 7.064+0.290x−0.013x2

R2 = 0.684

平均菌落生長

y(pH 6.0) = 4.829+4.256x−0.077x2

R2 = 0.998

y＝菌落生長直徑（mm） x = 時間（天）

R2 = 相關係數

其最佳菌落生長初期（3~39天）速率

較快，39天以後菌落生長速率逐漸趨緩。

(III) 臺灣塊菌與印度塊菌菌落生長比較

臺灣塊菌與印度塊菌菌落生長第 51

天，由表 6 變異數分析表得知：菌種間菌

落生長之變異呈極顯著差異（P＜0.001），

印度塊菌有較佳之菌落生長。菌種間各溫

度在所有 pH 值之平均菌落生長皆呈極顯

著差異（P＜0.001）。菌種間各 pH值在所

有溫度之平均菌落生長呈顯著差異（P＜

0.05），印度塊菌有較佳之菌落生長。菌種

與溫度之交感效應呈極顯著差異（P＜

0.001），印度塊菌除了於 10℃及 33℃時，

菌落生長較臺灣塊菌差以外，其餘溫度之

生長皆優於臺灣塊菌。菌種與 pH值、溫度

與 pH值及菌種、溫度與 pH值之交感效應

皆不呈顯著差異。

臺灣塊菌與印度塊菌其表面菌絲生長

形態之差異，皆以溫度影響較大而 pH則無

影響，表面菌絲顏色，除了 33℃外，其餘

溫度皆為白色，另於 30℃時，印度塊菌表

面菌絲呈淡粉紅色或淡橘色（圖 7a），而

圖 5 印度塊菌於各溫度之菌落生長形態

Fig. 5 The colony growth morphological characteristics of T. indicum at different temperatures

a b c d

e g h f

i j k l


圖 6 印度塊菌最佳、最差及平均菌落生長曲線圖

Fig. 6 A diagram of the best, worst and average colony growth curves of T. indicum

圖 7 臺灣塊菌與印度塊菌表面菌絲形態特徵

Fig. 7 The surface mycelia morphological characteristics of T. formosanum and T. indicum

臺灣塊菌則於 25℃時中央區域亦會有此徵

狀，但顏色較淺（圖 7b）；臺灣塊菌於 30

℃生長時，其菌落表面形態呈放射狀，但

印度塊菌並無此現象（圖 7c）。臺灣塊菌

與印度塊菌於菌落生長階段皆有代謝物色

素沉澱，其顏色有乳白色、乳黃色、淡橘

紅色及橘褐色等，依不同菌種及培養溫度

而異。

由表 1、2及圖 8 比較顯示：印度塊菌

之菌落平均生長，除了於 10℃及 33℃之環

境外，其他環境之生長皆較臺灣塊菌佳；

生長曲線亦是以印度塊菌生長為佳。

IV、討論

菌絲之生長對溫度之變化是非常敏感

的（Marx et al., 1970），臺灣塊菌與印度

塊菌於洋菜培養基之菌絲生長，在同一 pH

值時之不同溫度間皆互呈極顯著差異，以

25℃者最佳而 33℃者最差，此與許桂蓮

（2007）研究結果，冬塊菌、印度塊菌、

臺灣塊菌、擬外孔塊菌、法國黑孢塊菌及

義大利白塊菌之菌落生長皆以 25℃最佳而

34℃最差相近；其他研究亦有相同結果，

在 MMN 洋菜培養基中，土生空團菌

a b c


圖 8 台灣塊菌與印度塊菌最佳、最差及平均菌落生長曲線

Fig. 8 A diagram of the best, worst and average colony growth curves of T. formosanum and T.

