18 Curso de Actualización en el

Diagnóstico y Tratamiento de la

Tuberculosis en el Niño y el

Adulto

2014

Métodos convencionales para el

diagnóstico de la TuberculosisBiol. Susana Balandrano C.

Instituto de Diagnóstico y Referencia

Epidemiológicos

Depto. Bacteriología. Laboratorio de

Micobacterias2014

La tuberculosis es una enfermedad infecciosa, crónica, curable.

Se transmite por vía aérea de un enfermo con Tb pulmonar a una

persona sana.

Tuberculosis

La Tb pulmonar es la forma más común de esta enfermedad; ocurre en más del 80% de los casos.

Tuberculosis

La tuberculosis pulmonar confirmada por baciloscopía es la fuente de infección más frecuente y constituye el objetivo fundamental de las actividades de detección, diagnóstico y tratamiento para el control de la Tuberculosis.

NOM-006-SSA2-2013 Para la prevención y control de la tuberculosis

La confirmación del diagnóstico de la tuberculosis se establece en el laboratorio mediante la observación o el aislamiento e identificación del agente causal en una muestra clínica obtenida del sujeto en estudio.

Diagnóstico

BACTERIOLOGÍA

.

Baciloscopia

Cultivo

Diagnóstico

La Baciloscopia

Es la técnica de elección para confirmar los casos infecciosos (pulmonares).

Indicaciones de la Baciloscopia para diagnóstico

Cualquier muestra clínica excepto orina.

A todo sintomático respiratorio sospechoso de tuberculosis.

Contactos sintomáticos de un caso de tuberculosis.

Sospechosos de tuberculosis con manifestaciones clínicas o radiológicas.

Grupos o poblaciones de alto riesgo.

NOM-006-SSA2-2013 Para la prevención y control de la tuberculosis

Ácido alcohol resistencia

Es la propiedad que tienen las micobacterias de captar en su pared fucsina fenicada o auramina y retenerla, aún con la acción decolorante con mezcla de ácido y alcohol.

Se debe al alto contenido de lípidos (ácidos micólicos) que poseen las micobacterias en su pared celular.

Baciloscopía

Muestra Preparación de frotis

Tinción de Ziehl-Neelsen Lectura

Baciloscopia

Reporte de la baciloscopia

Negativo: No se observan bacilos ácido-alcohol resistentes en 100 campos microscópicos.

De 1-9 BAAR: Informar el número de bacilos en 100 campos observados.

Positivo (+): Menos de un bacilo por campo en promedio (de 10 a 99 bacilos), en 100 campos observados.

Positivo (++): De uno a diez bacilos por campo en promedio en 50 campos observados.

Positivo (+++): Más de 10 bacilos por campo en 20 campos observados.

Indicaciones de la Baciloscopia para control del tratamiento

En el TAES se realiza el seguimiento mediante unabaciloscopia mensual.

Confirmación de curación.

En el control de tratamiento como indicador pronóstico desu eficacia en casos TBMDR (mensual).

NOM-006-SSA2-2013 Para la prevención y control de la tuberculosis

Baciloscopía

VENTAJAS

� Simple y poco costosa

� Detecta rápidamente los casos infecciosos.

� Bioseguridad.

� Amplia cobertura.

DESVENTAJAS

� Poca sensibilidad.

� Poca especificidad.

Baciloscopía

LIMITACIONES

� No distingue a M. tuberculosisde otras micobacterias

� Organismos viables de los no viables.

� Bacilos sensibles de los resistentes.

Informe Mensual de Microscopía y Cultivo. InDRE

AÑOAÑOAÑOAÑO

LáminasLáminasLáminasLáminas

evaluadasevaluadasevaluadasevaluadas

LáminasLáminasLáminasLáminas

(+)(+)(+)(+)

FalsasFalsasFalsasFalsas

(+)(+)(+)(+)

ConcordanConcordanConcordanConcordanciaciaciacia

(%)(%)(%)(%)

LáminasLáminasLáminasLáminas

((((----))))

FalsasFalsasFalsasFalsas

((((----))))

ConcordanConcordanConcordanConcordanciaciaciacia

(%)(%)(%)(%)TOTALTOTALTOTALTOTAL

2010 39 476 8 854 150 98.3 30 622 141 99.5 99.3

2011 51 656 11 023 150 98.7 40 633 213 99.5 99.3

2012 64 231 12 312 166 98.7 51 919 215 99.6 99.4

2013 65541 12 801 264 97.9 52 740 246 99.5 99.2

RELECTURA DE LÁMINASDe los LESP´s a los laboratorios locales

CONTROL DE CALIDAD DE BACILOSCOPÍASCONTROL DE CALIDAD DE BACILOSCOPÍASCONTROL DE CALIDAD DE BACILOSCOPÍASCONTROL DE CALIDAD DE BACILOSCOPÍAS

