Análisis cualitativo y cuantitativo

en cromatografía

INTEGRANTES DEL EQUIPO Chi Aban Jesica Giselle Donde Sima Claudia Alejandra Ramos Varguez Alejandra Tamayo Cabrera Noemí

ANÁLISIS QUÍMICO En cromatografía, así

como en otras técnicas de separación, se utiliza el análisis químico para detectar y cuantificar sustancias presentes (analitos), en un sistema.

ANÁLISIS CUALITATIVO

Sirve para identificar qué elementos, iones o compuestos hay en una muestra

Tanto éste, como el cuantitativo, se pueden realizar por reacciones químicas, es decir en base a la reactividad del analito frente a un reactivo. La detección puede ser visual o por medio de un instrumento que mida la señal.

Es aplicable en HPLC , pues permite medir la altura y el área del pico y compararla con la obtenida para una muestra patrón.

ANÁLISIS CUANTITATIVO

Permiten determinar cuánto hay de uno o más constituyentes de una muestra.

Es aplicable en cromatografía pues la posición en que aparecen los picos, permite determinar el tiempo de retención, el cual será característico de cada sustancia.

Estos análisis requieren más esfuerzo (tiempo e insumos) y un trabajo más calificado que los cualitativos. Un análisis cuantitativo implica un mayor costo y, por lo tanto, la decisión de que análisis hacer, depende del valor de la información cuantitativa.

PARA REALIZAR UN ANÁLISIS CUANTITATIVO, SE DEBEN REALIZAR LOS SIGUIENTES PASOS PARA QUE EL ANÁLISIS SEA CONFIABLE:

Muestreo• Tomar una muestra representativa del sistema que se

analizará.• Si no se sabe si la muestra contiene al analito, puede

hacerse un análisis cuantitativo previo.

Preparación de la muestra• Es imprescindible medir el volumen o la masa de la

muestra, pues los resultados siempre se expresan con referencia a la misma.

• En muchos casos, es necesario hacerle un tratamiento a la muestra.

Determinación de la concentración• La elección del método más adecuado depende de la

naturaleza de la muestra, de la cantidad de analito presente y de sus interacciones con otros componentes, de la precisión que requiere el análisis, del costo y del tiempo del análisis.

CUANTIFICACIÓN EN GC Y HPLCLa cromatografía de gases y la cromatografía líquida de alta resolución (HPLC) son dos técnicas de separación de analitos que permiten identificar y cuantificar un gran número de compuestos. Para la cuantificación de compuestos, existen diversas técnicas como:

a) La normalización de áreas

b) El método de patrón externo

c) El método de patrón interno

A) LA NORMALIZACIÓN DE ÁREAS

Es un medio para establecer el porcentaje de cada componente en la muestra. Se calcula dividiendo el área de cada componente entre el área total y multiplicando por 100.

La concepto anterior se resume en la ecuación:

Es independiente del volumen de inyección de muestra y debe cumplirse que todos los picos deben estar separados. Esta ecuación solo se puede aplicar para una serie homóloga de compuestos de punto de ebullición muy parecidos y con similares respuestas del detector.

B) MÉTODO DE PATRÓN EXTERNOCuando se quiere cuantificar un compuesto presente en una muestra, empleando este método, los pasos a seguir son:

1.-

•Preparar una serie de disoluciones de concentraciones crecientes, del patrón correspondiente al compuesto a cuantificar. El intervalo de concentraciones ha de ser similar a la concentración del analito en la muestra problema.

2.-

•Inyectar el mismo volumen de cada una de las disoluciones patrón en el cromatógrafo, así como del extracto de la muestra. De esta forma tendremos los distintos cromatogramas de los patrones (un cromatograma para cada disolución patrón) y el cromatograma de la muestra.

C) MÉTODO DE PATRÓN INTERNOLa relación de masas conocidas de un patrón de la muestra y de un estándar deber ser preparadas e inyectadas al cromatógrafo para luego determinar las relaciones de área. Estas relaciones de áreas son graficadas en función de la relaciones de masa.

Del cromatograma se obtienen las áreas de analito y del estándar y luego con la ecuación de calibración y conociendo la masa del estándar se puede obtener la masa del analito en la muestra.

La masa del analito puede calcularse mediante la primera ecuación y el % de éste presente en la muestra, mediante la segunda ecuación.

LOS REQUERIMIENTOS PARA UN BUEN ESTÁNDAR INTERNO SON:

Debe ser resuelto de los otros picos Debe eluir cercano al pico de interés Debe usarse una concentración similar al pico

de pico de interés.- Debe ser de las mismas características

estructurales.

REFERENCIAS Aldaba, S.; Aramendía, P.; Bonazzola, C.; Lacreu, L.

Química 2, química en acción, Colihue: Argentina, 2004; pp. 276-279.

García, M.; Colom, M.; Jaramillo, J. Manual del auxiliar de laboratorio, 2ª ed.; MAD: España, 2003; pp. 401.

Fernández, S. I. Cuantificación de compuestos por cromatografía: Método del Patrón Interno.Chem.Rev [En línea] 2003, 3.

Guía de cromatografía http://www.ciens.ucv.ve:8080/generador/sites/LIApregrado/archivos/Guia%20para%20cromatografia.pdf

(consultado mayo 2014). Fernández, S. I. Cuantificación de compuestos por

cromatografía: Método del Patrón Externo.Chem.Rev [En línea] 2003, 4.