indicum

（Cenococcum geophilum）最適菌落生長溫

度為 20~25℃，32℃時生長減緩，38℃無

法生長，點柄乳牛肝菌（Suillus granulates）

適宜生長之溫度範圍為 16~27℃，32℃生

長受限，38℃時完全無法生長，彩色豆馬

勃在 21~32℃有較大之生長量，但在 38℃

時生長即明顯下降，且其適宜之溫度與其

原生地之緯度、溫度具相關性（Cline et al.,

1986；Theodorou and Bowen, 1971）。本試

驗結果，臺灣塊菌與印度塊菌洋菜培養基

培養於 25℃為其最適菌落生長溫度，溫度

超過 30℃即限制其生長。

臺灣塊菌於不同溫度下，其最適 pH值

亦不同，於較低溫度 10℃者呈顯著差異，

以 pH 5較佳，而較高溫度 33℃者亦呈顯著

差異，以 pH 6為佳，其餘溫度者則無顯著

差異；印度塊菌者於 33℃呈顯著差異，亦

以 pH 6較良好，其餘溫度者則互無顯著差

異，此 2菌種在極端溫度環境對 pH值之效

應呈顯著差異之原因，可能與菌絲生長之

有機酸產生有關，Hung and Trappe（1983）

研究指出，Hebeloma crustuliniforme 等 8

種外生菌根菌，菌絲體液體培養時，菌絲

菌落生長越好則生長基質最初及最終之

pH值下降差異越大，其菌絲有機酸離子之

傳導轉移與產生需再進一步研究，另亦有

研究，Paxillus involutus 及 Cenococcum

graniforme等外生菌根菌在其適應 pH值範

圍之極端，其菌絲色素會降低或改變（Meli,

1924；Mikola, 1962；Laiho, 1970）。

臺灣塊菌於10℃及33℃之菌落生長較

印度塊菌為佳，但其餘溫度則皆以印度塊

菌較良好，由此推斷臺灣塊菌比印度塊菌

有較寬廣之耐溫範圍。許桂蓮（2007）亦

指出印度塊菌最高致死溫度為 35℃，而臺

灣塊菌則為 36℃。印度塊菌於 30℃，pH 5、

pH 6、pH 7之總平均菌落大小為 78.47 mm

至 33℃時則急驟降至 7.07 mm，相差近 10


倍，於 15℃菌落大小為 61.67 mm 至 10℃

時則降至 13.7 mm，相差亦近 5 倍，此相

較臺灣塊菌於 30℃至 33℃之 4倍及 15℃至

10℃之 2倍，2菌種差異甚大，推論印度塊

菌菌落生長之臨界溫度較臺灣塊菌敏感。

洋菜媒質不同 pH 值對臺灣塊菌菌落

生長呈顯著差異，以 pH 6 者較佳，印度塊

菌則無顯著差異，不同菌種受 pH值之影響

亦有不同（Barros et al., 2006），印度塊菌

較臺灣塊菌對 pH有較大之適應範圍，但差

異不大。大多數之外生菌根菌，偏酸性之

環境是較適宜的，一般最適宜之 pH 值為

4~6 （胡弘道，1990）；鵝膏菌屬（Amanita

spp.），最適宜生長之 pH值為 6~7（Sawyer

et al., 2003；Daza et al.,2006），一般外生

菌根菌之 pH值忍受度最低為 pH 3（Dennis,

1985）。青剛櫟接種義大利白塊菌後，以

pH 7及 pH 7.5介質者於 2 個月時即可達到

感染並形成菌根，但 7 個月後之累積感染

率則以 pH 6.5 者為最佳（陳怡君，2004），

適宜之 pH值可促進菌根之感染與形成，此

將對子實體之產生有重大之影響。本研究

中 2菌種菌落於 pH 5、6、7可良好生長，

但其限制生長之 pH 臨界值為何？尚須進

一步探討。

Barros 等人（ 2006）研究腐生菌

Leucopaxillus giganteus 及外生菌根菌

Lactarius deliciosus及 Suillus luteus菌絲菌

落生長之影響，其顯示 pH 對菌絲形態特

徵，除對 S. luteus 有影響外，對其他菌種