Año

Meses supervisad

os promedio

Total de laminillas recibidas

Total de laminillas revisada

% revisado Positivas Falsas (+)%

Concordancia (+)

Negativas Falsas (-)%

Concordancia (-)

% Concordan

cia total

2009No

disponible11895 9411 79 3370 11 99,6 6041 49 99,3 99,45

2010 10 7589 6622 87 2049 7 99,7 4536 30 99,3 99,4

2011 11 10020 9752 97 2989 5 99,8 6720 38 99,4 99,6

2012 11 9886 7106 72 2107 20 99.05 4951 28 99.4 99.3

2013 5 10285 4034 40 1082 5 99.50 2932 15 99.5 99.5

RELECTURA DE LÁMINASDel InDRE a los LESP´s

Año InstitucionesMicroscopistas

evaluadosAprobados Condicionados Reprobados

No. % No. % No. %

2010*

IMSS 87 69 79 13 15 5 6

PEMEX 2 0 0 2 100 0 0

ISSSTE 32 25 78 5 16 2 6

Total 121 94 78 20 16 7 6

2012**

IMSS 27 24 89 3 11 0 0

PEMEX 0 0 0 0 0 0 0

ISSSTE 15 12 80 3 20 0 0

Total 42 36 86 6 14 0 0

2010*De los 1190 microscopistas evaluados para este año, 121 fueron de otras

instituciones.

2012**De los 1180 microscopistas evaluados para este año, 42 fueron de otras

instituciones.

PERÍODOPERÍODOPERÍODOPERÍODO MICROSMICROSMICROSMICROS----COPISTASCOPISTASCOPISTASCOPISTAS

APROBADOSAPROBADOSAPROBADOSAPROBADOS CONDICIONADOSCONDICIONADOSCONDICIONADOSCONDICIONADOS REPROBADOSREPROBADOSREPROBADOSREPROBADOS

NoNoNoNo %%%% NoNoNoNo %%%% NoNoNoNo %%%%

2007-2008 1107 972 87.80 109 9.85 26 2.35

2009-2010 1069 995 93.08 50 4.68 24 2.25

2012-2013 1138 1007 88.49 110 9.67 21 1.85

PRUEBA DE DESEMPEÑODel InDRE a la Red de Laboratorios

Fuente: Laboratorio de Micobacterias. InDRE

CULTIVO

Mediante esta técnica es posible hacer que los bacilos presentes en una muestra se multipliquen in vitro, hasta formar colonias en un medio sólido, turbidez en uno líquido o hasta que algún sensor incorporado en el medio cambie de color o emita fluorescencia cuando los bacilos consumen O2 o liberan CO2

CULTIVO

Crecimiento lento (división binaria de 18 a 22 horas).

Crece en presencia de oxígeno, a un pH de

6.8 a 7.2.

Características del M. tuberculosis

CULTIVO: método de Petroff

MuestraNaOH 4%

Agitar en vortex

Incubar a 37ºCCentrifugar a 3000 G Neutralizar

Sembrar en medio LJ Incubar a 37ºC

Reporte del cultivo

Negativo: No se observan colonias.

De 1-19 BAAR: Informar el número de colonias.

Positivo (+): De 20 a 100 colonias.

Positivo (++): Más de 100 colonias, sin cubrir toda la superficie del medio.

Positivo (+++): Colonias incontables, crecimiento confluente.

.

Los cultivos positivos tienen que ser identificados para diferenciar M. tuberculosis de micobacterias no tuberculosas (MNT), cuya prevalencia varía de país a país y que son más comunes en pacientes con VIH.

El tratamiento para MNT es totalmente diferente del tratamiento para la TB farmacorresistente.

Es indispensable que todo laboratorio que realice PFS identifique prev iamente el cultivo, para diferenciar M. tuberculosis de MNT.

Identificación

Indicaciones para el cultivo

Pacientes con tres baciloscopias negativas y sospecha clínica y radiológica de Tb.

Tuberculosis extrapulmonar.

Tuberculosis renal o genitourinaria.

Tuberculosis en niños.

Sospecha de Tuberculosis en pacientes VIH / SIDA y/o diabetes descompensada.

Diagnóstico

NOM-006-SSA2-2013 Para la prevención y control de la tuberculosis

Aporte del cultivo al diagnóstico TB

Baciloscopia - / Cultivo +Baciloscopia +

Cultivo - / diagnóstico por Radiología / clínica / epidemiología

Aporte del cultivo al diagnóstico de tuberculosis

94%

0%

10%

20%

30%

40%

50%

60%

70%

80%

90%

100%

Todos los casosTuberculosis

pulmonarTuberculosis pulmonar con cultivo +

Tuberculosis infecciosa

Manual para el diagnóstico de la tuberculosis Cultivo OPS / OMS

Indicaciones para el cultivo

En pacientes en tratamiento, en quienes al segundo mespersiste la baciloscopía positiva.

Para confirmar la curación o fracaso del tratamiento.

Pruebas de identificación y sensibilidad.

Control de tratamiento

NOM-006-SSA2-2013 Para la prevención y control de la tuberculosis

Diagnóstico en pacientes previamente tratados.

Pacientes que al término de la fase intensiva del tratamiento tienen Bk +

Para control bacteriológico de los casos TBMFR (BK mensual y cultivo bimensual)

Previo al inicio del tratamiento en pacientes contacto de un caso de Tb MFR

En casos de reingreso por recaída o fracaso.

En SR con DM descompensada que viven en zonas de alta incidencia de Tb FR

Para confirmar y ampliar los estudios de pacientes identificados con nuevas técnicas (Xpert-TB RIF, biología molecular, etc.).

Para investigaciones epidemiológicas, terapéuticas y bacteriológicas.

Indicaciones para cultivo

NOM-006-SSA2-2013 Para la prevención y control de la tuberculosis

Control de tratamiento en farmacorresistencia

CULTIVO

VENTAJAS

Técnica más sensible que provee un diagnóstico definitivo.

Aumenta significativamente el número de casos confirmados (15-30%).

Puede detectar casos más tempranamente, aún antes de llegar a ser infecciosos.

DESVENTAJAS

� Mayor tiempo para obtener resultados.

� Mas costoso.

� Necesita equipo especial.

� Mayor preparación de personal

� Bioseguridad

Cultivo

Manual para el diagnóstico bacteriologico de la tuberculosis. Normas y guia tecnica. Cultivo. OPS / OMS . 2008.

Fuente: Base de datos LRN de Micobacterias, InDRE.

LöwensteinJensen

31+3 Todos los LESP +INER,HGM y INCMNSZ

MGIT 15Ags.,BC.(x2),Coah.,Chis.,Chih.,Jal.,NL.,Mex.,Pue.,SLP, Ver.,INER, HGM y INCMNSZ

Año Área Recibidas Rechazadas Discordantes

PositivasContaminación Identificación

2010 País 1198 5 75 2 1116

2011 País 1726 5 139 3 1579

2012 País 1588 6 134 1 1447

2013 País 1518 5 127 3 1383

Medio de cultivo

Caminando a la excelencia

Control de Calidad del cultivo

Medio de CultivoAño

2010 2011 2012 2013

Lowenstein Jensen 22942 25541 27830 18 922

Stonebrink 3550 5423 5911 5 515

Total 26492 30964 33741 24 437

Producción de medio de cultivo

AñoNo. de Round

No. de Estados Calidad de Lotes Tipo de medio

Invitados Participantes Adecuado Inadecuado Caseros Comerciales

2011

1 15 12 12 0

Chis, Mex, Gro, Jal, NL,

Sin, Son, Ver.(8)

Ags, Chih, Hgo, Tab.(4)

2 15 10 10 0Chis, Mex,

Gro, NL, Sin, Son, Ver.(7)

Ags, Chih, Qroo.(3)

2012

1 17 15 14 1

Chis. Mex. Gro. Jal. N.L. Sin. Son. Ver

(8)

Ags.Coah. Chih. BC ( Mexicali-

Tijuana). Tab . Q.Roo (7)

2 17 15 15 0

Chis. Mex. Gro. Jal. N.L. Sin. Son. Ver

(8)

Ags.Chih. BC ( Mexicali-

Tijuana). Gto. Hgo. Tab . (7)

2013 1 18 11 10 1

BC (Tijuana), Chis, Gro, Jal, NL, Sin, Son y

Ver (8)

BC (Mexicali), Mex y Oax (3)

Control de Calidad del medio de cultivo

Fuente: Laboratorio de Micobacterias. InDRE

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