L. giganteus及 L. deliciosus不影響；pH值

對鵝膏菌屬不同菌株之菌絲顏色、菌絲密

度及形態，均無顯著差異（Daza, 2006）；

臺灣塊菌與印度塊菌其表面菌絲生長形態

之差異，以溫度影響較大而 pH則無影響，

此結果亦與上述雷同。臺灣塊菌與印度塊

菌表面菌絲顏色，除了 33℃外，其餘溫度

皆為白色，此與 Iotti 等人（2002）研究中

之塊菌種類純培養，其菌落皆呈白色相

同；另於 30℃時，印度塊菌則部分菌絲呈

淡粉紅色，許桂蓮（2007）之研究亦有相

同之結果，其可能來自其菌絲分泌物之色

素所致。臺灣塊菌於 30℃生長時，其菌落

表面形態呈放射狀，許桂蓮（2007）之研

究，擬外孔塊菌及法國黑孢塊菌亦有放射

線狀之菌落形態，但印度塊菌則無此現

象，此放射狀菌落形成之原因如何？目前

尚無研究證明，推測可能與生長之菌落在

橫向及縱向生長不均衡有關，此若與塊菌

菌種有關，則可作為鑑定之比對項目之

一。臺灣塊菌與印度塊菌於菌落生長階段

皆有代謝物色素沉澱，其顏色有乳白色、

乳黃色、淡橘紅色及橘褐色等，依不同菌

種及培養溫度而異；多篇研究提出，塊菌

及其他菌根菌菌落培養普遍會有代謝物產

生及分泌色素（高嘉鴻，2005；許碧如，

1987；許桂蓮，2007；Hung and Trappe,

1983；Laiho, 1970；Melin, 1925；Mikola,

1962）。2菌種於 10℃及 15℃生長時，其

菌落直徑生長緩慢但菌絲厚而密實，此可

能係菌種自我保護抵抗不良環境之機制

（Boxman et al.,1986），且菌落之直徑生

長與菌絲生物量收穫無相關性，菌絲於適

宜環境純培養下快速生長時，均會形成結

構鬆散之氣生菌絲（aerial mycelia）且其乾

重量相對降低（Sánchez et al.,2001）。

菌落生長效應，臺灣塊菌與印度塊菌

於菌種間、溫度間皆呈極顯著差異，但於


33℃、pH 5之環境，其各菌種之平均菌落

生長量分別為 10.1±5.57 mm 及 5.4±0.65

mm，數值相差近 1倍，經統計分析結果卻

不呈顯著差異，這可能是臺灣塊菌於該處

理內樣本觀測值差異太大所致。

印度塊菌因與法國黑孢塊菌不易辨

別，且因市場價格懸殊而常混雜冒充珍貴

之法國黑孢塊菌，因而有多篇研究其

ITS-rDNA 序列並與 NCBI（National Center

for Biotechnology Information）基因庫

（GenBenk database）比對供為鑑定之依據

（Roux et al., 1999，Halász et al., 2005；

Khalid et al., 2007；Mello et al., 1999；

Paolocci et al., 2004；Wang et al., 2006a；

Wang et al., 2006b；Wéden et al., 2005；

Zhang et al., 2005），印度塊菌 ITS 序列範

圍 1-550 bp，其中 ITS1 1-161 bp、5.8S

r-RNA 162-315 bp 、 ITS2 316-550 bp

（website 1）；臺灣塊菌依據 Hu and Huang

（2007）研究，ITS 序列範圍 1-532 bp，其

中 ITS1 1-173 bp、5.8S r-RNA 174-327 bp、

ITS2 328-532 bp，以 ITS1及 ITS2 序列比

較，臺灣塊菌與印度塊菌之親源非常相

近，但 2 者菌種間菌落生長效應互呈極顯

著差異，此可能因 2 菌種間隔臺灣海峽分

布於不同地理生態環境而顯現之差異。

本試驗之印度塊菌係採自大陸雲南地

區之菌種，但其菌落生長除了於 10℃及 33

℃外，其餘溫度均較臺灣原生塊菌─臺灣

塊菌生長佳，且該兩種菌種均可與青剛櫟

接種合成菌根（黃鏡諺，2002），目前臺

灣塊菌已成功地人工接種栽植並生產塊菌

子實體，因此印度塊菌在臺灣地區接種栽

植之可行性研究，應是樂觀的。

V、結論

臺灣塊菌菌落生長，於不同溫度間呈

極顯著差異，當 pH 6 時，最適溫度為 20

℃與 25℃，當 pH 5及 pH 7時，最適溫度

為 25℃，而各 pH皆以 33℃之菌落直徑生

長最小，各溫度平均菌落生長趨勢為 25℃

＞20℃＞30℃＞15℃＞10℃＞33℃；又於

不同 pH 值間之菌落生長亦互呈顯著差

異，以 pH 6生長最佳，pH 5及 pH 7較差

但互不呈顯著差異；最適環境之生長曲線

模式為 y＝4.210 + 6.457x − 0.146x2（R2=

0.999）。

印度塊菌菌落生長，於不同溫度間呈

極顯著差異，當 pH 5及 pH 6時，最適溫

度為 20℃與 25℃，當 pH 7時，最適溫度

為 25℃，而各 pH皆以 33℃之菌落直徑生

長最小，各溫度平均菌落生長趨勢為 25℃

＞20℃＞30℃＞15℃＞10℃＞33℃；又於

不同 pH 值間之菌落生長則不呈顯著差

異，但於 33℃時以 pH 6及 pH 7生長較佳

而 pH 5較差，於其他溫度則各 pH值間互

不呈顯著差異；最適溫度之生長曲線模式

為 y = 8.019 + 8.888x − 0.260x2，R2 = 0.997。

臺灣塊菌與印度塊菌 2 菌種間菌落生

長呈極顯著差異，印度塊菌除了於 10℃及

33℃之環境較臺灣塊菌差外，其他溫度之

生長皆較臺灣塊菌佳；各 pH值之菌落生長

亦以印度塊菌為佳。菌種總平均菌落生

長，以印度塊菌 54.16±32.01 mm 優於臺

灣塊菌 47.29±22.15 mm。臺灣塊菌與印度

塊菌表面菌絲呈白色且皆有代謝沉澱物產

生，菌落形態於不同溫度間呈明顯差異，

但不同 pH值間則無明顯差異。

臺灣塊菌與印度塊菌在洋菜培養基


中，最適宜之生長溫度為 20~25℃，pH值

為 6 左右，如此之條件應能於臺灣地區海

拔 800~1500 公尺區域之石灰質土壤生育

地生長。

VI、參考文獻

弓明欽、陳應龍、仲崇祿（1997）菌根研

究及應用，中國林業出版社，北京，pp.

223。

周綠蘋（1983）臺灣松口磨之基本研究，

臺灣大學植物學研究所碩士論文，pp.

105。

胡弘道（1990）林木菌根，國立編譯館主

編，台北，pp. 666。

胡弘道、劉啟福（1995）臺灣二葉松與松

茸共生關係之研究 (二) pH 及溫度對松

茸菌落生長之效應，臺大實驗林研究報

告，9(3)：21-27。

高嘉鴻（2005）中果塊菌（Tuber mes-

entericum Vitt.）之分離、菌落生長及半

無菌菌根合成，國立臺灣大學森林環境

暨資源學研究所碩士論文，pp. 74。

陳怡君（2004）意大利白塊菇之半無菌菌

根合成與不同 pH 介質對其菌根形成與

青剛櫟葉部大量養分元素之效應，國立

臺灣大學森林學研究所碩士論文，pp.

71。

黃鏡諺（2002）印度塊菌及臺灣塊菌與青

剛櫟形成菌根形態之比較及光黑腹菌與

鱗蓋紅菇之菌根純合成，國立臺灣大學

森林學研究所碩士論文，pp. 104。

許碧如（1987）溫度、pH值及葡萄糖濃度

對夏塊菇菌生長之效應，國立臺灣大學

森林學研究所碩士論文，pp. 55。

許桂蓮（2007）溫度對塊菌菌落生長之效

應及夏塊菌之外生菌根合成，國立臺灣

大學森林環境暨資源學研究所碩士論

文，pp. 78。

Barros, L., P. Baptista and I. Ferreira (2006)

Influence of the culture medium and pH

on the growth of saprobic and ectomy-

corrhizal mushroom mycelia. Minerva

Biotechnologica. 18(4): 165-170.

Bowen, G. D. and C. Theodorou (1973)

Growth of ectomycorrhizal fungi around

seeds and roots. In: Kozlowsky T.T. (Ed.),

Ectomycorrhizae, their ecology and phisi-

ology. New York, Academic Press pp.

107-150.

Bowen, G. D., C. Theodorou and M. F.

Skinner (1973) Towards a mycorrhizal

inoculateion programe. Proc. Amer.-Aust.

Forest Nutr. Conf., Canberra. 1971.

Boxman, A. W., R. J.Sinke and J. G. M.

Roelofs (1986) Effects of NH4+ on the

growth and K+ (S6Rb) uptake of various

ectomycorrhizal fungi in pure culture.

Water, Air Soil Pollution 31: 517-522.

Branzanti, M. B., E. Rocca, and A. Pisi

(1999) Effect of ectomycorrhizal fungi

on Chestnut ink disease. Mycorrhiza 9:

103-109.

Cline, M. L., R. C. France and C. P. P. Reid

(1986) Intraspecific and interspecific

growth variation of ectomycorrhizal fungi

at different temperatures. Canadian Jour-

nal of Botany 65: 869-875.

Daza, A., J. L. Manjón, M. Camacho, L.

Romero de la Osa, A. Aguilar and C. San-

tamaría (2006) Effect of carbon and

nitrogen sources, pH and temperature on


in vitro culture of several isolates of Ama-

nita caesarea (Scop.: Fr.) Pers. My-

corrhiza 16: 133-136.

Dennis, J. J. (1985) Effect of pH and

temperature on in vitro growth of ecto-

mycorrhiza fungi. Pacific Forestry Centre,

Canadian Forestry Service Information

Report BC-X-273.

Erland, S. and B. Söderström (1990) Ef-

fects of liming on ectomycorrhizal fungi

infecting Pinus sylvestris L. I: Mycorrhizal

infection in limed humus in the laboratory

and isolation of fungi from mycorrhizal

roots. New Phytol. 115(4): 675-682.

Frank, A. B. (1885) Über die auf Wur-

zelsymbiose beruende Ernährung gewisser

bäume durch unterirdische Pilze. Ber.

Deut. Bot. Ges. 3: 128-145.

Halász, K., Z. Bratek, D. Szego, S. Rudnoy, I.

Racz, D. Lasztity and J. M. Trappe

(2005) Tests of species concepts of the

small, white, European group of Tuber spp.

based on morphology and rDNA ITS se-

quences with special reference to Tuber

rapaeodorum. Mycol. Prog. 4:281-290.

Hu, H. T. and J. Y. Huang (2007) Phy-

logenetic study of two truffles, Tuber for-

mosanum and T. furfuraceum, indentified

from Taiwan, China. The Fifth Interna-

tional Workshop of Edible Mycorrhizal

Mushroom, The Organizing Committee

IWEMM5, Chuxiong, Yunnan, China.

26-29 august 2007. p.31.

Hu, H. T., Y. Wang and B. Y. Hu (2005)

Cultivation of Tuber formosanum on limed

soil in Taiwan. New Zealand Journal of

Crop and Horticultural Science, 2005, Vol.

33: 363-366.

Hung, L. L. and J. M. Trappe (1983)

Growth variation between and within spe-

cies of ectomycorrhizal fungi in response

to pH in vitro. Mycologia 75(2): 234-241.

Iotti, M., A. Amicucci, V. Stocchi and A.

Zambonelli (2002) Morphological and

molecular characterization of mycelia of

some Tuber species in pure culture. New

Phytol. 155(3): 499-505.

Karkouri, K. E., C. Murat, E. Zampieri and P.

Bonfante (2007) Indentification of In-

ternal Transcribed Spacer sequence motifs

in truffles : a first step toward their DNA

barcoding. Applied Enviroment Microbi-

ology 73(16): 5320-5330.

Laiho, O. (1970) Paxillus involutus as a

mycorrhizal symbiont of forest trees. Acta

For. Fenn. 106: 1-73.

Marx, D. H. and L. B. Davey (1969) The

influence of ectotrofic mycorrhizal fungi

on the resistance of pine roots to patho-

genic infections. III. & IV. Resistance of

aseptically formed mycorrhizae to infec-

tion by Phytophthora cinnamomi. Phyto-

pathology 59: 549-565.

Marx, D. H., W. C. Bryan and C. B. Davey

(1970) Influence of temperature on asep-

tic synthesis of ectomycorrhizae by Thele-

phora terrestris and Pisolithus tinctorius

on loblolly pine. Forest Science 16: 424-

431.

Melin, E. (1924) Üeber den Einfluss der

Wasserstoffionenkonzentration auf die

Virulenz der Wurzelpilze von Kiefer und


Fichte. Bot. Not. 1924: 38-48.

Melin, E. (1925) Untersuchungen über

die Bedeutung der Baummykorriza G.

Fischer, Jena, 152 p.

Mello, A., L. Garnero and P. Bonfante

(1999) Specific PCR-primers as a reli-

able tool for the detection of white truffles

in mycorrhizal roots. New Phytol. 141:

511-516.

Mikola, P. (1962) The bright yellow my-

corrhiza of raw humus. XII Internat. Un-

ion Forest Research Organizations Cong.

Proc. Part I. 24-49.

Paolocci, F., A. Rubini, C. Riccioni, F.

Topini and S. Arcioni (2004) Tuber

aestivum and Tuber uncinatum: two mor-

photypes or two species? FEMS Microbiol.

Lett. 235:109-115.

Roux, C., N. Séjalon-Delmas, M. Martins, A.

Parguey-Leduc, R. Dargent and G. Bécard

(1999) Phylogenetic relationships between

European and Chinese truffles based on

parsimony and distance analysis of ITS

sequences. FEMS Microbiol. Lett. 180:

147-155.

Sánchez, F., M. Honrubia and P. Torres

(2001) Effects of pH, water stress, and

temperature on in vitro cultures of ecto-

mycorrhizal fungi from Mediterranean

forests. Cryptogamie Mycol. 22(4): 243-

258.

Sawyer, N. A., S. M. Chambers and J. W. G.

Cairney (2003) Utilisation of inorganic

and organic nitrogen sources by Amanita

species native to temperate eastern Austra-

lia. Mycol. Res. 107: 413-420.

Theodorou, C. and G. D. Bowen (1970)

Mycorrhizal responses of radiate pine in

experiments with different fungi. Aust.

Forest 34: 183.

Theodorou, C. and G. D. Bowen (1971)

Influence of temperature on the mycorrhi-

zal associations of Pinus Radiata D. Don.

Aust. J. Bot. 19(1): 13-20.

Wang, Y., Z. M. Tan, D. C. Zhang, C. Murat,

S. Jeandroz and F. Le Tacon (2006a)

Phylogenetic and populational study inside

the Tuber indicum complex: taxonomic

implications. Mycol. Res. 110: 1034-1045.

Wang, Y., Z. M. Tan, D. C. Zhang, C. Murat,

S. Jeandroz and F. Le Tacon (2006b)

Phylogenetic relationships between Tuber

pseudoexcavatum, a Chinese truffle, and

other Tuber species based on parsimony

and distance analysis of four different

gene sequences. FEMS Microbiol. Lett.

259: 269-281.

Wedén, C., E. Danell and L. Tibell (2005)

Species recognition in the truffle genus

Tuber-the synonyms Tuber aestivum and

Tuber uncinatum. Environ. Microbiol. 7:

1535-1546.

Zhang, L. F., Z. L. Yang and D. S. Song

(2005) A phylogenetic study of com-

mercial Chinese truffles and their allies:

taxonomic implications. FEMS Microbiol.

Lett. 245: 85-92.

Documents

41 1 04-43-58 胡弘道等3人#646ntur.lib.ntu.edu.tw/bitstream/246246/177433/1/08.pdf · －44－ 溫度及pH 對臺灣塊菌與印度塊菌菌落在洋菜培養基上生長之效應

41 1 04-43-58 胡弘道等3人#646ntur.lib.ntu.edu.tw/bitstream/246246/177433/1/08.pdf · －44－溫度及pH 對臺灣塊菌與印度塊菌菌落在洋菜培養基上生長之效應